背景资料——大肠、金葡、枯草芽孢
枯草芽孢杆菌实际应用与发展前景的研究Microsoft Office Word 97-2003 文档
枯草芽孢杆菌实际应用与发展前景的研究[摘要] 随着国家对农业的支持，微生物化肥有农业中的应用也越来越受到重视。
而枯草芽孢杆菌在农业方面和其它方面都有广泛的应用，因此，研究枯草芽孢杆菌的实际应用是非常必要的。
本文从工业酶生产、生物防治领域、微生物添加剂领域和医药卫生领域等方面对枯草芽孢杆菌的实际应用进行研究。
[关键词] 枯草芽孢杆菌实际应用发展前景Bacillus subtilis application and development prospect of[ Abstract ] along with the country the support to agriculture, microbial fertilizer has application in agriculture has been paid more and more attention. And Bacillus subtilis in agriculture and other aspects of a wide range of applications, therefore, research of Bacillus subtilis and practical application is very necessary.This article from the industrial enzyme production, biological control field, microbial additives and medical and health fields on Bacillus subtilis applied research.[ Key words] Bacillus subtilis; application; development prospects1.1 枯草芽孢杆菌简介枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。
几种抗生素对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用
的耐 药性 问题 亦少 报道 ． 因此 ， 探 讨抗 生素 联合 效应 导致 的 耐药性 研究 可 为 医学 、 畜牧业 和 流行 病学 等 领 域 提 供一定 的数据 支持 和理论 依 据．
败 菌 的生长 ， 增加 有益 菌数 量 ， 增 强 细胞 免疫 和体 液免 疫 的功 能［ ２ ］ ．
抗 生素 （ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｉ ｏ ｔ ｉ ｃ ｓ ） 是 由微 生 物 （ 包括细菌、 真菌、 放线菌） 和一 些 高等 动 植 物 在 生 活 过 程 中 自身产 生 的具 有抗病 原 体或其 他 活性 的一 类 次级 代 谢 产 物 ， 能 干 扰其 他 生 活 细胞 发 育 和 正 常 活 动 功 能 的一 类 化学 物质 ［ ３ ］ ． 抗 生 素 的出现 为疾病 的治疗作 出了 巨大 贡献 ， 然 而近 年来 ， 抗 生 素 的过 度 使 用 ， 特 别在 养 殖 业、 畜牧 业等 领域 的过 度滥 用 ， 导 致抗 生 素通 过食 物链 进人 人 体 ， 改 变机 体 内菌群 的 结构 和 数量 ， 致使 人 体和 动物 体发 生免 疫失 调 ， 抵 抗 力下 降 ， 甚 至导 致机 体感 染某 些 超级 细菌 而致 死 ［ ４ ］ ． 所 以尽 管抗 生 素在 各
摘 要 ： 采 用 琼 脂 扩 散 纸 片法 分 析 ４ 种 抗 生 素 单 独 及 联 合 使 用 对 大 ． 选
用 普 适 性 抗 生 素 注射 用 青 霉 素 钠 、 注射 用 四 环 素 、 注射 用 硫 酸链 霉 素 和 注 射 用 头 孢 米 诺 钠 ， 分 别 在 各 自常 用 剂 量的 １ ０ 、 １ 、 ０ ． １倍 剂 量 下 进 行 ， 以 牛 肉 膏 蛋 白胨 琼 脂 平 板 培 养 基 上 圆形 滤 纸 片 的 抑 菌 圈 直 径 来 确 定 两 种 菌 种 对 抗 生 素 抑 菌 作 用 的敏 感 程 度 ． 结果表 明 ， ４种 抗 生 素 对 两 种 菌 均 有 一 定 的 抑 菌 作 用 ， 两 种 菌 对 常 用 剂 量 的 注 射 用青霉素钠 、 注 射 用 四环 素 、 注射 用 硫 酸 链 霉 素 表 现 为 中 度 敏 感 ， 而对 注射用 头孢 米诺钠 表现 为极度敏 感 ， 在 常用剂量 的 ０ ． １ 倍 剂 量 条件 下 ， 其 对 注 射 用 头 孢 米 诺 钠亦 表 现 为 极 度 敏 感 ； 且 抗 生 素 两 两 联 用 的抑 菌 效 果 与单
