大肠杆菌
大肠杆菌的功能和应用
大肠杆菌的功能和应用大肠杆菌(Escherichia coli)，简称为E.coli，是一种常见的肠道菌，大多数情况下无害于人体。
但也有些特殊的E.coli菌株会引起人体疾病。
除此之外，E.coli还有许多重要的功能和应用，本文将对其进行探讨。
一、E.coli在人体中的作用1.帮助消化E.coli是人体肠道中一种重要的有益菌，它可以分解食物中特定的成分，在体内帮助人体消化吸收。
它在肠道中产生酶类，有助于分解糖类和蛋白质等营养物质，促进废物排出。
2.维持肠道平衡肠道菌群是人体内一个重要的环节，它对于人体健康有着极其重要的作用。
E.coli是肠道菌群中的一员，能够抗菌和调节免疫系统的作用，维持肠道菌群的平衡。
3.防止病原菌的感染E.coli在肠道中能够占领细胞表面上的位置，使病原菌难以侵入以减少感染机会。
4.合成维生素KE.coli可以帮助人体肠道中合成必需的维生素K，它的重要性不可忽视，因为缺乏维生素K会导致出血、伤口不能愈合和轻度贫血等。
二、E.coli在医学上的应用1.药物基因工程E.coli是一种广泛应用于药物基因工程领域的微生物。
它是蛋白质表达和研究的重要载体，能够表达和生产大量药物。
例如，人胰岛素就是通过E.coli在大规模生产的。
2.生产生物燃料E.coli被广泛用于燃料生产，如生物柴油、生物乙醇等。
因为它的生长速度和代谢率很高，生产效率高。
3.制备微生物纤维素微生物纤维素被广泛应用于制造生物材料、纸张、生物啤酒等领域。
现在科学家已经通过转基因技术，使得E.coli能够大量生产微生物纤维素。
三、E.coli在环境领域的应用1.环境受污染检测E.coli可以被用作环境受污染检测的指示生物，因为其可以在肠道中存活和繁殖。
例如，水源污染常会对水中生物带来持续性的伤害，而E.coli的存在能够显示水质是否受到污染。
2.改良土壤质量E.coli能够利用土壤中的农业废弃物和其他类似物质，转化为可吸收的氮、磷等营养物质，有助于改善土壤质量以提高耕地质量。
大肠杆菌
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• 培养特性 • 由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、 葡萄糖的普通培养基上生长良好。 • 最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能 生长，生长温度范围为15-46℃。 • 在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态： • （1）光滑型： 菌落边缘整齐，表面有光泽、 湿润、光滑、呈灰色，在生理盐水中容易分散。 • （2）粗糙型：菌落扁平、干涩、边缘不整齐， 易在生理盐水中自凝。 • （3）粘液型：常为含有荚膜的菌株 • 此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生 长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低 于6.0或高于8.0则生长缓慢
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• 生化试验： 将斜面培养物移种到下列培养基中进行 生化试验。 1 色氨酸肉汤：在36±1℃培养24±2h 后,加Kovacs氏试剂0.2～0.3mL,上层出现红色 为靛基质阳性反应
靛基质试验（Indole）原理及照片
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2 MR-VP培养基：在36±1℃培养 48±2h。以无菌操作移取培养物1 mL至 13mm×100mm试管中,加5％α-萘酚乙醇 溶液0.6mL,40％氢氧化钾溶液0.2mL和少 许肌酸结晶,振摇试管后静置2h,如出现伊 红色,为VP试验阳性。 将MR-VP培养物的剩余部分再培养 48h滴加5 滴甲基红溶液。如培养物变红 色,为甲基红试验阳性,若变黄色则为阴性 反应
• 肠杆菌科有一些共同特性，比如都是革兰氏 阴性小杆菌，好氧或兼性厌氧，没有芽孢 • 大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有 动力。 • 有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖 类包膜，革兰氏阴性杆菌。
