凝集素凝集红细胞原理
细胞凝集胞实验报告
实验1.血细胞凝集Lab1.Blood cell agglutination摘要：细胞凝集指的是细胞与细胞之间通过某种凝集素的作用而相互粘连在一起的现象，最终形成大的细胞团块。
而凝集素由于可使细胞凝集而成为一种重要实验和临床试剂。
本次实验就是通过进行对兔血细胞的凝集操作，观察细胞凝集现象，并掌握凝集素促进细胞凝集的实验原理和操作方法。
关键词：细胞凝集、凝集素前言：凝集素是一类能专一识别糖并与之非共价可逆结合的非酶非抗体蛋白质。
凝集素是指从各种植物、无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红细胞，故名凝集素。
凝集素按来源可分为植物凝集素、动物凝集素和微生物凝集素三大类;植物凝集素分为7个家族：豆科凝集素、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、2型核糖体失活蛋白、木菠萝素家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素；动物凝集素按分子结构分为C-型凝集素、S-型凝集素、P-型凝集素、I-型凝集素等。
在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出的寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。
凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。
其反应机制如下图：凝集素在生化、医学等方面有广泛的应用：1.凝集素在实验室中经常被用来分离、纯化蛋白质植物凝集素的功能是结合细胞表面上的糖蛋白，动物凝集素的功能包括结合可溶性的细胞外或细胞内糖蛋白。
凝集素在实验室中经常用来分离、纯化糖蛋白。
这是由于植物凝集素能专一性地、非共价地可逆结合糖蛋白中不同类型的糖链结构，所以首先分别用凝集素亲和层析方法分离富集正常细胞和癌细胞的细胞裂解液中的糖蛋白，从细胞裂解物中高通量的分离出N-糖苷键型糖蛋白之后，再利用双向凝胶电泳技术对于被凝集素吸附的糖蛋白进行分离，最后利用质谱技术进行鉴定。
2.凝集素介导细胞与细胞、细胞与基质的粘附选凝素是一类Ca2+依赖的、能与特异糖基识别并结合的细胞粘附分子，主要介导白细胞与血管内皮细胞或血小板的识别和粘附。
实验七ABO血型鉴定
实验七、ABO血型鉴定一、实验原理血型是指红细胞膜上特异的抗原（凝集原）类型，常用血型系统有ABO系统、Rh系统。
血清中存在能与红细胞膜上相应抗原发生反应的抗体，称为凝集素。
ABO血型鉴定原理是血清中抗体（或凝集素）与红细胞的相应抗原起反应，产生凝集反应，而后发生血溶现象。
各种血型抗原与抗体分布：血型红细胞抗原（凝集原）血浆中抗体（凝集素）A A 抗BB B 抗AAB AB 无O 无抗A、抗B二、实验步骤1、双凹载玻片加两种血清：黄色抗B；蓝色抗A；2、消毒、采血（灭菌牙签）；3、静置10分钟，观察。
三、实验结果ABO血型系统根据红细胞表面有无特异性抗原（凝集原）A和B来划分的血液类型系统。
根据凝集原A、B的分布把血液分为A、B、AB、0四型。
红细胞上只有凝集原A的为A 型血，其血清中有抗B凝集素；红细胞上只有凝集原B的为B型血，其血清中有抗A的凝集素；红细胞上A、B两种凝集原都有的为AB型血，其血清中无抗A、抗B凝集素；红细胞上A、B两种凝集原皆无者为O型，其血清中抗A、抗B凝集素皆有。
具有凝集原A的红细胞可被抗A凝集素凝集；抗B凝集素可使含凝集原B的红细胞发生凝集。
如上表所示，当与抗A试剂反应为阳性，与抗B反应为阴性时，血型为A；当与抗A试剂反应为阴性，与抗B试剂反应为阳性时，血型为B；当与抗A、抗B试剂反应均为阳性时，血型为AB；而当与抗A、抗B试剂反应均为阴性时，血型则为O。
输血时若血型不合会使输入的红细胞发生凝集，引起血管阻塞和血管内大量溶血，造成严重后果。
所以在输血前必须作血型鉴定。
正常情况下只有ABO血型相同者可以相互输血。
在缺乏同型血源的紧急情况下，因O 型红细胞无凝集原，不会被凝集，可输给任何其他血型的人。
AB型的人，血清中无凝集素，可接受任何型的红细胞。
