多糖的提取分离方法
多糖各种提取方法
一、植物多糖的提取1 溶剂提取法1．1 水提法水对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全、经济.用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提.一般植物多糖提取采用热水浸提法,该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，沉淀提纯多糖;但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同,它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离;还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中,以乙醇沉淀最为普遍。
但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高，热水直接提取率不高。
此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出，有两种处理方法:一为酶解，二为弱碱溶解。
1．2酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。
但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，目前报道的并不多.而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸度，因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂.有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
采用的稀碱多位为0．1mol／L氢氧化钠、氢氧化钾，为防止多糖降解,常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。
同样，碱提优势也是因多糖类的不同而异。
与酸提类似,碱提中碱的浓度也应得到有效控制,因为有些多糖在碱性较强时会水解。
另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀.1．4 生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。
此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶,纤维素酶，果胶酶等。
1．5 超声提取法超声波是一种高频率的机械波,其主要原理是利用超声波产生的“空化作用"对细胞膜的破坏,有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层,加大了传质效率,有助于溶质的扩散。
多糖的提取方法
多糖的提取方法植物和动物体内含有丰富的多糖，在医药、食品、化妆品等领域有着重要的应用价值。
为了充分利用这些多糖资源，科学家们一直在探索各种多糖的提取方法。
本文将介绍几种常用的多糖提取方法，包括热水提取法、酶解法、酸碱法、超声波法和微波法。
一、热水提取法热水提取法是一种简单且常用的多糖提取方法。
首先，将植物或动物材料粉碎成粉末状，然后用适量的热水浸泡一段时间。
随后，将浸泡液过滤，得到的滤液中含有多糖。
最后，通过浓缩、沉淀和干燥等步骤，得到多糖提取物。
二、酶解法酶解法是利用特定的酶对植物或动物材料中的多糖进行水解的方法。
首先，将材料粉碎成粉末状，然后用适量的酶液浸泡一段时间，酶液中的酶能够降解多糖。
随后，将酶解液经过滤、浓缩和沉淀等步骤，得到多糖提取物。
三、酸碱法酸碱法是利用酸或碱对植物或动物材料中的多糖进行提取的方法。
首先，将材料粉碎成粉末状，然后用适量的酸或碱溶液浸泡一段时间。
酸或碱的作用能够将多糖与其他成分分离。
随后，通过中和、过滤、浓缩和沉淀等步骤，得到多糖提取物。
四、超声波法超声波法是利用超声波的机械作用对植物或动物材料进行提取的方法。
首先，将材料粉碎成粉末状，然后用适量的溶剂浸泡一段时间。
随后，将材料置于超声波设备中，超声波的振动能够促进多糖的释放。
最后，通过过滤、浓缩和干燥等步骤，得到多糖提取物。
五、微波法微波法是利用微波辐射对植物或动物材料进行提取的方法。
首先，将材料粉碎成粉末状，然后用适量的溶剂浸泡一段时间。
随后，将材料置于微波设备中，微波辐射能够加速多糖的释放。
最后，通过过滤、浓缩和干燥等步骤，得到多糖提取物。
在多糖的提取过程中，需要注意以下几点：首先，选择合适的提取方法，根据不同的多糖类型和材料特性进行选择；其次，控制提取条件，如温度、时间、酶的浓度等，以保证提取效果；最后，采用适当的分离和纯化方法，以得到纯度较高的多糖提取物。
多糖的提取方法多种多样，每种方法都有其适用的场景。
2多糖的提取和分离
与常规提取法相 比,具有提取时间短, 产率高,无需加热等 优点. 因此,在提取细 胞内物质的过程中可 用超声波进行细胞破 壁.
第2章 章
多糖的提取和分离
超声提取技术能避免高温高压对有效 成分的破坏,但它对容器壁的厚薄及容器 放置位置要求较高,否则会影响药材浸出 效果.而且目前实验研究都是处于很小规 模,要用于大规模生产,还有待于进一步 解决有关工程设备的放大问题.
