微生物

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1、微生物(microorganism):形体微小、结构简单、一般肉眼不见,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大才能观察到的微小生物。

方式为二分裂。

广义:两菌四体,除细菌外,其余是典型细菌与其它类型微生物间的过渡类型狭义:仅指细菌,数量最大、种类最多、最具代表性

细胞壁(cell wall)是位于细菌细胞最外层,包绕在细胞膜周围,无色透明、坚韧而富有弹性的膜状结构。平均厚度为12——30nm,组成较复杂,并随不同菌种而异。

细菌细胞壁由肽聚糖层(G+、G-相似)和特殊组分(G+、G-不同)构成。

4、革兰阳性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥

交联率为75%;三维立体结构;15-50层

革兰阴性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链

交联率25%;二维平面结构;1-2层

革兰阳性菌细胞壁特殊组分—磷壁酸

5、磷壁酸为革兰阳性菌特有成分,是由核糖醇或甘油残基经磷酸二酯键互相连接而成的多聚物。按结合部位不同分为壁磷壁酸和膜磷壁酸两种

6、革兰阴性菌细胞壁特殊组分—外膜

外膜位于肽聚糖外侧,由内向外由脂蛋白、脂质双层和脂多糖三部分组成

a脂蛋白:连接肽聚糖与脂质双层b脂质双层:结构类似细胞膜,有选择性通透作用

c 脂多糖(LPS):革兰阴性菌内毒素

7、脂多糖(lipopolysaccharid, LPS (脂多糖的结构:脂质A:一种糖磷脂,是内毒素的毒性成分,无种属特异性O特异多糖:即O抗原,具有种特异性核心

多糖:属特异性,同一菌属细菌核心多糖相同)

8、G+ 菌与G- 菌细胞壁的比较**

G+(强度:较坚韧厚度:20-80nm 肽聚糖层数:可多达50层肽聚糖含量: 50%-80% 磷壁酸:有外膜:无五肽交联桥:有

G—(较疏松10-15nm 1-2层5%-20% 无有无)

9、L型细菌:概念:某些药物作用于细菌,可抑制的肽聚糖的合成或破坏细胞壁的结构,在高渗环境下,细菌仍可存活,成为细胞壁缺陷型

形成条件:溶菌酶、青霉素、胆汁、溶葡萄球菌素、抗体、补体等

生物学特性:多形性、革兰阴性、高渗培养、生长缓慢、荷包蛋样菌落、可回复与医学的关系:致病性下降,常引起慢性和反复发作的感染,易导致误诊、漏诊。细胞膜相关的结构:中介体(mesosome)是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物,多见于革兰阳性细菌,参与细胞呼吸和细菌分裂,又称拟线粒体或类纺锤丝。

细胞质:细胞膜包裹的溶胶状物质,由水、蛋白质、脂类、核酸及少量糖和无机盐组成。它是细胞重要活动发生的场所,同时也是细胞器存在的场所。

重要细胞器:核糖体异染颗粒质粒(plasmid):染色体外的遗传物质,存在于细胞质中。为闭合环状的双链DNA,控制细菌某些特定的遗传特性。

10、核糖体:细菌合成蛋白质的场所,游离存在于细胞质中,由RNA和蛋白质组成。沉降系数70s 50s+30s(而真核80s 60s+40s

11、胞质颗粒细菌细胞质中含有多种颗粒,大多为贮藏的营养物质。其中有一种主要成分是RNA和多偏磷酸盐的颗粒,其嗜碱性强,用亚甲蓝染色时着色较深呈紫色,称为异染颗粒。常见于白喉棒状杆菌,位于菌体两端,故又称极体,有助于鉴定。

12、核质:核质由单一密闭环状DNA分子反复回旋卷曲盘绕组成松散网状结构。细菌是原核细胞,不具有成形的核。细菌的遗传物质称为核质或拟核,无核膜、核仁和有丝分裂器。功能与真核细胞的染色体相似,决定着细菌各种遗传性状。特殊结构**:荚膜(capsule)荚膜:某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质,当其厚度>=0.2µm,边界明显,光镜下可见时,称为荚膜。厚度< 0.2µm者称为微荚膜。其成分为疏水性多糖或蛋白质的多聚体,用理化方法去除后并不影响细胞的生命活动。

