用VitaFast Vitamin试剂盒检测饲料中维生素的含量
饲料中常用维生素的检测及鉴别
饲料中常用维生素的检测及鉴别何绮霞【摘要】维生素是动物机体维持生命活动、生产必须的营养成分,是饲料的重要组分。
因此,对饲料厂来说,快速鉴别维生素及掌握正确检测方法十分关键。
为此,本刊特邀广东省农科院何绮霞高级药师就《饲料中维生素的检测方法及真假鉴别》为题,综述了脂溶性、水溶性维生素的鉴别、检测方法,本刊将在第6、第7期刊登,敬请关注。
【期刊名称】《广东饲料》【年(卷),期】2012(000)006【总页数】2页(P41-42)【关键词】水溶性维生素;快速鉴别;饲料厂;检测;广东省农科院;生命活动;动物机体;营养成分【作者】何绮霞【作者单位】广东省农科院农产品质量安全与标准研究中心,广州510620【正文语种】中文【中图分类】S816.32维生素是饲料中的重要组成部分，是一组化学结构不同，生理作用和营养功能各异的化学物。
动物对维生素的需要量极微，但其生理、营养作用显著。
所以在饲料中是否加入维生素、加入的量是否准确，对动物的生长、发育和养殖企业获得的经济效益都会受到很大的影响。
《饲料添加剂品种目录》列出的维生素有32种，分为两类：一类是脂溶性维生素，包括维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K3；另一类是水溶性维生素，包括B族维生素和维生素C等。
维生素的测定方法包括高效液相色谱法、分光光度法、荧光光度法。
而高效液相色谱法是目前使用最多、比较理想的维生素分析方法，它具有分离效果好、灵敏度高、特异性强等特点，特别对于预混合饲料和配合饲料中的维生素，含量低，干扰成分多的情况下，只能用高效液相色谱法进行鉴别及含量分析。
本文主要介绍了维生素预混合饲料或配合饲料中维生素的鉴别及含量分析方法，以提供给广大饲料生产和养殖企业作为参考。
1 脂溶性维生素的鉴别、检测方法1.1 维生素A的鉴别及含量测定方法单体的维生素A肉眼看为淡褐色或灰黄色颗粒。
1.1.1预混合饲料中维生素A的鉴别方法。
取试样2～3g，加氯仿10mL，充分研磨，静置片刻后取少许上清液于点滴板上，加入1滴三氯化锑试液，即呈蓝色。
饲料中维生素检测方法概述
2020年第07期维生素作为饲料中的重要组成部分，是一组化学结构不同、生理作用和营养功能各异的化学物。
因此，在饲料中是否加入维生素、维生素含量是否达标、对动物的生长发育会产生很大影响。
本文从饲料中常用维生素的检测方法入手，提出不同维生素的不同检测方式，旨在进一步精确维生素的用量标准，提高养殖企业的经济效益，促进动物的生长发育。
1不同维生素检测措施首先选取试样2～3g ，添加氯仿10mL 并进行充分研磨，随后过滤或静置，取少许绿叶或上清液于小试管，向小试管内滴加乙酸肝6滴，进行充分摇匀，沿管壁两滴硫酸。
完成后仔细观察液面的变化，若含有V D3，则在硫酸与液面接触时试液应立即显蓝色，随着时间的流逝逐渐转为紫红色。
在操作过程中，注意硫酸与样品容易接触时立即显现蓝色，通常情况下不会看到有黄变红的变化。
同时必须要将样品充分研磨，大多数商品V D3都是包膜微粒，必须进行充分研磨才能促使VD3释放出来。
在添加硫酸时最好不要摇匀，而是选择让其沿着试管壁缓缓接触液面，并观察硫酸与液面接触时那一刹那的颜色变化，若添加硫酸时对其进行晃动则很可能错过反应现象。
高效液相色谱发可以检测V K3，并辨别V K3的真伪，这一方法主要是用于配合饲料配合饲料，复合预混合饲料和维生素预混合饲料。
