微生物与免疫实验指导
动物微生物与免疫
课程实验指导
怀化职业技术学院动物科技系
王湘
2016年5月
前言
动物微生物与免疫是畜牧兽医、兽医、兽药技术、动物防疫检疫专业的一门重要的专业基础课，是为动物畜禽传染病、兽医卫生检验、兽医临床基础、家畜内科学、家畜外科学、家畜寄生虫病等课程提供必要的理论知识和操作技能。在各相关专业中占有重要的地位。
为了提高教学水平，反映出本学科更具科学性、先进性和实用性的实验内容，根据教学大纲的要求和课程设置，同时根据本校教学实验条件，在参阅中外相关文献，学习兄弟院校的教学经验和资料的基础上，编写了本实验指导教材。本实验指导旨在理论与实际相结合，使学生将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，提高学生的综合能力与创新意识和学生分析问题和解决问题的能力。
目录
微生物与免疫实验守则 (1)
微生物实验室常用仪器的使用与保养 (3)
微生物实验基本操作技术 (7)
实验一显微镜油镜的使用及细菌形态的观察 (11)
实验二细菌标本片的制备及染色 (13)
实验三常用培养基的制备 (15)
实验四细菌的分离培养及培养形状的观察 (17)
实验五细菌的生化试验 (21)
实验六细菌的药物敏感试验（纸片法）技术 (24)
实验七外界环境微生物检查 (26)
实验八饲料中微生物的检查 (27)
实验九实验动物接种技术 (29)
实验十病毒鸡胚接种技术 (31)
实验十一病毒的血凝和血凝抑制试验 (33)
实验十二凝集试验 (35)
实验十三沉淀试验法 (37)
实验十四酶联免疫吸附试验 (38)
实验十五抗猪瘟血清的制备 (40)
实验十六真菌的检验技术 (41)
微生物与免疫实验守则
一、实验指导说明
1、性质与作用：动物微生物是高等农业职业院校畜牧兽医专业的一门岗位素质课程。对应岗位是：动物疫病诊断、检疫、检测技术等实训室技术岗位。作用是：研究微生物与畜禽的关系，并利用微生物学与免疫学的知识和技能来诊断、防治畜禽的疾病与人畜共患疾病，让学生具备畜牧兽医行业高等技术应用型专门人才所必须的畜禽疾病诊断、检测、预防等专业知识和熟练的职业专门技术能力，培养学生具备相应职业关键技术能力和职业道德。在教学过程中，使学生要掌握动物微生物与免疫所必须的专项实践技能和综合职业能力，基本掌握细菌类疾病、病毒类疾病、其他微生物实训室检验技术等。同时，在教学中对学生职业道德进行影响，注意敬业精神、吃苦耐劳、尽心钻研等方面的教育影响，并形成良好职业道德和敬业精神。
2、课程内涵：本课程的内涵是通过过程性的训练及考核，通过形成性联系及渐进式教学，使学生不但掌握专业知识而且能够有效把握技能的知识背景及相应的产业历史，为学生在系统掌握本课程专业技能操作的同时，初步具有应对复杂问题及进行有效迁移以及创造的能力。使学生掌握动物微生物课程所必须的专业理论知识，专业实践能力和综合职业能力，掌握主要动物的疾病实训室诊断技术，可以独立的开展动物疫病的实训室检验，具有较强的工作岗位适应能力、分析和解决实际问题的能力以及创新意识和职业道德意识。经过本课程的学习及培养后学生应具有认真负责、踏实肯干，严谨求实的工作态度及独立思考、自主创业的精神。
二、实验进行程序与要求
1、预习学生在课前应认真预习实验指导以及教材有关章节，必须对该次实验的目的要求、实验内容、基本原理和操作方法有一定的了解。
2、讲解教师对该实验内容的安排及注意事项进行讲解，让学生有充分的时间按实验指导的要求进行独立操作与观察。
3、独立操作与观察除个别实验分组进行外，一般由学生个人独立进行操作和观察。在实验中要按实验指导认真操作，仔细观察，作好记录。
4、示教每次的实验都备有示教内容，其目的是帮助学生了解某些实验中的难点，扩大在实验课有限时间内获得更多感性知识的机会。
5、作业实验报告必须强调科学性，实事求是地记录、分析、综合。在实验结束时呈
交。学生应认真阅读教师批改后的实验报告，不断提高实验质量。
6、小结实验结束后，由师生共同小结本次实验的主要收获及今后应注意的问题。
三、实验规则和注意事项
1、实验人员必须穿戴工作衣帽、手套、口罩等防护措施，防止病原微生物感染。
2、上实验课时必须携带实验指导、实验报告纸及绘图文具等，按规定座位入座。
3、实验前，要认真检查所用仪器、药品是否完好、齐备，如有缺损应及时向教师报告，自己不得随意调换标本、仪器等。没有得到教师的允许，不能动用实验室其它非本次实验所用的仪器设备。
4、实验时要遵守纪律。有问题时举手提问，严禁彼此谈笑喧哗，不准在实验室吃食和会客。
5、实验时要遵守实验操作规程，严格按照教师的安排和实验指导的要求进行。使用显微镜检查非永久片时，要特别小心。防止染料或试剂沾污镜头和镜台，不要用高级显微镜观察非永久片。操作要正规，观察要认真仔细，及时完成实验报告。
6、要爱护仪器、标本和器材设备，注意节约实验材料、药品和水电。如有损坏器材应立即报告，并主动登记、说明情况。凡是有化学药品的试剂和溶液瓶上，必须贴上标签，注明名称、成份、浓度、配制日期。
7、实验结束后，应清理实验台面，所有液体废物、酸类、染料等，应倒在废物缸内，不能倒在水槽中。实验动物的尸体等应严格消毒后掩埋。认真清理好仪器、药品及其他用品，放回原处。值日生要负责清扫地面，收拾实验用品，处理垃圾，关好水、电、门窗后再离开。
8、爱护实验用品，损坏的玻璃器皿等器材，应做好详细记录，人为因素损坏的应按相应规定赔偿。
微生物实验室常用仪器的使用与保养
掌握常用仪器的使用是进行微生物实验的基础。在实验室中不按规定操作仪器，可
能会造成很大的损失，直接影响到教学和科研的进展，严重时甚至可能造成人员伤亡。因此，有必要对某些常用仪器的使用方法和注意事项予以介绍。
1、超净工作台
超净工作台主要用于进行无菌操作，见图1。
（1）使用方法
①依次打开电源开关及工作开关，紫外灯照射20 min ，开启鼓风机运转10 min，方可进行实验操作。
②将实验需要的器材拜访在超净工作台台面上，灭过菌的材料如培养基放在左侧，工具放在右侧。
③将紫外灯切换到照明灯（鼓风机保持运转），打开玻璃门（玻璃门开启幅度不能过高，以不超过下巴为宜），手臂进入操作台前先点燃酒精灯，再用75%的酒精棉球擦净工作面，并对手进行消毒。
④操作时，应在中央无菌区域进行（尽量不要讲话），严格进行无菌操作。
⑤操作完毕后熄灭酒精灯，清理工作台面。实验结束后，开启紫外灯照射台面15min后，关闭工作台开关及电源开关，将左右物品归并带走废弃物。
（2）注意事项
①超净工作台内严禁长时间存放物品。
②紫外线对皮肤和视网膜由很强的刺激性，避免紫外线直射，单层玻璃即可有效阻挡紫外线。
③操作过程应严格遵守无菌操作规范。
④避免频繁开关紫外灯管和照明灯管，延长灯管使用寿命。
⑤定期检查空气滤网等滤材，老化严重应更换。
2、恒温培养箱
电热恒温箱主要用于细菌的培养，见图2。
（1）使用方法
①先检查电源电压，与培养箱电压一致时可直接插上电源，如不一致，可使用变压器变压。
②插上电源插头，开启电源开关，绿色指示灯明亮，表示电源接通。然后调节温度旋钮，选择所需要的温度，红色指示灯亮，表示电热丝已在发热，箱内升温。
③当温度升至所需温度是，红、绿灯交替明亮即为所需恒温。将培养物放入箱内，关好箱门。
④至设定培养时间后，取出培养物观察。
（2）注意事项
①温箱必须放置在干燥平稳处。
②使用时，随时注意显示温度是否与所需温度相同。
③除了取放培养物开启箱门外，尽量减少开启次数，以免影响恒温。
④工作室内隔板放置试验材料不宜过重，底板为散热板，切勿放置其他物品。
图1 超净工作台图2 电热恒温培养箱
3、电热干燥箱
电热干燥箱主要用于玻璃器皿和金属制品等的干热灭菌。
（1）使用方法
①先检查电源电压，在接上电源。
②将待灭菌物品放入干燥箱中。
③将温度调至所需温度后，打开电源开关，当门边的保温指示灯亮时，表明箱内温度达到所需温度，维持一定时间后（通常160℃、2h）关闭电源。当干燥箱中的温度下降至60℃以下时方可取出灭菌的物品。
