大肠杆菌
大肠杆菌培养基
大肠杆菌培养基大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性杆菌，是一种常见的肠道细菌，也是一种重要的实验室模式生物。
大肠杆菌培养基是一种用于培养和繁殖大肠杆菌的营养培养基，它提供了大肠杆菌所需的营养物质和生长条件，使其能够在实验室中进行研究和应用。
大肠杆菌培养基的组成。
大肠杆菌培养基的组成通常包括以下成分：1. 碳源，大肠杆菌需要碳源来进行能量代谢和生长。
常见的碳源包括葡萄糖、蔗糖、乳糖等。
2. 氮源，氮源是大肠杆菌合成蛋白质和核酸的重要原料。
常见的氮源包括氨基酸、氨基酸盐、蛋白胨等。
3. 矿物盐，矿物盐是细胞生长和代谢所必需的微量元素，如钙、镁、钾、磷等。
4. 生长因子，大肠杆菌培养基中通常还添加了一些生长因子，如维生素、核酸、辅酶等，以促进大肠杆菌的生长和繁殖。
5. pH调节剂，培养基的pH值对大肠杆菌的生长有重要影响，通常需要添加pH调节剂来保持培养基的适宜pH范围。
根据不同的研究目的和实验条件，大肠杆菌培养基的配方会有所不同，可以根据实际需要进行调整和优化。
大肠杆菌培养基的制备方法。
大肠杆菌培养基的制备方法相对简单，一般包括以下步骤：1. 称取适量的葡萄糖、蛋白胨、氯化钠等成分，加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀。
2. 调节pH值至适宜范围，通常大肠杆菌培养基的pH范围为7.0-7.4。
3. 加热蒸馏水，使培养基成分充分溶解。
4. 经过高温高压灭菌，使培养基无菌。
5. 分装培养基到适量的培养皿或试管中，待凝固后即可使用。
根据实验需求，可以添加抗生素、染色剂等成分，以实现对大肠杆菌的选择性培养。
大肠杆菌培养基的应用。
大肠杆菌培养基在科研和实验室应用中具有广泛的用途，主要包括以下几个方面：1. 细菌学研究，大肠杆菌培养基常用于大肠杆菌的分离、鉴定和培养，用于研究其生长特性、代谢途径、致病机制等。
2. 分子生物学实验，大肠杆菌是常用的重组DNA宿主细胞，大肠杆菌培养基可用于大肠杆菌的转化、表达、筛选等实验。
大肠杆菌的作用
大肠杆菌的作用
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌，它在人和
动物的胃肠道内广泛存在。
尽管大肠杆菌在一些情况下会引起疾病，但它在自然界中也扮演着一些重要的角色。
1.帮助消化：大肠杆菌参与人体对复杂碳水化合物的消化和吸收。
它可以分解蔬菜、纤维素和其他植物成分，产生有益人体的脂肪酸。
2.合成维生素：大肠杆菌合成人体所需的维生素K和维生素
B12。
这些维生素对于血液的凝固和细胞新陈代谢至关重要。
3.竞争性抑制其他病原菌：大肠杆菌在肠道内形成一种竞争优势，通过占据位置和营养资源，抑制其他致病菌的生长和繁殖。
4.促进免疫系统发育：大肠杆菌可以促进免疫系统的成熟和正
常功能。
它产生的抗菌物质可以抵抗其他病原菌的侵袭，并激活机体的免疫反应。
5.参与肠道生态平衡：大肠杆菌与其他肠道细菌共同维持着肠
道的生态平衡。
它们通过相互作用和能量交换，保持肠道健康和稳定。
总的来说，大肠杆菌在人体内发挥着多种重要的作用，包括帮助消化、合成维生素、竞争性抑制其他病原菌、促进免疫系统发育以及参与肠道生态平衡。
大肠杆菌知识点总结
大肠杆菌知识点总结一、基本特征1、形态特征大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌，细胞形态为短杆状，长度约2微米，直径约0.5微米，单株细胞通常呈革兰氏阴性，即没有颜色的结晶紫。
在革兰氏染色中，细胞壁由内向外依次为细胞膜、纤维素层、网状层和唇多糖层。
2、代谢特点大肠杆菌是一种严格厌氧生物，能够在缺氧环境下进行葡萄糖发酵产生能量。
此外，大肠杆菌还具有多种代谢途径，如异源代谢、乳酸发酵、融合发酵等，在不同环境下能够灵活应对。
3、遗传特征大肠杆菌具有较高的遗传变异能力，其遗传物质以DNA分子形式存在，主要位于细胞质内。
大肠杆菌拥有近似5000-6000个基因，其中约一半的基因编码蛋白质。
二、生长特性1、生长条件大肠杆菌是一种嗜温性菌种，适宜生长的温度范围为20-42°C。
除此之外，大肠杆菌还对酸碱度、氧气浓度、营养物质等生长条件有一定的要求。
2、生长曲线大肠杆菌的生长曲线呈现出在适宜环境条件下的指数增长。
在培养基中，大肠杆菌的生长曲线可分为潜伏期、对数期和平稳期三个阶段。
