北极海泥来源抗菌活性真菌的筛选及菌株H5的初步研究

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211050068_海洋真菌Pestalotiopsis_sp.甾体化合物的分离纯化及抗肿瘤活性研究

引用格式：雷辉, 夏童, 王佳女, 等. 海洋真菌Pestalotiopsis sp.甾体化合物的分离纯化及抗肿瘤活性研究[J]. 中国测试，2023,49(3): 60-64. LEI Hui, XIA Tong, WANG Jianü, et al. Separation and purification of sterols from marine fungus Pestalotiopsis sp. and study on its anti-tumor activity[J]. China Measurement & Test, 2023, 49(3): 60-64. DOI: 10.11857/j.issn.1674-5124.2021120105海洋真菌Pestalotiopsis sp.甾体化合物的分离纯化及抗肿瘤活性研究雷辉1，夏童2，王佳女2，熊霞2，刘利2(1. 西南医科大学药学院，四川泸州 646000; 2. 西南医科大学附属医院，四川泸州 646000)摘　要: 为了从海洋真菌次生代谢产物中获得抗肿瘤药物，该文对海洋真菌Pestalotiopsis sp.中的甾体化合物进行分离纯化、结构鉴定和抗肿瘤活性研究。

利用硅胶柱色谱，Sephadex LH-20 柱色谱等技术，从固体大米培养基发酵产物中分离纯化得到甾体化合物，鉴定为：4,4-dimethyl-5α-ergosta-8,24(28)-dien-3β-ol ，该化合物为首次从该属种分离获得，命名为：LH-1。

采用MTT 方法对该化合物进行体外细胞毒性测试，发现其可以选择性抑制肿瘤细胞的生长（IC 50：8.3 µmol/L ），而对正常细胞没有明显的杀伤作用。

该研究可为微生物来源的抗肿瘤先导化合物的发现提供实验基础。

关键词: 拟盘多毛孢属; 甾体; 结构鉴定; 抗肿瘤活性中图分类号: R932文献标志码: A文章编号: 1674–5124(2023)03–0060–05Separation and purification of sterols from marine fungus Pestalotiopsis sp.and study on its anti-tumor activityLEI Hui 1, XIA Tong 2, WANG Jianü2, XIONG Xia 2, LIU Li 2(1. School of Pharmacy, Southwest Medical University, Luzhou 646000, China;2. the Affiliated Hospital of Southwest Medical University, Luzhou 646000, China)Abstract : To obtain antitumor drugs from secondary metabolites of marine fungi, the sterol constituents of marine fungus Pestalotiopsis sp. and its antimelanoma activity were studied. One compound was isolated from the extracts of solid rice medium by means of chromatographic techniques, including silica gel column and Sephadex LH-20 column chromatography. The structure was identified as 4, 4-dimethyl-5α-ergosta-8, 24 (28)-dien-3β-ol, which was isolated from the marine fungus Pestalotiopsis sp. for the first time and was named LH-1. The anti-tumor activities of LH-1 was screened by using the MTT. The result showed that compound LH-1exhibited selective inhibitor activities against anti-tumor cells and not toxicity to normal cells, with IC 50 value of 8.3 µmol/L. This study provides an experimental basis for the discovery of antitumor lead compounds from microorganisms.Keywords : Pestalotiopsis sp.; sterols; structure elucidation; anti-tumor activity收稿日期: 2021-12-27；收到修改稿日期: 2022-02-20基金项目: 四川省科技厅项目（2020YJ0191）；国家自然科学基金青年项目（82003716）作者简介: 雷　辉（1979-），男，河南信阳市人，讲师，硕士生导师，博士，研究方向天然产物分离、纯化及活性筛选。

海洋来源真菌中二个聚酮类化合物的NMR研究

海洋来源真菌中二个聚酮类化合物的NMR研究刘涛;李占林;王宇;田黎;裴月湖;华会明【摘要】采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及重结晶等方法,从海洋来源真菌Penicillium sacculum 发酵液的乙酸乙酯萃取部分中分离得到2个聚酮类化合物:Griseophenone B(Ⅰ)和Griseophenone C(Ⅱ),通过1D NMR和2D NMR( HSQC,HMBC)等技术确定了化合物的结构.首次报道了化合物Ⅰ的13CNMR数据以及化合物Ⅱ的核磁共振数据,并利用2D NMR技术对2个化合物的核磁共振信号进行了归属.化合物Ⅱ为首次从该种真菌中分离得到.%Two polyketides.Griseophenone B( I ) and Griseophenone C(II ),were isolated from the ethyl acetate part,which was extracted from the fermentation broth of marine-derived fungus Penicillium sacculum,by silicagel,Sephadex LH-20 column chromatography and recrystallization.The structures of the two compounds were determined by ID NMR and 2D NMR(HSQC,HMBC).The 13CNMR data of compound I and NMR data of compound II were reported firstly,and the chemical shifts were assigned using 2D NMR pound II was isolated firstly from Penicillium sacculum.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2012(029)005【总页数】4页(P81-84)【关键词】核磁共振;信号归属;Penicillium sacculum;次级代谢产物;聚酮【作者】刘涛;李占林;王宇;田黎;裴月湖;华会明【作者单位】中国医科大学药学院,辽宁沈阳 110001;沈阳药科大学创新药物研究与设计教育部重点实验室,辽宁沈阳 110016;沈阳药科大学创新药物研究与设计教育部重点实验室,辽宁沈阳 110016;国家海洋局第一海洋研究所,山东青岛266061;4.青岛科技大学,山东青岛 266042;沈阳药科大学创新药物研究与设计教育部重点实验室,辽宁沈阳 110016;沈阳药科大学创新药物研究与设计教育部重点实验室,辽宁沈阳 110016【正文语种】中文【中图分类】O641海洋微生物资源丰富，独特的代谢和生理特性使其能够产生化学结构特殊的次级代谢产物，特别是其中结构新颖、具有抗肿瘤作用的代谢产物越来越受到国内外科研工作者的重视[1，2]。

海带藻际微生物抗菌活性及其多样性的初步研究

制的研究和防治［。２随着藻际微生物及藻际微环境】的提出ｌ，发现藻际微环境的平衡对于维持海藻的６】正常生长具有至关重要的影响，某些藻类对藻际微
带病烂机制，同时也为从海洋微生物中寻找抗菌先
摘要：从浙江台州海域健康海带、病烂海带ａｎｒａｏｉａ及其周围海水中分离纯化海带藻际微生物，ｍｉａｉｊｐｎｃ）ａ利用双层琼脂扩散法对获得的菌株进行抗菌活性筛选，比较活性菌株与来源的相关性，并对具有抗菌活性
第３卷第６５期
２１０１年１月１
水生生物学报
ＡＣ．１ＨＹＤＲ００ＬＡＢ１０ＧＩＡＩＣＡＣＳＮＩ
ＶＯ１．３５，ＮＯ．６
ＮＯＶ．，２０１１
ＤＯＩ０３２／ＰＪ１３．０１０９２：１．７４Ｓ．０５２１．０７
的菌株进行１ＳｒＮＡ系统发生学分析。６Ｒ结果显示，在分离的１３株海带藻际微生物中，有４４２株细菌具有抗
菌活性，其中来源于健康海带和海水的活性菌株比例（５３％和２％）于来源于病烂海带的细菌（３。其中９大２％）对１６株具有广谱抗菌活性的菌株进行的１ＳｒＮ系统发生学分析显示，分别属于Ｐｅｄａｔｒｍｏａ、６ＲＡｓｕｏｌｏｎｓｅ
中图分类号：３．Ｑ９８８文献标识码：Ａ文章编号：００３０（８１