荚膜的化学组成、特点及观察:成分是多糖或多肽。

具有免疫原性,荚膜肿胀试验检测。

荚膜的形成与环境条件有密切关系。一般在动物体内或含营养丰富的培养基中易形成荚膜,在普通培养基上或连续传代则易消失。

荚膜对一般碱性染料亲和力低,不易着色。

普通染色—菌体周围未着色的透明圈

特殊染色—染上与菌体不同的颜色。墨汁负染

荚膜的功能:保护细菌:抗吞噬作用、抗干燥、抗其它损伤(三抗)粘附作用抗原微荚膜与荚膜具有相同的功能

荚膜的重要医学意义:细菌重要的致病物质,免疫学诊断及细菌鉴别的靶点

免疫预防生物制品的来源鉴别细菌(特殊结构共有的重要意义

鞭毛:菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物,称为鞭毛,是细菌的运动装置。鞭毛经特殊染色法使鞭毛增粗后光镜下可见。

鞭毛的功能:鞭毛是运动装置。有鞭毛的细菌能主动运动,可通过动力试验进行

细菌鉴定;

鞭毛有免疫原性。鞭毛的成分为鞭毛蛋白,并且具有高度的特异性,称为鞭毛抗原(H抗原),可作为细菌分类、分型的依据;

有的细菌其鞭毛与致病性有关。

鞭毛的重要医学意义:细菌重要的致病物质免疫学诊断、防治细菌鉴别

菌毛(filus/fimbriae)菌毛:许多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物,与细菌的运动无关。

菌毛蛋白具有抗原性。根据功能不同,菌毛可分为普通菌毛和性菌毛两类。菌毛在普通光学显微镜下看不到,必须用电子显微镜观察。

普通菌毛:普通菌毛遍布菌细胞表面,每菌可达数百根。

普通菌毛是细菌的粘附结构,能与宿主细胞表面的特异性受体结合,是细菌感染的第一步。

菌毛的受体常为糖蛋白或糖脂,与菌毛结合的特异性决定的宿主的易感部位。性菌毛(sex pilus)仅见于少数革兰阴性菌。数量少,1-4根。比普通菌毛长而粗,中空呈管状。性菌毛由致育因子F质粒编码,故又称F菌毛。

带有性菌毛的F+菌与无性菌毛的F-菌相遇时,性菌毛与其相应受体结合,F+菌内的质粒或DNA可通过性菌毛进入F-菌体内,此过程即接合。

性菌毛是某些噬菌体吸附于菌细胞的受体。

菌毛的重要医学意义:

细菌的致病物质(粘附作用,普通菌毛)、参与细菌的遗传变异(接合,性菌毛)免疫学诊断、鉴别细菌

芽胞:某些细菌在一定的环境条件下,能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体,是细菌的休眠形式。芽胞形成后细菌即失去繁殖能力。

产生芽胞的都是革兰阳性菌。

芽孢折光性强、壁厚、不易着色,经特殊染色光镜下可见。

芽胞的功能与意义:芽胞的抵抗力强,可在自然界中存在多年,是重要的传染源。但芽胞并不直接引起疾病,只有发芽成为繁殖体后,才能迅速大量繁殖而致病。是细菌对不利环境的适应。芽胞抵抗力强,故应以杀灭芽胞作为可靠的灭菌指标。高压蒸汽灭菌法是杀灭芽孢最有效的方法。芽胞抵抗力强的原因:(1)芽胞含水量少,蛋白质受热后不易变性。(2)芽胞具有多层致密的厚膜,理化因素不易透入。(3)含有的DAP与钙结合的盐能提高芽胞中各种酶的稳定性。鉴别细菌:芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异,有重要的鉴别意义。

革兰染色法(Gram stain):最常用最重要的染色法

意义:鉴别细菌;区分致病性;帮助选择抗生素。

原理:G+及G- 等电点不同;脂质含量不同;含特殊结合染料的成分。

1.涂片、干燥及固定

2.单染:结晶紫染液第一次染色1min

3.媒染:碘-碘化钾溶液浸湿1min

4. 脱色:95%乙醇溶液进行颜色洗脱30s

5.复染:红色的复红染液染色1min

细菌生长繁殖的条件

A营养物质:水碳源氮源无机盐生长因子

b氢离子浓度(pH)7.2~7.6 c温度d气体(O2 及CO2)

专性需氧菌:具有完善的呼吸酶系统,仅能在有氧环境下生长。

微需氧菌:在低氧压(5%-6%)生长最好。

兼性厌氧菌:兼有有氧呼吸和无氧发酵两种功能,但以有氧时生长较好。大多数

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