三、代谢特点1、氧气代谢大肠杆菌可以在缺氧环境中进行乳酸发酵或醛酸发酵，产生能量。
在氧气充足的情况下，大肠杆菌则采用氧化磷酸化途径来产生ATP，同时释放二氧化碳和水。
2、营养代谢大肠杆菌具有多种代谢途径，能够利用多种碳源、氮源和能量源进行生长。
此外，大肠杆菌还可以合成营养物质、产生酶类等，以适应不同环境条件。
3、产气代谢大肠杆菌在肠道中的代谢产物主要为氢气、二氧化碳和甲烷等气体，这些气体对人体健康起到一定的作用。
四、致病机制1、肠毒力大肠杆菌具有一定的毒力，其中一些菌株可以产生肠毒素（enterotoxin），引起胃肠道炎症。
这些肠毒素主要通过损伤肠黏膜上皮细胞或刺激免疫系统而导致病理反应，表现为腹泻、呕吐等症状。
2、毒素分泌大肠杆菌还可以分泌多种毒素，如细胞外蛋白毒素、外毒素、细胞内毒素等，这些毒素可以引起细胞毒性、神经毒性、肠毒性等病理反应。
大肠杆菌
检测方法
食品中的大肠杆菌进行快速准确的检测已成为了人们经常**的问题。下面阐述食品中的大肠杆菌检测的方法 及分析 。
这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养24h。然后 对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方 法，还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等 。
目前国际公认的分类，主要有六个种类的大肠杆菌，即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌 （EPEC）、肠道产毒素性的大肠杆菌（ETEC）、肠道侵袭性的大肠杆菌（EIEC）、肠道出血性的大肠杆菌 （EHEC）、肠集聚性的大肠杆菌（EAEC）以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌 （ESIES），另外，还有能够致使尿道感染的尿道致病性的大肠杆菌（UPEC），以及最新命名的肠道集聚性的黏 附大肠杆菌（EAggEC） 。
用无菌吸管吸取稀释度样品1mL，该样品与乳糖胆盐发酵类似，然后将其放入无菌培养皿中，再加入温度于 45℃下的CDLJJD显色培养基中10mL的量，并进行培养皿中溶液均匀混合，可以通过快速转动培养皿的方式，等溶 液凝固以后，加入5mL左右 ，然后快速摇晃培养基，使其可以均匀覆盖平板表面，等其凝固以后，翻转培养基， 在温度37℃中培养24h左右，然后观察其形态，颜色等变化。
大肠杆菌 国家标准
大肠杆菌国家标准
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，属于肠道菌群中
的一种重要成员。
它在人和动物的肠道中普遍存在，是一种常见的肠道微生物。
大肠杆菌在生物学、医学和食品工业中具有重要的意义，因此各国都对大肠杆菌制定了相应的国家标准，以保障公共卫生和食品安全。
国家标准对大肠杆菌的监测和检测进行了详细规定，主要包括采样方法、检测
方法、限量标准等内容。
在食品工业中，大肠杆菌是一种重要的指标菌，其数量的多少直接反映了食品的卫生状况。
因此，国家标准对食品中大肠杆菌的限量标准进行了严格规定，以保障食品的安全卫生。
在医学领域，大肠杆菌也是一种重要的病原菌。
它能够引起多种感染性疾病，
如泌尿系统感染、肠道感染等。
因此，国家标准对医疗机构和实验室中的大肠杆菌的监测和检测也进行了详细规定，以防止病原菌的传播和感染。
除了食品和医学领域，大肠杆菌在生物学研究中也具有重要意义。
它是一种常
用的实验室模式菌种，被广泛应用于分子生物学、遗传学和生物工程等领域。
因此，国家标准对实验室中的大肠杆菌的保存、传递和使用也进行了规范，以保证实验室操作的安全和准确性。
总的来说，大肠杆菌国家标准的制定和执行，对于保障公共卫生和食品安全具
有重要意义。
通过对大肠杆菌的监测和检测，可以及时发现和控制病原菌的传播，保障人民群众的健康。
同时，国家标准的执行也可以规范实验室操作，保证科研工作的准确性和安全性。
因此，各界应严格遵守大肠杆菌国家标准，共同维护公共卫生和食品安全。
大肠杆菌
大肠杆菌（Escherichia coil）是我们了解得最清楚的原核生物，它为分子生物学的发展做出了巨大的贡献。
本文简要介绍大肠杆菌的细胞壁、细胞膜、细胞核、质粒、核糖体、鞭毛等结构与功能以及大肠杆菌的产能方式和生化反应。
