分子生物学实验室实验器材清单修订稿
分子生物学实验室实验
器材清单
集团文件发布号：（9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-
分子生物学实验室所需试剂、耗材清单1、普通化学试剂，共计约2.89万。
名称单位
单价
(元）
购置数
量
金额
（元）
95%乙醇AR瓶720140无水乙醇AR瓶1020200 DEPC瓶150101500 EDTA二钠AR瓶509450柠檬酸钠AR瓶279243柠檬酸三钠AR瓶159135 L-精氨酸BR瓶1265630 Tris瓶220102200苯酚AR瓶369324变色硅胶瓶1918342冰乙酸AR瓶10990丙酮AR瓶18590二甲苯AR瓶20120二乙醇胺cp瓶38138甘露醇AR瓶15115甘油AR瓶28256高碘酸AR瓶2402480甲醇AR瓶8.4542磷酸氢二钠AR瓶11111硫酸AR瓶14342硫酸铵AR瓶1017170硫酸镍AR瓶1021102氯仿AR瓶2810280氯化钾AR瓶20240氯化镁瓶18118氯化钠AR瓶1010100氯金酸AR瓶1961196莽草酸瓶39031170明胶CP瓶35135钼酸瓶2901290钼酸铵AR瓶3801380尿素AR瓶18590牛肉浸膏BR瓶90190硼酸AR瓶1810180氢氧化钠AR瓶1010100
去离子甲酰胺瓶78043120三乙醇胺瓶25125碳酸钙AR瓶23123碳酸钠AR瓶12112碳酸氢钠AR瓶16116无水碳酸钾AR瓶22122硝酸瓶10110硝酸银瓶35051750销酸钴瓶48148盐酸AR瓶14228乙酸钾AR瓶45145乙酸锌AR瓶36136葱酮AR瓶68168消毒/双氧水30%AR瓶11444 TrypanBlue瓶32132 Tween-20瓶20120硝酸钾瓶15115硫酸铁瓶15115氢氧化钾瓶15115甲醛500ml瓶815120硼砂瓶12560乳酸500ml瓶27127硝酸钙瓶12112乙酸钠瓶464184异丙醇AR瓶10.45883.6异戊醇AR瓶408320 SDS瓶38401520
合计28890. 6
2、分子生物学试剂,共计约4.5万元。
名称单位单价
(元）
购置数
量
金额
（元）
La高保真酶支25051250高保真TaqHS支70021400高保真TaqHSGCBuffer支70021400 DnaseI支43193879
RnaseA支1303390 100bpmaker支25092250 150bpMaker支25092250 MarkerDL500支8010800 MarkerDL1000支8010800
Markerr-ecot14Idigest支5001500去磷酸化酶支3001300 X-GLUC瓶4501450
Klenow酶支1081108 pMD18-TVetcor支2802560 T4DNA聚合酶支1081108
T4连接酶支40052000 TRNzol总RNA提取试剂盒4202840 IPTG瓶8010800
X-gal瓶600106000 dNTP(10mM)支80201600普通Taq酶（1000U）支80201600 DNAladder(100bp，1kb
等，50ug)
支180101800琼脂塘瓶300103000
TEMED瓶4020800
丙烯酰胺瓶70302100
溴酚兰瓶40140
矿物油瓶906540 Platinum高保真Taq酶支150057500
合计8793 0
3、内切酶,共计约0.41万。
名称
单
位
单价
(元）
购置数
量
金额
（元）
Bam
HI
支10990 Dra
I
支775385 Eco
RI
支65181170 Eco
RV
支759675 Hin
dIII
支775385 Kpn
I
支659585 Pst
I
支1202240 Xba支708560
I
合
计
4090 4、试剂盒,共计约1.84万元。
名称单位单价
(元）
购置数量
金额
（元）
Promega?T-easy载体
A1380
盒140011400 Promega?T-载体试剂盒盒900109000质粒提取试剂盒(50次)盒30051500一次性胶回收纯化试剂
盒（50次）
盒100033000 RNA提取试剂盒(50次)盒8001800 RNA纯化试剂盒(50次)盒36031080植物总RNA提取试剂盒盒128011280 RT-PCR试剂盒盒150023000
合计24827 0
5、组织培养试剂，共计约3.55万元。
名称单位单价
(元）
购置数
量
金额
（元）
Ammoniumsulfate硫酸铵瓶
119
11190
PotassiumphosphatemonobasicKH 2PO4瓶
139
11390
PotassiumnitrateKNO3瓶
426
14260
MYO-INSOSITOL肌醇瓶
465
29300
Magnesiumsulfateheptahydrate 硫酸镁瓶
322
13220
Phytagel?琼脂粉瓶
135
22700
N-Z-Amine水解酪蛋白瓶
158
11580
Kinetin瓶
505
15050
MgCl2.6H2O氯化镁瓶
158
11580
氯化钙瓶
360
13600
胰蛋白胨瓶3002600酵母粉瓶1502300琼脂粉
瓶525260葡萄糖瓶15575蔗糖瓶22488麦芽糖瓶2002400合计35593 6、抗生素，共计约2.22万。
名称单位单价
(元）
购置数
量
金额
（元）
潮霉素瓶70085600头孢霉素瓶55052750
羧苄青霉素瓶250041000 0
利福平瓶85043400卡那霉素瓶308240氨苄青霉素瓶308240
合计2223 0
7、实验室耗材，共计约1.58万。
名称单位
单价
(元）
购置数
量
金额（元）
玻璃拖把个3515
乳胶滴头个0.1310 1.3乳胶管6*9个 3.6518 1000ml塑料烧杯个 3.73518.65 1000ml玻璃烧杯个10.2551 500ml玻璃烧杯个 5.5527.5 5ml可调定量加液器支40.5140.5 5ml玻璃刻度吸管支515 10ml玻璃刻度吸管支 5.11 5.1 150ml玻璃锥形瓶个 4.11 4.1 100ml消煮管个8.418.4 25ml玻璃刻度试管支 1.94917.46 10ml塑料离心管个2045900玻璃棒支14545有机试管架25*30个34.6451557试管刷个2918
玻璃试管支 1.51827玻璃三角瓶个41872
玻璃试剂瓶个1218216
塑料量筒个1018180
塑料烧杯个1018180一次性过滤器个745315 X光片个26041040液氮（35L）个15091350冻存盒,离心管盒,离
心管架
个129108密封塑料盒个304120
100格冷冻盒个8432