海洋多黏类芽胞杆菌可湿性粉剂的研制

海洋多黏类芽胞杆菌可湿性粉剂的研制
随着工业的快速发展和人类生活水平的提高，环境污染日益严重，尤其是水质污染已成为我们重要的问题之一。

而海洋多黏类芽胞杆菌是一种可生长在海洋环境中的细菌，具有很强的污水降解作用，是目前环保领域研究的热点之一。

该研究旨在研制一种海洋多黏类芽胞杆菌可湿性粉剂，以提高其应用的便捷性和稳定性。

1. 实验材料
（1）菌株：从海洋环境中分离得到海洋多黏类芽胞杆菌。

（2）培养基：Luria-Bertani（LB）培养基。

（3）发酵罐：采用5L反应釜。

（4）发酵条件：30℃，200rpm。

（5）提取剂：正己烷、甲醇、无水乙酸、无水钠硫酸。

2. 实验方法
（1）菌株的分离和纯化：将采集到的海洋样品接种到LB平板上，经过筛选和鉴定后得到纯化的海洋多黏类芽胞杆菌。

（2）菌株的培养：用LB培养基进行液体培养，取1L发酵液放入5L反应釜中，进行发酵。

（3）多黏类芽胞杆菌粉剂制备：发酵结束后，将菌液混合，进行采样、离心、冻干、研磨等步骤得到海洋多黏类芽胞杆菌可湿性粉剂。

（4）多黏类芽胞杆菌可湿性粉剂性质的分析：对多黏类芽胞杆菌可湿性粉剂进行性质分析，包括水溶性、存活率等。

3. 结果和分析
（2）菌株的培养：采用5L反应釜进行液态培养，通过一系列发酵条件的优化，最终得到海洋多黏类芽胞杆菌的满意产量。

4. 结论。

国家自然科学基金委员会生命科学部2016年度青年基金项目_0a55ef92_a4

第28卷第12期2016年12月V ol. 28, No. 12Dec., 2016生命科学Chinese Bulletin of Life Sciences文章编号：1004-0374(2016)12-1493-54国家自然科学基金委员会生命科学部2016年度青年基金项目DOI: 10.13376/j.cbls/20161861微生物学细菌基因组歧化和遗传界限的产生：新物种形成的分子基础唐　乐哈尔滨医科大学我国沿海盐田嗜盐古菌胞外蛋白酶多样性研究侯　靖江苏大学反硝化细菌的鉴定及其与胆固醇降解相关蛋白、基因的初探丁　滨浙江中医药大学大连新港石油污染海域沉积物中厌氧微生物种群和功能基因多样性与氮源响应规律研究陈　超大连民族大学苏云金芽胞杆菌晶胞粘连表型菌株资源及形成机制的多样性研究王月莹华中农业大学粪产碱菌杀线虫活性物质挖掘及作用线虫方式研究鞠守勇华中农业大学冰川稀有低温细菌Cryobacterium物种多样性、分类学及冷适应性研究刘　庆中国科学院微生物研究所捕食青枯菌的粘细菌资源分离与功能评价李安章广东省微生物研究所环境因子对花生根瘤菌遗传多样性和分布的影响机制研究李　岩中国科学院烟台海岸带研究所家蚕病原细菌多样性、分布规律及其与蚕体共生菌关系研究周洪英湖北省农业科学院杏褪绿卷叶植原体宿主植物内生细菌的群落变化及与宿主抗/感病性的相关性研究韩　剑新疆农业大学竹虫肠道微生物群落结构及纤维素酶基因多样性分析王彦伟农业部沼气科学研究所木质纤维素水解残渣厌氧消化过程中微生物群落的组成与功能分析汤晓玉农业部沼气科学研究所海绵复杂共生体中放线菌新分类单元及新活性物质发现李　蕾上海交通大学贵州喀斯特洞穴放线菌多样性及生物活性菌株筛选房保柱中山大学放线菌中五角多酚类化合物的基因组挖掘刘力伟中国科学院微生物研究所疣孢菌CRISPR/Cas9基因组编辑技术的建立和评价谢　峰中国科学院微生物研究所3种黄连属濒危植物内生放线菌多样性及其抗菌消炎活性初探田守征云南中医学院中国丽赤壳属Calonectria种类及系统发育研究张云霞仲恺农业工程学院东北地区红菇真菌子实体及其地下菌根分子生态学研究冀瑞卿吉林农业大学山东苹果主产区红富士果面酵母菌多样性及对苹果炭疽病的生防潜能陈　汝山东省农业科学院中国毛霉属系统发育研究及DNA条形码筛选王亚宁中国科学院微生物研究所壳二胞属物种分类研究陈　倩中国科学院微生物研究所食药用菌真菌病害病原鉴定及系统分类研究孙敬祖中国科学院微生物研究所七种鞘翅目昆虫共生蛇口壳目真菌资源的分类与分子系统发育研究殷明亮广东省微生物研究所木兰科植物的丛枝菌根真菌多样性及协同进化特征杨安娜安徽师范大学我国海洋性冰川低温真菌多样性研究王曼曼河北大学云芝新颖苔色酸木糖苷衍生物的糖基化机制研究朱丽萍青岛农业大学中国芒果炭疽菌多样性及致病力变异分子机制的研究李其利广西壮族自治区农业科学院赤水河流域枯枝暗色丝孢菌Dematiaceous hyphomycetes多样性研究李小霞遵义师范学院鹅膏科系统发育框架构建及营养方式演化研究蔡　箐中国科学院昆明植物研究所西南地区葡萄座腔菌科四个重要属的分类和分子系统学发育研究刘建魁贵州省农业科学院严紧反应下乙酰化修饰对大肠埃希菌DnaA降解调控的研究张秋芬上海交通大学蓝细菌能量-还原力代谢重平衡新策略及其生理影响研究栾国栋中国科学院青岛生物能源与过程研究所海洋细菌胞外多糖 EPS273 抑制铜绿假单胞菌生物膜形成的分子机理研究吴仕梅中国科学院青岛生物能源与过程研究所1494生命科学第28卷里氏木霉sorbicillinoid类次级代谢产物生物合成机制的研究齐飞飞中国科学院青岛生物能源与过程研究所枯草芽胞杆菌产生羊毛硫细菌素subtilomycin促进其在植物体内定殖的机制邓　运华中农业大学沙雷氏菌属新种YD25中环脂肽类化合物与灵菌红素生物合成的共调控机制研究苏　春陕西师范大学青枯菌生物素合成途径中一种新型甲酯庚二酸单酰ACP酯酶的鉴定及其生物学功能研究贾　佳南京医科大学硫转移蛋白在嗜酸热硫氧化古菌Metallosphaera cuprina硫传递网络中的功能研究刘丽君西安医学院希瓦氏菌中D型β-内酰胺酶诱导表达及其耐药机制的研究音建华南昌大学酿酒酵母生物合成中长链二元酸的动态调控及其作用机制韩　丽郑州轻工业学院土壤杆菌胞外水溶性β-1,3-葡聚糖的生物合成机制研究程　瑞南京理工大学基于AFM力谱与SPR技术的启动子强度高效表征策略的研究张晓娟江南大学P450单加氧酶AveE催化阿维菌素呋喃环形成的机制研究马　