肉苁蓉药材质量标准(2020版药典)
2020版药典标准

2020版药典标准2020版药典标准是针对药品的质量标准和规范,由中国药典编辑委员会负责制定和发布。
本文将介绍2020版药典标准的背景、编制过程、主要内容和应用价值。
背景中国药典作为法定的药品质量标准,对保障药品质量和人民健康具有重要意义。
2020版药典标准的编制是基于对新药、现有药品和药品物质的全面审查和更新,旨在适应时代发展和国内外药品标准的变化,不断提高标准的科学性、严谨性和权威性。
编制过程2020版药典标准的编制经历了多个阶段,包括药品审评审批、文献研究、标准起草、标准讨论、公开征求意见、修订和最后的审定。
这一过程中,药物审评专家、药品质量监督管理部门、科研机构和相关行业协会等都参与其中,确保标准的科学性和可操作性。
主要内容2020版药典标准的主要内容包括药品通用品种的质量要求、药品物质的质量评价、制剂的性状、药效学和质量控制等。
标准针对不同药品的特性和用途,制定了相应的检测方法、质量指标和审查要求,以保证药品的质量和安全性。
具体而言,2020版药典标准对于药品通用品种的质量要求包括了理化性质、纯度、含量和微生物限度等方面的要求。
对于药品物质的质量评价,标准规定了化学和物理性质、纯度和指纹图谱等方面的要求,以确保药品物质符合规定的质量标准。
此外,2020版药典标准还对制剂的性状、药效学和质量控制进行了详细规定。
其中,制剂的性状要求包括外观、溶解性和比容等方面的要求;药效学要求包括药物的溶出度、体外释放度和生物等效性等方面的要求;质量控制要求包括药品的生产工艺、贮存条件、质量控制标准和稳定性等方面的要求。
应用价值2020版药典标准作为我国权威的药品质量标准,具有重要的应用价值。
首先,药品生产企业可以依据药典标准,确保药品质量符合规定,提高生产工艺和质量控制水平,降低药品质量风险。
其次,药品监管部门可以依据药典标准进行药品质量的监督和检查,保障人民群众用药的安全和有效性。
同时,药典标准还可以为药学研究人员提供参考,推动药物研发和创新。
《中国药典》中药材标准问题商榷

《中国药典》中药材标准问题商榷摘要:《中国药典》(2020年版)一部是判断中药材中药饮片真伪优劣的法定依据,其标准制定的科学性,可行性至关重要,在执行《中国药典》的过程中发现有些中药材的标准存在一些问题,造成执行困难,故提出改进意见,供商榷。
关键词:中国药典;中药材;来源描述、性状描述、显微描述、炮制描述我们按照《中华人民共和国药典》2020年版一部(以下简称《中国药典》)进行中药材、中药饮片质量检验时,发现标准规定的鉴别方法存在一些问题。
现将发现的问题和建议分述如下。
一、《中国药典》中药材对性状项描述有缺失或不够严谨。
1.1肉豆蔻性状描述……表面灰棕色或灰黄色,有时外被白粉(石灰粉末) ……现在加工已经不是石灰粉了。
建议修改为:……表面灰棕色或灰黄色……1.2白芷性状描述……直径1.5~2.5cm。
……根据拉丁学名查得中国植物志[1]……径3~5厘米,……建议修改为:……直径1.5~5cm。
……1.3益母草性状描述……花前期茎呈方柱形;上部叶羽状深裂或浅裂成3片,裂片全缘或具少数锯齿。
查得中国植物志[1]……茎直立,….钝四棱形,……茎下部叶….掌状3裂,…..茎中部叶轮廓为菱形,较小,通常分裂成3个或偶有多个长圆状线形的裂片,……建议修改为:茎呈方柱形;茎上部叶三浅裂至不裂而呈长披针状。
1.4荔枝核性状描述……长1.5~2.2cm,直径1~1.5cm……查得中国植物志[1]……卵圆形至近球形,长2~3.5厘米……建议修改为:……长2~3.5cm,直径1~1.5cm……1.5三白草性状描述……蒴果近球形。
……查得中国植物志[1]……果实分裂为3~4分果爿……建议修改为:……果实分裂为3~4分果爿……1.6川木通(小木通)性状描述……长圆柱形,略扭曲,长50~ 100cm,直径2~3.5cm……查得中华本草[2]小木通圆柱形,长短不一,直径般为0.5~2.5cm。
表面棕黄色或黄褐……建议修改为:……长圆柱形,略扭曲,长50~ 100cm,直径0.5~3.5cm……1.7款冬花性状描述……外面被有……苞片。
肉苁蓉标准汤剂质量研究

〔3〕王怀湘 依那普利的临床应用进展〔J〕 现代应用药学,1994,(4):52 53〔4〕MedzikovicL,AryanL,EghbaliM Connectingsexdifferences,estrogensignaling,andmicroRNAsincardiacfibrosis〔J〕 Journalofmolec ularmedicine(Berlin,Germany),2019,97(10):1385 1398 〔5〕易鲛隆,李伟,罗振华,等 TGF β1和CTGF与慢性心力衰竭心肌纤维化的研究进展〔J〕 现代诊断与治疗,2019,30(12):2002 2004〔6〕郑海清,应苗法,顾胜龙,等 心肌纤维化的信号转导机制及新型抑制剂的研究进展〔J〕 中国细胞生物学学报,2019,41(02):268 274〔7〕MiyazawaK,MiyazonoK RegulationofTGF βFamilySignalingbyIn hibitorySmads〔J〕 ColdSpringHarbPerspectBiol,2017,9(3):a022095〔8〕WangB,OmarA,AngelovskaT,etal RegulationofcollagensynthesisbyinhibitorySmad7incardiacmyofibroblasts〔J〕 AmJPhysiolHeartCircPhysiol,2007,293(2):1282 1290·中药与天然药物·肉苁蓉标准汤剂质量研究梁渐崧1,2,4,潘英杰2,4,陈紫颖2,4,张 英1,3,吴孟华1,3,曹 晖1,3,马志国1,3 (1 暨南大学药学院,广东广州510632;2 广东一方制药有限公司,广东佛山528244;3 暨南大学岭南传统中药研究中心,广东广州510632;4 广东省中药配方颗粒企业重点实验室,广东佛山528244)摘要:目的 制备肉苁蓉标准汤剂并为其质量控制提供可靠方法。
c004-肉苁蓉质量标准及内控标准-推荐下载

瓜州鑫诺甘草生态种植加工有限责任公司GMP管理文件文件名称肉苁蓉内控质量标准页数:4文件编号TS/ZL/c004/00执行日期:2010.09.28制订人:张燕部门审阅:质管部QA 审阅:包建国批准人:谭彦斌制订日期:2010.09.18审阅日期:2010.09.20审阅日期:批准日期:2010.09.282010.09.23共份分发:制定依据《中国药典》2010年版一部变更记录:变更原因及目的:修订号:批准日期:执行日期:目的:制定肉苁蓉的质量标准,确定产品生产、采购、质控依据。
范围:肉苁蓉质量标准及内控标准。
责任人:业务部采购人员、验收人员、生产人员、质管部检验人员使用该标准,质管部有制定、修订及监督实施的责任。
1、内容:1、品名:肉苁蓉来源及药用部位:本品为列当科植物肉苁蓉Cistanthedeserticala.Y.C.ma或管花肉苁蓉Cistanche tubulosa(Schrenk)Wight的干燥带鳞叶的肉质茎。
春季苗刚出土时或秋季冻土之前采挖,除去茎尖。
切段,晒干。
2、性状:肉苁蓉呈扁圆柱形,稍弯曲。
长3~15cm,直径2~8crn.表面棕褐色或灰棕色,密被覆瓦状排列的肉质鳞叶,通常鳞叶先端已断体重,质硬,微有柔性不易折断,断面棕褐色,有淡棕色点状维管束,排列成波状环纹.气微,味甜、微苦。
管花肉苁蓉呈类纺锤形、扁纺锤形或扁柱形,稍弯曲,长5~25cm,直径2.5~9cm表面棕褐色至黑褐色。
断面颗粒状,灰棕色至灰褐色,散生点状维管束。
3、鉴别取本品粉末lg,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至近干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。
