18-天然产物提取工艺学-40本.
水溶性天然产物的提取分离技术
水溶性天然产物的提取分离技术制药工程专业王俊20085257指导教师赵莉摘要：水溶性天然产物是药物研发中极具潜力的原料资源，分离纯化水溶性天然产物中具有独特生物活性的物质是中药研究的重要基础工作。
水溶性天然产物有效成分复杂，含量低，难于富集用传统的分离方法不仅步骤繁琐，能源及材料消耗大，而且产率及纯度不高，尤其难以分离结构和性质相似的组分。
随着中药现代化的发展高新技术不断在水溶性天然药物中推广应用。
现将近年水溶性天然产物提取分离纯化新技术的进展作一综述。
关键词：水溶性提取技术天然产物1、传统的提取分离方法1.1 热水浸提法热水浸提法即是煎煮法，是中药有效成分提取最早、最常用的方法之一。
中国药典1990年版一部和卫生部《药品标准》中药成方制剂1～9 册，共收载中成药1945种，其中采用热水浸提工艺的多达826 种。
但是热水浸提法基本上仍停留在经验水平上，热水浸提法的工艺参数，如浸泡时间、煎煮时间、煎出量(药液得量) 等均无最佳量控标准，往往导致产品质量和疗效的显著性差异。
一定程度上，应当组织力量从多层次、全方位进行系统研究，选择出适合于各种成药品种的热水浸提工艺的最佳条件和质量控制标准。
1.2 乙醇提取法乙醇浸提法原理与热水浸提法基本相同，不同之处是用乙醇作溶剂浸出中药有效成分，该法可以有效减少药材中水溶性杂质的浸出，对于这类杂质较多的药材尤为适宜。
乙醇浸提法分为冷浸法(渗漏法) 和热提法(回流法) 两种。
由于采用乙醇作为溶剂进行提取，某些溶解于乙醇的杂质(如树脂、油脂、色素等) 也会被提取出来。
对于这些杂质，可从醇提取液中回收乙醇，加水搅拌，冷藏一段时间，待完全沉淀后过滤除去。
冷浸法一般用于提取热敏性成分，但乙醇用量多，回收溶剂量大，生产周期长。
热提生产周期短，但杂质含量相对较高，给后继的分离工序增加了成本2综合提取分离技术。
2.1膜分离技术膜分离技术以选择性透过膜为分离递质，当膜两侧存在某种推动力（如压力差、浓度差、电位差等）时，原料侧组分选择性的透过膜，以达到分离，提纯目的。
第二章 天然产物提取分离方法和技术
2、设备选型与材料质量试验：
在小试阶段，大部分实验是在小型玻璃仪器中进行， 但在工业生产中，物料要接触到各种设备材料，如微 生物发酵罐、细胞培养罐、固定化生物反应器，多种 层析材料以及产品后处理的过滤浓缩、结晶、干燥设 备等。有时某种材质对某一反应有极大影响，甚至使 整个反应无法进行。故在中试时，要对设备材料的质
含强心苷的药材，用发酵法将低效的多糖苷转化为单 糖苷；需要从原料中提取某种苷的苷元时，用发酵法 或水解法把苷转化为相应的苷元后，再提取。
5、脱脂处理：
油质、蜡、树脂都不溶于水而易溶于乙醚、氯仿、丙 酮、苯及热乙醇中。
脱脂处理的方法：①先用乙醚或苯等亲脂性溶剂单独 或依次加热提取，并反复数次即可达到脱脂的目的。 ②对于树脂，可在乙醚提取液浓缩后，再经氯仿提取 即可以溶出树脂成分。
工厂化生产原料的质量控制方法
（1）形态与性状相结合的鉴别方法 （2）显微粉末鉴定：在显微镜下观察原料粉
末的组织或细微的形态，做出鉴定结论。 （3）化学鉴别法：用薄层层析法或传统的化
学方法进行化学成分的鉴定，并做出鉴定结论。 （4）紫外光谱法：用原料的甲醇或乙醇浸出
液在紫外光谱仪测定其紫外光谱，做出鉴定结 论。
主要是检查生产工艺流程的可行性和存在的问题，并 为中试和正式生产提供科学依据。如果放大实验的结 果较好，可以不再做中间生产实验，如果结果不理想， 可以为中间生产试验创造条件。
著名的化学工业学家L.H.裴克赖(L.H.Baekeland)的名 言:“小试验多摸索，大生产多收获” 。
