细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的临床研究进展
PDZ结合激酶T-LAK细胞来源的蛋白激酶在恶性肿瘤中的作用机制研究进展
《癌症进展》2021年3月第19卷第5期ONCOLOGY PROGRESS,Mar2021V ol.19,No.5*综述*PDZ结合激酶/T-LAK细胞来源的蛋白激酶在恶性肿瘤中的作用机制研究进展△宋开蓉1,2，刘媛1,2，陈思璐1,2，杨永秀2,3#1兰州大学第一临床医学院，兰州7300002甘肃省妇科肿瘤重点实验室，兰州7300003兰州大学第一医院妇产科，兰州730000摘要摘要：：PDZ结合激酶/T-LAK细胞来源的蛋白激酶（PBK/TOPK）属于促分裂原活化的蛋白激酶（MAPKK）家族，是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在人类的多种正常组织中不表达或呈低表达，而在癌变后的组织细胞中呈高表达，通过激活多条细胞内信号转导通路，促进多种细胞因子的分泌，引起机体内一系列转录因子和肿瘤基因等的表达量发生变化，参与调节细胞的增殖，促进恶性肿瘤细胞的侵袭、迁移，甚至抵抗凋亡等，为恶性肿瘤的治疗提供了新靶点。
本文综述了PBK/TOPK在不同恶性肿瘤中的作用机制及其抑制剂作为抗肿瘤药物的研究进展。
关键词关键词：：PDZ结合激酶/T-LAK细胞来源的蛋白激酶；恶性肿瘤；抑制剂；抗肿瘤药物中图分类号中图分类号：：R730文献标志码文献标志码：：A doi：10.11877/j.issn.1672-1535.2021.19.05.051PBK/TOPK的发现Gaudet等[1]首次通过酵母双杂交技术筛选鉴定出一种可与果蝇肿瘤抑制蛋白DLG的人类同源物（the human homologue of the Drosophila Discs-large tumor suppressor protein，hDlg）分子PDZ结构域相结合的新型蛋白激酶，命名为PDZ结合激酶（PDZ binding kinase，PBK）。
经测序发现，其与Abe等[2]克隆并命名的淋巴细胞激活的杀伤T细胞源性蛋白激酶（T-LAK cell-originated protein ki-nase，TOPK）属于同一分子，故统称为PBK/ TOPK。
双阻断法细胞周期同步化问题分析
为什么要“双阻断”才能实现细胞周期同步化？
S
S
S
S
G1
G1
G1
G1
G2
G2
G2
G2
M
M
M
M
A
B
C
D
第一次：在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量TdR，S期细胞被抑制，其它细胞
继续运转并最后停在G1/S交界处。
不少于G2、M和G1期时间的总和
第二次：移去TdR，洗涤细胞并加入新鲜培养液、细胞又开始分裂，当释放时间_大_于__S_时， 所有细胞均脱离S期。再次加入过量TdR，细胞继续运转至G1/S交界处，被过量TdR抑 制而停止。 释放时间除了要求大于S期时长，还需要__不__大__于___G_2_、___M__和__G__1_期__时__间__的___总__和__
②A组的第二次检测统计结果是_细__胞__都__是__G_1_期__（__或__细__胞__都__是_G__1_/_S_交__界__）_______。
5. 研究人员为测定细胞周期时间长短，进行如下实验：用含3H-TdR（3H标记的胸腺 嘧啶脱氧核苷）的原料培养某动物细胞，数分钟至半小时后获得细胞群体甲；随后将 3H-TdR洗脱，转换至不含3H-TdR培养液并继续培养得到细胞群体乙。则细胞群体乙 ( B) A．所有细胞均被3H-TdR标记 B．最先进入M期的标记细胞是S期最晚期细胞 C．培养液缺乏氨基酸供应，细胞停在S期 D．培养液加秋水仙素，M期细胞比例减少
A.实验开始时细胞核中被标记的物质是DNA，标记的时期是M期 B.D点时标记细胞比例减少，表明最慢的标记细胞开始进入G2期 C.该细胞的细胞周期中S期占3小时 D.分裂期经历时间约为1h
3. 用含3H-TdR(标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)培养液培养海拉细胞适当时间，使所有细胞都
细胞周期依赖性激酶4_Cdk4_在肿瘤发生发展中的作用
一 个 有趣 的可能 性 , 有 待证 明 "
2
C dk 调控因子与肿瘤 4
C dk 在 细 胞 周 期 G l 期 的 演 进 中受 到 多 种 因 4 素 的调控 , 任何 因素 出现 失调 都 可 能导 致 肿瘤 的发 生 "比如 , 突 变 的 C dk4 基 因 可以 成为 遗传 性 黑 色素 瘤 主 要 的致 癌 基 因I. " 而 且 , 在 50 % 以上 的乳 腺 癌 ] l
n m tn a i or a t rol i t m or 罗n e i a d m et t i P en u i s sn s s a a s.
