miR-34a调控下游基因FUT8表达介导乳腺癌多药耐药的实验验证
miR-378通过靶向RAB11A促进乳腺癌细胞系增殖和迁移
·论著·摘要目的探讨miR-378在乳腺癌细胞系表达及作用机制。
方法应用TargetScan 分析miR-378的作用靶基因RAB11A 。
应用RT-PCR 检测乳腺癌细胞系miR-378和RAB11A mRNA 表达水平。
转染MCF-7和MDA-MB-231细胞miR-378，NC （normal control ）对照，采用MTT 法和Transwell 法检测乳腺癌细胞增殖和迁移能力的变化；采用RT-PCR 和Western blot 检测RAB11A表达。
荧光素酶报告分析miR-378与靶基因RAB11A 之间的信号。
结果miR-378在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231表达上调[（4.23±0.15）和（4.67±0.12）比（0.98±0.03），P <0.01]；RAB11A 在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231中表达下调[（0.49±0.09）和（0.45±0.08）比（1.01±0.02），P <0.01]；在MCF-7、MDA-MB-231细胞中敲降miR-378后，乳腺癌细胞增殖活力降低[MCF-7：（1.28±0.01）比（1.75±0.10）；MDA-MB-231：（1.23±0.07）比（1.89±0.07），P 均<0.01]；细胞侵袭数目减少[MCF-7：（19.64±3.56）比（65.01±5.12）；MDA-MB-231：（32.65±4.36）比（83.09±7.45），P 均<0.01]；迁移数目减少[MCF-7：（23.78±2.43）比（73.24±6.16）；MDA-MB-231：（37.42±3.24）比（91.68±6.42），P 均<0.01]。
骨肉瘤患者血清中miR-34a、miR-449a表达及与新辅助化疗耐药的关系
骨肉瘤患者血清中miR-34a、miR-449a表达及与新辅助化疗耐药的关系楚利涛;李兴华;朱梁豫;辛晓林;魏瑄;骆晓飞【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2022(37)3【摘要】目的分析骨肉瘤患者血清中miR-34a、miR-449a表达水平及与新辅助化疗耐药的关系。
方法随机选择骨肉瘤83例,将其纳入研究组。
另选取同期体检健康受试者83例,将其纳入对照组。
检测血清miR-34a、miR-449a表达水平。
问卷调查骨肉瘤患者临床病理特征,给予新辅助化疗,统计耐药情况。
结果研究组患者血清miR-34a水平(6.47±1.28)明显高于对照组(P<0.05),miR-449a水平(29.47±1.23)低于对照组(P<0.05)。
不同年龄、性别、肿瘤位置患者血清miR-34a、miR-449a水平差异比较无统计学意义(P>0.05)。
不同肿瘤大小、临床分期患者的血清miR-34a、miR-449a水平差异比较有统计学意义(P<0.05)。
化疗有效组患者血清miR-34a表达水平(7.09±1.09)明显低于无效组(P<0.05),miR-449a 表达水平(33.74±2.06)明显高于化疗无效组(P<0.05)。
结论骨肉瘤患者血清miR-34a高表达,miR-449a低表达,且表达水平影响新辅助化疗效果,高表达会增加耐药性,增加化疗无效风险。
【总页数】4页(P388-391)【作者】楚利涛;李兴华;朱梁豫;辛晓林;魏瑄;骆晓飞【作者单位】郑州市骨科医院【正文语种】中文【中图分类】R738.1【相关文献】1.肺癌患者血清中Wnt/β-catein表达水平与术前新辅助化疗效果及远期生存率的关系2.骨肉瘤患者在不同新辅助化疗方案实施前后多药耐药相关蛋白在mRNA及蛋白水平中的表达变化3.新辅助化疗对骨肉瘤多药耐药相关蛋白表达的影响分析4.Skp2高表达与骨肉瘤患者新辅助化疗耐药之间的联系5.miR-34a在骨肉瘤患者血清中的表达及在诊断和预后中的价值因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者血清中表达情况研究
匡
了 ＿１ － ３ ８ ２ ６ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ５ － ０ ４ ７ ８ － ０ ４
