中药分析(挥发油)

木兰科 樟科 芸香科
300种，其主要分布如下表： 种 其主要分布如下表： 厚朴、辛夷、五味子、八角茴香
肉桂、樟木、山苍子
此外，在三白草科、毛莨科、蔷薇科、瑞香 陈皮、橙皮、枳实、花椒、吴茱萸、代代花、香橼 科、杜鹃花科、木犀科、萝藦科、禾本科、莎草 桃金娘科 桉叶、丁香 科、天南星科等的某些生药中，也含有较丰富的 伞形科 当归、小茴香、川芎、藁木、蛇床子、阿魏、防风 挥发油成分。 唇形科 薄荷、留兰香、紫苏、广藿香、荆芥、香薷
红联用（ 相同， 气-红联用（GC-FTIR）原理与 红联用 ）原理与GC-MS相同， 相同 傅里叶变换红外分光光度法作为气相色谱的检 测器，同样具有分离分析的双重能力， 测器，同样具有分离分析的双重能力，提高了 鉴别的准确性。 鉴别的准确性。
含量测定
许多常用中药中都含有挥发油， 许多常用中药中都含有挥发油，中草药中的挥 发油一般在1%以下，亦有少数达10%以上， 1%以下 10%以上 发油一般在1%以下，亦有少数达10%以上，如 丁香中含挥发油可高达14 21%。 14～ 丁香中含挥发油可高达14～21%。 挥发油中所含成分相当复杂， 挥发油中所含成分相当复杂，一种挥发油常含 有几十种到一、二百种成分， 有几十种到一、二百种成分，但其中往往以某 种或数种成分占较大的量。 种或数种成分占较大的量。
单萜、 单萜、倍半萜及它 们的含氧衍生物是 组成挥发油的主要 成分， 成分，其中含氧的 衍生物大多生物活 性较强， 性较强，并具有芳 香气味。 香气味。
薄荷醇化学式（薄荷油 中薄荷醇的含量约为 80%）
芳香族化合物大多为苯丙素衍生物， 芳香族化合物大多为苯丙素衍生物，例如 苏合香油中的苏合香烯(styrene) (styrene)、 苏合香油中的苏合香烯(styrene)、丁香油 中的丁香酚(eugenol) (eugenol)、 中的丁香酚(eugenol)、八角茴香油中的茴 香醚(anethole) (anethole)及肉桂中的桂皮醛 香醚(anethole)及肉桂中的桂皮醛 aldehyde)等 (cinnamic aldehyde)等。
3.薄层扫描法 3.薄层扫描法
主要用于定性分析，定量较少。 主要用于定性分析，定量较少。 因为挥发油成分复杂，薄层分离困难， 因为挥发油成分复杂，薄层分离困难，往往很 难达到定量要求， 难达到定量要求，仅用于主要成分含量高的挥 发油的制剂分析； 发油的制剂分析；再者大多挥发油成分都需显 色后才可测定，操作复杂， 色后才可测定，操作复杂，引入误差机会较多
理化性质
常温液态 具有特殊气味 具有挥发性 不溶于水易溶于有机溶剂 密度比水小（仅少数比水大，如丁香油、 密度比水小（仅少数比水大，如丁香油、桂皮 油等） 油等） 易氧化变质 大多数挥发油具有光学活性
挥发油类成分的显色反应通常是由于其中组 成成分的官能团不同所表现的。 成成分的官能团不同所表现的。
挥发油的组成除了上述三种物质外， 挥发油的组成除了上述三种物质外，还有一些 其它化合物 当归、川芎、和藁本等药材中的藁本内酯、 如：当归、川芎、和藁本等药材中的藁本内酯、 洋川芎内酯A， 洋川芎内酯 ，洋甘菊中的薁类化合物兰香油 大蒜中的大蒜辣素，芥子中的芥子油等。 薁，大蒜中的大蒜辣素，芥子中的芥子油等。
红色并逐渐消失; 5） ） 含有不饱和化合物，可 使溴水褪去红棕色；
浓硫酸 6） ） 含有薁类衍生物 → 蓝色或紫色反应 .
