环磷酰胺化疗导致小鼠卵巢功能损伤模型的建立
卵巢储备功能减退和卵巢早衰模型小鼠的差异蛋白质组学研究
卵巢储备功能减退和卵巢早衰模型小鼠的差异蛋白质组学研究李晓荣;仲佳雯;秦岭;高婷;罗玉雪;马小红【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2024(45)1【摘要】目的应用蛋白组学技术探究卵巢储备功能减退(decrease ovarian reserve,DOR)和卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)及正常对照组之间的蛋白质差异,并对差异蛋白质进行分析进一步阐明卵巢储备功能下降和卵巢早衰发生的可能机制。
方法一次性腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg联合白消安6 mg/kg制备DOR模型小鼠,一次性腹腔注射环磷酰胺120 mg/kg联合白消安12 mg/kg制备POF模型小鼠,药物注射后连续观察小鼠动情周期,以动情周期紊乱判定造模是否成功。
成功后筛选差异蛋白,运用生物信息学方法将所鉴定的差异蛋白进行功能注释及富集分析,分析其可能机制。
结果筛选出DOR中差异倍数在1.2倍以上的差异蛋白有148个,POF中有149个;富集结果显示,DOR组的差异表达蛋白主要参与了维生素B6代谢、磷酸吡哆醛合成、氧化应激等生物学过程,并在维生素B6代谢、α-亚麻酸代谢、PPAR信号等通路富集;POF组的差异表达蛋白主要参与了脂质代谢、炎症反应等生物过程,并在鞘糖脂生物合成、花生四烯酸代谢、核糖体等通路富集。
结论DOR和POF的发病机制较复杂,都参与氧化应激、炎症反应等生物学过程;α-亚麻酸信号通路可能是参与DOR发生的一条重要通路,HIST1H1C、CA3、FABP4可能是其发生的重要靶点;花生四烯酸代谢信号通路可能是POF发生的一条重要通路,HIST1H1C、D2HGDH、CYP4F3可能是其发生的重要靶点。
【总页数】9页(P68-76)【作者】李晓荣;仲佳雯;秦岭;高婷;罗玉雪;马小红【作者单位】宁夏医科大学总医院生殖医学中心;宁夏医科大学中医学院;宁夏医科大学银川市中医医院【正文语种】中文【中图分类】R711.75;R392【相关文献】1.卵巢储备功能下降及卵巢早衰动物模型研究进展2.晚期卵巢癌的血浆蛋白质组学模型用于早期卵巢癌诊断的初步研究3.基于蛋白质组学的补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征痰湿证患者血清差异蛋白的研究4.股骨头缺血性坏死组织差异表达蛋白质的鉴定和功能蛋白质组学初步研究5.卵巢储备功能减退相关基因及组学研究进展因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立
环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立高芃;钱嘉林;刘长喜;严卫星【期刊名称】《环境与职业医学》【年(卷),期】2004(21)4【摘要】[目的 ]建立肿瘤化疗免疫抑制动物模型 ,为建立保健食品减轻化疗毒副作用功能的评价方法提供科学依据。
[方法 ]给予C57BL/6J正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔内注射不同剂量的环磷酰胺 (CP) ,隔日连续腹腔注射 4～ 5次 ,观察对小鼠免疫学指标及肝肾功能的影响。
[结果 ]正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔注射 2 0、5 0、10 0mg/kg体重的CP后 ,各剂量组均出现不同程度的免疫抑制和肝肾功能损伤。
①正常小鼠 2 0mg/kg体重以上剂量组 ,白细胞计数、抗体生成细胞以及巨噬细胞功能显著下降 ,谷草转氨酶 (AST)升高 ;5 0mg/kg体重剂量组的脾脏指数下降 ;50mg/kg体重以上剂量组天然杀伤细胞(NK)细胞活性均出现显著下降 ,以及谷丙转氨酶、尿素的升高。
②荷瘤小鼠 2 0mg/kg体重以上剂量组白细胞计数、巨噬细胞功能显著下降 ,5 0mg/kg体重以上剂量组脾脏指数、NK细胞活性、抗体生成细胞功能均出现显著下降 ,以及谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素的升高。
③正常小鼠注射 60mg/kg体重的CP后 ,血清白细胞介素 2及肿瘤坏死因子均出现显著下降 ;荷瘤小鼠注射 60mg/kg体重的CP后 ,血清白细胞介素 2出现显著下降。
[结论 ]给予C57BL/6J正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔注射 2 0 5 0mg/kg体重的CP ,隔日连续 4 5次 ,即可建立免疫抑制动物模型。