另取松果菊苷对照品、毛蕊花糖苷对照晶,加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(附录VI B)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一聚酰胺薄层板上,以甲醇—醋酸—水(2:l:7)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。
肉苁蓉不同提取部位对db

㊀基金项目:国家中医药管理局-重点实验室研究领域的中医临床疗效提升项目(No.2100222179)ꎻ国家自然科学基金(No.81874345)ꎻ辽宁省自然科学基金-资助面上项目(No.2022-MS-223)作者简介:程世赞ꎬ女ꎬ硕士生ꎬ研究方向:中药炮制学ꎬE-mail:1376324304@qq.com通信作者:史辑ꎬ女ꎬ博士ꎬ教授ꎬ博士生导师ꎬ研究方向:中药炮制化学ꎬTel:0411-85890157ꎬE-mail:lnshiji@163.com肉苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖作用程世赞1ꎬ廉婧1ꎬ聂紫璇1ꎬ苏国明1ꎬ常源1ꎬ史辑1ꎬ2ꎬ贾天柱1ꎬ2(1.辽宁中医药大学药学院ꎬ辽宁大连116600ꎻ2.辽宁省中药炮制技术产业创新中心ꎬ辽宁大连116600)摘要:目的㊀探讨肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖的作用及机制ꎮ方法㊀富集肉苁蓉和酒苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷部分ꎬ对其含量进行了比较分析ꎮ选用db/db小黑鼠为实验动物ꎬ给药28d后ꎬ记录小黑鼠体重㊁进食量㊁饮水量ꎬ检测血糖ꎬ采用ELISA检测血清胰岛素(INS)㊁糖化血红蛋白(HbA1c)ꎬ肝脏甘油三酯(TG)㊁总胆固醇(TC)㊁低密度脂蛋白(LDL-C)㊁高密度脂蛋白(HDL-C)㊁丙二醛(MDA)㊁超氧化物歧化酶(SOD)ꎬ血浆和尿液中尿酸(UA)㊁肌酐(Cr)以及尿微量白蛋白(mALB)水平ꎻHE染色方法制备胰腺和肾脏组织病理切片ꎻIHC测定肾脏type-IVcollagen蛋白表达水平ꎮ结果㊀肉苁蓉多糖部位经过酒蒸后含量下降ꎬ肉苁蓉寡糖部位中的甜菜碱经过酒蒸后含量增加ꎬ总苷类成分酒蒸后松果菊苷的含量稍有下降ꎬ毛蕊花糖苷含量下降ꎬ异类叶升麻苷含量上升ꎮ与模型组相比ꎬ肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位能降低体重㊁空腹血糖(FBG)㊁口服葡萄糖耐量(OGTT)㊁HbA1c㊁胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)㊁胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)㊁MDA㊁LDL-C㊁UA㊁Cr以及mALBꎬINS和HDL-C有上升趋势(P<0.05ꎬP<0.01)ꎬ且能改善胰腺和肾脏的病理损伤以及type-IVcollagen的表达ꎮ结论㊀肉苁蓉和酒苁蓉总苷组降血糖作用较好ꎬ酒苁蓉多糖和寡糖也有一定的降血糖作用ꎮ关键词:肉苁蓉ꎻ总多糖ꎻ总寡糖ꎻ总苷ꎻdb/db小黑鼠ꎻ降血糖中图分类号:R285.5㊀文献标志码:A㊀文章编号:2095-5375(2024)01-0006-009doi:10.13506/j.cnki.jpr.2024.01.002HypoglycemiceffectofdifferentextractsofCistanchedeserticolaondb/dbmiceCHENGShizan1ꎬLIANJing1ꎬNIEZixuan1ꎬSUGuoming1ꎬCHANGYuan1ꎬSHIJi1ꎬ2ꎬJIATianzhu1ꎬ2(1.SchoolofPharmacyꎬLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicineꎬDalian116600ꎬChinaꎻ2.LiaoningTCMProcessingEngineeringTechnologyResearchCenterꎬDalian116600ꎬChina)Abstract:Objective㊀ToexplorethehypoglycemiceffectandmechanismofdifferentextractsofCistanchedeserticolaandprocessedC.deserticolaondb/dbmice.Methods㊀ThetotalpolysaccharidesꎬtotaloligosaccharidesandtotalglycosidesofC.deserticolaandprocessedC.deserticolawereenrichedꎬandtheircontentswerecomparedandanalyzed.Selectdb/dbmiceasexperimentalanimals.After28daysofadministrationꎬrecordthebodyweightꎬfoodintakeꎬwaterconsumptionꎬbloodglucoseꎬseruminsulin(INS)ꎬglycosylatedhemoglobin(HbA1c)ꎬlivertriglyceride(TG)ꎬtotalcholesterol(TC)ꎬlowdensitylipoprotein(LDL-C)ꎬhighdensitylipoprotein(HDL-C)ꎬmalondialdehyde(MDA)ꎬsuperoxidedismutase(SOD)ꎬuricacid(UA)inplasmaandurinecreatinine(Cr)andurinarymicroalbumin(mALB)levelsꎻPathologicalsectionsofpancreasandkidneywerepreparedbyHEstainingꎻTheexpressionleveloftype-IVcollagenproteininkidneywasdeterminedbyimmu ̄nohistochemistry.Results㊀ThecontentofpolysaccharideinC.deserticoladecreasedafterwinesteamingꎬthecontentofbeta ̄ineinthepolysaccharideinC.deserticolaincreasedafterwinesteamingꎬthecontentoftotalglycosidesdecreasedslightlyaf ̄terwinesteamingꎬthecontentofverbascosidedecreasedꎬandthecontentofisoacteosideincreased.Comparedwiththemodelgroupꎬthefastingbloodglucose(FBG)ꎬoralglucosetolerance(OGTT)ꎬHbA1cꎬinsulinresistanceindex(HOMA-IR)ꎬHO ̄MA-βꎬMDAꎬLDL-CꎬUAꎬCrandmALBinthedifferentextractsofC.deserticolaandprocessedC.deserticolaweresignifi ̄cantlydecreasedꎬINSandHDL-Cshowedanupwardtrend(P<0.05ꎬP<0.01)ꎬandcanimprovepathologicaldamagetothepancreasandkidneysꎬaswellastheexpressionoftype-IVcollagen.Conclusion㊀ThetotalglycosidesofC.deserticolaandprocessedC.deserticolahavebetterhypoglycemiceffectsꎬwhilepolysaccharidesandoligosaccharidesofprocessedC.deserti ̄colaalsohavecertainhypoglycemiceffects.Keywords:C.deserticolaꎻTotalpolysaccharideꎻTotaloligosaccharideꎻTotalglycosidesꎻdb/dbmiceꎻHypoglycemic㊀㊀肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉或管花肉苁蓉的干燥带鳞叶的肉质茎ꎮ春季苗刚出土时或秋季冻土之前采挖ꎬ除去茎尖ꎬ切段ꎬ晒干[1]ꎮ肉苁蓉具有补肾阳㊁益精血㊁润肠通便的功效ꎬ临床上多用于肾阳不足㊁精血亏虚㊁阳痿不孕㊁腰膝酸软㊁筋骨无力㊁肠燥便秘等ꎮ肉苁蓉的药理作用包括抗衰老㊁抗氧化㊁抗痴呆㊁抗疲劳以及润肠通便等[2-3]ꎮ肉苁蓉主要成分有苯乙醇苷类㊁环烯醚萜苷类㊁多糖等ꎬ其中苯乙醇苷类㊁多糖类成分为主要药效物质[4]ꎮ现代的药理研究表明ꎬ肉苁蓉多糖具有调节免疫活性㊁抗衰老㊁改善学习记忆能力㊁保护神经㊁抗肝损伤㊁抗病毒㊁抗肿瘤㊁影响肠道菌群等诸多药理作用[5]ꎮ肉苁蓉总苷具有滋补肝肾㊁益精血㊁抗氧化㊁抗衰老㊁免疫增强和神经保护作用[6]ꎮ«中国药典»2020年版(一部)收载有肉苁蓉片和酒苁蓉两个炮制品种ꎬ课题组前期研究发现ꎬ生品肉苁蓉偏于润肠通便ꎬ酒苁蓉补肾助阳作用明显增强ꎮ肉苁蓉总苷和总多糖为补肾阳的有效部位ꎬ肉苁蓉寡糖类成分为其润肠通便的有效部位[7]ꎮ肉苁蓉酒蒸过程中ꎬ苯乙醇苷类成分发生较大的变化ꎬ毛蕊花糖苷含量下降ꎬ而其同分异构体异毛蕊花糖苷含量明显增加[8]ꎮ2型糖尿病是由胰岛素抵抗ꎬ伴随胰岛β细胞结构和功能性损伤ꎬ继而导致胰岛素分泌不足ꎬ以血糖升高为主要特征的代谢疾病[9]ꎮ中医认为糖尿病往往与肾精有关ꎬ肾藏精ꎬ精亏则可诱发糖尿病ꎬ甚至会导致糖尿病肾病ꎮ2型糖尿病症状多表现为尿多㊁乏力㊁口渴喜饮㊁多食易饥等与肾阳虚类似症状ꎬ故中医临床治疗糖尿病多以补肾固本㊁补益肾阳为主[10-11]ꎮ文献报道ꎬ肉苁蓉中的苯乙醇苷类成分ꎬ如松果菊苷和毛蕊花糖苷不仅能够抑制餐后血糖水平的增加ꎬ而且能提高淀粉负荷小鼠的葡萄糖耐量[12-15]ꎮ这也提示着肉苁蓉具有降血糖的作用ꎮdb/db小黑鼠是由于瘦素(leptin)受体基因缺陷导致的先天肥胖性T2DM小鼠ꎬ其瘦素受体基因失去功能ꎬ在出生后2周内就发生高胰岛素血症ꎬ3~4周发展为肥胖ꎬ8周后就发展为非常严重的高血糖症ꎬ期间伴有胰岛素抵抗ꎬβ细胞功能衰竭[16-17]ꎬ一般在8~10个月内死亡ꎬ可并发明显的肾脏疾病[18]ꎮ本研究以db/db小黑鼠为实验对象ꎬ分别富集肉苁蓉和酒苁蓉的总多糖㊁总寡糖和总苷类成分ꎬ并对不同提取部位的降血糖作用进行了比较研究ꎬ期望为肉苁蓉酒蒸的炮制机理提供科学依据ꎮ1㊀材料与仪器1.1㊀实验动物㊀自发性2型糖尿病小鼠模型的BKS.Cg-Dock7m+/+Leprdb/JNju(基因型:db/db糖尿病小黑鼠)雄性7周龄的小黑鼠ꎬ体重35~40gꎬdb/dbm+(基因型:db/m+小黑鼠)雄性7周小黑鼠ꎬ体重量18~20gꎬ由南京大学-南京生物医药研究院ꎬ南京大学模式动物研究所提供ꎮ本研究方案通过辽宁中医药大学实验动物伦理委员会审核ꎬ批准编号:2018YSDW-030-02ꎮ1.2㊀药物与试剂㊀肉苁蓉药材于2019年5月采自内蒙古阿拉善(批号:20190508-1)ꎬ经辽宁中医药大学药学院翟延君教授鉴定为列当科植物肉苁蓉(CistanchedeserticolaY.C.Ma)的干燥带鳞叶肉质茎ꎬ标本保存于辽宁省中药炮制技术产业创新中心ꎮ松果菊苷(echinacoside)对照品(批号:MUST-13080801ꎬ纯度ȡ98%)㊁毛蕊花糖苷(verbascoside)对照品(批号:MUST-13122711ꎬ纯度ȡ98%)㊁异毛蕊花糖苷(isoacteoside)对照品(批号:MUST-15081001ꎬ纯度ȡ99.77%)㊁甜菜碱对照品(批号:894-200001ꎬ纯度ȡ98%)均购自中国药品生物制品检定所ꎻD101型大孔树脂由成都曼斯特生物科技有限公司提供ꎮ小鼠抗8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)单克隆抗体[批号:ab62623ꎬ艾博抗(上海)贸易有限公司]ꎻPAS(批号:G1281ꎬ北京索莱宝科技有限公司)ꎻ抗荧光淬灭封片液(海碧云天生物技术有限公司)ꎻSP9001兔SP检测试剂盒(无锡傲锐东源生物科技有限公司)ꎻDAB㊁胰岛素(INS)㊁糖化血红蛋白(HbA1c)㊁甘油三酯(TG)㊁小鼠总胆固醇(TC)㊁低密度脂蛋白(LDL-C)㊁高密度脂蛋白(HDL-C)㊁尿酸(UA)㊁肌酐(Cr)㊁丙二醛(MDA)㊁超氧化物歧化酶(SOD)㊁尿微量白蛋白(mALB)试剂盒(上海朗顿生物技术有限公司)ꎮ胆固醇㊁二甲苯㊁无水乙醇㊁乙腈㊁甲醇为色谱纯ꎬ水为超纯水ꎬ其他试剂均为分析纯ꎮ1.3㊀主要仪器㊀ACQUITYH-ClassUPLC(美国Waters公司)ꎻ血糖仪和血糖试纸条(拜耳医药保健有限公司)ꎻAE240型1/10万电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)ꎻFA1004型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)ꎻBN-518生物组织自动包埋机(湖北伯纳医疗科技有限公司)ꎻ电热恒温干燥箱(忠伟电子仪表有限公司)ꎻLeicaRM2245切片机(德国LeicaBiosystems公司)ꎻpH酸度计(上海鹏顺科学仪器有限公司)ꎻMilli-QIntegral3型净水机(法国Molsheim公司)ꎮ2㊀实验方法2.1㊀肉苁蓉炮制品制备㊀肉苁蓉:取肉苁蓉药材ꎬ洗净杂质ꎬ上锅常压蒸制2hꎬ切成6mmꎬ70ħ烘干ꎮ酒苁蓉:取肉苁蓉饮片ꎬ加入适量黄酒拌匀ꎬ闷润8h(黄酒ʒ水=1ʒ1)ꎬ高压蒸制4hꎬ70ħ烘干ꎮ(每100g肉苁蓉用黄酒30mL)ꎮ2.2㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位富集㊀取肉苁蓉/酒苁蓉粗粉30gꎬ加10倍量水加热回流提取2次ꎬ每次2hꎬ合并提取液ꎬ浓缩ꎬ加乙醇至含醇量达60%ꎬ低温沉淀12hꎬ抽滤ꎬ沉淀即为粗多糖部位ꎮ将上清液浓缩至适当浓度ꎬ上D101大孔吸附树脂ꎬ依次用水和不同浓度的乙醇洗脱ꎬ收集水洗脱液ꎬ减压浓缩至稠膏ꎬ即为总寡糖部位ꎻ40%乙醇洗脱液ꎬ减压浓缩干燥ꎬ即为肉苁蓉总苷部位ꎮ2.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位含量测定2.3.1㊀肉苁蓉/酒苁蓉总多糖的含量测定㊀称取葡萄糖样品20.00mg于50mL容量瓶中ꎬ制成0.4mg mL-1的葡萄糖标准溶液ꎬ分别吸取3㊁4㊁5㊁6㊁7mL置于50mL容量瓶ꎬ用水定容至刻度ꎬ分别吸取各个浓度梯度的葡萄糖溶液2.0mL于试管中ꎬ另取等量蒸馏水作空白对照ꎬ在各管加入1mL5%苯酚ꎬ摇匀ꎬ迅速加入5mL浓硫酸ꎬ放置10minꎬ置40ħ水浴中保持15minꎬ取出ꎬ迅速冷却至室温ꎬ在490nm处测其吸光度值ꎬ以吸光度(A)为纵坐标ꎬ葡萄糖浓度(C)为横坐标ꎬ绘制标准曲线ꎬ得回归方程Y=8.37X-0.1628(R2=0.9946)ꎮ精密称取生㊁制品总多糖部分的粉末1.0gꎬ分别置于50mL容量瓶中ꎬ加水溶解并定容至刻度ꎬ精密吸取2.0mL于试管中ꎬ同标准曲线制备方法ꎬ测定ꎬ即得ꎮ2.3.2㊀肉苁蓉/酒苁蓉中甜菜碱的含量测定2.3.2.1㊀对照品溶液制备㊀精密称定甜菜碱对照品1.17mgꎬ放入5mL量瓶中ꎬ加入50%甲醇溶解并定容ꎬ即得ꎮ2.3.2.2㊀色谱条件㊀色谱柱为Ecosil120-5-AMINO色谱柱(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)ꎬ流动相:乙腈-水(99.5ʒ0.5)ꎬ柱温:30ħꎬ检测波长:194nmꎬ流速:0.6mL min-1ꎬ进样量10μLꎬ色谱图见图1ꎮA.甜菜碱对照品ꎻB.肉苁蓉总寡糖部位ꎻC.