超声提取野菊花总黄酮及其抑菌活性的研究
药用菊花总黄酮提取方法的比较
药用菊花总黄酮提取方法的比较杨 阳1,姚 华2【摘 要】 目的 优化药用菊花总黄酮提取工艺。
方法 通过对冷浸法、索提法、回流法、超声法等几种提取方法的研究和比较,采用正交试验设计优选药用菊花总黄酮的最佳提取工艺。
结果 不同处理方法所得结果不同,李氏提取法(甲醇)所得浸膏重量及其得率均最高;超声法(70%乙醇)所得总黄酮含量及得率最高。
结论 超声法为药用菊花总黄酮的最佳提取方法,其最佳提取条件是溶剂为70%乙醇,料液比为1∶30,超声温度为60℃,超声时间为30min。
【关键词】 药用菊花;黄酮;提取方法;正交试验法【中图分类号】 R284.2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1008-7044(2007)06-0564-02 药用菊花为菊科植物菊Chry santhemum m ori-fo lium Ramat的干燥头状花序。
菊花是常用中药,性味甘苦、凉,具有散风清热,平肝明目等功效[1]。
药用菊花富含黄酮,该物质是以2-苯基色原酮为基核的化合物,是一类极具有开发前景的天然有机抗氧化剂[2],对冠心病、心绞痛、高血压、心血管疾病有很好的疗效。
该化合物的研究已成为国内外医药界研究的热门话题。
据调查,目前对菊花总黄酮的综合提取方案研究较少,优化该提取方案有利于今后对菊花黄酮的研究和应用。
本实验通过比较冷浸法、回流法、索氏提取法、超声法对菊花总黄酮提取[3],研究最佳提取方法,并优化提取方法的工艺条件,以期为该天然有机抗氧化剂的广泛应用提供依据。
1 材料与方法1.1 材料 供试材料:射阳产杭菊,60℃烘箱内烘干,打粉备用。
所用材料经鉴定为菊科杭菊Chr ysan-themum m orifo lium Ramat。
仪器:756CRT型紫外-可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司), KQ250B型超声仪(昆山市超声仪器公司),FA1104电子天平,水浴锅。
试剂:芦丁对照品(批号:10080-2003016,含量91.7)购于中国药品生物制品检定所;所用试剂亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、95%乙醇皆为分析纯;所用水为去离子水。
舟山野菊花序不同萃取物抑菌活性的研究
２ Ｄｎｈｉ ｉｒ ｔＺ ｏｓａ ｎｃ ａ ｅｔ ｒＤｓａｅａｄＣ ｎｒｌＺ ｏｓａ ３ ０ ， ｈｎ） ． ｉｇａ Ｄｓ ｃ， ｈｕｈｎＭｕ ｉｐ Ｃ ｎｅ ｆ ｉ ｓ ｎ ｏｔ ， ｈｕｈｎ ００ Ｃ ｉａ ｔ ｉ ｉｌ ｒｏ ｅ ｏ １ ６
Ａｂ ｔａ ｔ Ｔ ｅｅ ａ ｏ ｒｄ ｘｒ ｃｓ ＣＥ ｎｔｅｉｆ ｒｓ ｅ ｃ ｆＣ ｒｓｎ ｈ ｍｕ ｉｄｃ ｍ ｏ Ｚ ｏ ｓ ａ ｓｒ ｃ ： ｈ 山 ｎ ｌ ｕ ｅｅ ｔａ ｔ ｃ １ ｌ ｅ ｃ ｎ ｅｏ ｈｙ ａ ｔｅ ｍ ｉｕ ｆ ｍ ｈ ｕ ｈ ｎ ｉ ｈ ｎｏ ｎ ｒ
文章 编 号： ０ ８ ８ ０ ２ １）６ ０ ６ — ４ １０ — ３ Ｘ（ ００ — ５ ２ ０ ０
舟 山野菊花序不 同萃取物抑茵活性 的研 究
童国忠 １ 马剑茵 １石 亚素 ２ 王 ， ， ， 斌 １
（． １ 浙江海洋学院食品与药学学 院， 浙江舟 山 ３ ６０ ； ． 山市定海区疾病控制 中心 ， １０ ４ ２ 舟 浙江舟 山 ３ ６０ ） １０ ０
Ｔ ＯＮＧ Ｇｕ － ｈ ｎ ＭＡ ｉｎ ｙｎ， ＨＩ － ｕ ， ｔ ｌ ｏ ｚ ｏ ｇ， Ｊａ － ｉ Ｓ Ｙａ ｓ ２ ｅ ａ
（． ｏ ｄａ ｄＰ ａｍ ｃ ｃ ｏｌ ｆ ｈ ｊ ｎ ｅｎＵ ｉｅｓｙ Ｚ ｏ ｓａ ３ ０ ； １ Ｆ ｏ ｎ ｈ ｒ ａｙＳｈ ｏ ｅ ａ ｇＯｃａ ｎｖｒｉ ， ｈ ｕｈ ｎ ０ ４ ｏＺ ｉ ｔ １ ６
中 图分 类 号 ： Ｑ ６ Ｔ ４１ 文献标识码 ： Ａ
Ａｎ ｉ ｉ ｒ ｂ ａ ｔｖ ｔ ｆｔ ｅ Ｅｘ ｒ ｃ ｎ ｔ ｅ Ｉ ｆｏ ｅ ｃ ｎ ｅ ｏ ｔｍ ｃ ｏ ｉ ｌＡｃ ｉ ｉｙ ｏ ｔ ａ ｔｉ ｈ ｎ ｒ ｓ ｅ ｃ ｆ ｈ ｌ Ｃｈ ｙ ａ ｔ ｅ ｍ ｎ ｉ ｕ ｆ ｏ ｏ ｓ ａ ｃ ｉ ｅ ａ ｏ ｒ ｓ ｎ ｈ ｍｕ ｉ ｄ ｃ ｍ ｒ ｍ Ｚｈ ｕ ｈ ｎ Ａｒ ｈ ｐ ｌ ｇ
薇甘菊叶的总黄酮提取及抑菌活性研究