D C a cer T u n o m i r 罗 n e i M et t i! s s s s a a
C ycln 一 en den t k na e 4 (C d 4 ) C ycl i dep i s k n i
S 期 , 以确 保 遗 传 物 质可 以精 确 地 复 制 " G l 期 到 S 期 之 间 有 限制 点 , 确保 细胞 是 否 开 始 进 入新 一 轮 的
复制 " 限 制点 有 适 当 的调 控 机 制 , 以 保证 细 胞 保 持 正 常 的增 殖 水 平 , 防 止 细胞 过 量 增 殖 和肿 瘤 的 发 生 " 过 去 十 几年 许 多 的证 据 表 明 , 限制 点最 终 由 R b 家族 的 成 员调 控 , 包 括 :pR , p 10 和 p 13 1 " b 7 0 4 ]
期 ) , G Z (间 隙 阶段 2 和 M 期 (有 丝 分 裂 期 ) " 细 胞 )
细胞周期调控蛋白MPF的研究
与cdc2类似的CDK蛋白分子图解
细胞中还具有细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 （CDK inhibitor，CDKI）对细胞周期起负调控作用，目前 发现的CDKI分为两大家族：
①Ink4(Inhibitor of cdk 4)，如:P16ink4a、P15ink4b、 P18ink4c、P19ink4d，特异性抑制cdk4·cyclin D1、 cdk6·cyclin D1复合物。
②CIP/Kip(Kinase inhibition protein)：包括P21cip/waf1 (cyclin inhibition protein 1)、P27kip1(kinase inhibition protein 1)、P57kip2等，能抑制大多数CDK的激酶活性， P21cip/waf1还能与DNA聚合酶δ的辅助因子PCNA （proliferating cell nuclear antigen）结合，直接抑制 DNA的合成。
2. MPF可以催化核纤层蛋白（lamin）磷酸化，导 致核纤层解体。
3. MPF能使necleolin(核仁蛋白)磷酸化，可能对于M 期核仁分解以及染色体凝集有重要作用。
4. MPF能使一些原癌基因蛋白产物发生磷酸化，由 此产生一系列深远的与细胞分裂有关的生物学效应。 如使c-myc 基因产物磷酸化，可能降低这些蛋白在M 期与DNA的结合能力，利于染色体凝集。此外，还 能使P53、P105 RB等蛋白磷酸化，产生一系列有关 的生理效应。
2 蛋白质的合成与降解 P34cdc2蛋白在细胞周期中的含量相对稳
定．而周期蛋白B的含量则呈现周期性变化。 p34cdc2蛋白只有与周期蛋白B结合后才有可能 表现出激酶活性。因而，P34cdc2激酶活性首先 依赖于周期蛋白B含量的积累。细胞周期运转 到分裂中期后，M期周期蛋白A和B将迅速降解， P34cdc2激酶活性丧失。周期蛋白A和B的降解 是通过泛素化途径(ubiquitina-tion pathway)来 实现的。
细胞周期抑制剂P27与胃癌
细胞周期抑制剂P27与胃癌马振滨郭光红高志星【关键词】细胞【关键词】细胞周期抑制剂；P２７；胃癌细胞周期(cell cycle)是细胞生命活动的大体进程，细胞的增生、割裂、变形、凋亡和坏死等生理或病理进程都发生在它所处的细胞周期的某一时相；假设细胞周期的某一时相显现异样，细胞将进入与之相关的病理进程。
细胞周期受体内外多种因子、多层次调控。
而细胞周期调控与肿瘤的发生、进展的关系紧密。
调控细胞增殖和分化的因素有多种，要紧有细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依托性激酶(cyclin dependent kinases,CDK)、细胞周期蛋白依托性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor,CDKI)。
