帕珠沙星对映体的手性流动相添加剂HPLC法拆分
液相色谱手性物质分离工作总结
THF，MtBE，CHCl3，CH2Cl2 乙酸乙酯，1,4-二氧环乙烷，丙酮, 甲苯（紫外吸收强）
液相色谱手性物质分离工作总结
方法步骤： • 了解待分离化合物样品结构信息 • 了解化合物反相色谱信息 • 样品前处理 • 选择合适的手性固定相（手性分析柱） • 优化流动相，柱温
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纤维素三（3,5-二甲苯基氨基甲酸酯）
淀粉三[（S）-α-甲基苯基氨基甲酸酯] 淀粉三（3,5-二甲苯基氨基甲酸酯）
纤维素三（4-甲基苯基甲酸酯）
含有芳香基、酰胺基、羰基、 硝基、氨基、磺酰基、氰基、 羧基、羟基等化合物的分离， 及具有不对称点的位阻大的 化合物的分离
液相色谱手性物质分离工作总结
手性固定相分类
• 刷（Brush）型或称为Prikle型 • 聚合物固定相（如纤维素、淀粉，合成的手性聚
合物） • 大环手性固定相（环糊精、手性冠醚、大环抗生
素） • 蛋白质（Protein）型 • 配体交换（Ligand exchange）型 • 分子印迹固定相
液相色谱手性物质分离工作总结
拆分 1974年Blaschke：由光学活性单体合成出用手性LC的手性聚合物 1975年Gram等：用手性冠醚发展出主-客体色谱 1979年Pirkle和House：合成出第 一个硅胶键合手性固定相，并应用于手
性LC分离 1979年Okamoto等：合成出手性LC的螺旋形聚合物 1982年Allenmark等：把琼酯键合的BSA用于手性LC 1983年Hermansson：把硅胶键合的a1-酸糖蛋白用于手性拆分 1984年Armstrong和DeMond：制备出硅胶键合环糊精固定相
要大于1%，且要有空白对照。 3. 也可以先以少量DMSO，DMF，CHCl2溶解，然后再用
手性化合物的拆分技术
手性化合物的拆分技术研究进展许多药物具有光学活性。
一般显示光学活性的药物分子，其立体结构必定是手性的，即具有不对称性。
手性是指其分子立体结构和它的镜像彼此不能重合。
互为镜像关系而又不能重合的一对分子结构称为对映体。
虽然对映异构体药物的理化性质基本相同，但由于药物分子所作用的受体或靶位是由氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等，后者对与之结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求。
因此，对映异构体在动物体内往往呈现出药效学和药动学方面的差异。
鉴于此，美国食品药品监督管理局规定，今后研制具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分结果，欧盟也提出了相应的要求。
因此，手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。
1.生成非对映体拆分此方法是利用外消旋混合物与手性试剂反应后生成有不同性质的非対映体，从而利用生成物的不同物理性质（溶解度、蒸汽压、结晶速率等）将其分离，再将分离后的物质分别还原成之前的対映体。
还可以使用拆分剂家族代替单一拆分剂进行拆分，所谓拆分剂家族是指有类似结构的2~3个手性剂拆分剂。
组合拆分提高了产品收率和纯度。
2.动力学拆分利用两个対映体和手性试剂发生反应的速度不一样，在混合物中添加不足量的手性试剂。
一个対映体与手性试剂结合，从而得到纯的反应慢的対映体。
可以分为经典动力学拆分和动态动力学拆分，动态动力学拆分是指将经典动力学拆分和底物消旋化相结合的拆分方法，理论产率可以达到100%。
底物消旋化分为化学消旋化和酶消旋化，由于酶消旋化具有操作条件温和、产率高、副反应少等优点而具有广泛的工业应用价值[4]。
3.液膜拆分将具有手性识别功能的物质溶解在溶剂中制备液膜，利用内外向间推动力（浓度差、pH 差等）使待分离物中的某种物质得到富集。
液膜分离方法又分为本体液膜、乳化液膜、支撑液膜3种类型。
4.固体膜拆分此方法是基于対映体间亲和力的差异，利用推动力（浓度差、压力差、电势差）进行分离。
根据膜是否具有选择性又分成了两类，但是不具有手性选择性的膜分离时还需要有辅助的手性选择环境。
氨基酸对映体的手性拆分
氨基酸对映体的手性拆分氨基酸对映体的手性拆分??氨基酸对映体的分离是生命科学的基础，在蛋白质多肽的研究、有机化学中的不对称合成以及医药、食品、卫生等领域都具有重要意义。
近年来，光学纯氨基酸在国际市场上的应用越来越广，如作为手性药物前体、保健品、氨基酸食品、化妆品等。
