超声波降解紫球藻胞外多糖研究
微波预处理-超声波辅助提取紫山药多糖及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究
微波预处理-超声波辅助提取紫山药多糖及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究WANG Yan-ping;CHEN Yue-ying;JIA Yan-jie;CAO Ya;XU Shi;LOU Fang-hui 【摘要】以紫山药粉为原料,对微波预处理-超声波提取紫山药多糖的工艺进行优化,并以α-葡萄糖苷酶抑制模型研究其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用.通过单因素及正交试验确定最佳提取工艺为料液比1:40(g/mL)、微波功率300 W、微波时间30 s、超声功率270 W、超声时间30 min.在最佳工艺条件下,紫山药多糖平均得率为11.12％.醇沉后的紫山药多糖粉末中多糖的质量分数为45.80％.α-葡萄糖苷酶活性抑制试验中,紫山药多糖表现出明显的抑制作用,对α-葡萄糖苷酶抑制能力较阿卡波糖弱.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2019(040)014【总页数】6页(P7-12)【关键词】紫山药;多糖;微波预处理;超声波辅助提取;α-葡萄糖苷酶抑制【作者】WANG Yan-ping;CHEN Yue-ying;JIA Yan-jie;CAO Ya;XU Shi;LOU Fang-hui【作者单位】;;;;;【正文语种】中文紫山药多糖是紫山药细胞壁的结构成分，具有抗氧化[1]、免疫调节[2]、抗衰老[3-4]、降糖[5]、耐缺氧[6]等多种生物活性。
目前研究紫山药多糖的提取方法主要集中在热水浸提法[7]、超声波提取法[8]、微波提取法[9]和生物酶法提取[10]等，其中热水浸提法耗时长、温度高、得率低、纯度低，超声波法提取时间短、得率高，但长时间作用会破坏多糖活性[11]，微波法虽提取时间大为减少，但提取温度难以控制，亦会破坏多糖活性。
微波预处理-超声波辅助提取法首先采用微波对经水浸润的物料粉进行0.5 min～3 min 微波预处理，利用微波的热效应使生物细胞壁和细胞膜迅速破裂，然后进行20 min～60 min 超声波提取，利用超声波空化作用、机械作用和热效应进一步破坏生物细胞壁结构，加快多糖释放速度[12]。
螺旋藻中多糖成分的提取及其生物活性分析
螺旋藻中多糖成分的提取及其生物活性分析螺旋藻是一种重要的微藻，它具有多种营养成分和生物活性物质，其中多糖是一种重要的生物大分子。
提取螺旋藻中的多糖成分，对于发掘其药用价值具有重要意义。
本文将介绍螺旋藻中多糖成分的提取方法和生物活性分析。
一、多糖的提取方法1. 酸解和碱解法酸解和碱解是常用的提取多糖的方法。
其中酸解法是使用稀酸将多糖降解成糖分子，而碱解法则是使用碱性物质将多糖溶解并降解成糖分子。
这两种方法都需要注意温度和时间的控制，以免多糖降解过度。
2. 酶解法酶解法是利用多种酶将多糖分子降解为单糖或低聚糖的方法。
该方法不仅能够提取多糖，还能够保持其分子量分布范围的完整性。
常用的酶包括纤维素酶、淀粉酶、木聚糖酶等。
3. 超声波法超声波法是利用超声波的机械作用将生物样品处理成微小颗粒，从而加速多糖的释放和提取。
该方法具有操作简单、节省时间等特点，但需要注意超声波强度和处理时间的控制。
二、多糖的生物活性分析螺旋藻中的多糖具有多种生物活性，其中包括免疫增强、抗氧化、抗肿瘤、调节血糖等作用。
下面将介绍对多糖生物活性的分析方法。
1. 免疫增强活性分析免疫增强活性是多糖的重要生物活性之一。
常用的分析方法包括体内免疫增强实验和体外免疫细胞激活实验。
前者是通过给小鼠注射不同剂量的多糖，观察其对机体免疫功能的影响。
