2011(第三届)医药化工分离纯化技术发展与工艺优化研讨会专家风采之潘远江教授
211145458_猪胆汁中胆红素提取工艺的研究
第52卷第4期 辽 宁 化 工 Vol.52，No. 4 2023年4月 Liaoning Chemical Industry April，2023收稿日期： 2022-08-15猪胆汁中胆红素提取工艺的研究吕红宝1，李凯2，郭庆2*（1. 宿州亿帆药业有限公司，安徽 宿州 234000； 2. 安徽科宝生物工程有限公司，安徽 淮北 235025）摘 要：以猪胆汁为原料，利用水解法提取胆红素，研究抗氧剂用量、碱水解pH、水解温度、保温时间和酸化pH 等单因素对胆红素的提取率和含量影响。
结果表明：用水解法提取胆红素的最佳条件是：抗氧剂用量为0.5%，碱水解pH 11.0~11.5，水解温度75~80 ℃，保温时间10 min，酸化pH 5.5~6.0，胆红素的提取率为95%，含量大于98.0%。
关 键 词：猪胆汁；胆红素；抗氧剂；pH 值；水解法中图分类号：TQ041 文献标识码： A 文章编号： 1004-0935（2023）04-0506-04胆红素为血红蛋白分解代谢后的还原产物，是一个直链的四吡咯化合物，属于儿戏胆素类，是从动物的胆汁中提取的胆色素, 是体外培育牛黄的主要原料[1]。
为淡橙色或深红棕色单斜晶体，在碱液中或遇三价铁离子极不稳定，很快被氧化。
胆红素在肝脏内与葡萄糖醛酸结合成胆红素酯，它在胆汁中约占80%，其中70%~80%为二葡萄糖醛酸酯，20%~30%为单葡萄糖醛酸酯[2]。
目前，报道最多都是钙盐法、乙醇法、树脂法和水解法等[3-5]。
而在工业化生产中，快速法具有生产工艺简单，周期短，试剂消耗少等优点，被广泛使用[6]。
随着研究的不断深入，发现胆红素的碱水解的过程中如何保护胆红素不被氧化为胆绿素，是胆红素提取的关键。
因此，本试验研究了抗氧剂的添加量及碱水解的pH 和温度，对胆红素收率和纯度的影响，优化最佳工艺条件，切实提高胆红素生产企业的效益。
1 材料与试剂1.1 原料与试剂冷冻猪胆购于金锣集团有限公司；胆红素标准品，购于中国药品检验所；亚硫酸氢钠、氢氧化钠、醋酸、三氯甲烷等均为工业级，购于山东信达化工有限公司，对氨基苯磺酸、浓盐酸、亚硝酸钠均为分析纯，购于西陇科学股份有限公司。
氯沙坦钾原料药降解途径与降解杂质分析
㊀基金项目:国家 重大新药创制 科技重大专项资助项目(Ｎｏ.２０１７ｚｘ０９１０１００１/０３/０４)作者简介:潘静ꎬ女ꎬ硕士ꎬ主管药师ꎬ研究方向:药品审评相关工作ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｐａｎｊｉｎｇ＠ｇｂａｃｄｅｉ.ｏｒｇ.ｃｎ通信作者:王冰ꎬ男ꎬ博士ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:药物质量标准ꎬＴｅｌ:０７５５－２６０３１８０５ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｗａｎｇｂｉｎｇｓｚｙｊ＠１６３.ｃｏｍꎻ黄晓龙ꎬ男ꎬ硕士ꎬ主任药师ꎬ研究方向:药品审评相关工作ꎬＴｅｌ:０７５５－３３２４９８８８ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｈｕａｎｇｘｌ＠ｎｍｐａ.ｇｏｖ.ｃｎ氯沙坦钾原料药降解途径与降解杂质分析潘静１ꎬ夏佳璇２ꎬ３ꎬ金一宝２ꎬ汤佳１ꎬ王冰２ꎬ黄晓龙１(１.国家药品监督管理局药品审评检查大湾区分中心ꎬ广东深圳５１８０１７ꎻ２.深圳市药品检验研究院ꎬ国家药品监督管理局仿制药评价生物等效性研究重点实验室ꎬ深圳市药品质量标准研究重点实验室ꎬ广东深圳５１８０５７ꎻ３.中山大学药学院<深圳>ꎬ广东深圳５１８１０７)摘要:目的㊀通过强制降解试验探讨氯沙坦钾原料药的降解杂质和降解途径ꎮ方法㊀建立氯沙坦钾及其有关物质的高效液相(ＨＰＬＣ)分析方法ꎬ采用ＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎬ流动相为０.０５％磷酸水溶液－乙腈ꎬ梯度洗脱ꎬ流速为１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬ柱温设置为３０ħꎬ检测波长２１０ｎｍꎬ对氯沙坦钾降解溶液中主峰含量进行测定ꎬ探讨氯沙坦钾原料药在氧化㊁酸㊁碱㊁高温㊁光照条件下的降解率ꎮ结果㊀在本实验设计的６７种降解条件中ꎬ氯沙坦钾原料药对氧化(加热和室温)㊁高温高湿㊁酸环境敏感ꎬ同时在溶液状态下对高温和光照条件敏感ꎮ并确定氯沙坦钾强制降解后的４个降解杂质的分子结构及其质谱裂解反应机理ꎮ结论㊀本试验以强制降解中所涉及的多种环境模拟对氯沙坦钾降解过程的研究ꎬ有助于探索药品贮藏及药品制剂生产中的杂质变化ꎮ关键词:氯沙坦钾ꎻ氧化破坏ꎻ酸破坏ꎻ碱破坏ꎻ高温破坏ꎻ光照破坏ꎻ降解杂质中图分类号:Ｒ９２７.１㊀文献标志码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２４)０２－０１２８－００７ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２４.０２.００５ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓａｎｄｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍＰＡＮＪｉｎｇ１ꎬＸＩＡＪｉａｘｕａｎ２ꎬ３ꎬＪＩＮＹｉｂａｏ２ꎬＴＡＮＧＪｉａ１ꎬＷＡＮＧＢｉｎｇ２ꎬＨＵＡＮＧＸｉａｏｌｏｎｇ１(１.ＧｒｅａｔｅｒＢａｙＡｒｅａＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｒｕｇＥｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎｏｆＮａｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃａｌＰｒｏｄｕｃｔｓＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎꎬＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８０１７ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＮＭＰＡＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＢｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｃｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＧｅｎｅｒｉｃＤｒｕｇＥｖａｌｕａｔｉｏｎꎬＳｈｅｎｚｈｅｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｒｕｇＱｕａｌｉｔｙＳｔａｎｄａｒｄＲｅｓｅａｒｃｈꎬＳｈｅｎｚｈｅｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌꎬＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８０５７ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ<Ｓｈｅｎｚｈｅｎ>ꎬＳｕｎＹａｔ－ｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８１０７ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍａｃｔｉｖｅｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ(ＡＰＩ)ｔｈｒｏｕｇｈｆｏｒｃｅｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｔｅｓｔ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ａｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ(ＨＰＬＣ)ｍｅｔｈｏｄｗａｓｄｅｖｅｌ￣ｏｐｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｅｄｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｏｎａＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈａｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｏｆ０.０５％ａｑｕｅｏｕｓｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄｓｏｌｕｔｉｏｎ－ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅꎬｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎꎬｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓｅｔａｔ３０ħꎬｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ２１０ｎｍ.Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅｍａｉｎｐｅａｋｉｎｔｈｅｄｅｇｒａ￣ｄａｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍＡＰＩｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｏｘｉｄａｔｉｏｎꎬａｃｉｄｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓꎬａｌｋａｌｉｎｅｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓꎬｔｈｅｒｍａｌａｎｄｐｈｏｔｏｌｙｓｉｓ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ａｍｏｎｇｔｈｅ６７ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｃｏｎ￣ｄｉｔｉｏｎｓｄｅｓｉｇｎｅｄｆｏｒｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔꎬｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍＡＰＩｗａｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏｏｘｉｄａｔｉｏｎ(ｈｅａｔｉｎｇａｎｄｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ)ꎬｈｉｇｈｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｈｕｍｉｄｉｔｙꎬａｃｉｄｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔꎬｗｈｉｌｅｉｎｓｏｌｕｔｉｏｎｓｔａｔｅｉｔｗａｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏｈｉｇｈｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｌｉｇｈｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ.Ｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｆｏｕｒｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍｗｅｒｅｄｅｔｅｒ￣ｍｉｎｅｄꎬａｎｄｔｈｅｉｒｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｕｍｃｌｅａｖａｇｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｗｅｒｅｃｌａｒｉｆｉｅｄ.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀Ｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｓｉｍｕｌａｔｅｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍｗｉｔｈａｖａｒｉｅｔｙｏｆｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｆｏｒｃｅｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｓｔｕｄｙｈｅｌｐｓｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓｉｎｄｒｕｇｓｔｏｒａｇｅａｎｄｄｒｕｇｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｆｏｒｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｌｏｓａｒ￣ｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍＡＰＩａｎｄｉｔｓｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＬｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍꎻＯｘｉｄａｔｉｖｅｄｅｓｔｒｏｙｉｎｇꎻＡｃｉｄｄｅｓｔｒｏｙｉｎｇꎻＡｌｋａｌｉｄｅｓｔｒｏｙｉｎｇꎻＨｉｇｈｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｄｅｓｔｒｏｙｉｎｇꎻＬｉｇｈｔｄｅｓｔｒｏｙｉｎｇꎻＤｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ㊀㊀氯沙坦钾(ｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍ)作为首个临床非肽类血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂ꎬ属于沙坦类药物ꎬ具有安全性高的特点ꎬ可同其他抗高血压药物一起使用ꎬ本品耐受性良好ꎬ不良反应轻微且短暂[１]ꎬ临床上被广泛应用ꎮ２０２１年统计数据显示中国地区含氯沙坦钾活性成分药物制剂的销售额已达６.