降胆固醇菌株筛选方法
筛选菌株知识点

筛选菌株知识点随着微生物学研究的深入,筛选菌株成为了重要的研究手段之一。
通过筛选菌株,科学家们可以寻找具有特定特性的微生物,从而用于各种应用,例如生物制药、环境修复、工业生产等。
本文将介绍在筛选菌株时需要考虑的几个重要知识点。
1.筛选目标:在筛选菌株之前,首先需要明确筛选的目标。
这可能包括菌株对特定环境条件的适应性、对特定废物的降解能力、对特定化合物的产生能力等。
明确筛选目标有助于确定筛选的方向和方法。
2.筛选方法:根据筛选目标的不同,可以选择不同的筛选方法。
常用的筛选方法包括营养筛选、化学物质筛选、生物活性筛选等。
营养筛选通常是根据菌株在特定培养基上的生长情况进行筛选,化学物质筛选则是根据菌株在特定化合物存在下的反应情况进行筛选,生物活性筛选则是通过检测菌株对特定生物活性物质的产生能力进行筛选。
3.筛选指标:为了评估菌株的筛选效果,需要确定一些筛选指标。
筛选指标可以是生长速度、产物产量、抗性等。
根据筛选目标的不同,筛选指标也会有所不同。
例如,在寻找能够高效降解某种废物的菌株时,降解率可以作为一个重要的筛选指标。
4.筛选培养条件:菌株的生长和活性往往受到培养条件的影响。
在筛选菌株时,需要确定适合菌株生长和活性表达的培养条件。
这可能包括温度、pH值、氧气浓度等。
选择适合的培养条件有助于提高筛选的效果。
5.筛选策略:为了提高筛选效率,可以采用一些筛选策略。
例如,可以通过构建菌株库进行大规模筛选,或者通过改造菌株的基因组进行筛选。
筛选策略的选择应根据具体情况来决定,以提高筛选效率和准确性。
6.筛选结果评估:在筛选菌株后,需要对筛选结果进行评估。
评估可以包括菌株的纯度检测、特性表征等。
评估结果有助于判断筛选的效果,并确定是否需要进一步优化和选择。
筛选菌株是一项繁琐而重要的工作,需要科学家们综合运用多种知识和技术。
通过正确的筛选菌株,我们可以获得更多有价值的微生物资源,并为各个领域的应用提供可靠的支持。
在今后的研究中,随着技术的不断发展,筛选菌株的方法和策略也将不断改进和创新,为微生物学研究带来更多的突破和进展。
产胆固醇氧化酶菌株的筛选与鉴定

产胆固醇氧化酶菌株的筛选与鉴定刘文全;王莉莉;张雪勤;王宇;赵牧;李勇;任一兵;程君;冯涛;郑晓芳;杜佳【摘要】为获得产胆固醇氧化酶菌株,采用微生物纯化技术从动物新鲜粪便中进行分离,并对分离菌株的活性进行了测定,对活性较高的菌株进行分子生物学鉴定.结果表明:共筛选到产胆固醇氧化酶菌株36株;经酶活测定,筛选出4株对胆固醇降解活性较高的菌株;经16S rDNA基因序列分析,这4株细菌分别为无色杆菌、Lysinibacillus、假单胞菌和芽孢杆菌.%To obtain bacterial strains producing cholesterol oxidase, bacterial strains were isolated from animal intestines by microbial purification technology. The enzyme activity of these bacterial strains was tested and molecular biology character of these bacterial strains with higher enzyme activity was identified by molecular biology. Results showed that 36 bacterial strains producing cholesterol oxidase were isolated. By enzyme activity assay, four strains with high degrading efficiencies to cholesterol were screened out, which were Achromobacter, Lysinibacillus, Pseudomonas and Bacillus. The results may lay the foundation for further application of bacterial strains producing cholesterol oxidase in feed industry.