冻存管(2ML)个 2.5230575封口膜个2004800硅胶塞24-28个 1.94585.5
硅胶塞27-31个 2.745121.5三角烧瓶（1000ML)个6001600
三角烧瓶（100ML)个9.8439.2双面离心管架个 2.5410
水银温度计支8.5868
定性滤纸个 1.34558.5药匙个445180一次性注射器个0.7186130.2
0.2mlPCR管1000个/
包
包33501650 96孔PCR板10块/包包44651860
1.5ml离心管500个/
盒
盒750350 2ml离心管500个/盒盒745315 96孔PCR硅胶密封硅
胶盖
个5840一次性无菌细菌培养
皿
个1800800玻璃培养皿个0.84032吸嘴（10ul，100ul）
1000个/袋
袋 3.540140吸嘴（1000ul）1000个/
袋
袋40401600
合计15826. 91
建立一个分子生物学实验室所需的仪器
分子生物学技术信息 关于筹建一个分子生物学实验室所需的仪器 一、上游分子克隆 分子克隆技术是分子生物学的核心技术，这项技术的主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝，从而可以深入分析基因结构与功能，并可达到人为改造细胞及物种个体的遗传性状的目的。 1. 分子克隆的基本技术路线： 1) 分离制备目的基因或DNA片段； 2) 目的DNA与载体在体外进行连接； 3) 重组DNA分子转入宿主细胞； 4) 筛选及鉴定阳性重组体； 5) 重组体的扩增。 2. 分子克隆常用仪器：
二、核酸分子杂交 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的技术之一。其基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下可按碱基互补原则形成双链。由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的高度灵敏性，使其在分子生物学领域中被广泛应用于分子克隆的筛选，基因组中特定基因序列的定量定性检测，基因表达和基因突变分析及疾病的基因诊断等。根据核酸种类分为Southern印迹法和Northern印迹法。 核酸分子杂交中常用的仪器： 三、下游蛋白的表达及分离纯化 目的基因能否发挥其效应,只能通过其表达有功能的蛋白质来实现,因此蛋白质的表达及分析方法成为分子生物学中必不可少的组成部分。 1. 蛋白的表达 大肠杆菌是自然界中最为人知的生物体之一。由于其具有操作简易，产量高和成本低廉等优点，使其成为蛋白质表达的首选宿主。缺点是：表达缺乏翻译后加工，得到的蛋白可能缺乏某些天然蛋白所具有的活性。 酵母作为单细胞低等真核生物，具有易培养，繁殖快，便于基因操作等优点，渐渐被开发作为目的基因的表达系统。其中甲基酵母作为外源基因的表达
常见实验室仪器设备清单!(附实验室图)
一、疾病预防控制中心实验室仪器设备清单 1 气相色谱仪：定性定量分析 2 阿贝折射仪：测透明半透明液体或固体的折射率和平均色散 3 氨气分析仪：测样品中氨的含量 4 测汞仪：测固、体液体样品中汞含量 5 电导率仪：测电解质溶液电导率值 6 二氧化硫测定仪：大气环镜中二氧化硫浓度的自动监测 7 二氧化碳测定仪：大气环镜中二氧化碳浓度的自动监测 8 离子交换纯水器：使用离子交换法制纯水 9 粉层采样器：该采样器适用于煤矿及其它粉层作业环镜中进行粉层采样 10 光电浊度仪：测量浊度 11 光照度计：测定光照强度 12 火焰光度计：监床化验用病理研究 13 激光粉层仪：检测粉层浓度 14 紫外可见分光光度计：测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度、定量分析 15 紫外辐射照度计：紫外辐射照度测量 16 自动量程照度计：测定光照强度 17 自动旋光仪：测物质旋光度，分析物质的浓度、纯度、含糖量 18 酶标仪：定性定量 19 冷原子荧光测汞仪：专用测贡仪器，测痕量贡 20 离子计：测离子浓度 21 CO分析仪：测大气环镜中一氧化碳含量 22 双道原子荧光光度计：固、液体中汞、砷、硒、锑、锗、锡含量测定析 23 手持糖量计：测体的含糖量 24 生化分析仪：测定样品的浓度，酶反映速率和酶的活性等数十种生化参数 25 洗板机：与酶标仪配套使用 26 微量可调移液器：移微量液体 27 显微镜：观察微小物质 28 荧光分光光度计：分析和测试各类微生物，氨基酸、蛋白质、核酸及多种监床药物 29 医用净化工作台：提供无尘无菌高洁净工作环镜 30 便携式红外线人析器：测定公共场所中的CO2浓度 31 电子微风仪：适用于工厂企业通风空调，镜污染览测动压平衡自动跟踪等速烟尘采样器的采样 32 放射性污染计量仪：测试放射性污染是否超标 33 热敏电阻（测辐射热计）：用于辐射探测 34 紫外光功力计：测试检测紫外光功率 35 热球式电风速仪：测定室内外或模型的气流速度时，是一种测量低风速的基本仪器 36 红血蛋白仪：检测血红蛋白
分子生物学实验技术考试题库
一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。
11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合
(完整版)吐血整理------生物实验室英语：常见耗材、仪器、操作、试剂英文名称
一．容器与耗材（vessel & consumable material） 小瓶vial 量杯measuring cup 烧杯beaker 量筒measuring flask/measuring cylinderer 坩埚crucible 坩埚钳crucible clamp 试管test tube 漏斗funnel 比色皿cuvette 鱼缸aquarium 烧瓶flask 锥形瓶conical flask 三角瓶Erlenmeyer 塞子stopper/plug 洗瓶plastic wash bottle 玻璃活塞stopcock 试剂瓶reagent bottles 玻棒glass rod 搅拌棒stirring rod 容量瓶volumetric flask/measuring flask 移液管(one-mark) pipette 吸液管pipette 滤器filter 滤纸filter paper 培养皿culture dish 移液枪pipette 移液枪枪头pipette tips 剃刀刀片razor blade 手术刀scalpel 垃圾袋disposable bag 垃圾桶garbage bin 橡皮筋rubber band 托盘Tray 铝箔aluminium foil 洗耳球rubber suction