但是异型输血输入量大时，输入血中的凝集素未能被高度稀释，有可能使受血者的红细胞凝集。
所以大量输血时仍应采用同型血。
自身红细胞和血浆凝集的原因
自身红细胞和血浆凝集的原因 红细胞和血浆凝集是指红细胞聚集在一起形成凝块，使血液黏稠度增加的现象。这种现象在正常情况下不应发生，但在某些特定的病理条件下会出现红细胞和血浆凝集现象。下面将从两个方面来阐述红细胞和血浆凝集的原因。
红细胞凝集是指红细胞之间发生相互吸附和连接的现象。以下是一些可能导致红细胞凝集的常见原因：
1.抗原和抗体反应：人体免疫系统能产生抗体，当抗体与与其相对应的抗原结合时，会导致红细胞凝集。例如，ABO血型系统中的抗原和抗体反应会引起红细胞凝集。
2.寒冷凝集素：有些人体内存在一种特殊的抗体，称为寒冷凝集素，当暴露于寒冷环境中时，这些抗体会与红细胞表面的抗原结合，导致红细胞凝集。
3.糖蛋白凝集素：病毒和某些细菌表面上存在糖蛋白凝集素，它们可以与红细胞表面的特定糖蛋白结合并导致凝集。
4.高黏度血症：某些疾病或病理状态，如高血红蛋白、高胆固醇、高纤维蛋白原等，会导致血液黏稠度增加，从而促使红细胞凝集。
血浆凝集是指血浆中的凝集素或凝血酶原产生凝块的现象。以下是一些可能导致血浆凝集的常见原因：
1.凝血因子异常：血浆中的凝血因子，如凝血酶原、纤维蛋白原等异常会导致血浆凝集。 2.感染或炎症反应：某些感染、炎症反应会增加凝血因子的产生，进而引起血浆凝集。
3.自身免疫疾病：某些自身免疫疾病会导致机体产生自身抗体，这些抗体可能与血浆中的某些成分结合并形成凝块。
4.血浆蛋白异常：血浆中的蛋白质异常，如球蛋白增多，会增加血浆凝集的风险。
总结起来，红细胞和血浆凝集的原因可以归纳为凝血因子异常、免疫反应、寒冷凝集素、糖蛋白凝集素和高黏度血症等。当出现红细胞和血浆凝集的情况时，应及时就医进行相应的检查和治疗，以减少血液黏稠度增加导致的不良后果。
凝集实验报告
凝集实验报告篇一：细胞凝集反应实验报告细胞生物学实验报告一．二．实验名称：细胞凝集反应实验原理：细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。
目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
凝集素是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。
常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA)，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等，凝集素是它们的总称。
凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。
血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。
三．实验用品：土豆块茎显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支PBS缓冲液：称取NaCl7.2g，Na2HPO41.48g,KH2PO40.43g,加蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到7.2.4.2%的红细胞四．实验步骤：1. 称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
2. 以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂），加生理盐水3ml，在1000r/min，离心5min，重复3次离心，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。
3. 分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴，置双凹片左孔内，充分混匀。
抗凝集素，凝集素，凝集原辨析
抗凝集素，凝集素，凝集原辨析抗凝集素，凝集素，凝集原具体是些什么东西啊？与⾎型和输⾎有关的名词。