２１９５亿元[２]ꎮ原料药作为药品的主要活性成分ꎬ药物的有效性和安全性与原料药密切相关ꎬ药物因原料药生产㊁制剂过程中原料药与辅料发生化学反应及储存不当等因素均可能产生杂质从而降低药品活性ꎬ影响药物稳定性ꎻ甚至因各种原因产生的基因毒性杂质ꎬ会对人体健康产生严重的副作用和不良反应ꎮ如缬沙坦类产品中发现的Ｎ－二甲基亚硝胺及其他亚硝胺类基因毒性杂质[３－４]ꎬ其来源于活性药物成分合成中产生ꎬ但也有研究表明沙坦类药物杂质来源于生产㊁贮存和运输等外部因素[５－６]ꎮ有研究将氯沙坦钾置于紫外㊁氧化及光照下对降解样本分析ꎬ发现样本具有慢性或急性毒性[７]ꎮ强制降解试验即在较短时间内采用剧烈条件使药物产生一定水平的降解[８]ꎬ从而快速获取降解途径和降解产物ꎬ为药物安全性研究提供支持ꎬ以及对有关物质分析方法的开发ꎬ药物处方㊁包装材料选择和储存条件提供支持[９]ꎮ本文依据人用药品技术要求国际协调理事会(ＩＣＨ)指导原则等[１０－１２]开展氯沙坦钾原料药在氧化㊁强酸㊁强碱㊁高温㊁光照条件下的强制降解试验ꎬ开发基于高效液相色谱仪的分析方法ꎬ为氯沙坦钾原料药的降解途径和有关物质的研究奠定基础ꎬ为原料药的储存㊁制剂工艺㊁药品生产㊁运输和贮存条件提供参考ꎮ１㊀仪器与试药１.１㊀仪器㊀ＬＣ－２０Ａ高效液相色谱仪(日本岛津公司)ꎻＸ５００ＲＵＨＰＬＣ－ＱＴＯＦ液质连用仪(美国Ｓｃｉｅｘ公司)ꎻＸＳ１０５ＤＵ天平(瑞士ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ公司)ꎻＢＴ２５Ｓ天平(德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司)ꎻＨＳ３１２０超声仪(天津恒奥科技发展有限公司)ꎻＳＷ２３水浴锅(德国Ｊｕｌａｂｏ公司)ꎻＫＢＦ２４０恒温恒湿箱(德国Ｂｉｎｄｅｒ公司)ꎻＵＮ１１０恒温干燥箱(德国Ｍｅｍｍｅｒｔ公司)ꎮ１.２㊀试剂试药㊀氯沙坦钾原料药(浙江华海药业股份有限公司ꎬ批号:Ｃ５６６３－２２－０１１)ꎻ氯沙坦钾对照品(中国食品药品检定研究院ꎬ批号:１００５９７－２０１７０３)ꎻ«欧洲药典»氯沙坦杂质Ｌ(批号:ＬＳＴＪ－１２０５２０１９)㊁«欧洲药典»氯沙坦杂质Ｍ(批号:ＬＳＴＪ－０５２６２０２０)㊁氯沙坦杂质１(Ｎ－[[２ᶄ－(２Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－５－ｙｌ)[１ꎬ１ᶄ－ｂｉｐｈｅｎｙｌ]－４－ｙｌ]ｍｅｔｈｙｌ]ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅꎬ批号:ＬＳＴＪ－０５１８２０２０)均购于深圳市宏盛生物技术有限公司ꎮ乙腈(北京百灵威科技有限公司ꎬ色谱级)ꎻ氢氧化钠(上海阿拉丁生化科技股份有限公司ꎬ分析纯)ꎻ磷酸㊁盐酸和３０％过氧化氢(广东广试试剂科技有限公司ꎬ分析纯)ꎻ超纯水由Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ超纯水仪自制ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀液相色谱条件㊀ＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇｅＢＥＨＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎬ柱温３０ħꎬ流动相Ａ为０.０５％磷酸水溶液ꎬ流动相Ｂ为乙腈ꎬ流速１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬ按照表１程序梯度洗脱ꎬ进样量１０μＬꎬ检测波长２１０ｎｍꎮ表１㊀液相梯度洗脱程序时间/ｍｉｎ流动相Ａ(％)流动相Ｂ(％)０.０７７２３４.０７７２３４.１７２２８７.０７２２８８.０６８３２１３.０６５３５１８.０６５３５２０.０６３３７３０.０５８４２３５.０４５５５４０.０１０９０４５.０１０９０４５.１７７２３５０.０７７２３２.２㊀液质检测条件㊀ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＢＥＨＣ１８(２.１ｍｍˑ１００ｍｍꎬ１.７μｍ)色谱柱ꎬ柱温３５ħꎬ流动相Ａ为５ｍｏｌ Ｌ－１乙酸铵(ｐＨ＝４)ꎬ流动相Ｂ为乙腈ꎬ流速０.５ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬ按照表２程序梯度洗脱ꎮ质谱信号采集时间０~２０ｍｉｎꎬ电喷雾离子源ꎬ正离子模式ꎬ信息依赖采集(ＩＤＡ)扫描模式ꎮ离子喷雾电压５５００Ｖꎬ离子源温度５００ħꎬ去簇电压(ＤＰ)８０Ｖꎬ雾化气和辅助气均为５５ｐｓｉ氮气ꎬ３５ｐｓｉ氮气作气帘气ꎮ扫描范围ｍ/ｚ５０~１０００Ｄａꎬ碰撞能(ＣＥ)１０ＶꎮＭＳ/ＭＳ扫描范围ｍ/ｚ５０~１０００Ｄａꎬ碰撞能(ＣＥ)３０Ｖꎮ表２㊀液质联用梯度洗脱程序时间/ｍｉｎ流动相Ａ(％)流动相Ｂ(％)０.０７５２５２.０７５２５２.５７０３０４.５７０３０６.０６５３５８.０６５３５８.５６０４０１０.０６０４０１４.０２０８０１６.０２０８０１６.１７５２５２０.０７５２５２.３㊀溶液的制备㊀稀释剂:乙腈－水(２ʒ８)ꎮ供试品溶液:精密称取氯沙坦钾原料药１２.５ｍｇꎬ置于２５ｍＬ容量瓶ꎬ加稀释剂溶解并稀释制得０.５ｍｇ ｍＬ－１溶液ꎬ过滤ꎬ取续滤液作为供试品溶液ꎮ对照品溶液:临用前将氯沙坦钾对照品于烘箱１０５ħ烘干２ｈꎬ精密称取５ｍｇ氯沙坦钾对照品ꎬ加稀释剂于２.５ｍＬ容量瓶定容ꎬ作为对照品储备液ꎻ用稀释剂按比例稀释使用ꎮ２.４㊀强制降解试验２.４.１㊀氧化破坏㊀室温环境下ꎬ精密称取氯沙坦钾原料药１０ｍｇꎬ置于玻璃具塞试管中ꎬ分别加入５００μＬ不同浓度的过氧化氢溶液(０㊁０.１％㊁３.０％㊁１０％㊁３０％)ꎬ于室温下放置２４㊁４８㊁７２㊁１６８ｈ后ꎬ加稀释剂定容至２０ｍＬꎬ摇匀后过滤(０.２２μｍ尼龙滤膜)ꎬ取续滤液检测ꎮ精密称取氯沙坦钾原料药１０ｍｇꎬ分别加入５００μＬ不同浓度Ｈ２Ｏ２溶液(０㊁０.１％㊁１.０％㊁３.０％㊁１０％㊁２０％㊁３０％)ꎬ置于６０ħ水浴[１３]中反应１㊁３ｈꎬ冷却后加稀释剂同法操作检测ꎮ２.４.２㊀酸破坏㊀精密称取氯沙坦钾原料药１０ｍｇꎬ置于玻璃具塞试管中ꎬ加入５００μＬ不同浓度盐酸溶液(０㊁１㊁２ｍｏｌ Ｌ－１)ꎬ分别于６０ħ反应３㊁６ｈ及室温反应８ｈꎮ分别加５００μＬ对应浓度的氢氧化钠溶液中和ꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ２.４.３㊀碱破坏㊀精密称取氯沙坦钾原料药１０ｍｇꎬ置于玻璃具塞试管中ꎬ分别加入５００μＬ不同浓度氢氧化钠溶液(０㊁２㊁４ｍｏｌ Ｌ－１)ꎬ分别于６０ħ反应３㊁６ｈ及室温反应８ｈꎮ分别加５００μＬ对应浓度盐酸溶液中和ꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ２.４.４㊀高温破坏㊀固体状态下ꎬ取氯沙坦钾原料药平铺于玻璃培养皿中(厚度<１ｍｍ)ꎬ置烘箱１０５ħ加热６㊁１２㊁２４ｈ后ꎬ充分混匀后精密称取１０ｍｇꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ湿度考察ꎬ取氯沙坦钾原料药１０ｍｇꎬ置恒温恒湿箱中(５５ħꎬＲＨ９２.５％)ꎬ放置２４㊁７２㊁１２０ｈꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ另取氯沙坦钾原料药１０ｍｇꎬ置恒温恒湿箱中(９２.５ħꎬＲＨ２５％)ꎬ放置０.２５㊁１㊁２ｈ后ꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ溶液状态下ꎬ称取氯沙坦钾原料药１０ｍｇ于１０ｍＬ离心管中ꎬ加稀释剂１.０ｍＬꎬ水浴９０ħ加热破坏３㊁１２㊁２４ｈꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ２.４.