• MOTILITY TEST • 1. Pseudomonas aeruginosa（铜绿假单胞菌）： Motile 2. Staphylococcus aureus：Non-motile 3. Bacillus subtilis：Motile
大肠杆菌
检测方法
食品中的大肠杆菌进行快速准确的检测已成为了人们经常**的问题。下面阐述食品中的大肠杆菌检测的方法 及分析 。
这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养24h。然后 对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方 法，还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等 。
目前国际公认的分类，主要有六个种类的大肠杆菌，即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌 （EPEC）、肠道产毒素性的大肠杆菌（ETEC）、肠道侵袭性的大肠杆菌（EIEC）、肠道出血性的大肠杆菌 （EHEC）、肠集聚性的大肠杆菌（EAEC）以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌 （ESIES），另外，还有能够致使尿道感染的尿道致病性的大肠杆菌（UPEC），以及最新命名的肠道集聚性的黏 附大肠杆菌（EAggEC） 。
用无菌吸管吸取稀释度样品1mL，该样品与乳糖胆盐发酵类似，然后将其放入无菌培养皿中，再加入温度于 45℃下的CDLJJD显色培养基中10mL的量，并进行培养皿中溶液均匀混合，可以通过快速转动培养皿的方式，等溶 液凝固以后，加入5mL左右 ，然后快速摇晃培养基，使其可以均匀覆盖平板表面，等其凝固以后，翻转培养基， 在温度37℃中培养24h左右，然后观察其形态，颜色等变化。
鉴别大肠杆菌的方法
鉴别大肠杆菌的方法大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌是正常肠道菌群的一部分，但有些菌株可以引起食物中毒和感染。
因此，准确鉴别大肠杆菌的方法对食品安全和公共卫生至关重要。
在鉴别大肠杆菌时，通常需要从样品中分离出细菌，并进行初步的鉴定。
下面是一些常用的鉴别大肠杆菌的方法：1. 培养基选择：大肠杆菌可以在普通富营养的培养基上生长，如营养琼脂和TSA 寒天琼脂。
与其他致病菌不同的是，大肠杆菌具有乳糖发酵能力，因此可以使用含有乳糖的培养基如EOH（大肠杆菌溶血素乳糖琼脂）、MacConkey琼脂和XLD （硫代硫酸亚铁氧化琼脂）来选择性培养大肠杆菌。
2. 形态学特征：在琼脂平板上培养后，大肠杆菌形成小型、粉红色的圆形菌落。
在显微镜下观察，大肠杆菌呈革兰阴性，为杆状细菌，长度约为2微米，直径约为1微米。
此外，大肠杆菌具有移动性，在液体培养基中呈现出活跃的运动。
3. 生化特性：通过测试大肠杆菌的生化特性，可以进一步鉴别该菌株。
常见的生化试验包括蔗糖发酵试验、气体发酵试验、硫化试验和尿素酶试验等。
大肠杆菌通常可以产生气体和酸，而不产生硫化物，同时具有尿素酶活性。
4. 分子生物学方法：PCR（聚合酶链式反应）和基因测序技术能够快速、准确地鉴定大肠杆菌。
通过特定引物放大大肠杆菌特有的基因片段，再进行测序比对，可以确定分离菌株是否为大肠杆菌。
5. 抗生素敏感性测试：鉴别大肠杆菌的方法还可以包括抗生素敏感性测试。
通过对细菌进行抗生素敏感性的测试，可以确定菌株对不同抗生素的敏感程度。
大肠杆菌通常对多种抗生素敏感，但也能产生耐药株。
通过该方法，可以观察和评估细菌感染的治疗方法。
综上所述，鉴别大肠杆菌的方法包括培养基选择、形态学特征观察、生化特性测试、分子生物学方法以及抗生素敏感性测试。
这些方法可以相互配合，提供准确和可靠的鉴别结果，对于食品安全和公共卫生具有重要意义。
大肠杆菌检测原理
大肠杆菌检测原理
大肠杆菌检测是一种用于确定食品、水源或环境中是否存在大肠杆菌的常用方法。
大肠杆菌是一种肠道菌群常见的细菌，其存在通常表明可能存在粪便污染或其他健康危害的风险。
大肠杆菌检测主要基于以下原理：
1. 培养方法：采集样品后，将其接种到含有适宜营养物质的培养基上，利用大肠杆菌特有的形态、生理生化特性以及产生的气体等特点进行初步鉴定。
2. 确认方法：通过进一步的生化试验，如颜色反应、形状、气体产生情况等，进一步确认被培养出的菌落是否为大肠杆菌。
3. 分子生物学方法：利用PCR技术或核酸杂交等方法，针对大肠杆菌特异的基因序列进行扩增或检测。
4. 免疫学方法：利用特异性抗原或抗体与大肠杆菌产生的免疫反应，进行检测和确认。
这些方法都可以用于大肠杆菌的初步筛查和确认，根据不同的检测需求和样品特性选择合适的方法进行检测。