薇甘菊叶的总黄酮提取及抑菌活性研究张敏;韩雅莉【摘要】以总黄酮提取率为考察指标,采用超声波辅助提取薇甘菊叶中的总黄酮,并采用正交设计试验优化薇甘菊叶的总黄酮提取工艺.通过体外抑菌实验,利用打孔法和试管法分别测定了其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌这4种常见细菌的抑菌活性和最低抑菌浓度(MIC).结果表明,叶中总黄酮最佳提取条件为乙醇体积分数50％、料液比1∶30、超声功率50 W、超声时间50 min,此条件下黄酮得率为10.62％;薇甘菊叶的黄酮提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌均有良好的抑菌活性,其最低抑菌浓度分别为1.562 5、1.562 5、3.125 0、3.125 0 mg/mL(以黄酮质量浓度计).【期刊名称】《广东工业大学学报》【年(卷),期】2014(031)002【总页数】6页(P133-138)【关键词】薇甘菊叶总黄酮;超声波辅助提取;抑菌活性【作者】张敏;韩雅莉【作者单位】广东工业大学轻工化工学院,广东广州510006;广东工业大学轻工化工学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】TS201.2薇甘菊(Mikania Micrantha)是菊科假泽兰属多年生藤本植物，也称小花蔓泽兰或小花假泽兰.因其具有超强繁殖能力且适于攀缘缠绕于乔灌木，往往重压于其冠层顶部阻碍该植物光合作用，继而导致其死亡，被认为是世界上最具危险性的有害植物之一，因而被称为“植物杀手”［1］.薇甘菊原产于中美洲，现已广泛分布于我国海南及珠江三角洲地区，它已被列入中国首批外来入侵物种［2］.如何对其进行防除和有效的开发利用已成为治理的关键［3-4］.目前对薇甘菊的开发利用研究主要集中于对其进行营养成分的提取和生理活性物质的发现［5-6］等方面.有关研究发现薇甘菊中含有多种化学成分［7］，包括单萜、倍半萜、醇和酮的衍生物、黄酮类化合物等，其中多种物质具有潜在的保健与药用价值.随着崇尚自然的消费理念逐步得到人们的认可，天然防腐剂的研究与开发成为了防腐剂领域的研究热点［8］.从天然产物中寻找植物源抗菌剂已成为植物学的研究方向之一.为此，本文主要研究了薇甘菊叶总黄酮提取工艺，并对其进行了黄酮提取液体外抑菌活性研究，以期为薇甘菊的开发利用提供实验参考.1 材料与仪器1.1 材料与试剂薇甘菊叶采于2月份的广州市番禺区广东工业大学外环路，日照充足，洗净，60℃烘干，粉碎过40目筛，备用.大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonella)以及志贺菌(Shigella)均由广东工业大学微生物实验室提供.胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)(青岛高科园海博生物技术有限公司，批号:20130725)、琼脂粉(青岛高科园海博生物技术有限公司，批号:20130304).芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、无水乙醇、石油醚均为分析纯.1.2 设备与仪器BS224S型电子分析天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司);SHZ-D(Ⅲ)型循环水式多用真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司);KQ2200-DV型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);UV-1800型紫外－可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);LDZM-60KCS立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂);DHP-9052型电热恒温培养箱(上海一恒科学仪器有限公司);HD-650-U标准型净化工作台(苏州安泰空气技术有限公司);ZHWY-103B型多振幅轨道摇床(上海智城分析仪器制造有限公司).2 实验方法2.1 超声辅助提取薇甘菊叶黄酮工艺研究2.1.1 芦丁标准曲线的绘制参考文献［9-10］中的方法，用体积分数70%的乙醇溶解10.2 mg芦丁标准品后定容到100 mL.分别取芦丁标准溶液 0、1、2、3、4、5 mL 到 6 支 10 mL刻度试管中，加0.3 mL质量浓度5%的亚硝酸钠水溶液，摇匀，放置6 min;加0.3 mL 质量浓度10%的硝酸铝溶液，摇匀，放置6 min;加摩尔浓度为1 mol/L氢氧化钠溶液4.0 mL，用体积分数70%的乙醇定容至10 mL，摇匀，以空白溶液为参照，用紫外可见分光光度计测不同质量浓度芦丁溶液在510 nm下吸光度，以芦丁质量浓度(mg/mL)为横坐标、吸光值A为纵坐标绘制标准曲线.2.1.2 黄酮提取液的制备将薇甘菊叶的粉末与石油醚按1∶10(g/mL)混合，静置2 h，抽滤，滤渣晾干备用.称取处理过的粉末1 g置150 mL锥形瓶中，加入适量乙醇，进行超声辅助提取.将醇提液抽滤后定容至100 mL，备用.2.1.3 样品总黄酮的测定将薇甘菊叶黄酮待测液进行适量稀释，取稀释液1 mL，按2.1.1中方法加样，在波长510 nm 下测吸光度A，按式(1)计算样品溶液中总黄酮质量浓度(mg/mL)，据式(2)可得总黄酮提取率.2.1.4 单因素实验采取确定3个因素、变换1个因素的方法分别对料液比、乙醇体积浓度、超声功率、超声时间这4个关键因素进行分析［11］.