莉中国科学院青岛生物能源与过程研究所丁香假单胞菌海藻糖合成与抗水分胁迫相关性研究余希岚湖北大学解脂耶氏酵母中蛋白激酶Snf1参与氮饥饿启动赤藓醇合成的调控机制刘晓燕淮阴师范学院转录因子RpoD调控运动发酵单胞菌乙醇耐受性的机制研究谭芙蓉农业部沼气科学研究所酮基合酶MarO催化maremycin中哌嗪二酮的酰胺键形成和成环释放机制黄婷婷上海交通大学多模块持续性内切纤维素酶CcCel9A的持续性驱动力研究张坤迪中国科学院青岛生物能源与过程研究所里氏木霉外切纤维素酶CBH I的水解机理研究和理性设计王业飞中国科学院青岛生物能源与过程研究所单酶催化多步连续反应中底物结合模式研究姚明东天津大学灰盖鬼伞胞外β葡聚糖苷酶BGL2不同变体产生机制和生理功能的研究刘中华南京师范大学蛹虫草隐花色素Cry-DASH功能及作用机制王　芬中国科学院微生物研究所酶分子对黄姜细胞壁降解及皂苷释放的影响机理研究魏　蜜湖北工程学院基因内置特征影响密码子偏好对重组蛋白表达调控的研究周　勉华东理工大学大肠杆菌脂多糖转运关键蛋白LptFG的功能研究向泉桔四川农业大学金黄色葡萄球菌七异戊二烯二磷酸合成酶SaHepPPs晶体结构和抗菌药物开发李　倩中国科学院天津工业生物技术研究所以产油微藻海洋微拟球藻为模式的二酰甘油酰基转移酶功能机制研究辛　一中国科学院青岛生物能源与过程研究所聚酮合酶pks7和pks11对海洋草酸青霉合成Oxalicumone A及其环境适应性的调控机制研究王　洁中国科学院南海海洋研究所大肠杆菌中galE转录暂停调控下游ρ依赖型转录终止的分子机制王　璕华中农业大学XsfP催化的膜内受控蛋白水解在黄单胞菌致病过程中的调控功能邓超颖中国科学院微生物研究所鞘脂合成调控因子Orm1在球孢白僵菌中的功能鉴定及其致病机理研究王娟娟济南大学糖多孢红霉菌中与红霉素合成相关调控因子间的干扰机制研究汪焰胜安徽大学特异腐质霉转录因子HiProA调控纤维素酶表达机制的研究徐欣欣中国农业科学院生物技术研究所利用代谢拨动开关调控大肠杆菌芳香型氨基酸的合成古鹏飞济南大学CRISPR/Cas9介导的基因组进化构建固态发酵耐热酵母及机理研究李鹏松清华大学代谢工程改造枯草芽孢杆菌合成N-乙酰神经氨酸关键问题的研究刘延峰江南大学米曲霉Sedolisin家族基因相关联的外源蛋白表达分泌机制的研究朱　琳江苏大学L-异亮氨酸合成途径基因在谷氨酸棒杆菌中的模块化协调表达和代谢调控机制研究尹良鸿浙江农林大学酿酒酵母合成灵芝酸类似物的研究肖　晗上海交通大学聚3-羟基丁酸-4-羟基丁酸酯的全新合成代谢通路的构建与优化尹　进清华大学二硫吡咯酮生物合成途径中N4甲基转移酶的表征及组合生物合成应用黄　胜湖北民族学院大肠杆菌中植物CPR:P450模块化自主共价连接系统的构建及其在咖啡酸合成中的应用李宜奎江苏省中国科学院植物研究所胆囊癌微环境菌群结构特征和功能学的初步研究吴文广上海交通大学国家自然科学基金委员会生命科学部2016年度资助项目第12期1495单细胞水平高产虾青素雨生红球藻高通量筛选新方法研究王喜先中国科学院青岛生物能源与过程研究所基于功能活性可视化追踪的芳烃降解微生物高通量筛选方法方　云广东省微生物研究所微生物漆酶数据挖掘及底物杂泛性分析张寅良安徽大学亚硝酸盐还原酶转录调控蛋白NsrR去阻遏机制研究令桢民兰州大学异丙甲草胺脱烷基酶基因的克隆及脱烷基酶特性和功能的研究陈　青枣庄学院面向人工定向重构纤维素菌群的共生分子机理研究杜　然清华大学迪茨氏菌转录调控蛋白AlkX对烷烃降解过程的全局调控研究梁洁良中山大学GDSL酯酶的定向进化与分子改造研究丁俊美云南师范大学整合宏组学方法研究番茄秸秆堆肥生境中的关键微生物及其功能张小梅青岛农业大学假单胞菌CNB-12分解代谢3-氯硝基苯的机理研究闵　军中国科学院烟台海岸带研究所假单胞菌LY1降解3-吲哚乙酸上游途径分子机理研究于　浩青岛农业大学一种二苯醚类污染物直接开环角度双加氧酶的分子机制研究蔡　舒江苏省农业科学院根际促生解淀粉芽孢杆菌SQR9组氨酸激酶KinA-E响应的根系分泌物信号鉴定刘云鹏中国农业科学院农业资源与农业区划研究所膜囊泡介导Geobacter sulfurreducens胞外电子传递过程及机制刘　星福建农林大学短短芽孢杆菌Spo0A蛋白介导的生物膜调控通路中阻遏基因的功能分析侯启会山东农业大学高盐环境下盐单胞菌(Halomonas)降解偶氮染料的机制研究郭　光南京工程学院纳米氧化铝促海洋枯草芽孢杆菌抗菌物质合成机理研究于秀霞山东大学红树林湿地生态系统中MCG古菌mcrA基因的时空变化规律和环境效应研究潘　杰深圳大学基于秀丽隐杆线虫模型的抗菌性海洋益生菌筛选及其机理研究李英秀山东大学滇池水华中控藻菌的杀藻相关基因及其功能研究杨彩云西南大学太湖蓝藻群体颗粒附生细菌的宏基因组学研究张军毅东南大学稻田藻-菌生物膜中胞外聚合物对水体营养水平变化的响应机制刘俊琢中国科学院南京土壤研究所高原藏族人特异性皮肤菌群与紫外辐射适应关系研究曾　博四川农业大学学龄前儿童“口腔菌群年龄”的遗传基础和过程机制滕　飞中国科学院青岛生物能源与过程研究所地衣共生系统中地衣细菌群落结构及其功能研究司红丽山东师范大学广东省凡口铅锌矿矿山酸性废水中古菌的多样性与功能研究陈林兴中山大学鸡肠道微生物代谢黄曲霉毒素B1的分子机制研究汪玲玲华南农业大学西藏热泉环境栖热菌类群多样性及其生理生态功能研究周恩民中山大学中华蟾蜍蝌蚪肠道菌群的结构及其影响因素研究宋晓威信阳师范学院转录激活因子PilR在σ54调控水稻白叶枯病菌毒性中的功能研究余　超中国农业科学院植物保护研究所TLR介导的ATP释放在副猪嗜血杆菌感染上调IL-1β中的作用研究于　江山东省农业科学院分枝杆菌aceE基因影响细胞壁合成代谢的机制研究陈素婷首都医科大学碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌新优势克隆ST208毒力因子鉴定及功能研究陈　燕浙江中医药大学沙门氏菌毒素效应蛋白SifA C-端结构域毒力功能机制的研究赵伟栋新乡医学院MexS调控铜绿假单胞菌III型分泌系统分子机制的研究靳永新南开大学基于炭疽芽孢杆菌S-层蛋白自组装的双抗高灵敏检测纳米材料的研究王旭颖武汉血液中心c-di-AMP信号通路在炭疽杆菌致病机制中的功能研究胡　