④若仅需达到干烤的目的，可一直开启活塞通气孔，温度只需60℃即可。
（2）注意事项
①干燥箱中的物品不宜堆放太过拥挤，要留有一定的空隙，以利于热空气的流通，各部分均匀受热，灭菌彻底。
②加热升温时应将鼓风机打开，使各部分受热均匀。
③橡胶物品不能使用干燥箱进行灭菌。
④灭菌完毕后不可马上打开干燥箱，以免箱内物品着火或者玻璃器皿炸裂，必须待箱内温度降至60℃以下后，才能打开干燥箱。
⑤干燥过程中如遇箱内物品着火冒烟，应立即切断电源，关闭排气小孔，用湿毛巾堵塞箱门四周，杜绝空气进入，火则熄灭，待温度降至60℃以下时，方可拿出物品。
4、高压蒸汽灭菌锅
高压蒸汽灭菌锅亦称为高压灭菌锅，主要用于不怕潮湿的物品灭菌，常用的有手提式高压灭菌锅，见图3。
（1）使用方法
①在外桶中接入适量的水，将待灭菌物品放入灭菌桶内，再将灭菌桶放入外通内，改好金属盖后，接上电源，关好安全阀。打开放气阀，待水蒸气均匀冒出时，表示锅内冷空气已排完。然后关闭放气阀继续加入，待灭菌锅内压力升至约1×105Pa（121.3℃），经20~30min，即可达到灭菌的目的。
②灭菌时间达到后，停止加入，带压力降至零时，打开金属厚盖，取出灭菌物品。（2）注意事项
①无自动控温设备的灭菌器，应用开关电源的方法来控制温度和压力。
②灭菌桶内的物品不宜堆放的过挤，以免受热不均，影响灭菌效果。
③盖上的排气金属软管应插入灭菌桶内壁的排气槽内，以免放弃时将桶内的冷空气排放彻底。
④盖盖时应对称的拧紧固定螺旋，否则会使盖偏向一侧，造成密封不严，达不到所需的温度和压力。
⑤灭菌完毕后，不宜一次性将气排空，而应多次的缓慢的放弃，否则桶内灭菌液体沸腾，会冲开塞子或引起炸裂。
图3 手提式高压蒸汽灭菌锅
5、普通冰箱
（1）使用方法
①冰箱应放置在干燥通风处，避免日光照射，远离热源，离墙10cm以上，以保证对流，利于散热。
②电冰箱电源的电压一般为220V，如不符合，须另装稳压器稳压。
③通电检查冰箱内照明是否明亮，及其是否运转。
④冰箱内温度调节器调至所需的温度，一般冷藏室的温度应为4℃，冷冻室的温度为-20℃。将需要保存的物品放入冰箱内适当的位置，关好箱门即可。
（2）注意事项
①冰箱应放置在阴凉通风处，与墙壁之间应留有一定的距离，以利于散热。
②温度过高的物品不宜立即放入冰箱，以免增加冰箱的工作时间，降低使用寿命。
③冰箱内冷冻物品不宜反复冻融，以免影响其活力和品质，短时间停电时不宜打开冰箱取出物品。
④有霜或微霜冰箱应定期除霜，经常保持冰箱内的清洁干燥，有污染或霉变时应及时
清理，清理时应将电源关闭，待冰融后进行。
⑤箱内物品不宜堆放过挤，以利于冷空气对流，使箱内温度均匀。
⑥箱内保持清洁干燥，如有霉菌生长，断电后取出物品，经福尔马林熏蒸消毒后，方
可使用。
5、离心机
离心机一般分为常速离心机和超速离心机两种。实验室常用离心机沉淀细菌、病毒、血细胞、虫卵和分离血清。
（1）使用方法
①先将盛有材料的两个离心管及套管放天平上平衡，然后对称放入离心机中，若分离材料为一管，则对侧离心管放入等量的其他液体。
②将盖盖好，接通电路，慢慢旋转速度调节器到所需刻度，保持一定的速度，达到所需的时间（一般分离血清时转速为2000r/min，维持15~20min）后，将调节器慢慢旋回“0”处，停止转动方可打开盖子取出离心管。
③离心机如有杂音或离心机震动，立即停止使用，进行检查。
（2）注意事项
①离心管和套管必须严格称量平衡后才能放入离心机内，且必须对称放置。
②使用调速器调速时，必须逐档升降，待每档速度达到稳定时才能调档，不能连续调档或直接调至所需转速，以免损伤机器或降低其使用寿命。
③离心机没有完全停下时不能打开盖子，以免机内物品被甩出。
6、恒温水浴箱
恒温水浴箱，主要用于蒸馏、干燥、浓缩及温渍化学药品或血清学试验用。
使用时必须先加水于箱内，通电后电源指示灯亮，再顺时针方向旋转温度调节器，使加热指示灯亮即接通内部电热丝，使之加温。如水温达到所需温度，再逆时针方向微微调节温度调节器，使水温恒定不变即达到定温。使用时，不可加水过多或过少，以没过加热容器为宜。使用完毕后，待水冷却后，必须放水擦干。
必须强调，我们在教学和生产中，每购买一种新的仪器，必须认真阅读仪器说明书，以便正确使用。
微生物实验基本操作技术
一、棉塞的制作
棉塞的作用有二：一是防止杂菌污染，二是保证通气良好。因此，棉塞质量的优劣对实验的结果有很大的影响。正确的棉塞要求形状，大小，松紧与试管口（或三角瓶口）完全适合，过紧防碍空气流通，操作不便；过松则达不到滤菌的目的（棉塞制作过程图1）。塞上棉塞时，应使棉塞长度的1/3在试管口外，2/3在试管口内。做棉塞的棉花要选纤维较长的，一般不用脱脂棉做棉塞，因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格昂贵。
图1 棉塞的制作过程
此外，在微生物实验和科研中，往往要用到通气塞，即用几层纱布（一般8层）相互重叠而成，或是在两层纱布间均匀铺一层棉花而成。这种通气塞通常加在装有液体培养基的三角烧瓶口上。经接种后，放在摇床上进行振荡培养，以获得良好的通气促使菌体的生长或发酵，通气塞的形状如图2。
A. 配制时纱布塞法
B.灭菌时包牛皮纸
C.培养时纱布翻出
图2 通气塞
二、玻璃器皿的清洗
1.不能用有腐蚀性的化学试剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿；新的玻璃器皿应2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充分清洗干净，去除残留的酸，最后用蒸馏水冲洗2~3次，倒立使之干燥或烘干。
2.用过的器皿应立即洗涤。若占有油污的器皿，可用肥皂水煮半小时后趁热刷洗，再用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗2~3次，晾干。
3.强酸、强碱、琼脂等能腐蚀、阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须倒在废液缸内。
4.含有琼脂培养基的器皿可先将培养基刮去，或用水蒸煮，至培养基融化后倒出，然后再用洗洁净清洗。
5.凡遇有传染性材料的器皿，应经高压蒸汽灭菌后再进行清洗。一般的器皿可以用去污粉、肥皂或洗洁净清洗，油脂很重的器皿应先将油脂擦去。沾有煤膏、焦油及树脂一类物质，可用浓硫酸或40%氢氧化钠或用洗液浸泡；沾有蜡或有油漆物，可加热使之熔融后揩去，或用有机溶剂（苯、二甲苯、汽油、丙酮等）揩去。
6.载玻片或盖玻片，先擦去油垢再清洗干净，然后在稀的洗液里浸泡2小时，用清水冲净，最后用蒸馏水冲洗，干后浸于95%酒精中保存备用。
7.洗涤后的器皿应达到玻璃壁能被水均匀润湿而无条纹和水珠。
三、玻璃器皿的包装
1. 培养皿的包装
培养皿常用旧报纸紧紧包裹，一包7～10套，
包好后干热或湿热灭菌。如果将培养皿放入金属筒内
进行干热灭菌，则不必用纸包，金属筒有一圆筒形的
带盖外筒，里面放一装培养皿的带底框架（图3），
此框架自圆筒内取出，以便装取培养皿。
2.移液管的包装
转备好干燥的移液管，在距其粗头顶端约0.5cm处，塞约1.5cm长的棉花，以免使用时将杂菌吹入其中，或不慎将微生物吸出管外。棉花要松紧适当（过紧，吹吸液体太费力；过松，吹气时棉花会下滑），接着按图4方法包扎，后将移液管集中在一起，用一张大报纸包好，进行干热或湿热灭菌。
图4移液管的包扎方法与步骤
3. 试管和三角瓶的包装
试管管口和三角瓶瓶口塞上棉花塞或硅胶塞后，在棉花塞与管口和瓶口的外面用二层报纸包扎好（如有牛皮纸，效果更好），进行干热或湿热灭菌。试管较多时，一般 7 个或
10 个一组，再用双层报纸包扎。
四、玻璃器皿的灭菌
常用干热灭菌法。将包装好的玻璃器皿放入干燥箱内，为使空气流通，堆放不宜过挤，也不能紧贴箱壁，以免烧焦。一般采用160℃ 1~2h灭菌即可。灭菌完毕，关闭电源待烤箱内温度下降至60℃以下，方可开箱取出玻璃器皿。此外，也可用高压蒸汽灭菌，灭菌后烘干。