后者是将多糖加入到人体免疫细胞培养液中，观察其对免疫细胞的激活能力。
2. 抗氧化活性分析抗氧化活性是多糖的另一种重要生物活性。
该活性的分析方法包括自由基清除实验、铁离子还原能力实验和总抗氧化能力实验。
通过这些实验，可以测定多糖对氧自由基和其他有害化学物质的清除作用，并评估其抗氧化能力。
3. 抗肿瘤活性分析抗肿瘤活性是多糖的一种重要药理作用。
该活性的分析方法包括细胞毒性实验、细胞周期分析和肿瘤模型实验。
可以通过这些实验，测定多糖对乳腺癌、肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞的作用，并评估其抗肿瘤活性。
4. 调节血糖活性分析调节血糖活性是多糖的另一种重要生物活性。
超声波树脂联用法提取活性污泥中的胞外聚合物
3收稿日期:2006203210作者简介:李绍峰,博士,副教授,主要从事水污染控制研究。
基金项目:广东省自然科学基金项目(04300420);教育部春晖计划项目(2005)文章编号:100926094(2006)0520011203超声波树脂联用法提取活性污泥中的胞外聚合物3李绍峰1,王宏杰2,王雪芹3,董文艺2,崔崇威3(1深圳职业技术学院建工系,深圳518055;2哈尔滨工业大学深圳研究生院,深圳518055;3哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨150090)摘 要:考察了超声波树脂联用法提取活性污泥中胞外聚合物的影响因素,确定了最佳提取条件。
试验结果表明,树脂量为60g/g VSS ,在摇床振摇强度250r/m in 下处理4h ,再进行超声处理2m in ,EPS 提取量接近理论含量,即污泥干重的15%,与阳离子树脂法相比,EPS 提取物中DNA 的百分含量较低,即对细胞的破坏程度更小,说明超声波树脂联用法稳定、高效,是一种较佳的提取方法。
关键词:环境工程;超声波;树脂;活性污泥;胞外聚合物中图分类号:X172 文献标识码:A0 引 言胞外聚合物(Extracellular P olymeric Substances ,EPS )普遍存在于活性污泥絮体内部及表面,具有重要的生理功能,不仅对污水中金属离子的去除有贡献[1],而且对生物膜传质、活性污泥沉降及絮凝性能等都有重要影响[224]。
但由于其组成的复杂性、提取方法的多样性和无可比性,使得对EPS 的性质及EPS 影响污泥性能的研究所得到的结论没有很好的共性,甚至是相互矛盾的,因此,确定一种好的提取方法就尤显重要。
目前提取EPS 最常用的方法是阳离子树脂法,它通过机械和化学两方面作用,提取污泥中的EPS 。
超声波产生的空穴作用均匀,若控制好操作条件,可以使污泥絮体破碎,EPS 从细胞剥离更彻底,且细胞破坏量小。
本文将考察影响超声树脂联用法提取胞外聚合物的因素,确定最优试验参数,找出一种高效稳定的提取方法。
小球藻提取过程
小球藻提取过程以小球藻提取过程为标题，写一篇文章。
小球藻是一种常见的微藻类生物，具有很高的生物学和经济价值。
它富含蛋白质、多种维生素和矿物质，被广泛应用于食品、饲料、化妆品等领域。
小球藻的提取过程是将其有效成分从细胞中分离出来的过程，下面将详细介绍该过程。
选择新鲜的小球藻作为原料。
新鲜的小球藻含有较高的营养价值，能够提取出更多的有效成分。
因此，在提取过程中，选择质量良好的小球藻是非常重要的。
可以通过观察其颜色、形状和气味来判断小球藻的新鲜程度。
接下来，进行细胞破碎。
小球藻细胞壁坚硬，需要经过破碎才能将其中的有效成分释放出来。
常用的破碎方法有机械破碎、超声波破碎和化学破碎等。
机械破碎是将小球藻放入研磨机中进行高速旋转，使细胞壁破裂；超声波破碎是利用超声波的高频振动作用破坏细胞壁；化学破碎则是通过使用化学试剂溶解细胞壁。
不同的破碎方法选择取决于实际需要和设备条件。
随后，进行细胞分离。
经过破碎后，小球藻细胞的内部成分被释放出来，包括蛋白质、多糖、核酸等。
