三种中药和桦褐孔菌提取物体外抗弓形虫试验

摘 要 ： 了进 一 步研 究甘草 、 为 黄芩 、 齿苋 和桦褐 孔 茵体外 抗 弓形 虫作 用 ， 试验 将提 取 的 ３种 中药和 马 本 桦褐 孔 茵提取 物及 其组 合分 别进行 了体 外抗 弓形 虫试 验 。结 果表 明 ， 甘草 和 黄芩 提 取 物具 有 较好 的抗 虫效
果， 且黄 芩优 于甘 草 ， 马齿苋 和桦褐 孔 茵提取 物抗 虫效 果较 弱 ； 草与黄 芩 组合 、 甘 ４种提 取 物 组合 的 效 果优 于 其他 组合 和 蒿 甲醚组 。说 明 ４种提 取 物组 成的 复方在 体 外具有 良好 的抗 弓形 虫作 用。
动物 医学进 展 。０２ ３ （）４—１ ２ １ ，３ ２ ：６５
Ｐｒ ｇ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎ ｒ ｅ ｉｉ ｏ ｒ ｓ ｎ Ｖｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｄ ｃｎｅ
三 种 中药 和 桦 褐 孑 菌 提 取 物 体 外 抗 弓形 虫试 验 Ｌ
王韵 篪 ， 玉琳 ， 鞠 姚 琳
（ 边 大 学农 学 院 ， 林 延 吉 １ ３ ０ ） 延 吉 ３０ ２
二 倍倍 比进行 稀 释 ， 加入 药 物 ， 设 ５个 重 复孔 。孵 各 育２ 、 ８ｈ ４ｈ ４ 。试 验 组 每 孔 加 入 ２ Ｌ ＭＴＴ 溶 液 Ｏ （ ／ ） 培养 ４ｈ 吸 去孔 内培 养 液 。每 孔 加入 ５ｍｇ ｍＬ ， ，

１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
２ 、 ８ｈ增殖 率均 在 ９ 以上 的药物 浓 度 定 为 安 ４ｈ ４ ０ 全浓度 ， 于体 外抗 弓形 虫试验 。增殖 率计 算 方 法 ： 用 增殖 率 （ ） （ 一 ＯＤ 值 试 验 组 一 Ｏ 空 白对 照 组 ） Ｄ ／
津 灏 阳生物 有 限公 司） ＭＴ Ｓｇ ） 二 甲基 亚 砜 ； Ｔ（ ｉｍａ ； （ ＤＭＳ （ Ｏ） Ａｍｒｓｏ公 司进 口分 装 ） 其 他 试 剂 为 国 ｅｅ ； 产 分析 纯 。 １ １ ２ 仪 器 二 氧 化 碳 培 养 箱 （ ．． ＮＵＡＩ ＮＵ一 Ｒ， ５ ０ Ｅ型 ） 倒 置显 微镜 （ ｋ ｎ Ｊ ２ ０ ５０ ； Ｎｉｏ ，Ｅ ０ ０型 ） 旋 转蒸 ；
１ ２ 方 法 ．
病之一 ＿ ］ 目前 ， 病 的治 疗 主 要 以西 药 为 主 ， １。 该 但
传统 的磺胺 嘧 啶和 乙胺 嘧啶联合 应 用 表现 出了 明显
的毒 副作 用 ， 其 应 用 受 到 限制＿ ］ 使 ３ 。因此 ， 索 高 探
效安 全 的防治药 物甚 为迫 切 。现 已证 明 ， 甘草 、 芩 黄 水煎 剂在 体外具 有 一定 的抗 弓形 虫 作用 ； 马齿 苋 和桦 褐孔 菌水 煎剂对 小 鼠急性 弓形 虫 感染 有 较好 的
１ １１ 试 剂 ． ．
Ｄ ＭＥ 干粉 （ Ｂ Ｏ） 胎 牛 血清 （ Ｍ ＧＩ Ｃ ． ； 天