进行V K3的测定时用高效液相色谱测定，V K3经反相C18柱得到分离，检测器在一定波长下进行检测，外表法计算。
在测量时要尤其强调在维生素预混合饲料、复合预混合饲料、浓缩饲料、配合饲料中V K3所含有的量都不相同，样品的取样量、三氯甲烷体积、提取液稀释倍数都不相同，要特别注意换算。
V B2微溶于水溶于水中，呈现出强烈的黄绿色荧光，在稀释液中其荧光强度与核黄素浓度呈正比。
而待测样品大多为非单一成分，多数较为复杂，其中存在许多干扰物质，且难以消除，会对实验结果的准确性造成影响，为将这一问题切实解决，需要引入新型且高效的处理操作方法以及仪器检测措施，例如改变检测技术，促使同步荧光固定波长差法的应用，准确测定功能性食品中的V B2含量，这一方法简便快捷，散射光影响小，适合于测定混合物。
饲料添加剂维生素C的检验操作规程
饲料添加剂维生素C的检验操作规程Feed additive Vitaminc(ascorbic acid)[质量标准依据] GB7303－2006分子式：C6H8O6分子量：176.13（按1999年国际相对原子质量）1外观和性状本品为白色或类白色结晶性粉末，无臭、味酸，久置色渐变微黄，水溶液显酸性反应。
本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。
2项目和指标3试验方法3.1鉴别3.1.1试剂和溶液硝酸银：0.1mol/L溶液。
称取硝酸银1.7g，用水溶解并稀释至100ml；2，6-二氯靛酚钠：1g/L溶液。
3.1.2方法3.1.2.1称取样品0.2g，加水10ml溶解后，取溶液5ml，加硝酸银溶液0.5ml，即发生银的黑色沉淀。
3.1.2.2称取样品0.2g ，加水10ml 溶解后，取溶液5ml ，加2，6-二氯靛酚钠溶液1滴至3滴，试液的颜色即消失。
4维生素C 含量测定：4.1试剂和溶液冰乙酸：6％溶液。
取冰乙酸6ml ，加水稀释至100ml ； 淀粉指示液（5g/L ）：取0.5g 可溶性淀粉到200ml 烧杯中，加水5ml 湿润，加95ml 沸水搅拌，煮沸冷却备用（现用现配）。
碘标准溶液：0.1mol/L 。
按GB/T 601配制和标定。
4.2测定方法称取本品0.2g （准确至0.0002g ），加新沸过的冷水100ml 与冰乙酸溶液10ml 使溶解，加淀粉指示液1ml ，立即用碘标准溶液（0.1mol/L ）滴定，至溶液显蓝色并30秒不褪。
5结果计算：维生素C （C 6H 8O 6）含量X 1以质量分数（%）表示，按式（1）计算：%100008806.0%11⨯⨯⨯=G F V X 式中：V －为样品消耗碘滴标准液的体积，ml ；F －碘滴定液浓度的校正系数；0.008806─滴定度（1ml 的0.1mol/L 碘标准液相当于0.008806的C 6H 8O 6）G －样品重，g 。
饲料中维生素E的测定
维生素 E 具有广泛的生理功能，对于维护畜禽体内正常的生理功能有重要的意义。维 生素 E 能改变动物繁殖能力，增加免疫功能，促进细胞内呼吸，还可以保持体内的不饱和 脂肪酸，巯基化合物和巯基酶等免受氧化破坏，因而 VE 具有抗氧化作用。VE 是饲料行业 中重要的维生素类饲料添加剂。本实验参照 GB/T17812-2008《饲料中维生素 E 的测定》， 采用直接提取法，对 4％蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。
仪器配置
高压泵： 柱温箱： 检测器： 工作站：