料液比(g/mL)分析:确定提取时间为30 min，乙醇体积分数为70%，超声功率为60 W，料液比分别为1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶40;乙醇体积浓度(V/V)分析:确定提取时间为30 min，物料比为1∶30，超声功率60 W，将乙醇体积分数设定为 30%、40%、50%、60%、70%和80%;超声功率(W)分析:确定提取时间为30 min，物料比为1∶30，乙醇体积分数为50%，超声功率为40、50、60、70、80、90 W;超声时间(min)分析:确定乙醇体积分数为50%，料液比为1∶30，超声功率60 W，超声时间分别为 10、20、30、40、50、60 min.2.1.5 正交试验设计在单因素试验基础上，以乙醇体积浓度、超声功率、超声时间，料液比为考察因素，每个因素3水平进行L9(34)正交试验(表1)，以总黄酮提取率为考察指标，确定最佳提取工艺［12］.表1 因素水平设计Tab.1 Factors and levels水平因素A料液比/(g·mL －1)B乙醇体积分数/%C超声时间/min D超声功率/W 1 1∶20 40 30 50 2 1∶30 50 40 60 3 1∶40 60 50 702.2 体外抑菌实验2.2.1 薇甘菊叶的总黄酮提取液的制备根据1.3中最佳提取工艺，称取叶的粉末10 g，提取溶剂为体积分数为50%的乙醇，料液比1∶30，超声功率50 W，提取时间50 min.然后抽滤除去废渣，旋蒸浓缩至无醇味即得叶的黄酮提取液(经紫外分光光度测定总黄酮质量浓度为12.5mg/mL).2.2.2 供试菌种菌悬液制备准确移取80 μL活化好的菌液于装有4 mL无菌水的试管中，充分摇匀，校正浓度至0.5麦氏标准［13］，使含菌量达到 108cfu/mL，备用.2.2.3 样品抑菌效果测定采用打孔法［14-15］.选用同样规格培养皿，每皿加20 mL培养基，凝固后，将各菌种悬液100 μL分别加入各平板表面，均匀涂开菌种，待平板干燥后，用直径为6 mm的玻璃管(0.1 MPa、121℃灭菌20 min)打孔.每皿均为4孔，每菌做3次重复.以硫酸链霉素为阳性对照，以无菌水为空白对照，每孔加样60 μL.将细菌置37℃恒温培养箱培养24 h.取出后测量抑菌圈大小，比较其抑菌效果.直径大于9 mm抑菌圈为有显著抑菌效果，小于6 mm为无抑菌效果，抑菌圈在6～9 mm 之间为有一定抑菌作用.2.2.4 最低抑菌浓度(MIC)测定采用试管法［16-17］.取36支灭菌试管分为4组，每组9支.每支试管加入1 mL TSB液体培养基，另每组第1支试管加入1 mL薇甘菊叶黄酮醇提液(黄酮质量浓度为12.5 mg/mL)，混匀液体，再从每组第1管吸取1 mL混匀液到每组第2管中，如此类推一直到第8管，再从第8管中吸取1 mL混匀液舍去，第9管为细菌对照组，不加药液.4组试管分别加入金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和志贺菌液各50 μL.另取9支试管，稀释步骤按上述进行，此组不加入菌液，为药液对照组.将试管置于37℃摇床中振荡培养24 h，实验组与对照组对比观察结果.3 结果与讨论3.1 芦丁标准曲线的绘制图1为芦丁标准曲线，表明在0～0.05 mg/mL质量浓度范围内的芦丁标准品在波长510 nm下吸光度有良好的相关性.线性方程为:y=11.497x+0.002 9;R2=0.9992.图1 芦丁标准曲线Fig.1 Standard Curve3.2 单因素实验结果3.2.1 料液比对总黄酮提取率的影响由图2可知，随料液比的增加，总黄酮提取率呈先上升后下降趋势，料液比为1∶30时薇甘菊总黄酮提取率达到最大.其原因可能是在短时间内超声波促使组织细胞膜急剧破裂，随之萃取的黄酮类物质迅速进入溶剂，直至达到饱和.但当料液比增加至1∶30后，增加溶剂不但不会增加其提取率，反而会更有利于杂质溶出，因而提取率有所下降.图2 料液比对薇甘菊总黄酮提取率的影响Fig.2 The influence of liquid-material ration on falconoids extraction3.2.2 乙醇体积浓度对总黄酮提取率的影响由图3看出，随乙醇体积浓度提高总黄酮提取率呈先上升后下降趋势，乙醇体积分数达50%时黄酮提取率最高.可能是溶剂浓度太低，不利于其渗透进入植物细胞内，随着乙醇体积分数的提高，黄酮类化合物溶出量增加.当乙醇体积浓度到一定水平时，部分水溶性黄酮类化合物溶出量降低，相反一些脂溶性成分溶出，造成黄酮得率相对降低.图3 乙醇体积浓度(体积分数)对薇甘菊总黄酮提取率的影响Fig.3 The influenceof ethanol concentration on falconoids extraction3.2.3 超声功率对总黄酮提取率的影响由图4可知，随超声功率增大，总黄酮提取率呈先上升后下降趋势，当超声功率为60 W时总黄酮提取率最高.这可能是不同物质对超声功率有不同的适应范围，超过此范围超声可能会导致目标产物降解，因而提取率显著下降.图4 超声功率对薇甘菊总黄酮提取率的影响Fig.4 The influence of ultrasonicpower on falconoids extraction3.2.4 超声时间对总黄酮提取率的影响由图5可知，随时间延长总黄酮提取率呈先上升后下降趋势，时间为40 min时总黄酮量最大.