酒苁蓉总寡糖部位图1㊀肉苁蓉/酒苁蓉总寡糖部位的高效液相色谱图2.3.2.3㊀供试品溶液的制备㊀精密称取生㊁制品总寡糖部位的粉末1.0gꎬ分别置于5mL容量瓶中ꎬ加蒸馏水溶解并定容至刻度ꎬ摇匀ꎬ过0.45μL微孔滤膜ꎬ即得ꎮ2.3.2.4㊀样品含量测定㊀精密吸取生㊁制肉苁蓉中总寡糖供试品溶液ꎬ按 2.3.2.2 项下条件测定ꎬ计算样品中甜菜碱含量ꎮ2.3.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉中松果菊苷㊁毛蕊花糖苷和异类叶升麻苷含量测定2.3.3.1㊀对照品溶液的制备㊀精密称定松果菊苷4.50mg㊁毛蕊花糖苷4.80mg㊁异类叶升麻苷5.05mg分别放入5mL容量瓶内ꎬ加50%甲醇溶解并定容至刻度ꎬ分别取各对照品溶液200μLꎬ置于进样小瓶内ꎬ加400μL50%甲醇ꎬ混匀ꎬ制成混合对照品溶液ꎬ摇匀ꎬ即得ꎮ2.3.3.2㊀色谱条件㊀色谱柱为EcosilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)ꎬ甲醇为流动相Aꎬ0.1%甲酸为流动相Bꎬ梯度洗脱ꎬ0~45minꎬ30%Aң70%Aꎬ流速1.0mL min-1ꎬ柱温30ħꎬ检测波长330nmꎬ进样量10μLꎬ色谱图见图2ꎮA.混合对照品ꎻB.肉苁蓉总苷部位ꎻC.酒苁蓉总苷部位㊀1.松果菊苷ꎻ2.毛蕊花糖苷ꎻ3.异类叶升麻苷图2㊀肉苁蓉/酒苁蓉总苷的样品高效液相色谱图2.3.3.3㊀供试品溶液的制备㊀精密称取生㊁制品总苷部分粉末1.0gꎬ分别置于100mL容量瓶中ꎬ加50%甲醇溶解并定容至刻度ꎬ摇匀ꎮ各精密吸取5mL置于10mL容量瓶中ꎬ加入50%甲醇定容ꎬ摇匀ꎬ过0.45μm微孔滤膜ꎬ即得ꎮ2.3.3.4㊀样品含量测定㊀精密吸取肉苁蓉总苷样品ꎬ按 2.3.3.2 项下条件测定ꎮ计算样品中松果菊苷㊁毛蕊花糖苷以及异类叶升麻苷的含量ꎮ2.4㊀动物分组㊁造模及给药㊀动物房为12h光照㊁12h黑暗ꎬ相对湿度为50%~70%ꎬ室温为18~22ħꎮdb/db小黑鼠和db/m小黑鼠(正常对照组)以普通饲料正常喂养ꎬ至9周龄开始实验ꎬ除去正常对照组外ꎬ其余db/db小黑鼠根据血糖值及体重随机分为8组ꎬ分别是模型组㊁阳性对照组㊁肉苁蓉总多糖组㊁肉苁蓉总寡糖组㊁肉苁蓉总苷组㊁酒苁蓉总多糖组㊁酒苁蓉总寡糖组㊁酒苁蓉总苷组ꎮ除正常对照组和模型组外ꎬ其余各组大鼠按2mL/100g的剂量连续4周灌胃给药ꎬ药液浓度均为4.1g kg-1ꎬ正常对照组和模型组同法同量灌胃生理盐水ꎮ2.5㊀肉苁蓉不同炮制品提取部位对db/db小黑鼠血糖水平的影响2.5.1㊀口服葡萄糖耐量(OGTT)检测㊀给药26d后ꎬ禁食12hꎬ次日给药60min后ꎬ各组小黑鼠分别给予2.0g kg-1的葡萄糖ꎬ分别于0㊁0.5㊁1.0㊁2.0h尾静脉取血测定血糖值ꎬ以血糖值为纵坐标ꎬ时间为横坐标ꎬ制作血糖变化图ꎬ并按公式计算各实验组血糖曲线的线下面积(AUCꎬhmmoL L-1)[19]ꎮAUC=Aˑ0.25+Bˑ0.50+Cˑ0.75+D式中:A㊁B㊁C㊁D分别为0㊁0.5㊁1.0㊁2.0h的血糖值ꎮ2.5.2㊀胰岛素抵抗指数及动脉硬化指数计算㊀根据文献方法计算胰岛素抵抗指数[20]:HOMA-IR=GlucoseˑInsulin/22.5ꎬHOMA-β=20ˑInsulin/(Glucose-3.5)ˑ100%ꎮIR是胰岛素抵抗ꎬβ(%)是β细胞功能ꎮ葡萄糖的摩尔单位mmoL L-1ꎮ胰岛素以mU L-1给出ꎮ葡萄糖和胰岛素数字都是在禁食期间检测ꎮ根据Zheng等[21]描述的方法计算动脉硬化指数(Atherogenicindex)ꎬ计算方法:Athero ̄genicindex=(TC-HDL-C)/HDL-Cꎮ2.5.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠血清INS㊁HbA1c的影响㊀取冻存血清样品放至室温后ꎬ用于INS㊁HbA1c酶联免疫试剂盒的测试ꎬ严格按照试剂盒说明书的方法及步骤进行操作ꎮ2.6㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏氧化应激水平影响㊀取冻存血清样品放至室温后ꎬ用于MDA㊁SOD酶联免疫试剂盒的测试ꎬ严格按照试剂盒说明书的方法及步骤进行操作ꎮ2.7㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏脂肪代谢的影响㊀大鼠血清TG㊁TC㊁HDL-C㊁LDL-C水平测定均采用相关试剂盒测定ꎬ具体测定步骤参考试剂盒说明书ꎮ2.8㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠血浆和尿液中UA㊁Cr以及mALB的影响㊀取冻存血浆㊁尿液样品放至室温后ꎬ用于UA㊁Cr㊁mALB酶联免疫试剂盒的测试ꎬ严格按照试剂盒说明书的方法及步骤进行操作ꎮ2.9㊀HE染色法观察胰腺和肾脏病理切片㊀取出经10%多聚甲醛固定液浸泡24h后的胰腺㊁肾脏组织ꎬ蒸馏水清洗组织后保存于70%乙醇中ꎮ取出组织样品ꎬ经过梯度乙醇脱水㊁透明处理㊁石蜡包埋和切片处理ꎬ然后用苏木精和伊红染色(H&E染色)ꎮ待切片胶干后用高分辨率数码成像系统观察切片并拍照ꎮ2.10㊀免疫组化法测定肾脏组织type-IVcollagen的表达㊀取肾脏切片脱蜡至水后进行抗原修复ꎬ10%山羊血清封闭ꎬ一抗4ħ孵育过夜ꎬ洗涤后孵育二抗ꎬ现配溶液DAB显色ꎬ洗涤㊁脱水㊁封片ꎬ于光学显微镜下观察肾脏组织type-IVcollagen蛋白表达ꎮ2.11㊀统计学方法㊀运用GraphPadPrismVersion5.01(2007ꎬGraphPadSoftwareinc)软件分析数据ꎬ结果以meanʃS.E.M.表示ꎬ两组间差异进行One-wayANOVA(followedbyBonferroniᶄscompareselectedpairsofcolumntest)方法ꎬP<0.05为差异显著ꎬ具有统计学意义ꎮ3㊀实验结果3.1㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位含量测定结果㊀按 2.3 项下条件测定ꎬ肉苁蓉及酒苁蓉不同提取部位含量测定结果见表1ꎮ表1㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位含量测定结果成分总多糖(%)甜菜碱/mg g-1松果菊苷/mg g-1毛蕊花糖苷/mg g-1异类叶升麻苷/mg g-1肉苁蓉1.380.98752.01020.95820.5820酒苁蓉1.191.04411.82670.71470.67053.2㊀药理学指标测定结果3.2.1㊀一般情况观察㊀动物实验周期为4周ꎬ每周测定小黑鼠的空腹体重ꎬ结果见表2ꎮ灌胃实验开始至结束ꎬ模型组小黑鼠的体重出现持续上升ꎬ符合2型糖尿病模型体重增加的特征ꎮ正常对照组大鼠的体重基本不变ꎮ不同给药组对db/db小黑鼠灌胃1周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组大鼠体重增加的状态均有不同程度改善ꎬ其中以酒苁蓉总苷的改善作用最为明显(P<0.05)ꎻ不同给药组对db/db小黑鼠灌胃2周和4周后ꎬ酒苁蓉寡糖体重改善明显(P<0.05或P<0.01)ꎮ以上结果表明ꎬ肉苁蓉及酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠有降低体重的作用ꎬ结果见表2ꎮ表2㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠体重的影响(g)组别0d7d14d21d28d正常对照组20.00ʃ0.3920.47ʃ0.6718.07ʃ1.0019.57ʃ1.3319.97ʃ1.47模型组38.78ʃ0.50#40.75ʃ1.68##37.93ʃ1.20##41.30ʃ0.80##46.55ʃ1.19##阳性对照组37.90ʃ1.8039.88ʃ1.7436.95ʃ1.9438.60ʃ1.5643.47ʃ1.96肉苁蓉多糖组39.97ʃ1.0339.60ʃ0.7637.92ʃ1.4442.17ʃ1.4844.83ʃ1.40肉苁蓉寡糖组39.33ʃ1.7140.42ʃ2.0239.47ʃ1.3841.03ʃ2.1643.92ʃ2.14肉苁蓉总苷组39.53ʃ1.2440.47ʃ1.1639.55ʃ1.0942.63ʃ1.2446.22ʃ1.18酒苁蓉多糖组39.20ʃ1.1639.45ʃ1.2838.17ʃ0.8142.45ʃ0.9344.70ʃ1.05酒苁蓉寡糖组36.88ʃ0.6238.58ʃ1.1734.10ʃ0.55∗38.03ʃ0.7140.68ʃ0.61∗∗酒苁蓉总苷组37.25ʃ0.6536.10ʃ0.97∗36.10ʃ0.4339.58ʃ1.0343.42ʃ1.03㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ3.2.2㊀肉苁蓉不同炮制品提取部位对db/db小黑鼠血糖水平的影响㊀正常对照组db/db小黑鼠血糖均维持在一个正常水平(4.3~5.7mmoL