五、接种环的使用
1. 用接种环转接菌种
（1）接种环灭菌左手持斜面培养物，右手持接种环，按图5方法将接种环进行火焰灼烧灭菌（烧至发红），然后在火焰旁边打开斜面培养物的试管塞（注意：塞子不能放在桌上），并将管口在火焰上烧一下（图 7B）。
（2）取培养物在火焰旁，将接种环轻轻插入试管的上半部（此时不要接触斜面培养物），至少冷却5 s后，挑取少许培养物（菌苔），再烧一下管口，加塞并将其置于
试管架中（图 7C，D，E）。
图5 接种环的火焰灭菌步骤
（3）接种用左手迅速从试管架上取出一支未接种的斜面培养基，在火焰旁取下塞子，管口灼烧一下，将沾有少量菌苔的接种环迅速放处试管的底部（注意：接种环不要碰到试管口边）并从下到上划一直线，然后再从其底部开始向上作波浪形划线接种（图 7F）。完毕后，同样烧一下试管口，加塞（图 7G），将接种环在火焰上灼烧后放回原处（图 7H）。如果是向盛有液体培养基的试管和三角瓶中接种，则应将挑有菌苔的接种环首先在液体表面的管内壁上轻轻摩擦，使菌体分散从环上脱开，进入液体培养基中。
上述无菌操作技术，也可按照图6的方法，将待接和被接的两只试管同时拿在左手上进行。
图6 手持2只试管的接种方式
图7 用接种环转接菌种的操作程序
2.用移液管转接菌液
轻轻晃动装菌液的试管（注意：不要溅到管口），暂放加试管架上。取一支已灭菌的移液管，按图 8 取一定量的菌液，迅速转入另一支装有培养液或无菌水的试管中。
图8 用移液管吸取菌液
实验一显微镜油镜的使用及细菌形态的观察
一、目的要求
1.了解普通光学显微镜油镜的原理。
2.掌握显微镜油镜的操作步骤及保养方法。
3.掌握细菌形态的观察和描绘。
二、试验材料
显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、细菌染色标本。
三、实验内容
（一）显微镜油镜的使用
1.油镜的识别：油镜是显微镜物镜的一种，因使用时必须浸于香柏油内，故称油镜。油镜与其他物镜有以下区别：
（1）油镜一般是所有物镜中最长的。
（2）油镜头上标有其放大倍数“100×”或“90×”，使用时应查看油镜上标明的倍数。（3）不同厂家生产的显微镜,常在不同镜头上标有不同颜色的线圈以示区别，使用时应先熟悉一下油镜头上的线圈颜色，以防用错物镜。
2.基本原理：油镜头的镜片很小，进入镜中的光线亦少，光线通过载玻片时，由于空气介质和玻璃介质的折射率不一样，光线因折射使视野更暗。若在油镜和载玻片之间加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515），故可减少因折射而射入镜头外的光线，提高了视野的亮度，便于观察。物镜的入射角见图1-1。介质折射率对物镜光线通路的影响见图1-2。
图1-1 物镜的光线入射角图1-2 干燥物镜和油浸系物镜光线通路
3.使用方法
（1）取镜：打开镜箱，右手握住镜臂，左手托住镜座，轻轻的放在洁净平稳的桌上或实验台上。
（2）检查各部位零件是否完好，用纱布把镜身擦干净（接物镜、接目镜用擦镜纸拭擦）。
（3）调节光线：将低倍镜转至镜筒下方，转动粗调节器，使镜头离载物台1厘米，开放光圈，升高聚光器，调节反光镜（一般在自然光下用平面反光镜）使视野内有均等的光线。水浸标本应用较弱的光线，染色标本宜用强光。
（4）将标本置载物台上，使之正好在接物镜的下方。
（5）低倍镜观察：转动粗调节器使物镜向下降至距标本0.5厘米处，用眼从目镜处观察，同时转动粗调节器使镜筒慢慢升起，待看到物象时，再用细调节至清晰看见为止（初学者要注意分辨聚光器上或载物片或镜头上面的灰尘，以免误认为待观察物）。
（6）高倍镜观察：在低倍镜下观察到的物体用推动器移至视野中心，然后移动转换器，将高倍镜直接转到镜筒下方，然后由接目镜观察，调节光圈及聚光器获得适当的照明，再转
动细调节器可看见物象（不要转动粗调节器）。并将要观察部分移至视野中央。
（7）油镜使用
①用粗调节器将镜筒起约2厘米，将油镜转至镜筒下方，加液体蜡（香柏油）一滴于载玻片所要观察的部位上。
②用粗调节器轻轻将镜筒转下，此时应从显微镜侧方注意观察，使油镜浸入油中，并与标本片几乎相接触为止。
③调节聚光器、光圈、使得照明适宜，然后将粗调节器轻轻向后转动，使镜筒极其缓慢地上升，至能见到模糊物象为止。
④转动细调节器，使物象完全清晰。如上升时油镜已离开油面，仍未见到物象，必须再从侧面注视，将油镜降下，重复操作，直到看清物象为止。必须用粗调节器找到模糊物象后再用细调节器调节至物象清楚，否则禁止用细调节器。
⑤油镜使用完毕后，将镜筒升起，取下载玻片，用一片擦镜纸擦镜头上的油，如用香柏油则再用一片擦镜纸沾二甲笨（或笨）少许擦沾在镜头上的残存油渍。然后再用干净的擦镜纸小心地将二甲笨擦干净，以免粘合透镜的树酯或麻仁油溶解而损坏镜头。
⑥显微镜使用完毕后，应将镜头转成“八”字式，或将最低倍数镜头转至镜筒下方，再降下镜筒与聚光器，放平反光镜，拭去灰尘，归置箱中。
⑦显微镜应放在干燥阴凉的地方，不要放在强烈日光下照射。潮湿季节要经常擦镜头，或在镜匣内放上干燥剂硅胶，以免长霉而损坏镜头。
（二）细菌形态的观察：
观察细菌细胞的基本形态和排列状况，细菌的特殊结构；细菌的太小可用显微镜侧微尺或显微镜照相后进行测算；细菌经革兰氏染色可染成蓝紫色或红色，没蓝染色为蓝色。
1.细菌基本形态的观察：
2.细菌特殊构造的观察：
（1）球菌标本片的观察（1）细菌荚膜标本片的观察
（2）杆菌标本片的观察（2）细菌鞭毛标本片的观察
（3）螺旋菌标本片的观察（3）细菌芽孢标本片的观察
2.显微镜使用注意事项：
（1）持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，一面零件脱落或碰撞到其他地方。
（2）当油镜头与标本片几乎接触时，不可再用粗调螺旋向上移动载物台或下降油镜头，以免损坏玻片甚至压碎镜头。
（3）当油镜头和玻片几乎接触时，不可再用粗调节螺旋向上移动载物台或下降油镜头，以免损坏玻片甚至是压碎镜头。
（4）香柏油的用量以1－2滴、能淹到油镜头的中间部分为宜，用量太多则浸染镜头，太少则视野变暗不便观察。
（5）为了增强视野的亮度，应做到三点：聚光器调至最高，光圈调至最大，反光镜用凹面镜。
（6）镜头的擦拭只能用擦镜纸擦拭，不能用手、棉布或其他纸张擦拭。使用二甲苯擦镜头时，用量不宜过多，防止溶解固定镜头的树脂。
四、教学组织
实验1人一组，每人有一台显微镜，教师认真讲解操作规程，边讲解边示范，学生观察做图，在学生基本清楚的下，教师进行分别指导教学。
五、思考题与作业
1.实验报告，将细菌形态画于实验册上。
2.用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？
实验二细菌标本片的制备及染色
一、目的要求
1.了解其他的染色方法和操作步骤。
2.掌握细菌抹片的制备及革兰氏染色方法。
二、试验材料
病料、细菌培养物、显微镜、载玻片、接种环、香柏油、二甲苯、擦镜纸、酒精灯，染色液等。
三、实验原理
简单染色法是一种最基本的染色方法，是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，而碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红、孔雀绿或蕃红）等进行染色，当这类染料解离后，染料离子带正电荷，使菌体着色。简单染色一般难于辨别细菌细胞的构造。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的重要鉴别染色反应。通过革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G－）两大类。这是因为两类菌的细胞壁结构和成分的不同，G－菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经过蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色，即紫色。