可能是达一定时间后大部分黄酮类物质已经溶出，继续延长提取时间反而导致黄酮水解，导致提取率降低.图5 超声时间对薇甘菊总黄酮提取率的影响Fig.5 The influence of ultrasonic time on falconoids extraction3.3 提取工艺正交实验结果由表2可知，各因素对薇甘菊叶黄酮提取影响的大小顺序为B＞A＞D＞C，即乙醇体积浓度＞料液比＞超声功率＞超声时间.最佳提取条件组合为B2A2D1C3，即:乙醇体积分数 50%、料液比1∶30、超声功率50 W，超声时间50 min，在此条件下薇甘菊叶黄酮提取率为10.616%.分别取3份同一批次的薇甘菊叶的粉末，在最优组合条件下进行提取，重复3次，总黄酮提取得率分别为10.62%、10.80%、10.54%，RSD值为0.012%，证明该方法稳定可靠.表2 正交试验结果Tab.2 Results of orthogonal experiments序号各因素水平A B C D叶中黄酮得率/%1 1 1 1 1 9.518 2 1 2 2 2 9.903 3 1 3 3 3 10.091 4 21 2 3 9.850 5 2 2 3 1 10.616 6 2 3 1 2 10.359 7 3 1 3 2 9.807 8 3 2 1 310.442 9 3 3 2 1 10.370 K19.837 9.727 10.107 10.170 K2 10.277 10.32010.040 10.023 K3 10.207 10.273 10.173 10.127 R 0.440 0.593 0.133 0.147 3.4 抑菌效果的测定由表3可知，薇甘菊叶的黄酮提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌的抑菌圈平均直径分别为 15.0、11.0、7.5、8.0 mm;阳性对照硫酸链霉素组测得的直径分别为17.3、20.8、13.2、18.5 mm;阴性对照无菌蒸馏水组均无抑菌圈出现.由此可知，薇甘菊叶的黄酮提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有明显抑菌效果，对沙门氏菌和志贺菌有一定的抑菌效果，其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强.表3 总黄酮提取液的抑菌效果(24 h)Tab.3 Antibacterial activity of total falconoids extract(24 h)供试菌种抑菌圈直径/mm薇甘菊叶黄酮提取液无菌蒸馏水硫酸链霉素金黄色葡萄球菌15.0 6.0 17.3大肠杆菌 11.0 6.0 20.8沙门氏菌 7.5 6.0 13.2志贺菌8.0 6.0 18.53.5 最低抑菌浓度(MIC)测定由表4可知，薇甘菊叶黄酮提取液在一定浓度下对4种菌均有一定抑制作用，而且随着黄酮质量浓度的增加，抑菌作用增强呈正相关，具有广谱的抑菌性.其中，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用最强，其MIC均为1.562 5 mg/mL，对沙门氏菌和志贺菌的抑制作用稍弱，其 MIC均为3.125 0 mg/mL(以黄酮质量浓度计).表4 总黄酮提取液的MIC1)Tab.4 The MIC of total falconoids extract1)稍微浑浊有少数细菌生长，用“+”表示;比较浑浊有较多细菌生长，用“++”;完全浑浊细菌生长良好，用“+++”表示;透明清亮，无细菌生长，用“－”表示管号稀释倍数金黄色葡萄球菌大肠杆菌沙门氏菌志贺菌1 1∶2－－－－2 1∶4－－－－3 1∶8－－++ +4 1∶16 + ++ ++ ++5 1∶32 + ++ +++ ++6 1∶64 ++ ++ +++ +++7 1∶128 +++ +++ +++ +++8 1∶256 +++ +++ +++ +++9－+++ +++ +++ +++对照组－－－－－MIC/(mg·mL －1)1.562 5 1.562 53.125 0 3.125 04 结论在单因素实验的基础上，通过四因素三水平的正交试验，得到了超声辅助提取薇甘菊叶中总黄酮的最优工艺.其中各因素对薇甘菊叶黄酮提取影响的大小顺序为B＞A ＞D＞C，即乙醇体积分数＞料液比＞超声功率＞超声时间.叶中总黄酮最佳提取工艺条件组合为B2A2D1C3，即:乙醇体积分数50%、料液比1∶30、超声功率50W、超声时间50 min，在此条件下，叶中总黄酮含量可达10.62%.抑菌试验结果表明，薇甘菊叶的黄酮提取液对常见的致病菌具有较好的抗菌活性，而且随着提取液中黄酮质量浓度的增加而增强.薇甘菊叶的黄酮提取液对不同的菌种抑制效果不同，其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，对大肠杆菌的抑制作用稍微次之，而对沙门氏菌和志贺菌的作用较弱，这可能与提取液所含的黄酮种类、含量以及提取液中的其他活性成分有关，原因还需要进一步深入研究.