BioRad凝胶成像分析仪

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3.3.1 自动分析
点击左侧“分析工具箱”下方的“自动分析”,进行“检测设置”和“分子量分析设置” 点击“确定”,完成对图像的自动分析。
3.3.2 手动分析 3.3.2.1 点击左侧“分析工具箱”下方的“图 像工具”,可以对图像进行“水平”和“垂直” 的翻转,“向左90°”、“向右90°”和“自定 义”的旋转,以及“裁切”、“逆变数据”、 “合并”等操作。
3.2 成像
→ → 3.2.1 将凝胶放入仪器盘里,关好仪器门 点击“放置凝胶” 通过照相机缩放调节图像
→ 的大小或打开仪器门,挪动电泳胶,使其处于合适的成像位置 点击运行实验协议即可成像
3.2.2 此时可以点击主窗口工具栏的“快照”或“保存”,分别保存照片和软件格式,一边
日后查看或分析。
3.3 图像分析
背景扣除方法里的“局部”是通过我们所圈选的未知 条带和标准条带的像素密度总和来进行背景值的扣抵; “全局”是通过整张胶(膜)的背景平均的密度来进行背 景值的扣抵。
谢 谢!
3、软件基本程序应用
3.1 建立图像获取程序
双击
选择“新建实验协议”
3.1.1 在应用程序下,选择各种成像模式,
包括核酸凝胶、蛋白质凝胶、印迹及自定 义等
3.1.2 在成像区域项下,选择凝胶的类型
及图像区域。
3.1.3 在图像曝光、显示选项下,可以
手动或自动设置曝光时间,是否高亮显 示饱和像素及显示图像色颜色。




将分 将分 将分


析表 析表 析表


复制 导出 导出


到剪 到文 到EXCEL


切板 件

3.3.2.4 分子量分析
点击“分析工具箱”中的“MW分析工具”,在标准项下,点击“更改”,选择 所需的“分子量标准”,选择“标准泳道”,点击“分析表”,即可查看所要检测的 蛋白的分子量,通过“主窗口工具栏”的“标准曲线”查看标准曲线、“报告栏”查 看报告。
3.3.2.2 点击“泳道和条带”,在“泳道” 选项下可以进行泳道检测器的“自动” 和“手动选择”,可以对“所有泳道” 或“单个泳道”进行相关的操作;在 “条带”选项下,可以进行“条带的 检测”,以及条带的“添加”、“删 除”、“调整”。
3.3.2.3 分析完毕后,点击主窗口工具栏的“分析表”,显示分析结果。同时“分析 上方的选项可以调整“分析表”的显示项,及保存成Excel或文件的格式等。
Bio-Rad凝胶成像分析仪
2012.05.11
主要内容
▪ 仪器组成成份介绍 ▪ 软件操作界面介绍 ▪ 软件应用介绍
1、仪器基本组成
仪器各组成部分介绍
紫外透射平台
镜头及滤光片位置 控制面板
1.1 控制面板
1.2 背面开关及保险丝
Universal Hood 电 源 开 关
1.3 镜头
相机镜头 滤光片
3.3.2.6 注释工具
可以通过注释工具增加文字批注及箭头批注, 并可调整批注相对位置、文字属性、颜色及 旋转方向等参数。
3.3.2.7 手动定量工具/体积工具
按下“矩形”、“圆形”、“徒手画”选择较合适的条带 型态,选取想要定量分析的条带位置,并在条带上点 击左键两下可将样品定义为标准品、未知样品或背景 空白,并分别定义其定量依据(如kb、ppm、mg/ml…)。
2、基本软件操作界面
软件操作界面
主窗口工作列
分 析 工 具 列
状态列
启动精灵
程序桌面
2.1 主窗口工具列
2.2 显示工具列
图放缩 像大小 显 示 设 定
全亮 改 转 图
窗度 变 换 像
口 明 图 3D 信
大暗 像 成 息
小度 色 模
转彩 式


2.3 分析工具列
图像工具 泳道及条带工具 分子量工具 自动定wenku.baidu.com工具 注释工具 手动定量工具
3.3.2.5 定量工具
定量工具包括“相对定量”和 “绝对定量” 。在“相 对定量”里我们选用泳道5的1号条带为参考条带,其被定 义为“1”,其余条带依次得出相对结果。
3.3.2.5 定量工具——“绝对定量”
通过选择已知标准品浓度的条带(至少两个以上,以R表示),并设定合适 的回归参数计算所得之标准曲线来推算目标条带的绝对浓度,具体数据可以查看 分析表。
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