为了得到目标成分，需要将其中的杂质和固体颗粒分离出来。
常用的分离方法有离心、过滤和沉淀等。
离心是利用离心机的离心力将细胞碎片和液体分离；过滤则是通过滤纸或者滤膜将固体颗粒过滤掉；沉淀则是将液体静置一段时间，使颗粒沉淀到底部。
根据需要，可以根据不同的分离效果选择合适的方法。
进行有效成分的提取。
经过前面的处理，小球藻中的有效成分已经得到了分离和纯化。
接下来，可以使用不同的提取剂将其中的目标成分溶解出来。
常用的提取剂有有机溶剂、水、酸碱等。
不同的成分可能需要不同的提取剂，因此需要根据实际情况选择合适的提取剂。
提取剂与小球藻中的目标成分发生化学反应后，通过分离和纯化，最终得到纯净的有效成分。
通过以上几个步骤，小球藻的提取过程就完成了。
这个过程涉及到细胞破碎、细胞分离和有效成分的提取等多个环节，需要仔细操作和科学控制条件，才能得到高纯度的有效成分。
小球藻的提取过程在食品、饲料、化妆品等领域具有广泛的应用前景，有着很高的经济和社会价值。
植物活性多糖的提取实验报告
植物活性多糖的提取实验报告紫菜多糖提取实验报告紫菜多糖的提取与理化性质研究Made by Zilong【摘要】水提法分离纯化了紫菜多糖；采用TLC法分析证明紫菜多糖组成中含有半乳糖、甘露糖和葡萄糖；苯酚-硫酸法显色结果为黄色；溶液酸催化分解后加入氯化钡可产生沉淀。
【关键词】苯酚-硫酸法紫菜多糖TLC前言：紫菜属于海藻类主要为红藻门红毛菜科植物甘紫菜的叶状体是一种深受人们喜爱的食物。
紫菜多糖一般分为紫菜胶和琼胶两类主要区别在于琼胶中硫酸基含量比紫菜胶中的少,而3,6-内醚-半乳糖含量前者比后者高。
紫菜多糖的含量由于种类、生长环境和生长季节等不同而有很大差异各种多糖的单体组成也不同主要由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖和木糖组成是一种含糖醛酸的酸性异多糖。
研究表明紫菜多糖具有多种生物学活性及药用价值如降血脂、抗血栓、降血糖、抗炎、抗疲劳、增强免疫、抑制肿瘤生长等作用在保健品和医药中具有广阔的开发前景。
1. 材料与方法1.1 原料与试剂原料：干紫菜粉末（实验指导教师提供）试剂：苯酚、浓硫酸、氯化钡、氯仿、正丁醇、三氟乙酸、苯胺、二苯胺均为国产分析纯试剂。
主要仪器：硅胶薄层板、电热恒温水浴锅、DHG-9145型电热恒温鼓风干燥箱、电子天平、烧杯、安瓿瓶、滴管。
1.2 实验方法1.2.1 紫菜多糖的提取取1.0g干紫菜粉末于烧杯中，按照液料比20:1加入20ml蒸馏水，搅拌均匀后用保鲜膜封口，置于水浴锅中80℃恒温提取2h，抽滤后得提取液。
1.2.2 紫菜多糖除杂蛋白将提取液与saveg试剂（氯仿：正丁醇=4:1）按照体积比1:4混合，按照saveg法除蛋白得上清液。
1.2.3紫菜多糖的分离纯化取上清液，加入4倍体积的无水乙醇得到沉淀。
抽滤分离沉淀后用80%的乙醇及无水丙酮洗涤干净，在干燥箱中烘干3小时得紫菜粗多糖。
1.2.4紫菜多糖的理化性质分析1.2.4.1苯酚-硫酸法显色反应配制0.1mg/ml的粗多糖溶液。
超声波技术去除藻毒素的效果
对于藻类污染的控制主要从以下两方面考虑： 1） 从源头治理，控制营养物质，特别是控制含氮磷 的有机物过多排入受纳水体，这是处理富营养化水 体最有效彻底的措施； 2） 当水体富营养化已经形 成，一旦蓝藻水华暴发，应当采取有效的应急及治理 措施。蓝藻污染带来的危害包括高密度的藻体及藻 毒素两方面，而目前的大部分治理措施都立足于除 藻而忽略了藻毒素，往往有些灭藻措施仅杀灭藻细 胞，反而促使藻细胞内藻毒素释放至水体，导致治理 措施本身存在安全性的危险。因此需开发同时具有 除藻和除藻毒素作用的除藻技术。