薇甘菊叶的黄酮提取液良好的抑菌活性预示着其在天然防腐剂开发利用方面的广阔前景.由于薇甘菊生长能力强，来源丰富，对有效成分开发，从而实现更好利用将具有重大意义.参考文献:［1］孔国辉，吴七根，胡启明.外来杂草薇甘菊(Mikania Micrantha H.B.K.)在我国出现［J］.热带亚热带植物学报，2000，8(1):27-28.［2］李鸣光，张炜银，廖文波，等.薇甘菊研究历史与现状［J］.生态科学，2000，19(3):41-45.Li M G，Zhang W Y，Liao W B，et al.The history and status of the study on Mikania Micrantha［J］.Ecologic Science，2000，19(3):41-45. ［3］Pimentel D，Zuniga R，Morrison D.Update on the environmentaland economic costs associated with alien-invasive species in 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野菊花的药理作用研究
野菊花的药理作用研究◎唐琴张改琴孙家宝和昊琦豆佳媛＊（作者单位：长沙经济开发区城建开发有限公司）图，如图二所示。
此外，在电气工程当中，对于关键位置要开启接零保护，例如：发动机金属外壳以及配电屏金属外壳保护。
对于实际工作内容的开展，还需要对电气传动设备受到接零保护给予保障，使得外部的某些供电系统直接连接传动系统有所降低，避免产生漏电问题之后不能开启漏电保护效果。
接零保护原则，是电气工程整个开展过程中一直要遵守的原则，对于相应的设备和设施，需要对系统的接零保护开展严格处理。
如果电气工程当中没有理想的施工环境，更需要将施工过程当中的接零保护工作提升，以便使电气工程工更具稳定性。
图二：漏电保护器接线图3.确保漏电保护装置的合理性。
对漏电保护装置的合理性给予保障，是将电气工程施工安全性提升的重要基础，在具体施工当中，需要借用人工的力量检测漏电保护装置，以便合理应用该项装置，有更好的技术保障。
施工开展时，人工检测漏电保护装置，可通过额定电压检测接零保护电路，进而使漏电保护装置保持理想的状态。
在检测该项装置时，不能一次通过，需要利用多次检测手段。
此外，还要对漏电保护装置严格挑选，合格的漏电保护气不但能阻隔漏电保护还能与漏电保护装置起到配合效果，完成告警。
在配置漏电保护装置时，需要与电气工程实际需求充分结合，进而对合理的漏电保护层级进行应用。
漏电保护器内部对于层级的应用，要依照电气工程制定的标准。
此外，对于保护器的连接，需要将电器的连接点合理降低，为规避设备出现超烧毁情况，还要对三级漏电防护措施进行应用。
四、结语总之，在建筑电气工程中，对于漏电保护技术的应用，与工程的安全性有着直接的联系。
为了避免出现设备以及人员出现漏电安全事故，要合理挑选漏电器的类型，开展等电位连接、始终坚持零线保护规范，确保漏电保护装置的合理性，结合工程提出的要求，完善管理以及维护工作，并对漏电保护技术做好系统的调整以及优化，可对电气工程的未来起到有力的推进效果。
菊花总黄酮的提取工艺
实验教学与科研工作。
吸光度值 Ａ
范围：１．９９６－１５．９６８（μｇ／ｍＬ）。工作曲线如图 １。
Ｃ／μｇ·Ｌ－１ 图 １ 工作曲线
２． ２ 不同溶剂和方法提取总黄酮 ２． ２． １ 水回流法
精确称取干燥菊花 ５．０２ ｇ，加入 ７５ ｍＬ 蒸馏水， 于 ６０ ℃水浴中温浸 ２ ｈ，滤出药渣，将药渣中加入 ４０ ｍＬ 蒸馏水，加热回流两次，每次 ３０ ｍｉｎ，滤出药渣 后合并滤出液，定容至 ５００ ｍＬ。精确取出 １．００ ｍＬ，减 压浓缩至浸膏，用甲醇溶解并稀释至 ５０．００ ｍＬ ，摇 匀后得水提液。 ２． ２． ２ 乙醇回流法
第 ３０ 卷第 ４ 期 ２００７ 年 ０４ 月
河北化工
Ｖｏｌ．３０ Ｎｏ．４ Ａｐｒ ． ２００７
菊花总黄酮的提取工艺
张晓媛， 雷和稳， 张文英 （河北化工医药职业技术学院，河北 石家庄 ０５００２６）
［ 摘 要］ 采用水回流法、乙醇回流法、超声提取法对菊花中总黄酮的提取工艺进行了研究。结果表明，乙醇回流法效果最佳
精确称取干燥菊花 ５．０６ ｇ，加入 ７５ ｍＬ 蒸馏水， 于 ６０ ℃水浴中温浸 ２ ｈ，滤出药渣，将药渣中加入 ４０ ｍＬ 蒸馏水，超声提取两次，每次 ３０ ｈ，滤出药渣后 合并滤出液，定容至 ５００ ｍＬ。精确取出 １．００ ｍＬ，减压
第４期
张晓媛等：菊花总黄酮的提取工艺
·４５·
浓缩至浸膏，用甲醇稀释至 ５０．００ ｍＬ ，摇匀后得超 声提取液。 ２． ２． ４ 样品的测定
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（上接第 １５ 页）
生药野菊花药用成分作用及提取进展研究