建议采?【总页数】5页(P314-318)【关键词】荷瘤小鼠;免疫抑制;CP;体重;剂量;正常小鼠;环磷酰胺;下降;腹腔注射;抗体生成细胞【作者】高芃;钱嘉林;刘长喜;严卫星【作者单位】中国疾病预防控制中心营养与食品安全所;国家食品药品监督管理局【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R730【相关文献】1.不同浓度环磷酰胺和地塞米松对小鼠免疫抑制模型建立的影响 [J], 张涵淇;王娇;崔圆圆;胡鑫;王德彬;2.小剂量环磷酰胺治愈荷膀胱癌小鼠动物模型的建立 [J], 李墨林;姜妙娜;舒晓宏;崔晓栋;李传刚;贾玉杰3.不同浓度环磷酰胺和地塞米松对小鼠免疫抑制模型建立的影响 [J], 张涵淇;王娇;崔圆圆;胡鑫;王德彬4.环磷酰胺免疫抑制小鼠模型的建立及其在肾包膜下移植中应用 [J], 唐超明;李汉贤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
环磷酰胺辅助化疗对不同年龄乳腺癌患者卵巢功能的损伤情况及机制研究
・850・现代生物医学进展biomecLcnj Progress in Modern Biomedicine VoL21NO.5MAR.2021doi:10.13241/ki.pmb.2021.05.010环磷酰胺辅助化疗对不同年龄乳腺癌患者卵巢功能的损伤情况及机制研究*刘思旋李晓林陈璇马丽思翁怀玉宗祥云△(上海交通大学附属第六人民医院乳腺外科上海200233)摘要目的：以月经变化情况及血清激素水平为观察指标,探讨环磷酰胺辅助化疗方案对绝经前不同年龄段乳腺癌患者卵巢功能的损伤情况及可能的机制研究。
方法：收集2017年1月至2018年12月期间在我院接受环磷酰胺辅助化疗的绝经前乳腺癌患者77例患者年龄范围为26-48岁，并按年龄分为两组:M35岁组为16例；>35岁组为61例调查研究两组患者化疗前后的月经情况，以及血清激素水平(E、FSH、AMH)。
同时进行动物实验，采用单剂量环磷酰胺(200mg/kg)处理不同月龄组(3月龄和6月龄)雌性C57BL/6J小鼠，每组小鼠12例.在环磷酰胺处理前及处理后一周，检测小鼠血清AMH水平，计数小鼠卵巢卵泡数量结果：环磷酰胺化疗后，>35岁组与M35岁组间比较,>35岁组闭经率更高，复经率更低，血清AMH和E：水平下降幅度更大(P<0.05), FSH水平升高幅度也大于M 35岁组，但差异无明显统计学意义(P>0.05).不同年龄组内比较,W35岁组患者化疗后的血清AMH 和E?下降水平无明显差异(P>0.05)；血清FSH水平明显升高(M0.05),而>35岁组的患者化疗后，血清AMH和E：水平明显下降,FSH水平明显升高，差异均有统计学意义(片0.05)不同月龄组小鼠环磷酰胺处理前后，血清AMH水平明显下降，卵巢原始卵泡和生长卵泡数明显较少，差异均有统计学意义(P<0.05),且6月龄组小鼠下降程度更明显(P<0.05).结论：环磷酰胺辅助化疗方案明显损伤患者卵巢功能，且对年龄越大者损伤程度越严重，更易导致不可逆性卵巢损伤关键词:环磷酰胺；卵巢损伤；抗缪勒氏管激素中图分类号：R737.9;R730.53文献标识码：A文章编号：1673-6273(2021)05-850-07Study on the Damage and Mechanism of Cyclophosphamide-assistedChemotherapy on Ovarian Functionin Patients with Breast Cancer at Different Ages*LIU Si-xuan,LI Xiao-lin,CHEN Xuan,MA Li-si,WENG Huai-yu,ZONG Xiang-yurr' (Department of B reast Surgery,Shanghai Jiao Tong University Affiliated Sixth People's Hospital,Shanghai,200233,China) ABSTRACT Objective:To study the damage of cyclophosphamide adjuvant chemotherapy on ovarian function in different age groups of premenopausal breast cancer patients and the possible mechanism,the changes of menstruation and serum hormone level were observed.Methods:77premenopausal breast cancer patients who received cyclophosphamide adjuvant chemotherapy in our hospital from January2017to December2018were collected.The age range of the patients was26-48years old,and they were divided into two groups by age:16cases in the group of S35years old and61cases in the group of>35years old.To investigate the