根据细胞特征性抗原的不同或者有⽆，可将⾎液分为若⼲⾎型系统。
⽬前已经科学研究确认的仅⼈类红细胞的特征性抗原⾄少有15 个类型，也即有15 个⾎型系统（如ABO 、RH 、lewis 等）。
其中ABO ⾎型系统是发现最早与临床医学关系最密切最常应⽤的。
早在1890 年，⼈们就发现⼈类红细胞膜上可含有A 和B 两种凝集原。
⼈类⾎清中也存在抗A 和抗B 两种凝集素。
ABO ⾎型系统就是根据红细胞膜上含有的A 和B 凝集原的不同，将⼈类⾎液分为A 、B 、AB 、O4 个基本⾎型。
红细胞膜上仅具有A 凝集原的就是A 型⾎；仅具有B 凝集原的为B 型⾎；A 、B两种凝集原均具有的就是AB 型⾎；O 型⾎者⽆A 或B 凝集原。
实验研究还发现，A 凝集原与抗A 凝集素结合或B 凝集原与抗B 凝集素结合会使红细胞凝集成团，并在⾎管中发⽣溶⾎反应，所以A 型⾎⾥⽆抗A 仅有抗B 凝集素，B型⾎⾥仅有抗A 凝集素，AB 型⾎⾥⽆抗A 和抗B 凝集素，⽽O 型⾎⾥同时具有抗A 和抗B 凝集素。
在临床上输⾎时，主要考虑供⾎者的凝集原与受⾎者的抗凝集素有⽆凝集反应，所以最好是同型输⾎。
O 型⾎素有“万能供⾎者”之称，因为它不含有A 或B 凝集原；⽽AB 型⾎⼜称“万能受⾎者”，因为它⽆抗A 和抗B凝集素。
考虑到⼈类除ABO 之外，⾃⼰的话：受⾎时外原内还有许多⾎型系统，所以临床上输⾎之前都要做配⾎试验。
⼈的⾎型是遗传所得，终⽣不改。
（⾃⼰的话：受⾎时外原内抗）⾎型知识.O型⾎者是危险的万能供⾎者O型⾎者的⾎清中含有天然抗A和抗B抗体，当O型⾎输⼊A型、B型或AB型⾎的⼈体内时，O型⾎中的抗A和抗B抗体就会和以上三种⾎型中的⼈的红细胞结合（因这些⼈⾎液中的红细胞膜上含有相应的A抗原或B抗原），使红细胞遭到破坏⽽造成溶⾎性输⾎反应。
ABO血型鉴定及分析
实验8 ABO血型鉴定及分析
1 实验原理
血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型，其分类的依据是红细胞表面是否存在某些可遗传的抗原物质。
若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇，这一现象称为红细胞凝集。
造成凝集的机制是抗原-抗体反应。
红细胞表面还有特异性糖蛋白抗原物质统称为凝集原（Agglutinogen）。
在血浆中则含有与之相应的特异性抗体，称为凝集素
在凝集反应中被称为凝集原。
能与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为凝集素。
凝集素为γ-球蛋白，存在于血浆中。
发生抗原-抗体反应时，由于每个抗体上具有2～10个抗原结合位点，因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间形成桥梁，使它们聚集成簇，从而发生凝血。
根据红细胞膜上是否存在A抗原和B抗原可将血液分为四种ABO血型：红细胞膜上只含有A抗原者为A型；只含B抗原者为B型；含有A与B两种抗原者为AB型；A和B两种抗原均无者为O型。
不同血型的人的血清中含有不同的抗体，但不会含有与自身红细胞抗原相对应的抗体。
在A型血的
血清中，只含有抗B抗体；B型血的血清中只含有抗A抗体；AB型血的血清中没有抗A和抗B抗体；而O型血的血清中则含有抗A和抗B两种抗体。
表1 ABO血型中的抗原和抗体
血型红细胞膜上所含的抗
原
（凝集原）血清中所含的抗体（凝集素）
A A 抗B
B B 抗A AB A、B 无
O 无抗A、抗B。
免疫凝集和免疫沉淀简介
免疫凝集和免疫沉淀简介一、免疫凝集反应（一）基础概述凝集反应（agglutination）、凝集素（agglutinin）、凝集原（agglutinogen）、效价(滴度)、不完全抗体、抗球蛋白试验(Coombs试验)1、凝集反应是指细菌、红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体（如红细胞、聚苯乙烯胶乳等），与相应抗体结合，在一定条件下，出现肉眼可见的凝集现象（agglutination）。
2、参加凝集反应的抗原称为凝集原，而抗体则称为凝集素。
3、效价：是指抗原抗体反应时，出现明显反应终点时抗原或待测血清（抗体）的最高稀释度。