bulb 保鲜膜preservative film 研磨钵mortar 研杵pestle 小滴管dropper 蒸馏装置distilling apparatus 桶bucket 广口瓶wide-mouth bottle 离心机转子rotor 试管架test tube holder/rack 酒精灯alcohol burner 酒精喷灯blast alcohol burner 搅拌装置stirring device 石蜡封口膜Parafilm 微量离心管（EP管）Eppendorf tube 载玻片Slide 盖玻片Cover glass 离心管Centrifuge tube 电泳槽Gel tank 电线Electrical leads 牙签Toothpick 螺丝钉Screw 锁紧螺母Nut, Cap nut 复印纸Copy paper 复写纸Carbon paper 钉Nail 试管刷test-tube brush 计时器Timer 闹钟Alarm clock U形钉Staple 衣服挂钩Coat hanger 电泳用的梳子Comb 扳手Shifting spanner 订书机Stapler 订书钉staple 圆珠笔芯Refill 灯泡Globe 记号笔marker pen 注射器syringe 注射器活塞plunger 铁架台iron support 万能夹extension clamp 止水夹flatjaw pinchcock 圆形漏斗架cast-iron ring 橡胶管rubber tubing 药匙lab spoon 镊子forceps 剪刀scissor 打孔器stopper borer pH试纸universal ph indicator paper 称量纸weighing paper 擦镜纸wiper for lens 水银温度计mercury-filled thermometer
分子生物学实验室常用仪器设备简介(精)
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介 实验室主要仪器，设备的简介及使用方法 微量移液器 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。 微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分别是： 0.5～10μl(读数窗显示0.5～10.0,每转1档为0.1μl); 10～100μl(读数窗显示10.0～100, 每转1档为1μl); 20～200μl(读数窗显示20～200, 每转1档1μl); 100～1000μl(读数窗显示100～1000, 每转1档为5μl). 量液的操作步骤： 1．将微量移液器装上吸头（不同规格的移液器用不同的吸头） 2．将微量移液器按钮轻轻压至第一停点； 3．垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液样面下几毫米，千万不要将吸嘴直接插到液体底部；4．缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。否则液体进入吸嘴太快，导致液体倒吸入移液器内部，或吸入体积减少； 5．等一秒钟后将吸嘴提离液面 6．平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以排出剩余液体； 7．提起微量移液器，然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。 量液操作注意问题： 1．未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2．一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 3．不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4．不要用大量程的移液器移取小体积样品。 5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 低温台式高速离心机 离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上 离心机的功能：分离，纯化 低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白等，根据用途又可分为分析超速离心机和制备超速离心机。 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段 基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术 本实验室所用离心机为台式高速离心机（IBM），配有角式转头：24×1.5ml；极限转速20000rpm 台式高速离心机使用步骤 1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。
分子生物学实验技术全攻略
分子生物学实验技术 目录 实验一细菌的培养 2 实验二质粒DNA的提取 3 实验三紫外吸收法测定核酸浓度与纯度 4 实验四水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 5 实验五质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 7 实验六植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析 8 实验七聚合酶链反应（PCR）技术体外扩增DNA 9 实验八 RNA提取与纯化 11 实验九 RT-PCR扩增目的基因cDNA 13 实验十质粒载体和外源DNA的连接反应 15 实验十一感受态细胞的制备及转化 16 实验十二克隆的筛选和快速鉴定 18 实验十三 DNA分析——Southern杂交 19 一基本操作 实验一、细菌培养 实验二、质粒DNA提取 实验三、紫外吸收法测定核酸浓度与纯度 实验四、水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 实验五、质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 实验六、植物基因组DNA提取、定量、酶切及电泳分析实验八、植物RNA提取及纯化 二、目的基因获取