ｍｉ Ｒ－ ３ ４ａ ｅ ｘ ｐｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｏ ｆ ｒ ｅ ｌ ａ ｐ ｓ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｍｉ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ ｍｕ ｌ ｔ ｉ ｐ ｌ ｅ ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ
ｍｍ ａ ｎ ｄ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ａ ｒ ｅ ｔ ｒ ｏ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｗａ ｓ ｐ ｅ ｆｏ ｒ ｒ ｍｅ ｄ ｏ ｎ Ｒ ＲＭＳ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗｈ ｏ ｗ ｅ ｒ ｅ ａ ｄ ｍｉ ｔ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｊ ａ ｎ ｕ ａ ｒ ｙ ２ ０１ ４ ｔ ｏ
ｉ ｎ ａ ｃ ｕ ｔ ｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｐ ｓ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｍｉ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ ｔ ａ ｇ ｅ ， ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｓ ｓ ｉ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｉ ｔ ａ ｓ ａ ｎ ｅ ｗ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ ｓ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｈ ｉ ｐ ｂ ｅ ｔ ｗｅ ｅ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ —
在观察组缓解期 的血清表达与健康组 比较 ， 差异无统 计学 意义 （ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） 。结 论 ［ 关键 词 ］ 多发性硬化 ； ｍ ｉ Ｒ － ３ ４ ａ ； 血清标记物 ； 急性复发期 ； 缓解 期 ｍｉ Ｒ 一 ３ ４ ａ在复发一 缓解 型多发 性硬化 患者
的急性复发期 中表 达降低 ， 并可能具有作为 复发 一 缓解 型多发性硬化急性复发期诊断 的血清生物标志物潜质 。
《2024年MiR-20a通过靶向ABL2促进前列腺癌浸润和迁移》范文
《MiR-20a通过靶向ABL2促进前列腺癌浸润和迁移》篇一一、引言前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年上升，对人类健康构成严重威胁。
近年来，随着分子生物学和基因组学研究的深入，microRNA（miRNA）在肿瘤发生、发展及转移过程中的作用逐渐受到关注。
MiR-20a作为一种重要的肿瘤相关miRNA，其在前列腺癌的浸润和迁移过程中发挥关键作用。
本文旨在探讨MiR-20a通过靶向ABL2（酪氨酸蛋白激酶）促进前列腺癌浸润和迁移的机制，为前列腺癌的治疗提供新的思路和方法。
二、MiR-20a与前列腺癌的关系MiR-20a是一种非编码小RNA，通过与靶基因的3'-UTR（非翻译区）结合，调节基因的表达。
近年来研究发现，MiR-20a在多种肿瘤中表达异常，与肿瘤的浸润、迁移和预后密切相关。
在前列腺癌中，MiR-20a的表达水平明显升高，且与前列腺癌的恶性程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关。
三、ABL2基因与前列腺癌的关系ABL2是一种酪氨酸蛋白激酶，参与多种细胞信号传导过程。