L-1)ꎬ而模型组小黑鼠血糖持续升高(P<0.01)ꎮ与模型组相比ꎬ给药1周后ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖㊁总苷组及酒苁蓉总多糖㊁总寡糖㊁总苷FBG降低(P<0.01)ꎻ给药2周后ꎬ酒苁蓉总苷FBG降低(P<0.05)ꎻ给药3周后ꎬ肉苁蓉总多糖和酒苁蓉总寡糖FBG降低(P<0.05或P<0.01)ꎻ给药4周后ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖及酒苁蓉总多糖㊁总寡糖㊁总苷FBG降低(P<0.05)ꎬ结果见表3ꎮ㊀㊀在口服葡萄糖耐量实验(见表4)中ꎬ正常对照组小黑鼠的平均血糖水平在30min时达到峰值ꎬ然后快速下降到正常水平ꎮ而模型组小黑鼠的平均血糖水平在30min达到峰值后ꎬ继续保持在较高的水平ꎮ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠血糖达到最高值后呈不同程度的下降趋势ꎬ其中酒苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组下降速度较快ꎮ此外ꎬ根据计算得各组AUCꎬ结果显示各给药组小黑鼠AUC均低于模型组ꎬ肉苁蓉总多糖和酒苁蓉总苷降低了给予葡萄糖后2个时间点(90㊁120min)的血糖值(P<0.05或P<0.01)ꎬ肉苁蓉总寡糖和酒苁蓉总多糖降低了给予葡萄糖120min后的血糖值(P<0.05)ꎬ酒苁蓉总寡糖降低了给予葡萄糖后3个时间点(0㊁90㊁120min)及曲线下面积(P<0.05或P<0.01)ꎮ结果表明ꎬ肉苁蓉和酒苁蓉可改善db/db小黑鼠的OGTT能力ꎮ表3㊀肉苁蓉不同炮制品及提取部位对db/db小黑鼠FBG值的影响(mmoL L-1)组别0d7d14d21d28d正常对照组5.33ʃ0.284.97ʃ0.524.33ʃ0.225.67ʃ0.535.10ʃ0.33模型组16.92ʃ1.88##19.55ʃ3.31##14.90ʃ1.40##12.40ʃ0.78##12.82ʃ0.77##阳性对照组16.92ʃ1.0614.20ʃ1.91∗8.60ʃ0.89∗∗10.20ʃ1.4810.35ʃ2.08肉苁蓉多糖组15.47ʃ0.8611.32ʃ1.09∗∗14.07ʃ1.777.73ʃ0.77∗9.05ʃ1.14∗肉苁蓉寡糖组17.35ʃ3.2310.00ʃ1.05∗∗11.55ʃ1.0811.02ʃ0.799.18ʃ1.00∗肉苁蓉总苷组16.63ʃ1.588.32ʃ1.95∗∗12.77ʃ2.0114.85ʃ3.0712.00ʃ1.93酒苁蓉多糖组17.15ʃ1.7611.30ʃ1.49∗∗14.68ʃ1.2512.55ʃ1.008.82ʃ0.91∗酒苁蓉寡糖组13.00ʃ1.319.43ʃ1.69∗∗6.43ʃ1.56.55ʃ0.58∗∗8.90ʃ1.03∗酒苁蓉总苷组14.63ʃ0.5712.75ʃ0.96∗∗10.63ʃ1.48∗9.80ʃ1.108.27ʃ0.34∗㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ㊀㊀与正常对照组相比ꎬ模型组小黑鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)㊁HbA1c水平升高(P<0.05)ꎬ胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)水平降低ꎮ与模型组相比ꎬ肉苁蓉寡糖组㊁肉苁蓉多糖组㊁酒苁蓉寡糖组与酒苁蓉总苷组血清HbA1c含量明显降低(P<0.05)ꎻ肉苁蓉多糖组㊁酒苁蓉多糖组㊁酒苁蓉寡糖组与酒苁蓉总苷组HOMA-IR指数明显降低(P<0.05)ꎻ经过给药组干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠胰岛β细胞分泌指数水平均有不同程度的升高ꎬ结果见表5ꎮ胰岛素属于一种蛋白质激素ꎬ主要由胰腺组织中的胰岛β细胞合成与分泌ꎬ参与机体的糖代谢ꎬ维持机体血糖平衡ꎬ血清INS水平可反映糖尿病治疗的效果ꎮ从表5可知ꎬ与正常组相比ꎬ模型组小黑鼠的INS水平显著降低(P<0.01)ꎮ经过给药组干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠空腹血清胰岛素水平均有不同程度的升高ꎬ其中以肉苁蓉和酒苁蓉的总苷组升高最为明显ꎮ结果表明ꎬ各给药组可提高db/db小黑鼠的血清胰岛素水平ꎬ促进胰岛β-细胞分泌胰岛素ꎮ表4㊀肉苁蓉不同炮制品及提取部位对db/db小黑鼠OGTT的影响组别AUC/h mmoL L-10min30min60min90min120min正常对照组14.98ʃ2.944.65ʃ0.309.00ʃ3.576.65ʃ1.324.68ʃ0.334.32ʃ0.57模型组36.91ʃ1.22##12.23ʃ1.18##23.02ʃ2.42##13.38ʃ0.85##12.4ʃ0.23##12.13ʃ0.36##阳性对照组30.96ʃ2.6210.50ʃ0.8720.63ʃ2.7313.40ʃ1.668.43ʃ1.02∗∗7.97ʃ0.54∗∗肉苁蓉多糖组33.90ʃ0.9014.70ʃ2.8028.42ʃ2.6910.63ʃ0.408.25ʃ0.24∗∗8.05ʃ0.58∗∗肉苁蓉寡糖组36.81ʃ0.3613.20ʃ1.7429.75ʃ0.5612.85ʃ0.979.80ʃ0.979.00ʃ0.32∗肉苁蓉总苷组35.97ʃ2.7815.08ʃ3.3328.20ʃ4.7713.88ʃ3.3311.70ʃ1.2410.20ʃ0.65酒苁蓉多糖组33.25ʃ2.7811.10ʃ1.1026.40ʃ2.4710.90ʃ1.0710.98ʃ1.459.10ʃ1.50∗酒苁蓉寡糖组26.42ʃ2.71∗∗8.00ʃ0.88∗21.15ʃ3.439.43ʃ1.418.05ʃ1.00∗∗6.78ʃ0.36∗∗酒苁蓉总苷组32.97ʃ2.4710.73ʃ0.3326.22ʃ2.5611.20ʃ1.208.85ʃ0.95∗8.77ʃ0.93∗㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ表5㊀db/db小黑鼠的HOMA-IR㊁HOMA-β和血清HbA1c㊁INS水平组别HbA1c/ng mL-1INS/mU L-1HOMA-IRHOMA-β正常对照组39.91ʃ2.5366.39ʃ6.1612.17ʃ0.5763.48ʃ5.83模型组50.62ʃ4.20#45.95ʃ1.81##31.34ʃ6.64##16.32ʃ1.18##阳性对照组45.83ʃ3.1854.91ʃ3.31∗26.01ʃ6.4621.90ʃ1.86肉苁蓉多糖组38.43ʃ0.20∗48.50ʃ3.1019.64ʃ2.99∗18.27ʃ1.89肉苁蓉寡糖组37.60ʃ3.68∗52.95ʃ2.8921.89ʃ3.3320.94ʃ2.36肉苁蓉总苷组40.37ʃ3.6753.42ʃ2.3527.35ʃ4.0219.71ʃ1.45酒苁蓉多糖组45.13ʃ3.6746.16ʃ3.1218.24ʃ2.60∗17.09ʃ1.00酒苁蓉寡糖组37.30ʃ5.99∗47.95ʃ6.0319.32ʃ3.80∗20.20ʃ3.27酒苁蓉总苷组40.20ʃ1.01∗51.94ʃ3.0719.04ʃ1.08∗20.54ʃ1.86㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ3.2.