menstruation and serum hormone levels(E,FSH,AMH)of the two groups before and after chemotherapy.At the same time,a single dose of cyclophosphamide(200mg/kg)was used to treat female C57BL/6J mice of different age groups(3and6months),12mice in each group.Before and one week after cyclophosphamide treatment,the serum AMH level and the number of ovarian follicles were measured. Results:After cyclophosphamide adjuvant chemotherapy,the>35-year-old group had a higher amenorrhea rate and lower menstrual recovery rate than the S35-year-old group.The levels of serum AMH and E2decreased more significantly(P<0.05),and the increase of FSH levels was greater than S35year-old-group,but the difference was not statistically significant(P>0.05).Comparing within different age groups,there was no significant difference in the levels of serum AMH and E2after chemotherapy in patients S35years old(P> 0.05);but the levels of serum FSH significantly increased after chemotherapy(P<0.05).In>35-year-old group,serum levels of AMH and E2decreased significantly,and FSH levels increased significantly after chemotherapy.The differences were statistically significant(P<0.05).Before and after cyclophosphamide treatment in mice of different month-old groups,serum AMH levels decreased significantly,and the number of ovarian primordial follicles and growing follicles was significantly less.The differences were statistically significant(P<0.05),and the decrease was more significant in the6-month-old group(P<0.05).Conclusions:Cyclophosphamide adjuvant chemotherapy significantly damages the ovarian function of patients,and the older the patients are,the more serious the damage is,the more likely to *基金项目：上海市科学技术委员会西医引导项目(15411966500)作者简介:刘思旋(1994-),女,硕士研究生，主要研究方向：乳腺癌的诊疗，电话：怡217678801,E-mail:***************△通讯作者淙祥云(1974-),男，研究生导师,副教授，主要研究方向：乳腺癌的诊疗,E-mail:*****************(收稿日期：2020-07-23接受日期：2020-08-18)现代生物医学j o Progress in Modem Biomedicine VoL21NO.5MAR2021・851・lead to irreversible ovarian damage.Key words:Cyclophosphamide;Ovarian damage;Anti-Mullerian hormone(AMH)Chinese Library Classification(CLC):R737.9;R730.53Document code:AArticle ID:1673-6273(2021)05-850-07刖g近年来，由于乳腺癌诊疗手段的完善，乳腺癌的死亡率持续下降，早期5年生存率高达90%吓。
烷化剂联合应用建立小鼠卵巢早衰模型的初步研究