大肠杆菌（Escherichia coli）在自然界分布很广，是人和动物肠道中的正常菌群。
正常情况下一般不致病，但它是条件致病菌。
大肠杆菌是单细胞原核生物，具有原核生物的主要特征：细胞核为拟核，无核膜，细胞质中缺乏象高等动植物细胞中的线粒体、叶绿体等具膜结构的细胞器，核糖体为70S，以二分分裂繁殖。
大肠杆菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌。
其大小为：0.5～0.8μm×1.0～3.0μm。
周身鞭毛，能运动，具致育因子的菌株还具性菌毛。
1．形态结构1.1 细胞壁位于大肠杆菌的最外层，厚约11um，分为两层，即外膜和肽聚糖层。
外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分，占细胞壁于重的80％，厚约8nm，位于肽聚糖层的外侧，主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。
脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素，也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有成分，主要和其抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。
肽聚糖层由1～2层网状的肽聚糖组成，占细胞壁干重的10％，厚约2～3nm，是细菌等原核生物所特有的成分。
大肠杆菌的肽聚糖由聚糖链、短肽和肽桥三部分组成。
聚糖链由N-乙酸葡糖胺和N-乙酚胞壁酸分子通过β-1，4糖苷键连接而成，短肽由L-丙氨酸→D-谷氨酸→内消旋二氨基庚二酸→D-丙氨酸组成，并由L-丙氨酸与胞壁酸相连。
一条聚糖链短肽的D-丙氨酸与另一条聚糖链短肽的内消旋二氨基庚二酸直接形成肽键（肽桥），从而使肽聚糖形成网状的整体结构。
由脂蛋白将外膜和肽聚糖层连接起来，从而使大肠杆菌的细胞壁形成一个整体结构。
1.2 细胞膜大肠杆菌细胞膜的结构和其它生物细胞膜的结构相似。
但其细胞膜中蛋白质的含量高且种类多。
其细胞膜具选择透性，从而可控制营养物质进出细胞。
大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点
大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌群中的细菌。
它是一种革兰氏阴性、非芽孢杆菌，可以通过合适的培养基进行鉴别和分离。
本文将介绍大肠杆菌的鉴别培养基及菌落特点，并对其进行详细解释。
一、鉴别培养基1. 麦康凯氏培养基（MacConkey agar）：麦康凯氏培养基是一种选择性和区分性培养基，通常用于分离和鉴别肠道革兰氏阴性菌。
它含有麦康凯氏紫（crystal violet）和牛胆盐（bile salts）等抑制革兰氏阳性菌生长的成分，同时含有乳糖和中性红等成分，能够区分能够利用乳糖的细菌和不能利用乳糖的细菌。
大肠杆菌在麦康凯氏培养基上生长良好，形成红色或粉红色的菌落，说明它可以利用乳糖产生酸性代谢产物。
2. EMB培养基（eosin methylene blue agar）：EMB培养基是一种选择性和区分性培养基，常用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌。
它含有嗜酸染料亚甲蓝（methylene blue）和伊美司粉（eosin Y）等成分，能够抑制革兰氏阳性菌的生长。
大肠杆菌在EMB培养基上形成绿色或金属光泽的菌落，说明它可以产生酸性代谢产物。
3. XLD培养基（xylose lysine deoxycholate agar）：XLD培养基是一种选择性和区分性培养基，主要用于分离和鉴定肠道沙门氏菌属（Salmonella）和伤寒沙门氏菌（Shigella）。
大肠杆菌在XLD培养基上形成黄色的菌落，与其他肠道致病菌如沙门氏菌和伤寒沙门氏菌形成明显的区别。
二、菌落特点大肠杆菌在以上鉴别培养基上的菌落特点如下：1. 麦康凯氏培养基上的大肠杆菌菌落为红色或粉红色，直径约为2-3毫米，呈圆形或不规则形状。
2. EMB培养基上的大肠杆菌菌落为绿色或金属光泽的菌落，直径约为2-3毫米，边缘清晰。
3. XLD培养基上的大肠杆菌菌落为黄色的菌落，直径约为2-3毫米，表面平整。
大肠杆菌