研究表明，ABL2在多种肿瘤中表达异常，与肿瘤的浸润、迁移及预后不良有关。
在前列腺癌中，ABL2的表达水平也与肿瘤的恶性程度及浸润深度有关。
因此，ABL2可能是前列腺癌治疗的重要靶点。
四、MiR-20a靶向ABL2的机制研究发现，MiR-20a可以通过与ABL2的3'-UTR结合，抑制ABL2的表达。
在前列腺癌细胞中，MiR-20a的高表达导致ABL2的表达降低，进而影响细胞内信号传导过程，促进前列腺癌细胞的浸润和迁移。
此外，MiR-20a还可以通过调控其他与肿瘤浸润和迁移相关的基因表达，共同促进前列腺癌的恶性进程。
五、实验研究为进一步探讨MiR-20a和ABL2在前列腺癌中的关系及作用机制，我们进行了以下实验研究：1. 通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测前列腺癌组织中MiR-20a和ABL2的表达水平；2. 通过构建过表达和敲除MiR-20a的细胞模型，观察其对前列腺癌细胞浸润和迁移能力的影响；3. 通过生物信息学分析和双荧光素酶报告实验验证MiR-20a 与ABL2的靶向关系；4. 通过Western blot检测过表达和敲除MiR-20a后ABL2蛋白表达水平的变化；5. 通过免疫组化检测前列腺癌组织中ABL2的表达情况及其与临床病理特征的关系。
miR-181 a对乳腺癌耐药蛋白表达调控作用的研究
miR-181 a对乳腺癌耐药蛋白表达调控作用的研究林姝;焦旭阳;赵琳;魏敏杰【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2014(30)8【摘要】目的：探讨miRNA-181a对乳腺癌耐药蛋白( BCRP)及其介导的乳腺癌细胞耐药性的调控作用。
方法应用生物信息学预测 BCRP mRNA-3ˊUTR 与 miR-181a 的结合位点；荧光素酶报告分析检测miR-181a与BCRP mRNA-3ˊUTR的结合作用；qRT-PCR和Western blot检测细胞中相关蛋白表达水平。
结果与阴性转染组比较,miR-181a mimic 与PGL3-BCRP 3ˊUTR共转染后,荧光素酶活性明显降低( P<0.05)。
miR-181a mimic转染到MCF7/MX细胞48 h后,与阴性转染组相比,导致原本 miR-181a低表达的 MCF-7/MX细胞中miR-181a的表达增加(P<0.05),BCRP mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05),而MRP、P-gp、LRP的mRNA和蛋白水平均无明显改变(P>0.05)；MCF-7细胞在miR-181a inhibitor 转染48 h后,与阴性转染组相比,miR-181a的表达降低( P<0.05)。
同时, BCRP mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。
而MRP、P-gp、LRP的mRNA和蛋白水平无明显改变(P>0.05)。
结论 miR-181a可通过靶向作用于BCRP mRNA-3ˊUTR 区,调控BCRP表达。
%Aim ToinvestigatetheeffectsofmiRNA-181 a on breast cancer resistance protein ( BCRP ) . Methods Bioinformaticspredictedbindingsitesof BCRP mRNA-3ˊUTR region and miR-181 a;further lu-ciferase reporter gene analysis confirmed that miR-181 a could combine with BCRP mRNA-3ˊUTR; qRT-PCR and Western blot detected related mRNA and protein expressionlevels.ResultsComparedwithnegative transfection group, after the miR-181a mimic and PGL3-BCRP 3ˊUTR were co-transfected, luciferase ac-tivity was significantly decreased ( P <0 . 