应掌握的微生物种属拉丁文
金黄色萄球菌Staphylococcus aureus大肠杆菌Escherichia coli枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis炭疽芽孢杆菌Bacillus anthracis酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae八孢裂殖酵母Schizosaccharomyces octospores黑曲霉Aspergillus niger毛霉属Mucor黑根霉Rhizopus nigricans产黄青霉Penicillium chrysonegum米曲霉Aspergillus oryzae黄曲霉Aspergillus flavus尿素微球菌Micrococcus ureae嗜热链球菌Streptococcus thermophilus 保加利亚乳酸杆菌Lactobacillus bulgar尿素八叠球菌Sarcina ureae铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa植物乳杆菌Lactobacillus acidophilus破伤风梭菌Clostridium tetani根瘤菌属Rhizobium肺炎链球Streptococcus pneumoniae盐生盐杆菌Halobacterium halobium红皮盐杆菌Halobacterium cutirubrum结枝杆菌Mycobacterium tuberculosis霍乱弧菌Vibriocholerae灰色链霉菌Streptomyces griseus白地霉Geotrichum candidum绿色木霉Trichodermaviride细黄链霉菌Streptomyces microflavus巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium乳酸链球菌Streptococcus lactis四联微球菌Micrococcus tetregenus丙酮丁醇梭菌Clostridiumacetobutylicum鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium热带假丝酵母Candida tropicalis沙门氏菌属Salmonella 欧文氏菌属Erwinia 乳酸乳球菌Lactococcus lactis荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens第一位观察到微生物的科学家是Leeuwen Hooke.\自然发生说的理论认为微生物来自无生命的物质\细菌学的奠基人是Robert Koch\路易.巴斯德对微生物学的贡献在于他确立了生命来自生命的胚种学说\阐明微生物是传染病原因的概念称为病原菌学说\巴斯德采用曲颈瓶试验来驳斥自然发生说\微生物学中铭记柯赫是由于证实病原菌学说\下列微生物中，细胞壁不含肽聚糖的是古细菌\在自然界存在的各种形态的原核生物中，最多见的形态是球状\在枯草芽孢杆菌肽聚糖中，四肽尾的结构是L-Ala-D-Glu-L-Lys-D-Ala\在G+细菌细胞壁中缺乏的化学成分是蛋白质\在G-细菌细胞壁中缺乏的化学成分是磷壁酸\脂多糖是G¯细菌的内毒素，其毒性来自分子中的类脂A\用人为的方法处理G¯细菌的细胞壁后，可获得仍残留有部分细胞壁的缺壁细胞称作球状体\按鞭毛的着生方式，大肠杆菌属于周生鞭毛菌\除支原体外，能形成“油煎蛋”状菌落的细菌还有L－型细菌\金黄色葡萄球菌肽聚糖的肽桥是－（Gly）5－\细菌中异染粒的主要生理功能是磷源贮存物\荚膜的主要化学成分是多糖，多肽或蛋白质\蓝细菌进行固氮作用的部位是异形胞\蓝细菌进行光合作用的部位是类囊体\细菌鞭毛的运动所需能量来自于细胞膜\原核微生物细胞壁中所特有的物质是肽聚糖\G＋细胞壁中所特有的成分是磷壁酸\细菌芽孢的抗逆性是多方面的，但最突出的是抗热\在细菌的芽孢皮层和芽孢核心中，有一种特殊的与其抗热性有关的物质是DPA-Ca\苏云金芽孢杆菌体孢晶体的化学成分是蛋白质\古生菌细胞壁中假肽聚糖分子的连接键是β－1.3－糖苷键\属于细菌特殊结构的是糖被\细菌鞭毛是细菌的运动器官\聚－β－羟丁酸在细菌中的生理功能是碳源类贮藏物\固氮菌所特有的休眠体构造称为孢囊\放线菌的菌体是分枝丝状体，因此它是一种多核的原核微生物\能形成肉眼可见的子实体的原核微生物是粘细菌\菌毛的作用是吸附作用\细菌的繁殖方式主要为裂殖\细菌在液体培养基上的群体形态称为菌膜\放线菌基内菌丝的主要作用为