大肠杆菌检测的结果可以用于评估食品、水源、环境等是否存在粪便污染，从而采取相应的控制和预防措施。
大肠杆菌
大肠杆菌（Escherichia coil）是我们了解得最清楚的原核生物，它为分子生物学的发展做出了巨大的贡献。
本文简要介绍大肠杆菌的细胞壁、细胞膜、细胞核、质粒、核糖体、鞭毛等结构与功能以及大肠杆菌的产能方式和生化反应。
大肠杆菌（Escherichia coli）在自然界分布很广，是人和动物肠道中的正常菌群。
正常情况下一般不致病，但它是条件致病菌。
大肠杆菌是单细胞原核生物，具有原核生物的主要特征：细胞核为拟核，无核膜，细胞质中缺乏象高等动植物细胞中的线粒体、叶绿体等具膜结构的细胞器，核糖体为70S，以二分分裂繁殖。
大肠杆菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌。
其大小为：0.5～0.8μm×1.0～3.0μm。
周身鞭毛，能运动，具致育因子的菌株还具性菌毛。
1．形态结构1.1 细胞壁位于大肠杆菌的最外层，厚约11um，分为两层，即外膜和肽聚糖层。
外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分，占细胞壁于重的80％，厚约8nm，位于肽聚糖层的外侧，主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。
脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素，也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有成分，主要和其抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。
肽聚糖层由1～2层网状的肽聚糖组成，占细胞壁干重的10％，厚约2～3nm，是细菌等原核生物所特有的成分。
大肠杆菌的肽聚糖由聚糖链、短肽和肽桥三部分组成。
聚糖链由N-乙酸葡糖胺和N-乙酚胞壁酸分子通过β-1，4糖苷键连接而成，短肽由L-丙氨酸→D-谷氨酸→内消旋二氨基庚二酸→D-丙氨酸组成，并由L-丙氨酸与胞壁酸相连。
一条聚糖链短肽的D-丙氨酸与另一条聚糖链短肽的内消旋二氨基庚二酸直接形成肽键（肽桥），从而使肽聚糖形成网状的整体结构。
由脂蛋白将外膜和肽聚糖层连接起来，从而使大肠杆菌的细胞壁形成一个整体结构。
1.2 细胞膜大肠杆菌细胞膜的结构和其它生物细胞膜的结构相似。
但其细胞膜中蛋白质的含量高且种类多。
其细胞膜具选择透性，从而可控制营养物质进出细胞。
大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点
大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌群中的细菌。
它是一种革兰氏阴性、非芽孢杆菌，可以通过合适的培养基进行鉴别和分离。
本文将介绍大肠杆菌的鉴别培养基及菌落特点，并对其进行详细解释。
一、鉴别培养基1. 麦康凯氏培养基（MacConkey agar）：麦康凯氏培养基是一种选择性和区分性培养基，通常用于分离和鉴别肠道革兰氏阴性菌。
它含有麦康凯氏紫（crystal violet）和牛胆盐（bile salts）等抑制革兰氏阳性菌生长的成分，同时含有乳糖和中性红等成分，能够区分能够利用乳糖的细菌和不能利用乳糖的细菌。
大肠杆菌在麦康凯氏培养基上生长良好，形成红色或粉红色的菌落，说明它可以利用乳糖产生酸性代谢产物。
2. EMB培养基（eosin methylene blue agar）：EMB培养基是一种选择性和区分性培养基，常用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌。
它含有嗜酸染料亚甲蓝（methylene blue）和伊美司粉（eosin Y）等成分，能够抑制革兰氏阳性菌的生长。
大肠杆菌在EMB培养基上形成绿色或金属光泽的菌落，说明它可以产生酸性代谢产物。
3. XLD培养基（xylose lysine deoxycholate agar）：XLD培养基是一种选择性和区分性培养基，主要用于分离和鉴定肠道沙门氏菌属（Salmonella）和伤寒沙门氏菌（Shigella）。
大肠杆菌在XLD培养基上形成黄色的菌落，与其他肠道致病菌如沙门氏菌和伤寒沙门氏菌形成明显的区别。
二、菌落特点大肠杆菌在以上鉴别培养基上的菌落特点如下：1. 麦康凯氏培养基上的大肠杆菌菌落为红色或粉红色，直径约为2-3毫米，呈圆形或不规则形状。
2. EMB培养基上的大肠杆菌菌落为绿色或金属光泽的菌落，直径约为2-3毫米，边缘清晰。