实验七、聚合酶链式反应（PCR）技术体外扩增DNA 实验九、RT-PCR扩增目的基因cDNA 三、目的基因的克隆和表达 实验十、质粒载体和外源DNA的连接反应 实验十一、感受态细胞的制备及转化 实验十二、克隆的筛选和快速鉴定 实验十三、DNA分析——Southern杂交 实验一细菌的培养 一、目的 学习细菌的培养方法及培养基的配置。 二、原理 在基因工程实验和分子生物学实验中，细菌是不可缺少的实验材料。质粒的保存、增殖和转化；基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。 大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。当大肠杆菌在培养基中培养时，其开始裂殖前，先进入一个滞后期。然后进入对数生长期，以20~30min复制一代的速度增殖。最后，当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时，菌体密度就达到一个比较恒定的值，这一时期叫做细菌生长的饱和期。此时菌体密度可达到 1×109~2×109/mL。 培养基可以是固体的培养基，也可以是液体培养基。实验室中最常用的是LB培养 基。 三、实验材料、试剂与主要仪器 （一）实验材料 大肠杆菌 （二）试剂 1、胰蛋白胨 2、酵母提取物
化学实验室仪器设备清单word版本
化学实验室仪器设备清单 编号名称单位数量单价（元）金额（元）备注 1钢制黑板块1150.00150用于贴磁性图片2打孔器套411.0044 3打孔夹板个134.0034 4打孔器刮刀个114.0014 5手摇钻孔器台178.0078 6仪器车辆1300.00300 7离心沉淀器台173.0073 8酒精喷灯个243.0086 9电加热器个176.0076 10列管式烘干器台1270.00270 11注射器只50 5.00250 12塑料洗瓶个4 5.0020 13试剂瓶托盘个1219.00228 14实验用品提蓝个230.0060 15塑料水槽个508.00400JY 53 16碘升华凝华管个2515.00375可自制 17方座支架套2525.00625或称铁架台18万能夹个510.0050 19三脚架个257.00175 20泥三角个1 1.20 1.2 21试管架个257.00175 22漏斗架个112.0012 23滴定台个119.0019 24滴定夹个114.0014 25多用滴管架个2518.00450与多用滴管配套26教学电源台1150.00150可与物理共用27托盘天平台5046.002300 28托盘天平台175.0075 29温度计支50 1.5075 30温度计支1 2.50 2.5 31多用电表个185.0085
32密度计支1 4.004 33密度计支1 5.005 34水电解演示器台1120.00120 35水电解实验器台2577.001925可自制36原电池实验器个2513.00325可自制37贮气装置台251.00102 38分子间隔实验器件2560.001500 39溶液导电演示器台1110.00110 40微型溶液导电实验器套25120.003000 41初中分子结构模型套320.0060 42金属矿物、金属及合 金标本 盒160.0060 43原油常见馏分标本盒125.0025 44合成有机高分子材料 标本 盒122.0022 45走进化学实验室套175.0075 46身边的化学物质套175.0075 47物质的组成、性质和 变化规律 套175.0075 48化学与社会发展套175.0075 49元素周期表件138.0038 50量筒个50 3.00150 51量筒个50 4.00200 52量筒个2 5.0010 53量筒个215.0030 54量杯个18.008 55容量瓶个110.0010 56容量瓶个112.0012 57滴定管支125.0025 58滴定管支135.0035 59试管支2500.60150 60试管支250 1.00250 61试管支100 1.20120 62试管支50 1.0050
实验室仪器清单
. . . . . 1、实验室常用仪器设备清单
2、选用及科研要求的仪器
3. 其它重要补充 1酸度计:测HP 值 2电导率仪:测电解质溶液电导率值 3旋光仪（自视自动）:测物质旋光度，分析物质的浓度、纯度、含糖量 4气相色谱仪:定性定量分析 5液相色谱仪:定性定量分析 6自动定位滴定仪:酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定、络合滴定 7智能崩解仪:在设定温度（人体温度下）进行药片崩解实验 8药物溶出度仪:在设定温度（人体温度下）进行药片崩解实验 9脆碎度检查仪:在设定转速下进行药片脆碎度检验 10熔点仪:测量结晶性化学制品、药品和部分结晶聚合物熔点 11澄明度检测仪:观察溶液澄清程度，有否颗粒物 12紫外辐射照度计:紫外辐射照度测量 13紫外可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度，定量分析14可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度，定量分析 15微量进样器:液相、气相色谱分析中使用 16阿贝折射仪:测透明半透明液体或固体的折射率和平均色散 17原子吸收争光光度计:根据被测元素的基态原子对特征辐射的吸收程度进行定量分析 18荧光分光光度计:分析和测试和类微生物、氨基酸蛋白质、核酸及多种监床药物 19色差计:测量药品颜色
20红外分光光度计:定性定量分析 21手持糖量计:测定溶液中糖度、含糖量
22标准旋光管旋光仪: 测旋光度标准，检验旋光仪准确度 23超净水器：制超净水 24钠离子浓度计：测钠离子浓度 25尘埃粒子计数器：测定空气中的微粒 26永停滴定仪：根据电们变化指示滴定终点的滴定用仪器 27卡尔费休水份测定仪：测产品含水量 28薄层色谱仪：定性分析 29傅立液变换红外光谱仪：定性定量分析 30紫外强度计：测紫外线强度 31三用紫外线分析仪：药物生产和研究中，可用来检查荧光药品的质量 32生物显微镜：观察微小物质 33激光粒子数计：尘埃粒子计数 34多小长飞点扫描仪：凝胶电冰、薄层板等的精密定量 35风速仪：测风速 36数字式光度表：测量可见光辐照强度 37反渗透纯水机：超纯水系统的进水，也可作一般实验室用水 38环境参数测试仪：测试环镜参数 39医用净化工作台：提供无尘无菌高洁净工作环镜 40紫外线斑点检测仪：在药物生产研究中，可用来检查荧光药品质量 41浮游菌采样器：监控空气中细菌总数和检测空气中的和种细菌 42数字白度计：测试药品白度，以及荧光样品测量 43散射光浊渡仪：测量水质浊度 44实验淘（labtaobao.)-专业级科学仪器、分析仪器、实验室设备、检测及测试设备一站式选型与价格查询信息平台。 45
分子生物学实验室需要的仪器配置