C18 柱，250 mm×4.6 mm，5 μm 甲醇 1.0 mL/min 40 ℃ 285nm 20 μL
P-101A 单泵或升级为双泵 LC5510 柱温箱 LC5510 检测器 LC5510 液相色谱工作站
在线脱气机（选配）： DM-101 自动进0µg/mL 标样谱图
组分名称 维生素 E
图 2 饲料样品谱图
保留时间（min） 18.45
实验所需设备
设备名称 超声波水浴 溶剂过滤器
电子天平
C18 色谱柱
规格 —— —— 精度 0.0001g
设备名称 针式过滤器 一次性无针头注射器
规格 0.45μm，有机系
5mL/1mL
250 mm×4.6 mm， 5 μm
参照标准：GB/T17812-2008 样品溶液制备： 称取饲料样品 1g 左右（精确至 0.0001g）于 50mL 棕色容量瓶中，
加入约 40mL 甲醇，在 65℃超声波水浴中超声提取 30min，冷却
至室温，用甲醇定容至刻度，充分摇匀过滤待测。
色谱条件
色谱柱： 流动相： 流速： 柱温： 检测波长： 进样量：
-2-
食物中的维生素含量测定实验
食物中的维生素含量测定实验维生素是维持人体正常生理功能的重要有机物质，缺乏维生素会引发各种健康问题。
因此，准确地测定食物中的维生素含量对于我们了解其营养价值以及合理膳食非常重要。
本篇文章将介绍一种常用的方法——高效液相色谱法（HPLC）来测定食物中的维生素含量。
一、实验介绍在开始实验之前，我们需要准备一些实验器材和试剂。
具体列表如下：1. 高效液相色谱仪：用于分离和检测维生素。
2. 四氯化钛（TiCl4）：用于提取样品中的维生素。
3. 醋酸乙酯：用于提取样品中的维生素。
4. 维生素标准品：用于制备浓度不同的标准曲线。
5. 色谱柱：用于分离维生素。
6. 注射器：用于装载样品和标准品。
二、实验步骤1. 标准曲线的制备a. 准备一系列不同浓度的维生素标准品溶液。
b. 将每种浓度的标准品溶液以等体积的方式进样到高效液相色谱仪中。
c. 记录每种维生素峰的面积，并绘制标准曲线。
2. 样品的制备a. 将待测食物样品称取一定量。
b. 使用四氯化钛和醋酸乙酯提取样品中的维生素。
c. 过滤提取的液体并将其转移到注射器中。
3. 样品的测试a. 将样品注入高效液相色谱仪中。
b. 使用标准曲线计算样品中各种维生素的含量。
三、结果分析通过实验测定，我们可以得到不同食物样品中各种维生素的含量。
根据这些结果，我们可以评估食物的营养价值，并根据个人需求合理安排膳食。
例如，如果某种食物富含维生素C，那么可以适当增加摄入量以满足身体对维生素C的需求。
此外，通过对不同食物维生素含量的测定，我们也可以比较不同食物之间的营养差异，从而选择更加丰富多样化的膳食，确保获得全面的营养。
四、实验注意事项在进行食物中维生素含量测定实验时，我们需要注意以下几点：1. 确保所有实验器材和试剂的洁净，并严格按照实验步骤和使用说明进行操作。
2. 仔细称取样品和标准品，以确保实验结果的准确性和可靠性。
3. 避免样品的长时间暴露于光线和高温环境中，以防止维生素的降解。
复合预混合饲料中维生素b族的测定
复合预混合饲料中维生素b族的测定复合预混合饲料是一种常见的饲料形式，其中包含多种营养成分，包括维生素B族。
维生素B族是一组水溶性维生素，对动物的生长发育和代谢具有重要的作用。
因此，准确测定复合预混合饲料中维生素B族的含量对于保障动物的营养需要和健康发育至关重要。
维生素B族是一组包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12等多种维生素的总称。