Ｋ ｅ ｙ Ｌ ｏ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｆ ｅ ｒ ｔ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ Ｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｍａ ｉ ｎ ｔ ｅ ｎ ａ ｃ ｅ ｆ ｏ Ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｆ ｏ Ｅ ｄ ｕ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， Ｎ ｉ ｎ ｇ ｘ ｉ ａ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｙ ｉ ｎ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ ７ ５ ０ ０ ０ ４， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ６—７ ｗｅ ｅ ｋ—ｏ ｌ ｄ Ｉ Ｃ Ｒ ｆ ｅ ｍａ ｌ ｅ ｍｉ ｃ ｅ ｗ ｅ ｒ ｅ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｔ ｏ ｗ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ： １ ５ ０ ｍｇ・ｋ ｇ一 ｃ ｙ ｃ ｌ ｏ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｍｉ ｄ ｅ ａ ｎ ｄ ２ ０ ｍｇ ・ｋ ｇ 一 ｂ ｕ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｎ
安一次性 腹腔注射后可引起小 鼠卵巢 内分泌功能紊乱和卵巢组织的 明显损伤 ， 导致 卵巢早 衰。
Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｆ ａ ｌ ｋ ｙ ｌ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ ｓ ｏ ｎ ｃ ｏ ｎ ｓ ｔ ｒ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｅ ｍａ ｔ ｕ ｒ ｅ ｏ ｖ ａ ￣ａ ｎ ｆ ａ ｉ ｌ ｕ ｒ ｅ ｍｏ ｄ ｅ ｌ
・ 论
著 ・
烷 化 剂联 合应 用建 立小 鼠 卵巢 早 衰模 型 的初 步 研 究
孙 苗， 于 佳， 马 文智 ， 马会 明 ， 杨 延周 ， 蒲 静， 曹 秀琴 ， 张 宁， 裴 秀英 ， 王 燕 蓉
［ 摘要 ］ 目的 探索烷化 剂联 合应 用在构建 小 鼠卵巢早 衰 （ Ｐ Ｏ Ｆ） 模型 的作用及 效果 。方 法 以 ６～７周 龄
苯与环磷酰胺联合建立小鼠再障模型的实验研究
ｋ ）ｏｃ ａ ｒ ｅｋ ｈ ａａ ｅｅ ｓ ｄｗ ｒ ａ ｌ ｗ ：ｇｎｒｌ ｏｄｔ ｎ ｅ ｐ ｅ ｌ ｌｏ ｍ ａ ，ｂｎ ａｒ ｍｅｒ ｇ ｎｅａｄｙｆ ｗ ｅ．Ｔ ｅｐｒｍ ｔ ｔ ｔ ｅ ｓｆ ｌ ｓ ｅｅａ ｃｎ ｉｏ ，ｐ ｒ ｈｒ ｏｄｓ ｅｒ ｏｅｍ ｒ ｗ ｓ ａ， ｏａ ｓ ｒ ｅｅ ｅ ｏｏ ｉ ｉ ａｂ ｏ
Ｃｙ ｌ ｐｈ ｓ ｈ ｃ ｏ ｏ ｐ ａｍｉ ｎ Ｍ ｉｅ ｄｅ ｉ ｃ
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苑 晓磊 ，李梅 君
（ 辽宁医学院 ，辽宁 锦州 １ １０ ） ２０ １
【 摘要】 目的 探讨苯和环磷酰胺联合建立小鼠再生障碍性贫血模型的方法。方法 按 ２０ Ｌｋ ．ｍ ／ｇ于昆明种雄性小
鼠皮下注射苯油混合液 ，每天 １次，隔 日给 药；并 以环磷 酰胺 溶液 （０ ｇｋ ）腹腔 注射 ，每 日 １次共 ７次。于给 药前及后 ５ ｍ／ｇ
ｏ ｓ Ｋ ｎ ｎ ａ ｃ ｅｅｉ ｅｔ ｉ ｅｚｎ ＋ｃｒ ｏｌ ２０ ｌｋ ）ｏｃ ｖｒ ｔｏｄ ｙ ａｄｗｔ ｃｃｏｈｓｈｍｉ ５ ｍｇ ｄ ｕ ｍｉ ｍ ｌ ｍｉ ｗ ｒ ｎ ｃ ｄｗｔ ｂｎｅ ｅ ｏｎ ｉ （． ｍ／ ｇ ｎｅｅｅｙ ｗ ａｓ ｎ ｉ ｌｐｏｐａ ｄ ０ ／ ｇ ｅ ｅ ｊ ｅ ｈ ｈｙ ｅ（
环磷酰胺不同剂量及停药周期构建小鼠卵巢早衰动物模型比较研究
环磷酰胺不同剂量及停药周期构建小鼠卵巢早衰动物模型比较研究莫金桦;胡鸿;颜秋霞;李鹏东;陈彩蓉【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2024(33)3【摘要】目的比较环磷酰胺(CTX)不同剂量和停药周期构建的小鼠卵巢早衰(POF)动物模型,寻找最佳造模方式,为进一步研究POF提供更为适用的实验模型。