Ｐ２７是一种新发觉的非特异性的周期素依托酶抑制剂，对肿瘤细胞的增殖有重要的调控作用，与肿瘤的发生、进展紧密相关，已成为最近几年来研究的一个热点。
１P27的基因、蛋白结构特点P27基因定位于第12号染色体短臂１区3带(12ｐ１３），含有两个有编码功能的外显子和一个无功能的外显子及一个内含子。
P27是由Polyak等［１］1994年在转化生长因子-β（ＴＧＦ-β）和细胞接触抑制致使的静息细胞Mvilu提取物中发觉的，是相对分子质量为27000的热稳固蛋白，能与cyclinE-ＣＤＫ２、cyclinD-ＣＤＫ４及ｃｙｃｌｉｎＤ-ＣＤＫ６结合，并发挥其激酶抑制作用。
人类的P27蛋白氨基酸顺序与鼠和貂的P27蛋白氨基酸顺序存在98%的同源性；P27ｃＤＮＡ长594ｂｐ，编码198个氨基酸，在N-结尾与同家族中P２１蛋白具有42%同源性，与P57具有47%的同源性，这一区域具有两个Ser磷酸化位点，介导CDKs激酶活性的抑制，近C-端有一个双枝核定位信号，C-结尾有一个Thr磷酸化点。
与H1组蛋白磷酸化抑制作用有关。
２P27与细胞周期调控２．１P27蛋白具有负性调剂细胞周期、抑制细胞增殖的作用在正常情形下，P27蛋白在G０／Ｇ１期时表达增高，当细胞进入S期时那么表达下降。
CDKs(细胞周期依赖性蛋白激酶)调控细胞周期中的作用
ＧＡＯ ｉ Ｌｅ ，ＳＨＩＹｏ — ｈ ｎ ｕ ｚ ｅ ，ＲＥＮ Ｙｕ— ｎｇ ｈｏ ，ＦＡＮ ｉｗｅ ，Ｗ ＡＮＧ —ｏ Ｒｕ ． ｎ Ａｉｒ ｎｇ
（． ｏｌ ｅｏ ｎｍａ ｃ ｎｅａ ｄＶｔｒ ａｙＭｅｉｎ ，Ｓ ａｘ ｇｉ ｌ ｒｌＵ ｉ ｒｔ， 】 Ｃ ｌｇ ｅ ｆＡ ｉ ｌ ｉ ｃ ｎ ｅ ｉ ｒ ｄｃ ｅ ｈ ｎｉ ｒ ｕｔ ａ ｎｖ ｓｙ Ｓｅ ｅｎ ｉ Ａ ｃ ｕ ｅｉ
因素是 细胞 周期 依赖 性蛋 白激酶 （ ｙｌ ｃｃｉ ｎ～ｄｐ ｎ ｅｔ ｅ ｅｄ ｎ ｋｎ ｓｓ Ｃ Ｋ ） 它 属 于 丝 氨 酸／ 氨 酸 蛋 白激 酶 家 ｉａｅ ， Ｄ ｓ ， 苏
族， 可在 特定 的 细胞周 期 变化 过程 中被激 活 ， 之后 产 生 出磷 酸化 相 应 的底 物 ， Ｃ Ｋ 功 能 的 实 现 还 依 而 Ｄ ｓ
自１ 纪 ８ ９世 ０年 代 以来 ， 胞 生 物学 界 发 现 了 细
细胞分 裂 现象 ，９ １ ， 出完 整 的 细胞 周 期 概 念 ， １５ 年 提
到２ ０世 纪 ７ ０年 代 发 现 调 控 细 胞 周 期 的 因子 。而 今， 人们 已总结 出调 控 细 胞 周 期 的相关 机制 。细 胞 周期 是 细胞 生命 活 动 的基 本 过 程 ， 指 细 胞 从 一 次 是
并移 向两 极 （ 后期 ） 子 核形 成 和胞 质 分裂 （ 期 ） ； 末 。
有 丝分 裂结 束到 下 一 次 有 丝 分 裂 结 束 的 这 一 过 程 ，
此 时 由一个 细胞 分 裂成 为两 个子 细胞 。细胞 分 裂包
括 Ｄ Ａ复制及 染 色体 分 离 。细 胞 周期 调 控 的 关 键 Ｎ
复制 。
时相 性地 激 活 Ｃ Ｋ ， Ｃ Ｋ Ｄ ｓ 而 Ｄ ｓ的时 相性 激 活是 细 胞
cdk6分子量
cdk6分子量摘要：1.CDK6分子的基本概念2.CDK6分子的功能与作用3.CDK6分子在生物学研究中的应用4.CDK6分子的研究进展与展望正文：CDK6是一种蛋白质分子，它的全称是周期蛋白依赖性激酶6（Cyclin-dependent kinase 6）。
在生物体内，CDK6作为一种重要的信号传导分子，参与到细胞周期的调控、细胞分裂、基因表达调控等多个生物学过程中。