这些维生素在动物体内参与多种代谢过程，如蛋白质代谢、糖代谢、脂肪代谢等。
缺乏维生素B族会导致多种疾病，如神经系统疾病、贫血等。
因此，合理补充维生素B族对于动物的健康发育至关重要。
复合预混合饲料是一种包含多种营养成分的饲料形式，其中包括多种维生素和矿物质。
为了保证饲料中维生素B族的含量符合营养需求，需要对饲料中维生素B族的含量进行准确测定。
目前，常用的测定方法包括生物学法、化学法和光谱法等。
生物学法是一种通过观察动物对维生素B族的反应来测定维生素B族含量的方法。
这种方法具有灵敏度高、准确度高等优点，但需要较长的时间和较高的成本。
化学法是一种通过化学反应来测定维生素B族含量的方法。
这种方法具有操作简单、成本低等优点，但存在一定的误差。
光谱法是一种通过测量样品对特定波长的光的吸收来测定维生素B族含量的方法。
这种方法具有速度快、精度高等优点，但需要先进行样品前处理，且受到样品的干扰。
在实际应用中，应根据具体情况选择合适的测定方法。
例如，对于大规模生产的饲料，可以选择化学法或光谱法进行测定，以保证测定速度和成本的合理性；而对于特殊要求的饲料，如高品质的饲料或用于特殊动物的饲料，可以选择生物学法进行测定，以保证测定的准确性。
总之，复合预混合饲料中维生素B族的含量对于动物的营养需求和健康发育具有重要的作用。
在实际应用中，应根据具体情况选择合适的测定方法，以保证饲料中维生素B族含量的准确性和合理性。
饲料中维生素A的测定方法解析
饲料中维生素A的测定方法解析作者：谈暠媛鲁小翠来源：《湖北畜牧兽医》2014年第12期摘要：针对饲料中维生素A含量的检测方法-HPLC进行了详细的解析，对各个步骤应该注意的事项进行了归纳总结，为饲料中维生素A的含量检测提供参考意见。
关键词：维生素A；皂化法；高效液相色谱中图分类号：S816.2 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2014）12-0062-01维生素是动物所需的五大营养素之一。
其中维生素A的主要营养作用有：维生素A是视紫红质（感光色素）的重要组成成分，维持正常视觉功能；维生素A可保护上皮组织，防止上皮细胞萎缩、角化，保护呼吸道、消化道、生殖泌尿器官黏膜，利于公畜精子生成；增强动物免疫力，促进骨骼发育。
维生素A的化学名是视黄醇，呈淡黄色油状物，易氧化，遇光易变质。
在饲料中的维生素A是通过附着在一定载体上以视黄醇乙酸酯或视黄醇棕榈酸酯的形式添加进去的[1，2]。
1 方法解析目前检测饲料中维生素A的含量主要是分为皂化法[3]和直接提取法。
直接提取法主要适用于维生素预混料，定量限较高。
皂化法一般适用于维生素A含量较低的配合料、浓缩料及复合预混料。
针对GB/T 17817-2010 《饲料中维生素A的测定高效液相色谱法》中第一法皂化提取法提出几点见解。
皂化法分为以下几个步骤：皂化—提取—水洗至中性—浓缩—过膜—供高效液相色谱法检测。
1.1 皂化皂化是指在碱性环境下，油脂被水解生成羧酸盐和醇的反应。
由于维生素A在酸性环境下不稳定，在碱性环境下稳定，易氧化，耐热性好。
所以维生素A的皂化步骤是在碱性环境下，加入抗氧化剂抗坏血酸，在沸水浴上回流30 min，将维生素A提取出来，将其他成分转化成可溶于水的成分。
需注意的是：①L-抗坏血酸乙醇溶液易氧化，所以最好临用新配；②在回流过程中需不时振荡皂化瓶，防止试样粘附瓶壁，导致皂化不充分；③皂化结束时用5 mL 无水乙醇和5 mL水自冷凝水顶端冲洗其内部，将附在冷凝管内壁上的蒸汽水滴冲洗下去。
