细胞生物学的研究方法

第三章细胞生物学的研究方法

一、填空题

1．透射电子显微镜由、、、三部分所组成。

2.在酵母人工染色体制备过程中，要用酶脱去酵母的细胞壁，使之成为、并且用进行观察和计数。

4.观察贴壁生长的培养动物细胞可用，而观察脱去细胞壁的植物细胞，则要用。

5. 物质在紫外光照射下发出的荧光可分为和两种，其中需要将被照射的物质进行染色。

6．用紫外光为光源照射物体比用可见光的分辨率要高，这是因为。

7．通过或形成的细胞叫细胞株。

9.灭活的仙台病毒之所以能够诱导细胞融合，是因为。

10. 相差显微镜与普通显微镜的不同是用替代可变光阑，用代替普通物镜，并带有一个合轴用的望远镜。

11．倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其。

12．若用紫外光为光源，光学显微镜的最大分辨率为，透射电子显微镜的最大分辨率为，扫描电镜的分辨率为。

13. 显微镜的分辨本领是指能够能力，用来表示。

14．高压电镜的电压在120kV以上，优点是：、。

16. 细胞培养的突出特点是：可在。

18.贴壁生长的细胞有三个特点：①；②；③。

19. 用细胞培养法来研究生命活动规律的局限性是。

20．超薄切片染色常采用、染色。

21．免疫细胞化学技术是用来定位细胞中的物质。

22．电子显微镜使用的是透镜，而光学显微镜使用的是透镜。

23.电子染色是用来增强电子的散射能力。

24．在光学显微镜下见到的结构称为，在电子显微镜下见到的结构称为。25．细菌质膜的多功能性主要表现在：具有的呼吸作用，具有的分泌作用，具有的信号传导作用。

27.在同位素追踪技术中，用于研究DNA的同位素标记的前体物是。

28．单克隆抗体技术是将与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。

29. 可用技术来研究质膜结构的不对称性。

31.动物细胞培养所用的合成培养基中除含多种、和外，一般还需加入。

32．用荧光显微镜观察细胞时，经吖啶橙染色的细胞中的DNA发荧光，而RNA发荧光。33．适于观察活细胞的光学显微有、和等。

34．分辨率是指人的肉眼或显微镜在25cm处能够分辨到的相邻两个物体间最近距离的能力。人眼为，普通光学显微镜为，透射电子显微镜为，扫描隧道显微镜为，扫描电子显微镜为，以紫外光为光源的光学显微镜为。

35. 细胞内不同组分分级分离的常用方法有离心法、层析法、电泳法等。离心技术可将细胞匀浆中的不同细胞器或生物大分子进行有效分离。因为不同形态、大小和密度的细胞器以及步弓分子质量的生物大分子在离心力作用下各不相同。离心分离法又分和两种。离心是一种较为简便的分离法，常用于细胞核和的分离。因为在密度均一的介质中，颗粒越大沉降越，反之则沉降较。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开，而且所获得的分离组分往往不是很纯。而离心则是较为精细的分离手段，这种离心方法的关键是先在离心管中制备出或等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层。

二、判断题

1．透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞，而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。

2．扫描隧道显微镜是具有原子显像力的显微镜。

3. 在等密度梯度离心中蔗糖或甘油的梯度的作用与移动区带离心中梯度原理是不同的，在移动区带离心中梯度的惟一目的是减少样品的扩散，即使是在离心管的底部，颗粒的密度也比介质大。相反，在等密度梯度离心中，使用的密度足以阻止颗粒移动的密度，当颗粒达到与本身密度相同的密度区时就会停留在该区域。

4. 以蔗糖为介质的密度梯度离心又叫差速密度梯度离心。

5．CsCl密度梯度离心又称等密度梯度离心。

6．CsCl密度梯度离心法分离纯化样品时，样品要和CsCl混匀后分装。离心时，样品中不同组分因重力的不同而停留在不同区带。

7．提高显微镜的分辨率，可通过缩短波长，或给标本染色。

8．在光学显微镜下观察到的细胞结构称为亚显微结构，在电子显微镜下观察到的结构称为超显微结构。9．为了使光学显微镜或电子显微镜标本的反差增大，可用化学染料对标本进行染色。

11．贴壁生长的细胞呈单层生长，且有接触抑制现象。

12.癌细胞的培养，也是单层生长，但没有接触抑制现象。

13．生物样品的电镜分辨率通常是超薄切片厚度的1/10，因而切得越薄，照片中反差也越强。

14．用Triton等去垢剂可以抽提细胞中的微管、微丝等蛋白质结构。

15．淋巴细胞在体外培养时是以贴壁的方式进行生长。

16.相差显微镜可用来观察活细胞和未经染色的标本。

17．细胞匀浆离心时，较小的细胞器经受较小的摩擦，因而比更大的细胞器更快沉淀。

三、选择题

1．通过选择法或克隆形式从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的细胞群体称作（）

A．细胞系B．细胞株C．细胞库D．其他

2．观察活细胞的显微结构时，最好用（）

A．荧光显微镜B．相差显微镜C．扫描电镜D．透射电镜

3. 研究DNA在细胞中的代谢，常用的同位素标记物有( )。

A.14C-戊糖

B.32P-磷酸

C.15N-鸟嘌呤

D.3H-胸腺嘧啶

4.在细胞培养的研究中，已知细胞培养液与未知细胞培养液的主要区别是( )。

A.未知培养液是细胞培养研究中最近才发展起来的技术

B.未知培养液完全是人工制造的

C.已知培养液包括血清、淋巴因子和其他来自生物体的流质体

D.已知培养液不含血清、淋巴因子和其他来自生物体的流质体

5、使用氯化钯密度梯度离心法，其目的是（）

A、通过密度梯度来维持重力的稳定性，防止物质对流

B、用来分离生物分子和细胞亚显微结构

C、防止生物大分子凝聚沉淀

D、以上都不对

细胞融合是一个复杂的过程，在此过程中（）

A、PEG可以诱导融合

B、用活的仙台病毒可以促进融合

C、不会形成异核体

D、只有同类细胞才能融合

6、提高一般光学显微镜的分辨能力，常用的方法有（）

A、利用高折射率的介质（如甘油）

B、调节聚光器，加红色滤光片

C、用荧光抗体示踪

D、将标本染色

7、细胞融合的诱导剂主要有（）

A、PEG（聚乙二醇）

B、TMV（烟草花叶病毒）

C、亚硝酸

D、PHV（植物凝集素）

8、流式细胞仪或流式细胞分选仪能快速测定细胞的下列哪些参数（）

A、DNA含量

B、RNA含量

C、蛋白质含量

D、细胞体积

9、在包埋-去包埋超薄切片电镜技术中，（）不正确

A、不用重金属染色

B、分辨率高

C、没有包埋剂存在

D、要用Triton去包埋

10、下列最不可能成为原代细胞培养的细胞来源是（）

A、胚胎组织

B、活跃生长的恶性肿瘤组织

C、成年鼠脑组织

D、植物原生质体

11、单个植物细胞在体外经过诱导并培养成为完整小植株的实验证明了（）

A、细胞是构成有机体的基本单位

B、一切有机体均来自于细胞

C、细胞是有机体生长发育的基础

D、细胞具有遗传的全能性

12、光学显微镜有一个放大率为40的物镜和放大倍数为10的目镜，成像的总放大倍数是（）

A、40×

B、50×

C、400×

D、450×

13、下列哪项与显微镜能达到的分辨率无关？