在小型实验中要对所有工序的物料进行化学分析，并 在每个工序中计算被提取物质的收率和损失，并计算 各种物料的变化和废水、废液和废渣的数量。每次实 验都要总结经验、分析数据、找出问题、提出解决问 题的办法。
天然化学产物结构。合成及提取
有效成分
一次代谢和二次代谢
二、主要的生物合成途径：
1、醋酸-丙二酸途径（AA-MA）
脂肪酸类、酚类、蒽酮类
2、甲戊二羟酸途径（ MVA ）
HO
萜类、甾类
HOOC
OH
二、主要的生物合成途径：
3、桂皮酸及莽草酸途径
苯丙素类、香豆素类、 木质素类、木脂体、黄酮类
COOH
4、氨基酸途径
物理吸附：硅胶、氧化铝、活性炭 化学吸附 半化学吸附：聚酰胺
（1）物理吸附
① 基本规律：相似者易于吸附 极性吸附剂：
极性物质易被吸附
溶剂极性增强，溶质吸附减弱
非极性吸附剂： 非极性物质易被吸附 溶剂极性减弱，溶质吸附减弱
（1）物理吸附
② 支配吸附过程的主要因素：极性
官能团极性； 极性官能团数目多，极性大； 溶剂介电常数越大，极性越强。
（2）选择氢核去偶谱
消除某个或某几个氢核的偶合影响，此时 峰形发生变化的信号只是与之有偶合关连 的13C信号。
（3）偏共振去偶谱 在13C谱上仅仅显示出直接与C原子相连 的1H核造成的裂分。
符合N+1律：
q CH3
t CH2
d CH
s C
（4）DEPT: 通过改变照射1H 核的脉冲宽度（θ） 或设定不同的弛豫时间，使不同类型的 13C 信号在图谱上呈单峰形式分别朝上 或向下伸出。
（2）峰面积：以积分曲线高度表示
在氢谱中，积分曲线高度 与分子中的总H数相当
（3）偶合与分裂
自旋-自旋偶合：核自旋产生的核磁矩间的相
互干扰
自旋-自旋分裂：由自旋偶合引起的共振峰分
裂的现象
（3）偶合与分裂
例：
天然产物分离
天然产物分离覆盖:2000到2007年中期：自1990年代以来,天然产物研究的兴趣大大增加。
以下几个突出的发展领域的分离方法,光谱技术,和敏感的生物,自然产物研究获得了新的关注提供新颖的化学实体。
这个更新审查处理样品制备和净化,最近提取技术用于天然产物分离、液固和液-液分离技术,以及多步骤的色谱操作。
它涵盖了NPR以来发表的论文审查的例子“现代分离方法”马斯顿和Hostettmann 1主要强调开发和自2000年以来的研究方法。
1 介绍天然产品预计将发挥重要作用的新药的主要来源在未来几年,因为（1)自己无与伦比的结构多样性,(2)他们中许多人的尺寸相对较小(< 2000 Da),(3)“药物样”的特性,即被吸收的能力和metabol-ised。
2隔离来自高等植物的天然产品,因此海洋生物和微生物仍然迫切需要,要求先进的方法分离和隔离程序。
考虑,一个植物可能包含成千上万的选民,分离和isola-tion过程冗长而乏味的。
隔离的天然产物通常结合了各种分离技术,取决于溶解性、波动性和稳定的化合物分离成为可能。
不同的分离步骤的选择是非常重要的和分离的分析规模优化参数是值得的。
马斯顿和hostett曼1描述分离的方法有离心薄层色谱（第七所），超压层色谱法（OPLC），闪光色谱（FC），液相色谱[低压液相色谱法（LPLC），高压液相色谱（MPLC），高压液相色谱法（HPLC）]，和[逆流色谱液滴逆流色谱（DCCC），旋转室逆流色谱（RLCC），离心分配色谱法（CPC）]。
最近文献的评价表明，第七所，OPLC，RLCC，和DCCC 2000以来很少使用。
俱乐部还经常使用但主要为多级分离过程的一部分。
主要分离技术是近年来液相色谱等色谱、半制备高效液相色谱方法，以及党，主要为高速逆流色谱（HSCCC）或高性能离心分配色谱（HPCPC）。
多步色谱操作大多被应用，例如结合FC预净化和半制备hplcfor最终净化2 纯化样品的制备几个样品的制备，预净化和清理的步骤是天然产物分离和/或分析之前使用。