高效液相色谱法（ HPLC） 以其准确、灵敏、重现 性好而且可以同时分析多种藻毒素异构体等优点而 被 WHO、美国、英国等推荐为 MCs 的 标 准 检 测 方 法。我国在 GB / T 20466—2006《水中微囊藻毒素的 测定》中将 HPLC 法列为藻毒素的标准检测方法之 一。微囊藻毒素在 238 nm 波长下有特征吸收峰。 取微囊藻毒素标准品（ 纯度≥95% ，台湾藻研有限 公司） 绘制标准曲线。不同的藻毒素异构体有不同 的保留时间，将其与微囊藻毒素标样的保留时间对 比，便可得出测试样品中微囊藻毒素的组成。试验 采用外标法依据出峰面积，计算水样中微囊藻毒素 的浓度。 1. 2. 2. 2 竞 争 酶 联 免 疫 吸 附 法 （ 藻 毒 素 试 剂 盒
多糖提取——精选推荐
传统的海带多糖的提取方法包括:热水提取法、酶提取法、碱提取法，度是而这些提取方法都存在一定的缺陷。
热水提取的方法采用的温70^-80'}C耗能多，提取时间长.工业生产需要使用的酶量大，不经济。
酶提取的方法提取的时间长，碱提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法，但是碱提取方法会造成多糖生物活性的降低。
因此寻找合适的提取方法来降低能耗，提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重要。
为达到这一目的，我们现采用超声波方法来提取海带多糖，随后对其理化性质和生物学活性进行检侧，并与传统方法进行比较，以期得到海带多糖提取的最佳方法。
配制1%的碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500mL水称取制备好的200g海带粉，置于不锈钢桶中，加入配好的碳酸钠溶液2. 8L,在50℃水浴5h，趁热用棉纶网进行吊滤，并不断用热冲洗保持温度，获得的吊滤液于5000r/min离心15min，保留上清液。
按体积比平均分成两份，一份上清液经减压浓缩(40 ℃)后，加入三倍体积95%乙醇，沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖 E.另一份上清液中加入氛化钙( 2g/1OOmL)，静置，5000r/min离心去除揭藻酸钙。
上清液经减压浓缩(40 ℃)后，加入三倍体积95%乙醉，沉淀过夜.离心后获得海带硫酸多糖F.将以上所得沉淀E, F各重新溶于水，离心除去不溶物。
上清液再加三倍体积95%乙醇，静置沉淀.生成沉淀经无水乙醇、乙醚洗涤，重新溶于蒸馏水，置于一20℃冰箱冷冻过夜，冷冻干燥得到海带杂多糖E,以及海带硫酸多糖粗品F1可溶性大豆多糖是一种从大豆中提取的多糖类化合物，主要由膳食纤维组成，而膳食纤维对治疗高血压、高血脂、心血管疾病和肥胖病等具有积极作用[1-3]。
可溶性大豆多糖还具有分散稳定性、乳化性，所以常用于酸性饮料中[4-5]。
其属于酸性多糖，结构类似于果胶，多数类型由半乳糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸，也包括鼠李糖、海藻糖、木糖、葡萄糖等。
专题5 活性多糖
多糖是一种免疫调节剂 (激活机体免疫反应) 但也有少数多糖具直接杀死癌细胞作用 或两者俱存 ---- 治疗机体免疫功能受到严重损伤的癌症和艾滋病 ----治疗多种免疫缺损疾病和某些细菌,病毒引起的 疾病 ----多糖还具有明显的抗病毒、抗感染、降血糖、 降胆固醇、降血脂、抗心肌缺血作用 多糖作为药物的最大特点是毒副作用很小
沙棘多糖溶液
◦ 以生理氯化钠溶液为对照，0.32％的沙棘多糖溶液有明 显的抗氧化作用 ◦ 随着浓度的升高，抗氧化作用明显上升
金樱子多糖(PRL)
◦ 能显著清除超氧阴离子自由基、抑制羟自由基对细胞膜 的破坏而引起的溶血和脂质过氧化产物的形成。
中药夏枯草中分离出来的硫酸多糖
◦ 具有抗HIV作用， ◦ 对HIV病毒的最小抑制浓度为1.4～2.8 mg· L-1
百合多糖: 降血糖
◦ 修复β一胰岛细胞、增强胰岛素的分泌、 ◦ 降低肾上腺皮质激素分泌以及促进肝脏中血糖转化为糖元 的联合作用，