四、实验内容
1.细菌抹片的制备
（1）载玻片的准备取洁净的载玻片，如有油迹或污垢，用少量的酒精擦拭。通过火焰2~3次，以便除去残余油迹，如上述方法未能除去油渍，可再滴加1~2滴冰醋酸。
（2）抹片的准备根据所用材料的不同，抹片的方法也有所不同。
①固体培养物或浓汁粪便等，用经火焰灼烧灭菌的接种环，蘸取一小滴生理盐水或蒸馏水于玻片上，再用灭菌的接种环取细菌的固体培养物少许与玻片上的液滴混匀，涂抹成直径1~1.5cm的均匀涂片。
②液体培养物或血液、渗出液、乳汁、尿液等，直接用灭菌接种环取一环或数环待检物置于玻片上制成涂片。
③组织脏器材料，取一块脏器，以其新鲜切面在玻片上制成压印片或抹片，或直接用接种环从组织深处取材料制成涂片。
（3）干燥固定将抹片放至自然干燥或置于温箱中干燥后，将涂面朝上，以其背面在酒精灯火焰上通过数次，略微加热（以不烫手背为最佳）进行固定。化学固定时，可将干燥好的玻片浸入甲醇中2－3min后取出晾干，或在涂片上滴加数滴甲醇使其作用2－3min 后自然挥发干燥。此外，丙酮和酒精也可用作化学固定剂；作瑞特氏染色的涂片不需固定，因染色液中含有甲醇，有固定作用。
图2-1 细菌的涂片、干燥和固定
2.细菌染色根据不同的材料和菌种选择不同的染色法。
（1）单染色法：又称简单染色法，即只应用一种染料进行染色的方法。
①美蓝染色法：在已干燥、固定好的涂片或触片上滴加适量的美蓝染色液，染色1－2min 后，水洗，干燥（吸水纸吸干或自然干燥），镜检。
②瑞特氏染色：在已干燥、固定好的涂片或触片上滴加瑞特氏染色液，为避免干燥，可适当多加一些，或视情况补充滴加，1－3min后再加与染液等量的中性蒸馏水或缓冲液，轻轻晃动玻片，使之与染色液混合均匀，再经3－5min后，直接用水冲洗，吸干或烘干后镜检。也可在玻片上的涂抹处盖一适当大小的滤纸，然后再在滤纸上轻轻滴加瑞特氏染色液，至略浸过滤纸，视情况补充滴加，维持不干，3－5min后直接用水冲洗，吸干或烘干后镜检。
③吉姆萨氏染色法：先将吉姆萨染色液原液稀释成常用的吉姆萨染色液（取5－10滴原液于5ml新煮过的中性蒸馏水中，混合均匀），在经甲醇固定好的涂片上滴加足量的染色液，或将涂片浸入盛有染色液的染色缸中，染色30min或浸染数小时至24小时后取出，水洗，吸干或烘干后镜检。
（2）复染色法：应用两种或两种以上的染料或再加媒染剂进行染色的方法。
①革兰氏染色法：在已干燥、固定好的涂片上滴加适量的草酸铵结晶紫染色液，染色1－2min后，水洗，再加革兰氏碘液，作用1－2min后，水洗，加95％酒精脱色0.5－1min后，水洗，稀释石炭酸复红（或沙黄、番红）染色液复染 0.5min后，水洗，干燥，镜检。
②抗酸染色法：常用的有萋－尼氏染色法和沙黄－美蓝染色法。
a.萋－尼氏染色法：在已干燥、固定好的涂片上滴加较多量的石炭酸复红染色液，酒精灯火焰上方微微加热至冒出蒸气并维持3－5min，水洗；再用3%盐酸酒精脱色至无染色液流出，充分水洗；然后用碱性美蓝染液复染约1min，水洗，吸干，镜检。
b.沙黄－美蓝染色法：在已干燥、固定好的涂片上滴加较多量的沙黄染色液，酒精灯火焰上方微微加热使冒蒸气3－5次，维持1－2min，水洗；再用再用3%盐酸酒精脱色至无染色液流出，充分水洗；然后用碱性美蓝染液复染约1min，水洗，吸干，镜检。
(3)注意事项
1.做细菌涂片时，不宜涂得过厚，以免影响制片效果。
2.固定必须确实，火焰固定时不宜温度过高，以免破坏菌体结构。
3.每种染液染色的过程中应保持染色液不干，尤其加热染色的染液，在染色过程中应随时添加，以免蒸发干，影响染色效果。
4.每种染液染色后，应用水将染液一起冲掉，不可先将染液倾去后再用水冲洗。
四、教学组织
实验2-3人一组，教师认真讲解操作规程，边讲解边示范，学生操作、观察、做图，在学生基本清楚的下，教师进行分别指导教学。
五、思考题与作业
1.实验报告，将每组涂片结果画于实验册上。
2.细菌涂片前为什么要固定？
3.简述革兰氏染色的原理与步骤。
实验三常用培养基的制备
一、目的要求：
1、要求学生掌握常用培养基的制备过程
2、要求学生掌握培养基pH的测定和调节方法
二、设备材料
灭菌锥形瓶烧杯试管平皿天平高压灭菌器过滤装置漏斗纱布电炉玻棒新鲜牛肉或牛肉浸膏蛋白胨磷酸氢二钾氯化钠琼脂蒸馏水0.1 mol/l氢氧化钠溶液精密pH试纸等
三、实验内容
（一）培养基制备的一般程序
1.根据所要制备的培养基的数量和种类，称取培养基的成分。
2.现将蒸馏水加入到玻璃烧杯或搪瓷缸中，水量为全部培养基的三分之二左右。按照顺序称取其他的成分加入到烧杯中加热溶解，待完全溶解后再将剩余水量补足，煮沸后测pH 值。
3.若pH没有达到标准范围（7.2~7.6），应用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节培养基的pH值，使其接近pH要求。
4.用滤纸或纱布过滤，按需求将培养基分装至试管或三角瓶内，塞棉塞，用牛皮纸包扎后进行灭菌。
5.高压蒸汽灭菌，一般培养基121℃灭菌15~20分钟即可。含糖培养基不已灭菌，应先将糖溶液无菌过滤后加入已灭菌的培养基内。若要灭菌时，应严格控制灭菌温度（不宜超过100℃）和时间（10~15min）。
（二）基础培养基的制备：
1.普通肉汤培养基：
牛肉浸膏3~5g 磷酸氢二钾0.5g
蛋白胨10g 蒸馏水1000ml
氯化钠5g
①称量和融化。根据上述各种成分的配比，计算待制作的培养基所需量，准备称取。取蒸馏水加热，然后加入上述成分，边加热边搅拌，快沸腾时注意不要溢出，加热至完全溶解。
②调节pH值。用pH试纸或pH测定仪，pH值应为7.2~7.6。
③过滤包扎。用普通滤纸或纱布过滤，分装于试管或三角瓶中，塞上棉塞，在棉塞外用牛皮纸或报纸包扎好，标明培养基的名称和日期。
④灭菌和无菌检验。高压121℃灭菌15~20min。将灭菌好的培养基放入无菌操作台中备用。
2.普通琼脂培养基：取1000ml普通肉汤培养基于烧杯中，加入10~15g琼脂，煮沸使琼脂充分融化，趁热用2~4层纱布过滤，补充蒸馏水至1000ml，测定和调节pH至所需标准。高压灭菌后无菌分装于试管（装量为1/4~1/3管，见图3-1）中趁热斜置，冷却即成琼脂斜面（图3-2）；或分装平皿（厚度为2~3mm，图3-3）中，水平静置冷却即成琼脂平板。也可先分装于试管中，再进行高压灭菌，然后趁热斜置冷却。
（三）营养培养基的制备：
1.鲜血琼脂培养基：亦称为血液琼脂培养基。将灭菌后的普通琼脂培养基加热溶解，冷却至45~50℃时加入无菌鲜血（每100ml普通琼脂中加入鲜血5~6ml），摇匀后趁热分装于试管中制成斜面，或分装于平皿中制成平面。若温度过高时加入鲜血，则血液变为暗褐色，称为巧克力琼脂。
图3-1 培养基的分装装置与棉塞
图3-2 斜面培养基的制作图3-3 平板培养基的制作
2.血清琼脂培养基：方法同鲜血琼脂培养基，血清用量是每100ml普通琼脂中加入56ml。（四）其他常用培养基的制备：
1.半固体培养基：制备方法同普通琼脂，只是将琼脂的用量减少为0.5%－0.7%。
2.马铃薯琼脂培养基：马铃薯200g，去皮后切成小块，加蒸馏水煮沸30min，用4层纱布过滤，加入葡萄糖20g，加入融化后补充蒸馏水至1000ml，调节pH至4.5，灭菌后分装即可。主要用于霉菌和担子菌的分离培养。
3.麦抗凯琼脂培养基：蛋白胨2g、乳糖1g、氯化钠0.5g、胆盐0.5g、1％中性红水溶液0.5ml、蒸馏水加至1000ml。
4.SS琼脂培养基：蛋白胨5g、牛肉浸膏5g、乳糖10g、胆盐10g、枸橼酸钠10－14g、硫代硫酸钠8.5g、枸橼酸铁0.5g、0.5％中性红水溶液4.5ml、0.1%亮绿溶液0.33ml、琼脂25－33g、蒸馏水加至1000ml。
四、教学组织
实验2-3人一组，教师认真讲解操作规程，边讲解边示范，学生理解、操作，在学生基本清楚的下，教师进行分别指导教学。
