脂肪干细胞治疗ED
脂肪干细胞运用
ADSCs的分离与纯化关于ADSCs的获取方法很多，但不管哪种方法所得到的并非单一的脂肪干细胞，是一组具有干细胞特性的细胞群。
目前应用最广泛的分离方法是酶胶原消化法。
首先将无菌条件下切取的脂肪组织块剪成细小的颗粒，PBS液冲洗干净后，用0．1％的胶原酶在37℃下振荡消化4O～90 min，再用含10％胎牛血清的等体积DMEM培养基终止。
1 200 r／min离心5～10 min，弃上清液及悬浮的脂肪组织，重悬细胞后经过细胞筛过滤，所得细胞按2—4×105／cm 接种于50ml培养瓶内。
37℃条件5％的CO 饱和湿度培养箱内培养，2 d后首次换液，以后3d换液一次，至细胞达70％～8O％融合时用0．25％胰酶消化，并传代。
经过提取获得的以脂肪干细胞为主的细胞群接种后数小时即开始贴壁生长，24h内完成贴壁。
细胞的形状与成纤维细胞相似，体积较小，核浆比较大，随后细胞体积渐增大，克隆形成。
经传代后，细胞的形态及排列才趋于一致。
由于目前尚未发现脂肪干细胞表面存在特异性的分子标记物，因此无法利用分子表型来分离纯化。
然而可通过纯化脂肪组织块来间接达到纯化脂肪干细胞的目的。
流式细胞仪检测显示：传至第3代时，可达95％以上的细胞纯度。
ADSCs的生物学特性1.ADSCs的鉴定在ADSCs鉴定上，现阶段尚无特异性鉴定方法。
用免疫荧光法和流式细胞术检测结果均显示ADSCs表达特异性分子CD44，OCT一4，E—eadherin，流式细胞术检测细胞周期显示绝大多数细胞是处于静止期的干细胞，传代后生长迅速，随机挑选来源标本，对细胞进行染色体核型分析显示ADSCs具有遗传稳定性。
ADSCs分泌多种生长因子在生理功能方面，脂肪干细胞能分泌相当数量的细胞因子，包括肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PGF)、转化生长因子一B(TGF—B)、成纤维细胞生长因子(FGF一2)等，低表达的因子有Ang一2 C。
胚胎干细胞尾静脉注射移植糖尿病肾病大鼠的氧化应激反应
胚胎干细胞尾静脉注射移植糖尿病肾病大鼠的氧化应激反应樊志刚;樊红亮【摘要】背景：近年来研究资料显示，糖尿病并发症的发生、发展与机体内氧化应激的平衡破坏程度有着密切的相关性。
目的：探讨胚胎干细胞对糖尿病肾病大鼠氧化应激反应的影响。
方法：原代培养小鼠胚胎干细胞，观察细胞形态，免疫组化检测表面抗原标志表达。
腹腔注射柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液稀释的链脲佐菌素建立糖尿病肾病SD大鼠模型，细胞实验组经尾静脉注射胚胎干细胞，模型对照组注射等量PBS，正常对照组不造模，一次性腹腔注射柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液，共注射2次，末次注射细胞后5周，检测各组大鼠血糖、肾功能指标(尿蛋白/尿肌酐、血尿素氮和血肌酐)，测定肾组织氧化应激产物丙二醛及蛋白羰基含量，免疫印迹检测超氧化物歧化酶的表达水平。
结果与结论：胚胎干细胞为椭圆形或圆形，边界清晰，折光性好，高表达Oct-4、SSEA-1；与正常对照组比较，模型对照组和细胞实验组肾功生化指标、丙二醛、蛋白羰基含量均明显升高，超氧化物歧化酶表达量显著下降(P<0.05)；与模型对照组比较，细胞实验组肾功生化指标、丙二醛、蛋白羰基含量明显下调，超氧化物歧化酶表达量明显回升(P<0.05)。
结果表明胚胎干细胞可以通过抑制氧化应激反应的进程从而逆转糖尿病肾病的发生发展。