分子生物学实验室需要的仪器配置 (1)培养箱在分子生物学试验中，有很多反应都是在特定温度下进行的，这时就需要一个控温的装置。例如：用于细菌的平板培养，我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养；其他分子生物学实验如酶切等需要25℃，30℃，37℃等条件。 (2)冰箱冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。分子生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。具体来说，不同温度下保存的物品如下： a. 4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。 b.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。 c.-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液，感受态等的保存。 d.0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 (3)摇床摇床是实验室常用仪器，一般有常温型和低温型两种。对于分子生物学实验室，如果能配置低温型摇床，就可以适应不同的实验需求。例如：用于大肠杆菌，酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达，培养通常为28度和37度，诱导表达需要20-37度；在感受态的制备过程中，需要有18度的温度控制；用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡，常温使用；用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏，常为37度。对于控制温度低于室温时，我们需要低温型摇床来控温。 (4)水浴锅水浴锅也是一种控温装置，水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。例如，用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应；用于DNA杂交过程中水浴控温。 (5)烘箱烘箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。烘箱有不同的控温范围，用户可以根据实验需求进行选择。例如，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干；用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干。 (6)纯水装置纯水装置包括蒸馏水器和纯水机。蒸馏水器的价格便宜，但在造水过程中需要有人值守；纯水机价格高些，但是使用方便，可以储存一定量的纯水。纯水使用也有不同的级别，一般实验用水需要纯水，用于PCR、DNA测序、酶反应均需要超纯水。 (7)灭菌锅分子生物学所用到的大部分实验用具都应严格消毒灭菌。包括实验物品、试剂、培养基等。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。 (8)天平天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。
分子生物学实验技术实验内容
2006 年《分子生物学实验技术》实验内容 RT-PCR （一）总 RNA的提取 实验安排：每两人抽提一管。为了使操作同步以节省时间，各组样品请一起离心。 操作步骤： TM（苯冰预冷的900μlLS -Biotragents液体样品加入 1.5ml Ep管中，再加入1、将100μ l 酚和异硫氰酸胍的混合物）。 2、将样品剧烈混合后，在室温放置5min。 3、加入200μl 氯仿，颠倒Ep 管混和两次，并剧烈振荡混和10s。 4、在4℃条件下，以10000×g 离心15min。 5、将上层水相转移到一个新的Ep 管中，加入等体积的异丙醇（Isopropanol）并混匀，然后在4℃放置至少10min。 6、在4℃条件下，以10000×g离心15min 后，小心并尽可能地去除全部上清夜。 7、用1ml 75%乙醇洗涤RNA 沉淀和管壁。 8、将RNA 沉淀进行干燥（不能完全干燥）处理后，用10μl 无RNase污染的水（RNase- Free Water）将RNA 溶解并于-20℃保存。 注意事项： 1、所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr 或更长时间。 2、所用的塑料材料，如吸头、离心管等需用0.1% DEPC 水浸泡过夜。 3、配制的溶液应尽可能用0.1% DEPC，在37℃处理12hr 以上。然后用高压灭 菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC 处理过的无菌双蒸水 配制，然后经0.22μm 滤膜过滤除菌。 4、操作人员需在超净工作台上操作，并戴一次性口罩、手套，实验过程中手套要勤换。 二）反转录 实验安排： 每人做一管反应体系（20μ l）：按下列顺序加样 μl4 5× Buffer
各行业实验室应配仪器清单
技术服务-1 食品微生物实验室必备设备 一，无菌室和超净工作台 是实验室的核心部分，主要为样品提供保护，保证实验结果的准确和人员的安全。 （一）无菌室 无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境。无室的主要组成设备的 空气自净器，传递窗，紫外线灯等。严格的无菌室可能还装备风彬室等。 （二）超净工作台 超净工作台作为代替无菌室的一种设备，使用简单方便，为实验的开展提供一个相对无菌的操作台。超净工作台湾队根据风向分为水平式和垂直式。 二，培养箱 主要用于实验室微生物的培养，为微生物的生长提供一个适宜的环境。 （一）普通培养箱：一般控制的温度范围为：室温+5～65℃，又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱。 （二）生化培养箱：一般控制的温度范围为：5～50℃。 （三）恒温恒湿箱：一般控制的温度范围为：5～50℃，控制的湿度范围为：50～90％。可作为霉菌培养箱。 （四）厌氧培养箱：适用于厌氧微生物的培养。 三，干燥箱 四，灭菌器 五，天平 一般要求具备精度达到万分之一的分析天平。 六，显微镜 主要用于微生物和微小物品结构，形态等的观察。 七，分光光度计 在QS中用于生产方便面，茶饮料，肉制品，乳制品，棉白糖的企业。 八，酸度计 在QS中用于生产果蔬罐头，白沙糖，饮用水类的企业。 九，电导率仪和浊度仪 在QS中用于生产饮用水的企业。 十，折光仪 在QS中用于生产果蔬罐头，饮料类的企业。 十一，恒温水温浴锅 在QS中用于生产方便面，速冻面米食品企业。 十二，定氮装置 在QS中用于生产乳制品，含蛋白质饮料的企业。 十三，杂质度过滤机 在QS中用于生产乳品企业。 实验室配套常用设备 一，通风柜 二，离心机 三，纯水器 四，烘箱 五，低温冰箱 实验室常用消耗品