本文将简要介绍CDK6分子的基本概念、功能与作用，以及在生物学研究中的应用，并展望CDK6分子的研究进展。
CDK6分子的基本概念CDK6是周期蛋白依赖性激酶（CDK）家族的一员，这个家族包括CDK1、CDK2、CDK4、CDK6等成员。
CDK6分子由约300个氨基酸组成，具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性。
在细胞周期的调控中，CDK6与周期蛋白（Cyclin）结合，形成CDK-Cyclin复合物，进而调控细胞周期的进展。
CDK6分子的功能与作用CDK6主要参与到细胞周期的G1期和S期的调控。
在G1期，CDK6与Cyclin D结合，促进细胞进入S期；在S期，CDK6与Cyclin E结合，调控DNA合成和染色体复制。
此外，CDK6还具有以下功能：1.参与细胞骨架重构：CDK6与细胞骨架蛋白相互作用，调控细胞形态和迁移。
2.调控免疫细胞功能：CDK6在免疫细胞中表达，影响免疫细胞的分化和活化。
3.参与肿瘤发生与发展：CDK6在许多肿瘤中高表达，与肿瘤的发生和发展密切相关。
CDK6分子在生物学研究中的应用1.细胞周期研究：CDK6作为细胞周期的关键调控分子，可用于研究细胞周期的调控机制和相关疾病的发生发展。
2.肿瘤研究：CDK6在肿瘤中的重要作用使其成为抗肿瘤药物研究的靶点。
3.免疫学研究：CDK6在免疫细胞中的功能使其成为免疫调控研究的重要分子。
4.神经生物学研究：CDK6在神经元中的表达和作用，使其成为神经生物学研究的热点。
CDK6分子的研究进展与展望近年来，CDK6分子的研究取得了丰硕的成果，但仍有许多问题亟待解决。
CDK4 6抑制剂治疗HR阳性HER-2阴性乳腺癌临床应用专家共识(2023版)解读PPT课件
实践应用
多学科协作在CDK4/6抑制剂治疗中发挥重要作用。例如 ，基因组学分析可以帮助确定患者的基因突变情况，从 而指导用药选择；药理学研究有助于优化药物剂量和给 药方案，减少毒副作用；肿瘤学专家则负责监测病情变 化和评估治疗效果。通过多学科协作，可以为患者提供 更加精准、个性化的治疗方案，提高治疗效果和生活质 量。
前景预测
随着对CDK抑制剂研究的深入，未来有望开 发出更加高效、低毒的新药。这些药物将针 对不同亚型的乳腺癌患者提供更加个性化的 治疗方案，进一步提高治疗效果和生活质量 。
多学科协作提高CDK4/6抑制剂治疗效果
协作模式
多学科协作涉及肿瘤学、药理学、基因组学等多个领域 专家的共同参与。通过建立多学科诊疗团队，可以实现 患者病情的全面评估和治疗方案的优化。
不同药物在疗效上存在一定差异，但 总体来说，CDK4/6抑制剂的疗效相 似，且均能够显著改善患者的PFS和 OS。
03
安全性评价
CDK4/6抑制剂的安全性较好，常见 的不良反应包括中性粒细胞减少、感 染、疲乏等，但大多数为轻至中度， 且可通过剂量调整或暂停用药等方式 进行管理。
特殊人群用药建议及注意事项
CDK4/6抑制剂在不同治疗阶段的适用性
初始治疗阶段
对于新诊断的HR阳性HER-2 阴性乳腺癌患者，CDK4/6抑 制剂联合内分泌治疗可以作为
初始治疗方案。
辅助治疗阶段
在手术和放疗后，CDK4/6抑 制剂联合内分泌治疗可以作为 辅助治疗手段，降低复发风险
。
晚期治疗阶段
对于已经出现复发或转移的 HR阳性HER-2阴性乳腺癌患 者，CDK4/6抑制剂联合内分 泌治疗可以作为晚期治疗方案
CDK4和CDK6作为直接靶点，与抑制剂 结合后抑制其激酶活性。
细胞分裂周期蛋白14生物学功能的研究进展