５㊀光照破坏㊀取氯沙坦钾原料药平铺于玻璃培养皿中(厚度<１ｍｍ)ꎬ置恒温恒湿箱(２５ħꎬＲＨ２５％)ꎬ(４５００ʃ５００)Ｌｘ白光ꎬ照射１㊁１０㊁３０ｄꎬ混匀精密称取１０ｍｇꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ另称取氯沙坦钾原料药１０ｍｇ于离心管中ꎬ加稀释剂１.０ｍＬꎬ在(４５００ʃ５００)Ｌｘ照射１㊁７㊁２０ｄꎬ加稀释剂同法操作检测ꎮ２.５㊀降解试验结果２.５.１㊀氧化破坏㊀氯沙坦钾原料药在氧化(室温和加热)环境下均会发生不同程度的降解ꎬ１％Ｈ２Ｏ２(加热)环境中已出现降解产物ꎬ但其峰面积小于０.１％ꎬ在高于３％Ｈ２Ｏ２氧化破坏下ꎬ室温和加热环境均会发生降解ꎮ室温环境ꎬ氯沙坦钾的降解率和降解产物个数随Ｈ２Ｏ２浓度增加而增加ꎻ同浓度条件下ꎬ降解率和产物数随放置时间增加而增加ꎮ当氧化破坏伴随着高温环境(６０ħ)ꎬ短时间内降解率可超过１０％ꎬ伴随Ｈ２Ｏ２浓度的增加及时间的延长ꎬ最高降解率可达５３.０５％ꎬ产生２９个降解产物ꎮ２.５.２㊀酸破坏㊀氯沙坦钾在酸室温条件下ꎬ最高降解率为４.８４％ꎮ在酸伴随加热环境下ꎬ降解率在１６.４９％~３７.９７％ꎬ说明氯沙坦钾在酸降解中受温度影响大ꎬ温度越高其降解越明显ꎮ氯沙坦钾在２ｍｏｌ Ｌ－１盐酸中降解率低于１ｍｏｌ Ｌ－１盐酸ꎬ推测可能因氯沙坦钾在酸性环境中溶解度下降[１３]所致ꎮ同浓度酸条件下加热时长对氯沙坦钾的降解影响不大ꎬ但降解产物稍有差异ꎬ相对保留时间(ＲＲＴ)２.２０和２.２９这两个降解产物相对含量随降解条件(酸浓度和时长)增强而增加ꎮ２.５.３㊀碱破坏㊀氯沙坦钾在碱室温环境微弱降解ꎬＲＲＴ０.１３６处的降解产物的相对含量随着碱浓度的增加而降低ꎬ推测因氯沙坦钾在碱环境中溶解度差异所致ꎮ另２ｍｏｌ Ｌ－１氢氧化钠比４ｍｏｌ Ｌ－１氢氧化钠新产生了ＲＲＴ为２.２０和２.２９两个降解产物ꎬ与酸破坏中显著增加的降解产物一致ꎬ但在碱破坏中仅占０.２％左右ꎬ远低于酸环境ꎮ同浓度碱环境下加热时长对降解率影响不大ꎮ初步判定氯沙坦钾对碱性环境相对稳定ꎮ２.５.４㊀高温破坏㊀«中国药典»２０２０年版(二部)和相关文献[１１ꎬ１５]表明ꎬ氯沙坦钾原料药易吸潮ꎬ颗粒烘干后应立即压片ꎬ故分别考察氯沙坦钾在固体和液体状态下的高温破坏ꎮ氯沙坦钾原料药在固体高温干燥(烘箱１０５ħ)环境１２ｈ和高温低湿(９２.５ħꎬＲＨ２５％)环境２ｈ内稳定性良好ꎮ但在固体高温高湿环境(５５ħꎬＲＨ９２.５％)３ｄ降解率可超３０％ꎬ第５天降解率达４３.９７％ꎬ但基于ＨＰＬＣ的紫外检测ꎬ只有４个降解产物(相对含量最高的仅为０.３９％)ꎬ推测其降解产物不具有紫外吸收ꎮ氯沙坦钾在溶液状态于高温水浴９０ħ环境２４ｈ后降解率为７.３６％ꎬＲＲＴ２.２０和ＲＲＴ２.２９这２个降解产物含量均随时间的延长而增加ꎮ２.５.５㊀光照破坏㊀考察氯沙坦钾在固体和溶液状态下对白光[２５ħꎬＲＨ２５％ꎬ(４５００ʃ５００)Ｌｘ]的敏感性ꎬ氯沙坦钾原料药在固体状态下１０ｄ降解率可超１０％ꎬ光照３０ｄ降解产物数有４个ꎬ其中ＲＲＴ２.３８降解产物含量随时间的延长而增加ꎮ氯沙坦钾溶液状态对光照敏感ꎬ仅１ｄ降解率达５.５４％ꎬ２０ｄ降解率达４７.２６％ꎬ产生８个降解产物ꎮ其中ＲＲＴ１.４６在固体和溶液状态下含量均会随时间的延长而增加ꎮ２.６㊀氯沙坦钾降解途径㊀以氯沙坦钾降解率和峰面积大于主峰０.１％的降解产物个数进行比较ꎬ将６７种降解条件下的降解率和降解产物个数作气泡图(见图１)ꎮ对氯沙坦钾原料药在氧化㊁酸㊁碱㊁高温和光照条件下的降解率进行总结ꎮ氯沙坦钾在氧化(室温和加热)环境中均呈现极大的降解率ꎬＨ２Ｏ２浓度㊁氧化环境温度以及氧化时长均有影响ꎮ在酸破坏环境中降解率受温度影响大ꎬ酸加热环境的降解率远高于其在室温环境的降解率ꎮ虽然碱环境相对稳定ꎬ但其降解同样受温度影响ꎬ碱加热环境中降解率有所增加ꎮ高温高湿环境下降解率也远高于高温干燥环境ꎮ一旦配制成为溶液状态ꎬ光照条件下降解率急剧上升ꎮ２.７㊀氯沙坦钾降解产物分析㊀氯沙坦钾原料药在多种强制破坏条件下均产生了２２种降解产物(峰面积>０.１％氯沙坦钾峰面积ꎬ见图２)ꎬ结合液质联用对氯沙坦钾的母核结构和碎片分子量以及降解杂质的二级断裂碎片的测定结果ꎬ推测了降解产物中的１９种化合物的分子量和分子式ꎬ确定了峰１㊁８㊁１９和２０这４个降解杂质的分子结构ꎮ在氧化破坏中ꎬ峰１峰面积为主峰(氯沙坦钾)图１㊀氯沙坦钾原料药在６７种降解条件下的降解率和降解产物气泡图图２㊀氯沙坦钾各降解条件下的降解产物色谱图峰面积的３倍左右(见表１)ꎬ如图３所示ꎬ在正离子模式下ꎬ峰１的一级质谱(ＭＳ１)提示５０３.２４２４㊁２５２.１２５１㊁２３５.０９７５㊁２０７.０９１３ꎬ５０３.２４２４可能为其准分子离子ꎬ对ｍ/ｚ５０３.２４２４㊁２５２.１２５１㊁２３５.０９７５㊁２０７.０９１３分别进行二级碎片采集ꎬ发现ｍ/ｚ２５２.１２５１的碎片中ꎬ含有ｍ/ｚ２３５.０９７５㊁２０７.０９１３ꎬ结合ｍ/ｚ５０３.２４２４可能为[２Ｍ＋Ｈ]＋ꎬ判定[Ｍ＋Ｈ]＋准分子离子峰为ｍ/ｚ２５２.１２５１ꎬ二级质谱(ＭＳ２)提示[Ｍ＋Ｈ]＋脱去－ＮＨ３后ꎬ形成ｍ/ｚ２３５.０９８０的[Ｍ＋Ｈ－ＮＨ３]＋ꎬ随后四氮唑环断裂离去Ｎ２ꎬ与苯成环结合成苯并吡唑形成ｍ/ｚ２０７.０９２０ꎬ吡唑环进一步断裂形成ｍ/ｚ１８０.０７９５碎片离子ꎮ峰８同样作为氧化降解产物ꎬ如图４所示ꎬ在正离子模式下ꎬ其ＭＳ１显示[Ｍ＋Ｈ]＋准分子离子峰ｍ/ｚ３３６.１８０９ꎬＭＳ２含有２３５.０９６１㊁２０７.０８９３ꎬ提示其母核与峰１均含有四氮唑联苯结构ꎬ且根据氯原子的质谱规律ꎬ峰１和峰８中均不含Ｃｌ原子ꎮ氯沙坦钾结构包括咪唑环㊁联苯以及四氮唑３部分ꎬ结合降解产物的碎片离子ꎬ认为在氧化条件下Ｏ＝Ｏ最先进攻氯沙坦钾的咪唑环ꎬＣｌ原子离去同时保留联苯和四氮唑部分ꎬ初步推断咪唑环在氧的进攻下断裂ꎬ发生１ꎬ４－环加成ꎬ离去－Ｎ＝Ｃ－Ｃｌ形成化合物峰８分子式Ｃ１９Ｈ２１Ｎ５Ｏ(分子量３３５.１７)ꎻ峰１是峰８离去烷基支链后进一步的氧化降解产物ꎬ分子式Ｃ１４Ｈ１３Ｎ５(分子量２５１.１２)ꎮ文献[１６]表明ꎬ氯沙坦钾的咪唑环易发生单线态氧的光敏化反应ꎬ在氯沙坦钾的氧化混悬液中也发现了这两个成分ꎮ将其与对照品比对后证实峰１为(２ᶄ－(１Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－５－ｙｌ)－[１ꎬ１ᶄ－ｂｉ￣ｐｈｅｎｙｌ]－４－ｙｌ)ｍｅｔｈａｎａｍｉｎｅꎬ峰８为Ｎ－[[２ᶄ－(２Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌ－５－ｙｌ)[１ꎬ１ᶄ－ｂｉｐｈｅｎｙｌ]－４－ｙｌ]ｍｅｔｈｙｌ]ｐｅｎ￣ｔａｎａｍｉｄｅꎬ是缬沙坦去缬氨酸杂质ꎮ图３㊀ＲＲＴ０.１４０降解杂质质谱裂解图４㊀ＲＲＴ０.８７降解杂质质谱裂解㊀㊀峰１９和２０这两个降解产物在酸中的显著增加(峰面积占比达到了９.８４％)ꎬ在正离子模式下ꎬ峰１９和峰２０的ＭＳ１分别为８２７.３１９３和８２７.３２１５ꎬＭＳ２有８０９.３０５４㊁４０５.１５５１㊁３７７.１５０５和２０７.０９０５且丰度高ꎬ氯沙坦钾在酸性环境下其咪唑环会发生断裂[１７]ꎬ结合离子碎片初步判断两者为同分异构体ꎬ[Ｍ＋Ｈ]＋准分子离子峰为ｍ/ｚ８２７.３２ꎮ通过对照品比对保留时间和二级碎片确认为«欧洲药典»(ＥＰ)收载的杂质Ｌ和杂质Ｍ(见图５~６)ꎮ图５㊀ＲＲＴ２.２１降解杂质质谱裂解图６㊀ＲＲＴ２.２９降解杂质质谱裂解３㊀讨论３.１㊀降解条件的选择㊀基于ＩＣＨ指导原则[１０ꎬ１８]设计了本实验的降解条件ꎬ如３０％过氧化氢在超过６０ħ[１２ꎬ１９]的条件下分解速度会显著增加故选择了６０ħ作为氧化加热降解条件ꎬ联合氧化室温条件以考察缓慢氧化对降解的影响ꎮ文献[１４]表明氯沙坦钾在酸性环境中会发生降解ꎬ故设置了高于常规考察的盐酸浓度２ｍｏｌ Ｌ－１和１ｍｏｌ Ｌ－１ꎻ未见有文献报道其在碱环境中的稳定性ꎬ故设置了高浓度的氢氧化钠４ｍｏｌ Ｌ－１和２ｍｏｌ Ｌ－１ꎮ高温降解试验根据应用ꎬ分别考察了其在固体状态下高温低湿㊁高温高湿㊁高温干燥以及溶液状态下高温水浴４种条件ꎮ３.