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2011(039)004【总页数】3页(P127-129)【关键词】胆固醇氧化酶;筛选;鉴定【作者】刘文全;王莉莉;张雪勤;王宇;赵牧;李勇;任一兵;程君;冯涛;郑晓芳;杜佳【作者单位】攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;重庆大学,生物工程学院,重庆,400044;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000;攀枝花学院,四川,攀枝花,617000【正文语种】中文【中图分类】Q291胆固醇是一种甾体化合物,是所有动物细胞膜的重要组成成分,对维持动物体内正常的生理生化代谢具有重要的意义。
降胆固醇乳酸菌的筛选及其降胆固醇活性研究

降胆固醇乳酸菌的筛选及其降胆固醇活性研究潘道东;张德珍【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2005(026)006【摘要】为了得到一株高效降胆固醇的乳酸菌并研究其降胆固醇的特性,本研究通过体外筛选得到一株降胆固醇能力为41.87%的乳酸乳球菌乳亚种LQ-12,并用该乳酸菌发酵酸奶饲喂高脂模型大鼠,研究其对血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)、血清总胆酸(TBA)、肝脏总胆固醇(TC)、粪便总胆固醇(TC)、粪便总胆酸(TBA)以及体重和肝、肾、脾重量的影响.结果发现28d 后,与高脂模型组相比,实验组大鼠血清中TC、TG和TBA含量明显下降(p<0.05);粪便中TC含量升高,而TBA含量降低;肝重/体重显著降低.各组间大鼠的HDL-C、体重、肾重/体重、脾重/体重无显著差异.【总页数】5页(P233-237)【作者】潘道东;张德珍【作者单位】南京师范大学金陵女子学院食品科学与工程系,江苏,南京,210097;南京师范大学金陵女子学院食品科学与工程系,江苏,南京,210097【正文语种】中文【中图分类】TS201.3【相关文献】1.降胆固醇乳酸菌的体外筛选及其降胆固醇机理探讨 [J], 黄燕燕;郭均;黎恒希;杨爱君;冯立科;彭小霞;刘冬梅2.发酵酸肉中降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降胆固醇作用 [J], 丁苗;刘洋;葛平珍;王丹;周才琼3.自然发酵豆酱中降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及对大鼠血清胆固醇的影响 [J], 郭晶晶;张鹏飞;曹承旭;邹婷婷;乌日娜4.具有降胆固醇功能益生菌的筛选及其体外降胆固醇机制初探 [J], 李雅迪;柳陈坚;龚福明;李晓然5.具降胆固醇功能的海洋源乳酸菌的筛选及发酵条件工艺优化 [J], 万婧倞;罗曼;吴鹏;黄仕新;唐旭;徐长安因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
菌种筛选方法

菌种筛选方法菌种筛选是微生物学研究中的一项重要工作,通过筛选出具有特定特性或功能的菌株,可以广泛应用于医药、食品、农业和环境等领域。
本文将介绍一些常见的菌种筛选方法。
一、传统筛选方法1. 纯培养与分离纯培养与分离是最基本的菌种筛选方法。
通过采集样品,将其中的微生物分离出来,并通过重复分离和鉴定,筛选出单一菌种用于后续研究。
这种方法简单易行,但需要进行大量的繁琐工作。
2. 形态学特征筛选菌落形态学特征是菌株之间的重要区别指标,通过观察菌落的大小、颜色、形状等特征,可以初步筛选出具有目标性状的菌株。
这种方法不需要复杂的设备和技术,适合初步筛选大量样品。
3. 生理生化特征筛选生理生化特征是菌株在代谢和生长方面的表现,通过测定菌株对各种生理生化指标的反应,例如抗生素敏感性、产酶能力等,可以进一步缩小筛选范围。
这种方法需要特定的培养基和试剂,对筛选条件有一定要求。
二、分子生物学方法1. PCR扩增PCR扩增是一种常用的分子生物学技术,可以利用特异性引物扩增目标基因。