吸收营养，排泄废物\有一菌落干燥，不透明，表面呈致密的丝绒状，且在培养基连接紧密，则该菌最有可能是放线菌\在实验室中，通过自发突变而形成的遗传性状稳定的细胞壁缺壁细胞称为L-型细胞\高等陆生真菌细胞壁的主要成分为几丁质\在“9＋2”型鞭毛微管二联体的A亚纤维上，会伸出内外两条动力蛋白臂，其性质是一个ATP酶\“9＋2”型鞭毛的基体，其横切面在电子显微镜下显“9＋0”型\能产生厚殖孢子的常见酵母是白假丝酵母\真酵母进行有性繁殖时产生子囊孢子\在固态基质上会不断蔓延，以致不能形成菌落的霉菌是根霉\根霉产生的有性孢子和无性孢子是接合孢子和孢囊孢子\呈扫帚状分生孢子头的霉菌是青霉\在其生活史中，只发现有无性繁殖而未发现有性繁殖的真菌称为半知菌\能产生游动孢子的霉菌是腐霉\下列不属于真菌细胞器结构的是叶绿体\某些酵母菌上下两细胞连接处呈藕节状，通常称为假菌丝\下列属于无性孢子的是分生孢子\由气生菌丝特化而成的结构是子囊果\由营养菌丝特化而成的结构是菌核\营养体只能以单倍体形式存在的酵母菌是八孢裂殖酵母\营养体只能以二倍体形式存在的酵母是路德氏酵母\营养体既能以单倍体又能认二倍体形式存在的酵母是酿酒酵母\分生孢子梗的顶部长有顶囊，基部长有足细胞的霉菌是曲霉的重要特征\蕈菌菌丝中双核细胞的大量繁殖必须借助锁状联合\对于细菌芽孢的叙述，正确的是芽孢是细菌细胞内形成的休眠体\芽孢染色常采用的染料是孔雀绿\复红染鞭毛的关键操作为染料新鲜\接种环常用的灭菌方法是火焰灼烧灭菌\革兰氏染色的关键操作步骤是酒精脱色\显微镜观察细菌时，一般要在镜头与载波片之间滴一滴香柏油\有一菌落的特征为：圆形，干燥，表面呈绒毛状，菌落较大，这种菌可能为霉菌\菌落特征为：圆形，表面湿润或粗糙，或有光泽，易挑起，这种菌最有可能是酵母菌\所有下述特征中，不适合描述酵母菌细胞的是它们是多细胞的真菌\微生物细胞染色时热固定步骤在只有用多步染色法\酵母菌细胞壁主要含葡聚糖和脂多糖\磁小体的作用是导向作用\酵母菌主要生长在偏酸的含糖环境\噬菌体是一种感染细菌和放线菌的病毒\病毒缺乏独立代谢的酶体系\溶源菌遇到同一种噬菌体或与之密切相关的噬菌体时表现为免疫性\最先发现病毒的是尹万诺夫斯基\病毒纯化方法均是根据病毒的基本物化性质建立的，包括病毒的主要化学组成是蛋白质\温和性噬菌体基因组在溶源性细菌内可以下列状态存在整合于宿主染色体或质粒形式\烟草花叶病毒的典型形状为杆状\以二十面体对称的病毒粒是腺病毒\以复合对称的病毒是T4噬菌体\噬菌体感染宿主后在固体培养基表面形成的透明斑称为噬菌斑\动物病毒在其宿主的单层细胞培养物上所形成的聚集体，称为空斑\从本质上看，病毒应是一种既可以感染态存在，也可以非感染态方式存在的遗传因子\病毒的增殖方式为复制\引起牛、羊搔痒病的病原是朊病毒\1971年，T.O.Diener在患仿锤病的马铃薯块茎中，发现了最小的只含有裸露RNA分子的寄生生物类病毒\病毒壳体的组成成分是蛋白质\组成病毒粒子核髓的化学成分是核酸\决定病毒感染专一性的物质基础是蛋白质\朊病毒是一类仅含有侵染性的蛋白质\最先提纯的病毒结晶的病毒是烟草花叶病毒\与寄主细胞同步复制的噬菌体为温和噬菌体\拟病毒为不具独立侵染性的RNA分子\在含有下列物质的培养基中，大肠杆菌首先利用的碳源物质是葡萄糖\下列物质中可用作生长因子的是叶酸\大肠杆菌属于化能有机异养型微生物\化能无机自养微生物可利用H2为电子供体\用来分离产胞外蛋白酶菌株的酪素培养基是一种选择培养基\下列培养基是合成培养基的是查氏培养基\一般酵母菌适宜的生长PH为5.0~6.0\一般细菌适宜的生长PH为7.0~7.5\对厌氧微生物正常生长关系最大的物理化学条件是氧化－还原势\高氏1号培养基适合培养放线菌\下列关于微生物的营养，说法正确的是无机氮源也能提供能量\适合细菌生长的C/N比为5:1\被运输物质进入细胞前后物质结构发生变化的是基团转位\ EMB培养基对大肠杆菌群有显著的鉴别力，主要是依据的原理是发酵乳糖产酸\富集土壤真菌用的常用选择性培养基是马丁氏培养基\蓝细菌属于光能自养型微生物\化能自养微生物的能量来源于还原态无机化合物\基团转位有如下特征运输前后物质发生化学变化\占微生物细胞总物质70%-90%以上的细胞组分是水\自养型微生物和异养型微生物的主要区别是所需碳源不同\一种细菌所利用的碳源是有机物，能源是氧化有机物所释放的能量，则该细菌的营养类型为化能异养型\实验室细菌培养基能够加富通过添加血液\要对细菌进行动力观察，最好采用半固体培养基\对厌氧微生物正常生长关系最大的物理化学条件是氧化还原电位\在C·H·O类化合物中，微生物最适宜的碳源是糖类\新陈代谢研究中的核心问题是能量代谢\微生物光合作用的中间产物是氧气和葡萄糖分子\不产氧光合作用产生A