桑叶中分离得到一种糖肽复合物(glyco—peptides， GPs)，
南瓜多糖:
◦ 有降血糖、三酰甘油和胆固醇水平的作用 ◦ 能提高动物对高糖的耐受力，且与胰岛素有很好的协同作 用。
芦荟：甘露聚糖:
◦ 通过免疫激活作用促进非包被小核糖核酸病毒衣壳蛋白 抗原抗体的产生，
螺旋藻多糖:
◦ 具有抗辐射能力，降低辐射引起的突变频率， ◦ 增强骨髓细胞的增殖活性， ◦ 具有维持藻体本身超强辐射抗性的重要作用， ◦ 现已开发成抗辐射医药保健品
显著减轻小鼠骨髓细胞和蚕豆根尖细胞的辐射遗传损伤，
海带中的聚岩藻糖
◦ 具抗凝血作用，
褐藻糖胶
低浓度下不同葡萄糖浓度对小球藻胞内蛋白质和多糖的影响2
低浓度铅胁迫下不同浓度葡萄糖对小球藻生理生化的影响葸玉琴1董杰2杨梅霞3葸阳4罗亦欣5吕瑾美6(西北师范大学生命科学学院甘肃兰州730070)摘要：本实验通过测定小球藻生物量，叶绿素，胞内可溶性蛋白质和多糖的含量，来观察适宜Pb2+浓度胁迫下不同浓度葡萄糖对小球藻生理生化的影响。
实验证明，当初始藻密度为0.035g/L时，10g/L的葡萄糖浓度在经济和效益两方面都有利于小球藻的大规模培养，在此浓度下，小球藻可溶性蛋白和多糖的单位质量浓度分别达到了343.06mg/g 和406.05mg/g，产率分别达到了22.58 mg.(g.d)-1和67.68mg.(g.d)-1，具有重要的指导意义。
关键字：铅胁迫可溶性蛋白质(protein) 胞内多糖( polysaccharide)Abstract: this experiment through the determination of chlorella biomass, chlorophyll, soluble protein and intracellular polysaccharide content, to observe appropriate Pb2 + concentration under stress of different concentrations of glucose on chlorella physiological and biochemical influence. Experiments show that 1 g/L glucose concentration in economic and benefits both to chlorella of mass culture, in this concentration, chlorella soluble proteins and polysaccharides unit mass concentration reached to 343.06 mg/g and 406.05 mg/g, yield reached to 22.58 mg. (g.d) - 1and 67.68 mg. (g.d) - 1. It has important guiding significance.Keywords:Lead stress;protein;Intracellular polysaccharide小球藻(chlorella vulgaris )光合作用强，藻体中蛋白（protein）含量超过50%，含有人类所需的20种氨基酸。
海洋微生物多糖研究概况
海洋微生物多糖研究概况【摘要】随着人类知识领域的扩展、对海洋了解的深入，人类开始从海洋生物中提取有益人体健康的物质。
海洋微生物作为海洋生物的一大类，其生长过程中产生大量次级代谢产物，高压高盐低光照寡营养的生长环境为次级代谢产物的多样性提供了条件。
海洋中存在大量真菌，细菌和放线菌，所以产生了不同于陆地的结构新颖的微生物多糖。
海洋微生物多糖表由于结构和功能特异性，至今研究进展和利用率较低，成果转换速度比较慢，被认为是药物发现的新型天然产物重要来源。