方法8周龄动情周期规律的C57BL/6雌性小鼠共40只,随机分成5组:CON(对照组),CTX80(80 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX100(100 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX120(120 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX150(150 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续腹腔注射10 d,CON组注射生理盐水,其余组注射不同剂量CTX。
记录小鼠体重、动情周期和卵巢脏器系数等,比较得出CTX诱导POF模型最佳暴露剂量。
使用最佳CTX暴露剂量重新造模,随机分为模型组和对照组,分别在停药后第1、2、3、4周,检测血清性激素,计数各级卵泡等,比较得出CTX诱导POF模型最佳停药周期。
结果(1)研究最佳造模剂量时,CTX150死亡2只,而CTX80小鼠仍有完整的动情周期,说明这两种剂量并非最佳。
CTX各组在暴露过程中体重呈进行性下降,停止暴露后体重开始回升,但至停药第7天各组体重仍显著低于CON组(P<0.05)。
停药第7天各CTX组卵巢脏器系数均显著低于CON组(P<0.01),CTX100最低(P<0.001),但各CTX组间差异无统计学意义(P>0.05)。
考虑到尽量缩小药物对实验动物伤害的伦理要求,得出CTX诱导卵巢早衰模型的最佳暴露剂量为100 mg·kg^(-1)·d^(-1)×10 d。
(2)研究最佳停药周期时,模型组停药后第1、2、3、4周血清抗苗勒管激素(AMH)水平、雌二醇(E_(2))水平、原始卵泡、初/次级卵泡均显著低于同期对照组(P<0.05),卵泡刺激素(FSH)水平在第1、3、4周均显著高于同期对照组(P<0.05),而第1、2、4周的闭锁卵泡计数均显著高于同期对照组(P<0.05),均表现出POF典型特征。
环磷酰胺对小鼠遗传和生殖毒性影响的研究对雄性小鼠生殖细胞的影响
环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞的遗传损害作用。
参考文献
1 张桥. 卫生毒理学基础. 北京: 人民卫生出版社, 2001. 249 252. 2 辛 华, 邵红 莲, 车 大年, 等. 细胞生 物学实 验. 北 京: 科学 出版 社,
2001. 176 177. 3 祝寿芬, 仇玉兰, 王仲霞. 三 氧化二砷 对小鼠精 子形态 的影响. 卫
环磷酰胺对小鼠遗传和生殖毒性影响的研究(1)--对骨髓细胞微核和染色体的影响
环磷酰胺对小鼠遗传和生殖毒性影响的研究(1)--对骨髓细胞微核和染色体的影响贾庆军;郭魁亮;刘天鹏;冯长龙;杨录军;周燕虹【期刊名称】《白求恩军医学院学报》【年(卷),期】2006(004)001【摘要】目的探讨不同剂量的环磷酰胺对小鼠骨髓细胞微核和染色体的影响.方法骨髓细胞微核试验,40只小鼠随机分为4组,3个实验组分别腹腔注射环磷酰胺10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg,于染毒后24 h、48 h取小鼠胸骨髓,计数小鼠骨髓细胞微核率;骨髓染色体畸变试验,16只小鼠随机分为实验组和对照组,实验组小鼠腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg,连续5 d染毒,第5 d染毒后6 h取双侧股骨骨髓,计数小鼠染色体畸变率,评价环磷酰胺对小鼠的毒性作用程度.结果小鼠腹腔注射环磷酰胺各剂量组骨髓细胞微核发生率显著高于对照组(P＜0.05);染色体畸变率亦高于对照组,且有非常显著性差异(P＜0.01).结论腹腔注射环磷酰胺可诱导小鼠染色体损伤.【总页数】2页(P6-7)【作者】贾庆军;郭魁亮;刘天鹏;冯长龙;杨录军;周燕虹【作者单位】050081,石家庄,白求恩军医学院;050081,石家庄,白求恩军医学院;050081,石家庄,白求恩军医学院;050081,石家庄,白求恩军医学院;400038,重庆,第三军医大学预防医学系卫生毒理教研室;400038,重庆,第三军医大学预防医学系卫生毒理教研室【正文语种】中文【中图分类】R979.1;R994.1【相关文献】1.环磷酰胺对小鼠遗传和生殖毒性影响的研究(2)--对雄性小鼠生殖细胞的影响 [J], 贾庆军;刘天鹏;郭魁亮;冯长龙;杨录军;周燕虹2.烹调油烟对小鼠骨髓细胞染色体畸变率和微核率影响的研究 [J], 让蔚清;李东阳3.环磷酰胺对小鼠骨髓细胞微核率的影响作用研究 [J], 王文蔚;方芳;李春明4.艾灸对环磷酰胺诱导小鼠骨髓细胞微核率的影响 [J], 魏明俊;叶卓明5.环磷酰胺诱导小鼠骨髓细胞微核的影响因素的研究 [J], 余明泽;刘以农;蒋中仁;谢惠萍;葛宇杰;敬明武;郭明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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1． 1 实验药物 CTX 为江苏恒瑞医药股份有限公司产品（ 粉剂，
200 mg / 支） ，实验时用生理盐水配成相应浓度的水 溶液注射。 1． 2 实验动物及给药方案