TP是通过循环光合磷酸化\发酵是专性厌氧菌或兼性厌氧菌在无氧条件下的一种生物氧化形式，其产能机制是底物水平磷酸化\合成代谢是微生物细胞中的一个过程，其作用是合成分子及细胞结构\营硝酸盐呼吸的细菌，都是一类兼性厌氧菌\下列代谢方式中，能量获得最有效的方式是有氧呼吸\下列哪些描述不符合次级代谢及其产物次级代谢产物的合成不受细胞的严密控制\非循环光合磷酸化中，还原力NADPH2的〔H〕来自于H2O的光解\微生物产生次生代谢产物的最佳时期是稳定期\下列说法不正确的初级代谢产物的合成无需代谢调节\在细菌细胞中，能量代谢的场所是细胞膜\属于微生物初级代谢产物的是A TP，维生素\抗生素属于微生物代谢中的次生代谢产物\只存在于微生物中的一条特有的代谢途径是ED\一些嗜盐菌进行光合作用的机制为紫膜光合磷酸化\在以下能进行光合作用的细菌中，不含叶绿素和菌绿素的是嗜盐菌\硝化细菌是化能自养菌，氧化氨生成亚硝酸盐获得能量\对于细菌群体生长曲线叙述不正确的是对容器内全部培养基里的细菌进行测定\消毒的目的是消灭病原微生物\代时是指细胞分裂繁殖一代所需要的时间\在典型的单细胞微生物生长曲线中，细胞形态最大的生长期是延滞期\在典型的单细胞微生物生长曲线中，代时最短的生长期是对数期\在典型的单细胞微生物生长曲线中，细胞产量最高的时期是稳定期\下列保存方法会降低食物的水活度的是腌肉\能导致微生物死亡的化学剂是杀菌剂溶菌剂\微生物细胞内环境中的pH值一般为中性\只能用高压灭菌才能杀死的是细菌芽孢\磺胺的结构类似物是对氨基苯甲酸\青霉素杀菌的主要机理是抑制细胞壁合成\采用紫外线诱变菌种时需要在黑暗或红外条件下进行，主要原因是可见光激活微生物细胞中的光激活酶\能通过抑制叶酸合成而抑制细菌的生长的是磺胺类药物\直接显微镜计数适宜的微生物是霉菌孢子和酵母菌\所有微生物的世代时间是不同的\微生物分批培养时，在延迟期菌体体积增大\微生物产生次级代谢产物的最佳时期是稳定期\使用高压锅灭菌时,打开排汽阀的目的是排尽锅内冷空气\细菌细胞进入稳定期是由于：（2）代谢产生的毒性物质发生了积累；（3）能源已基本耗尽\对生活的微生物进行计数的最准确的方法是平板菌落计数\连续培养时培养物的生物量的决定因素是稀释率\高温灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动\微生物细胞大小、形态典型，生理生化反应稳定，并开始积累贮存物质的阶段稳定期\处于较低浓度范围内，可影响生长速率和菌体产量的营养物称生长限制因子\最符合同步生长的描述是处于同一生长分裂阶段\紫外线杀菌的主要机理是形成胸腺嘧啶二聚体\为了比较各种表面消毒剂的相对杀菌强度，通常采用检测指标是石炭酸系数\对金属制品和玻璃器皿通常采用的灭菌方法是干热灭菌\在“后抗生素”时代，学者们关注的发展微生物生化药物的一个新方向是生物药物素\“细胞内颗粒更明显，细胞出现多形态、畸形或衰退形，芽孢开始释放”具有这样特点的是微生物生长的衰亡期\在微生物生长的某个阶段，新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，微生物的生长速率处于动态平衡。
1-大肠杆菌表达体系介绍PPT课件
转录水平 翻译水平
质粒拷贝数
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启动子
启动子 P lac P trp P tac P traA P lL P recA
-35 区序列 TTTACA TTGACA TTGACA TAGACA TTGACA TTGATA
P tac = 3 P trp = 11 P lac
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-10 区序列 TATAAT T TAA C T TATAAT TAAT G T GATACT TATAAT
酸性国内国外均 有，中性国内尚 未产业化
稳步增长
稳步增长，当前是纺织 酶中市场最大
宽温宽pH 碱性条件 近中性
国外有，国内目 前江南大学产业 化初步阶段
稳步增长 >3000吨
诺维信等少数国 际公司产业化， 国内产业化初步 阶段
市场空间较大 > 5000吨
目前尚无商业化， 未来皂洗、染料废水脱
成本高
色市场空间大
易操作性
• 转化，筛选、遗传稳定
可延展性
• 蛋白种类，放大
低成本性
• 发酵原料，发酵工艺和后处理
高效表达
• 副产物少，表达量高
.
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常用工业酶表达系统的表达水平
种类 细菌 酵母
丝状真菌
菌名
大肠杆菌 枯草芽孢杆菌
毕赤酵母 黑曲霉 米曲霉
里氏木霉 金孢子菌C1
表达水平
目的蛋白
总蛋白
<7g/l
20g/l
Aspergillus niger/oryzae