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏氧化应激水平影响㊀模型组小黑鼠肝脏MDA水平显著高于正常组(P<0.05)ꎮ经过给药组干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组的MDA水平均出现不同程度下降(P<0.05)ꎬ其中肉苁蓉总多糖㊁肉苁蓉总寡糖㊁肉苁蓉总苷㊁酒苁蓉总苷和酒苁蓉总寡糖的小黑鼠肝脏组织MDA水平减少最明显(P<0.05或P<0.01)ꎮ结果表明ꎬ肉苁蓉对降低db/db小黑鼠肝脏组织MDA水平具有一定的效果ꎬ改善效果好于酒苁蓉给药组ꎮ模型组小黑鼠肝组织中SOD活力低于正常对照组(P<0.05)ꎮ当给予肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位灌胃后ꎬ可提高db/db小黑鼠肝脏组织中SOD活力ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组均可恢复SOD活力ꎬ其中肉苁蓉总苷组差异有统计学意义(P<0.05)ꎬ结果见表6ꎮ3.2.4㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏脂肪代谢的影响㊀为评价肉苁蓉/酒苁蓉对db/db小黑鼠的血清血脂代谢水平影响ꎬ实验检测了糖尿病脂质代谢相关标志物ꎮ从表7可知ꎬ与正常对照组相比ꎬ模型组小黑鼠血清LDL-C水平显著升高(P<0.05)ꎬHDL-C水平降低ꎮ经过给药干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组以及酒苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组的血清TG㊁TC和LDL-C水平均出现不同程度降低ꎬHDL-C水平升高ꎬ其中肉苁蓉总苷组有改善TC水平作用(P<0.05)ꎮ结果表明ꎬ肉苁蓉和酒苁蓉在一定程度上可改善db/db小黑鼠的脂代谢紊乱ꎮ表6㊀db/db小黑鼠的肝脏重量㊁相对肝脏重量和肝脏SOD㊁MDA水平组别肝脏重量/g相对肝脏重量(%)SOD/nmoL mL-1MDA/ng mL-1正常对照组0.86ʃ0.034.33ʃ0.2019.89ʃ0.5433.94ʃ1.05模型组2.39ʃ0.09##5.12ʃ0.11#17.36ʃ0.98#38.32ʃ0.94#阳性对照组2.13ʃ0.204.87ʃ0.2816.92ʃ0.1930.53ʃ0.86∗∗肉苁蓉多糖组2.13ʃ0.064.75ʃ0.1718.53ʃ0.5631.31ʃ0.41∗∗肉苁蓉寡糖组2.18ʃ1.134.85ʃ0.3918.95ʃ0.8731.81ʃ0.42∗∗肉苁蓉总苷组2.35ʃ0.215.08ʃ0.4219.82ʃ0.50∗30.51ʃ1.38∗∗酒苁蓉多糖组2.33ʃ0.055.23ʃ0.2018.03ʃ0.4036.46ʃ1.25酒苁蓉寡糖组1.77ʃ0.12∗∗4.35ʃ0.24∗19.17ʃ0.8634.06ʃ0.87∗酒苁蓉总苷组2.22ʃ0.055.13ʃ0.2018.61ʃ1.4733.19ʃ3.15∗㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ3.2.5㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠血浆和尿液中UA㊁Cr以及mALB的影响㊀给药4周后ꎬ与模型组相比ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖以及酒苁蓉总苷组的UA㊁Cr以及mALB水平均出现不同程度的降低ꎬ其中肉苁蓉总苷组对血浆中的Cr以及尿液中的Cr㊁UA和mALB有降低作用(P<0.05或P<0.01)ꎬ酒苁蓉多糖组对尿液中的UA㊁Cr以及mALB水平改善作用(P<0.05或P<0.01)ꎬ酒苁蓉对血浆中UA水平有改善作用(P<0.05)ꎬ肉苁蓉总苷一定程度上可降低db/db小黑鼠血浆UA㊁Cr以及mALB水平ꎮ3.2.6㊀肉苁蓉不同炮制品及提取部位对db/db小黑鼠胰腺㊁肾脏组织病理学影响㊀正常对照组小黑鼠胰腺组织无病理学损伤ꎬ胰岛可见清晰边缘ꎬ胰岛细胞呈椭圆形且有序排列在胞浆中ꎬ细胞核呈圆形ꎬ胰岛数量较多且体积较大ꎮ模型组小黑鼠胰腺组织无完整胰岛ꎬ胰岛边缘不清晰且形状不完整ꎬ胰岛β细胞排列杂乱无章ꎬ数量较少ꎬ并出现萎缩现象ꎬ胰腺出现严重损伤ꎮ与模型组大鼠相比ꎬ经过肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位灌胃4周后ꎬ各提取部位给药组的胰岛组织部分恢复ꎬ胰岛细胞体积出现不同程度变大ꎬ胰岛细胞可见清晰的边界ꎬ排列无序的状况得到改善ꎮ其中ꎬ以肉苁蓉和酒苁蓉总苷组恢复的最好ꎮ表7㊀db/db小黑鼠的肝脏TC㊁LDL-C㊁HDL-C和TG水平组别TG/μmoL L-1LDL-C/mmoL L-1TC/mmoL L-1HDL-C/μmoL mL-1HDL-C/TC动脉硬化指数正常对照组1.12ʃ0.041.58ʃ0.303.56ʃ0.092.28ʃ0.020.64ʃ0.020.56ʃ0.04模型组1.19ʃ0.062.26ʃ0.11##3.68ʃ0.13##2.26ʃ0.020.62ʃ0.020.63ʃ0.06阳性对照组1.09ʃ0.042.15ʃ0.093.20ʃ0.122.10ʃ0.050.66ʃ0.030.53ʃ0.07肉苁蓉多糖组1.23ʃ0.052.11ʃ0.083.97ʃ0.332.18ʃ0.040.56ʃ0.040.82ʃ0.14肉苁蓉寡糖组1.28ʃ0.092.03ʃ0.093.46ʃ0.182.27ʃ0.050.66ʃ0.040.53ʃ0.09肉苁蓉总苷组1.18ʃ0.031.96ʃ0.063.07ʃ0.22∗2.11ʃ0.070.70ʃ0.060.46ʃ0.12酒苁蓉多糖组1.26ʃ0.032.19ʃ0.043.59ʃ0.072.14ʃ0.050.60ʃ0.020.68ʃ0.07酒苁蓉寡糖组1.37ʃ0.032.27ʃ0.093.63ʃ0.082.27ʃ0.060.63ʃ0.020.60ʃ0.06酒苁蓉总苷组1.26ʃ0.062.22ʃ0.083.69ʃ0.242.24ʃ0.070.61ʃ0.040.65ʃ0.09㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ表8㊀治疗第28天db/db小黑鼠血浆和尿液中UA㊁Cr以及mALB水平组别Cr/mg dL-1UA/mg dL-1血浆尿液血浆尿液mALB/μg