198科技资讯 SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATIONDOI：10.16661/ki.1672-3791.2019.19.198生药野菊花药用成分作用及提取进展研究①童淼 张楚楚 侯学雯 汪从雨 高玉婷 邓同乐*(中国计量大学生命科学学院药学系 浙江杭州 310000)摘 要：该文选取近几年来与生药野菊花相关的文献，重点论述野菊花总黄酮和挥发油的药理作用和提取工艺。
得出如下结论：野菊花的临床研究尚需加强，药理作用仍需发掘，有效成分提取工艺仍需优化，因此需要进一步加深研究，开发野菊花的应用也具有一定的前景。
关键词：野菊花 药用成分 药理功效 提取工艺中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1672-3791(2019)07(a)-0198-031 生药野菊花简介野菊花是菊科植物野菊( Chrysanthemum indicum L.) 的干燥头状花序。
性凉，味苦、辛，归肺肝二经，具有疏散风热、消肿解毒的功效。
能治疗疔疮痈肿、咽喉肿痛、头痛眩 晕等病症。
《神农本草经》称“菊花味苦、平、主风、头晕、肿痛、目欲泪出、皮肤死肌、恶见湿脾、久服利血气、轻身耐老延年[1-2]”。
2 生药野菊花的主要化学活性成分以及药理作用2.1 黄酮类药理作用黄酮类化合物是主要活性成分，与野菊花的药理药效密切相关，其含量高低也是评价其药效的主要标志[3-4]。
野菊花中含有的黄酮类化合物主要有槲皮素、木樨草苷、木樨草素、芹菜素和金合欢素-7-O-β-D葡萄糖苷等[5-6]。
2.1.1 免疫抗炎作用对这方面的药理作用也有不少人研究，如郑璐璐等人采用HPLC分析法[7]，初步确定野菊花中抗炎作用的药效组分。
后续还进一步比较了野菊花的水煎液与五味消毒饮之间的抗炎活性，将野菊花水煎液设置低、中、高3种浓度，共同用于因二甲苯而导致耳廓肿胀小鼠上，发现二者都有消肿能力，水煎液浓度越高抗炎消肿能力越明显。
野菊花中总黄酮的提取
野菊花中总黄酮的提取邓贺;钟政【摘要】目的：研究野菊花中总黄酮的最佳提取工艺。
方法采用正交试验，以提取次数、提取时间、提取温度、溶剂用量4个因素研究水提野菊花的最佳工艺。
结果最佳提取工艺为水提取野菊花2次，2次溶剂用量依次为8倍和6倍，提取温度100℃，提取时间都为40 min。
结论本文所用工艺提取野菊花总黄酮工艺简单、提取率高、操作控制容易、稳定性好、适合于工业化生产。
【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2015(000)034【总页数】2页(P29-29,31)【关键词】野菊花;总黄酮;提取【作者】邓贺;钟政【作者单位】国家食品药品监督管理总局一四六仓库，河北石家庄 050071;国家食品药品监督管理总局一四六仓库，河北石家庄 050071【正文语种】中文【中图分类】R282.710.3野菊花是菊科植物野菊的干燥头状花序，其主要成分为总黄酮，具有清热解毒、降血压、抗病毒、抑制血小板凝聚等功能[1-2] ，野菊花水剂可抑制金葡菌、大肠杆菌、痢疾杆菌等一般致病菌，且对异烟肼、链霉素和氨基水杨酸钠耐药或敏感的结核杆菌均有明显的抑菌作用，为了有效地开发和利用药材资源，充分提取野菊花所含的总黄酮等成分，我们采用正交试验的方法进行了制备工艺的研究。
1 仪器与试剂1.1 仪器：电子万用炉（天津泰斯特仪器有限公司）；旋转蒸发仪（上海亚荣生仪器厂）；752N型紫外光谱仪（上海广照光电科技有限公司）；电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）；高速离心喷雾干燥机（常州市振兴干燥设备厂）；蠕动泵（常州科健蠕动泵厂）；微型空气压缩机（上海力彪机械制造有限公司）；PHS-2酸度计（上海第二分析厂）；NDJ-1型黏度计（上海天平仪器厂）；电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）；Olympus-CH 型生物显微镜（日本进口）；烘箱（LAB供应集团）；电冰箱（购自青岛海尔集团）；棕色瓶、无色瓶（购自安国义通中药材有限公司）5000 mL圆底烧瓶，冷凝管。
野菊花中黄酮类物质的提取和鉴定
７一鼠 李 糖 葡 萄 糖 甙 （ ｃｃｔ Ａ ａｅ ｎ一７一ｒａ ｏｉ ｉ ｈｍｎ ｓ ．
ｌ ｈ ｕ ｎ ｓ ｙ ｍｅ ｅ ｄ ａ ｓ ｄ ｒ ａ ｏ ｅ Ｔ ｅ ｅ ｇ ｔ ｅ ｕ ｔ ｏ ． ９ ｍｇ ｇ Ｍｏｅ ｖ ｒ ｔ ｅ ｅｆ ｃ ｆｔ ｎ ｓ ｂ ｅ ｉ ｔｌ ｍｉ ｏ ｉ ｔｒａ ｔ ａ ｄ ｆ ｖ ｎ ． ｈ ｒ ｏ ｓ ｌ ｆ２ ２ ０ ／ ． ｇ ｔ ｎ ｎ ａ ｌ ｒ ｓ ｒ ｏ ｅ ， ｈ ｆｅ ｔｏ ｍｅ ｏ ｔ ｌ ｉ ａ
ｔ ｒ ｕ ｈ ｒａ ｔｎ ｔ Ｃ１一Ｚｎ ｐ ｗｄ ｒ Ｔｈ ｉ ｏ ｅ ｔ ｎ ｔ ｌ ｈ ｙ ａ ｈｅ ｕ ｗｅ ｅ ｍ ｅ ｓ ｒ ｄ ｗ ｔ ｓ ｅ ｓｏ ｆ ｈ ｏ ｇ ｅ ｃ ｉｇ ｗｉｈ Ｈ ｏ ｅ． ｅｒ ｃ ｎｔｎ ｓ ｉ ｈｅ ｗ ｄ ｃ ｒ ｓ ｎｔ ｍ ｍ ｒ ａ ｕ ｅ ｈ ａ ｄｉｐ ｒｉ ｎ ｏ ｉ ｉ
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响应曲面法优化野菊花中总黄酮的超声提取工艺