第2章 章
多糖的提取和分离
1,蜜环菌细胞壁壳聚糖的制备
(2)壳聚糖的制备: (2)壳聚糖的制备: 壳聚糖的制备 称取甲壳素粗品与45%的NaOH 溶液一起在灭菌锅中加 热(压力1.2-1.4Kgf/cm2,温度为121—126℃)脱乙酰基3 小时,用热水洗至中性. 然后,将产品用4%盐酸抽提(酸抽提两次),过滤除 去不溶物. 再用10%的NaOH溶液调pH至pH=10析出沉淀物,过滤洗 涤至中性,冷冻干燥得壳聚糖产品.
第2章 章
多糖的提取和分离
5,酶法: ,酶法 酶反应较温和地将植物组织分解,可以 较大幅度提高收率,故酶解不失为一种最 大限度从植物体内提取有效成分的方法之 一.这是一项很有前途的新技术 酶水解提取法常用于除去各种与多糖 结合的蛋白质
第2章 章
多糖的提取和分离
福建师范大学林宇野采用酶法提取银 耳多糖:将银耳浆液pH调到6.3,加入1% 复合酶制剂(果胶酶,纤维素酶,中性蛋 白酶食品级复合酶)50℃下酶促反应40分 钟,迅速升温至80℃灭活,并保温浸提1.5 小时,浓缩,透析,醇沉,真空干燥.
透析法多用于去除大分子溶液中的小分子 物质,此称为脱盐,其次常用来对溶液中小 分子或分子进行缓慢的改变,这就是所谓的 透析平衡,如透析结晶等. 透析膜两边都是液体一边是供试样品液, 主要成分是生物大分子,是试验过程中需要 留下的部分,被称作"保留液";另一边是 "纯净"溶剂,即水或缓冲液,是供经薄膜 扩散出来的小分子物质逗留的空间场所,或 是提供平衡小分子物质的"仓库",透析完 成后往往是不要的,被称作"渗出液".
综述多糖的提取、分离及纯化方法
综述多糖的提取、分离及纯化方法小伙伴们！今天咱就来好好唠唠多糖的提取、分离及纯化方法这事儿哈。
多糖这玩意儿在生物领域那可是相当重要的角色呢，它的应用老广泛啦，所以掌握它的提取、分离和纯化方法那是很有必要的哟。
一、多糖的提取方法。
常见的多糖提取方法有很多种呢。
1. 热水浸提法。
这可是一种挺经典的方法哟。
就是把含有多糖的原料放到热水里面浸泡，让多糖溶解到水里边。
这个方法操作起来相对简单，成本也比较低。
就好比咱们泡茶一样，茶叶里的一些成分就会慢慢溶到水里啦，多糖也是类似的道理。
不过呢，它也有个小缺点，就是提取效率可能不是特别高，而且在高温下，有些多糖的结构可能会受到一定的破坏哦。
2. 酸提法。
酸提法就是用酸溶液来提取多糖啦。
酸可以破坏原料中的一些细胞结构，让多糖更容易释放出来。
就像是拆房子，把阻碍多糖出来的“墙”给拆掉。
但是呢，这个方法得控制好酸的浓度和提取时间，要是酸浓度太高或者时间太长，多糖可能就会被水解掉，那就不好啦。
3. 碱提法。
和酸提法相对应的就是碱提法咯。
碱可以使一些与多糖结合的杂质分解，从而提高多糖的提取率。
比如说有些多糖和蛋白质结合在一起，碱就可以把它们分开。
不过呢，碱提法也有它的麻烦事儿，就是在提取完之后，需要把碱给去除干净，不然会影响后续多糖的纯度哟。
4. 酶解法。
酶解法就比较巧妙啦。
它是利用酶的特异性来分解原料中的一些成分，让多糖更容易被提取出来。
就像一把专门的钥匙开一把锁，酶可以针对性地把阻碍多糖提取的东西给分解掉。
而且酶解法还比较温和，对多糖的结构破坏比较小。
但是呢，酶的成本相对较高，而且酶的活性也受到很多因素的影响，比如温度、pH值这些，所以操作的时候得特别小心。
二、多糖的分离方法。
把多糖提取出来之后，还得把它和其他杂质分离开来，这就用到各种分离方法啦。
1. 离心分离法。
离心分离法就像是坐过山车，利用离心力的作用，让不同密度的物质分离开来。
多糖和一些杂质的密度可能不一样，通过高速旋转，它们就会在离心力的作用下分层，这样就可以把多糖和一部分杂质分开啦。
多糖的提纯化技术
多糖的提纯化技术
溶剂提取法
(1) 水提法：以水为溶剂，可采用热水浸提或冷水浸提（植物多糖多采用热水浸提，可直接或离心去除杂质），由于多糖不溶于乙醇，可通过沉淀将多糖提纯出来。
水提法的确缺点在于温度高、耗时长、提取率低。
(2) 酸提法：有些含酸性基团的多糖在酸性条件下不易溶解，可用盐酸或乙酸处理后，再用乙醇或不溶性络合物将多糖沉淀出来。