大肠杆菌学名:Escherichiacoli(T.Escherich1885)大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌，是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌，学名称作“大肠埃希菌”，属于肠道杆菌大类中的一种，主要寄生于大肠内，约占肠道菌中的1%，是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。
大肠杆菌结构简单，繁殖迅速，正常栖居条件下大多数大肠杆菌不致病，还能竞争性抵御致病菌的进攻，还能合成维生素B和K2，与人体是互利共生的关系；但在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下，进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。
因此，大部分大肠杆菌通常被看作机会致病菌。
在水和食品中检出，可认大肠菌群数常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。
特点大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。
主要生活在大肠内。
1、大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
2、大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。
3、人体与大肠杆菌的关系：在不致病的情况下（正常状况下），可认为是互利共生（一般高中阶段认为是这种关系）；在致病的情况下，可认为是寄生。
4、培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
5、大肠杆菌在生物技术中的应用：大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。
目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。
6、大肠杆菌在生态系统中的地位，假如它生活在大肠内，属于消费者，假如生活在体外则属于分解者。
7、它的基因组DNA为拟核中的一个环状分子。
同时可以有多个环状质粒DNA。
8、大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子，长度约为4 700 000个碱基对，在DNA分子上分布着大约4 400个基因，每个基因的平均长度约为1 000个碱基对。
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八、非致病性大肠杆菌的作用 保护肠道的微生态平衡。消耗肠道内的氧 气，创造厌氧环境，利于厌氧菌的生长； 分解代谢产物供厌氧菌生长。 能合成维生素K和B。 对外袭菌有拮抗作用。某些大肠杆菌能产 生大肠菌素，对一些病原微生物具有拮抗 作用。
九、微生物学的诊断
1、病料的采集：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、 、病料的采集 脑脊液等，腹泻者取粪便。 2、分离培养 、分离培养：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培 养基。其他病料可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌 选择性培养基。37℃培养18～24h后，观察菌落并涂 片染色镜检。 3、生化鉴定：大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发 、生化鉴定： 酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和木胶糖等产酸 产气。 IMViC试验为“+ + - -”。即为典型大肠杆菌。
四、大肠杆菌的特殊结构
1、荚膜 荚膜具有抗原性，构成了大肠杆菌的表面抗原，即 K抗原 。 2、鞭毛 由鞭毛蛋白组成，构成了细菌的鞭毛抗原，与运动 有关。 3、菌毛 在细胞表面还含有一种比鞭毛更细更短更硬的丝状 体叫菌毛，可分为普通菌毛和性菌毛。
大肠杆菌可以透过 接合作用传递遗传 物质。
五、抗原及血清型
生化试验
血清学鉴定 临床上只检测O抗原
猪水肿病菌株
Stx2e检测 检测