1分离方法分离氨基酸对映体的方法主要有高效毛细管电泳(HPCE)法、高效液相色谱(HPIC)法、薄层色谱(TLC)法和气相色谱(GC)法等。
氨基酸对映体在色谱分离前通常需要进行衍生化，衍生化的氨基酸对映体更适合于色谱分离，而且还能提高样品的检测灵敏度。
1．1高效毛细管电泳法(HPCE)高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展起来的一种新的分析技术，其特点是分离效率高(理论塔板数＞105?06)、灵敏度高(可达10-19?021?mol)、应用范围广(从生物大分子到小分子、离子)、分析时间短(一般数分钟)、需要样品体积小(1?50nl)、分离模式多。
目前常用的手性氨基酸分析模式为毛细管区带电泳(CZE)和胶束电动色谱(MEKC)。
1．2高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。
高效液相色谱分离手性物质的特点是灵敏、快速、分辨率高、重复性好、处理量大等。
HPLC广泛用于手性氨基酸的拆分。
1．3薄层色谱法(TLC)薄层色谱法作为色谱分析的一个重要分支，具有快速、分离效率高、灵敏度高(薄层层析可以检出0．01靏的物质)以及操作方便、无需任何设备、应用面广和既可进行定性鉴定亦可进行定量测定等优点，无须对样品进行任何预处理即可取得较好效果。
早在20世纪中叶，Kotake和Dalgliesh就利用薄层色谱法成功地拆分了手性氨基酸对映体。
1．4气相色谱法(GC)气相色谱分析是一种高效能、选择性好、灵敏度高、操作简单、应用广泛的分析、分离方法。
HPLC手性流动相添加剂法拆分盐酸美西律对映体
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相添加 剂法 拆分盐酸美西律对 映体 的方法 。结论 ： 此方法简便 、 快速 ， 分离 度好 。 关键 词 ： Ｐ Ｃ； 动相 添加剂 ； 酸美西律 ； 映体拆分 ；羟丙基 一ｐ一环糊精 ＨＬ 流 盐 对
中 图 分 类 号 ： ６ ２６ ０ ５ ．３ 文 献标 识 码 ： Ａ
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高效液相色谱法测定人血浆中帕珠沙星浓度
高效液相色谱法测定人血浆中帕珠沙星浓度作者：许建平来源：《中外医学研究》2011年第20期【摘要】目的建立HPLC-紫外法检测人血浆中帕珠沙星浓度的方法。
方法采用25%高氯酸溶液沉淀蛋白，分析柱为CNWSILC18（4.6 mm×100 mm），流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液-乙腈-三乙胺(86∶13.5∶0.5)，pH=3.5，紫外测定波长248 nm。
结果帕珠沙星浓度在0.08~30.96 mg/L呈线性关系，r=0.9998（n=6）；萃取回收率高于88%，方法回收率98%~101%，日间日内精密度均小于6%。
在-40 ℃冰箱保存15 d或冻融2次稳定性较好。
结论本方法简便灵敏，适合用来检测血浆中帕珠沙星浓度。
【关键词】帕珠沙星；高效液相色谱；紫外检测High performance liquid chromatography (HPLC) to human plasma concentration of pearl sand pato XU Jian-ang,Hengyang 421002,China【Abstract】ObjectiveTo establish HPLC ultraviolet method to detect human plasma concentrations of pearl sand pato method.MethodsUsing 25% high chlorine acid solution protein deposition, analysis for CNWSILC18 (4.6 mm column 100mm),mobile phase (mol/L for 0.02 sodium dihydrogen phosphate solution-acetonitrile-three procedures (86∶13.5∶0.5),pH= 3.5,uv wavelength 248nm determination.ResultsPalmer bead uptake in 30.96 0.08-concentration of the linearmg/L,r=0.9998(n= 6);Extraction recovery higher than 88%, method,daytime 101% recovery98-are less than 6% within precision.In-40 ℃ cross-matched 15d or freeze-thaw 2 times stability isgood.ConclusionThis method is suitable for sensitive,and Jane pato in plasma pearl sand detection concentration.