通过在筛选过程中选择特定的基因片段作为指标,可以筛选出具有目标特性的菌株。
这种方法具有高灵敏度和高特异性,适用于筛选基因工程菌株等特定要求的菌株。
2. 基因芯片基因芯片是一种高通量技术,可以同时检测上千个基因。
通过在菌种筛选中选择合适的探针,可以迅速准确地筛选出具有目标基因表达的菌株。
这种方法操作简便,适用于大规模筛选。
3. 基因重组技术基因重组技术是一种将异源基因导入宿主细胞中的方法,通过构建适当的载体和选择合适的宿主细胞,可以快速筛选出具有目标基因功能的菌株。
这种方法需要相关的分子生物学技术支持,适用于特定的目标筛选。
三、高通量筛选方法1. 微孔板筛选微孔板是一种用于大规模平行筛选的工具,通过在每个微孔中添加不同培养条件和指标物质,可以同时筛选多个菌株。
这种方法高效快速,可以用于大规模筛选和反复筛选。
2. 流式细胞术流式细胞术是一种利用特定染料对菌株进行筛选的方法,通过检测菌株表面或内部的荧光信号,可以筛选出具有特定特性的菌株。
菌株选育方法

菌株选育方法一、引言菌株选育是微生物学研究中的重要环节,通过选育出高效、高产、高质的菌株,可以提高微生物发酵产物的产量和质量,具有重要的应用价值。
本文将介绍几种常用的菌株选育方法。
二、菌株筛选菌株筛选是菌株选育的第一步,常用的筛选方法有以下几种:1. 形态特征筛选:根据菌株的形态特征进行筛选,如菌落形状、颜色、透明度等。
例如,在筛选产生抗生素的菌株时,可以通过观察菌落的颜色变化来判断菌株的产生抗生素的能力。
2. 生理特性筛选:根据菌株的生理特性进行筛选,如耐高温、耐酸碱等。
例如,在筛选产酶菌株时,可以将菌株培养在不同的温度和pH值条件下,观察其产酶能力的变化。
3. 生长速度筛选:根据菌株的生长速度进行筛选,如菌落形成的速度、菌体生长的速度等。
例如,在筛选高产菌株时,可以通过比较不同菌株的生长速度,选择生长较快的菌株作为高产菌株。
三、遗传改造遗传改造是菌株选育的重要手段之一,通过改变菌株的遗传物质,使其具备特定的性状或功能。
常用的遗传改造方法有以下几种:1. 诱变:通过物理或化学手段引起菌株的突变,产生新的性状或功能。
常用的诱变剂有射线、化学物质等。
例如,在筛选高产菌株时,可以利用诱变剂诱导菌株发生突变,然后通过筛选得到高产菌株。
2. 基因工程:利用基因工程技术将外源基因导入菌株中,使其具备特定的性状或功能。
常用的基因工程技术有基因克隆、基因转染等。
例如,在筛选产生重要药物的菌株时,可以将合成该药物的基因导入菌株中,使其具备合成该药物的能力。
四、代谢工程代谢工程是菌株选育的另一重要手段,通过调控菌株的代谢途径和代谢产物分布,提高目标产物的产量和质量。
常用的代谢工程方法有以下几种:1. 基因组学分析:通过对菌株基因组的测序和分析,确定菌株的代谢途径和相关的基因。
例如,在筛选高产菌株时,可以通过基因组学分析找到与目标产物合成有关的关键基因,并进行代谢工程。
2. 代谢通路工程:通过改变菌株代谢途径中的关键酶的活性或表达水平,调控目标产物的合成。
发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选及生物学特性研究

发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选及生物学特性研究
刘薇;刘长建;汤丽燕;姜波;赵冬
【期刊名称】《中央民族大学学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2013(022)001
【摘要】本实验利用4种培养基,从5种发酵食品样品中分离到473株乳酸菌,其中H2O2酶反应阴性的有96株.从中筛选出了11株对胆固醇有较好降解能力的菌株,并对其生长特性,生化特性等进行了研究.根据菌落、细胞形态、生理生化特性试验,初步确定菌株ML03为果糖乳杆菌;MR12、MR13、AC01和AC15为类布氏乳杆菌;M R25为米酒乳杆菌;SC12和SC13为植物乳杆菌;HC12和HC17为干酪乳杆菌;而菌株ML21为乳杆菌属.11株乳酸菌的胆固醇的降解率都大于40%,其中类布氏乳杆菌MR12、AC01和植物乳杆菌SC12的胆固醇降解率超过了50%.