%BACKGROUND:Occurrence and development of diabetic complications is closely related to the severity of oxidative stress imbalance in the body. OBJECTIVE:To investigate the effect of embryonic stem cel s on oxidative stress response of rats with diabetic nephropathy. METHODS:Primarily cultured rat embryonic stem cel s were observed for cel morphology and surface antigen detection. Sprague-Dawley rats were divided into experimental group (two injections of embryonic stem cel svia the tail vein), model group (injection of the same volume of PBS), and normal control group (with no modeling, intraperitoneal injection of sodium citrate-citrate buffer). In the former two groups, the rats were intraperitoneal y injected sodium citrate-citrate buffer diluted streptozotocin to establish diabetic nephropathy models before treatment. At 5 weeks after the last injection, blood glucose level, renal function indicators (urine protein/urine creatinine, blood urea nitrogen and serum creatinine) were tested in each group;contents of malondialdehyde and protein carbonyl were detected in the kidney;the expression level of superoxide dismutase was detected by western blot assay. RESULTS AND CONCLUSION:The embryonic stem cel s were oval or round, with clear boundary and good refraction, and highly expressed Oct-4 and SSEA-1. Compared with the control group, renal biochemical indicators, malondialdehyde and protein carbonyl contents were significantly increased, while the expression level of superoxide dismutase was decreased dramatical y in the model group and experimental group(P<0.05);compared with the model group, the renal biochemical indicators, malondialdehyde and protein carbonyl contents were dropped significantly in the experimental group, but the expression of superoxide dismutase was significantly rebounded (P<0.05). Taken together, embryonic stem cel s can reverse the occurrence and development of diabetic nephropathy by inhibiting oxidative stress in progress.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(000)014【总页数】6页(P2199-2204)【关键词】干细胞;移植;胚胎干细胞;糖尿病肾病;氧化应激;丙二醛;蛋白羰基;超氧化物歧化酶【作者】樊志刚;樊红亮【作者单位】河南医学高等专科学校，河南省郑州市 451191;河南医学高等专科学校，河南省郑州市 451191【正文语种】中文【中图分类】R394.2文章亮点：1 糖尿病肾病是糖尿病的慢性微血管并发症之一，对于糖尿病肾病目前尚缺乏有效的治疗手段，而干细胞治疗给人们带来了新的方向。