五、思考题与作业
1.写实验报告。
2.以肉汤培养基和普通琼脂培养基为例，简述培养基制作的一般步骤？
3.制备培养基时为什么要进行pH值调节？
实验四细菌的分离培养及培养形状的观察
一、目的要求
1.掌握细菌的分离培养、纯化的操作技能；
2.掌握细菌在培养基上的生长特性；
二、设备材料
恒温培养箱病料或细菌培养物接种环接种针酒精灯灭菌吸管各种细菌培养基无水碳酸钠氢氧化钠或氢氧化钾凡士林及生理盐水
三、实验内容
（一）细菌的分离培养
其目的是将被检查的材料做适当的稀释，以便能得到单个菌落，有利于菌落形状的观察和对可疑菌做出初步鉴定。
1.细菌的分离培养
①将新鲜肛门拭子用灭菌生理盐水洗涤，洗涤液可用于分离培养；无菌采取新鲜粪便的中心部分，用灭菌生理盐水稀释搅匀后澄清，其上清液可用于分离培养；如为病理组织，可用烧红的刀片在其表面烫一下，随即用此刀片在烫过的地方切开一小口，右手持灭菌接种环在切口内蘸一下即可用于分离培养。
②用接种环无菌取样（培养物或其他材料）。接种培养平板时以左手持皿，无名指和小指托底，拇指、食指和中指将皿盖揭开呈20°左右的角度（角度越小越好，以防空气中的细菌进入平皿将培养基污染），右手持接种环，将材料涂在培养基的边缘，将接种环上多余的材料在火焰上烧掉，待接种环冷却后再与所涂细菌轻轻接触开始划线，划线时使接种环与平板成30°~40°角，轻触平板，用腕力将接种环在平板表面轻快的滑移动作来回划“Z”字线，划线间距适当，不能重叠，接种环也不能嵌入培养基内滑破琼脂表面，并注意无菌操作，避免空气中的细菌污染。具体方法见图4-1和图4-2所示。
微生物免疫学实验报告材料
1实验容： 2显微镜油镜的使用与保护。 3细菌的形态与结构的观察。 4实验目的： 5学会显微镜的使用，重点掌握油镜的使用与保护。 6进一步认识细菌的形态，明确细菌的大小与测量单位。 7熟悉细菌的特殊结构。 8实验材料： 显微镜、擦镜纸、液体石蜡、消毒液、细菌的基本形态标本、细菌的特殊结构标本。 4实验方法： (1)显微镜油镜的使用与保护 显微镜是一种贵重的光学仪器，而油镜又是显微镜的最精密部分，是观察细菌最重要的工具。因此，要求大家必须熟练地掌握显微镜的使用和保护，尤其是油镜，避免损坏。
1识别油镜：95╳、100╳、HI、OeL。 2对光：自然光用平面反光镜，人工光用凹面反光镜；先用低倍镜对光，次用高倍镜。对好光源后，染色标本将聚光器升高，光圈放开。 3、调节焦距：选一细菌染色标本置于载物台上，用推进器固定，用低倍镜先找准物象，再用高倍镜看清物体，于标本上加镜油一滴。 ⑴用眼从侧面观察，转动粗螺旋调节器，将油镜头徐徐下降浸入其中，切不可用力过猛，以免损坏油镜。 ⑵用左眼从接目镜观察，徐徐向上转动粗螺旋调节器，见模糊物象后，再用细螺旋调节器，直到物象完全清晰为止。 4、显微镜的保护： ⑴所有的光学部分结构都不能用手指、普通布擦拭，用过的油镜头应立即先用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭，再用干擦镜纸擦去二甲苯，以防二甲苯镜头上的固定胶，致使镜片脱落。 ⑵显微镜的光学部分应避免日光直射。避免接触强酸、强硷、氯仿、酒精。 ⑶显微镜用毕，将物镜转成品字形并下降集光器和镜筒，用软布擦拭各部件后覆盖于接目镜上，双手端平送入镜箱。置于干燥处，以防受潮。 (二)细菌形态观察 1、细菌的基本形态；球菌：肺炎球菌、脑膜炎球菌、葡萄球菌、链球菌杆菌：大肠杆菌、炭疽杆菌、结核杆菌、白喉杆菌弧菌：霍乱弧菌 2、细菌的特殊结构： 荚膜：肺炎球菌、产气荚膜杆菌 鞭毛：水弧菌（周毛菌） 芽胞：破伤风杆菌（芽胞位于菌体顶端，呈鼓槌状）
医学免疫学与微生物学 试卷备课讲稿
一、A型题 1、原核细胞型微生物不包括： A 沙眼衣原体 B 立克次体 C 支原体 D 细菌 E 病毒 2、下列哪种结构不是细菌的基本结构： A 细胞壁 B细胞膜 C荚膜 D细胞质 E核质 3、杀菌力最强的酒精浓度是： A 50%~60% B 70~75% C 80~90% D 95% E 65~75% 4、鉴定葡萄球菌有无致病的重要指标是： A 溶血素 B 血浆凝固酶 C 杀白细胞素 D 甘露醇试验 E 透明质酸酶 5、血清中含量最高的Ig是： A IgA B IgM C IgG D IgD E IgE 6、灭菌时的主要指标是能否杀灭细菌的哪种结构： A细胞壁 B 细胞膜 C 荚膜 D芽孢 E菌毛 7、细菌生长繁殖所需要的条件不包括： A 营养物质 B 适宜的温度 C 光线 D 适宜的酸碱度 E 必要的气体 8、介导细胞免疫的是： A T细胞 B NK细胞C巨噬细胞 D B细胞 E中性粒细胞 9、与外毒素有相同免疫原性的物质是： A 抗毒素 B细菌素 C 类毒素 D抗生素 E干扰素 10、下列哪种疾病患病后容易形成带菌状态： A 伤寒 B 痢疾 C 霍乱 D 破伤 风 E 以上均不是 11、决定抗原特异性的是： A 大分子物质 B 表位 C 自身物质 D 同种异体物质 E 异种物质 12、结核杆菌入侵人体的途径包括： A 消化道 B 呼吸道 C 损伤皮肤 D 损伤粘膜 E 以上都是 13、下列说法错误的是： A外毒素的毒性强B内毒素的毒性弱 C外毒素可以用甲醛处理成类毒素 D内毒素可以用甲醛处理成类毒素 E外毒素不耐热 14、人类T细胞发育成熟的场所是： A 胸腺 B 腔上囊 C 骨髓 D 脾脏 E 淋巴结 15、下列哪种物质属于抗体： A 抗毒素 B 病原微生物 C 类毒素 D 青霉素 E外毒素 16、下列哪一种细菌产生的肠毒素可导致患者出现米泔水样便： A 大肠杆菌 B 霍乱弧菌 C 副溶血性弧菌 D 变形杆菌 E 沙门菌 17、异嗜性抗原属于： A 完全抗原 B 共同抗原 C 自身抗原 D 同种异型抗原 E 半抗原 18、属于II型超敏反应性疾病的是： A 皮肤过敏反应 B 消化道过敏反应 C 输血反应 D 过敏性休克 E 呼吸道过敏反应 19、人类免疫缺陷病毒即爱滋病病毒不可能通过哪项传播： A 性接触 B 输血 C 器官移植 D 与病人握手 E 经胎盘 20、与I型超敏反应的发生有关的抗体是： A IgE B IgG C IgM D IgA E IgD 21、被称为免疫复合物型超敏反应的是： A Ⅰ型超敏反应 B Ⅱ型超敏反应 C Ⅲ型超敏反应 D Ⅳ型超敏反应 E Ⅴ型超敏反应 22、注射哪种物质属于人工主动免疫： A 破伤风抗毒素 B 青霉素 C 卡介苗 D 白喉抗毒素 E 人免疫球蛋白 23、由衣原体引起的疾病是： A 梅毒 B 麻疹 C 沙眼 D 流行性斑疹伤寒 E 非典型性肺炎 24、细菌呈鼓槌状，是哪种细菌的典型特征： A 破伤风梭菌 B肉毒梭菌 C大肠杆菌 D 沙门菌 E结核杆菌 25、用于人工被动免疫的制剂有： 仅供学习与参考
微生物与免疫学名词解释
微生物与免疫学名词解 释 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】
《医学免疫学》与《医学微生物学》名词解释 1.抗原：能刺激机体的免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答产物发生特异性结合的物质。 2.表位（抗原决定簇）：抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。 3.异嗜性抗原：存在于人、动物、微生物等不同种属之间的共同抗原。 4.抗体：免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆B细胞增殖分化成的浆细胞所产生 的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 5.免疫球蛋白：血清中一类主要的蛋白，由α1、α2、β和γ球蛋白组成。 6.抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）：抗体Fab段结合病毒感染的细胞或肿瘤细 胞表面的抗原表位，其Fc段与杀伤细胞表面的FcR结合，介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞。 7.补体：正常人或动物体液中存在的一组与免疫有关，并具有免疫活性的免疫球蛋白。 细胞因子：由免疫细胞及组织细胞分泌的具有生物学活性的小分子蛋白。 8.主要组织相容性复合体（MHC）：某一染色体上的一群紧密连接的，决定移植组织是否 相容，与免疫应答有关的基因群。 9.人类白细胞抗原（HLA）：人的MHC。 10.B细胞受体（BCR）：表达于B细胞表面的免疫球蛋白。 细胞受体（TCR）：表达于T细胞表面的免疫球蛋白。