【总页数】5页(P19-23)
【作者】刘薇;刘长建;汤丽燕;姜波;赵冬
【作者单位】大连民族学院生命科学学院,辽宁大连116600
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.9
【相关文献】
1.盐酸菜中降胆固醇、亚硝酸盐乳酸菌筛选及功能特性研究 [J], 曾承露;李锋;黄德娜
2.新疆马奶酒中降胆固醇乳酸菌的筛选及性状研究 [J], 陆晓娜;杨海燕;阿布力米提
3.东北传统发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解机制 [J], 任大勇; 曲天铭; 杨柳; 安彬; 王国超; 冯时蓉
4.青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究 [J], 张娟;李文苑;高利娥;马莹;丁梓桐;李福厚;郭旭生
5.分离自传统自然发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选与评价 [J], 李尧;张羽竹;张利;杨靖鹏;王菁;樊明涛;魏新元
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筛选菌种的四个步骤
筛选菌种的四个步骤筛选菌种是指通过一系列实验和评估来确定最适合特定应用的微生物菌株。
下面将介绍筛选菌种的四个步骤:1.初始筛选:2.生物活性筛选:在生物活性筛选阶段,我们通过对菌株的生物活性进行评估来确定其具有潜在用途的能力。
这通常包括筛选抗生素产生菌、产酶菌株等。
首先进行抗菌活性筛选,将菌株培养在富含病原菌的琼脂平板上,观察是否有抗菌圈产生。
然后,进行产酶筛选,比如进行淀粉酶、纤维素酶等酶的产生能力的评估。
此外,还可以通过对菌株的生态学行为、对有毒物质的降解能力等进行评估。
3.遗传特性筛选:在遗传特性筛选阶段,我们关注的是菌株的遗传特征。
这通常包括筛选具有高产能、稳定性和耐受性等特性的菌株。
这一步骤通常涉及菌株的基因分析,如PCR、序列测定等。
通过对菌株的基因组和基因表达数据进行分析,我们可以确定菌株的基因组组成、功能基因和代谢途径等。
此外,还可以使用基因工程技术来改良菌株的特性,例如通过基因突变或基因组互换等。
4.应用评估:应用评估是最后一步,用来评估菌株在特定应用中的实际效果。
这个步骤通常包括菌株的生物质量产量、产物纯度和质量等因素的评估。
此外,还可以考虑菌株的生长特性、代谢路径和产物稳定性等。
通过与已经商业化或研究中的菌株进行比较,可以确定最具潜力的菌株,并进一步开发应用。
总结起来,筛选菌种的四个步骤包括初始筛选、生物活性筛选、遗传特性筛选以及应用评估。
这四个步骤通过从原始样品中筛选出具有潜在应用的微生物菌株,并对其进行评估,以确定最适合特定应用的菌株。
这些步骤的目的是发现具有特殊功能的微生物菌株,并利用它们在农业、医药、环境等领域的广泛应用。
菌的筛选方法有哪些
菌的筛选方法有哪些
菌的筛选方法有以下几种:
1. 形态学筛选:根据菌落的形态特征(如大小、形状、颜色等)来进行初步筛选。
2. 生理生化特性筛选:通过对菌株的生理生化特性进行分析,如对不同营养源的利用能力、产酶能力、耐受性等进行测试来筛选。
3. 抗生素敏感性筛选:利用不同抗生素的敏感性测试,通过测定菌株对抗生素的敏感性来筛选。
4. 基因组学筛选:通过对菌株的基因组进行测序和分析,筛选出具有特定基因特征的菌株。
5. 代谢产物筛选:通过检测菌株产生的次生代谢产物,如抗生素、酶、激素等来筛选。