治疗卵巢早衰的方法—间充质干细胞
由于现代生活压力大，许多女孩二三十岁的就出现了类似更年期的症状，如困倦、易怒、阴道干涩、性欲下降、失眠多梦、月经紊乱等，有人以为这是工作太累引起的，不用过于在意，可实际上，女性在非更年期出现更年期症状，可能预示着卵巢早衰！卵巢功能早衰（POF）是指女性40岁之前由于多种病因出现卵巢萎功能衰竭，被认为是导致不孕的“不治之症”。
卵巢早衰对女性生殖健康的两大威胁主要是雌激素水平降低及生育能力丧失，雌激素水平降低增加了女性患骨质疏松和冠心病的危险。
而处于生育期的女性提早闭经、生育能力丧失，容易出现抑郁、焦虑等心理问题。
该病的诊断标准是指: 40岁以前出现至少4个月以上闭经, 并有2次或以上血FSH>40U/L (两次检查间隔1个月以上) , 雌二醇<73.2pmol/L。
这种疾病的发病率在育龄女性中超过１％，且近年来呈上升和年轻化趋势。
没有一种有效的治疗方法能够根治POF，间充质干细胞(MSCs)是属于中胚层的一类多能干细胞，具有强大的增殖能力和多向分化潜能、免疫调节功能、异体移植排异较轻、配型要求不严格、易于分离和培养等优势。
脐带间充质干细胞治疗POF的研究进展脐带间充质干细胞（UCMSCs）是目前干细胞研究领域最热的成员之一，具有取材容易，对母体创伤小，污染概率低，无免疫原性等优势特点。
朱少芳等人研究发现人脐带间充质干细胞可以在损伤的大鼠卵巢中存活，迁移，能部分改善建模后大鼠的性激素水平，减轻对卵泡的损伤，卵巢注射组和尾静脉注射组部分大鼠能生育幼鼠，其后代生长发育良好。
还有研究发现，将UCMSCs通过尾静脉注射到小鼠体内，可以提高卵泡的数量，改善卵巢的功能。
UCMSCs 是目前最有可能应用于临床治疗卵巢早衰的生物制剂。
骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗POF的研究进展骨髓间充质干细胞（BMSCs）是被广泛应用和研究的一类干细胞之一。
范雪等人研究发现BMSC可以维持血清中各种雌性相关激素的正常水平，消除由顺铂类物质对卵巢造成的早衰，促进卵泡的发育，改善并增强卵巢功能。
干细胞在创面愈合与组织再生中的移植应用
用 的细胞标 记 手段 包括 抗 原标 记 、 同位 素标 记 、 荧光 流供应 ， 治疗缺血性疾 病 的 目的。 目前 ， 达到 临床干细
染料标记 等， 存在 随 时 间标 记 物被 稀 释 的不足 ， 均 并 胞移植治疗 下肢严 重肢体 缺血 （ｒｉ ｌｌ ｂ ｉ ｈ ｍａ ｃ ｔ ａ ｉ ｓ ｅ ｉ ， ｉｃ ｍ ｃ 且标记 方法费 时费力 ， 存在 污染 等风 险。荧光 蛋 白标 Ｃ Ｉ 病变主要包括 自体 骨髓 单个核细胞 （ｏ ｅｎｔＯ ． Ｌ） ｂ ｎ ｋＴＷ Ｔ Ｉ 记 多使用 绿色 荧光 蛋 白， 一种 体 内理 想 的标 记 物， ｄｒ ｅ ｏｏｕ ｌ ｒ ｅ ｓＢ ． Ｎ ｓ 、 是 ｅ ｖｄｍ ｎ ｎｃ ａ ｃｌ ， Ｍ Ｍ Ｃ ） 自体 骨髓 间充质 ｉ ｅ ｌ 检测 时不 需添加其他物 质 ， 灵敏度 高 ， 续 时间长 ， 持 对 干细 胞 （ ｏｅ ｍ ｒ ｗｄｒ ｅ ｅｅｃｙ ａ ｓ ｍ ｃｌ ， ｂｎ ａ ｏ ．ｅ ｖｄ ｍ ｓｎ ｈｍ ｔ ｔ ｅ ｓ ｒ ｉ ｅ ｌ 细胞毒 性小 ， 良反 应 少 ， 已广 泛 应用 干 细胞 基础 Ｂ ＭＳ ｓ 和 造 血 干 细 胞 （ ｅ ａ ｐ ｉｉ ｓ ｍ ｃｌ ， 不 现 Ｍ． Ｃ ） ｈｍ ｔ ｏ ｔ ｔ ｅ ｓ ｏ ｅｃ ｅ ｌ 研究及 动物实验 ， 临床研 究 中较少 应用。核 磁共振 Ｈ Ｃ ） 但 Ｓ ｓ 移植 ３种。２０ ０２年 Ｔｔｉ ｉ ａ ｓ 等 首次报 道 了应 ｅｈ 体 ５例 Ｃ Ｉ患， Ｌ 取得半 对 比增 强剂标 记 可通 过 磁 共振 对 干细胞 在 活体 内的 用患者 自 骨髓干细胞 移植 治疗 ４ 迁移 、 分化 等进 行成像研 究 ， 其最 大优 点为 无侵袭 性 ， 目前部分标 记 物 已进 入 临床研 究 Ｊ 。本 期 中有一篇