【Key words】Palmer bead sand;High performance liquid chromatography (HPLC);Ultraviolet detection甲磺酸帕珠沙星(pazufloxacin，简称帕珠沙星)是第三代喹诺酮类抗菌药，其作用机理为抑制细菌DNA双螺旋结构形成，导致细菌无法分裂增殖而死亡。
HPLC手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体
第27卷第4期 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报 Vol.27,No.4 2011年7月 Journal of Qiqihar University July,2011HPLC 手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体卢建国1，王立艳2，苏立强2（1．黑龙江农垦职业学院，哈尔滨150025；2. 齐齐哈尔大学 化学与化学工程学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006）摘要：建立了以羧甲基-β-环糊精为手性流动相添加剂，在反相液谱条件下拆分巴氯芬对映体的方法。
研究了手性添加剂的种类及浓度、流动相组成、pH 值及流速等因素对拆分的影响。
流动相为甲醇、乙腈、水，体积比为90︰5︰5，其中含2.00 g/L CM-β-CD，pH 值5.95，流速0.60 mL/min，检测波长231 nm，分离度为1.31。
该方法简便、快速、相对偏差小。
关键词：羧甲基-β-环糊精；流动相添加剂；高效液相色谱法；巴氯芬；对映体中图分类号：O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：1007-984X(2011)04-0060-03巴氯芬（化学名β-4-氯-γ-氨基丁酸）是应用于临床的选择性GABA B受体激动剂，其化学结构见图1。
目前，临床使用的仍是巴氯芬外消旋体。
据文献报道R(-)-巴氯芬的生理活性是S（+）-巴氯芬的100倍[1]。
现有拆分方法有毛细管电泳法[2]、柱前衍生化法[3]和手性固定相法[4]，但用HPLC 手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体还未见报道。
本文以羧甲基-β-环糊精（CM-β对映体分离度达1.3，此法无需昂贵的手性柱，也无需繁琐的柱前衍生化，方法简便快速，相对标准偏差小。
1 实验部分1.1 仪器与试剂高效液相色谱（HPLC）系统（大连依利特分析仪器有限公司）：P200Ⅱ高压恒流泵、UV200Ⅱ紫外可变波长检测器、Echrom98色谱工作站；AS3120超声波清洗器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）。
甲醇、乙腈（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心）；β-环糊精（β-CD，中国医药集团上海化学试剂公司）；羧甲基-β-环糊精（实验室自己合成）；巴氯芬原料药（武汉祥和精细化工有限公司）。
手性药物分离CRD、CMP和CSP方法的特点
试述手性药物分离CRD、CMP和CSP方法的特点。
HPLC用于手性分离概括起来可分为两大途径：间接法和直接法。
其中直接法包括手性流动相添加剂法（CMP）和手性固定相法（CSP），间接法（CDR)又称为非对映体拆分法或柱前手性衍生化法。
间接法（CDR)，是手性化合物对映体在分离之前把手性药物对映体混合物在预处理液中进行柱前衍生化，形成一对非对映异构体，非对映体对与固定相之间的键合力如偶极-偶极、电荷转移、氢键、疏水性不等，产生差速迁移而被分离。
其优点在于：可采用通用的非手性柱分离；通过衍生化可提高检测灵敏度；分离条件简单；分离效果好。
而其缺点在于：要有可被衍生化的基团；要有高光学纯度的手性试剂；对个对映体衍生化率速和平衡常数应一致；衍生化和色谱过程中不能发生消旋化。