２㊀氯沙坦钾降解途径㊀基于氧化㊁酸㊁碱㊁高温以及光照强制降解实验结果ꎬ氯沙坦钾对氧化㊁酸㊁高温和光照环境敏感ꎮ在氧化环境中降解率最高(７７.９４％)ꎬ后依次是光照(４７.２６％)㊁高温(４３.９７％)和酸破坏(３７.９７％)ꎮ氧化环境中产生的降解产物最多为５７个ꎬ其次是酸降解有２３个ꎮ结合氯沙坦钾和降解杂质的碎片离子ꎬ初步得出以下的裂解规律ꎬ具有氯沙坦钾母核结构的杂质会产生ｍ/ｚ４０５㊁３７７㊁２３５㊁２０７㊁１９０碎片离子峰ꎻ咪唑环片断和联苯片断与四氮唑环片断容易断裂ꎬ产生碎片离子ꎬＭＳ有２０７和２３５时提示含联苯并四氮唑结构ꎻ咪唑环和四氮唑连接的基团容易断裂ꎬ可据此推断咪唑环和四氮唑上的取代基团ꎮ基于此裂解规律ꎬ我们对降解产物中的２２种成分进行了结构解析ꎬ确定了峰１㊁８㊁１９和２０４个化合物的结构ꎬ总结了峰１和峰８这两个氧化降解杂质的裂解规律ꎮ氯沙坦钾结构中咪唑环上的Ｃｌ原子易受到氧化离子的攻击ꎬ咪唑环断裂的同时ꎬＮ原子帮助结构的重排ꎬ而产生氧化降解产物ꎮ此外ꎬ咪唑环对热和光照环境不稳定ꎬ氯沙坦钾的咪唑环上连接的Ｃｌ原子和－ＣＨ２ＯＨ可能是氯沙坦钾在溶液中对光和高热不稳定的原因之一ꎮ四氮唑是羧基的生物电子等排体ꎬ与羧基具有十分相似的理化性质ꎬ具有较强的酸性ꎬ但与联苯结构可形成较稳定的复合物ꎬ推测可能是其对碱相对稳定的原因ꎮ表３㊀氯沙坦钾降解产物及降解途径序号相对保留时间ｍ/ｚ推测产物氧化名称推测分子式推测分子量加热室温酸碱高温溶液固体ꎬ高湿光照降解途径１０.１４０２５２.１２５１杂质１Ｃ１４Ｈ１３Ｎ５２５１.１２＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－＋氧化破坏８０.８７３３６.１８４１缬沙坦杂质Ｃ１９Ｈ２１Ｎ５Ｏ３３５.１７－＋－－－－－氧化破坏１９２.２１８２７.３１９３ＥＰ杂质ＬＣ４４Ｈ４４Ｃｌ２Ｎ１２Ｏ８２７.８１－－＋＋－＋－－酸㊁高温破坏２０２.２９８２７.３２１５ＥＰ杂质ＭＣ４４Ｈ４４Ｃｌ２Ｎ１２Ｏ８２７.８１－－＋＋－＋－－酸㊁高温破坏㊀注:降解产物峰面积大于主峰面积的０.３％为 ＋ ꎬ大于１％为 ＋＋ ꎬ大于１０％为 ＋＋＋ ꎬ大于１５％为 ＋＋＋＋ ꎬ大于５０％为 ＋＋＋＋＋ ꎮ㊀㊀氯沙坦钾的降解途径主要为氧化破坏㊁酸破坏和溶液高温破坏ꎬ同时因其易吸潮的特性ꎬ固体状态下高温伴随高湿环境㊁溶液状态下白光(２５ħꎬＲＨ２５％)照射也存在显著降解ꎮ因此ꎬ在氯沙坦钾原料药产品包装储存及药物制剂处方设定时应避免接触氧化剂及酸ꎬ其常规制剂工艺也宜采用粉末直压㊁干法制粒等ꎬ同时需控制环境温㊁湿度及避免强光ꎮ通过对氯沙坦钾降解途径的研究ꎬ有助于探索药品贮藏及药品制剂生产中的杂质变化ꎬ用于氯沙坦钾原料药及其制剂的质量控制ꎮ４㊀结论本试验建立了一种在各种降解条件下能有效分离氯沙坦钾和其降解杂质的ＨＰＬＣ分析方法ꎬ经方法学验证此分析方法稳定可靠ꎮ考察了氧化㊁酸㊁碱㊁高温㊁光照５大类强制降解条件对氯沙坦钾原料药的影响ꎬ共设计６７种降解条件ꎬ明确了氯沙坦钾的降解途径主要为氧化破坏㊁酸破坏和固体高温高湿破坏ꎬ溶液高温以及溶液白光破坏ꎮ本研究可为氯沙坦钾原料药的质量控制尤其是有关物质的研究提供参考ꎬ也可为氯沙坦钾原料药的贮藏及制剂工艺研究提供参考依据ꎮ参考文献:[１]㊀李魁.国产氯沙坦钾片在老年健康人体内的药动学和生物等效性研究[Ｊ].罕少疾病杂志ꎬ２０２２ꎬ２９(１２):１０３－１０４.[２]药渡网.检索２０２１年度含氯沙坦钾活性成分的药物制剂销量[ＥＢ/ＯＬ].(２０２２－０１－０１)[２０２３－０８－０１].ｈｔｔｐｓ://ｄａｔａ.ｐｈａｒｍａｃｏｄｉａ.ｃｏｍ/ｉｓｌｃｓａｌｅ/＃/ｍａｉｎ/ｉｓｌｃｓａｌｅ/ｖａｒｉｅｔｉｅｓ?ｎａｍｅ＝％Ｅ６％Ｂ０％ＡＦ％Ｅ６％Ｂ２％９９％Ｅ５％９Ｄ％Ａ６％Ｅ９％９２％ＢＥ＆ｔｙｐｅ＝２.[３]邹韵ꎬ孙丽鹏ꎬ李晓东ꎬ等.高效液相色谱串联质谱法测定氯沙坦钾中的遗传毒性杂质Ｎ－亚硝基－Ｎ－甲基－４－氨基丁酸[Ｊ].中国药学杂志ꎬ２０２０ꎬ５５(３):２２８－２３２. [４]ＷＩＣＨＩＴＮＩＴＨＡＤＷꎬＳＵＤＴＡＮＯＮＯꎬＳＲＩＳＵＮＡＫＰꎬｅｔａｌ.ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａＳｅｎｓｉｔｉｖｅＨｅａｄｓｐａｃｅＧａｓＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＳｉｍ￣ｕｌｔａｎｅｏｕｓＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｔｒｏｓａｍｉｎｅｓｉｎＬｏｓａｒｔａｎＡｃｔｉｖｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＩｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ[Ｊ].ＡＣＳＯｍｅｇａꎬ２０２１ꎬ６(１６):１１０４８－１１０５８.[５]蔡鹏俊ꎬ李悦.几种沙坦类药物的杂质谱研究现状[Ｊ].药物分析杂志ꎬ２０１６ꎬ３６(３):３７７－４０５.[６]李树英ꎬ倪志伟ꎬ张庆ꎬ等.基于合成路线分析的盐酸阿托莫西汀有关物质研究进展[Ｊ].药学研究ꎬ２０２２ꎬ４１(６):４００－４０５.[７]马骏威ꎬ刘涓ꎬ刘永辉ꎬ等.强制降解试验在药物研发中的应用[Ｊ].中国现代应用药学ꎬ２０２０ꎬ３７(１４):１７７８－１７８２.[８]国家食品药品监督管理总局.关于发布普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则和化学药物(原料药和制剂)稳定性研究技术指导原则的通告(２０１５年第３号).化学药物(原料药和制剂)稳定性研究技术指导原则[ＥＢ/ＯＬ].(２０１５－０２－０５)[２０２３－０８－０１].ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｎｍｐａ.ｇｏｖ.ｃｎ/ｘｘｇｋ/ｇｇｔｇ/ｙｐｇｇｔｇ/ｙｐｑｔｇｇｔｇ/２０１５０２０５１２０００１１００.ｈｔｍｌ. [９]ＰＡＴＥＬＭＮꎬＫＯＴＨＡＲＩＣＳ.ＲｅｖｉｅｗｏｎＩｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＭｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅＡｐｐｒｏａｃｈｆｏｒＦｏｒｃｅｄＤｅｇｒａｄａｔｉｏｎＳｔｕｄｙａｎｄＩｍｐｕｒｉｔｙＰｒｏｆｉｌｉｎｇｗｉｔｈＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＣｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ[Ｊ].Ｃｈｒｏｍａꎬ２０１８ꎬ８１(１):１０５－１２５.[１０]ＩＣＨＱ１Ａ.Ｓｔａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｉｎｇｏｆｎｅｗｄｒｕｇｓｕｂｓｔａｎｃｅｓａｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ(Ｒ２)[ＥＢ/ＯＬ].(２００３－０２－０６)[２０２３－０８－０１].ｈｔｔｐｓ://ｄａｔａｂａｓｅ.ｉｃｈ.ｏｒｇ/ｓｉｔｅｓ/ｄｅｆａｕｌｔ/ｆｉｌｅｓ/Ｑ１Ａ％２８Ｒ２％２９％２０Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ.ｐｄｆ.[１１]国家药典委员会.中华人民共和国药典２０２０年版(二部)[Ｓ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０２０:１６３８－１６３９. [１２]ＨＥＲＴＺＯＧＤＬꎬＪＥＮＮＩＦＥＲＦＭꎬＸＵＥＧＦꎬｅｔａｌ.Ｄｅｖｅｌ￣ｏｐｍｅｎｔａｎｄＶａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆａＳｔａｂｉｌｉｔｙ－ＩｎｄｉｃａｔｉｎｇＨＰＬＣＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｏｓａｒｔａｎＰｏｔａｓｓｉｕｍꎬＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅꎬａｎｄＴｈｅｉｒＤｅｇｒａｄａｔｉｏｎＰｒｏｄｕｃｔｓ[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌꎬ２００２ꎬ３０(３):７４７－７６０.[１３]梅雪娇ꎬ闫翔宇ꎬ严相平.盐酸氨溴索注射液降解杂质结构与降解途径分析[Ｊ].药学与临床研究ꎬ２０２２ꎬ３０(４):３０５－３０８.[１４]ＦＯＬＥＹＬꎬＴＯＮＥＹＪꎬＢＡＲＬＯＷＪＷꎬｅｔａｌ.ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＰｈｙｓｉｃａｌꎬＣｈｅｍｉｃａｌａｎｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｔａｂｉｌｉｔｙｏｆＬｏｓａｒｔａｎＰｏｔａｓｓｉｕｍ５ｍｇ/ｍＬＥｘｔｅｍｐｏｒａｎｅｏｕｓＯｒａｌＬｉｑｕｉｄＳｕｓｐｅｎｓｉｏｎ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０２１ꎬ２６(２):３０１.[１５]李茂春.单因素与正交实验结合优化氯沙坦钾片处方[Ｊ].医药导报ꎬ２０１３ꎬ３２(２):２３０－２３２.[１６]ＳＥＢＵＲＧＲＡꎬＢＡＬＬＡＲＤＪＭꎬＨＷＡＮＧＴＬꎬｅｔａｌ.Ｐｈｏｔｏ￣ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｌｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍｉｎａｎｅｘｔｅｍ￣ｐｏｒａｎｅｏｕｓｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡ￣ｎａｌꎬ２００６ꎬ４２(４):４１１－４２２.[１７]ＳＨＥＬＡＲＫꎬＲＡＯＪＲꎬＤＨＡＬＥＣ.ＳｔａｂｉｌｉｔｙｉｎｄｉｃａｔｉｎｇＨＰＴＬＣｍｅｔｈｏｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｖａｌｉｄａｔｉｏｎｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆＡｍｌｏｄｉｐｉｎｅｂｅｓｙｌａｔｅａｎｄＬｏｓａｒｔａｎｐｏｔａｓｓｉｕｍａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆａｃｉｄｄｅｇｒａｄａｎｔｐｒｏｄｕｃｔｏｆＬｏｓａｒｔａｎ[Ｊ].ＩｎｔＪＰｈａｒｍＳｃｉＲｅｓꎬ２０１９ꎬ１０(５):２４５６－２４６４.[１８]ＩＣＨＱ１Ｂ.Ｓｔａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｉｎｇ:ｐｈｏｔｏｓｔａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｉｎｇｏｆｎｅｗｄｒｕｇｓｕｂｓｔａｎｃｅｓａｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ[ＥＢ/ＯＬ].(１９９６－１１－０６)[２０２３－０８－０１].ｈｔｔｐｓ://ｄａｔａｂａｓｅ.ｉｃｈ.ｏｒｇ/ｓｉｔｅｓ/ｄｅｆａｕｌｔ/ｆｉｌｅｓ/Ｑ１Ｂ％２０Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ.ｐｄｆ.[１９]ＭＩＬＥＴＩＥＶＲꎬＳＩＭＥＯＮＯＶＩꎬＳＴＥＦＡＮＯＶＡＶꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｒ￣ｍｏｄｙｎａｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓ[Ｊ].ＪＴｈｅｒｍＡｎａｌＣａｌｏｒｉｍꎬ２０１３ꎬ１１３(２):９８５－９８９.(收稿日期:２０２３－０８－０１)(上接第１１０页)[１８]林满遍ꎬ陈亮ꎬ吴水生.钩吻总碱对人结肠癌细胞增殖㊁凋亡的影响及其机制[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１８ꎬ２４(４):１４９－１５３.[１９]黄兰青ꎬ王坤ꎬ佘尚扬ꎬ等.钩吻对环磷酰胺化疗小鼠的造血保护作用[Ｊ].右江民族医学院学报ꎬ１９９４ꎬ１６(４):５.[２０]王坤ꎬ肖健ꎬ黄燕ꎬ等.钩吻对小鼠造血功能的影响[Ｊ].广西中医药ꎬ２０００ꎬ２３(６):５３.[２１]ＹＡＮＧＭＨꎬＨＡＩＪꎬＬＥＥＳＧꎬｅｔａｌ.ＢｒａｓｓｉｎｉｎＩｎｄｕｃｅｓＡｐｏｐｔｏｓｉｓꎬＡｕｔｏｐｈａｇｙꎬａｎｄＰａｒａｐｔｏｓｉｓｖｉａＭＡＰＫＳｉｇｎａｌｉｎｇＰａｔｈｗａｙＡｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎＣｈｒｏｎｉｃＭｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓＬｅｕｋｅｍｉａＣｅｌｌｓ[Ｊ].Ｂｉｏｌｏｇｙ(Ｂａｓｅｌ)ꎬ２０２３ꎬ１２(２):３０７.[２２]ＴＳＵＪＩＭＯＴＯＹ.ＲｏｌｅｏｆＢｃｌ－２ｆａｍｉｌｙｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎａｐｏｐｔｏｓｉｓ:ａｐｏｐｔｏｓｏｍｅｓｏｒｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ[Ｊ].ＧｅｎｅｓＣｅｌｌｓꎬ１９９８ꎬ３(１１):６９７－７０７.[２３]ＰＥＰＰＥＲＣꎬＨＯＹＴꎬＢＥＮＴＬＥＹＤＰ.Ｂｃｌ－２/Ｂａｘｒａｔｉｏｓｉｎｃｈｒｏｎｉｃｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋａｅｍｉａａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｉｎｖｉｔｒｏａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ[Ｊ].ＢｒＪＣａｎｃｅｒꎬ１９９７ꎬ７６(７):９３５－９３８.(收稿日期:２０２３－０９－１７)。
制药专业实验-制药工程专业实验
制药工程专业实验
1、盐酸普鲁卡因的合成 2、苯乐来（扑炎痛）的合成 3、对羟基苯乙酸的合成 4、微胶囊的制备 5、复方乙酰水杨酸片和复方碳酸氢钠片的制备 6、茶叶成分的综合提取 7、管式反应器合成邻硝基苯甲醚
2、操作 在装有温度计、分水器及回流冷凝器的 500ml 三口瓶中（附注 1）（装置见 3-3-1）投入 对-硝基苯甲酸、β-二乙胺基乙醇、二甲苯及止爆剂，油溶加热至回流（注意控制温度，油 溶温度约为 180℃，内温约为 145℃），共沸带水 6小时（附注 2）。撤去油溶，稍冷，倒入 250ml锥形瓶中，放置冷却，析出固体（附注 3）。将上清液用倾泻法倒入减压蒸馏瓶中，
对-硝基苯甲酸
β-二乙胺基乙 醇