dL-1正常对照组1.35ʃ0.020.041ʃ0.0011.56ʃ0.019.80ʃ0.098.85ʃ0.17模型组1.62ʃ0.08#0.044ʃ0.0041.67ʃ0.06##10.40ʃ0.7611.11ʃ0.12阳性对照组1.41ʃ0.020.047ʃ0.0011.82ʃ0.079.57ʃ0.4810.64ʃ0.71肉苁蓉多糖组1.47ʃ0.080.044ʃ0.0031.60ʃ0.069.42ʃ1.059.26ʃ1.48肉苁蓉寡糖组1.42ʃ0.070.040ʃ0.0021.63ʃ0.058.94ʃ0.6411.02ʃ0.81肉苁蓉总苷组1.33ʃ0.08∗0.034ʃ0.003∗1.77ʃ0.137.75ʃ0.52∗∗9.15ʃ0.47∗酒苁蓉多糖组1.58ʃ0.110.036ʃ0.001∗1.69ʃ0.078.05ʃ0.06∗∗7.85ʃ0.65∗酒苁蓉寡糖组1.43ʃ0.99∗0.052ʃ0.0041.66ʃ0.079.86ʃ0.068.00ʃ1.24酒苁蓉总苷组1.53ʃ0.090.043ʃ0.0041.83ʃ0.049.21ʃ0.3610.59ʃ1.19㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ图3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠胰腺病理学的影响(H&Eꎬ200ˑ)㊀㊀正常对照组小黑鼠的肾脏组织无明显损伤ꎬ肾小球结构㊁形态以及与肾小球囊腔的比例正常ꎬ近端小管与远端小管的管壁薄厚㊁管腔大小正常ꎮ模型组小黑鼠肾小球结构㊁形态㊁大小不规则ꎬ血管球萎缩㊁肾球囊腔消失ꎬ近端小管与远端小管的管壁薄厚不匀㊁管腔大小不一㊁界限不清模糊ꎬ肿胀坏死ꎬ有大量的炎性细胞浸润ꎮ与模型组大鼠相比ꎬ经过肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位灌胃4周后ꎬ各提取部位给药组的肾脏组织有所改善ꎬ肾小球结构㊁形态㊁大小接近正常ꎬ近端小管与远端小管的管壁薄㊁管腔大小得到改善ꎬ肿胀减轻ꎬ有的部位仍可见少量的炎性细胞浸润ꎮ其中以肉苁蓉多糖组和酒苁蓉多糖组恢复最好ꎮ3.2.7㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肾脏组织中type-IVcollagen表达㊀与正常组相图4㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肾脏病理学的影响(H&Eꎬ200ˑ)比ꎬ模型组小黑鼠肾脏type-IVcollagen蛋白表达发生了明显变化(P<0.05)ꎮ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠的平均肾膜基质面积增加ꎬ其中肉苁蓉多糖组㊁酒苁蓉寡糖组㊁酒苁蓉总苷组中type-IVcollagen的表达改善ꎬ而肾基膜中的type-IVcollagen表达差异无统计学意义ꎮ图5㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肾脏type-IVcollagen表达型胶原的表达结果4㊀讨论与结论本文研究表明肉苁蓉多糖部位经过酒蒸后含量下降ꎬ推测多糖在酒蒸过程中发生水解ꎻ肉苁蓉寡糖部位中的甜菜碱经过酒蒸后含量增加ꎬ炮制过程中可能生成了甜菜碱类成分ꎬ而使甜菜碱含量增加ꎻ总苷类成分ꎬ松果菊苷的含量稍有下降ꎬ毛蕊花糖苷含量下降ꎬ异类叶升麻苷含量上升ꎮ2型糖尿病(T2DM)的病因众多ꎬ其病机是由于β细胞功能障碍和胰岛素抵抗而引起糖㊁脂肪㊁蛋白质的代谢紊乱ꎮ其中基因㊁肥胖和体力活动显然是2型糖尿病最重要的风险因素[22]ꎮ从中医学角度分析ꎬ2型糖尿病属于 消渴 范畴ꎬ而脾肾阳虚证是因为阳气耗损ꎬ在脾阳虚的状态下无法发挥滋补脾肾的作用ꎬ从而导致阳气损伤的发生[23]ꎮHbA1c是评价糖尿病血糖控制的 金标准 ꎮ英国前瞻性糖尿病研究发现HbA1c水平越高ꎬ糖尿病慢性并发症发生风险越大ꎮ本实验表明ꎬ肉苁蓉多糖和寡糖及酒苁蓉寡糖和总苷显著降低HbA1c水平ꎮINS分泌相对不足是2型糖尿病的发病机制之一[24]ꎮ本研究证明ꎬ肉苁蓉及酒苁蓉各部位均能提高胰岛素水平ꎬ说明生制肉苁蓉不同提取部位可增加胰岛素分泌ꎮmALB对于早期肾损害具有重要参考意义ꎬ而尿Cr能准确反映肾功能状态[25]ꎮ肉苁蓉总苷和酒苁蓉总多糖显著降低了mALB水平ꎬ肉苁蓉总苷㊁酒苁蓉多糖和寡糖显著降低了Cr水平ꎬ降低了肾功能损害ꎮUA通过参与氧化应激ꎬ导致内皮功能障碍ꎬ加重胰岛素抵抗[26]ꎮ肉苁蓉总苷和酒苁蓉总多糖显著降低UA水平ꎬ使尿酸分泌减少ꎬ降低胰岛素抵抗ꎮ2型糖尿病血脂异常的主要表现为HDL-C㊁LDL-C㊁TG水平升高等ꎬ这些因素同样是诱发动脉粥样硬化的因素[27]ꎮ本实验中ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组以及酒苁蓉总多糖和总苷组的血清HDL-C㊁LDL-C以及TG水平均出现不同程度降低ꎬ一定程度上可降低血脂从而促进降血糖作用ꎮ肉苁蓉不同提取部位可显著提高HDL-C/TC水平ꎬ降低动脉粥样硬化指数ꎮ提示肉苁蓉不同提取部位对糖尿病和心血管疾病的治疗均有益处ꎮ研究发现ꎬMDA在糖尿病患者体内的表达水平比正常人高ꎻ超氧化物歧化酶SOD在糖尿病患者的活性比正常人低ꎬ提示氧化应激可能在糖尿病肾病的发生发展中起重要作用[28]ꎮ本实验各给药组的MDA水平均出现不同程度下降ꎬSOD活力均有提高ꎬ提示在肉苁蓉及酒苁蓉各提取部位有抑制氧化应激的作用ꎮ本文深入研究了肉苁蓉不同提取部位的降血糖作用ꎬ发现肉苁蓉和酒苁蓉总苷具有较好的降血糖作用ꎬ酒苁蓉多糖和寡糖也有一定的降血糖作用ꎬ为临床合理应用肉苁蓉及其炮制品提供可靠实验依据ꎮ肉苁蓉是我国著名的补益中药ꎬ其药理作用广泛ꎬ在临床疾病的预防和治疗中发挥巨大的作用ꎬ其有很好的应用前景ꎮ然而ꎬ肉苁蓉具有抗高血糖和降血脂作用的生物活性成分和机制有待进一步研究ꎮ参考文献:[1]㊀国家药典委员会.中华人民共和国药典2020年版(一部)[S].北京:中国医药科技出版社ꎬ2020:140. [2]LIYꎬPENGYꎬWANGMYꎬetal.Rapidscreeningandi ̄dentificationofthedifferencesbetweenmetabolitesofCistanchedeserticolaandC.tubulosawaterextractinratsbyUPLC-Q-TOF-MScombinedpatternrecognitionanal ̄ysis[J].JPharmBiomedAnalꎬ2016(131):364-372. [3]刘博男ꎬ史辑ꎬ贾天柱ꎬ等.肉苁蓉高压蒸制工艺的优化[J].中成药ꎬ2019ꎬ41(11):2576-2580.[4]ZHANGXꎬZHENGFJꎬZHANGZ.TherapeuticeffectofCistanchedeserticolaondefecationinsenileconstipationratmodelthroughstemcellfactor/C-kitsignalingpathway[J].WorldJGastroenterolꎬ2021ꎬ27(32):5392. [5]FANLꎬPENGYꎬCHENXNꎬetal.IntegratedanalysisofphytochemicalcompositionꎬpharmacokineticsꎬandnetworkpharmacologytoprobedistinctionsbetweenthestemsofCistanchedeserticolaandC.tubulosabasedonan ̄tidepressantactivity[J].FoodFunctꎬ2022ꎬ13(16):8542-8557.[6]樊燕燕ꎬ张石在.肉苁蓉总苷通过调控lncRNAGAS5保护神经细胞缺血再灌注损伤[J].中成药ꎬ2022ꎬ44(7):2320-2324.[7]范亚楠ꎬ王佳ꎬ贾天柱ꎬ等.肉苁蓉不同提取部位对便秘大鼠通便作用的影响[J].中国医院药学杂志ꎬ2017ꎬ37(13):1256-1258.[8]高云佳ꎬ姜勇ꎬ戴昉ꎬ等.肉苁蓉润肠通便的药效物质研究[J].中国现代中药ꎬ2015ꎬ17(4):307-310. 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肉苁蓉

肉苁蓉文章目录*一、肉苁蓉的概述*二、肉苁蓉的功效与作用*三、肉苁蓉的分类*四、肉苁蓉的药方选录*五、肉苁蓉的服用方法*六、肉苁蓉的选购方法、保存方法肉苁蓉的概述1、肉苁蓉的概述肉苁蓉,中药材名。
本品为列当科植物肉苁蓉或苁蓉、迷肉苁蓉等的肉质茎。
春、秋均可采收。
但以3~5月间采者为好,过时则中空。
春季采者,通常半埋于沙土中晒干,商品称为甜大芸、淡大芸或淡苁蓉。
秋采者,因水分多,不易晒干,须投入盐湖中1~3年后,取出晒干,称为盐大芸、咸大芸或咸苁蓉。
功能主治为:补肾,益精,润燥,滑肠。
治男子阳痿,女子不孕,带下,血崩,腰膝冷痛,血枯便秘。