脂肪间充质干细胞定义
脂肪间充质干细胞定义
脂肪间充质干细胞（Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells，ADSCs）是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，它们来源于人体脂肪组织。
这些细胞在特定的诱导条件下，可以分化成多种细胞类型，如脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经细胞和内皮细胞等。
因此，脂肪间充质干细胞在再生医学、组织工程和细胞治疗等领域具有广泛的应用前景。
脂肪间充质干细胞的主要特点包括：1）易于获取，来源丰富，可从人体脂肪组织中提取；2）具有较强的增殖能力和多向分化潜能；3）免疫原性低，不会引起明显的免疫排斥反应；4）具有抗炎、抗凋亡和促进组织修复的能力。
在医学应用方面，脂肪间充质干细胞已被用于治疗多种疾病，如心血管疾病、糖尿病、神经系统疾病、自身免疫性疾病和皮肤损伤等。
通过将这些细胞移植到患者体内，可以促进受损组织的修复和再生，从而改善疾病症状。
然而，脂肪间充质干细胞的应用仍面临一些挑战和限制，如细胞分化机制尚未完全阐明、细胞来源和质量的不稳定性、以及移植后的细胞存活和分化等问题。
因此，未来需要进一步深入研究脂肪间充质干细胞的生物学特性和分化机制，以优化细胞培养和移植技术，提高其在医学应用中的疗效和安全性。
总之，脂肪间充质干细胞作为一种具有广泛应用前景的细胞类型，在再生医学和细胞治疗等领域发挥着重要作用。
随着科学技术的不断进步和研究的深入，相信这些细胞将在未来为人类健康事业做出更大的贡献。
电针联合脂肪源性干细胞移植对大鼠脑缺血／再灌注损伤后海马区CXCL2及受体CXCR2表达的影响
常对照组 ２只 ， 其余 每 组 ｌ ２只。参 照 Ｌ ｎａ等 的 ｏｇ 线栓改 良法 复 制大 鼠大脑 中动 脉缺 血模 型 。正 常对 照组不予任 何 干预 。模 型对 照 组 ： 纯造 模 ， 单 不予 任
增 强脊 髓损 伤 中移植 的 骨髓 间充 质干 细胞存 活 的数 量 和迁 移能 力 ， 两者 联 合 治 疗 能 协 同 促 进脊 髓 损 伤
正 常对 照组缺 血后 １ｄ ３ｄ和 ７ｄ Ｎ Ｓ评 分 均 、 Ｓ
１ ５ １ 神经 功能评 估 ． ．
为 ０分 。缺 血 后 ｌｄ和 ３ ｄ 与 模 型对 照 组 对 比， ， 电
针 组 、 Ｄ Ｃ组 和 电针 ＋ Ｄ Ｃ组 Ｎ Ｓ评 分差别 均 无 Ａ Ｓ Ａ Ｓ Ｓ 统 计学 意义 （ ０ ０ ） Ｐ＞ ． ５ 。缺血 后 ７ ｄ 与模 型对 照 组 ， 对 比， 电针组 、 Ｄ Ｃ组 和 电针 ＋Ａ Ｓ Ａ Ｓ Ｄ Ｃ组 Ｎ Ｓ评 分 Ｓ
行 Ｎ Ｓ评 分 。 Ｓ １５ ２ 蛋 白质 印 迹 检 测 ．．
降低 ， 差别 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ＜０ ０ ， 中 电 针 ＋ ． ５） 其
Ａ Ｓ Ｄ Ｃ组 Ｎ Ｓ评 分 低 于 电针 组 和 Ａ Ｓ Ｓ Ｄ Ｃ组 ， 别 有 差
统计 学意 义 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。见 表 １ 。
ＣＬ２； ＣＸＣＲ２
美 国 Ｓｇ ｉ ｍａ公 司 ； Ｒ ｚｌ 剂 、 ｕ ｅｓｒ ｔ 反 转 录 ＴＩ 试 ｏ Ｓ ｐｒｃｉ Ｉ ｐＩ 酶 、 Ｎ Ｐ ， 自 Ｉｖｔ ｇｎ公 司 ； ａ Ｄ Ａ 聚 合 酶 、 ｄ Ｔ ｓ购 ｎ ｉｏｅ ｒ Ｔｑ Ｎ
Ｄ ２ ０ Ｄ Ａ 标 志 物 ， 自 日本 Ｔ ｋｒ Ｌ０ ０ Ｎ 购 ａ ａａ公 司 ；Ｃ ． Ｘ
脂肪间充质干细胞提取方法