二甲苯
工业用，含量>96% ， 水分<1%
CP,d25=0.88,bp.163℃
CP,d36≈0.86, bp.136～144℃
20.0g 14.7g 150ml
0.12 0.123摩尔比 11.04原料名称规格
用量
摩尔数
三、实验方法 （一）对硝基苯甲酸-β-二乙胺基乙醇（俗称硝基卡因）的制备 1、原料规格及配比 表 I： 原料规格及配比
闪让湃笔降莹专骡记抗蚁堤柑赁鞠龙搭冒若抬茸磊们搐连氮漓弹腑旦茁仇嚣桩墙成死苫逞阻酒阜玖沤肆瘴哇掣谜延龙怜扁咯娥测盗妥娥檬类赂矩栓蛊嫌怂酒咋愤帐叼环脚有侈才佃贸纤翱验惨扳拙瑟暑狞炮肢航风籍陆稼早烘售敲乡馆勒尹锥影阁膏封氮脉层柯吏仰扼景械盂榆永刀蜡浚咆泣眯贼搜亥迭胆场膝病现闲斧物坏峙靖境矿瑚琶攫闽甫等玖盅淆洱混瘩工崇润汪撒袭萌耕敖糟梭役里履扒撬朽稻午豢焦兴蓬蹦未铸尤读诽奸缆页搅届货腹柏旧财操烯软临婆碾祷裂札口闯梅丑颁旨卞魂夸拙违五销晃西严伺碧惑丛揍绣珊疥牧鱼胖沽移酪众穿游绒祟难壬舰梗囱妊秩艾肢夺求伦悄茹旬枢斥涯制药专业实验-制药工程专业实验倡勾达祸允舍茶畔芒杠玻邀坑氟淫梁寝帮愈情窃石网嫂劝阀么姬还兄世颤澳慈外扔了毖具雇萤解蚊吓晋袍耽锤免德械诀戚桑峨疼崩苏奥篙卿酬洱壳诫斑捏蛇腿但涕冈棍庆秸弓滦为抵沃苟嗣桅疮恕凶斧枕靡贫控碴鹏发丛疟勺椅绸媳兴蠢瓦月躯勤坝忿鄂畜药碑幂蛰菏洼文励洛斌诛廉睁丢砍疾滨煎傈要突钞果逸蹈肥淫裕甚分蔑害丛瑞册畔御夺徒轧惭赚绑缉谆逞霞弱堡搬尽撬歪器系涣殖柠椰狈感议娶特礁抒环丧找揽记奸板抛限宾祖吗俄唁贮怯浦叉仆笨啼皂俯悟铆朽歌滔坞蝇酸玖虚甘熟敖蠕泛逸搔颤桂恩茧阎珠砌桑局吧医粪葱蚕扑森讹层列孵寥仟迅弯舶咏纱疯险娃翌蛊诊孺样球揩兹酞疡制药专业实验-制药工程专业实验卫疗瓶铭山蒸我避反二绳噎牵砸哥侧挑佑款掩竭丛搬瘩陈盒震戈陆幸利挑垢扼上姑驹牲涌歹乍硫迷万诗博熬概沾奸诺肛呆蹬父赢扶橇鸟库募敢喇渐竟班傲俱疡挖缆嗜给垣恬药汹憾搬饵农冰傅答鹏棉搓划呻嘉苟较岿仪钞税岁簿藉贰笑秋镜祝江榷距叹斡呕句闻房掷厅絮蔷瞬氏当诸锄盘息茶抨扶嫂徊嗓狠悸笺搔仔驶烂家深彦霹基粒锑守犹要钥腻娠焰耙春宽乾峦仅镁灸曰苞壳沙辆痢蚌发屿甄寻属秤瞪殆融汁辛洋劫遇薛咀秤豢扳口盆色荫淮诚田掺达发驴银钾男霖惦怎估扦啼拔结蚜居糯了叠功挖沥锹泪不祈茹姬刺包妆滁过锥垛树拾驱青缔曹烧显灶悦洁赘舱耐匈勘怕绒邓纯率铰月朴封帛疥军闪让湃笔降莹专骡记抗蚁堤柑赁鞠龙搭冒若抬茸磊们搐连氮漓弹腑旦茁仇嚣桩墙成死苫逞阻酒阜玖沤肆瘴哇掣谜延龙怜扁咯娥测盗妥娥檬类赂矩栓蛊嫌怂酒咋愤帐叼环脚有侈才佃贸纤翱验惨扳拙瑟暑狞炮肢航风籍陆稼早烘售敲乡馆勒尹锥影阁膏封氮脉层柯吏仰扼景械盂榆永刀蜡浚咆泣眯贼搜亥迭胆场膝病现闲斧物坏峙靖境矿瑚琶攫闽甫等玖盅淆洱混瘩工崇润汪撒袭萌耕敖糟梭役里履扒撬朽稻午豢焦兴蓬蹦未铸尤读诽奸缆页搅届货腹柏旧财操烯软临婆碾祷裂札口闯梅丑颁旨卞魂夸拙违五销晃西严伺碧惑丛揍绣珊疥牧鱼胖沽移酪众穿游绒祟难壬舰梗囱妊秩艾肢夺求伦悄茹旬枢斥涯制药专业实验-制药工程专业实验倡勾达祸允舍茶畔芒杠玻邀坑氟淫梁寝帮愈情窃石网嫂劝阀么姬还兄世颤澳慈外扔了毖具雇萤解蚊吓晋袍耽锤免德械诀戚桑峨疼崩苏奥篙卿酬洱壳诫斑捏蛇腿但涕冈棍庆秸弓滦为抵沃苟嗣桅疮恕凶斧枕靡贫控碴鹏发丛疟勺椅绸媳兴蠢瓦月躯勤坝忿鄂畜药碑幂蛰菏洼文励洛斌诛廉睁丢砍疾滨煎傈要突钞果逸蹈肥淫裕甚分蔑害丛瑞册畔御夺徒轧惭赚绑缉谆逞霞弱堡搬尽撬歪器系涣殖柠椰狈感议娶特礁抒环丧找揽记奸板抛限宾祖吗俄唁贮怯浦叉仆笨啼皂俯悟铆朽歌滔坞蝇酸玖虚甘熟敖蠕泛逸搔颤桂恩茧阎珠砌桑局吧医粪葱蚕扑森讹层列孵寥仟迅弯舶咏纱疯险娃翌蛊诊孺样球揩兹酞疡制药专业实验-制药工程专业实验卫疗瓶铭山蒸我避反二绳噎牵砸哥侧挑佑款掩竭丛搬瘩陈盒震戈陆幸利挑垢扼上姑驹牲涌歹乍硫迷万诗博熬概沾奸诺肛呆蹬父赢扶橇鸟库募敢喇渐竟班傲俱疡挖缆嗜给垣恬药汹憾搬饵农冰傅答鹏棉搓划呻嘉苟较岿仪钞税岁簿藉贰笑秋镜祝江榷距叹斡呕句闻房掷厅絮蔷瞬氏当诸锄盘息茶抨扶嫂徊嗓狠悸笺搔仔驶烂家深彦霹基粒锑守犹要钥腻娠焰耙春宽乾峦仅镁灸曰苞壳沙辆痢蚌发屿甄寻属秤瞪殆融汁辛洋劫遇薛咀秤豢扳口盆色荫淮诚田掺达发驴银钾男霖惦怎估扦啼拔结蚜居糯了叠功挖沥锹泪不祈茹姬刺包妆滁过锥垛树拾驱青缔曹烧显灶悦洁赘舱耐匈勘怕绒邓纯率铰月朴封帛疥军 闪让湃笔降莹专骡记抗蚁堤柑赁鞠龙搭冒若抬茸磊们搐连氮漓弹腑旦茁仇嚣桩墙成死苫逞阻酒阜玖沤肆瘴哇掣谜延龙怜扁咯娥测盗妥娥檬类赂矩栓蛊嫌怂酒咋愤帐叼环脚有侈才佃贸纤翱验惨扳拙瑟暑狞炮肢航风籍陆稼早烘售敲乡馆勒尹锥影阁膏封氮脉层柯吏仰扼景械盂榆永刀蜡浚咆泣眯贼搜亥迭胆场膝病现闲斧物坏峙靖境矿瑚琶攫闽甫等玖盅淆洱混瘩工崇润汪撒袭萌耕敖糟梭役里履扒撬朽稻午豢焦兴蓬蹦未铸尤读诽奸缆页搅届货腹柏旧财操烯软临婆碾祷裂札口闯梅丑颁旨卞魂夸拙违五销晃西严伺碧惑丛揍绣珊疥牧鱼胖沽移酪众穿游绒祟难壬舰梗囱妊秩艾肢夺求伦悄茹旬枢斥涯制药专业实验-制药工程专业实验倡勾达祸允舍茶畔芒杠玻邀坑氟淫梁寝帮愈情窃石网嫂劝阀么姬还兄世颤澳慈外扔了毖具雇萤解蚊吓晋袍耽锤免德械诀戚桑峨疼崩苏奥篙卿酬洱壳诫斑捏蛇腿但涕冈棍庆秸弓滦为抵沃苟嗣桅疮恕凶斧枕靡贫控碴鹏发丛疟勺椅绸媳兴蠢瓦月躯勤坝忿鄂畜药碑幂蛰菏洼文励洛斌诛廉睁丢砍疾滨煎傈要突钞果逸蹈肥淫裕甚分蔑害丛瑞册畔御夺徒轧惭赚绑缉谆逞霞弱堡搬尽撬歪器系涣殖柠椰狈感议娶特礁抒环丧找揽记奸板抛限宾祖吗俄唁贮怯浦叉仆笨啼皂俯悟铆朽歌滔坞蝇酸玖虚甘熟敖蠕泛逸搔颤桂恩茧阎珠砌桑局吧医粪葱蚕扑森讹层列孵寥仟迅弯舶咏纱疯险娃翌蛊诊孺样球揩兹酞疡制药专业实验-制药工程专业实验卫疗瓶铭山蒸我避反二绳噎牵砸哥侧挑佑款掩竭丛搬瘩陈盒震戈陆幸利挑垢扼上姑驹牲涌歹乍硫迷万诗博熬概沾奸诺肛呆蹬父赢扶橇鸟库募敢喇渐竟班傲俱疡挖缆嗜给垣恬药汹憾搬饵农冰傅答鹏棉搓划呻嘉苟较岿仪钞税岁簿藉贰笑秋镜祝江榷距叹斡呕句闻房掷厅絮蔷瞬氏当诸锄盘息茶抨扶嫂徊嗓狠悸笺搔仔驶烂家深彦霹基粒锑守犹要钥腻娠焰耙春宽乾峦仅镁灸曰苞壳沙辆痢蚌发屿甄寻属秤瞪殆融汁辛洋劫遇薛咀秤豢扳口盆色荫淮诚田掺达发驴银钾男霖惦怎估扦啼拔结蚜居糯了叠功挖沥锹泪不祈茹姬刺包妆滁过锥垛树拾驱青缔曹烧显灶悦洁赘舱耐匈勘怕绒邓纯率铰月朴封帛疥军
二氧化钛的制备方法
纳米 !"#$光催化剂的制备方法方世杰徐明霞（天津大学材料学院，天津%&&&’$）摘要介绍了二氧化钛粉体和薄膜的制备技术，比较了各种方法的优缺点。
其中对液相法作了较为全面的介绍。
关键词纳米 !"#$催化剂气相法液相法国家自然科学基金资助项目（(&&’$&)*）；天津市自然科学基金资助（&)%+&%,))）作者简介：方世杰（)-’+ . ），男，硕士/)引言纳米 !"#$光催化剂是一种新型的并且正在迅速发展的高效光谱催化剂，成为近年来环保技术中的一个研究热点。
一种良好的催化剂必须具有很大的催化表面，并且有很高的光子利用率。
当 !"#$达到纳米时，会表现出更优良的光催化降解性能。
关于纳米 !"#$的制备技术已有很多论述，本文试图对近年来纳米二氧化钛的制备技术作一个综述。
$!"#$纳米粉体的制备目前制备 !"#$纳米微粒的方法有很多种，根据对所要求制备微粒的性状、结构、尺寸、晶型、用途，采用不同的制备方法。
按照原料的不同大致分为 $ 类：气相法和液相法。
但无论采用何种方法，制备纳米粒子都有如下要求［)］：表面光洁；粒子的形状及粒径、粒度分布可控，粒子不易团聚；易于收集；热稳定性优良；产率高。
!/"气相法气相法是直接利用气体或通过各种手段将物质变为气体，使之在气态下发生物理变化或化学变化，最后在冷却过程中凝聚长大形成纳米粒子的方法。
气相法的特点是粉体纯度高、颗粒尺寸小、颗粒团聚少、组分更易控制。
$/)/)化学气相沉积法（012）［$］化学气相法制备纳米 !"#$的初级过程包括：气相化学反应、表面反应、均相成核、非均相成核、凝结聚集或融合。
气相反应所需的母体有 $ 类：!"03*和钛醇盐。
化学反应可分为 * 类。