医学分子生物学实验技术
1、基因：是遗传的物质基础，是DNA 或者RNA分子中携带遗传信息的特定核苷酸序列。 2、基因组：是指单倍体细胞核、细胞器或病毒粒子所含的全部DNA 或RNA分子，每个生物的基因组携带者构成和维持该生物体生物形式所必需的所有生物信息。 3、逆转录：以RNA为模板，由反转录酶催化四种dNTP聚合，产生DNA的过程。 4、聚合酶链反应：是一种由引物介导利用DNA聚合酶在体外扩增目的基因的方法，也叫基因扩增技术。 5、限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链的核酸内切酶。 6引物：是一种与DNA模板链互补的线性核苷酸变短，其3’末端为游离的-OH，细胞内复制所需的引物是一小段RNA。催化游离dNTP之间相互聚合。 7、TaqDNA聚合酶：从一种嗜热菌株中分离得到的耐热的DNA聚合酶。 8、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程成为退火。 9、启动子：是位于转录起始点附近，且为转录所必需的序列元件。 10、DNA变性：当DNA收到某些理化因素作用时，DNA双链互补碱基对之间的氢键和相邻碱基之间的堆积力受到破坏，DNA分子被解开成单链，逐步形成为无规则线团的构象，不涉及核苷酸间共价键的断裂。
1、RT-PCR的基本原理 将RNA反转录与PCR过程结合的一种PCR技术，在反转录酶的作用下，以mRNA为模板，反转录生成DNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增。 2、DNA电泳的基本原理，按照支持物不同可以分为几类 基本原理：核酸是两性电解质，在中性或偏碱性的pH溶液中均带负电，在电场中向正极泳动，不同的核酸在相对分子质量、分子形状等方面各有不同，在凝胶的空隙中泳动时电泳迁移率各不相同，因此借助电泳即可使其得到分离。 分类：1琼脂糖凝胶电泳AGE 2聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE 3 毛细管电泳 3、总RNA提取后，如何鉴定RNA的纯度 （1）紫外分光光度法：先通过A260与A280的比值判断核算的纯度，纯RNA的A260与A280的比值等于2.0，比值升高或降低均表示样品不纯。 (2)琼脂糖凝胶电泳法：基因组DNA的分子量远远大于RNA，两者之间电泳迁移率存在很大差别，用荧光染料EB为示踪剂的AGE即可观察到RNA分子中是否含有DNA，细胞RNA的琼脂糖凝胶电泳一般可见三条条带，条带模糊比例不合适及弥散明显说明RNA有严重降解。
实验室仪器清单
1、实验室常用仪器设备清单
2、选用及科研要求的仪器
3. 其它重要补充 酸度计:测HP 值 电导率仪:测电解质溶液电导率值 旋光仪（自视自动）:测物质旋光度，分析物质的浓度、纯度、含糖量 气相色谱仪:定性定量分析 液相色谱仪:定性定量分析 自动定位滴定仪:酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定、络合滴定 智能崩解仪:在设定温度（人体温度下）进行药片崩解实验 药物溶出度仪:在设定温度（人体温度下）进行药片崩解实验 脆碎度检查仪:在设定转速下进行药片脆碎度检验 熔点仪:测量结晶性化学制品、药品和部分结晶聚合物熔点 澄明度检测仪:观察溶液澄清程度，有否颗粒物 紫外辐射照度计:紫外辐射照度测量 紫外可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度，定量分析 可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度，定量分析 微量进样器:液相、气相色谱分析中使用 阿贝折射仪:测透明半透明液体或固体的折射率和平均色散 原子吸收争光光度计:根据被测元素的基态原子对特征辐射的吸收程度进行定量分析荧光分光光度计:分析和测试和类微生物、氨基酸蛋白质、核酸及多种监床药物 色差计:测量药品颜色 红外分光光度计:定性定量分析 手持糖量计:测定溶液中糖度、含糖量
标准旋光管旋光仪: 测旋光度标准，检验旋光仪准确度 超净水器：制超净水 钠离子浓度计：测钠离子浓度 尘埃粒子计数器：测定空气中的微粒 永停滴定仪：根据电们变化指示滴定终点的滴定用仪器 卡尔费休水份测定仪：测产品含水量 薄层色谱仪：定性分析 傅立液变换红外光谱仪：定性定量分析 紫外强度计：测紫外线强度 三用紫外线分析仪：药物生产和研究中，可用来检查荧光药品的质量 生物显微镜：观察微小物质 激光粒子数计：尘埃粒子计数 多小长飞点扫描仪：凝胶电冰、薄层板等的精密定量 风速仪：测风速 数字式光度表：测量可见光辐照强度 反渗透纯水机：超纯水系统的进水，也可作一般实验室用水 环境参数测试仪：测试环镜参数 医用净化工作台：提供无尘无菌高洁净工作环镜 紫外线斑点检测仪：在药物生产研究中，可用来检查荧光药品质量 浮游菌采样器：监控空气中细菌总数和检测空气中的和种细菌 数字白度计：测试药品白度，以及荧光样品测量 散射光浊渡仪：测量水质浊度 实验淘（-专业级科学仪器、分析仪器、实验室设备、检测及测试设备一站式选型与价格查询信息平台。
实验室仪器清单
１、实验室常用仪器设备清单
2、选用及科研要求得仪器
3、其它重要补充 1酸度计:测HP 值 2电导率仪:测电解质溶液电导率值 3旋光仪(自视自动):测物质旋光度,分析物质得浓度、纯度、含糖量 4气相色谱仪:定性定量分析 5液相色谱仪:定性定量分析 6自动定位滴定仪:酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定、络合滴定 7智能崩解仪:在设定温度(人体温度下)进行药片崩解实验 8药物溶出度仪:在设定温度(人体温度下)进行药片崩解实验 9脆碎度检查仪:在设定转速下进行药片脆碎度检验 10熔点仪：测量结晶性化学制品、药品与部分结晶聚合物熔点 11澄明度检测仪：观察溶液澄清程度,有否颗粒物 12紫外辐射照度计:紫外辐射照度测量 13紫外可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射得吸收程度,定量分析14可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射得吸收程度,定量分析 15微量进样器:液相、气相色谱分析中使用 16阿贝折射仪:测透明半透明液体或固体得折射率与平均色散 17原子吸收争光光度计：根据被测元素得基态原子对特征辐射得吸收程度进行定量分析 18荧光分光光度计：分析与测试与类微生物、氨基酸蛋白质、核酸及多种监床药物 19色差计:测量药品颜色