2、肉苁蓉的别名苁蓉、大芸、荒漠肉苁蓉、肉松蓉、纵蓉。
3、肉苁蓉的性状形态扁圆柱形,稍弯曲,长3~20厘米,宽2~8厘米,厚1.5~4厘米。
表面暗棕色、灰棕色或黑棕色,密被覆瓦状排列的肉质鳞叶,通常鳞叶先端已断或鳞叶脱落而留有横长的短线状鳞叶痕。
体重,质坚实而硬,微有韧性,不易折断。
断面暗棕色或黑棕色,有淡棕色点状维管束,排列成深波状环纹,有时中空。
气微,味甜而微苦。
以条粗壮、密被鳞片、色暗棕、质柔润者为佳。
4、肉苁蓉的性味归经性温,味甘、咸。
归肾经、大肠经。
5、肉苁蓉的来源列当科植物肉苁蓉带鳞叶的肉质茎。
6、肉苁蓉的产地分布生于荒漠中,寄生在藜科植物琐琐(盐木)的根上。
分布于内蒙古、陕西、甘肃等地。
肉苁蓉的功效与作用1、肉苁蓉的化学成分、营养成分主要含苯乙基苷类。
内蒙古和新疆所产的肉苁蓉,含多糖8.5%~13%,总糖及多糖含量以内蒙古所产为高。
另含松果菊苷、毛蕊花糖苷、洋丁香酚苷、肉苁蓉苷A、肉苁蓉苷B、肉苁蓉苷C、肉苁蓉苷D、肉苁蓉苷E、肉苁蓉苷G、苁蓉素、甘露醇等成分。
2、肉苁蓉的功效作用补肾阳、益精血、润肠通便。
属补虚药下补阳药3、肉苁蓉的毒副作用胃弱便溏之人忌食。
性功能亢进者亦忌服。
不宜使用铁(铜)器具。
阴虚火旺者忌用。
《中国药典》2020版68个可以趁鲜加工的中药材

《中国药典》2020版68个可以趁鲜加工的中药材
1.药材切片(共29个品种):干姜、土茯苓、山柰、山楂、山药、川木通、三棵针、片姜黄、乌药、功劳木、附子、地榆、皂角刺、鸡血藤、佛手、苦参、狗脊、粉萆薢、浙贝母、桑枝、菝葜、绵萆薢、葛根、紫苏梗、黄山药、竹茹、桂枝、狼毒、滇鸡血藤。
2.药材切段(共18个品种):大血藤、小通草、肉苁蓉、青风藤、钩藤、高良姜、益母草、通草、桑寄生、黄藤、锁阳、槲寄生、颠茄草、野木瓜、广东紫珠、首乌藤、桃枝、铁皮石斛。
3.药材切块(共3个品种):何首乌、茯苓、商陆;
4.药材切瓣(共4个品种):木瓜、化橘红、枳壳、枳实;
5.药材切瓣或片、段(指可选用多种切制方法加工的药材,共11个品种):丁公藤、大黄、天花粉、木香、白蔹、防己、两面针、虎杖、香橼、粉葛、大腹皮。
6、去心(共3个):远志、莲子、牡丹皮。
#中医# #中药#。
《中华人民共和国药典》(2020年版)中药材和中药饮片质量标准增修订工作思路

《中华人民共和国药典》(2020年版)中药材和中药饮片质量标准增修订工作思路
《中华人民共和国药典》简称《中国药典》,是在中国境内生产、销售和使用药品必须执行的标准,与原卫生部颁发的《中华人民共和国卫生部药品标准》(简称“部颁标准”)和国务院药品监督管理部门颁发的《中华人民共和国药品标准》(简称“国家药品标准”)组成国家药品标准。
已收入《中国药典》的药品,其标准必须按《中国药典》执行,因此《中国药典》每5年的增修订已成为药品生产和销售企业、医疗机构、科研单位等关注的热点。
中药材是生产中药饮片的原料,中药饮片是临床汤剂和中成药生产的原料。
因此,中药材和中药饮片质量标准的增修订不仅直接关系到中药饮片的临床疗效和安全性,也关系到中成药的疗效和安全性。
中药材多数来源于植物和动物,具有农副产品的性质,其质量受种质资源、土壤、气候、栽培和加工技术等内外因素影响很大。
由于中药化学成分复杂,部分药材来源广泛、基原复杂,加上违法添加、造假,给中药材和中药饮片的质量标准制定带来巨大挑战。
为了做好《中国药典》2020年版中药材和中药饮片质量标准增修订工作,国家药典委员会面向全国征求意见,同时组织中药材和中药饮片方面的药典委员以及有关专家,对收集的意见、建议和媒体反映的问题进行了数据溯源和深入研讨。
在此基础上,制定了《中国药典》2020年版中药材和中药饮片质量标准增修订的工作思路[1]。
本文详细介绍《中国药典》2020年版编制大纲有关“中药材和饮片”部分的内容,同时探讨了影响中药材和中药饮片质量的部分问题,以供参考。
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肉欣蓉
Roucongrong
C1STANCHES 11ERBA
本品为列当科植物肉灰蓉或管花肉为蓉Cistanche tubulosa (Schenk)Wight 的干燥带鳞叶的肉质茎。
春季苗刚出土时或秋季冻土之前采挖,除去茎尖。
切段,晒干。
【性状】肉灰蓉呈扁圆柱形,稍弯曲,长3〜15cm,直径2〜8cm。
表面棕褐色或灰棕色,密被覆瓦状排列的肉质鳞叶,通常鳞叶先端已断。
体重,质硬,微有柔性,不易折断,断面棕褐色,有淡棕色点状维管束,排列成波状环纹。
气微,味甜、微苦。
管花肉衣蓉呈类纺锤形、扁纺锤形或扁柱形,稍弯曲,长5〜25cm, 直径2.5〜9cm。
表面棕褐色至黑褐色。
断面颗粒状,灰棕色至灰褐色,散生点状维管束。
【鉴别】取本品粉末1g,加甲醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至近干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。
另取松果菊苗对照品、毛蕊花糖昔对照品,加甲醇分别制成每1ml含lmg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述三种溶液各23, 分别点于同一聚酰胺薄层板上,以甲醇-醋酸-水(2:1:7)为展开剂,展开, 取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】水分不得过10.0% (通则0832第二法)。
总灰分不得过8.0% (通则2302) o
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(通则2201)项下的冷浸法测定,用稀乙醇作溶剂,肉灰蓉不得少于35.0%,管花肉欢蓉不得少于25.0%。
【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,以0.1%甲酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为330nm o理论板数按松果菊首峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备取松果菊背对照品、毛蕊花糖昔对照品适量,精密称定,加
50%甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品粉末(过四号筛)约1g,精密称定,置100ml 棕色量瓶中,精密加入50%甲醇50ml,密塞,摇匀,称定重量,浸泡30分钟,超声处理40分钟(功率250W,频率35kHz),放冷,再称定重量,加50%甲醇补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOpI,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,肉欢蓉含松果菊甘(C35H46。
20)和毛蕊花糖首(C29H 36015)的总量不得少于0.30%;管花肉族蓉含松果菊昔(C35H46。
20)和毛蕊花糖甘(c29H36015)的总量不得少于1.5%c
饮片
【炮制】肉灰蓉片除去杂质,洗净,润透,切厚片,干燥。
【性状】肉获蓉片呈不规则形的厚片。
表面棕褐色或灰棕色。
有的可见肉质鳞叶。
切面有淡棕色或棕黄色点状维管束,排列成波状环纹。
气微,味甜、微苦。
管花肉灰蓉片切面散生点状维管束。
【鉴别】【检查】【浸出物】【含量测定】同药材。
酒灰蓉取净肉从蓉片,照酒炖或酒蒸法(通则0213)炖或蒸至酒吸尽。
【性状】酒获蓉形如肉灰蓉片。
表面黑棕色,切面点状维管束,排列成波状环纹。
质柔润。
略有酒香气,味甜,微苦。
泗管花肉欢蓉切面散生点状维管束。
【鉴别】【检查】【浸出物】【含量测定】同药材。
【性味与归经】甘、咸,温。
归肾、大肠经。
【功能与主治】补肾阳,益精血,润肠通便。
用于肾阳不足,精血亏虚,阳痿不孕,腰膝酸软,筋骨无力,肠燥便秘。
【用法与用量】6〜10g。
【贮藏】置通风干燥处,防蛀。