3. XLD培养基上的大肠杆菌菌落为黄色的菌落，直径约为2-3毫米，表面平整。
大肠杆菌
大肠杆菌学名:Escherichiacoli(T.Escherich1885)大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌，是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌，学名称作“大肠埃希菌”，属于肠道杆菌大类中的一种，主要寄生于大肠内，约占肠道菌中的1%，是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。
大肠杆菌结构简单，繁殖迅速，正常栖居条件下大多数大肠杆菌不致病，还能竞争性抵御致病菌的进攻，还能合成维生素B和K2，与人体是互利共生的关系；但在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下，进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。
因此，大部分大肠杆菌通常被看作机会致病菌。
在水和食品中检出，可认大肠菌群数常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。
特点大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。
主要生活在大肠内。
1、大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
2、大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。
3、人体与大肠杆菌的关系：在不致病的情况下（正常状况下），可认为是互利共生（一般高中阶段认为是这种关系）；在致病的情况下，可认为是寄生。
4、培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
5、大肠杆菌在生物技术中的应用：大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。
目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。
6、大肠杆菌在生态系统中的地位，假如它生活在大肠内，属于消费者，假如生活在体外则属于分解者。
7、它的基因组DNA为拟核中的一个环状分子。
同时可以有多个环状质粒DNA。
8、大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子，长度约为4 700 000个碱基对，在DNA分子上分布着大约4 400个基因，每个基因的平均长度约为1 000个碱基对。
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目录∙ 1 概述∙ 2 分类∙ 3 性状及特点(1) 原核生物(2) 形态与染色(3) 培养特性(4) 生化反应(5) 抗原构造(6) 抵抗力(7) 异养厌氧型(8) 人体与大肠杆菌的关系(9) 鉴别(10) 生态系统中的地位∙ 4 致病性(1) 致病物质(2) 病原体(3) 潜伏期(4) 所致疾病∙ 5 检查法(1) 细菌的分离鉴定(2)卫生细菌学检查∙ 6 治疗方法∙7传播途径∙8 预防方法大肠杆菌简介大肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌，1885年由Escherich发现，分布在自然界，大多数是不致病的。
主要附生在人或动物的肠道里，为正常菌群，少数的大肠杆菌具有毒性，可引起疾病。
婴儿出生后即随哺乳进入肠道，其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长，减少蛋白质分解产物对人体的危害，还能合成维生素B和K，以及有杀菌作用的大肠杆菌素。
正常栖居条件下不致病。
但若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。
在肠道中大量繁殖，几占粪便干重的1/3。
在环境卫生不良的情况下，常随粪便散布在周围环境中。
若在水和食品中检出此菌，可认为是被粪便污染的指标，从而可能有肠道病原菌的存在。
因此，大肠菌群数（或大肠菌值）常作为饮水和食物（或药物）的卫生学标准。
技术上，大肠菌群被定义为所有好氧或兼性好氧。
常引起流行性婴儿腹泄和成人肋膜炎。
侵入人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。