4、不完全抗体：IgM类抗体与IgG类抗体，IgG类抗体与抗原结合后，常不出现可见的凝集反应，这种抗体有时又称不完全抗体。
5、抗球蛋白试验：利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接已结合抗原（红细胞）上的不完全抗体，使红细胞凝集，称抗球蛋白试验（Coombs实验）（二）分类1、直接凝集反应原理：细菌、螺旋菌和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
分为玻片法和试管法：(1) 玻片凝集实验用于抗原的定性分析，一般用来鉴定菌种或分型，也适用于人类ABO血型的测定。
(2) 试管凝集试验检测有无抗体和抗体效价用来协助临床诊断或流行病原调查研究。
例如肥达试验、外斐试验、输血时也常用于受体和供体俩者的交叉配血试验。
2、间接凝集反应原理：是将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象。
(1)正向间接凝集反应可溶性抗原致敏载体，用以检测标本中待测抗体的凝集反应，称为正向间接凝集反应。
(2)反向间接血凝反应特异性抗体致敏载体，用以检测标本中待测抗原的凝集反应。
(3)间接血凝抑制试验先将可溶性抗原(或抗体)与相应抗体(或抗原)试剂混合,然后再加入抗原(或抗体)致敏的载体颗粒，则能抑制原先的凝集现象，称为正向(或反向)间接凝集抑制试验。
细胞凝集和细胞膜的渗透性
是否 溶血
时间
结果分析
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实验总结
溶血时间及现象的观察比较困难，可采用离 溶血时间及现象的观察比较困难，可采用离 心辅助的方法来判别兔血在哪些等渗液中最易溶 心辅助的方法来判别兔血在哪些等渗液中最易溶 血，哪些较慢，做一些定性的分析。经过离心之 哪些较慢，做一些定性的分析。 后，若上清液无色，证明在这个时间段血细胞没 若上清液无色， 发生溶血，若上清液略红，证明有溶血发生。 发生溶血，若上清液略红，证明有溶血发生。当 然这个方法不很精确，但却快速、便于观察。 然这个方法不很精确，但却快速、便于观察。
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溶血现象
溶 血 前
溶 血 后
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3. 兔红细胞的渗透性观察 等渗溶液（ 种 等渗溶液（10种） 取试管一支加入3mL等渗溶液，再加入1～2滴 等渗溶液，再加入 ～ 滴 取试管一支加入 等渗溶液 稀释的兔血，轻轻摇动，注意颜色有无变化？ 稀释的兔血，轻轻摇动，注意颜色有无变化？有无 溶血现象？为什么？若发生溶血，记下时间（ 溶血现象？为什么？若发生溶血，记下时间（自加 入稀释兔血到溶液变成红色透明澄清所需时间）。 入稀释兔血到溶液变成红色透明澄清所需时间）。
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概念区别
等渗溶液和等张溶液之间的差别， 等渗溶液和等张溶液之间的差别，除各种药物不同的理化 之间的差别 特性外，主要是因为红细胞膜是生物膜， 特性外，主要是因为红细胞膜是生物膜，而不是理想的半 红细胞膜是生物膜 透膜。它除了能让水分子自由通过外， 透膜。它除了能让水分子自由通过外，也能让其他物质通 过不同途径出入，所以应区分等渗和等张溶液。等渗溶液 过不同途径出入，所以应区分等渗和等张溶液。 不一定是等张溶液，溶液只有经生物学的方法试验以后， 不一定是等张溶液，溶液只有经生物学的方法试验以后， 才能认为是等张的。 才能认为是等张的。 简单说， 简单说，溶质分子不能自由通过细胞膜的等渗溶液就是等 张溶液。 张溶液。
凝集反应课件
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特点：抗原抗体反应既可以在体内作为 体液免疫应答的效应机制自然发生，也 可以在体外作为免疫学试验的结果而出 现，体外实验的抗原抗体反应称为血清 学反应（serological reaction).