大多数海洋多糖来源于天然来源，如岩藻依聚糖，藻酸盐，角叉菜胶，琼脂糖，卟啉，超凡，毛兰，几丁质，壳聚糖和壳寡糖。
最近，海洋多糖类纳米材料的研究和开发，作为纳米技术的应用受到了广泛关注。
海洋多糖类纳米材料具有良好的生物相容性，可生物降解性，无毒性，低成本和丰富性。
【关键词】海洋微生物次级代谢产物海洋多糖1.1微生物胞内多糖研究概况海洋微生物发酵方式一般分为固体培养和液体培养，培养基的碳源、氮源、温度、湿度、pH、无机盐成分、溶氧量等都会对微生物的发酵构成影响，所以对微生物多糖的产率和结构会构成影响。
微生物胞内多糖一般采取热水提取法。
例如Ke-FengWang等人通过离心从酪醇诱导的培养物中分离菌丝体，物料比为1：30，热水（90℃）提取2小时3次。
通过离心和过滤收集上清液，通过减压蒸发浓缩，并用4体积的95%乙醇在4℃过夜沉淀，粗品经过离心，洗涤，透析浓缩等方法得到纯品多糖IPS-T。
从菌丝体中分离的细胞内蛋白质—多糖（IPS）是一种高效的抗肿瘤剂和免疫调节剂。
王宏雨等人把姬松茸菌丝体按物料比1：10比例，100摄氏度热水提取4小时，浓缩醇沉得到粗品多糖，进一步除蛋白分离纯化得到纯品胞内多糖。
将菌丝体发酵液发酵液离心、浓缩、醇沉、纯化得到纯品胞外多糖。
对胞外多糖和胞内多糖进行抗氧化活性研究，DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力比较发现，浓度为15mg/m L时胞内多糖活性明显优于胞外多糖。
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设计对超ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ波降解紫球藻胞外多糖的影响因素 （ 处理振幅、时间、脉冲） 进行优化，获得超声波处理的最佳
条件：振幅３％、处理 时间２ ５和脉 冲９５。在最佳条件下，胞外多糖 的粘度为２９ ｍ ／，与预 测值一致 。采 ９ ４ｓ ． ｓ ． ｍ２ ８ ｓ 用ＤＰ 软件对 实验结 果进行二次多项式分析与拟合 ，并对模 型和回归 系数进行显著性检验 ，建立 了以胞外 多 Ｓ
Ｗａ ％． ａ ｒｔ ｏｙ ｏ ａ ｏ Ｓ ｓ ｆ ｒ ｓ ｓｄｔ ａｙ ｅａ ｄｆ ｅｒｓｌ ｏ ｅ ｓ ０ Ｑｕ ｄａｉ ｐ ｌｎ ｍｉｌ ｆＤＰ ｏｔ ｅＷａ ｕ ｅ ａ ｌｚ ｔ ｅｕｔ ｆ ｃ ｗａ ｏｎ ｎ ｉ ｔ ｈ ｔ ｈ
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糖 粘度 为 目标 的 回 归方 程 式 。
关键词 ：紫球藻 ；胞外多糖 ；超声 波；均匀设计 ；粘度
中图分类号：Ｑ５ ． ３ 文献标识码：Ａ 文章编号 ：１０ ．７ １ ０ ８０ ．０ ８ ３ ０ ９７９ （ ０ ）１０ ４ － ２ ０
Ｕｌｒ ｓ ｎ ｃＤｅ ｒ ｄ ｔｏ ｆＥｘ ｒ ｃ ｌ ｌ ｒＶｏ ｙ ａ ｃ ｒ ｄ ｒ ｍ ｔ ａ ｏ ｉ ｇ ａ ａ ｉ ｎ ｏ ｔ ａ ｅｌ ａ ｌ ｓ ｃ ｈａ ｉ ｅｆ ｏ ｕ Ｐｏ ｐｈ ｒｄ ｕ ｃ ｕｅ ｕ ｒ ｙ ｉ ｉ ｍ ｒ ｎｔ ｍ
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维普资讯
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超声波 降解紫球藻胞外 多糖研 究
刘 梅 ，陈必链 ，陈伟 平
（ 福建师范大 学 生命科学学院，福建 福州 ３０ ０ ） ５ １８
摘
要 ：通过测定溶 液粘度 ，判断超 声波降解紫球藻 （ ｏ ｈｒ ｉ ｒｅｔ ｉ 胞外 多糖 的效果。运 用均匀 Ｐ ｒ ｙｉｕ ｃｕｎ ｍ ） ｐ ｄｍ ｕ
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