猪腹泻菌株
肠毒素检测
4、血清型鉴定 、 假定试验：取经生化试验证实的大肠杆菌培养物， 用致病性大肠杆菌，侵袭性大肠杆菌和产毒素大肠 杆菌多价O血清和出血性大肠杆菌的O157血清做玻 片凝集试验。 当与某一种多价O血清凝集时，在与该多价O血清 的单价O血清做实验。如与某一单价O血清发生强 凝集反应，则为假定试验阳性。 证实试验：制备O抗原悬液。原效价为1：160～1： 320的O血清，用0.5%盐水稀释至1：40。稀释血清 与抗原悬液在10mm×75mm试管内等量混合，做 试管凝集试验。混匀后放于50℃水浴箱内，经16h 后观察结果。如出现凝集，可证实为该O抗原。
（1）三糖铁培养基 ） ①配方 牛肉膏 5g 氯化钠 5g 蛋白胨 20g 蛋白胨 5g 10g 乳糖 蔗糖 10g 1g 葡萄糖
0.2g 硫酸亚铁 蒸馏水 1000mL 硫代硫酸钠 0.2g 琼脂 1 2g 2%酚红溶液 12.5ml
②原理
测定细菌对葡萄糖、乳糖及蔗糖的发酵反应，以及 能否产生硫化氢。可鉴别肠道菌。
病料
腹泻或水肿病例 败血症病例
常采集粪便或肠粘膜刮取物 麦康凯或伊红美兰琼脂平板划线
常采集血液及其病变组织 血琼脂或麦康凯琼脂平板划线
挑取疑似大肠杆菌菌落5～10个分别在琼脂平板进行纯培养 挑取疑似大肠杆菌菌落 ～ 个分别在琼脂平板进行纯培养 革兰染色镜检 革兰氏染色阴性 接种TSI琼脂培养基 琼脂培养基 接种
（一）抗原 O抗原，即菌体抗原，为细胞壁脂多糖。该抗原刺激 机体主要产生IgM类抗体。 H抗原， 即鞭毛抗原 ，H抗原主要刺激机体产生IgG 类抗体，与其他肠道菌基本无交叉反应。 K抗原，即荚膜抗原，位于O抗原外层，为多糖。具 有K抗原的菌株不能被其相应的抗O血清所凝集叫 “O不凝集性”。 据耐热性不同，K抗原又分为：L、A和B 三型。
⑤ 肠道菌鉴别培养基 麦康凯琼脂培养基：红色菌落。 伊红美兰琼脂培养基：黑色带金属闪光的菌落。 SS琼脂培养基：一般不生长或生长较差，生长者呈红色。 ⑥血平板：一些致病性菌株常β溶血。
琼脂培养基 麦康凯琼脂培养基 伊红美兰琼脂培养基 SS琼脂培养基
血平板
2、 生化特性
I：吲哚试验 M：甲基红试验 V：V-P试验 C：枸橼酸盐利用实验
细胞质膜 周质
外膜
（二）质粒 F因子：又称致育因子，插入、复制和转移的功能。 有F因子的大肠杆菌为雄性，用F+表示，不含F因子 的大肠杆菌称为雌性，用F-表示。通过F+和F-细菌 的接合，F因子可经性菌毛传递给F-菌株，使F-菌株 转变为F+菌株。 F R因子 ：抗性转移因子和抗性决定因子 。 Col因子：产大肠杆菌素因子，编码合成大肠杆菌 素。
十、防治
母源抗体能保护幼畜抵抗致病性大肠杆菌。 相应血清型的灭活苗，亚单位苗具有免疫预防作用。 治疗可选用庆大霉素、丁胺卡那霉素等。 使用微生态制剂：治疗出生幼畜下痢。
假定试验
大肠杆菌培养物 致病性大肠杆菌 侵袭性大肠杆菌 产毒素大肠杆菌 出血性大肠杆菌 多价O血清 多价O血清 多价O血清 O157血清 玻片凝集试验
证实试验
O抗原悬液 试管内等量混匀 O血清 试管凝集试验 50℃水浴箱，16h 结果判定
5、Stx2e的检测 、 的检测 （1）Vero细胞毒性试验； （2）小鼠神经毒性试验； （3）抗Stx2e抗体中和试验； （4）PCR方法对Stx2e基因特异序列的扩增。 6、ETEC肠毒素检测 、 肠毒素检测 （1）检测LT的常用方法:兔回肠结扎肠试验；ELISA；中国地鼠 卵巢细胞培养法；平板免疫溶血试验； （2）检测ST常用方法有：乳鼠胃内投服试验；GM1-ELISA等。
（二）血清型 可用O:K:H排列表示其血清型。如：O8:K23:H19， 表示该菌具有O抗原8，K抗原23，H抗原为19。 致人畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌，除含K抗原外， 还可含有蛋白质性粘附素抗原。对粘附素抗原应并 列写于多糖K抗原之后。如：O8:K87，K88:H19 中 K88即为粘附素抗原。
六、致病性
（一）致病物质 1、定居因子（Colonization factor ，CF）；也称粘附素， 即大肠杆菌的菌毛。 2、肠毒素是肠产毒性大肠杆菌在生长繁殖过程中释放的外 毒素，分为耐热和不耐热两种。 ①耐热（ST）：100℃20min不破坏，免疫原性弱。 ②不耐热（LT）：65 ℃30min破坏，免疫原性强。 3．其他：细胞壁脂多糖的类脂A具有毒性；K抗原有抗吞噬 作用，有抵抗抗体和补体的作用 。