40 只 SPF 级 8 周龄 C57BL /6 品系雌性小鼠，体 质量（ 18 ± 2） g，由上海斯莱克实验动物有限责任公 司提供，动物生产许可证号码为 SCXK （ 沪） 2007 － 0005，使用许可证号码为 SYXK（ 沪） 2003 － 0026。饲 养在 23 ℃ ～ 25 ℃ 室内，光照 12 h，自由饮食。观察 1 周后行阴道涂片，选取有正常动情周期的小鼠用于 实验。设定第 0、3、7、14、35 天 5 个时间点，于第 0 天 断颈处死处于动情间期的小鼠作为对照组（ n = 8） ， 其余腹腔一次性注射 75 mg / kg CTX，分别于第 3、7、 21、35 天分批（ n = 8） 断颈处死处于动情间期的小鼠。 1． 3 取材
［摘要］ 目的 探索建立化疗后导致小鼠卵巢功能损伤模型的方法。方法 以 C57BL /6 雌性小鼠为研究对象，以 75 mg / kg 的剂
量一次性腹腔注射环磷酰胺，观察小鼠一般情况、动情周期、血清雌激素（ 雌二醇） 水平以及卵巢组织的形态学改变、各级卵泡数
变化、抗苗勒管激素分泌情况和组织纤维化程度。以未注射环磷酰胺小鼠作为对照。结果 与对照组比较，环磷酰胺注射小鼠
化疗和放疗是治疗恶性肿瘤以及防止肿瘤复发 的主要方法，但 放 化 疗 不 仅 会 带 来 骨 髓 造 血 和 免 疫 功能的抑制，还会对女性性腺造成损害，使卵泡（ 原 始卵泡数目在胚胎期已固定） 过早排空，导致卵巢萎 缩，间 质 纤 维 化，原 始 卵 泡 减 少，出 现 卵 巢 功 能 的 过
早衰竭（ premature ovarian failure，POF） ［1］。POF 是指 第二性征发育正常的女性在 40 岁以前出现持续闭 经和性器官 萎 缩，并 伴 有 血 清 卵 泡 刺 激 素 （ folliclestimulating hormone，FSH） 和 黄 体 生 成 素 （ luteinizing hormone，LH） 升高，雌激素降低等的综合征，包括月
好方法。
［关键词］ 卵巢功能损伤； 化疗； 动物模型； 小鼠
［DOI］ 10． 3969 / j． issn． 1674-8115． 2011． 10． 009
［中图分类号］ R711
［文献标志码］ A
Establishment of mouse model of cyclophosphamide-induced ovarian failure
［Abstract］ Objective To establish the mouse model of chemotherapy-induced ovarian failure． Methods Female C57BL /6 mice were intraperitoneally injected with cyclophosphamide at the dose of 75 mg / kg． The general conditions， estrous cycles， serum estrogen ( estradiol) levels， morphology of ovarian tissues， changes of numbers of follicles， secretion of anti-Mullerian hormone and tissue fibrosis of mice were observed． Mice without cyclophosphamide injection were served as controls． Results Compared with controls， the serum estrogen level and secretion of anti-Mullerian hormone of ovarian tissues decreased， there were significant stromal hyperplasia and fibrosis in ovarian tissues， and the number of follicles reduced in mice injected with cyclophosphamide． Conclusion Intraperitoneal injection of 75 mg / kg cyclophosphamide may cause obvious ovarian failure， and the changes in reproductive endocrine and ovarian histopathology are similar to those of chemotherapy-induced ovarian failure in female patients in clinics． It can be used to establish the animal model of chemotherapy-induced ovarian failure due to its simplicity， feasibility， high success rate and low mortality． ［Key words］ ovarian failure; chemotherapy; animal model; mouse