响应曲面法优化野菊花中总黄酮的超声提取工艺崔建强;赖普辉【摘要】以总黄酮得率为评价指标,采用单因素实验和响应曲面法实验优化野菊花中总黄酮超声提取工艺.确定最佳提取工艺为:乙醇体积分数60%、超声提取时间40 min、液料比15:1(mL:g)、超声提取温度50℃、超声功率1080 W,在此条件下,总黄酮得率可达0.881%.该提取工艺设计合理,为进一步研究野菊花中总黄酮的应用提供了科学依据.%Using total flavonoids yield as an evaluation index,we optimized the extraction process of total flavonoids from Chrysanthemum indicum by a single-factor experiment and a response surface methodology.The optimum extrac-tion process could be determined as follows:ethanol volume fraction of 60%,ultrasonic extraction time of 40 min,extrac-tion temperature of 50 ℃,liquid-solid ratio of 15 :1(mL:g),and ultrasonic power of 1080 W.Under above condi-tions,the total flavonoids yield reached 0.881%.The extraction process is designed rationally,which provides a scientific basis for the further research on the application of total flavonoids from Chrysanthemum indicum .【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2017(034)011【总页数】6页(P30-34,48)【关键词】总黄酮;超声波;响应曲面法【作者】崔建强;赖普辉【作者单位】陕西国际商贸学院医药学院,陕西西安 710246;陕西国际商贸学院医药学院,陕西西安 710246【正文语种】中文【中图分类】TQ461野菊花(Chrysanthemum indicum)是菊科植物野菊花的干燥头状花序，在我国分布广泛[1]。
菊花提取
菊花提取菊花是药食同源的植物，根据现有的文献记载，菊花的主要药学有效成分为黄酮类、三萜类化合物和精油，具有心血管疾病，抗病毒，抗炎等多种生理活性。
从菊花中已分离得到的黄酮类化合物有: 香叶木素、芹菜素、木犀草素、槲皮素。
邢振荣等人以挥发油，总糖，木犀草素为指标区分不同产地的杭菊；黄保民等采用均匀设计发优化怀菊花总黄酮提取工艺，表明乙醇浓度，溶媒体积，提取时间等是影响总黄酮含量的主要因素，王振忠等采用响应面法确认野菊花的最佳提取工艺参数为56.6%的乙醇浓度，提取温度为80℃，液固比为19.6，提取时间为3.2h，提取次数为1次，可得到总黄酮4.64%。
在以上文献的研究基础上，菊花总黄酮设定为菊花提取物的主要有效成分，以乙醇浓度、液固比、提取时间、提取温度作为优化提取菊花总黄酮参数，另外可考虑的因素有提取次数，。
先以均匀设计法来初步确定菊花总黄酮提取参数的大概方位，再以响应面法来进一步优实验仪器：烘箱、组织粉碎机、水浴锅、抽滤瓶、冷凝回流装置、冰水浴？紫外可见分光光度计、干燥设备实验药品：芦丁标准品、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇、实验步骤：1、将菊花放于烘箱70℃，24h烘干，组织粉碎机粉碎后备用2、取5g菊花粉，加至烧瓶，加入100ml 50%乙醇，浸泡10min之后，水浴锅40℃，回流1h，取出，冷水浴迅速降温，抽滤分离溶剂和沉渣，再用水回流30min，冷却后过滤，合并两次滤液，定容至250ml，按照黄酮的检测方法上机检测。
另外可考虑的辅助提取手段：预先处理原料：冷冻真空干燥法、酶解法，碱破坏细胞壁法提取过程：微波辅助、超声波辅助可用均匀设计表简化提取工艺。
4实验数据使用计算机多元高次回归处理后得到一个回归方程，根据回归方程求得最优组合值，根据最优组合值可以确定是个参数的最佳范围，在考虑不同实验因素关联的情况下，从而大大减少试验次数和缩短实验时间。
以均匀设计法得到的参数范围，再继续优化各个参数条件。
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脂， 萃取 ２次 后 置 于 １ ０ｍｌ容 量 瓶 中 ， ０ 加水 定 容 ， 摇
匀， 即得供 试品溶液 （ 浓度 为 １ ０ｍｇ・ ） ０ ｍＩ 。 １ ２ ３ 总 黄酮测定 ．． １ ２ ３ １ 对照 品溶 液配制 ． ．． 精密 称 取经 １ ０℃ 干燥 至恒 重 的芦 丁对 照 品 ２ ２ ５ ｍｇ 置于 ５ 量瓶 中 ， 乙醇 适量 ， 充 分溶 解 ， ， ０ｍＩ容 加 使