V-P试验 试验
枸橼酸盐试验
IMViC试验 试验
三、大肠杆菌的基本结构
(一)细胞壁 大肠杆菌的细胞壁分外膜和肽聚糖层。 外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分，主要由磷脂、 蛋白质和脂多糖组成。 脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素，也是革兰氏阴 性细菌细胞壁的特有成分，主要与抗原性、致病性 及对噬菌体的敏感性有关。
底层和斜面均呈 发酵葡萄糖和乳糖； 大肠杆菌 黄色，底层有气 大量产酸产气 葡萄糖 泡 乳糖 沙门菌 只发酵葡萄糖 底层黄色，斜 蔗糖 产酸产气 面保持红色 硫酸亚铁 能产硫化氢菌株 因形成硫化亚铁而使培养基呈黑色
对照 假单胞菌 志贺氏菌 沙门氏菌 大肠杆菌 变形杆菌 三糖铁培养基
吲哚试验
甲基红试验
大肠杆菌
大肠杆菌的历史
肠杆菌科,为革兰氏阴性杆菌。根据生化反应、血清 学试验、DNA同源性研究，肠杆菌科至少包括28个 菌属，110个以上的菌种。 埃希菌属（Escherichia）中最重要的是大肠埃希菌 (E. coli) ，常称为大肠杆菌。 大肠杆菌广泛分布于自然界，包括腐生菌、寄生菌 和人及动物的病原菌。多数是人和动物肠道正常菌 群的重要成员。 20世纪中叶，认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对 人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常 引起严重腹泻和败血症。
（二）所致疾病 1．肠道外感染 肠道外感染：多为内源性感染，以泌尿系感染为 肠道外感染 主；大肠杆菌可侵入血液，引起败血症；大肠杆菌 性脑膜炎 。 2．急性腹泻 急性腹泻 （1）肠产毒性大肠杆菌（ETEC） （2）产志贺毒素大肠杆菌(STEC） （3）肠致病性大肠杆菌（EPEC） （4）肠出血性大肠杆菌（EHEC） （5）肠侵袭性大肠杆菌（EIEC ） （6）肠粘附性大肠杆菌（EAEC）
L型K抗原：对热敏感，100℃ 1h破坏其抗原性，并 失去与相应抗体的结合力和凝集性，位于被膜中， 偶见于荚膜中。 A型K抗原：耐100℃ 1h ，但121℃ 2.5h破坏其抗 原性和O不凝集性，但保留与相应抗体结合能力。 位于荚膜中，抗A血清可使具有相应A抗原的菌体出 现荚膜肿胀现象。 B型K抗原：100℃ 1h 破坏其抗原性与相应抗体的 凝集性，但保留其与相应抗体结合力。
一 、大肠杆菌的一般特性
1、G－直短杆菌，两端钝圆，散在有的有荚膜。 3、代谢能力强，代谢类型是异养兼性厌氧型 。
二 、培养及生化特性
1、培养特性 、
① 兼性厌氧； ② 最适生长温度37℃，最适生长pH7.2～7.6； ③ 普通琼脂培养基：生长良好，圆形凸起、光滑、湿润、半 透明、灰白色菌落，直径约2~3mm； ④ 普通肉汤培养基：均匀浑浊，管底有粘性沉淀，液面管壁 有菌环。
肠产毒性大肠杆菌（ETEC）
ETEC是致人和幼畜腹 泻最常见的病原菌； 毒力因子有粘附素性 菌毛和肠毒素。
致病过程
七、抵抗力
大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强。 55℃加热60min或60℃加热15min仍有部分细菌存 活。 胆盐、煌绿等对非致病性大肠杆菌有选择性抑制作 用，而对致病性大肠杆菌无抑制作用，所以用肠道 选择鉴别培养基来分离致病性大肠杆菌。 对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感。
十、卫生细菌学检查
1、细菌总数：检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用 倾注培养计算。 2、大肠菌数检验：指100g1000mL水中所含大肠菌群的最 近似数（MPN），采用乳糖胆盐发酵试验检测。 乳糖胆盐发酵试验
发酵试验
分离培养
复发酵试验
食品执行标准：含乳蛋白冷冻饮品菌落总数应小于25000cfu/ml，大肠菌群小于 450MPN/100ml； 含豆类冷冻饮品菌落总数应小于20000cfu/ml，大肠菌群小于 450MPN/100ml；含淀粉或果类冷冻饮品菌落总数应小于3000cfu/ml，大肠菌群 小于100MPN/100ml；食用冰块菌落总数应小于100cfu/ml，大肠菌群小于 6MPN/100ml。