脂肪间充质干细胞提取方法脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells，ADMSCs）是一种广泛存在于人体脂肪组织中的多潜能干细胞。
由于其易于获取、丰富来源以及多向分化潜能等优势，ADMSCs在再生医学和组织工程领域备受关注。
提取脂肪间充质干细胞的方法有多种，常用的包括机械消化法、酶消化法以及分离培养法。
本文将对这些方法进行介绍和比较。
1. 机械消化法机械消化法是一种较为简单直接的提取脂肪间充质干细胞的方法。
首先，将脂肪组织从捐赠者身体中获取，并去除血管和结缔组织。
然后，使用机械切割或研磨的方法将脂肪组织分解成小块。
接下来，使用胶原酶等酶类物质对脂肪组织进行消化。
最后，通过离心等方法将脂肪间充质干细胞与其他细胞分离开来。
2. 酶消化法酶消化法是一种常用的提取脂肪间充质干细胞的方法。
首先，将脂肪组织从捐赠者身体中获取，并去除血管和结缔组织。
然后，使用胰蛋白酶等酶类物质对脂肪组织进行消化。
消化过程中，酶能溶解脂肪细胞膜，并释放出脂肪间充质干细胞。
最后，通过离心等方法将脂肪间充质干细胞与其他细胞分离开来。
3. 分离培养法分离培养法是一种较为复杂但效果较好的提取脂肪间充质干细胞的方法。
首先，将脂肪组织从捐赠者身体中获取，并去除血管和结缔组织。
然后，将脂肪组织切成小块，并加入胶原酶等酶类物质进行消化。
消化后，将细胞悬液进行离心分离，得到含有脂肪间充质干细胞的细胞沉淀。
接下来，将细胞沉淀进行过滤和洗涤，去除其他细胞和残留酶类物质。
最后，将脂肪间充质干细胞进行培养，促进其增殖和分化。
以上提取方法各有优劣。
机械消化法操作简单，但提取效率较低，且存在细胞破损的风险；酶消化法提取效率较高，但对酶的质量和浓度要求较高，且酶消化过程可能影响细胞活力；分离培养法提取效率较高，且可以得到纯度较高的脂肪间充质干细胞，但操作复杂且耗时较长。
为了获得高质量的脂肪间充质干细胞，提取过程中的无菌操作非常重要。
血液净化技术在急危重症患者救治中的作用及护理
血液净化技术在急危重症患者救治中的作用及护理摘要：目的:探讨血液净化技术在急危重症患者中的护理措施及应用效果。
方法:选取本院收治的59例急危患者为研究对象，对患者进行血液净化技术治疗并采取相应的护理措施。
观察患者临床疗效，比较治疗前后心脏血流动力学参数，并记录。
结果:59例患者经治疗后，有效40例，显著16例，无效3例。
总有效率为94.92%。
治疗后患者心率、中心静脉压、心排血量明显下降，平均动脉压升高。
治疗前后心脏血流动力学参数比较，差异有统计学意义(P <0.05)。
结论:在危重患者中实施血液净化技术可有效提高患者的临床疗效，改善患者的心功能，采用有针对性的护理措施可有效促进患者的治疗效果。
关键词：血液净化技术；急危重症患者；抢救效果血液净化技术适用于血液流动缓慢、液体透析速度较慢、弥散和溶液交换和水净化。
能净化体内多余的水分，保持水电解液及酸碱平衡，净化尿素、酐其他的内部和外部有毒物质来源，以及一些炎症环境，超过了正常的治疗能力。
除了治疗严重的慢性肾衰竭之外，还广泛采用了作为急救手段的净化技术以及各种危险的疾病。
当患者处于危急状态时，肾功能往往会下降，需要使用替代的外部手段。
为了帮助病人摆脱机体中的新陈代谢，医学上称之为肾替代物或血液净化技术。
在实际临床治疗过程中，严重危机患者处于严重的压力状态，生命体征不稳定，生命受到严重威胁，病人的血液净化有助于病人康复。
然而，由于这是一个封闭的治疗方法，手术是复杂的，这是一个非常危险的治疗方法。
因此，医务人员必须具备降低死亡率的适当临床经验。
本研究就急危重症患者行血液净化技术治疗的护理措施和应用进行分析与探讨，其报道如下。
一、血液净化1、生物人工肾。
当代研究人员指出了肾元微阵列，如肾小管、亨利氏小管和肾小球。
通过观察临床效果的Ⅰ和女朋友,发现女朋友和女朋友可以有效减少体液的粒细胞集落刺激因子,降低il-10、il-6的水平,该方法安全可靠,带来好消息增加病人的生命长度。
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矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。