第二章 天然产物的研究现状
开发思路：
如果能用简便的化学合成方法合成出 天然有效成分，或者以毒性大、活性不 够高的天然产物为先导化合物进行结构 修饰，提高活性降低毒性，这样上述中 药与天然产物活性成分都有可能开发成 新药。
紫杉醇的提取技术生产工艺配方专利大全
1、紫杉醇的提取方法 2、一种提高红豆杉内生真菌发酵物中紫杉醇产率的方法 3、紫杉醇组合物及其制备方法 4、榛子提取“紫杉醇” 5、一种利用高压液相色谱制备高纯度紫杉醇的方法 6、9-二氢-13-乙酰基巴卡亭III和紫杉醇的提取方法 7、从红豆杉细胞培养液滤液中富集提取紫杉醇的方法 8、一种高效分离制备高纯度紫杉醇半合成前体的方法 9、制备紫杉醇的方法 10、工程菌株及其制备方法以及用其制备紫杉醇的方法 11、从紫杉醇粗产品分离纯化紫杉醇的方法 12、一种高效制备紫杉醇的方法 13、紫杉醇的超细纤维剂型及制备方法和装置 14、紫杉醇半合成方法 15、水溶性抗癌药紫杉醇复合物及其制备方法 16、用可再生资源提取药用紫杉醇及其衍生物的方法 17、紫杉醇纳米微粒的制备方法 18、利用酶催化半合成紫杉醇的方法 19、柱溴化法制备高纯度紫杉醇的工艺 20、改进的基于紫杉醇的抗肿瘤制剂
现状：பைடு நூலகம்
在新药的研发中，天然药物起到了无法估量的 作用，47%的新药源于天然产物及其衍生物， 特别是在抗癌和抗感染方面，例如，紫杉醇、 长春碱（Vinblastine）、喜树碱 （camptothecin）、鬼臼毒素 （Podophyllotoxin）等的衍生物已经广泛应用 于临床。
中药提取工艺学习题
中药提取工艺练习题一、名词1、天然产物：一切源自植物、动物、昆虫及微生物的有机代谢产物，如生物碱、黄酮体、萜类、氨基酸、蛋白质、糖类、激素类等；依功能分，有药物、甜味剂、色素、香精等。
2、提取物：指采用适当的溶剂和方法，从某种材料中提出或加工的物质。
3、浸渍提取法：将中草药粉或碎片装入适当的溶器中，然后加入适宜的溶剂，浸渍药材，以溶出其中有效成分的方法。
4、渗漉法：将中草药粉末先装在渗漉器中使药材浸渍24—48小时膨胀，然后不断加入新溶剂，使其自上而下渗透过药材，从渗漉器下部流出、收集浸出液的一种浸出方法。
5、浓缩：将药液加热至沸腾并不断移走气化了的溶剂，气化溶剂再经冷却而全部冷凝为液体重复使用的单元过程叫作浓缩或蒸发。
6、结晶：结晶是固体物质以晶体状态从蒸汽、溶液或熔融物中析出的过程。
在天然产物的制备中，常遇到的情况是从溶液中使固体物质结晶出来。
7、萃取：就是利用提取物中各成分在两种互不相容的溶剂中的分配系数的不同而达到分离纯化的方法。
这是天然产物制备中用的最多的方法之一。
8、吸附分离：吸附是去杂质的物理方法，是利用某些固体物质所具有的吸附性，将一些天然成分自溶液中吸附到它的分子上，并利用不同成分在吸附剂与洗脱剂之间的吸附和溶解度的差异，达到分离和除去杂质的目的。
9、回流提取法：10、辅料：是指中药提取或天然产物生产中所用的各种有机溶剂或各种化学药品包括水。
11、原料：是指一切用于中药提取或天然产物生产的天然生物材料。
12、中药：中药是以中医药学理论表述其性味、功效和使用规律，并且按中医药学理论指导其临床应用的传统药物。
以中药为原料，按照中医药学理论基础配伍、组方，根据药典和制剂规范，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂，称为中药制剂。
二、填空1、提取的作用是多方面的，可划分为二个层次：一是“形态改变功能”；二是“ 性能改进功能” 。
2、中药提取中，根据提取物原材料属性的不同，可以分为：植物提取物、动物提取物、菌类提取物等。
武汉大学天然产物的提取桔梗
食品价值