.
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表达系统
工业生产：菌株、发酵工艺和后提取方法等
The good production strain is not everything, but everything is nothing without a good production strain.
竹醋液、芦荟汁复配液的抑菌效果研究
种具有药 理活性 和生 物活性 的化学 成 分 。其 中主要
１ ． １ ． １ 菌种 金 黄色葡萄球菌 、大肠杆 菌 、枯草芽孢
收稿 日期 ：２ ０ ０ ６ — ０ ６ — ２ ６
作者简介 ：鄢洪德（ １ ９ ８ ｏ ＿ ） ，助理 实验师，研 究方向为 生物技 术。
五
维普资讯
ｖ ｉ ｎ ｅ ｇ ａ ｒ ＆ａ ｌ ｏ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ
ＹＡ Ｎ Ｈｏ ｎ ｇ — ｄ ｅ ， Ｚ Ｈ ＡＮ Ｇ Ｙ ｉ ｎ － ｊ ｕ ｎ ， ＷＡ ＮＧ Ｚ ｈ ａ ｏ ， Ｗ ＡＮ Ｇ Ｐ ｉ ｎ ｇ
（ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ａ ｎ ｄ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ， Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｈ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ３ １ ０ ０ １ ４ ）
工艺 技市
■
长 时间放 置后３ 种汁液 表 面均有棕 色膜 状物 质产 生 ．
杆菌 、放线菌 、青霉 、米 曲霉 、黑 曲霉 ：浙江工业大 学微生物实验室保 藏菌种 １ ． １ ． ２ 培 养基 牛 肉膏 蛋 白胨 培 养 基（ 细 菌类 培 养
并会 有大量 沉淀物。 经过抽 滤 和离 心 的芦荟提 取液 与 只经 过纱 布 过 滤的相 比较 ，前者 几乎 不 含 固体 杂质 。故 比后者 透
ＫＮ０ ３ １ ． ０ ｇ ， Ｋ２ Ｈ Ｐ Ｏ ４ ０ ． ５ ｇ ， Ｍｇ Ｓ Ｏ４ ・ ７ Ｉ － Ｉ ２ ０ ０ ． ５ ｇ 。 Ｎａ Ｃ １
枯草芽孢杆菌在家禽生产中应用
枯草芽孢杆菌在家禽生产中应用郭发祥;肖金松【摘要】随着品种选育、遗传潜力提高以及饲养方式的改进，家禽生产力得到了极大地提高，使家禽养殖业成为畜牧业中发展最快的产业。
然而，家禽生长速度提高和饲养密度的增加也加剧了疫病发生频率，使得家禽对各种病原尤其是肠道病原微生物如大肠杆菌、沙门氏菌和空肠弯杆菌等更加敏感。
对病原敏感度的增加也促使生产者使用抗生素、生长促进剂来加强肠道健康和控制亚临床征状的发生。
虽然抗生素在治疗家禽疾病，促进动物生长等方面表现出强大的优势，但由于药残、耐药性以及其它的一些不利之处使得其在世界范围内逐步受到限制。
【期刊名称】《广东饲料》【年(卷),期】2011(000)007【总页数】3页(P32-34)【关键词】家禽生产;枯草芽孢杆菌;病原微生物;应用;肠道健康;家禽养殖业;空肠弯杆菌;生长促进剂【作者】郭发祥;肖金松【作者单位】河源市动物疫病预防控制中心,广东河源517000;广东温氏食品集团有限公司福建分公司,福建南靖363900【正文语种】中文【中图分类】S816.7随着品种选育、遗传潜力提高以及饲养方式的改进，家禽生产力得到了极大地提高，使家禽养殖业成为畜牧业中发展最快的产业。
然而，家禽生长速度提高和饲养密度的增加也加剧了疫病发生频率，使得家禽对各种病原尤其是肠道病原微生物如大肠杆菌、沙门氏菌和空肠弯杆菌等更加敏感。
对病原敏感度的增加也促使生产者使用抗生素、生长促进剂来加强肠道健康和控制亚临床征状的发生。
虽然抗生素在治疗家禽疾病，促进动物生长等方面表现出强大的优势，但由于药残、耐药性以及其它的一些不利之处使得其在世界范围内逐步受到限制。
益生素由于可通过加强肠道微生物区系的屏障功能或通过非特异性免疫功能增强动物抗病力和体质，防止病菌感染，同时还可提高饲料利用率等特点而引起大家的重视。
其中，枯草芽孢杆菌作为益生素中的一种，因具有无毒副作用、无残留污染、不产生耐药性且可部分替代抗生素等优点而引起人们广泛关注。
(食品微生物)第2章 原核微生物
第3氨基酸
-(肽尾）
1～2－
-D-Lys-
第3氨基酸 第2氨基酸
E.coli （G-）
S.Aureus （G+）
M.Luteus （G+）
C.Poinsettiae （G+）
多个双糖单位相连形成肽聚糖的多糖 链，……NAM－ NAG－NAM－NAG……，其长度因菌种而异（金黄 色葡萄球菌9个、地衣芽孢杆菌79个）。