［基金项目］ 上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院院内基金（ 3030448） ； 上海交通大学医工合作面上项目（ YG2010MS66） （ Foundation of the International Peace Maternity and Child Health Hospital affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine，3030448； Shanghai Jiaotong University Foundation，YG2010MS66） 。 ［作者简介］ 王方圆（ 1983—） ，女，硕士； 电子信箱： sunflowerwang113@ gmail． com。 ［通信作者］ 赖东梅，电子信箱： laidongmei@ hotmail． com； 韩 伟，电子信箱： weihan@ sjtu． edu． cn。
王方圆1 ， 谢 超2 ， 程蔚蔚1 ， 韩 伟3 ， 赖东梅1
（ 1． 上海交通大学 医学院附属国际和平妇幼保健院中心实验室，上海 200030； 2． 上海交通大学 农业与生物学院 上海市兽医生 物技术重点实验室，上海 200240； 3． 上海交通大学 药学院再生组学研究室，上海 200240）
No． 10
王方圆，等： 环磷酰胺化疗导致小鼠卵巢功能损伤模型的建立
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经失调、闭经、不孕、潮热、出汗、骨质疏松等，甚至引 发泌尿系统和心血管系统疾病［2］。化疗对卵巢的损 伤与年龄有 关，性 腺 损 伤 的 发 生 率 随 年 龄 的 增 长 而 升高。化疗药物种类、治疗持续时间、化疗药物的累 积剂量均为卵巢损伤的影响因素［3］。如何在化疗时 保护卵巢功能和生育能力是亟待解决的问题。本实 验以对 卵 巢 毒 性 较 强 的 化 疗 药 物 环 磷 酰 胺 （ cyclophosphamide，CTX） 建立稳定的化疗导致卵巢功能损 伤的小鼠模型，为深入研究 POF 的发病机制和治疗 方法提供实验依据。
WANG Fang-yuan1 ， XIE Chao2 ， CHENG Wei-wei1 ， HAN Wei3 ， LAI Dong-mei1 ( 1． Central Research Laboratory， the International Peace Maternity and Child Health Hospital， Shanghai Jiaotong University School of Medicine， Shanghai 200030， China; 2． Shanghai Municipal Key Laboratory of Veterinary Biotechnology， School of Agriculture and Biology， Shanghai Jiaotong University， Shanghai 200240， China; 3． Laboratory of Regeneration Medicine， School of Pharmacy， Shanghai Jiaotong University， Shanghai 200240， China)
·1398·
上海交通大学学报（ 医学版） Journal of Shanghai Jiaotong University （ Medical Science）
［文章编号］ 1674-8115（ 2011） 10-1398- 05
Vol． 31 No． 10 Oct． 2011
·论 著·
环磷酰胺化疗导致小鼠卵巢功能损伤模型的建立
血清雌二醇水平降低，卵巢组织抗苗勒管激素分泌减少，卵巢组织间质增生、纤维化明显，各级卵泡数目减少。结论 75 mg / kg
的剂量一次性腹腔鼠生殖内分泌和卵巢组织学的变化与临床上化疗导致
卵巢功能损伤患者的情况相似。该方法简便易行、造模时间短、成功率高、死亡率低，是建立化疗导致卵巢功能损伤动物模型的较
摘小鼠眼球以取血，4 ℃ 放置过夜后，5 000 × g 离心 5 min，分离血清于 － 20 ℃ 保存。取小鼠左右两 侧卵巢，固定后常规石蜡包埋、切片。 1． 4 检测指标 1． 4． 1 一般情况的观察 包括体质量、进食、排便 和活动情况。注射 CTX 时测体质量 1 次，注射完毕 后每天测体质量并观察小鼠一般情况。 1． 4． 2 动情周期的确定 每天 9： 00 取自制微细棉 签蘸以 0． 9% 生理盐水后，轻轻于小鼠阴道内旋转 1 圈，行阴道涂片，用 95% 乙醇固定 5 min，显微镜下 观察细胞的种类和形态。观察小鼠阴道口径的变化 及充血状态，结合阴道涂片检查结果，判断小鼠性周 期的各个时期。①动情前期： 大量膨大的有核上皮 细胞及少 量 角 化 上 皮 细 胞； 阴 道 开 口 增 大，充 血 肿 胀。②动情期： 大量无核角化上皮细胞及少量有核