12.抗原提呈细胞（APC）：能够摄取、加工、处理抗原，并以抗原肽—MHC 分子复合物的形式将抗原肽信息提呈给T细胞的一类细胞。 13.免疫耐受：免疫活性细胞接触某种抗原性物质时所表现的一种特异性无应答状态。 14.超敏反应：机体受到某些抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常的适应 性免疫应答。 L型细菌：细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素直接破坏或合成被抑制后的细菌，在高渗环境下仍可存活，这种细胞壁受损后，仍能够生长和分裂的细菌称为细胞壁缺陷型或L型细菌。 质粒：染色体外的遗传物质，存在于细胞质中。为闭合环状的双链DNA，控制细菌某些特定的遗传特性。 荚膜:某些细菌如肺炎球菌、炭疽杆菌等在细胞外面有一层较厚的粘液性物质，称为荚膜。 鞭毛:有些杆菌、弧菌及螺形菌的菌体上具附有细长、弯曲的丝状物，称为鞭毛。它是细菌的运动器官。 芽胞:某些菌在一定的环境条件下，细胞质脱水、浓缩，在菌体内形成折光性强、不易着色的圆形或卵圆形的小体，称为芽胞。 菌落：单个细菌经一定时间培养后形成的一个肉眼可见的细菌集团。 消毒：杀灭物体上的病原微生物，但不一定能杀死芽胞的方法。 灭菌：杀灭物体上所有微生物，包括病原微生物、非病原微生物和芽胞的方法。
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1?免疫防御功能下降易发生（） A超敏反应 B肿瘤 C反复感染 D自身免疫（病） 正确答案:C 单选题 2?下列对抗毒素的叙述中，正确的是（）广A经外毒素脱毒制成 B只能中和外毒素 C既可中和外毒素，又可能引起超敏反应"D用于人工自动免疫 正确答案:C 单选题 3?关于Tl-Ag的描述，错误的是（） A产生抗体不需T细胞辅助 B只有B细胞表位 「C不引起细胞免疫 "D可引起再次应答 正确答案:D 单选题 4?下列大分子物质中，免疫原性最强的是（ ） 'A蛋白质 "B多糖 C核酸 「D类脂 正确答案:A
5?关于TD-Ag的描述，正确的是（）A产生抗体不需T细胞的辅助 B只能引起体液免疫 「C不能引起再次应答 左 D具有T细胞表位和B细胞表位 正确答案:D 单选题 6?抗原的特异性取决于（） 「A分子量大小 “ B表位性质 广C结构复杂性 广D化学组成 正确答案:B 单选题 7?对SIgA的错误描述是（） r A是黏膜局部抗体 “ B其SP能保护SIgA不被蛋白酶水解「C初乳中含量最丰富 D能激活补体经典途径 正确答案:D 单选题 8?适应性免疫的特征是（） A出生时即具有 厂B反应迅速 "C特异性 「D无记忆性 正确答案:C
9?新生儿可从母体初乳中获得的lg是（） A igG B IgM C SlgA D IgD 正确答案:C 单选题 10.对抗原特异性的描述是正确的，除了（） A只能激活具有相应受体的淋巴细胞系 B与相应抗体结合 厂C与相应效应淋巴细胞结合 "D与MHC结合 正确答案:D 单选题 11.免疫稳定功能失调易发生（） 厂 A超敏反应 厂B肿瘤 "C反复感染 * D自身免疫（病） 正确答案:D 单选题 12?固有性免疫的特征是（） “ A通过遗传获得 r B特异性 厂C反应缓慢 「D有记忆性 正确答案:A 单选题
微生物及免疫学答案
微生物及免疫学答案 【篇一：病原微生物与免疫学试题(护理)】 >一、名词解释 1、抗原：是一类能刺激机体的免疫系统产生特异性免疫应答，并 能与免疫应答的产物在体内外发生特异性结合的物质。 2、抗体：是机体的免疫系统受抗原刺激后，b细胞转化为浆细胞，由浆细胞产生的能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白。 3、免疫球蛋白：是指具有抗体活性或化学结构上与抗体相似的球 蛋白 4、免疫应答：是指免疫细胞识别抗原，自身的活化，增殖分化， 产生效应物质，将抗原破坏、清除的全部过程 5、超敏反应：是指某抗原或半抗原再次进人致敏的机体，在体内 引起特异性体液或细胞免疫反应，由此导致组织损伤或生理功能紊乱。 6、细菌：是一类具有细胞壁与核质的单细胞微生物。细菌个体微小，结构简单，无成形的细胞核，无完整的细胞器 7、消毒：是指杀死物体上病原微生物的方法。一般不能全部杀死 非病原菌和芽胞。 8、灭菌：是指杀死物体上所有微生物的方法，包括非病原菌和芽胞。 9、支原体：支原体是一类没有细胞壁，能在无生命培养基上生长、繁殖的最小的原核细胞型微生物 10、衣原体：是一类能通过除菌滤器、专性活细胞内寄生、并有独 特发育周期的原核细胞型微生物。 二、填空题 1、抗原具有两个基本特性，即：免疫原性，免疫反应性 2、抗体多样性的原因主要有两方面：内源性因素，外源性因素 3、自身抗原有三种类型：隐蔽自身抗原，修饰自身抗原，自身正 常物质。 2．细菌的基本形态可分为：球菌，杆菌，螺菌。 4．细菌的基本结构从外向内分别为：细胞壁，细胞膜，细胞质， 核质，菌毛。细菌的特殊结构有荚膜，鞭毛，芽胞。 5．临床上常以杀灭：芽孢作为灭菌是否彻底的指标。 6．革兰染色的步骤分：结晶紫初染，碘液媒染，95％酒精脱色， 稀释复红复染四步。
医学免疫学与微生物学参考答案
1.正常菌群对机体的益处不包括（ D ） A.刺激免疫系统成熟 B.抗肿瘤 C.抗致病菌生长 D.产生干扰素 E.提供营养 参考：教材164页三、微生物与人类的关系正常菌群 2.溶菌酶对G＋菌的作用是（ B ） A.破坏磷壁酸 B.裂解聚糖骨架 C.损伤细胞膜 D.抑制菌体蛋白合成 E.降解核酸 参考：教材169页尾行 3.可在细菌间传递DNA的物质是（ E ） A.鞭毛 B.中介体 C.荚膜 D. 普通菌毛 E. 性菌毛 参考：教材174页2。性菌毛 4.细菌致病性的强弱主要取决于细菌的（ E ） A.荚膜 B.菌毛 C.侵袭性酶 D. 毒素 E. 毒力 参考：教材192页，第三节细菌的毒力物质 5. .决定痢疾杆菌侵袭力的首要因素是( D ) A.内毒素 B.外毒素 C.侵袭性酶 D.菌毛 E.肠毒素 参考：教材252页，二、致病性与免疫性 6.湿热灭菌法中杀菌效果最彻底的是（ D ） A.煮沸法 B.巴氏消毒法 C.间歇灭菌法 D.高压蒸汽灭菌法 E.流通蒸汽灭菌法 参考：教材201页一、热力消毒灭菌法 7.可用于分离脑膜炎球菌的培养基是（ B ） A.血平板 B.巧克力平板 C.沙氏培养基 D.双糖培养基 E.碱性平板 参考：教材240页一、脑膜炎奈瑟菌2。培养特性