葭中国科学院武汉病毒研究所生物被膜在沙门菌逃逸肠黏膜树突状细胞免疫监视中的作用和机制阴银燕扬州大学结核分枝杆菌广谱胁迫蛋白Rv1996介导的异烟肼耐药机制研究胡新玲中国科学院微生物研究所一种肺炎链球菌磷壁酸合成相关蛋白的功能鉴定吴凯峰遵义医学院NO调控鲍曼不动杆菌多重耐药的机制研究邓珊珊成都医学院禾谷镰刀菌FgPrp6调控剪接体激活的作用机制研究金巧军西北农林科技大学高渗胁迫下应激活性蛋白激酶afSakA对黄曲霉毒素合成的调控机制研究袁　军福建农林大学低铁环境下白色念珠菌核质转运受体Nmd5调控转录因子Sef1异常核输出的分子机制研究黄新华中国科学院上海巴斯德研究所Fasciclin-1结构蛋白在红色毛癣菌生长发育和侵袭宿主细胞中的作用机制研究占　萍南昌大学生命科学第28卷1496白念珠菌灰菌细胞的菌丝生长调控机制研究管国波中国科学院微生物研究所水稻条纹病毒Pc2蛋白在病毒侵染介体中的功能研究赵淑玲扬州大学南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV) P7-1形成的管状结构进入细胞壁的机制及其在病毒运动网络中的功能谢　礼浙江省农业科学院反向长链非编码RNA调控NIA基因响应CMV侵染的机制研究赵建华中国科学院微生物研究所植物液泡脂质调控CMV病毒基因组复制的机制顾周杭浙江理工大学Dicer-2调控抗病毒Toll免疫通路的作用机制研究王赵玮武汉大学利用MDV载体递呈靶向ALV-J的CRISPR/Cas9系统预防MDV和ALV-J感染的研究李　凯中国农业科学院哈尔滨兽医研究所NS1蛋白与人核仁磷酸化蛋白1互作在A型流感病毒感染过程中的作用研究朱春玉辽宁大学乙型肝炎病毒HBx类泛素化Neddylation修饰的功能及生物学意义刘宁宁中国科学院微生物研究所Nrf2/ARE信号通路对RHDV感染中肝脏氧化应激的作用胡　波江苏省农业科学院汉滩病毒核衣壳蛋白核质转运信号的鉴定及其在病毒感染中功能的研究叶　伟中国人民解放军第四军医大学免疫缺陷病毒Vpx蛋白识别宿主CRL4 (DCAF1) E3泛素连接酶的作用机制研究魏　伟吉林大学新型EV71病毒抑制剂靶向病毒3D蛋白的作用机制及其抗病毒功能研究张　伟苏州大学乙型肝炎病毒C蛋白促进Src/PI3K/Akt通路介导的肝细胞周期进程及机制刘　伟三峡大学基于"HCV core-ZEB相互作用促进EMT"探讨HCV感染相关性肝癌的发生机制张利军重庆医科大学抗肿瘤化合物tyrphostin AG490抑制丙型肝炎病毒NS5B聚合酶活性的分子机理研究杨　娜中国科学院海洋研究所GADD45G蛋白通过组蛋白修饰调控HSV-1感染的分子机理研究陈晓庆广州医科大学新型H3N2人流感的进化及受体结合特性研究路希山中国科学院天津工业生物技术研究所用VLP表达HPIV3的HN和F蛋白及其介导的免疫应答对小鼠的保护作用研究张光媛重庆医科大学CCHFV囊膜蛋白Gc结构域III与病毒入侵相关位点研究张怀东中国科学院武汉病毒研究所乙型脑炎病毒RNA元件的宿主特异性研究刘思情中国科学院武汉病毒研究所HIV-1利用CypA躲避TRIM11加速脱衣壳作用的机制研究袁　婷中国科学院武汉病毒研究所ISlncRNA-23促进HIV-1复制的机制研究董银慧中国科学院生物物理研究所发热伴血小板减少综合征病毒对IL-10和IL-11抗炎信号的抑制机制宁云佳中国科学院武汉病毒研究所HCMV通过IE1调控神经干细胞中Hes1表达及节律的机制李小军中国科学院武汉病毒研究所柠檬酸铁的抗病毒作用与机制研究王洪斌中国科学院上海巴斯德研究所长链非编码RNA A VIRL在抗流感病毒感染中的作用机制研究陈玉海中国科学院微生物研究所噬菌体SWU1杀菌过程中ROS的作用及产生机制研究樊祥宇济南大学gp38蛋白决定大肠杆菌噬菌体Bp7宽宿主谱的机制张　灿青岛农业大学鹦鹉热嗜衣原体两个TMH家族蛋白结构与功能研究伍海英南华大学黑龙江立克次体表面蛋白与血管内皮细胞(宿主细胞)表面分子相互作用的研究齐　永中国人民解放军南京军区军事医学研究所2植物学NAC转录因子调控荔枝果柄离区细胞凋亡的机理研究李彩琴华南农业大学细胞壁组分与复合多层结构对小麦籽粒水分及品质调控机理的研究应瑞峰南京林业大学水稻极度矮化基因STD1的图位克隆与功能分析房静静中国农业科学院作物科学研究所复苏植物牛耳草DnaJ蛋白参与水分胁迫下叶绿体保护的作用机理刘　杰中国科学院植物研究所PRSL1通过蛋白磷酸酶PP1调控拟南芥植株形态的分子机理秦倩倩兰州大学拟南芥WUSCHEL互作因子WIC1调控茎端分生组织功能的机理研究周　超山东农业大学虎耳草科虎耳草属石荷叶组的分类学研究张卓欣华南农业大学国家自然科学基金委员会生命科学部2016年度资助项目第12期1497中国景天科山景天组的分类学研究孟世勇北京大学日本蛇根草和广州蛇根草及其近缘类群的系统分类学研究吴　磊中南林业科技大学万寿竹属的分类学和系统学研究朱鑫鑫信阳师范学院豆科甘草属分子系统发育与生物地理学研究段　磊中国科学院华南植物园苍山冷杉复合体的物种划分与气候响应模式研究邵毅贞河南农业大学泛喜马拉雅地区鼠尾草属的分类修订胡国雄贵州大学豆科长柄山蚂蝗属的分子系统学研究宋柱秋中国科学院华南植物园中国长篦藻属硅藻的分类修订及分子系统学研究刘　琪山西大学平叶多褶苔和变异多褶苔的物种界定以及洲际间断分布格局的形成原因师雪芹安徽师范大学绿藻门橘色藻目的系统分类学研究朱　欢中国科学院水生生物研究所北半球间断分布植物珊瑚菜的亲缘地理学和保护遗传学研究李密密江苏省中国科学院植物研究所东亚植物区系空间分化的分子机制——棣棠花和粉花绣线菊复合群的谱系地理学研究罗　冬中国科学院昆明植物研究所热带亚洲鞭苔属的系统分类学研究董珊珊华南农业大学溯祖方法在系统发育基因组学分析中的可靠性席祯翔四川大学基于ddRAD-seq技术的悬竹属时空演化格局研究张宪智西北农林科技大学银莲花属西南银莲花组和鹅掌草组的分子系统学研究张　煜湖南科技大学双盖蕨属(蹄盖蕨科)的系统发育和物种多样性分化研究卫　然中国科学院植物研究所小檗科(Berberidaceae)系统基因组学及叶绿体基因组进化研究孙延霞中国科学院武汉植物园鬼灯檠属的进化历史研究马祥光中国科学院昆明植物研究所浅苞橐吾、云南橐吾和大黄橐吾之间的自然杂交和基因渗入研究余姣君中国科学院昆明植物研究所芸薹属油菜类作物细胞质基因组单倍型的精细解析及其协同进化分析乔江伟中国农业科学院油料作物研究所荨麻科叶绿体系统发育基因组学研究吴增源中国科学院昆明植物研究所大豆脂肪酸脱氢酶FAD2家族酶活性差异的进化与功能研究赵　嫚浙江工业大学印度-西太平洋地区红树基因组渐渗与物种分化机制研究何子文中山大学青藏高原—蒙古高原—中亚地区砾玄参复合群的亲缘地理学研究王瑞红浙江理工大学小麦杀配子现象中存在的转录组变异及miRNAs在其中的调控作用研究白　琰哈尔滨师范大学水玉簪属(Burmannia L.)