双糖单位
N-乙酰葡萄糖胺（G）和 N-乙酰胞壁 酸（M）以β-1，4糖苷键相互间隔连 接而成的线形大分子 ，构成了肽聚糖 的主链分子，即“聚糖”。
M—G—M—G—M—G—M—G
四肽尾或四肽侧链
由四个氨基酸组成（连在N-乙酰胞壁酸 上）
L-丙氨酸 D-谷氨酸 L-赖氨酸（G+） D-丙氨酸
肽桥
炭疽病的病原菌 -------炭疽杆菌
螺旋菌(spirilla)
螺旋菌：细胞呈弯曲杆状的细菌统称螺旋菌。螺旋菌 细胞壁坚韧，菌体较硬，常以单细胞分散存在，不同 种的细胞个体，在长度、螺旋数目和螺距等方面有显 著区别。据此可再分为两种形态。
1）弧菌（vibrio)：菌体只有一个弯曲，其程度不是一圈，犹 如"C"字，或似逗号，如霍乱弧菌。
Ⅱ、保证致病菌与宿主间的粘连避免被白细胞吞噬，并 有抗补体的作用。
Ⅲ、赋于G+菌以特异的表面抗原，因而可用于菌种鉴定。 Ⅳ、提供某些噬菌体以特异的吸附受体位点。 Ⅴ、调解细胞内自溶素的活力，以防止细胞因自溶而死
亡。 Ⅵ、贮藏元素。
（2）革兰氏阴性细菌细胞壁
G-细胞壁的组成和结构比G+更复杂。分为内壁层 和外壁层两部分。
第二章 原核微生物
菌种的传代、保藏及菌液ppt课件
1、玻璃器皿：如各种规格培养皿。 2、微生物实验室常用的设备，如高压灭菌锅、恒温培养箱等
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菌种的接种操作步骤
一. 斜面接种法：
1. 从冷藏箱中取出菌种斜面后，应在室温放置约30
分钟。
2. 将装有新鲜配制的培养基菌种保藏管管壁上注明
菌名及接种日期，和传代菌种一并移入接种室或
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铜绿假单胞菌—琼脂平板的形态
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铜绿假单胞菌—鞭毛染色形态
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生孢梭菌
形态特征： G＋粗大芽胞杆菌、但在陈旧培养物中菌体 革兰染色为阴性 ，芽胞正圆形或卵圆形，直径大于菌体， 位于军体中央或近端，有周身鞭毛，能运动。 培养特性：专性厌氧，但要求不严格。一般培养时不易 形成芽孢，在普通营养琼脂培养基形成不规则菌落。在
菌种管口移至火焰上方。
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5.塞上管塞，左手将菌种管放下，取营养琼 脂斜面（或改良马丁琼脂斜面）一支，照 上述操作打开管塞，将接种环伸入管内至 琼脂斜面的底部向上划一条直线，然后从 底部向上作连续曲线划线，一直划到斜面 顶端，使细菌接种在斜面的表面上。 6.取出接种环，在火焰上方将培养基管盖上 塞子，然后将接种过细菌的接种环在火焰 上烧灼灭菌。 7.将已接种好的细菌管置35～37℃细菌培养 箱培养22 ～24h，霉菌管置23～28℃霉菌 培养箱培养 7天。 2019 -
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二. 穿刺接种法： 用接种针取细菌少许，从培养基的中央垂 直刺入，接近管底但不接触管底，然后接 种针沿穿刺线原路退出。 主要用于生孢梭菌的传代。 三.液体接种法： 用接种针取菌少许，在试管内壁与液面交 界处的管壁上轻轻研磨，使菌混合于培养 液中。
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生防菌剂：以拮抗、竞争、诱导植物抗性为主
培养条件
需氧菌，最适生长温度35°C，最适生长pH6.0
优化后培养基：葡萄糖15g/L，酵母提取物5g/L，MgSO45g/L，
枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌培养基图
不同抗生素对
培养基：马丁培养基
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抗生素对照空白对照
不同抗生素对不同菌的抑制作用
培养基：LB
菌：金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌834
TH
大肠杆菌
铜绿假单胞菌
KCC
KCD
乳酸菌
BS
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3 4
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抗生素对照空白对照
抗生素1
抗生素2