桔梗不仅是一种传统中药,还是一种食品,其根 可制成美味的菜肴,在我国东北地区及日、韩、等 东亚国家,桔梗都被用作常用蔬菜之一。桔梗营养 丰富含有大量亚油酸等不饱和脂肪酸,具有降压降 脂、抗动脉粥样硬化等多种作用。因此桔梗是种 很好的功能性食品。
近年来,日本学者将桔梗的提取物用于化妆品 和浴液中。经研究,桔梗等植物的提取物可抑制粘 多糖的降解,消除氧自由基,具有抗氧化作用,可用 于抗衰老化妆品的研制。同时报导用酸液电解用 制备香味及色素物质用于化妆品生产。此外,桔梗 浸液还可作为农作物的杀虫杀菌剂。因此,桔梗除 药用外,尚有很高的经济价值。
在本制备方法中,采用提取液直接通过大 孔吸附树脂柱进行富集,既可简化操作,又 可节省能耗,降低成本。 4) 本法操作简单、快速、安全,使用溶剂 单纯且可回收套用,适于工业化大量制备
醇提大孔吸附树脂柱色谱法
提取:取生药桔梗干品715 kg ,粉碎过 840μm 孔径筛(20 目) ,室温下用70 %乙 醇浸提5 次,每次36 h (第1 次用乙醇15 L , 后4 次为10 L/ 次) ,每4～6 h 充分搅拌1 次。合并浸提物,浓缩至有油状物产生时, 将其于冰箱中放置48 h ,分离油状物和浓 缩提取液,分别用氯仿脱脂。油状物脱脂 后再用正丁醇萃取,回收至干 分离:前处理后的桔梗提取液浓缩物6 400 mL 分3 份:2 100 mL 、2 200 mL 、 2 100 mL ,于11 cm ×115 m的玻璃柱中 装入大孔吸附树脂6 kg ,蒸馏水平衡24 h 后上样,用水和20 %、30 %、40 %、50 %、95 %乙醇洗脱.
水提取法
取4kg桔梗粉末，以4倍量水常温浸提5次， 每次24h，合并提取液减压浓缩至2L，以5 倍量的乙醇沉淀菊糖，减压过滤，浓缩上 清液至无醇味，上大孔吸附树脂，水洗脱 糖脱色，酒精洗脱至无色，酒精洗脱液浓 缩至无醇味，水溶冷冻干燥，得总皂苷冻 干粉49.12g，产率为1.2%
天然产物的提取分离技术研究进展
天然产物的提取分离技术研究进展摘要：本文对天然药物化学成分的传统提取和分离技术进行了简单的介绍，并对近些年来发展起来的新技术，新方法加以总结。
关键词：天然药物中药提取分离Progress in the Techniques of Separation and Extraction of theNatural ProductsAbstract：This paper has introduced the natural products chemistry of traditional extraction and separation technology briefly，and summarized the new techniques and new methods developed in recent years.Key words：Natural products；Chinese medicine ；extraction and separation1引言中药作为我国传统文化重要的组成部分，在华夏五千年源远流长的文明中起着不可替代的作用，中医传统用药强调炮制和复方，中药的功效在长期的生活实践中被证明是稳定有效的。
在当下日益加快的生活节凑中，西药由于其快速、便捷的特点，使其成为人们治疗疾病的首选。
但是随着绿色养生的生活理念逐渐走入人们的生活中，中药被更多地现代人所应用。
为了使中药能够走出国门，我们对于中药的研究方法必须加以改进和完善，进而更好的为世人服务，而从中药中提取天然产物是中药现代化的一个重要组成部分。
天然产物是药物研发中极具潜力的原料资源，分离纯化天然产物中具有独特生物活性的物质是中药研究的重要基础工作。