酸提法容易破坏多糖的空间结构，一般较少使用。
(3) 碱提法：一些含有糖醛酸的多糖和酸性多糖在碱性条件下都比较稳定，可提高多糖的提取率，一般用硼氢化钠或硼氢化钾作为溶剂。
碱提法的不足之处在于某些多糖在碱性较强时会降解，而且容易影响成品的色泽和风味。
碱提法提取多糖
碱提法提取多糖碱提法是一种常用的多糖提取方法，通过使用碱性溶液来分离和提取多糖。
在这个过程中，我们将从多糖源（如植物或动物组织）中提取出多糖，并利用其在生物学、医药和食品工业等领域的广泛应用。
我们需要准备好多糖源样品。
这可以是植物的果实、根茎、叶子，也可以是动物的骨骼、皮肤、软骨等。
样品需先经过适当的处理，如清洗、研磨和浸泡等，以去除杂质和增加提取效果。
接下来，将处理好的样品与适量的碱性溶液混合。
常用的碱性溶液包括氢氧化钠（NaOH）、氢氧化钾（KOH）等。
溶液的浓度和温度可以根据具体实验要求进行调整，在实际操作中，我们可以选择较低的浓度和适宜的温度，以避免多糖的降解和糖链的断裂。
混合溶液后，需要进行搅拌或加热处理，以促进多糖的溶解和释放。
搅拌的时间和速度、加热的温度和时间等因素也会影响提取效果。
通常情况下，较长时间的搅拌和适度的加热可以提高多糖的溶解度和提取率。
在溶解和释放过程完成后，我们需要对混合溶液进行分离和纯化。
这可以通过离心、过滤或沉淀等步骤来实现。
离心可以将固体颗粒和溶液分离，过滤则可以去除残留的杂质，沉淀则可以将多糖从溶液中沉淀出来。
根据实际需要，我们可以选择适合的分离方法。
我们将得到纯化的多糖产物。
这些产物可以进一步进行分析和应用。
常见的分析方法包括光谱法、色谱法、电泳法等，用于确定多糖的结构和性质。
在应用方面，多糖可以用作药物的载体、食品的添加剂、生物材料的基础等。
通过碱提法提取多糖的过程，不仅可以获得高纯度的多糖产品，还可以实现对多糖的定量和定性分析。
这为多糖的研究和应用提供了重要的实验基础。
同时，这种方法的操作简便、成本较低，适用范围广泛，因此在实际应用中得到了广泛的推广和应用。
多糖的提取和应用将为人类的生活带来更多的福祉和可能性，为健康和发展做出贡献。
多糖提取分离的原理和方法
多糖提取分离的原理和方法
多糖提取分离是指从植物、海洋生物、微生物等来源中提取和分离多糖类化合物的过程。
其原理主要基于多糖的化学性质和溶解性特点。
多糖提取分离的方法主要有以下几种：
1. 溶剂提取法：利用有机溶剂（如水、醇类、醚类等）将多糖提取出来。
这种方法适用于多糖相对溶解性较好的样品。
2. 酶解法：利用特定酶解剂酶解样品中与多糖相结合的其他物质，使多糖分离出来。
常用的酶解剂有蛋白酶、纤维素酶等。
3. 离子交换层析法：利用树脂的阳离子或阴离子交换功能将多糖从样品中分离出来。
这种方法适用于多糖具有不同电荷性质的样品。
4. 等温沉淀法：通过调节多糖样品中的溶液温度和离子浓度，使多糖形成胶体，并在一定条件下沉淀。
常用的方法有醇法、果胶酸盐法等。
5. 凝胶过滤法：利用凝胶材料的孔隙大小将多糖与其他物质分离。
常用的凝胶材料有琼脂、琼脂糖等。
补充说明：以上提到的方法只是多糖提取分离的常用方法之一，实际操作中还可
以根据样品特点选择合适的提取和分离方法。
多糖的提取分离方法
1.多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围，一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂，释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1．1溶剂法1．1．1水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70 %左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5 h，多糖的质量分数和得率均较高。