１ ０￣ Ｄ Ｏ， 摇 床 上 振 荡 １ ｎ 在 酶 标 仪 ５ Ｌ ＭＳ 置 ０ ｍｉ ， Ｏ ／。 处 双 波 长 测 量 各 孔 吸 光 值 ， ５孔 平 均 Ｄ ６ ３ 以 值 ， 算各浓 度 下 Ｖｅｏ细 胞增殖 率 。根据 美 国药典 计 ｒ 中关 于 细 胞 相 对 增 殖 率 与 细 胞 毒 性 分 级 评 价 ， 将
胎牛 血清 的 Ｄ Ｍ 培养 液 按 照 有 效成 分 含 量 倍 比 ＭＥ 稀 释 ， ０ ２ ｍ 微 孑 滤膜 过 滤除菌 ， 用 。 用 ．２ Ｌ 备
ｌ １ ４ 细胞及 虫株 非 洲 绿 猴 肾细胞 （ ｒ ） ＿ ． Ｖｅｏ 由哈 尔滨 兽 医研究 所 提供 ； 弓形 虫 ＲＨ 株 由 日本 带 广 原 虫病 研究 所 惠赠 ， 液氮 中保存 。 在
１ ２ １ ４种 提 取 物 对 Ｖｅｏ细 胞毒 性 试 验 采 用 ． ． ｒ ＭＴ Ｔ法 ， 种药 物设 试 验 组 、 验 对 照组 和空 白对 每 试
照组 （ 加 细胞 ） 不 。取 细 胞悬 液 ， 数 １ ｍＬ， 孔 计 ０／ 每 １ ０ Ｌ接种 于 ９ ０ ６孔 培 养 板 内 ， ３ 在 ７℃ 、 积 分 数 体
１ １ ３ 试 验 药材 ． ．
黄芩 黄酮 （ 乙醇 提 取 物 ， 黄 酮 总
含 量 １ ７ ） 甘 草 黄 酮 （ ．８ ； 乙醇 提 取 物 ， 黄 酮 含 量 总
琦 等 报道 的 ＭＴＴ方 法 ， 每种 药 物 设 试验 组 、 虫 加 体对 照组 、 加虫 体 对 照 组 和 空 白对 照 组 。在 底 部 不 形成 单个 细胞 层 的 ９ ６孔 板 内接 种 经 ５ ｍ 滤膜 纯化
关键 词 ： 药提取 物 ； 中 弓形 虫 ； ＭＴＴ 法
中 图分 类 号 ： ８ ９ ７ ￥ ５ ． ３ ￥ ５ ． ；８ ２ ７ １ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ７ ５ ３ （ ０ ２ ０ — ０ ６０ １ ０ — ０ ８ ２ １ ） ２０ ４ — ６
弓 形 虫 病 （ ｘ ｐｓ ｓ ）是 由 刚 地 弓 形 虫 Ｔｏ ｏ ｌｍａｉ ｓ （Ｔ ｘ ｐａ ｍａｇ ｎ ｉ 引起 的全身 性感 染 的人 兽共 ｏ ｏ ｌｓ ｏ ｄ ｉ） 患寄生 虫病 ， 全 球 感染 最 普 遍 的人 兽 共 患 寄 生 虫 是
发 仪 （ 海 亚 荣 生 化 仪 器 厂 ， 一２ 上 ＲＥ ５ ＡＡ 型 ） 酶 标 仪 ；
（ 上海科 华 实验 系统有 限公 司 ， Ｔ３ ０型 ） 。 Ｓ ６ 等
（ ＯＤ值 试验 对 照组 一Ｏ Ｄ值 空 白对照组 ） ０ 。 ×１ ０
１ ２ ２ ４种 提取 物体 外 抗 弓形 虫试 验 参 考 王 海 ． ．
治疗 作用 ， 桦褐 孔 菌 多 糖 为体 内抗 弓形 虫 作 用 主 要 成分 【 ］ ５ 。本试验 将 ４种 提 取 物及 其 组 合 进 行 抗 弓
形 虫 的体 外试 验 ， 以探讨 其体 外抗 弓形 虫作用 效果 。
为 ５ Ｃ 孵育 １ 。设 ５个 浓 度 梯 度 （ １ ， Ｏｚ ８ｈ 表 ） 以