手性流动相添加剂法（CMP）是将手性试剂加到LC流动相中，与手性药物生成可逆的非对映体复合物，根据复合物的稳定性，在流动相中的溶解性和与固定相的键合力差异，于非手性固定相上分离对映体。
优点是：不需昂贵的手性柱，亦无须进行柱前衍生，手性添加剂可视要求而更换，可变范围较宽，使用比较方便。
缺点是：可拆分的化合物范围有限；某些添加剂不够稳定且往往会干扰测验。
手性固定相法（CSP）是将手性试剂化学键合到固定相上制成手性柱，外消旋体中的一个手性物质与手性固定相发生作用，生成不稳定的短暂复合物，而两者在固定相中的保留时间不同，从而达到分离的目的。
优点是：能广泛适用于各类化合物，适于常规及生物样品的分析测定；除非必须衍生化，否则无需高光学纯度试剂；样品处理步骤简单；制备分离方便，定量分析的可靠性较高；缺点是：样品有时也须作柱前衍生（但不一定是手性衍生化试剂）；对样品结构有一定限制，其适用性尚不及普通HPLC固定相（包括正相和反相）那样广泛。
该方法是目前认为非常简单有效，而且应用最为广泛的方法，迄今为止，CSP柱商品已有40多种，但价格大多昂贵，尚未有一种具有类似ODS柱的普遍适用性。
手性药物分离分析技术概况
手性药物分离分析技术概况手性药物是指具有立体异构性质的药物，它们的左右对称体被称为对映体。
由于对映体的结构和性质存在差异，它们对体内的相互作用和药效也可能有显著影响。
因此，对手性药物进行分离分析是药物研究和制备过程中非常重要的一环。
手性药物的分离分析技术包括物理分离方法和化学分析方法。
物理分离方法是基于对映体之间物理性质的差异进行区分，常用的技术包括手性色谱、手性电泳和手性萃取。
化学分析方法则是通过制备具有对映体选择性的试剂进行分析，包括手性固相微萃取、手性气相色谱和核磁共振等。
手性色谱是分离分析手性药物常用的技术之一，包括手性高效液相色谱（HPLC）、手性毛细管电泳（CE）和手性薄层色谱（TLC）。
其中，HPLC是最常用的手性色谱技术。
它利用手性色谱柱上的膜相对对映体进行区分，可分离不同的对映体。
HPLC分离手性药物的条件包括手性色谱柱类型、流动相组成和温度控制等。
手性电泳是基于电泳效应进行分离，包括毛细管区带电泳和开管电泳。
手性电泳技术能够快速分离对映体，具有高效、高分辨率和低样品消耗的特点。
手性萃取是通过特定的手性选择性试剂将对映体分离出来，常用的手性萃取试剂包括环糊精和几丁聚糖等。
手性萃取技术通常结合其他分析方法进行测定。
手性固相微萃取是一种基于固相萃取原理的手性分离技术，它利用手性固相微柱提取对映体物质，再通过其他方法进行分析。
它具有简单、灵敏和高效的特点。
手性气相色谱是通过将样品分离的物质与手性气相色谱柱上的手性烷基硅氧烷相互作用，达到对映体的分离。
手性气相色谱具有高分辨率、高灵敏度和高选择性。
核磁共振是通过核磁共振技术对手性药物进行分析，其中最常用的是氢核磁共振技术。
核磁共振技术能够提供对映体的结构、构象和化学位移等信息。
同时，光谱仪也可以通过测定两个对映体的旋光度差异进行分析。
总之，手性药物分离分析技术是药物研究和制备过程中必不可少的技术。
通过选择适当的分离技术，可以有效地分离对映体，获得具有高纯度的手性药物，并研究其生物活性和作用机制。
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帕珠沙星对映体的手性流动相添加剂HPLC法拆分
邢玉仁;孙玲;张广洲;张岱州
【期刊名称】《中国医药工业杂志》
【年(卷),期】2004(35)8
【摘要】建立了拆分帕珠沙星对映异构体的HPLC手性流动相法。
使用ODS柱,流动相为乙腈- L-苯丙氨酸手性溶液(5∶95),检测波长320nm。
左旋体和右旋体色谱峰的保留时间分别为30.2和33.8min。
【总页数】2页(P482-483)
【关键词】帕珠沙星;对映体拆分;高效液相色谱;手性流动相
【作者】邢玉仁;孙玲;张广洲;张岱州
【作者单位】山东省医药工业研究所
【正文语种】中文
【中图分类】TQ460.72;O657.72
【相关文献】
1.HPLC手性流动相添加剂法拆分美索巴莫对映体 [J], 翟明翚;苏立强;王颖;张鹏旭
2.RP-HPLC手性流动相添加剂法拆分甲磺酸帕珠沙星对映体的研究 [J], 张哲峰;杨更亮;梁贵键;陈义
3.HPLC手性流动相添加剂法拆分盐酸美西律对映体 [J], 高玉玲;吴照义;苏立强
4.HPLC手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体 [J], 卢建国;王立艳;苏立强
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