ｍＬ， 匀 ， 置 ６ｍｉ ； 加 ５ 硝 酸 铝 溶 液 ２ ０ｍＩ 混 放 ｎ再 ． ，
芦丁 对照 品（ 号 ：０ ０ ９ ０ ） 购 自中 国药 品生 批 ０８ ２ ７５ ， 物制 品检 定所 ； 菊花 ， 野 购于青 岛众 生大药 房 。 所用试 剂均为 分析纯 。
１ ２ ３ ２ 标 准 曲 线 的绘 制 ． ．． 精 密 吸 取 芦 丁 对 照 品 溶 液 ０ ５ｍＩ １０ｍＩ ２ ０ ． … ． 、
１ 实 验
１ １ 材 料 、 剂 与 仪 器 ． 试 ’
ｍＬ ３ ０ｍＩ ． 、 ． …６ ０ｍＩ， 别 置 于 ２ 、 ． ４ ０ｍＬ ５ ０ ｍＩ 分 ５ ｍＩ容量瓶 中， 水至 ６ｍＩ， 加 再加 ５／ 硝 酸钠 溶液 １ 亚 ９ ６
摘
要 ： 野 菊 花 中 总黄 酮含 量 作 为考 察 指 标 ， 以 用正 交 实验 法优 化 野 菊 花 总 黄 酮 超 声提 取 工 艺 ， 考察 超 声 波 法 对 并
总 黄 酮 抑 菌 活性 的影 响 。 结 果表 明 ， 菊花 总 黄 酮 的 最 佳提 取 工 艺为 ： 超 声 功 率 ２ ０ Ｗ 条 件 下 ， ｌ 野 在 ０ 用 ２倍 量 ４ 的 乙 ５
１ ２ 方 法 ．
ＣＤ Ｉ ） Ｕ１ 的干燥 头 状 花 序 ， 我 国各 地 均 有 分 布 。其 ． 在
性微寒 、 苦 ， 肺 、 二 经 ， 有 疏风 清 热 、 肝 明 目 味 归 肝 具 平
的功效 。现代药 理研究 表 明 ， 野菊 花具有 降血 压 、 张 扩 冠状动 脉 、 防止冠 脉粥样 硬化 等作 用 ， 临床用 于治疗 高 血压 和冠心病 。野 菊花 被 称 为 中草 药 中的 “ 谱 抗 ］ 广 生素 ” 入药或茶 饮 ， ， 能防治感 冒、 痢 、 炎 、 秘等 多 菌 肠 便 种疾病 ， 因其产 量高 、 价格便 宜 、 用方便 ， 饮 已作为保 健
野 菊 花 是 菊 科 植 物 野 菊 花 （ ｈ ｙａ ｔｅ ｒ ｉｄ — Ｃ ｒ ｓｎｈｍｕｎ ｎ ｉ
ＵＶ２ ２ １ ０型紫 外 分 光 光 度 计 ， 日本 岛 津 ； Ｌ １ ０ Ｄ ２ ８ 型超声仪 ， 浙江 象 山县海 天 电子 仪 器厂 ； Ａ１０ Ｆ １ ４型 电 子 天平 ， 上海 天平 仪器 厂 。
放 冷 ， 乙 醇 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 得 对 照 品溶 液 （ 度 用 摇 即 浓
为 ０ ５ｍｇ・ｍＩ ） ． 。
含量为考 察指标 ， 采用 正 交 实验 法 对 其提 取 工 艺进 行 研究， 以期 为科学 、 充分地 利用 野菊 花资源 及工 业化生 产 总黄酮 提供参考 。
醇 提取 １ ｉ。此 时 野 菊 花 总黄 酮 的得 率达 到 ２ ８ 。该 工 艺 简 单 可 行 、 现 性 好 ， 超 声 波 对 总 黄 酮抑 茵 活 性 没 有 ５ｒ ｎ ａ ．６ 重 且
影 响 ， 用 于 工 业化 生产 。 适
关 键词 ： 菊 花 ； 黄 酮 ； 取 工 艺 ； 菌 活性 野 总 提 抑 中 图分 类 号 ： ５ ． Ｒ ２ ４ ２ Ｏ ６ ８ ２ ８ ． 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： ６ ２ ４ ５ ２ ０ ） ２ ０ ７ —０ １ ７ —５ ２ （ ０ ８ １ — ０ ２ ３
收 稿 日期 ：０ ８ ７ ８ ２ ０ —０ —１
摇 匀 ， 置 ６ｍｉ ； 放 ｎ 再加 ４ 氢氧化钠 试液 １ 加水 ＯｍＩ，
至 刻度 ， 匀 ， 置 １ ｎ 摇 放 ５ｍｉ 。以相 应 的试 剂 溶液 为 空
囵
２８ｏ ５ｏ２ Ｃ ０，Ｉ 亿 学与生物 互程 ０Ｖ． Ｎ １ ｈ ２
ｅ ｉｔｙ ＆ Ｂｉｅ ｇ ｎ ｅ ｉｇ ｍ ｓｒ ｏ ｎ ｉｅ ｒｎ
超 声提 取 野 菊花 总黄 酮及 其抑 菌活 性 的研 究
朱庆 书 ， 文英 赵 （ 岛科技 大学化 工学 院， 东 青 岛 ２ ６ ４ ） 青 山 ６ ０ ２
饮料 广为应用 。
提取 溶 剂 ， 乙醇 体 积 分 数 、 取 时 以 提
间 、 剂用量 、 溶 超声 功率 为 考察 因素 ， 总黄 酮得 率 为 以 考察 指标 ， 取 Ｌ （ 正交 表进行 实验 。 选 。 ３） １ ２ ２ 供试 品溶液 制备 ．． 称取 １ 野 菊花粗 粉 ９ ， 正交 实验设 计进 行 ０ｇ 份 按 回流提取 ， 并 提取 液 ， 热 过 滤 ， 缩 ， 石 油 醚 脱 合 趁 浓 用
黄酮类化 合物是 野菊 花 中非 常重要 的一 类次级 代
谢 产物 ， 具有 多种药 埋 作用 ， 中包 括抗 氧化 作 用 、 其 抗
病 毒作用 、 消炎作用 和抗基 因诱 变作用 ， 是治 疗心 血管 疾 病药物 的主要成 分 ， 对心 血管 疾病 、 免疫 系统疾病 有
显 著药理 作 用 。黄 酮 类 化 合 物作 为 野 菊 花 的 有 效 成 分 ， 药理作 用与所 含 的黄酮成 分密 不可分 。 其 超声 提取 因其 独 特 的提 取 机 制 与 理 想 的提 取 效 果， 在黄酮 类成 分 的提 取 中显示 了 明显 的优 势口 。为 ］