05 ) . After miR-181a mimic transfected MCF7/MX cells for 48h, compared to the negative group, the expression of miR-181 a in MCF-7/MX cells was increased ( P<0. 05 ) , BCRP mRNA, BCRP protein expression were signifi-cantly decreased ( P<0 . 05 ) , while mRNA expression and protein levels of MRP, P-gp, LRP did not change significantly ( P >0. 05 ); after transfecting miR-181 a inhibitor for 48h, compared to the negative group, the expression of miR-181 a in MCF-7 cells was reduced (P<0. 05). Meanwhile,BCRP mRNA expression and BCRP protein expression were also significantly in-creased ( P<0. 05 ) . The mRNA expression and pro-tein levels of MRP, P-gp, LRP did not change signifi-cantly(P>0.05).Conclusion miR-181acanregu-late BCRP expression by targeting the BCRP mRNA-3ˊUTR region.【总页数】6页(P1073-1078)【作者】林姝;焦旭阳;赵琳;魏敏杰【作者单位】中国医科大学药学院药理学教研室，辽宁沈阳 110001;中国医科大学药学院药理学教研室，辽宁沈阳 110001;中国医科大学药学院药理学教研室，辽宁沈阳 110001;中国医科大学药学院药理学教研室，辽宁沈阳 110001【正文语种】中文【中图分类】R341;R342.2;R394.2;R737.902.2;R977.9【相关文献】1.RNA 结合因子 AUF1调控基因表达及其在肿瘤发生中的双重调控作用的研究进展 [J], 杨颖卓;康鹏;高杰;徐春林;王诗美(综述);吴霞(审校)2.斑马鱼nrf基因时空表达分析及其在调控胰外分泌酶原基因表达中的作用研究[J], 孙素杰;谢琳琳;于翠霞;王雨薇;钟雪萍;赵浩斌;陈新华;周青春3.斑马鱼4个小maf时空表达分析及在调控胰外分泌酶原基因表达中的作用研究[J], 曾俏慧;吴纯;卢飞;赵浩斌;钟雪萍;周青春4.miR-214调控FGF9的表达参与结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中PI3K/AKT信号通路的免疫调控作用研究 [J], 苏维娜;李晓晶;张丽丽;包志伟5.二甲双胍对肺腺癌细胞Nrf2基因表达的调控作用研究 [J], 张甲翠;马和平;段晓晏;王佳宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
淫羊藿通过miR-148a调控乳腺癌干性表达
网络出版时间：２０２３－０５－０９１６：２２：４４ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０５０８．１４２９．０２０．ｈｔｍｌ淫羊藿通过ｍｉＲ １４８ａ调控乳腺癌干性表达宋 博１，刘明燃１，魏福霞１，陈 颖１，迪少帅１，翟春涛２，柴 智２，马艳苗２，彭 涛３，４（山西中医药大学１．研究生学院、２．基础医学院，山西太原 ０３０６１９；３．山西省中西医结合医院名中医工作室，４．经方扶阳山西省重点实验室，山西太原 ０３００１３）收稿日期：２０２２－１２－２０，修回日期：２０２３－０２－１４基金项目：山西省卫健委“四个一批”科技兴医创新计划项目（Ｎｏ２０２０ＸＭ２６）；山西省基础研究计划项目（Ｎｏ２０２１０３０２１２３２２６）；经方扶阳山西省重点实验室开放课题研究基金（Ｎｏ２０２１０４０１０９１００１１）；山西中医药大学研究生创新创业项目（Ｎｏ２０２１ＣＸ０４０）作者简介：宋 博（１９９６－），女，硕士生，研究方向：中西医结合防治肿瘤临床，Ｅ ｍａｉｌ：ｓｏｎｇｂｏ２０９＠１６３．