人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。
感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人。
1. 大肠杆菌性状及特点（1）原核生物大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
（2）单个菌体的形态与染色大小0.4～0.7×1～3um，无芽胞，大多数菌株有动力。
有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖类包膜，革兰氏阴性杆菌。
（3）代谢类型大肠杆菌的代谢类型是异养厌氧型。
（4）菌落特性在血琼脂平板上，有些菌株产生β型溶血。
在鉴别性或选择性培养基上形成有颜色、直径2～3mm的光滑型菌落。
大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。
IMViC试验为“+、+、-、-”。
即为典型大肠杆菌。
培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
（5）抗性较复杂，有O、K、H、F四种抗原。
O抗原为脂多糖，已有171种，其中162种与腹泻有关，是分群的基础。
K抗原有103种，为荚脂多糖抗原。
从病人新分离的大肠杆菌多有K抗原，有抗吞噬和补体杀菌作用。
根据耐热性等不同，K抗原分为L、A、B三种，其中L、B不耐热，有60种。
F抗原至少有5种，与大肠杆菌的粘附作用有关、表明大肠杆菌血清型的方式是按O：K：H排列，例如O111：K58（B4）：H2。
2.大肠杆菌分类根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：（1）致病性大肠杆菌(EPEC)婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死；成人少见。
（2）肠产毒性大肠杆菌(ETEC)引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。
腹泻常为自限性，一般2～3天即愈。
营养不良者可达数周，也可反复发作。
（3）肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)特点是能侵入大、小肠粘膜，穿入上皮细胞内，使细胞蛋白溶解并在其中生长繁殖，使粘膜刷状缘受损，局部发生溃疡甚至出血，所以临床大便表现似痢疾。
（4）肠出血性大肠杆菌(E．IIEC)患者可能出现各种症状，包括严重的水泻、带血腹泻、发烧、腹绞痛及呕吐。
情况严重时，更可能并发急性肾病。
5岁以下的儿童出现该等并发症的风险较高。
若治疗不当，可能会致命。
（5）肠粘附性大肠杆菌(EAEC)可以引起腹泻，但对其发病机理与血清型尚不了解。
EAEC不侵入肠上皮细胞，不产生LT或ST，也无VT毒素。
唯一特征是具有与Hep-2细胞（人喉上皮细胞癌细胞系）粘附的能力，故也称Hep-2细胞粘附性大肠杆菌。
3.大肠杆菌的致病性3.1致病物质（1）定居因子（Colonizationfactor,CF）也称粘附素(Adhesin)，即大肠杆菌的菌毛。
致病大肠杆菌须先粘附于宿主肠壁，以免被肠蠕动和肠分泌液清除。
使人类致泻的定居因子为CFAⅠ、CTAⅡ(ColonizationfactorantigenⅠ、Ⅱ)，定居因子具有较强的免疫原性，能刺激机体产生特异性抗体。
（2）肠毒素是肠产毒性大肠杆菌在生长繁殖过程中释放的外毒素，分为耐热和不耐热两种。
（3）不耐热肠毒素（Heatlabileenterotoxin,LT）对热不稳定，65℃经30分钟即失活。
为蛋白质，分子量大，有免疫原性。
由A、B两个亚单位组成，A又分成A1和A2，其中A1是毒素的活性部分。
B亚单位与小肠粘膜上皮细胞膜表面的GM1神经节苷脂受体结合后，A亚单位穿过细胞膜与腺苷酸环化酶作用，使胞内ATP转化cAMP。
当cAMP增加后，导致小肠液体过度分泌，超过肠道的吸收能力而出现腹泻。
LT的免疫原性与霍乱弧菌肠毒素相似，两者的抗血清交叉中和作用。
（4）耐热肠毒素（Heatstableenterotoxin,ST）对热稳定，100℃经20分钟仍不被破坏，分子量小，免疫原性弱。
ST可激活小肠上皮细胞的鸟苷酸环化酶，使胞内cGMP增加，在空肠部分改变液体的运转，使肠腔积液而引起腹泻。
ST与霍乱毒素无共同的抗原关系。
肠产毒性大肠杆菌的有些菌株只产生一种肠毒素，即LT或ST；有些则两种均可可产生。
有些致病大肠杆菌还可产生vero毒素。