植物与丛枝菌根真菌协同进化研究赵中涛中国科学院华南植物园结合几何形态学方法探索泽泻科植物心皮的发育与进化黄岚杰湖北大学荠属种内叶形自然变异的研究杨　丽中国科学院植物研究所姜科唇瓣的发生、发育及其分子机理研究李秀梅广东省农业科学院农业生物基因研究中心同域分布老鹳草属植物花冠开口方向的分化机制王　慧华中农业大学Hlips在保护蓝藻光系统II免受氨损伤中的机制研究戴国政华中师范大学管藻黄素型LHCII参与的假根羽藻非光化学淬灭机制研究王文达中国科学院植物研究所D1蛋白周转过程的调控机制研究-以短命植物为例涂文凤中国科学院植物研究所糖基化调控水稻乙醇酸氧化酶与过氧化氢酶互作及过氧化氢信号发生的机理研究张智胜湖南农业大学水稻镉吸收和积累相关基因的发掘和功能鉴定杨　猛华中农业大学硫-TOR信号通路介导拟南芥生长的分子机理研究徐　萍中国科学院上海生命科学研究院木薯碱性/中性转化酶MeNINV1的酶活性调节机制研究姚　远中国热带农业科学院热带生物技术研究所拟南芥转录因子NAC103在逆境胁迫响应中的生物学功能及其调控机理孙　玲江苏大学基于ssRNA-seq的木薯抗旱lncRNA的挖掘及相关基因调控网络的研究丁泽红中国热带农业科学院热带生物技术研究所BHLH转录因子HBI1调控植物生长和免疫抗病动态平衡的分子机制研究樊　敏山东大学转录因子基因LbCPC参与二色补血草盐腺分化的功能研究袁　芳山东师范大学GSK3类蛋白激酶SGK1通过SOS2调节植物耐盐性的分子机制研究周华鹏四川大学生命科学第28卷1498拟南芥内质网膜蛋白ROOT HAIR DEFECTIVE 3 (RHD3)调控花青素代谢分子机理王　静北方民族大学大豆转录因子SNAC的无序序列区对耐盐相关基因表达调控的分子基础刘国宝深圳大学光周期下拟南芥CAT2蛋白降解的分子机制研究苏　彤山东师范大学拟南芥类受体蛋白激酶CRKN1在脱落酸信号转导中的功能研究梁　杉清华大学一氧化氮调控拟南芥体内硼含量稳态的分子机制研究夏金婵河南中医学院植物高温响应的表观记忆机制刘军钟中国科学院上海生命科学研究院拟南芥光信号转录因子FAR1与EDS1互作调控植物免疫的机理研究王晚晴北京联合大学非传统G蛋白及其激活蛋白的晶体结构与水稻应答盐胁迫机制的关系解析苗　锐福建农林大学拟南芥MYB102通过调控细胞壁扩展蛋白的表达增强植物耐旱的分子机理研究周　成安徽科技学院大豆高盐响应蛋白GmOSM的调控机理研究万　群江苏省农业科学院拟南芥新型液泡阴离子通道(VSAC1和VSAC2)介导细胞水势调控的分子机制研究张海纹北京市农林科学院野生番茄响应昆虫唾液中FAC诱导物的遗传基础研究申国境中国科学院昆明植物研究所膜结合转录因子NAC091调控植物内质网胁迫应答的分子机理研究杨正婷贵州师范大学拟南芥丝氨酸羧肽酶SCPL41基因在干旱胁迫中的作用及机制贾艳霞中国科学院昆明植物研究所小麦类钙调素调节植物耐盐性的功能研究周　硕河北省农林科学院遗传生理研究所拟南芥RopGEF7的互作蛋白eIF4E1参与生长素介导的植物发育的分子机制刘太波华南农业大学拟南芥CKRW1调节内源生长素水平稳态平衡的分子机理研究武　磊兰州大学拟南芥乙酰转移酶HLS1在BR与Auxin协同调控植物生长发育中的功能研究刘晓磊中国科学院上海生命科学研究院GA与BR共同调控拟南芥纤维素合成的分子机制研究王　昕沈阳大学独脚金内酯信号通路D53-like SMXLs下游转录因子的鉴定与功能分析王　冰中国科学院遗传与发育生物学研究所一氧化氮与细胞分裂素信号通路互作调节植物适应性生长的分子机制张燕香中国科学院遗传与发育生物学研究所转录因子GhKNOX1-1调控棉花叶片形态建成的分子机制研究肖光辉陕西师范大学拟南芥WRKY71转录因子调控叶片衰老的分子机制研究于延冲青岛农业大学RLF1亚硝基化介导生长素调控水稻侧根发育的分子机制孙爱珍中国科学院上海生命科学研究院油菜生长素合成相关基因BnaA.YUCCA6调控分枝角度的机理研究成洪涛中国农业科学院油料作物研究所类受体激酶SIT1调节水稻叶片衰老的分子机制王　耕河北师范大学拟南芥隐花色素CRY2在介导蓝光依赖的生物钟调控中的作用机理研究曹世江福建农林大学周质微丝在植物网格蛋白介导内吞中的功能研究范路生福建农林大学IDD5的O-GlcNAc糖基化修饰在赤霉素信号转导通路中的作用KihyeShin福建农林大学甲基茉莉酸响应的bHLH类转录因子在青蒿素生物合成中的调控机制研究沈　乾上海交通大学糖基转移酶UGT78H2的活性鉴定及在黑莓类黄酮代谢中的功能分析陈　清四川农业大学玉米糖基转移酶UFGT2调节黄酮合成与耐逆的功能研究李燕洁山东大学FtMYB2对荞麦类黄酮生物合成的代谢调控机制及抗逆功能研究李晓华华中农业大学金柑类黄酮糖基转移酶基因功能分析及其调控网络构建刘小刚西南大学何首乌中芪合酶、白藜芦醇羟化酶基因的功能研究生书晶广东第二师范学院拟南芥LMBD2基因突变回复mur3-3表型的分子机制丁安明中国农业科学院烟草研究所博落回根中苄基异喹啉生物碱合成、转运和积累的细胞类型特异性定位及分子机制研究郑亚杰湖南农业大学拟南芥核质反向信号参与表观遗传调控的分子机理沈　杰中国科学院植物研究所灵芝三萜酸下游合成路径关键CYP450s基因挖掘与功能分析陈方方中国科学院武汉植物园文冠果性别分化的内源激素与microRNA调控机制敖　妍北京林业大学一个CCCH锌指蛋白调控水稻雄性生殖发育中胼胝质代谢的研究方瑞秋华南农业大学转录因子TDF1对拟南芥分泌型绒毡层发育与功能的转录调控楼　悦上海师范大学。