6. 生物活性筛选:通过对菌株的抗菌、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等生物活性进行测试来筛选。
7. 分子生物学筛选:利用PCR、RT-PCR等技术,对菌株进行特定基因的检测
和表达分析,筛选出特定基因表达水平高的菌株。
8. 一般筛选方法:菌落刺激、利用各类介质进行培养筛选、蓝白斑筛选等方法。
菌种分离筛选的5个步骤
菌种分离筛选的5个步骤一、样品采集与处理菌种分离筛选的第一个步骤是样品采集与处理。
在进行菌种分离之前,我们需要选择合适的样品进行采集。
样品可以来自不同的环境,如土壤、水体、动植物等。
采集样品时,我们需要注意卫生和安全,避免污染和交叉感染。
采集后,样品需要进行处理,包括样品的细碎、过滤、稀释等步骤,以便于后续的菌种分离工作。
二、菌种分离菌种分离是菌种分离筛选的核心步骤。
在这一步骤中,我们需要将样品中的微生物菌种分离出来,并培养成单菌种。
常用的分离方法有稀释平板法、涂布平板法、过滤法等。
分离时,需要选择适当的培养基和培养条件,以促进菌种的生长和繁殖。
分离出的单菌种需要进行纯化,以确保其纯度和纯种性。
三、菌种鉴定菌种鉴定是确定分离出的菌种种属和种类的步骤。
鉴定菌种的方法有形态学观察、生理生化特性测定、分子生物学方法等。
通过对菌种的形态、生长特征、代谢产物等进行观察和分析,可以初步确定其分类地位。
而通过分子生物学方法,如16S rRNA基因序列分析,可以更准确地确定菌种的种属和种类。
四、菌种筛选菌种筛选是根据特定需求从众多菌种中选择出具有特殊功能或性质的菌株的步骤。
筛选的目标可以是抗菌活性、产酶能力、产生生物活性物质等。
常用的筛选方法有抗菌活性筛选、产酶能力筛选、生物活性物质筛选等。
在进行筛选时,需要设置合适的筛选条件和指标,并利用适当的方法进行评价和选择。
五、菌种保存与应用菌种保存与应用是菌种分离筛选的最后步骤。
在菌种分离筛选过程中,我们通常会得到很多有潜力的菌株。
为了保证这些菌株的长期保存和应用,我们需要采取相应的保存措施,如冷冻保存、冻干保存、液氮保存等。
同时,我们还可以将这些菌株应用于不同的领域,如农业、医药、环境等。
通过进一步的研究和开发,这些菌株可以发挥出更大的应用价值。
通过以上五个步骤,我们可以从自然环境中分离出具有特殊功能或性质的菌株,并进行进一步的研究和应用。
菌种分离筛选是微生物学研究中的重要工作,对于发现新的生物资源和开发新的生物产业具有重要意义。
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降胆固醇菌株筛选方法
1.培养基
(1)YEPD液体培养基,用于酵母菌的活化。
(2)改良Kenji的培养基组成
盐溶液Ⅰ:酵母酶解粉0.2g,蛋白胨 0.4g,KH2PO4 0.25g,MgSO4·7H2O 0.25g,
FeSO4·7H2O 5mg,NaCL 5mg,蒸馏水1000mL。可加入1mL·L-1的2%溴百里香草酚兰作指
示剂。pH自然,121℃灭菌20min。
胆固醇的溶解:取N,N-二甲基甲酰胺10mL,吐温-80 0.5mL,胆固醇 0.5g,加入到
试管,121℃灭菌20min。
应用时将以上助溶胆固醇加热融化,无菌操作取100μl加入到灭菌盐溶液Ⅰ的试管中
(5mL),混匀。(胆固醇浓度0.1%)。
2.纯化菌株的筛选
(1)纯化酵母菌株的初筛
分离培养基为加了10g酵母膏的土豆培养基。液体培养物的制备用液体PDA培养基,