8.以内毒素为主要致病因素并可引起全身感染的肠道致病菌是（ A ） A. 伤寒杆菌 B. 志贺痢疾杆菌 C. 大肠杆菌 D.霍乱弧菌 E.肠炎杆菌参考：教材198页3）内毒素血症 9.不引起毒血症的毒素是（ B ） A.葡萄球菌肠毒素 B.霍乱肠毒素 C.志贺毒素 D.白喉毒素 E.破伤风痉挛毒素 参考：教材198页2）毒血症 10.在人体肠道正常菌群中占绝对优势的细菌是（ C ） A.大肠杆菌 B.变形杆菌 C.无芽胞厌氧菌 D.白色念珠菌 E.沙门菌 参考：教材164页三、微生物与人类的关系正常菌群 11.结核菌素试验的用途不包括（ C ） A.选择卡介苗接种对象 B.判断卡介苗接种效果 C.诊断Ⅳ型超敏反应? D.辅助诊断婴幼儿结核病 E.判断细胞免疫功能 参考：教材269页（三）结核菌素试验 12.引起败血症的细菌除外（ A ） A.白喉杆菌 B.金黄色葡萄球菌 C.绿脓杆菌 D.乙型溶血性链球菌 E.大肠杆菌 参考：教材198页4）败血症 13．一般不入血引起败血症的细菌是（ A ） A. 白喉杆菌 B. 大肠杆菌 C. 绿脓杆菌 D. 变形杆菌 E. 产气荚膜杆菌 参考：教材198页4）败血症 14. 与结核杆菌致病性有关的物质是( D ) A.外毒素 B.侵袭性酶 C.菌体表面构造 D.细胞壁类脂 E.内毒素
医学免疫学与微生物学01任务0005
01任务_0005 试卷总分：100 测试时间：0 单项选择题 一、单项选择题（共 50 道试题，共 100 分。） 1. 初次免疫应答的特点是（） A. 抗原提呈细胞是B细胞 B. 抗体产生快，维持时间短 C. 抗体滴度较高 D. 抗体产生慢，维持时间长 E. 抗体产生慢，维持时间短 2. 补体经典途径激活的顺序是（） A. C123456789 B. C124536789 C. C142356789 D. C124356789 E. C356789 3. 抗原提呈细胞中不包括（） A. 朗罕细胞 B. 巨噬细胞 C. 树突状细胞 D. 并指状细胞 E. 中性粒细胞 4. 移植排斥反应难以避免的主要原因是（） A. HLA系统的高度多态性 B. 移植物血供不良 C. 移植物被细菌感染
D. 受者体内已经存在对移植物致敏的淋巴细胞 E. 受者的免疫功能处于紊乱状态 5. 白细胞分化抗原是指（） A. TCR和BCR B. 血细胞在分化成熟为不同谱系、不同阶段以及在活化中出现或消失的细胞表面标记分子 C. 白细胞表面的全部膜分子 D. T细胞表面的膜分子 E. B细胞表面的膜分子 6. 识别TD抗原时需要T细胞辅助的细胞是（） A. B1细胞 B. B2细胞 C. CTL细胞 D. 肥大细胞 E. 中性粒细胞 7. 受抗原首次刺激后发生免疫应答的部位是（） A. 骨髓 B. 胸腺 C. 腔上囊 D. 血液 E. 淋巴结 8. 介导I型超敏反应的抗体是（） A. IgG B. IgD C.
IgE D. IgM E. IgA 9. 关于胸腺描述正确的是（） A. T细胞分化发育成熟的场所 B. B细胞分化发育成熟的场所 C. 发挥免疫调节功能的场所 D. T细胞发生免疫应答的场所 E. 成熟T细胞定居的场所 10. T细胞分化成熟的场所是（） A. 骨髓 B. 胸腺 C. 淋巴结 D. 脾脏 E. 黏膜相关淋巴组织 11. 下列不属于补体参与的超敏反应性疾病的是（） A. 溶血性贫血 B. 重症肌无力 C. 肾小球肾炎 D. 血清过敏性休克 E. 血小板减少性紫癜 12. 中枢免疫器官的功能是（） A. T淋巴细胞成熟场所 B. B淋巴细胞成熟场所
病原微生物与免疫学
医学微生物学与寄生虫学＆医学免疫学 简答题 １.简述特异性免疫应答过程。 适应性免疫应答，又称特异性免疫应答，指体内抗原特异性T/B淋巴细胞接受抗原刺激后，自身活化增殖分化为效应细胞，产生一系列生物学效应的全过程。 基本过程： ①识别活化阶段： ⅰAPC（抗原提呈细胞）对抗原加工处理及提呈。 ⅱT细胞和B细胞识别抗原。 ②增殖分化阶段：T、B淋巴细胞活化，增殖分化产生效应细胞和浆细胞。 ③效应阶段：Ab和效应T细胞与Ag结合，通过多种机制最后清除Ag。 ２．Ⅰ型超敏反应发生的机制。 Ⅰ型超敏反应又称过敏反应，主要是由特异性IgE抗体介导产生，可发生于局部，亦发生于全身。 ①致敏阶段：变应原进入机体后，可选择诱导变应原特异性B细胞产生IgＥ抗体应答，Ig Ｅ类抗体与ＩｇＧ类抗体不同，它们可在不结合抗原情况下，以其Fc段与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面相应受体结合，而使机体处于对该变原的致敏状态。 ②激发阶段：指相同变应原再次进入机体后，通过与肥大细胞／嗜碱性粒细胞表面IgE抗体特异性结合，使之脱落释放生物活性介质的阶段。 ③效应阶段：指生物活性介质作用于效应组织和器官，引起局部或全身过敏反应的阶段。 ３.细菌致病因素。
４.区别内、外毒素的主要性状。 ５.细菌的特殊结构有哪些？各有何作用？ ①荚膜：抗吞噬；粘附作用；抗有害物质损伤，与细菌的致病性有关，是构成细菌毒力的重要因素。 ②鞭毛：细菌运动器官；某些与致病性有关，如霍乱弧菌、空肠弯曲菌；有抗原怕，称H 抗原，可以鉴定细菌。 ③菌毛：具有抗原性，普通菌毛具有粘附易感细胞的能力；与细菌致病性有关，性菌毛。 ④芽胞：具有保护和稳定蛋白质生命物质作用；有助于鉴别细菌；医学消毒、灭菌的重要指标。 6.细菌、病毒感染的类型和特点。 细菌： 隐性感染：机体损伤轻，不出现或仅出现不明显的临床症状，机体可获得特异性免疫力，如结核、白喉、伤寒等疾病常有隐性感染。 ⑴根据病情缓急不同可分为： 急性感染：发病急，病程短，一般数日或数周，病愈后病原菌从宿主体内消失，如霍乱、化脓性脑膜炎等。 慢性感染：病程缓慢进行，常持续数月至数年，多见于胞内寄生菌的感染，如结核、麻风等。 ⑵按感染部位不同可分为： ①局部感染：致病菌引起的感染仅局限于一定部位，引起局部病变。如临床上常见的痈、伤口化脓等。 ②全身感染：感染后病原菌或其毒性产物向全身扩散，引起全身症状的一种感染类型，常见的全身表现有：毒血症、内毒素血症、菌血症、败血症、脓毒血症 带菌状态：有时病原菌在隐性或显性感染后，并未被完全消除，而继续在体内存留一段时间，并不断被排出体外，称为带菌状态。处于带菌状态的人称为带菌者。如白喉、伤寒等传染病，病后常出现带菌状态。由于带菌者经常或间歇排出病原菌，是重要的传染源。 病毒： 隐性感染：病毒侵入机体不引起临床感染称为重金属感染或亚临床感染。其原因可能是病毒毒力弱或机体免疫力强，使病毒不能大量增殖，组织细胞损伤轻微；也可能是病毒最终未到达靶器官，帮不呈现或极少呈现临床症状。脊髓灰质炎病毒感染时，大多数人表现为隐性感
微生物免疫学实验报告
微生物免疫学实验报告Newly compiled on November 23, 2020
1实验内容：
2显微镜油镜的使用与保护。 3细菌的形态与结构的观察。 4实验目的： 5学会显微镜的使用，重点掌握油镜的使用与保护。 6进一步认识细菌的形态，明确细菌的大小与测量单位。 7熟悉细菌的特殊结构。 8实验材料： 显微镜、擦镜纸、液体石蜡、消毒液、细菌的基本形态标本、细菌的特殊结构标本。 4实验方法： (1)显微镜油镜的使用与保护 显微镜是一种贵重的光学仪器，而油镜又是显微镜的最精密部分，是观察细菌最重要的工具。因此，要求大家必须熟练地掌握显微镜的使用和保护，尤其是油镜，避免损坏。 1识别油镜：95╳、100╳、HI、OeL。 2对光：自然光用平面反光镜，人工光用凹面反光镜；先用低倍镜对光，次用高倍镜。 对好光源后，染色标本将聚光器升高，光圈放开。 3、调节焦距：选一张细菌染色标本置于载物台上，用推进器固定，用低倍镜先找准物象，再用高倍镜看清物体，于标本上加镜油一滴。 ⑴用眼从侧面观察，转动粗螺旋调节器，将油镜头徐徐下降浸入其中，切不可用力过猛，以免损坏油镜。 ⑵用左眼从接目镜观察，徐徐向上转动粗螺旋调节器，见模糊物象后，再用细螺旋调节器，直到物象完全清晰为止。 4、显微镜的保护： ⑴所有的光学部分结构都不能用手指、普通布擦拭，用过的油镜头应立即先用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭，再用干擦镜纸擦去二甲苯，以防二甲苯镜头上的固定胶，致使镜片脱落。 ⑵显微镜的光学部分应避免日光直射。避免接触强酸、强硷、氯仿、酒精。 ⑶显微镜用毕，将物镜转成品字形并下降集光器和镜筒，用软布擦拭各部件后覆盖于接目镜上，双手端平送入镜箱内。置于干燥处，以防受潮。
《医学免疫学与微生物学》