基于杂合肽H5LL_活性的生物信息学分析和重组乳酸菌表达载体的构建

第 49 卷第 5 期2023年 9 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.49 No.5Sep.2023DOI：10.13481/j.1671‑587X.20230534基于杂合肽H5LL活性的生物信息学分析和重组乳酸菌表达载体的构建赵潇颖, 宿建胜, 马嘉辉, 王岳峰, 王丹, 孙丽媛（北华大学医学技术学院临床生化及分子生物学检验教研室，吉林吉林132013）［摘要］目的目的：以人源性抗菌肽（AMPs）富组蛋白5（Hst5）和LL-37为亲本，设计新型杂合肽H5LL，并通过基因工程技术构建重组乳酸菌表达载体，实现AMPs的高效和安全表达。

方法方法：采用生物信息学方法对H5LL进行理化参数、亲/疏水性、剪切位点、磷酸化位点、信号肽、跨膜区域、亚细胞定位和二级结构预测；将目的序列和空载质粒pMG36e经Hin dⅢ及KpnⅠ双酶切后，构建乳酸菌重组表达载体pMG36e-H5LL，克隆转化获得含目的基因的重组质粒。

结果结果：H5LL成为AMPs的可能性较高，含36个氨基酸，相对分子质量为4 625 380，总电荷数为+10，具有亲水性；有3个磷酸化位点，无糖基化位点；属于膜内蛋白，无跨膜区域，无信号肽；亚细胞定位预测，线粒体靶向肽的可能性为0.333。

二级结构中α-螺旋结构和β-转角占比分别52.78%及22.22%，三级结构中α-螺旋数量较多。

含目的基因的重组质粒PCR电泳，于138 bp处有单一特异性条带；双酶切电泳，重组质粒在136和3 500 bp处有清晰条带。

结论结论：设计并合成的新型杂合肽H5LL具有较高稳定性、抑菌活性和低毒性；成功构建重组乳酸菌表达载体pMG36e-H5LL。

［关键词］富组蛋白5；抗菌肽；生物信息学；乳酸菌；表达载体［中图分类号］Q939.9［文献标志码］ABioinformatics analysis based on activity of heterotrimericpeptide H5LL and construction of recombinant Lactic acidbacteria expression vectorZHAO Xiaoying, SU Jiansheng, MA Jiahui, WANG Yuefeng, WANG Dan, SUN Liyuan （Department of Clinical Biochemistry and Molecular Biology Testing，School of Medical Technology，Beihua University，Jilin 132013，China）ABSTRACT Objective：The human-derived antimicrobial peptide（AMPs）histatin 5 （Hst5）and LL-37 were used as the parents to design a novel heterozygous peptide H5LL，and to construct a recombinant lactic acid bacteria expression vector by genetic engineering technology to achieve the efficient and safe expression of the AMPs.Methods：Bioinformatics method was used to predict the physicochemical parameters，hydrophilicity/hydrophobicity，shear sites，phosphorylation sites，signal peptides and transmembrane regions， subcellular localization， and secondary structure of H5LL； the target sequence and the empty plasmid pMG36e were doubly digested by Hin dⅢ and KpnⅠ，then the lactic acid bacteria [文章编号] 1671‑587X(2023)05‑1366‑09[收稿日期]2022‑12‑03[基金项目]吉林省科技厅科技发展计划项目（2023020259NC，20230204085YY）；北华大学研究生创新项目（北华研创合字〔2021〕025）[作者简介]赵潇颖（1993－），女，吉林省吉林市人，在读硕士研究生，主要从事病原微生物和抗菌肽方面的研究。