天然产物中的有效成分复杂，含量低，难于富集，用传统的分离方法不仅步骤繁琐，能源及材料消耗大，而且产率及纯度不高，尤其难以分离结构和性质相似的组分。
随着中药现代化的发展，高新技术不断在天然药物的提取分离中推广和应用。
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《天然产物提取工艺学》实验指导书烟台南山学院工学院食品科学与工程系二○一四年十二月前言1、实验前必须认真预习实验指导书及实验内容，明确实验目的、步骤、原理、回答实验教师的提问，回答不合要求者，须重新预习，才能进行实验。
2、对规定实验外确属需要的内容，可先提出实验原理和方法，经指导教师同意后，方可进行实验。
3、做实验时必须严格遵守实验室的规章制度和仪器设备的操作规程，服从指导教师的指导。
4、爱护仪器设备，节约使用材料，使用前详细检查，使用后要整理就位，发现丢失或损坏应立即报告，未经许可不得动用与本实验无关的仪器设备及其它物品，不准将任何实验室物品带出室外。
5、实验时必须注意安全，防止人身和设备事故的发生，若发生事故应立即切断电源，及时向指导教师报告，并保持现场，不得自行处理，待指导教师查明原因并排除故障后，方可继续实验。
6、进入实验室后应保持安静，不得高声喧哗和打闹，不准随地吐痰，不准乱抛纸屑杂物，要保持实验室和仪器设备的整齐清洁。
7、实验完毕后，经指导教师检查仪器设备、工具、材料及实验记录后方可离开。
8、实验后要认真完成实验报告，包括分析结果、处理数据、绘制曲线及图表等。
对不合格要求的实验报告应退回重做。
9、对违反实验规章制度和操作规程、擅自动用与本实验无关的仅器设备、私自拆卸仪器而造成事故和损失的肇事者必须写出书面检查，视情节轻重和认识程度按规定处理。
目录实验一薄层层析法分离氨基酸 (1)实验二葡萄皮色素提取及稳定性探究 (4)实验三青霉素的萃取与萃取率的计算 (6)实验四淀粉的提取及性质分析 (9)实验一薄层层析法分离氨基酸实验类型：验证性实验实验学时：4实验要求：必修适用专业：食品生物技术一、实验目的1、通过氨基酸的分离，学习并掌握薄层层析的原理和操作技术；2、掌握氨基酸的鉴定方法。
二、实验内容1、制板2、点样3、层析4、显色三、仪器设备仪器：毛细管、电热吹风机、层析缸、小型玻璃喷雾器、层析板、铅笔、直尺、分析天平、量筒、烧杯、烘箱。
四、所需耗材1、实验材料：谷氨酸、组氨酸、脯氨酸标准品2、试剂：（1）氨基酸标准溶液：0.01mol/L脯氨酸、谷氨酸、组氨酸标准溶液及混合溶液。
（2）硅胶G（3）0.5%羧甲基纤维素钠（CMCNa）：取羧甲基纤维素钠5g溶于1000ml蒸馏水中，煮沸，静置冷却，弃沉淀，取上清备用。
（4）展开溶剂：按80:10:10比例（V/V）混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水，临用前配制。
（5）0.25%的水合茚三酮溶液：称取0.25g茚三酮，加100mL蒸馏水溶解，避光保存。
（6）展层-显色剂：按照10:1比例（V/V）混匀展开剂和0.25%茚三酮溶液。
五、实验原理、方法和手段1、实验原理薄层层析是一种将固定相在固体上铺成薄层进行层析的方法。
由于该方法具有操作简便、层析展开时间短、灵敏度高、结果可视化等优点，广泛应用于对天然化合物的分离和鉴定。
薄层层析时一般将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。
当液相（展开溶剂）在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。
即通过吸附-解吸-再吸附-再解吸的反复进行，而将样品各组分分离开。