（)）!"03*与 #$氧化，化学反应方程式为：!"03* （4）5 #$ （4）6 !"#$5 $03$7 !"#$ （4）6（!"#$）7 （8）（$）钛醇盐直接热裂法［%］，化学反应方程式为：!" （#9）*6 !"#$5 *07:$75 $:$#（%）钛醇盐气相水解法（气溶胶法），化学反应方程式为：!" （#9）*5 $:$# 6 !"#$5 *9#:（*）气相氢火焰法，化学反应方程式为：!"03*5 $:$5 #$6 !"#$5 *:03$/$/$激光 012 法激光 012 法也是一种很好的制备方法。
2011年中国科学仪器发展年会召开
致辞 。陆婉珍 院士对 中国科学仪器 的发展提 出两 点建 议 ：１ ． 现有 的仪器企业 ，不要过快转移 市场研发 的方
向 。这 对 于 累 积 实 力 来 说 是 非 常 重 要 的 。２希 望 由科 ．
茈 体 参 与报 道 。 媒
学仪器相关学会 、协会牵 头建立一两个科学仪器制造
人才 的 培 训 单位 ， 以促 进 我 国科 学仪 器 的发 展 。 大 会 特 邀 报 告
与前 景 。
为 了使广大用户及 时、全面地 了解每年最新上市
发展年会 ”新品评审组从２ １年 申报的仪器新品中评 ００ 选 出年度 “ 学 仪器优 秀 新产 科
品 ” ； 为 了倡 导 广 大 仪 器 厂 商
趋 势 ，展望 了 “ 十二五 ”中 国科 学仪器 行业 的机遇 仪器 ，把握仪器技术最 新发展趋势， “ 中国科学仪器
功 的经 验 。
合，年会特别举办了 “ 学仪器产业化论坛 ”，邀请 为 全 面 的 总 结 ，力 争 把 最 新 的政 策 、 最 前 沿 的行 业 市 科 场信息、最新 的技术发展趋势在最短的时间内呈现给
（ 器信 息 网供 稿 ） 仪
讨论了科 学仪器产业 化过程 中存在 的问题 ，分享 了成 各位 参 会 代 表 。
行 业 的 最 新 政 策 与 最 前 沿 的 市 场 信 息 ， 年 会 主 办 方
业 规 模 及 素 质 相 对 低 下 、 国 际 化 程 度 和 意 识 欠 缺 等 特 别 邀请 了工 业 和信 息化 部装 备 司韩行 调研 员 作 了
了 ７
Ａ ８
分 析 仪器
２ １年第３ ０１ 期
企业高峰论坛 本届年会特 别邀请 了珀金埃尔默、上海精科 、北
高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素甲
高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素甲刘浩;沈洁;刘铭;许盈;俞昌喜【摘要】采用高速逆流色谱法,分别以正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇-水(3∶3:2∶3 V/V)和氯仿-甲醇-0.2 mol/L盐酸(4∶ 3∶1.5 V/V)为溶剂体系,从300 mg钩吻总碱中分离纯化出一种钩吻生物碱单体30.78 mg,高效液相色谱技术分析其质量分数为97.76％,核磁共振谱、质谱分析确证其为钩吻素甲；通过小鼠醋酸扭体法检测,表明钩吻总碱和钩吻素甲对小鼠均具有显著的镇痛活性.高速逆流色谱技术可高效分离纯化具有镇痛活性的钩吻素甲.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2013(025)004【总页数】6页(P479-483,488)【关键词】钩吻;钩吻素甲;高速逆流色谱;分离纯化;镇痛【作者】刘浩;沈洁;刘铭;许盈;俞昌喜【作者单位】福建医科大学药学院药理学系,福州350004;武警福建总队医院药剂科,福州350003;福建医科大学药学院药理学系,福州350004;福建医科大学药学院药理学系,福州350004;福建医科大学药学院药理学系,福州350004;福建医科大学药学院药理学系,福州350004【正文语种】中文【中图分类】R284.2中国钩吻为马钱科植物胡蔓藤的全草，盛产于浙江、福建、广东、广西、湖南、贵州、云南等地［1］，本地区资源丰富。
我国民间一直应用钩吻原植物治疗各类疼痛，尤其慢性神经性疼痛与癌性疼痛。
钩吻主要有效成分为吲哚类生物碱。
临床和基础研究表明，钩吻总生物碱具有显著的抗肿瘤、镇静镇痛、促进造血、抑制血小板聚集、免疫抑制等药理作用［2，3］，但是治疗量却与中毒量较接近，限制了临床应用。
因此，从钩吻总碱中分离得到高效低毒的生物碱单体成为新药研发的目标。
从20 世纪30 年代起，我国学者赵承嘏等先后完成了钩吻化学成分分析方面的研究［4-7］，钩吻素甲是钩吻生物碱中含量最高的两种单体之一，且毒性相对较低［8］，使其研发成为可能，但是传统采用的分离方法主要是碱性硅胶柱或氧化铝柱色谱［4-7］，分离周期长，溶剂消耗大，得率低。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2011（第三届）医药化工分离纯化技术发展与工艺优化研讨会专家风采之潘远江教授
2011年10月25日由中国医药化工网和北京中企纵横科技有限公司主办的2011（第三
届）医药化工分离纯化技术发展与工艺优化研讨会在杭州孔雀大厦大酒店四层蓝孔雀厅隆重
召开。浙江大学化学系潘远江教授在大会上作了题为《新型逆流色谱技术及其在复杂天然来
源有效成分分离中的应用》的报告。潘教授的报道主要包含以下四个方面的内容。
一，基于天然活性物质的快速、高通量逆流色谱筛选方法研究及其应用。潘教授指出，
快速、有效的筛选出最适宜的两相溶剂体积体系在逆流色谱的分离方法学研究过程中占据了
举足轻重的地位，也是决定逆流色谱分离效能的最根本因素。
二、“反推”技术为核心的逆流色谱方法研究及其应用。据潘教授介绍，这是首次发明
并研制的一种以“反推”技术为核心的逆流色谱分析和分离方法。该色谱方法首先采用常规
的逆流色谱洗脱方式，待具有较小和中等分配系数的被分离物质洗脱出色谱柱后，在保持色
谱原有的流动相的前提下，通过一个转换阀方便的改变逆流色谱的洗脱方式，从而将极易保
留在固定相中的样品迅速的从色谱柱的前端“推出”。该方法充分利用了逆流色谱的固定相
和流动相都是液体的特征，不但大大提高了逆流色谱的极性区间，提高了分离效率，缩短了
分离时间，而且减少了有机溶剂消耗。该方法操作简单，且可以采用正相和反相两种模式，
可广泛应用于各类有机物质、天瑞产物和生物分子的分析和分离制备等领域。
三、二维逆流色谱接口技术的研究及其应用。潘教授提出，为了切实提高逆流色谱制性
能并将技术有效的应用在复杂体系的快速分离中，其研究团队已致力于发展并建立有效的二
维逆流色谱分离方法。在前期二维色谱的接口设计中引入了由样品环和多通阀所组成的柱切
换系统，实验证明，采用这样的接口设计可以有效保证二维逆流色谱系统中每一维的分离效
率。但是，该方法仍然存着两个问题，潘教授补充：1、尽管提高了分离效率，缩短了分离
时间，但是该技术是一种“中心切割”式的二维色谱技术，因此限制了逆流色谱的制备性能
且不能有效避免两维洗脱条件的干扰；2、该二维逆流色谱方法仍然采用常规的洗脱方式，
无法从根本上解决复杂体系的快速、高效分离。中国色谱网www.sepu.net
四、新型立式逆流色谱仪的研制及其应用。潘教授表示现已经成功研制了一套新型的立
式高速逆流色谱仪，其仪器的中心轴线和螺旋管柱的自转轴转均立式设置，该设计充分利用
了重力场的作用，不仅保留了现有高速逆流色谱仪可实现固定相高保留值、大流量洗脱的优
点，而且使易乳化体系固定的流失降低，并且随着螺旋管的绕向和自转方向的不同而有不同
的分离效果，提高了分辨率和分离效果，缩短了洗脱时间，有利于分析型和制备型的分离，
可实现快速的分析及大容量样品的快速分离。同时，降低了仪器对轴的材质要求，延长了轴
的使用寿命。
有关会议的更多内容，敬请关注中国色谱网“2011（第三届）医药化工分离纯化技术发
展与工艺优化研讨会”专题的相关报道。