影响多糖提取率的因素有：水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备，生产工艺成本低，安全，适合工业化大生产，是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大，容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来，从而使提取液存放时腐败变质，为后续的分离带来困难，且该法提取比较耗时，提取率也不高。
1．1．2酸提法为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多糖沉淀析出，也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H＋的存在抑制了酸性杂质的溶出，稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高，但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂，且酸会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1．1．3碱提法多糖在碱性溶液中稳定，碱有利于酸性多糖的浸出，可提高多糖的收率，缩短提取时间，但提取液中含有其它杂质，使粘度过大，过滤困难，且浸提液有较浓的碱味，溶液颜色呈黄色，这样会影响成品的风味和色泽。
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1. 多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围，一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂，释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1．1 溶剂法1．1．1 水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70 %左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置 5 h，多糖的质量分数和得率均较高。
影响多糖提取率的因素有：水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备，生产工艺成本低，安全，适合工业化大生产，是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大，容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来，从而使提取液存放时腐败变质，为后续的分离带来困难，且该法提取比较耗时，提取率也不高。
1．1．2 酸提法为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多糖沉淀析出，也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H +的存在抑制了酸性杂质的溶出，稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高，但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂，且酸会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1．1．3 碱提法多糖在碱性溶液中稳定，碱有利于酸性多糖的浸出，可提高多糖的收率，缩短提取时间，但提取液中含有其它杂质，使粘度过大，过滤困难，且浸提液有较浓的碱味，溶液颜色呈黄色，这样会影响成品的风味和色泽。
1．1．4 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术。
超临界流体是指物质处于临界温度和临界压力以上时的状态，这种流体兼有液体和气体的特点，密度大，粘稠度小，有极高的溶解，渗透到提取材料的基质中，发挥非常有效的萃取功能。