维生素的检测现状及国际标准检测方法
36 食品安全导刊 2011年10月刊AnAlysis & test 分析与检测□ 左程丽 李端 拜发分析系统销售（北京）有限公司维生素的检测现状及国际标准检测方法维生素是各种生物生长和代谢所必需的，无处不在的营养卫士。
维生素帮助身体中的酶起催化作用，是我们每个人的健康要素。
人体一旦缺乏维生素，机体代谢会失去平衡，免疫力会下降，各种疾病就会趁虚而入，产生维生素缺乏症。
维生素检测背景市场上，食品添加剂像药品一样被标注上“剂量”。
一般的添加食品有婴儿配方食品、谷类产品和果汁，可以为日常饮食添加更多营养成分。
食品中添加的维生素必须进行严格控制，维生素在添加进食品之前就应通过检测，如果储存后再使用，则应重新检测。
European Directive 2002/46 EC制定了一系列关于食品添加剂标识及检测添加过维生素的食品中标注的维生素含量的法规。
我国国家标准GB5413-2010对婴幼儿配方食品与乳品中维生素含量也有明确的规定，标准中涉及的方法有微生物法及高效液相色谱法。
维生素传统测定方法大多步骤繁琐，检测周期长，操作费时，其中一些方法受干扰因素影响大，灵敏度较低，而在实际工作中往往要求测定结果准确、测定周期短、经济合算，这就导致对维生素快速分析方法的需求越来越迫切。
为此，德国拜发公司将继续秉承其研发宗旨，致力于追求简便、快速、准确的维生素分析检测方法。
维生素检测方法国际及国内维生素检测方法主要为微生物法及H P LC法，德国拜发R-Biopharm公司根据国际现行方法研发的配套检测产品能够使检测方法更简单省时，检测结果更准确可靠。
1.传统经典方法——微生物法微生物法根据维生素为细菌生长所必需的原理,以细菌繁殖程度或代谢产物定量该维生素含量，适用于检测多种衍生物的总和。
国家标准GB5413中检测维生素B 12、烟酸和烟酰胺、叶酸、泛酸、生物素及肌醇测定第一法(仲裁法) 均为等同采用AOAC的方法——微生物法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
畜健康。 营养素应能保证家禽机体的能量 、 蛋白质 、 碳水 之 间 的 比例有关 ； 同时 ， 也与 日粮 中其它元 素 营养方 面
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
一
种 营养素缺乏 ， 能引起 家畜生理状态紊 乱并降低其 添加过量， 均 也能引起维生素过多症和畸形。 维生素 的可 吸收性 与很多 因素有关 ， 首先与维生素 的平 衡度有关 。
第３ １眷第６期 总 １７明 ７ ２１ ０ １年 １ １月２ ５日出版
产量 ； 如其过剩 ， 引起饲料消耗不合理 ， 也会 并影响到家 化合物 、 微量元素等 。
素 的方法 。
使继发神经病变 的不 可逆转 。
为了组织 家禽 的全价饲养 ， 有饲料维 生素营养 应拥
近年来 ， 刊出不少有关 完善饲 料营养价值 和规范家
畜饲养标准 的建议 。在俄 国 ， 采用饲料营养价值 包括能 性 和维 生素需要量 的资料 。 维生素能促 进饲料 中营养物
一
类化合物 ， 由微 生物产生 。家禽维 生素缺乏症主要 表 或