一株产吡咯喹啉醌南极海洋细菌的分离鉴定及生物活性

（ＤＣ０１００；南极磷虾资源调查与评估技术指南 ” 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项ＪＺ２１０２） “ ；资金（０１１）２１Ｔ１资助项目作者简介张晓玲（９８一）女，１７，博士，助理研究员，主要从事水产品安全及海洋微生物系统生物学研究
ＡｂｔａｔＡｎｗｐｒｌｑｉｏｉｕｎｎ（Ｑ－ｒｄｃｇｍｒｅｂｃｅｉ，Ｐ－８ｓａｎａｓｌｅｓｒｃ：ｅｙｒｏｕｎｌｅｑｉｉｅＰＱ）ｐｏｕｉａｉａｔａＱ０ｔｉ，ｗｓｉａｄｏｎｎｎｒｒｏｔ
ＰＱＱ－ｒｄｃｇｍａｉｅｂｃｅｉｒｍｈｔｒｔｃａｐｏｕｉｒｎａｔｒａｆｏｔｅＡｎａｃｉｏｅｎｎｃ
ＺＨＡＮＸｉｏｌｇ，Ｌ－ａＡＮＣｅｇｑ，ＭＡＬ —ａＩＧａ－ｎＵＹａｎｎ，Ｆｈｎ－ｉｉｉｙｎ，ＪＡＮＧｉｇ，Ｐｎ
染严重。与此方法相比，微生物发酵法可显著降低生产成本，过菌种选育及发酵调控技术，通可定向提
高产生菌株的单位产量；且可通过基因工程技术实现ＰＱ异源表达及高效生产，Ｑ从而展现出较为广阔
的工业应用前景。ＰＱ仅存在于少数微生物、物及动物组织中，已知的可合成ＰＱ的微生物种Ｑ植而Ｑ
属包括副球菌属（ａａｏｃ８、单胞菌属（ｓｕｏｏａ）互生平胞菌属（ｌｒｍｎｓ、Ｐｒｃｃｕ）假Ｐｅｄｍｎｓ、Ａｔｏｏａ）甲烷单胞菌ｅ

海洋微生物活性物质(精)

海洋微生物活性物质的研究进展专业:生物工程姓名:李振森学号:4012010302海洋是生命的发源地,约占地球表面积的71%,其中生物种类20多万种,其多样性远远超过陆地生物的多样性。

由于海洋环境具有高盐度、高压、低营养、低温和无光照等条件,从而形成了海洋生物与陆地生物不同的生长方式和代谢系统。

近年来,随着人们对海洋生物研究的不断深入,发现了多种多样的生物及许多具有新颖、特异化学结构的生物活性物质。

海洋生物活性物质主要包括生物信息物质、生理活性物质、海洋生物毒素及生物功能材料等。

目前,从海洋生物中已相继发现300余种新型化合物,结构新颖并具有多样性:有枯类、聚醚类、当醇类、皂昔类、生物碱、多糖、小分子肤、核酸及蛋白质等,并具有丰富的生理及药理活性,包括抗菌、抗肿瘤、抗病毒、防治心血管疾病、延缓衰老及免疫调节等多种功能。

多年来,国内外一直致力于这方面的研究,试图从中开发结构明确,疗效肯定的新型生物活性物质,以用于攻克人类面临的重大疑难疾病,其中具有高生物活性和高选择性的海洋生物毒素备受重视,成为研究的热点。

近年来,海洋生物毒素是海洋生物活性物。

1、海洋抗肿瘤活性物质1.1海洋放线菌海洋有着极其丰富的放线菌资源,具有抗菌活性的海洋微生物中约有45%来源于放线菌。

就目前的报道,海洋放线菌产生的活性物质大部分来源于小单孢菌属和链霉菌属。

由于海洋放线菌所产生的代谢产物具有功能独特、结构新颖等特点而受到人们的广泛关注,例如抗真菌、抗疟等功能。

另一方面,陆生放线菌的不断开发,发现新的活性物质的可能性越发减少,迫使人们将目光转向海洋放线菌的开发。

1991年Fenical小组[1]首次发现一属全新的需盐生长的特殊海洋放线菌Salinispora,其广泛存在于热带和亚热带海泥中。

2003~2005 年Fenical小组从菌株Salinispora tropica CNB-392 中分离得到10个结构新颖的化合物[2-4],其中化合物Salinosporamide A(1[3]具有广阔的成药前景,对人结肠癌细胞的IC50为0.035 nmol/L,已作为癌症药物进入临床前研究[5-6]。

南极罗斯海沉积物中可培养菌株的分离及胞外水解酶活性检测

第32卷第1期极地研究Vol. 32, No. 1 2020年3月CHINESE JOURNAL OF POLAR RESEARCHMarch 2020[收稿日期] 2019年9月收到来稿, 2019年11月收到修改稿[基金项目] “十三五”国家重点研发计划(2018YFC1406701)资助 [作者简介] 王飞, 女, 1991年出生。

硕士研究生, 主要从事极地微生物研究。

E-mail:*********************[通信作者] 丛柏林,E-mail:**************.cn南极罗斯海沉积物中可培养菌株的分离及胞外水解酶活性检测王飞1 丛柏林2 张朝晖2 杨黄浩1(1福州大学, 福建福州 350108;2自然资源部第一海洋研究所, 山东青岛 266061)提要研究了南极罗斯海地区沉积物中可培养微生物多样性, 并检测了菌株胞外酶活性, 为开发利用南极资源奠定基础。

采用Zobell 2216E 培养基、土豆培养基(PDA)及稀释平板划线法分离并获得纯培养的细菌和真菌, 分别通过16S rDNA 、18S/ITS 序列鉴定分析了可培养微生物的多样性和系统发育。

从南极罗斯海沉积物样品中获得78株细菌和54株真菌, 细菌、真菌的优势菌株分别为嗜冷杆菌属(Psychrobacter )、枝孢属(Cladosporium ); 78株细菌菌株中有2株与模式菌株的16S rDNA 基因序列相似性小于97%, 可能是潜在的细菌新物种。

细菌API20NE 生理生化和真菌产胞外酶活性结果表明, 获得的细菌和真菌大多数可检测到胞外水解酶活性。

本研究丰富了南极可培养微生物资源, 为南极罗斯海地区可培养微生物的多样性研究以及南极微生物资源的应用研究奠定了基础。

关键词南极罗斯海可培养菌株胞外酶 doi: 10. 13679/j.jdyj.201900510 引言南极位于地球的最南端, 由陆地和海洋两部分构成, 终年被冰雪覆盖, 气候酷寒干燥、强光辐射、盐度变化大, 是地球上最冷最干的地区[1]。

海洋来源的耐盐真菌Wallemia

海洋来源的耐盐真菌W allemia sebi产生的二酮哌嗪生物碱彭晓娉，王乂，刘培培，尹霞，朱伟明*中国海洋大学医药学院青岛市鱼山路5号，266003从海洋微生物中寻找具有生物活性的环肽类化合物已成为一个新的研究热点1。

氨基酸缩合成肽的反应是生命过程中的一类重要反应，海洋放线菌可以通过氨基酸途径合成环二肽，环二肽类化合物是海洋放线菌的特征次生代谢产物，但海洋真菌较少代谢产生此类化合物，推测可能与培养基相关。

为此，我们选择一株耐高渗透压的真菌Wallemia sebi为研究对象。

Wallemia sebi是中国的一新记录属（该属只有这个种），是一株耐盐真菌，在PDA平板上可抑制植物病原真菌的生长2，其代谢产物具有抗菌和细胞毒活性3。

从该菌的发酵产物中鉴定了6个吡咯多烯（pyrrolylpolyenes）色素wallemias A-F 4,5、倍半萜类化合物walleminol和walleminone6、氮杂甾醇UCA 1064 A和UCA 1064 B7，这些化合物具有抗真菌、肿瘤细胞毒活性7，但文献中未见W. sebi 代谢产生环二肽的报道。