2、实验方法和手段本实验应用硅胶作为固相支持物，用羧甲基纤维素钠作为粘合剂，以正丁醇、冰醋酸及水的混合液为展开剂，测定混合氨基酸中各分离斑点的Rf 值，以分离和鉴别混合氨基酸的成分。
移动速率Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。
氨基酸的显色反应：茚三酮水化后生成水化茚三酮，它与氨基酸发生羧基反应生成还原茚三酮、氨基醛，与此同时，还原茚三酮又与氨基茚三酮缩合生成蓝色化合物而使氨基酸斑点显色。
六、实验步骤（一）实验流程（二）操作步骤1、制板（1）调浆：称取硅胶3g ，加0.5%的羧甲基纤维素钠8ml ，调成均匀的糊状。
（2）涂布：取洁净的干燥玻璃板a 均匀涂层b 。
（3）干燥：将玻璃板水平放置，室温下放置0.5h ，自然晾干。
（4）活化：70℃烘干60分钟。
2、点样（1）标记：用铅笔距底边2cm 水平线上均匀确定4个点并做好标记。
每个样品间相距1cm 。
（2）点样：用毛细管分别吸取氨基酸标准品及混合氨基酸溶液，轻轻接触薄层表面点样。
加样原点扩散直径不超过2mm 。
点样后用电吹风轻轻吹干，必要时重复加样。
3、层析将薄层板点样端浸入展层-显色剂，展层-显色剂液面应低于点样线。
盖好层析缸盖，上行展层。
当展层剂前沿离薄板顶端2cm 时，停止展层，取出薄板，用铅笔描出溶剂前沿界线。
4、显色在90℃下烘干30min ，即可显出各层斑点。
七、实验结果1、记录各氨基酸色斑中心至样品原点中心距离（a ）及溶剂前缘至样品原点中心距离（b ）2、计算各种已知氨基酸和未知氨基酸色谱的Rf 值：原点到溶剂前沿的距离距离原点到层析斑点中心的 f R 3、分析混合样品中未知氨基酸的组分。
八、实验注意事项1、粘在玻璃板侧面边上的硅胶粉应去掉，否则在层析时会有较强的边缘效应。
2、整个层析过程中，避免用手接触层析板，必要时戴上手套。
3、重复点样时必须等第一点样品干后再点第二点，样点不能浸入到溶液中，可将层析缸盖涂上凡士林，防止层析液挥发。
九、预习与思考题1、如何确定混合样品中的氨基酸组分？2、薄层层析的原理是什么？十、实验报告要求1、用规范的实验报告纸。
2、写清实验的目的、原理、内容、方法、设备等。
3、本实验为验证性实验，写出实验结果。
实验二葡萄皮色素提取及稳定性探究实验类型：综合性实验实验学时：4实验要求：必修适用专业：食品生物技术一、实验目的1、掌握葡萄皮色素的提取原理和方法。
2、熟悉葡萄皮色素的性质。
二、实验内容1、葡萄皮色素的提取2、研究温度、pH、H2O2对葡萄皮稳定性的影响。
三、仪器设备分光光度计，干燥器，电热恒温水浴锅、电子天平、量筒、烧杯、烘箱。
四、所需耗材1、实验材料：鲜葡萄皮2、试剂：95%无水乙醇、酒石酸、盐酸、丙酮、H2O2溶液五、实验原理、方法和手段1、实验原理葡萄皮色素是一种水溶性天然食用色素，属于黄酮类化合物，是由花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物。
在自然界中广泛存在于植物的花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中，使其呈现由红、紫红到蓝等不同颜色。
作为一种天然食用色素，不仅无毒、资源丰富外，而且具有一定的营养和药理价值，在食品、药品、化妆品等领域都有着巨大的潜力和商业价值。
2、实验方法和手段本实验利用葡萄皮色素溶于乙醇的性质提取葡萄皮色素，最大吸收波长在530nm左右，然后对葡萄皮花色苷在不同条件下的稳定性进行研究，分析温度、氧化性物质对葡萄皮花色苷的稳定性的影响。
六、实验步骤（一）葡萄皮预处理与色素浸提流程将葡萄皮与籽、梗分离。
将葡萄皮烘干,置干燥器内备用。