细胞分裂周期蛋白14生物学功能的研究进展刘儒;谢基明;孟峻【摘要】细胞分裂周期蛋白14(Cdc14)属于高度保守的丝、苏氨酸双特异性磷酸酶家族,能够下调周期素依赖性激酶(CDK)的活性,是重要的细胞周期调节蛋白,在真核生物细胞中广泛表达.Cdc14在不同的真核细胞中生物学功能相差甚远.在出芽酵母细胞中,Cdc14通过逆转CDK的活性,进而调节出芽酵母细胞有丝分裂退出网络;在裂殖酵母细胞中,Cdc14的同源物多聚腺苷酸因子Clp1对于裂殖酵母细胞有丝分裂的退出无明显影响;在人类细胞中,Cdc14的同源物人类Cdc14A(hCdc14A)可使CDK失活,控制有丝分裂的时间.基于国内外对Cdc14的研究成果,现针对Cdc14在出芽酵母细胞、非洲裂殖酵母细胞、秀丽隐杆线虫细胞、非洲爪蟾细胞、鸟类细胞、小鼠卵母细胞和人类细胞7种不同真核生物细胞中的分型、定位及其生物学功能等进行综述,为Cdc14的研究提供参考.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2019(045)004【总页数】5页(P960-964)【关键词】有丝分裂;细胞分裂周期蛋白14;减数分裂;出芽酶酵母细胞;周期素依赖性激酶【作者】刘儒;谢基明;孟峻【作者单位】内蒙古医科大学附属医院检验科,内蒙古呼和浩特 010050;内蒙古自治区人民医院检验科,内蒙古呼和浩特010017;内蒙古医科大学附属医院检验科,内蒙古呼和浩特 010050【正文语种】中文【中图分类】Q253有丝分裂细胞周期分为G1期(DNA合成前期)、S期(DNA合成期)、G2期(DNA 合成后期)和M期(有丝分裂期)[1]。
细胞周期的精准调控需要依靠一系列的调控分子来实现，细胞分裂周期蛋白14(cell division cycle protein 14，Cdc14)最早由Hartwell利用出芽酵母温度敏感突变株鉴定得到的，该基因调控出芽酵母细胞周期，可以逆转周期素依赖性激酶(cyclin dependant kinase，CDK)活性，在出芽酵母有丝分裂退出网络中起关键作用[2-4]。
细胞周期调控对肿瘤治疗的影响
细胞周期调控对肿瘤治疗的影响在人类与疾病的漫长斗争史中，肿瘤一直是一座难以攻克的堡垒。
随着对细胞生物学的深入研究，人们逐渐认识到细胞周期调控在肿瘤发生发展中的关键作用，这也为肿瘤治疗带来了新的希望和策略。
细胞周期是一个高度有序且受到精密调控的过程，它确保细胞能够准确地进行分裂和增殖。
细胞周期包括 G1 期（Gap 1，细胞生长和准备合成 DNA）、S 期（Synthesis，DNA 合成）、G2 期（Gap 2，细胞准备进入有丝分裂）和 M 期（Mitosis，细胞分裂）。
在这个过程中，一系列的调控因子和检查点发挥着重要作用，它们就像是细胞周期的“交通信号灯”，确保细胞周期的顺利进行，并防止错误的发生。
当细胞周期调控出现异常时，肿瘤就有可能发生。
例如，某些促进细胞增殖的信号通路过度激活，或者抑制细胞增殖的机制失效，都可能导致细胞不受控制地分裂和生长，最终形成肿瘤。
细胞周期调控中的关键因子包括细胞周期蛋白（Cyclins）和细胞周期蛋白依赖性激酶（Cyclindependent kinases，CDKs）。
细胞周期蛋白的水平在细胞周期中会发生周期性的变化，它们与相应的 CDKs 结合形成复合物，从而推动细胞周期的进程。
例如，Cyclin D 与 CDK4/6 复合物在 G1 期发挥重要作用，促进细胞从 G1 期进入 S 期。
如果 Cyclin D 或 CDK4/6 过度表达或异常激活，就可能导致细胞过度增殖，增加肿瘤发生的风险。
此外，细胞周期检查点也是细胞周期调控的重要组成部分。
检查点的作用是监测细胞周期进程中的关键事件，如 DNA 复制的完整性、染色体的正确分离等。
如果发现问题，检查点会阻止细胞周期的继续进行，给细胞足够的时间来修复损伤或启动凋亡程序。
在肿瘤细胞中，检查点机制常常被破坏，使得细胞能够在存在 DNA 损伤等问题的情况下继续分裂，从而促进肿瘤的生长和扩散。
基于细胞周期调控的这些特点，科学家们开发了一系列针对肿瘤治疗的策略。