我们采用放线菌培养基并增添1%的蛋白胨、并在高盐条件（30%NaCl）下发酵培养W. sebi（70L），乙酸乙酯萃取得60g浸膏，经硅胶柱色谱、LH-20凝胶柱色谱、反相高压液相色谱等手段，结合其理化性质和波谱学特征，从中分离鉴定了5个环二肽类化合物：cyclo-(Pro-Tyr) (1, 26 mg)8、cyclo-(Pro-Trp) (2, 2 mg)9、cyclo-(Pro-Phe) (3, 9 mg)10、cyclo-(Pro-Phe) (4, 8 mg)11、cyclo-(V al-Leu) (5, 5 mg)12。

实验表明，采用放线菌培养基、特别是增加培养基中的氮源，真菌也可代谢产生环二肽类化合物。

HO HNNOOHNHNNOOHNNOOHNNHOOHNNOO12345参考文献1.Li, D.; Zhu; W. M.; Gu, Q, Q.; Cui, C. B. Marine Sciences. 2007, 31, 5.2.郭永霞, 赵爽, 刘庆洪, 王贺祥, 王有智. 微生物学通报, 2006, 33, 30.3.穆军, 焦炳华, 孙炳达, 刘杏忠. 第二军医大学学报, 2006, 27, 84.Badar, Y.; Lockley, W. J. S.; Toube, T. P.; et al. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1973, (13), 1416-1424.5.Ahmed, F. R.; Buckingham, M. J.; Hawkes, G. E.; Toube, T. P. J. Chem. Res., Synopses, 1984, (6), 178-179.6.Frank, M.; Kingston, E.; Jeffery, J. C.; et al. Tetrahedron Lett. 1999, 40, 133-136.7.Takahashi, I.; Maruta, R.; Ando, K.; et al. J. Antibiot. 1993, 46, 1312-14.8.Wagger, J.; Grdadolnik, S. G.; Grošelj, U.; et al. Tetrahedron: Asymmetry2007, 18, 464–4759.Jayatilake, G. S.; Thornton, M. P.; Leonard, A. C.; Grimwade, J. E.;Baker, B. J. J. Nat. Prod. 1996, 59, 293–296.10.Lin, Z. J.; Lu, X. M.; Zhu, T. J.; Fang, Y. C.; Gu, Q. Q.; Zhu, W. M. Arch. Pharm. Res. 2008, 31, 1108–1114.11.Timo, S.; Thomas, H. J. Agric. Food Chem. 2005, 53, 7222–7231.12.Faouzi, F.; V ictoriano, V.; Jose, L. S.; Ricardo, R. J. Nat. Prod. 2003, 66, 1299–1301.__________________________*国家863计划（2007AA091502）和国家自然科学基金（30670219）资助课题联系人: 朱伟明,Email:******************.cn,电话**************。

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亿亏岛生物互程２０１３，ＶｏＩ．３０Ｎｏ．５
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
田
北极海泥来源抗菌活性真菌的筛选及菌株Ｈ５的初步研究
倪孟祥。胡颖
茵株Ｈ５的发酵液进行体外抗茵活性研究；将调至不同ＰＨ值的Ｈ５发酵液用不同极性的有机溶剂萃取，研究该活性物
质的酸碱性和极性；将调至不同ｐＨ值的发酵液按不同时间温度梯度进行加热处理，研究该活性物质的稳定性；同时用
（中国药科大学生命科学与技术学院，江苏南京２１０００９）
摘
要：从北极海泥中筛选抗茵活性海洋真菌，鉴定了活性菌株并对活性最高的菌株Ｈ５的代谢产物进行了初步研
究。通过形态学观察、基因间隔区（ＩＴｓ）序列分析对活性最高的茵株Ｈ５进行系统发育分析和菌种鉴定；通过纸片法对
大孔树脂对活性物质进行提取分离。结果表明，从北极海泥中共分离得到１７株真菌，其中真菌Ｈ５、Ｈ６的代谢产物具有较好的抗茵活性；茵种鉴定表明菌株Ｈ５归属于烟曲霉属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ），该菌株发酵液对苹兰氏阳性茵、革兰
氏阴性茵、真茵及耐药茵均有不同程度的抑制活性，活性产物为极性较大、热稳定性较好、耐酸不耐碱的物质；薄层层析
显示活性成分在２５４ｎ．ｍ紫外光下无吸收。关键词：海洋真菌；抗茵代谢物；筛选；性质；菌种鉴定
１实验
１．１材料
沙氏培养基：蛋白胨ｉ０ｇ，葡萄糖４ｇ，琼脂ｌ５～
２０ｇ，蒸馏水１０００ Байду номын сангаасｍＬ。
改良的马丁培养基：葡萄糖２Ｏｇ，蛋白胨５ｇ，酵母
粉２ｇ，Ｋ２ＨＰＯ４１ｇ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，海盐
２Ｏ世纪９Ｏ年代才进入较快速的发展阶段］。目前，
ＤＮＡＭａｒｋｅｒ、ＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ，康为；引物由上海生工合成；其它试剂均为国产分析纯。
１．２培养基
人们已经从海洋真菌的发酵产物中发现了１０００多种新的次生代谢产物，这些代谢产物呈现出良好的抗肿
１．２．１分离培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基：马铃薯去皮，２００ｇ切
瘤、抗菌、抗病毒等生物活性，成为当前海洋药物研究的热点引。
作者从北极海泥中分离真菌，采用其发酵液进行抗菌活性筛选，并鉴定其种类、研究其活性代谢产物的
１．１．１样品来源
北极海泥来自北极黄河站附近海域潮间带。
１．１．２指示菌
２０ｇ，琼脂１５＂－－２０ｇ，蒸馏水ｉ０００ｍＬ。葡萄糖酵母膏蛋白胨琼脂培养基：葡萄糖ｌｏｇ，蛋白胨２ｇ，酵母膏０．５ｇ，海盐２０ｇ，琼脂１５＂－２０ｇ，蒸馏
中图分类号：ＴＱ９２７文献标识码：Ａ文章编号：１６７２ —５４２５（２０１３）０５ —００６１一Ｏ４
从海洋微生物寻找新药已成为开发药物资源的重要策略之一［１］。国内外对海洋细菌和放线菌的活性天然产物的研究起步较早，发现的新化合物数量也较
性质，以期发现具有显著抗菌活性的菌株，为建设海洋
成小块，加水煮沸３０ｍｉｎ，４～６层纱布过滤，加２０ｇ
葡萄糖、２０ｇ海盐、１５￣２０ｇ琼脂，蒸馏水１０００ｍＬ。
察氏培养基：ＮａＮＯ２ｇ，Ｋ２ＨＰＯｉｇ，ＭｇＳＯ・
７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，ＫＣ１０．５ｇ，ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．０１ｇ，蔗糖３０ｇ，海盐２０ｇ，琼脂１５４２０ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ。
真菌种质资源库、开发新的微生物药物奠定基础。
水１０００ｍＬ。
ｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）、白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ），均由
中国药科大学微生物学实验室提供。
１．１．３主要试剂
多，相比之下对海洋真菌的系统研究起步较迟，直到