挥发油的鉴别
（一）化学反应法 （二）色谱法
（一）化学反应法
萜类中多有双键，能与溴、 萜类中多有双键，能与溴、氢卤酸等起加成反 应 不饱和萜类可被氧化剂（如高锰酸钾、铬酸等） 不饱和萜类可被氧化剂（如高锰酸钾、铬酸等） 氧化， 氧化，生成不同产物 多数挥发油能在浓硫酸（或浓盐酸） 多数挥发油能在浓硫酸（或浓盐酸）存在下与 香草醛形成各种颜色产物 缺点：专属性不强（中药制剂成分复杂， 缺点：专属性不强（中药制剂成分复杂，干扰 因素多） 因素多）
败酱科 菊科 姜科 甘松、缬草、蜘蛛香 茵陈、白术、苍术、木香 砂仁、豆蔻、草果、莪术、姜、草豆蔻、高良姜、益 智
目录
结构特征 理化性质 鉴别（化学反应法、色谱法） 鉴别（化学反应法、色谱法） 含量测定（气相色谱法 、高效液相色 含量测定（ 谱法、联用技术） 谱法、联用技术）
结构特征
挥发油为多种类型成分的混合物， 挥发油为多种类型成分的混合物，一种挥 发油往往含有几十种到一、二百种成分， 发油往往含有几十种到一、二百种成分， 其中以某种或数种成分占较大的分量。 其中以某种或数种成分占较大的分量。其 基本组成为： 基本组成为： 萜类化合物（ 萜类化合物（主） 芳香族 脂肪族
含量测定包括总挥发油和单一成分的测定 总挥发油测定： 总挥发油测定： 采用挥发油测定器，用蒸馏法测定， 采用挥发油测定器，用蒸馏法测定，可分别测 定相对密度在1.0以下和1.0 1.0以下和1.0以上的挥发油含量 定相对密度在1.0以下和1.0以上的挥发油含量。
（按药典附录方法） 按药典附录方法）
常见挥发性成分分析方法
薄荷醇(menthol) 薄荷醇(menthol) － GC 丁香酚(eugenol) 丁香酚(eugenol) － GC 龙脑(borneol) (borneol)－ 龙脑(borneol)－ GC,TLCS 樟脑(camphor) 樟脑(camphor) - GC 桂皮醛(cinnam (cinnamGC， 桂皮醛(cinnam-aldehyde) － GC，HPLC,TLCS 桉油精(cineole) 桉油精(cineole) －GC 丹皮酚(paeonol) (paeonol)丹皮酚(paeonol)- HPLC,GC,UV,TLCS
供试品前处理 原料药材：粉碎后，直接水蒸气蒸馏， 原料药材：粉碎后，直接水蒸气蒸馏，所得挥 发油用乙醚、 发油用乙醚、石油醚提取 制剂： 制剂：有机溶剂提取
2.高效液相色谱法 2.高效液相色谱法
挥发性成分有些具有紫外吸收， 挥发性成分有些具有紫外吸收，如芳香族化合 物类（桂皮醛、丹皮酚、丁香酚、茴香脑等）， 物类（桂皮醛、丹皮酚、丁香酚、茴香脑等）， 可用高效液相色谱法进行测定。 可用高效液相色谱法进行测定。
挥发油作为中药中的一类重要的活性成分，具有发散 解表、芳香开窍、理气止痛、祛风除湿、活血化瘀、 祛寒温里、清热解毒、解暑祛秽、杀虫抗菌等作用。 如薄荷油用驱风健胃，当归油镇痛，柴胡油退热，土 荆芥油驱肠虫等。近年来还发现某些挥发油具抑制肿 瘤作用，如莪术油。
我国地大物博，资源丰富， 我国地大物博，资源丰富，主含挥发油的生药很 松科 油松、马尾松 多 我国野生与栽培的芳香植物约有56科 属 柏科 。我国野生与栽培的芳香植物约有 科、136属 侧柏叶