不加酵母膏。
酵母菌YEPD液体培养物制备:180mm大试管装50mYEPD液体培养基,至少每株菌
准备一瓶,121℃灭菌后,分别接种分离出来的酵母菌菌株。28±2℃培养24h。无菌操作取
各酵母菌发酵液,测定其在600nm处的吸收值。测定后,将发酵液统一用灭菌的YEPD培
养基进行稀释,要求稀释后所有发酵液的OD560nm值一致(考虑操作简便性,在下一步接
种可不稀释而是根据菌体浓度按比例接种)。(保证OD600nm在0.2-0.8范围内)
初筛:按3%(v/v)接种量将上述酵母菌YEPD液体培养物,接种于加了溴百里香草酚兰
指示剂(1 ml /1000ml 2%)的改良Kenji的培养液(培养液装量5/管)中,每个菌株做两个
重复,如此再传代2-3次,进行富集增菌培养。比较其生长(变色)速度(每天观察,初步
确定培养时间)、发酵液浊度(OD600nm),初步判定各菌株利用胆固醇的能力。将初筛
发酵液中的各菌株分别划线接种于含碳酸钙的YEPD双层平板上,并同时做后续复筛试验。
(2) 降解胆固醇酵母菌的复筛
取初筛发酵液100μL(根据初筛发酵液OD值确定接种量),接种于改良Kenji的培养
液(不需要加酸碱指示剂,培养液装量5管)中,培养36-72h,将菌液用蒸馏水适当稀释,
在600nm波长测定其光密度,以OD值表示其相对生长量(用未接菌的改良Kenji的培养液
稀释液调节分光光度计的0和100)。并测定其发酵前和发酵后培养液的胆固醇含量,计算
其降解率。
胆固醇含量的测定,采用邻苯二甲醛法比色法。
胆固醇降解率(%)=(发酵前胆固醇含量—发酵后胆固醇含量)/发酵前胆固醇含量
×100%。
(3) 筛选出降解胆固醇酵母菌的保存
将复筛发酵液中的各菌株分别划线接种于含碳酸钙的YEPD双层平板上。待菌落长出
后,将碳酸钙溶解圈大的菌株接种于YEPD培养基斜面上,4℃冰箱保存。
3.酵母菌降解胆固醇特性研究(模拟人体胃肠环境)
经初筛和复筛试验,优选出1-2株降胆固醇能力强的菌株。
(1)酵母菌的活化
用接种环从保存的或复筛发酵液蘸取适量菌体细胞,接种至YEPD液体培养基中28℃恒
温培养24h后,再用移液管移取1ml培养液于新的YEPD液体培养基中28℃恒温培养24h,如
此重复两代,使酵母菌活化。
(2)酵母菌降胆固醇特性研究
将活化好的菌株按10%(v/v)接种至不同pH的PBS缓冲液中(模拟胃环境),
37℃保温4 h后,将此含菌缓冲液按10%(v/v)接种至含不同胆盐浓度(模拟肠道环境)
的改良Kenji的培养液中,37℃培养24 h后,测定其发酵前和发酵后菌体及培养液中的胆固
醇含量,计算其降解率。
表1 培养液胆固醇降解率
模拟人体消化道环境 培养前培养液 培养后培养液
培养液胆固醇降解率
胃环境 肠道环境
OD560nm OD560nm
pH1.5 PBS 0.1%胆盐24h 0.2%胆盐24h
0.3%胆盐24h
pH2.5 PBS 0.1%胆盐24h 0.2%胆盐24h
0.3%胆盐24h
pH3.5 PBS 0.1%胆盐24h 0.2%胆盐24h
0.3%胆盐24h
表2 菌体胆固醇富集情况
模拟人体消化道环境 培养前菌体 培养后菌体
菌体胆固醇累计量
胃环境 肠道环境
OD560nm OD560nm
pH1.5 PBS 0.1%胆盐24h 0.2%胆盐24h
0.3%胆盐24h
pH2.5 PBS 0.1%胆盐24h 0.2%胆盐24h
0.3%胆盐24h
pH3.5 PBS 0.1%胆盐24h 0.2%胆盐24h
0.3%胆盐24h