ｃｏｍ；马艳苗（１９８２－），女，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：方剂的现代药理作用及其物质基础，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｍｙｍｓｘｔｃｍ＠ｓｘｔｃｍ．ｅｄｕ．ｃｎ；彭 涛（１９７５－），男，博士，主任医师，硕士生导师，研究方向：中西医结合临床肿瘤药理，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：Ｐｅｎｇ ｔａｏ５１９７２２０＠１６３．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２１２０２４文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０５－０８５１－０９中国图书分类号：Ｒ２８２ ７１；Ｒ３２９ ２８；Ｒ３９４ ２；Ｒ７３７ ９０２ ２摘要：目的 观察淫羊藿对乳腺癌细胞增殖及干性表达的影响，探讨其抑制干性与ｍｉＲ １４８ａ的关系及分子机制。
方法 淫羊藿处理乳腺癌ＭＤＡ ＭＢ ２３１细胞后，采用ＭＴＴ法和平板克隆实验评估其对细胞增殖和群体依赖的影响；悬浮成球实验检测其对衍生乳腺球大小的影响；ｑＰＣＲ检测其对ＣＤ４４、ＡＬＤＨ １、Ｏｃｔ４、ＢＭＩ１和ＥｐＣＡＭ表达水平的影响；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＥｐＣＡＭ、ＳＯＸ４、ＺＯ １、Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的蛋白表达量；免疫荧光观察ＥｐＣＡＭ的蛋白定位情况；划痕实验检测其对细胞迁移能力的影响。
肾透明细胞癌miRNA-34a、Notch1和Hes1的表达及意义
１２ １ Ｒ Ａ的提取 采用液氮研磨法将组织磨成 ．． Ｎ 粉末 ， 加入 Ｔｉ ｌ 试剂 说 明书提取 总 Ｒ Ａ。 ｒｏ 按 ｚ Ｎ
１２ ２ 总 Ｒ Ａ纯度 和浓度 的检测 ．． Ｎ 使 用超微 量 紫 外分 光光度计 测定 Ｒ Ａ浓 度和 纯度 ， 录 Ｏ 值 。 Ｎ 记 Ｄ Ｒ Ａ纯度 检测 ：Ｎ Ｎ Ｒ Ａ溶液 的 Ｏ ：／ Ｄ８的 比值 （ Ｄ印 Ｏ 。 比 值范 围 １８～ ． 纯度 合 格 ） ． ２ １为 。样 品 Ｒ Ａ浓 度 计 Ｎ 算 公 式 为 ： Ｄ∞ ×４ Ｏ ０Ｘ稀 释 倍 数 （ ｇ １ 。所 提 ｎ／ ） Ｒ Ａ 一８ Ｎ ０℃保存 备用 。 １２ ３ 逆 转 录 ．． 按 Ｆｒｅｔ 逆 转 录 说 明书操 作 。 ｅｍ ｎａ ｓ ｍｉＮ 一４ Ｒ Ａ３ ａ用 ｍｉＮ 一 ａ茎 环 引物逆 转 录 ， 余 用 Ｒ Ａ３ ４ 其
３南昌大学第一附属 医院泌尿外科研究所 ； ４南昌大学第一ｌ属 医院烧伤研究所） ； ｆ ｛
摘要： 目的
观察 ｍ Ｒ Ａ ３ ａ Ｎ ｔｈ ｉ Ｎ 一４ 、 ｏ ｌ和 Ｈ ｓ 肾透明细胞癌组织 的表达 ， ｃ ｅｌ在 探讨 其与 肾癌发生 发展的关系及
可能的临床意义 。方法
运用实时荧光定量 Ｐ Ｒ方 法检测 ｍｉＮ 一 ａ Ｎ ｔｈ Ｃ Ｒ Ａ３ 、 ｏ ｌ和 Ｈ ｓ 肾透 明细胞癌 组织及其 ４ ｃ ｅｌ在
随机 引物逆转 录 。ｍ Ｒ Ａ ３ ａ 环引物 见表 １ ｉＮ 一４ 茎 。
表 １ ＲＴ Ｐ 、 ＣＲ 引物 序 列
路与 肾癌 的关系不明确 ， Ｎ ｔ 信号通路相关 的 与 ｏｈ ｃ ｍＲ Ａ在 肾癌 中 的研 究 也 未 见 报 道 。本ｔｈ ｉＮ 一４ 、 ｏ ！和 Ｈ Ｍ 在 肾透 明细胞 ｃ ｅ
miR-34a在消化道肿瘤中的研究现状
miR-34a在消化道肿瘤中的研究现状
杨连勐
【期刊名称】《医学综述》
【年(卷),期】2016(22)1
【摘要】微RNA(miRNAs)是一组高度保守的内源性非编码小RNAs,在转录后水平调控基因的表达,参与炎症、发育、凋亡、肿瘤等多种生理病理过程.miR-34a是一个典型的多功能miRNA,其异常表达影响着肿瘤的发生、发展.消化道肿瘤是一种高发病率和病死率的疾病,严重地威胁着人类的生命健康.miR-34a通过多条信号通路在胃癌、结直肠癌、肝癌以及胰腺癌等消化道肿瘤的发生、诊断、治疗及预后中发挥着重要的作用.