20红外分光光度计:定性定量分析 21手持糖量计：测定溶液中糖度、含糖量
22标准旋光管旋光仪: 测旋光度标准,检验旋光仪准确度 23超净水器:制超净水 24钠离子浓度计:测钠离子浓度 25尘埃粒子计数器:测定空气中得微粒 26永停滴定仪:根据电们变化指示滴定终点得滴定用仪器 27卡尔费休水份测定仪:测产品含水量 28薄层色谱仪:定性分析 29傅立液变换红外光谱仪:定性定量分析 30紫外强度计:测紫外线强度 31三用紫外线分析仪:药物生产与研究中,可用来检查荧光药品得质量 32生物显微镜:观察微小物质 33激光粒子数计:尘埃粒子计数 34多小长飞点扫描仪:凝胶电冰、薄层板等得精密定量 35风速仪:测风速 36数字式光度表：测量可见光辐照强度 37反渗透纯水机:超纯水系统得进水,也可作一般实验室用水 38环境参数测试仪:测试环镜参数 39医用净化工作台:提供无尘无菌高洁净工作环镜 40紫外线斑点检测仪:在药物生产研究中,可用来检查荧光药品质量 41浮游菌采样器:监控空气中细菌总数与检测空气中得与种细菌 42数字白度计:测试药品白度,以及荧光样品测量 43散射光浊渡仪：测量水质浊度 44实验淘(labtaobao、)-专业级科学仪器、分析仪器、实验室设备、检测及测试设备一站式选型与价格查询信息平台。
第五章 分子生物学常用技术 习题
第五章常用分子生物学技术的原理及其应用习题（引自网络精品课程） 一、选择题 （一）A型题 1 ．分子杂交实验不能用于 A ．单链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交 B ．双链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交 C ．单链 RNA 分子之间的杂交 D ．单链 DNA 分子之间的杂交 E ．抗原与抗体分子之间的杂交 2 ．关于探针叙述错误的是 A ．带有特殊标记 B ．具有特定序列 C ．必须是双链的核酸片段 D ．可以是基因组 DNA 片段 E ．可以是抗体 3 ．下列哪种物质不能用作探针 A ． DNA 片段 B ． cDNA C ．蛋白质 D ．氨基酸 E ． RNA 片段 4 ．印迹技术可以分为 A ． DNA 印迹 B ． RNA 印迹 C ．蛋白质印迹 D ．斑点印迹 E ．以上都对 5 ． PCR 实验延伸温度一般是 A ．90 ℃ B ．72 ℃ C ．80 ℃ D ．95 ℃ E ．60 ℃ 6 ． Western blot 中的探针是 A ． RNA B ．单链 DNA C ． cDNA D ．抗体 E ．双链 DNA 7 ． Northern blotting 与 Southern blotting 不同的是 A ．基本原理不同 B ．无需进行限制性内切酶消化 C ．探针必须是 RNA D ．探针必须是 DNA E ．靠毛细作用进行转移 8 ．可以不经电泳分离而直接点样在 NC 膜上进行杂交分析的是 A ．斑点印迹 B ．原位杂交 C ． RNA 印迹 D ． DNA 芯片技术 E ． DNA 印迹 9 ．下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板 A ． RNA B ．单链 DNA C ． cDNA D ．蛋白质 E ．双链 DNA 10 ． RT-PCR 中不涉及的是 A ．探针 B ． cDNA C ．逆转录酶 D ． RNA E ． dNTP 11 ．关于 PCR 的基本成分叙述错误的是 A ．特异性引物 B ．耐热性 DNA 聚合酶 C ． dNTP D ．含有 Zn 2+ 的缓冲液 E ．模板 12 ． DNA 链末端合成终止法不需要 A ． ddNTP B ． dNTP C ．引物标记 D ． DNA 聚合酶 E ．模板 13 ． cDNA 文库构建不需要 A ．提取 mRNA B ．限制性内切酶裂解 mRNA C ．逆转录合成 cDNA D ．将 cDNA 克隆入质粒或噬菌体 E ．重组载体转化宿主细胞 14 ．标签蛋白沉淀是 A ．研究蛋白质相互作用的技术 B ．基于亲和色谱原理 C ．常用标签是 GST D ．也可以是 6 组氨酸标签 E ．以上都对 15 ．研究蛋白质与 DNA 在染色质环境下相互作用的技术是 A ．标签蛋白沉淀 B ．酵母双杂交 C ．凝胶迁移变动实验 D ．染色质免疫沉淀法 E ．噬菌体显示筛选系统 16 ．动物整体克隆技术又称为
微生物实验室常用仪器设备清单 (1)
微生物实验室常用仪器设备清单 微生物学实验室是生物学领域的一个基本实验室，对于一个完备的微生物学实验室，我们需要配置哪些仪器呢? 1、超净工作台 微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。 2、培养箱? 培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。生化培养箱只能控制温度，可作为一般细菌的平板培养;霉菌培养箱可以控制温度和湿度，可作为霉菌的培养;CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养。 ES5000-6S型智能配平仪 3、天平 天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。 4、微生物均质器 用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。 5、菌落计数器 菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。 6、微波炉/电炉? 用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。 7、高压灭菌锅? 微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。 8、移液器? 液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。? 9、低温冰箱? 冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。? 10、生物安全柜? 微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。? 11、摇床? 摇床是实验室常用的一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。 12、纯水装置? 超纯水器，制造出各精密检测无杂质、无污染的纯水，