为使 日粮在维生素方 面得 到平衡 ， 必须 了解饲料 中 现为生长缓慢 、 生殖紊 乱 、 生产性能 降低 以及 肉 、 中维 蛋 维生 素含量 、 同年龄 家禽对 维生素 的需要量 、 不 动物 生 生素含 量降低 。维生素 Ａ、 ｃ、 Ｂ 叶酸短缺 时 ， Ｅ、 Ｂ、 、 、 Ｂ 理状 态和添加 标准 以及各种 家禽 Ｅ粮 中采用 合成维 生 会 引起 连锁基 因 中毒事件 ，从 而危 害更大 的遗传程 序 ， ｔ
维生 素不是动 物机体 组织 和器官结 构 中能量 和物
不 仅包括基 本 的糖 、 肪等有机 营养物 质 ， 时也 包含 质的来源。 脂 同 然而 ， 多维生素是组 成酶的成分。Ｉ粮 内个 很 ＜ Ｉ 均能 降低相应 酶 的活性 和 在 机体物 质代谢 过程 中执 行重要 作用 的矿物质 和维生 别维生素缺乏或其含 量不足 ， 表现为 食欲缺乏 、 虚弱 、 生长 缓慢 、 衰竭 素。动物 机体 内维生素代谢受 多种 因素影响 ， 它与家禽 物质代谢 紊乱 ，
转变 为不 易消化 的形式 。因此 ， 在集约化养禽业 生产条 取 代物质 代谢过 程 中的维生素 ， 以致失 去其 功能 ； 二是 饲料 中含此 件下 ， 生素 营养问题 ， 维 应依靠 维生素饲 料调制 或是配 用裂解和形成络合物而使维生素失去活性 。
合饲料 中采用合成维生素制剂而予 以综合地解决 。
一
３ ． ６
＠围 技一 禽 学 轱占
李光辉 译 自 兽医学｝ｏｏＮ １， ￣ ０ 俄《 ２ｌ ，９１ ７４ ＿ ３
李 震 校审
中图分 类号 ： Ｓ 文献标识码 ： ｃ 文章 编号 ：０ １ ０ ６ （０ １ ４ ０ ３ － １０ － ７ ９ １） － ０ ６ ２ ２ ０
目前 ， 约化 养禽业 规定 家禽 的全价 、 集 平衡 饲料 ，
现和经济指标 。
各种疾病 引发 的消化不 良。
饲料是维生素 的主要来源 。然 而 ， 当饲料 调制与贮
维生 素缺乏症 也可 由具 有抗 维生素 特性 的物 质引
存不 当时 ， 部分天 然维生 素遭 到破 坏 ， 中某些成 分被 起 ， 其 特别是相 当于维 生素结 构的类 似物。 其作用之一 ， 是
生长幼禽 和成年高产蛋鸡对维 生素 的需要量 大 ， 仅 依靠饲料 中的含量是不够 的。
近年来 ， 由工业法生产 出大量 的维生素制 剂。它不
按照 以下指标测定 日粮成分具 有特别意义 ，包 括 ：
干物质水平 ， 能数量 ， 蛋 白 、 代谢 粗 可消化蛋 白、 氨基酸 、 仅用于预 防维生素缺乏症 ， 同时也用来增加畜 禽生产的 降低 蛋 白质 饲料 的消耗 ， 并提 高饲 料营养 素 的效 糖、 淀粉、 纤维素、 常量元素、 微量元素、 维生素含量以及 数量 、 糖和能量蛋 白质 比例 、 钙磷 比例 以及酸碱平衡 等。任何 果 。然 而 ， 某些 维生素 如维 生素 Ａ、 生素 Ｄ、 生素 Ｅ 维 维
量价值在 内的综合 评价。 代谢能保证动物机体用于生产 质的吸收 ， 将其在机体 内转 化成生命必需 的化合物并激 产 品的消耗 ， 中包 括维持 生命 、 消化 和吸收。 其 饲料 研究 励 不同器官和内分泌腺的重要机能 。 家禽能量和维生素营养标准 ， 可使专 家参 考饲料 的生化
成分而制定出有科学依据的 日粮 。
的种类 、 因型 、 基 年龄 、 生产性 能 、 管理条 件 以及 日粮 中 以及特异的维生素缺乏症 。 中隐ｌ维生素缺乏症较常 其 生
维生素与其它 营养成分 的配比有关 。 上述 因素能改变维 发生 ， 临床 上多无 明显 的症状 。维 生素缺乏症 的病 因 在 生素 利用 的效率 ， 相应地影 响 到动物 的健 康 、 并 生产 表 多是 由于随饲料进入体 内的维生素不足 ， 也可能是 因为