【总页数】5页(P83-87)
【作者】杨连勐
【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二医院普外六科,哈尔滨150086
【正文语种】中文
【中图分类】R604
【相关文献】
1.免疫营养在消化道肿瘤治疗中的研究现状与进展 [J], 刘莉;王庆兰;郑永法
2.液体活检在消化道肿瘤诊疗中应用的研究现状 [J], 顾心怡; 李贺明; 王喆; 王若雨
3.建立共载米铂与核酸miR-34a阳离子脂质体中miR-34a的含量测定方法 [J], 孟月; 王丹; 王雪蕾; 郭晓茹; 夏桂民
4.消化道肿瘤诊断中肿瘤标志物的检测应用与研究现状 [J], 王亚磊
5.丹参酮在消化道肿瘤中的应用及研究现状 [J], 李国红;梁启廉
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
miR-34
miR-34c enhances mouse spermatogonial stem cells differentiation bytargeting Nanos2+AbstractMiRNAs are expressed in many mammalian cells, acting specific roles in regulating gene expression or mediating special mRNAs cleavage by targeting their 3'UTR. Some miRNAs are essential and important for animal development. However, it is still unclear what the relationship is between miR-34c and mammalian spermatogonial stem cells (SSCs). We found that a conserved microRNA-34c through its target-Nanos2, regula ting SSCs’ differentiation in mouse. Immunohistochemistry analysis of Nanos2 and miR-34c FISH results revealed the opposite expression trends between them. Seven bioinformatics websites and programs predicted that miR-34c has interaction sites in Nanos2’s 3' untranslated region (3'UTR). Dual-luciferase reporter vector and mutated dual-luciferase reporter vector analysis validated that they are interacted. After transfection miR-34c mimics into mouse SSCs, or miR-34c lentiviral vector in vitro co-cultivation with seminiferous tubules, and western blot analysis demonstrated that miR-34c over-expression could suppress Nanos2 expression in post-transcription level. Our experiments identified that miR-34c may promote meiosis process by interacting with Nanos2 leading up-regulation of Stra8 in mouse spermatogonial stem cells. MiRNA在很多哺乳动物细胞中表达，在调节基因表达或靶向作用mRNA的3'非编码区域（UTR）介导特定mRNA分裂起着特殊作用。
MiR-34a-5p在MLN8237诱导神经母细胞瘤细胞衰老中的作用机制
DOHO.3369/j.issn.1673-5323.2021.01.003•论著•MiR24a2p在MLN9237诱导神经母细胞瘤细胞衰老中的作用机制曹雨华刘爱国王松咪王瑶余文张妍杨燕周琦胡迎胡群【摘要】目的研究小分子AURKA抑制剂MLN9237诱导神经母细胞瘤细胞衰老的作用机制。
方法利用细胞转染的方法改变SK-N-2H细胞中miR24o2p的表达水平，通过SA-2-2ai染色方法及流式细胞术检测细胞衰老及细胞周期情况。
运用CCK9检测不同处理下细胞增殖的变化情况。
RT-2CR及蛋白质免疫印迹（Western blot）方法用来检测细胞中相关基因及蛋白的表达情况。
结果（1）MLN9237在SK-N-SH细胞中可以通过激活P53/P21通路诱导细胞衰老，同时引起miR24o2p表达上调（P值均＜0.05）。
（2）SANLC染色及流式检测细胞周期显示，过表达miR24o2p可以引起SK-N-SH细胞衰老，靶向调控衰老相关靶基因SIRT1的表达，并导致P53、P71蛋白及mRNA表达升高（P值均＜0.05）,激活P53/P71衰老通路。
（3）将miR24o-9p抑制剂与MLN9737联用后，与单用MLN9237相比可以减少衰老细胞，降低P53、P71的表达（P值均＜0.05），并抑制P53/P21衰老通路，且CCK9结果提示，两者联用可以显著减弱MLN9237对SK-N-SH细胞的增殖抑制作用（P值均＜0.05）。
结论在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中MLN9237是通过激活P53/miR24o2p/SIRT1反馈环路来诱导细胞衰老的过程。