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二.直接凝集反应
定义：细菌、红细胞等颗粒性抗原在适量电解 质的参与下，直接与相应抗体结合，出现肉眼 可见的凝集现象，该反应中的抗原称为凝集原 （agglutinatinogen)，抗体称为凝集素 （ agglutinin)。 一）玻片凝集试验（ABO血型鉴定）；二） 试管凝集试验（肥达试验）。
缘皱缩成花边状
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自身红细胞凝集试验
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自身红细胞凝集试验特点：双 功能抗体的存在，用全血量少， 检测快速。用于快速体格筛检。
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抗球蛋白参与的血凝试验
1945年，Coombs建立的一种间接血凝试 验，又称Coombs试验或桥梁连接反应
直接Coombs试验 检测红细胞上的不完全抗体
间接Coombs试验 检测游离在血清中的不完全抗体
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谢谢大家！
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四、间接血凝试验 （ hemagglutination test)
将抗原（抗体）包被于红细胞表面， 用以检测相应抗体（抗原）。
红细胞上包被抗原的血凝反应称正向 间接血凝试验，反之包被抗体称反向间 接血凝试验。
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- 红细胞沉积于管底 + 红细胞沉积于管底，周围有少量凝集 ++ 红细胞形成层凝集，面积较小，边缘较松散 +++ 红细胞成片层凝集 ++++红细胞成片层凝集，均匀布满管底，或边
凝集反应
质偶联在红细胞上，常用的偶联剂有戊二醛、CrCL3
和双偶氮联苯胺。
临床免疫学及免疫检验
2.胶乳颗粒载体及致敏
聚苯乙烯胶乳颗粒是人工合成的载体，它是一种大小均
一，直径为0.8μm大小的圆形颗粒，带有负电荷，可用物 制备成带有化学活性基团的颗粒(如带有羧化聚苯乙烯胶 乳)，抗原或抗体能以共价键交联在胶乳表面(通过缩合剂 碳化二亚胺将胶乳颗粒表面的羧基与被交联物上的氨基
的反应。1945年Coombs等根据抗体球蛋白对异种动物亦 是抗原的原理，把产生“不完全抗体”的机体正常血清球 蛋白，注射到异种动物使之产生抗球蛋白，这种抗球蛋 白加入表面结合有不完全抗体的红细胞的复合物中，就
能出现可见的凝集现象，称抗球蛋白试验。因为此反应是
Coombs首先建立的，故又称Coombs试验。
(1) 取细菌或红细胞悬液1滴，在玻片上 和1滴诊断血清混匀。 (2) 置室温，数分钟后即可用肉眼或低 倍显微镜观察凝集结果，出现颗粒凝 集者为阳性。
临床免疫学及免疫检验
3．方法评价 本试验是一种特异性强、简
便、快速的定性试验方法。 4．临床意义 适用于大量普查，未知菌种 的鉴定或分型，或用标准血清作红细胞 ABO血型的鉴定。有时也可用于定量检测 前的筛选试验(如布氏菌、土拉弗氏菌等 抗原)，初步观察病人血清中有无相应的 抗体，然后再对阳性标本作试管凝集试验 测定其效价。
间接凝集试验又称被动凝集试验(passive agglutination test)。所用的与免疫无关颗 粒称为载体，将抗原(或抗体)吸附或偶联 于颗粒表面的过程称致敏。而吸附有已 知抗原或抗体的颗粒称致敏颗粒。
临床免疫学及免疫检验
一、间接凝集技术类型
根据致敏载体用的是抗原或抗体以及 凝集反应的方式，间接凝集反应可分为：
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凝集素凝集红细胞原理
凝集素是一种特殊的蛋白质，它能够与红细胞表面上的特定抗原结合，
从而使红细胞发生凝集现象。在人类体内，红细胞表面上有多种不同的血
型抗原，如A、B、O等，而不同的血型凝集素只与特定的血型抗原结合。
因此，当一个人的血浆中存在与其自身血型抗原不同的凝集素时，这些凝
集素就会结合在其血液中的相应血型抗原上，导致红细胞凝集，从而引起
不同的血型反应。
例如，当A型血浆中的抗A凝集素与B型血中的红细胞表面上的B抗
原结合时，就会发生红细胞凝集现象。同样地，当B型血浆中的抗B凝集
素与A型血中的红细胞表面上的A抗原结合时，也会发生红细胞凝集。而
对于O型血，由于其红细胞表面上不含有A、B抗原，因此既不会与抗A
凝集素结合，也不会与抗B凝集素结合。
总之，凝集素通过与红细胞表面上特定的血型抗原结合，导致红细胞
之间发生凝集，是血型鉴定及输血安全控制的重要基础。