而且这种溶解能力随着压力的升高而增大，提取结束后，再通过减压将其释放出来，具有保持有效成分的活性和无溶剂残留等优点。
由于C02的超临界条件（TC= 304. 6 C, Tp= 7. 38MPa容易达到，常用于超临界萃取的溶剂，在压力为8〜40 MPa时的超临界CO2足以溶解任何非极性、中极性化合物,在加入改性剂后则可溶解极性化物。
该法的缺点是设备复杂,运行成本高,提取范围有限。
1.2 酶解法1. 2. 1 单一酶解法单一酶解法指的是使用一种酶来提取多糖,从而提高提取率的生物技术。
其中经常使用的酶有蛋白酶、纤维素酶等。
蛋白酶对植物细胞中游离的蛋白质具有分解作用,使其结构变得松散；蛋白酶还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解, 降低它们对原料的结合力，有利于多糖的浸出。
1．2．2 复合酶解法复合酶解法采用一定比例的果胶酶、 纤维素酶及中性蛋白酶， 主要利用纤维素酶和果胶 酶水解纤维素和果胶， 使植物组织细胞的细胞壁破裂，的多少和复合酶的加入量、酶解温度、酶解时间、酶解 率高等优点。
1．3 物理强化法1．3．1 微波辅助提取法 微波萃取是高频电磁波穿透萃取媒质， 到达被萃取物料的内部， 能迅速转化为热能使细胞内部温度快速上升，细胞内部压力超过细胞壁承受力，细胞破裂，细胞内有效成分流出， 在较低的温度下溶解于萃取媒质，通过进一步过滤和分离，获得萃取物料。
微波辅助提取多糖和其他的萃取方法比较， 微波萃取效率高， 操作简单， 且不会引入杂 质，多糖纯度高，能耗小，操作费用低，符合环境保护要求，是很好的多糖提取方法。
1．3．2 超声波辅助提取法超声波提取是利用超声波的机械效应、空化效应及热效应。
机械效应可增大介质的运 动速度及穿透力，能有效的破碎生物细胞和组织，从而使提取的有效成分溶解于溶剂之中； 空化效应使整个生物体破裂， 整个破裂过程在瞬间完成， 有利于有效成分的溶出； 热效应增 大了有效成分的溶解速度， 这种热效应是瞬间的， 可使被提取成分的生物活性尽量保持不变； 此外，许多次级效应也能促进提取材料中有效成分的溶解，提高了提取率。
超声波提取与水煮法醇沉法相比，萃取充分，提取时间短；与浸泡法相比，提取率高。
1．3．3 高压脉冲法高压脉冲法是对两电极间的流态物料反复施加高电压的短脉冲 （典型为20〜80 kV/cm ） 进行处理，作用机理有多种假说，如细胞膜穿孔效应、电磁机制模型、粘弹极性形成模型、 电解产物效应、臭氧效应等，研究最多的是细胞膜穿孔效应。
动物、植物、微生物的细胞， 在外加电场作用下， 产生横跨膜电位， 绝缘的生物膜由于电场形成了微孔， 通透性发生变化， 当整个膜电位达到极限值（约为 1 V ）时，膜破裂，膜结构变成无序状态，形成细孔，渗透能力增强。
电位差达到临界点，细胞破裂。
2. 多糖的分离纯化2．1 除蛋白2．1 ． 1Sevage 法根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性的特点， 用V （氯仿）：V （戊醇或正丁醇）为5 :1或4 ： 1,混合物剧烈振摇 20〜30 min ，蛋白质变性生成凝胶，离心分离，分去水层和溶 剂层交界处的变性蛋白质。
此种只能除去少量蛋白质，效率不高，须反复多次，多糖有损 失。
但此方法比较温和,在避免多糖降解上效果较好,如配合加入一些蛋白质水解酶,用 Sevage 法效果更佳。
此法不能除去脂蛋白,因为脂蛋白溶于氯仿。
2．1 ． 2 三氟三氯乙烷法将多糖溶液与三氟三氯乙烷等体积混合,低温搅拌 10 min 左右,离心分离得上层 水层,水层继续用上述方法反复处理几次,得无蛋白质的多糖溶液,此法效率较Seavg 法高,但溶剂沸点低,易挥发,不宜大量应用。
2．1 ． 3 三氯乙酸法三氯乙酸是一种有机酸,使多糖提取液中的蛋白质与有机酸作用而变性沉淀。
该法是 在多糖水提液中滴加 5 %〜 10 %与多糖水提取液等体积的三氯乙酸,混匀静置过夜,离心除 去胶状沉淀，重释放细胞壁内的活性多糖， 多糖释放 pH 值有直接的关系。