分子生物学常用实验技术及方法
第二章 常用实验技术及方法 一、聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR) 反应总体积为50 μl ，其中含有： 模板DNA 0.5 μl PCR 缓冲液(不含MgCl 2) 5 μl 10×MgCl 2 溶液 5 μl dNTP (2.5 mmol/L) 0.5 μl 引物1 (50 umol/L) 0.5 μl 引物2 (50 umol/L) 0.5 μl Taq DNA 聚合酶 0.5 μl 无菌去离子水加至 50 μl 上层用25 μl 液体石蜡油覆盖。 循环参数为： 94 ℃变性10 min 94 ℃变性1 min 56 ℃退火1 min 72 ℃延伸2 min 共30个循取环，PCR 结束后，取2 μl PCR 扩增产物，经1 %琼脂糖凝胶电泳，在紫外检测仪上观察并拍照。 二、基于PCR 技术的定点突变 1. 根据所要突变位点的特定氨基酸，并按公认的四引物法原理，分别设计上下 游引物Primer 3和Primer 4，这两条引物部分交错互补，但分别含有欲突变后的碱基（红点）的互补序列（如下图所示）； 2. 用基因5’端的Primer 1和Primer 2 PCR 扩增DNA 片段1，用基因3’端的Primer4和Primer 3一起PCR 扩增DNA 片段2，PCR 反应条件基本如上(七、聚合酶链反应)，可根据具体实验略有调整，反应完毕后，分别电泳回收DNA 片段1和 DNA
片段2； 3. 以片段1和片段2为模板，进行第二次PCR反应，反应体系为50 μl： 片段1 1 μl 片段2 1 μl 10×PCR缓冲液(不含MgCl2) 5 μl 10×MgCl2溶液 5 μl dNTP (2.5 mmol/L) 5 μl Taq酶 1 μl 加ddH2O至50 μl 在该反应体系中先不加入引物，按上述反应条件进行10个循环，然后再加入Primer 1和Primer 4各1 ul，按上述反应条件再扩增30个循环； 4. PCR产物经电泳检查，然后连接到相应的载体中，进行测序以确定定点突 变的正确性。 三、Total RNA的提取(Catrimox-14TM RNA Isolation Kit Ver. 2.11) 1. 吸弃培养细胞中的旧培养基，用PBS洗涤1-2次后，加入1 ml的Catrimox-14 TM 溶液，然后充分混匀； 2. 收集细胞裂解液，按以下条件进行离心： 细胞数<5×105 ：9500 rpm (约5 000×g) 5 min 细胞数5×105 - 1×10 7 ：3000 rpm (约450×g) 5 min 细胞数>1×107 ：1500 rpm (约112.5×g) 5 min 3. 除去上层溶液，加入1 ml的DEPC处理的H2O，上下颠倒混合数次后，12000 rpm离心2 min； 4. 吸弃上层溶液，激烈振荡使沉淀松动； 5. 向Microtube中加入1 ml的2 M LiCl溶液； 6. 激烈振荡后，室温下12000 rpm离心5 min，除去溶液； 7. 沉淀用70 %冷乙醇清洗一次； 8. 沉淀经过简单的真空干燥后，溶于适当的缓冲液中。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法.
实验指导 目录 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法 实验二质粒 DNA 的提取-碱裂解法 实验三琼脂糖凝胶电泳 实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六动物组织细胞基因组 DNA 提取 实验七 DNA 的定量 实验八 PCR 基因扩增 实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的 DNA 实验十 DNA 重组 实验十一动物组织细胞总 RNA 的提取 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用 事实证明, 在科学飞速发展的今天, 无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有 良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外, 还具有一些特殊用途的仪器, 这些仪器一般较精密, 价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机
低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术 , 因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内, 有多个厂家生产冷冻离心机, 本实验室的高速冷冻离心机为 GL-20G-Ⅱ型(上海安亭 ,落地式。配有角式转头:6×50ml 、 12×10ml 和 12×1.5ml 。极限转速 20000rpm 。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离 10cm 以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在 0~30℃之间,相对湿度小于 80%。试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关, 再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。 2. 操作程序 (1插上电源, 待机指示灯亮; 打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 (2设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。 (3将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。 (4按控制面板的运转键,离心机开始运转。在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。 (5 在预先设定的运转时间内(不包括减速时间 , 离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。 (6按控制面板上的停止键,数码管显示 dedT ,数秒钟后即显示闪烁的转速值,这时机器已准备好下一次工作。