（5）其他胞壁脂多糖的类脂A具有毒性，O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。
大肠杆菌的K抗原有吞噬作用。
3.2病原体大肠杆菌O157:H7是大肠杆菌的其中一个类型，该种病菌常见于牛只等温血动物的肠内。
这一型的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，如带血腹泻。
3.3潜伏期通常为3至4日，但亦会长达9日。
3.4所致疾病（1）肠道外感染多为内源性感染，以泌尿系感染为主，如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎、上行性尿道感染多见于已婚妇女。
也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。
婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。
早产儿，尤其是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎。
（2）急性腹泻某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。
4.大肠杆菌的检测4.1 细菌的分离鉴定（1）标本的获取肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。
（2）分离培养与鉴定粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。
血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。
其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。
37℃孵育18～24小时后，观察菌落并涂片染色镜检。
采用一系列生化反应进行鉴定。
肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。
必要时检定肠霉毒素。
泌尿系统除确定大肠杆菌外，还应计数，每毫升尿含菌量≥100，000时，才有诊断价值。
4.2 卫生细菌学检查大肠杆菌不断随粪便排出体外，污染周围环境和水源、食品等。
取样检查时，样品中大肠杆菌越多，表示样品被粪便污染越严重，也表明样品中存在肠道致病菌的可能性越大。
故应对饮水、食品、饮料进行卫生细菌学检查。
（1）细菌总数检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用倾注培养计算。
我国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。
（2）大肠菌群数指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。
我国的卫生标准是每1000ml 饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。
5大肠杆菌的治疗和预防5.1治疗方法普通大肠杆菌的化脓性炎症尤其是医院内病人发生的严重感染，可用抗生素治疗，如用氨苄青霉素、庆大霉素、头孢菌素等；产肠毒素性大肠杆菌引起的腹泻，一般不需用抗生素，主要采取支持疗法，纠正水和电解质的丢失，并根据病人的情况作对症处理。
5.2预防方法（1）保持地方及厨房器皿清洁，并把垃圾妥为弃置。
（2）保持双手清洁，经常修剪指甲。
（3）进食或处理食物前应用肥皂及清水洗净双手，如厕或更换尿片后亦应洗手。
（4）食水应采用自来水，并最好煮沸后才饮用。
（5）应从可靠的地方购买新鲜食物，不要光顾无牌小贩。
（6）避免进食高危食物，例如未经低温消毒法处理的牛奶，以及未熟透的汉堡扒、碎牛肉和其它肉类食品。
（7）烹调食物时，应穿清洁、可洗涤的围裙，并戴上帽子。
（8）食物应彻底清洗。
（9）易腐坏食物应用盖盖好，存放于雪柜中。
（10）生的食物及熟食，尤其是牛肉及牛的内脏，应分开处理和存放(雪柜上层存放熟食，下层存放生的食物)，避免交叉污染。
（11）雪柜应定期清洁和融雪，温度应保持于摄氏4度或以下。
（12）若食物的所有部分均加热至摄氏75度，便可消灭大肠杆菌0157：H7；因此，碎牛肉及汉堡扒应彻底煮至摄氏75度达2至3分钟，直至煮熟的肉完全转为褐色，而肉汁亦变得清澈。
（13）不要徒手处理熟食；如有需要，应戴上手套。
（14）食物煮熟后应尽快食用。
（15）如有需要保留吃剩的熟食，应该加以冷藏，并尽快食用。
食用前应彻底翻热。
变质的食物应该弃掉。
（16）使用电子产品前勤洗手。