2、气相色谱法（挥发油容易气化） 、气相色谱法（挥发油容易气化） 非极性固定液：饱和烃润滑油、 非极性固定液：饱和烃润滑油、甲基硅酮 ）、三氟丙基甲基硅酮 （SE-30）、三氟丙基甲基硅酮（OV-210） ）、三氟丙基甲基硅酮（ ） 极性固定液：聚乙二醇类、 ② 极性固定液：聚乙二醇类、己二酸酯 担体：硅烷化白色硅藻土。担体上不应有酸、 ③ 担体：硅烷化白色硅藻土。担体上不应有酸、 铁离子等杂志存在， 碱、铁离子等杂志存在，否则萜类成分易引起 变化。 变化。 柱温： ④ 柱温：根据挥发油不同成分沸点不同选择不同 柱温，现多采用程序升温。 柱温，现多采用程序升温。
（二）色谱法
1、薄层色谱法 、 依据： ① 依据：挥发油极性大小 ② 吸附剂：硅胶、氧化铝、硝酸银 吸附剂：硅胶、氧化铝、 展开剂：石油醚、正己烷、 ③ 展开剂：石油醚、正己烷、混合展开剂 显色剂： 硫酸乙醇（ ④ 显色剂：10%硫酸乙醇（萜类经脱水等作用 硫酸乙醇 而显荧光或呈色）、香草醛-浓硫酸 ）、香草醛 浓硫酸（ 而显荧光或呈色）、香草醛 浓硫酸（使萜类 显不同颜色）、对二甲氨基苯甲醛（ ）、对二甲氨基苯甲醛 显不同颜色）、对二甲氨基苯甲醛（使薁类化 合物呈蓝色） 合物呈蓝色）
1） ） 含酚类成分 三氯化铁的乙醇溶液→ 蓝色、蓝紫色或绿色反应; 2） ） 含有羰基化合物 苯胫或苯胫衍生物、羟 → 结晶性衍生物 ; 胺等试剂 3） ） 醛类化合物
硝酸银氨试液 → 银镜反应；
4） ） 含内酯类化合物（吡啶溶液） 亚硝酰铁氰化钠及氢氧化钠溶液→ 呈现
肉桂中的桂皮醛
脂肪族化合物较多存在于植物的果实和水果中， 脂肪族化合物较多存在于植物的果实和水果中， 包括烃、 酮和酯等， 包括烃、醇、醛、酮和酯等，例如鱼腥草中的 甲基正壬酮(methyl-nonyl-ketone)、松节油 甲基正壬酮 、 中的正庚烷(n-keptane)、桂花中的正癸烷 中的正庚烷 、 (dacane)等。 等 CH3CO(CH2)8CH3 CH3(CH2)8CH3 CH3(CH2)5CH3 甲基正壬酮 正癸烷 正庚烷
①
挥发油中各化合物常用对照品对照法进行鉴别， 挥发油中各化合物常用对照品对照法进行鉴别， 即在相同的色谱条件下测定供试品与对照品的 保留时间（ 以确定某组分的存在与否。 保留时间（tR）,以确定某组分的存在与否。 以确定某组分的存在与否
3、联用技术 、 气质联用（ 气质联用（GC-MS）： ）： 具有测定未知成分相对分子质量、 具有测定未知成分相对分子质量、快速定性和 推断分子结构的高鉴别能力， 推断分子结构的高鉴别能力，特别适合做多组 分混合物中未知组分的鉴别； 分混合物中未知组分的鉴别； 还可修正色谱分析的错误判断， 还可修正色谱分析的错误判断，利用多离子检 测技术可以检测出部分分离甚至未分离的色谱 以增加定性鉴别的准确性和可靠性。 峰，以增加定： 单一成分测定： 首选气相色谱法 HPLC，TLCS,GC其次 HPLC，TLCS,GC-MS 关键是分离， 关键是分离，色谱法是挥发油成分分析的主要 方法
1.气相色谱法 1.气相色谱法
方法：一般气相色谱 方法：一般气相色谱 闪蒸气相色谱法 顶空气相色谱法 闪蒸气相色谱法——将样品置闪蒸器内，在一定 将样品置闪蒸器内， 闪蒸气相色谱法 将样品置闪蒸器内 温度下，挥发性成分气化， 温度下，挥发性成分气化，被载气带入色谱柱进 行分析 顶空气相色谱——在热力学平衡的蒸气相与被分 顶空气相色谱 在热力学平衡的蒸气相与被分 析样品同时存在于一个密闭恒温的样品瓶中， 析样品同时存在于一个密闭恒温的样品瓶中，测 定恒温后样品瓶蒸气相中挥发性成分的含量