【关键词】神经母细胞瘤；MiRL4oLp；细胞衰老；MLN9237；P53The mechanism of miR-33a-5p in MLN8237-induced senescence of neuroblastoma cellnCAO Yuhua31LIU Aiguo,WANG Songmi,WANG Yao3,YU Wen,ZHANG Yan,YANG Yan,ZHOU Qi1, HU YinU i HU Qun. 1.Departoeai of Pediatocc日61!1：01002Departoeai of Experimeatai Mediciov Cedtve,Tongj-Hospitai,Tongj-Medicci Collepa,Huazhong University of Science anO1x000100,Wuhoo 4340341ChinoCorresyondinp anthve：Lid Aipuv,Emaii:*****************【Abstroct0Objective Tv explore tha mecCanism of tha senescence of nedroUlastomo celis inOuced by tha smali moleccie AURKA inOiPime MLN9237.MetOodt Celi transfection wos used tv chdrina tha expression level of miR24o-9p in SK-N-2H celis.Celi senescence anO celi cyciv were detected by SA-Ll gai staining methoU anO4ow cytometra-Tha chdrinas in celi prolimratiou unOve various treatoenis were examined by CCK-2.RT-2CR anO Western Blci were used tv detect tha expression of related penas anO proteins in celis.Resnltt（1）MLN9237cou IU inOuca cali sepescenca by activating P53/P71pchwoy in SK-N-SH calls,anO up-epuUo tha expression of miR24o-9p（all P＜0.05）-（2）5八---2£0staining anO4ow cytometra showed thoi overexpressiou of miR24o-Sp inOuced SK-N-SH celt senxcenca,基金项目：国家自然科学基金（51572157）（51672776）作者单位：430037武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院儿童血液科（曹雨华,刘爱国，王松咪，王瑶，余文,张妍，胡迎,胡群）实验医学研究中心（杨燕,周琦）通讯作者:刘爱国，Email：drliuaipuo@reeulateP the expressiou of smccew2dmP tareee yepe SIRT1,the expressiou of P52,P21 (dll P<0.05)anC activatee tUe P53/P21spipccpcc pdUway.(3)The comrinatiou of miRW4aWp inCiaitoe anC MLN7727codld u P ucc smet cells,Powc-reeulate P52anp P21expressiou(al P< 0.45),anC inhirC i U p P53/P21smcce pdtUway comparee w R MLN7727aloue.The res91ts of CCK7also s9uyesteP tUaS tUe comrinatiou couia dasiRe tUe Rhiditore rOct oc cell proliferatiou of MLN7727(all P<0.45).Conclusion-Ic ceeroUlastoma SK-2-2H cells,MLN7727couia inPuce c21 smece by activatina P52/miRW4aWp/SIRT1feepaack loop.【Keywords-NeeroUlastoma；MiRW4aWp；CS smece；MLN7727；P52在儿童中,神经母细胞瘤是最常见的颅外实体肿瘤,高危患者长期存活率较低，恶性程度高,且增大化疗药物剂量,并不能显著降低死亡率。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
·６１７·
： ＤＯＩ １０．１３６０２ ／ ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０１９．０８．１３
·临床实验研究·
ｍ药ｉＲ的３实４ａ验调验控证下游基因 ＦＵＴ８ 表达介导乳腺癌多药耐
白质水平变化；采用 ＣＣＫ８ 实验、免疫荧光实验检测其对 ＭＣＦ７ 和 ＭＣＦ７／ ＡＤＲ 细胞增殖、耐药性的调控作用。结果
（ ）； 在 中的表达水平明显高于 ｍｉＲ３４ａ ＭＣＦ７
ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ Ｐ ＝ ０．００２ ６
ＦＵＴ８ 基因在 ＭＣＦ７／ ＡＤＲ 中的表达水平明显高于 ＭＣＦ７
（Ｐ＝ ０．００１ ）； ６ ＦＵＴ８ 是 ｍｉＲ３４ａ 调控乳腺癌耐药性的靶点（Ｐ＝ ０．００１ ９）；特异性上调 ＭＣＦ７／ ＡＤＲ 细胞中 ｍｉＲ３４ａ 的水平可明
ｍｉＲ３４ａ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｄｏｗｎｓｔｒｅａｍ ｇｅｎｅ ＦＵＴ８
， （ ， ， ， ； ＷＡＮＧ Ｘｉｎ１ ＭＡ Ｘｉａｏｌｕ２ １． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｄａｌｉａｎ Ｓｉｘｔｈ Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｄａｌｉａｎ １１６０３１ Ｌｉａｏｎｉｎｇ ２． Ｄｅｐａｒｔ ， ， ， ， ） ｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｄａｌｉａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｄａｌｉａｎ １１６０１１ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｃｈｉｎａ ： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｍｅｃｈａ
ｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ａｂｎｏｒｍａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ３４ａ ａｎｄ ＦＵＴ８ ｏｎ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ
ｍｉＲ３４ａ ａｎｄ ＦＵＴ８ ｉｎ ＭＣＦ７ ａｎｄ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ ａｎｄ ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ． Ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｏｆ ｍｉＲ３４ａ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ． Ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍｉＲ３４ａ ａｎｄ ＦＵＴ８ ｗａｓ ｐｒｅ
， ｄｉｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｆｕｒｔｈｅｒ ｖｅｒｉｆｉｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｄｕａｌｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ ｒｅｐｏｒｔｅｒ ａｓｓａｙ． Ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ３４ａ ｗａｓ ｓｐｅ ， ， ｃｉｆｉｃａｌｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ＦＵＴ８ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｗｅｓｔｅｒｎ ， ， ｂｌｏｔ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ３４ａ ｗａｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ
王欣１，马晓露２（１．大连市第六人民医院检验科，辽宁大连 ； １１６０３１ ２．大连医科大学附属第一医院检验科，辽 宁大连 ） １１６０１１
摘要：目的 探究 ｍｉＲ３４ａ 及 ＦＵＴ８ 的异常表达对乳腺癌多药耐药性的调控机制，明确乳腺癌耐药的诊疗靶点。方法 采用
及 技术检测 和 中 和 的表达水平； 技术检测乳腺 Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ
显抑制 ＦＵＴ８ 的表达，并抑制该细胞的多药耐药性及增殖性；而下调 ＭＣＦ７ 细胞中 ｍｉＲ３４ａ 表达后，ＦＵＴ８ 的表达水平明显升
高，同时增强了细胞多药耐药及增殖能力。结论 ｍｉＲ３４ａ 通过调控下游基因 ＦＵＴ８ 的表达介导乳腺癌多药耐药。
关键词：ｍｉＲ３４ａ；ＦＵＴ８；乳腺癌；多药耐药性
中图分类号：Ｒ４４６ 文献标志码：Ａ
ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ＭＣＦ７ ａｎｄ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ＣＣＫ８ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｓｓａｙｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘ
（ ） ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｍｉＲ３４ａ ｉｎ ＭＣＦ７ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｃｅｌｌｓ Ｐ ＝ ０．００２ ６ ． Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ （ ） ｏｆ ＦＵＴ８ ｇｅｎｅ ｉｎ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ＭＣＦ７ ｃｅｌｌｓ Ｐ ＝ ０．００１ ６ ． ＦＵＴ８ ｗａｓ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｍｉＲ３４ａ （ ） ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ Ｐ ＝ ０．００１ ９ ． Ｔｈｅ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ３４ａ ｉｎ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｃｅｌｌｓ ｃｏｕｌｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ ， ， ｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＦＵＴ８ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｃｅｌｌｓ． Ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ ， ３４ａ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＦＵＴ８ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＣＦ７ ｃｅｌｌｓ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＭｉＲ３４ａ
ＭＣＦ７ ＭＣＦ７ ／ ＡＤＲ ｍｉＲ３４ａ ＦＵＴ８
Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ
癌细胞系中 ｍｉＲ３４ａ 的转染效率；通过生物信Ｒ３４ａ 之间的靶向关
系；特异性调控 ｍｉＲ３４ａ 的表达后，分别通过 Ｒｅａｌｔｉｍｅ 、 ＰＣＲ ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 以及免疫荧光染色检测转染细胞系中 ＦＵＴ８ 基因及蛋