酶解法提取的实质是通过酶解反应强化传质过程。
此法具有条件温和、杂质易除和得复以上的操作直至溶液不再继续混浊为止，得无蛋白质的多糖。
三氯乙酸浓度越大，除蛋白质效果越好，但对多糖的影响也越大，可能是三氯乙酸对多糖结构具有破坏作用，使多糖降解，而且这种破坏作用随着三氯乙酸浓度增大而增强。
植物多糖常采用三氯乙酸法除蛋白质，也可先用蛋白水解酶，使样品中的蛋白质部分降解后再用Sevag 法效果更好；微生物多糖去除蛋白常采用Sevag 法、三氟三氯乙烷法；也可用盐析法、有机溶剂萃取等方法除蛋白。
2．2 多糖的分离主要有分级沉淀、季铵盐沉淀法、金属盐沉淀法、色谱分离、膜分离、透析、电渗析等，目前大多采用DEAE-凝胶或其他各种不同类型的凝胶柱层析以及离子交换色谱法。
2．2．1 分级沉淀法大多数活性多糖可溶于水，3 个碳以下的多糖还可溶于乙醇，随着聚合度的增大，多糖在乙醇中的溶解度逐渐降低。
根据这一性质可在多糖的浓缩水溶液中分批加入乙醇，使乙醇的体积浓度逐渐增加到50 ，100，200，900 mL/L ，从而使不同聚合度的多糖分别沉淀析出。
2．2．2 色谱分离法常用两种色谱分离方法：一是凝胶柱色谱法，二是离子交换色谱法。
2．2．3 膜分离法膜分离技术（membra neseparatio n tech no logy ，MST是一种高效分离技术，分离过程以选择透过性膜作为分离介质，通过在膜两侧施加某种推动力（压力差、化学位差、电位差等），使原料液中组分有选择性的通过膜。
目前应用较多的是超滤和微滤技术。
3 多糖的分析鉴定3．1 含量的测定测定方法：硫酸－苯酚法、硫酸－蒽酮法、比色定量法、分光光度法、纸色谱法、离子交换色谱法、yaphe 法、薄层色谱法、酶法、原子吸收法、HPLC 法、凝胶电泳法、亲和电泳法、连续流动分析法检测法［44］、次亚碘酸盐定量法、蒽酮—硫酸法（总糖）、DNS法（还原法）、磷钼比色法、邻钾苯胺比色法等。
每种方法只对某些多糖的测量效果好。
比色法、分光光度法、离子交换色谱法、酶法和电泳法等可同时用于多糖的定性定量分析。
3．2 纯度鉴定多糖是高分子化合物，其纯品微观上是不均一的，通常所说的多糖纯品实质上是一定分子量范围的均一组分。
多糖纯度鉴定的常用方法：超离心、高压电泳、凝胶层析、HLPC 法等。
现在应用较多的是HLPC 法，旋光度测定也是纯度测定的一种方法。
3．3 分子量的测定多糖分子量的测定是研究多糖性质的一项重要工作。
常用方法：渗透压法、蒸气压渗透剂法、端基法、粘度法、光散射法、凝胶色谱法、超过率法、沉淀法、凝胶电泳法、HPLC 法、超离心分析法、分子筛色谱法、GPC法、MALD—TOF—MS法。
3．4 结构测定3．4．1 多糖一级结构测定多糖的一级结构分析，主要是分析组成多糖的单糖类型、数目、连接方式及苷建构型。
常用化学法和仪器分析法。
多糖组分与分子比例测定法：部分酸解法、完全酶解法、色谱法；吡喃、呋喃环形式结构的分析：红外光谱；连接次序：选择性光谱法、糖苷键顺序水解、核磁共振；a-B-异头异构体：糖苷酶水解、核磁共振；羟基被取代情况：甲基化反应、气相色谱、过碘酸氧化、Smith 降解法和测硫酸基法（terho 法）、核磁共振、质谱法；糖链、肽链连接方式：单糖与氨基酸组成、稀碱水解法、肼解反应；多糖结构的分析方法很多，迄今没有一种方法可以单独完成多糖结构的分析。
仪器分析与化学方法相结合是常用的多糖结构测定方法。
3．4．2 多糖高级结构测定目前研究多糖的二级结构常用的手段是NMR 技术，如2D－NMR，13C 谱，通用的方法是将现代NMR 技术与理论计算相结合通过一定的理论计算筛选构象，主要的理论计算方法有从头计算、丰度经验计算及经验力场计算。
圆二色谱法（CD也可用于糖的构象分析，近年来，以精确三维结构知识为基础揭示重要生命活动的规律已达到前所未有的深度和广度，多糖作为一类重要的生物活性大分子其结构的研究势必推动对多糖的认识向深层次发展。
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