抗生素3
抗生素4
抗生素5
抗生素6
抗生素对照
空白对照
大肠杆菌
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金葡菌
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金葡菌834
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铜绿
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KCC
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培养条件
最适生长温度37°C，最适生长pH7.4
金黄色葡萄球菌革兰氏染色图金黄色葡萄球菌电镜图
金葡菌普通培养基图金葡菌BP培养基图
枯草芽孢杆菌
形态
革兰氏阳性菌
无荚膜，周生鞭毛，能运动
菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色
在液体培养基中生长时，常形成皱醭
热稳定性
强，能产生耐热抗逆的芽孢
特性
可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚
致病性
主要表现为呕吐、发热、腹泻
可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染
传播途径
中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品
此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
抑制剂
有较强的抵抗力，对磺胺类药物、青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感，易产生耐药性
KCD
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BS
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TH
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乳酸菌
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血平板菌落周形成透明的溶血环
Baird-Parker平板上菌落为圆形，直径2-3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带
特性
有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气
分类
溶血毒素、杀死白细胞素、血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素
大肠杆菌
全名
大肠埃希氏菌（E. coli）
形态
革兰氏阴性细菌（G-）
周生鞭毛，能运动，无芽孢
LB平板菌落形态是白色、湿润、光滑菌落
热稳定性
55℃,60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活
特性
大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气
向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在
致病菌分类
6类：肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）、肠黏附性大肠杆菌（EAEC）和弥散粘附性大肠杆菌(DAEC)
致病性
常引起严重腹泻和败血症
传播途径
肠出血性大肠杆菌感染是一种人畜共患病
可通过饮用受污染的水或进食未熟透的食物而感染
抑制剂
胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用
对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感
培养条件
最适生长温度37°C，最适生长pH7.4-7.6
大肠杆菌革兰氏染色图大肠杆菌1
大肠杆菌2大肠杆菌产酸产气图
大肠杆菌伊红美蓝培养基图
金黄色葡萄球菌
形态
是革兰氏阳性菌的代表
无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，
普通平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0.5-1.0mm