葡萄皮色素浸提流程:葡萄皮→干燥→破碎（5g）→提取剂浸提(50mL乙醇在80℃水浴中浸提1小时) →过滤→葡萄皮色素粗提液→测定吸光度。
（二）稳定性研究1、pH对色素颜色的影响葡萄色素在不同的pH值范围内有不同的颜色，分别观察pH为3、6、10时葡萄色素的颜色。
2、温度对色素的影响将葡萄皮色素溶液在不同温度下（30、40、50℃）保温30min,冷却后观察其颜色的变化，并测定色素溶液的吸光度值。
3、过氧化氢对色素的影响。
向葡萄皮色素溶液中加入不同浓度的H2O2,（0.02、0.06、0.1%）放置30min后，测定色素的吸光值，并观察颜色的变化。
七、实验结果1、记录实验现象2、分析实验现象的原因。
八、实验注意事项1、不同品种的葡萄中含有的葡萄皮色素的最大吸收波长会有变化，实际操作过程中可进行调整。
九、预习与思考题1、说明葡萄皮色素的稳定性如何？十、实验报告要求1、用规范的实验报告纸。
2、写清实验的目的、原理、内容、方法、设备等。
3、本实验为综合性实验，写出实验结果。
实验三青霉素的萃取与萃取率的计算实验类型：综合性实验实验学时：4实验要求：必修适用专业：食品生物技术一、实验目的1、学会利用溶剂萃取的方法对料液进行提纯。
2、掌握碘量法测定青霉素含量的方法，并计算出青霉素的萃取率。
二、实验内容1、青霉素的提取2、青霉素萃取率的计算三、仪器设备150ml棕色瓶（2个）、分液漏斗、100ml量筒、100ml烧杯（2个）、玻璃棒、酸式滴定管、铁架台、1ml移液管、10ml移液管、洗耳球、100ml容量瓶、精密pH试纸（包括pH2.4）。
四、所需耗材青霉素钠、K2Cr2O3、Na2S2O3、无水Na2CO3、碘、KI、无水乙酸钠、冰醋酸、NaOH、浓HCl、可溶性淀粉、乙酸丁酯、浓硫酸。
（1）Na2S2O3（0.1mol/L）取Na2S2O3约2.6g与无水Na2CO3 0.02g，加新煮沸过的冷蒸馏水适量溶解，定容到100ml。
（2）碘溶液（0.1mol/L）取碘1.3g，加KI 3.6g与水5ml使之溶解，再加HCl 1～2滴，定容到100ml。
（3）乙酸乙酸钠（pH4.5）缓冲液100ml 取83g无水乙酸钠溶于水，加入60ml冰醋酸，定容至1L。
（4）NaOH（1mol/L）4g/100ml（5）HCl（1mol/L）8.3ml/100ml（6）H2SO4（1mol/L）55.5ml/L（7）淀粉指示剂称取可溶性淀粉0.5g，置于玛瑙研钵中，加少量除盐水研磨成糊状物，徐徐加入到100mL煮沸的除盐水中，继续煮沸1min，冷却后备用。
该试剂不宜存放，应在使用时配制。
五、实验原理、方法和手段1、实验原理萃取过程是利用在两个不混溶的液相中各种组分溶解度的不同，从而达到分离组分的目的。
2、实验方法和手段本实验利用当pH=2.3时，青霉素在乙酸丁酯中比在水中溶解度大，因而可以将乙酸丁酯加到青霉素溶液中，并使其充分接触，使青霉素被萃取浓集到乙酸丁酯中，达到分离提纯的目的。
青霉素萃取率（%）=（萃取前青霉素含量－萃取后青霉素含量）/萃取前青霉素含量。
萃取前后青霉素含量的测定采用的是碘量法。
碘量法的基本原理为青霉素类抗生素经碱水解的产物青霉噻唑酸，可与碘作用（1mol青霉噻唑酸可与8mol碘原子反应，即青霉素：I2=1：4），根据消耗的碘量可计算青霉素的含量。
利用碘量法测定青霉素含量时，为了消除供试品中可能存在的降解。
剩余的碘用Na2S2O3滴定（Na2S2O3：I2=2：1）。
六、实验步骤1、Na2S2O3的标定取K2Cr2O3 0.15g于棕色瓶中，加入50ml水使之溶解，再加KI 2g，溶解后加入稀H2SO4 40ml，摇匀，密塞，在暗处放置10min。
取出后再加水25ml稀释，用Na2S2O3滴定临近终点时，加淀粉指示剂3ml，继续滴定至蓝色消失，记录消耗的体积。