医学免疫学与微生物学》形成性考核册答案 作业一 １、免疫系统具有哪些功能，正常或异常时有何生物学效应？ 答：（１）免疫防御：指机体抵御外来抗原性异物入侵的一种保护功能。正常时可抵御病原微生物的感染和损害，即抗感染免疫。异常时如果防御功能过强出现超敏反应，免疫防御功能过低（免疫缺陷）会导致反复发生感染。 （２）免疫稳定：指维持体内环境相对稳定的生理机能。正常时可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞以及抗原－抗体复合物等抗原性异物，对自身成分耐受和保护。功能紊乱时会导致自身免疫疾病，失去了对自身抗原的耐受而对自身细胞发动攻击。 （３）免疫监视：指免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理保护功能。功能正常时可防止肿瘤产生，功能失调时可导致肿瘤发生，或病毒感染不能及时清除，造成病毒持续性感染。 ２、列出医学上重要的抗原物质 答：（１）微生物及其代谢产物：如细菌及细菌毒素、病毒等微生物，既可在感染时引起机体免疫应答清除病原微生物，也可人工利用这些抗原制备疫苗、类毒素、抗毒素用于人工免疫预防和治疗，或体外进行抗原抗体检测进行疾病的诊断。 （２）动物免疫血清：人工制备的抗毒素如破伤风抗毒素是由马血清制备，对人而言，既含有特异性抗体可中和毒素，又含有异种动物蛋白引起超敏反应。在应用抗毒素前应做皮试判断有无过敏现象。 （３）同种异性抗原：如血型抗原和组织相容性抗原。输血和器官移植前应进行血型鉴定或组织配型以避免发生输血反应和移植排斥反应。 （４）肿瘤抗原：分为肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原。如肝癌患者体内出现高水平ＡＦＰ（甲胎蛋白），可用于肝癌的普查和早期诊断。 ３、简述抗体的种类和主要功能 答：抗体依据重链抗原性不同分为五类：IgG IgA IgM IgD IgE。 IgG：血清中含量最高，是最重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素 等。还能激活补体，增强巨噬细胞的吞噬功能（调理作用），穿过胎盘保护胎儿及新生儿免受感染。 IgA：分为单体和双体两种。单体存在于血清中，双体存在于粘膜表面及分泌物中，是粘膜局部抗感染的重要因素。 IgM：是分子量最大、体内受感染后最早产生的抗体，具有很强的激活补体作用和调理作用，时作重要的抗感染因子，且常用于诊断早期感染。 IgD：主要存在于成熟Ｂ细胞表面，是Ｂ细胞识别抗原的受体。 IgE：血清中含量最少，某些过敏性体质的人血清中可检测到，参与介导Ⅰ型超敏反应。４、简述补体的生物学活性 答：补体的生物学活性主要有： （１）溶菌和溶细胞。细菌等抗原物质和相应抗体结合形成抗原抗体复合物，可通过经典途径激活补体系统；革兰氏阴性菌的脂多糖可通过旁路途径激活补体，在细菌等靶细胞表面形成膜攻击复合物，最终导致细菌细胞或靶细胞裂解。 （２）促进抗体中和及溶解病毒。补体可明显增强抗体对病毒的中和作用，在没有特异性抗体存在的条件下，补体也可溶解灭活某些病毒。 （３）调理和免疫粘附。补体裂解产物与细菌及吞噬细胞结合，促进吞噬细胞的吞噬作用，即调理作用；若与红细胞、血小板结合可形成较大的聚合物利于吞噬细胞的吞噬，此即免疫粘附作用。
微生物学与免疫学A型选择题库
1、不属于原核细胞型的微生物是（） A. 细菌 B. 病毒 C. 支原体 D. 立克次体 E. 衣原体 2、属于真核细胞型的微生物是（） A. 螺旋体 B. 放线菌 C. 真菌 D. 细菌 E. 立克次体 3、属于非细胞型微生物的是（） A. 细菌 B. 真菌 C. 螺旋体 D. 立克次体 E. 病毒 4、属于真核细胞型微生物的是（） A. 细菌 B. 真菌 C. 螺旋体 D. 立克次体 E. 病毒 1、G-菌细胞壁内特有的成分是（） A. 粘肽 B. 磷壁酸 C. 脂蛋白 D. 脂多糖 E. 外膜 2、G+菌细胞壁内特有的成分是（） A. 粘肽 B. 脂蛋白 C. 外膜 D. 脂多糖 E. 以上均不是 3、关于细菌的核，错误的描述是（） A. 具有完整的核结构 B. 为双股DNA C. 是细菌生命活动所必需的遗传物质 D. 无核膜 E. 无核仁 4、对外界抵抗力最强的细菌结构是（） A. 细胞壁 B. 荚膜 C. 芽胞 D. 核质 E. 细胞膜 5、作为细菌运动器官的特殊结构是（） A. 荚膜 B. 鞭毛 C. 菌毛 D. 芽胞 E. 以上均是 6、内毒素的主要成分为（） A. 肽聚糖 B. 蛋白质 C. 鞭毛 D. 核酸 E. 脂多糖 7、细菌细胞壁的主要成分是（） A. 多糖 B. 肽聚糖 C. 脂蛋白 D. 脂类 E. 脂多糖 8、细菌经革兰染色后，如果为阴性，其着色应是（） A. 红色 B. 蓝色 C. 深紫色 D. 蓝紫色 E. 绿色 、对外界环境有很强抵抗力的是（） A. 芽胞 B. 荚膜 C. 鞭毛 D. 菌毛 E. 质粒 10、对肠粘膜上皮细胞有很强粘附力，与致病性有关的是（） A. 芽胞 B. 荚膜 C. 鞭毛 D. 菌毛 E. 质粒 1、细菌生长繁殖所需的条件不包括（） A. 营养物质 B. 气体 C. 温度 D. 光线 E. 酸碱度 2、卡介苗是根据下述哪项变异原理制备的（） A. 形态变异 B. 毒力变异 C. 耐药性变异 D. 菌落变异 E. 以上均不是 3、属于细菌分解代谢产物的是（） A. 热原质 B. 硫化氢 C. 外毒素 D. 维生素 E. 抗生素 4、对人致病的细菌大多是（） A. 专性厌氧菌 B. 专性需氧菌 C. 微需氧菌 D. 兼性厌氧菌 E. 以上均不对
免疫学实验报告
免疫实验—抗血清制备及抗体效价检测 摘要：用具有抗原性的物质牛血清白蛋白（BSA)注入到健康动物例如鼠、兔的 机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。抗血清，是指含有免疫蛋白的血清。抗体效价指抗体的物理状态及其在体内滞留时间，以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果。此次实验主要是进行小鼠的牛血清白蛋白（BSA)抗血清的制备过程，并通过酶免疫吸附试验（ELISA）对其进行抗体效价检测。 关键字：牛血清白蛋白（BSA) 抗血清抗体效价免疫 实验过程： 本次实验一共分为三个分实验： 实验一：免疫 实验二：抽血、放血，分离抗血清 实验三：ELISA测定抗体效价 实验一：免疫 一、抗血清制备的原理 用具有抗原性的物质注入到健康动物的机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。二、目的 制备高效价的抗血清 三、实验仪器、材料和试剂 实验仪器：1mL 注射器，酒精棉球，剪刀 材料：家兔，小鼠 试剂：3％～5％苦味酸溶液或80％～90％苦味酸，牛血清白蛋白（BSA) 三、方法和步骤 1、动物编号 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。红色表示十位数,用黄色表示个位数。免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。
如下图所示抓取目标动物 家兔为300～600 μg/次（400），每次不超过2mL；小鼠为10～100 μg /次（10-20，20~40 μg / ml），每次不超过0.5mL。 小鼠腹腔注射 以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推 0.5～1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液， 为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。
《医学免疫学与病原生物学》
《医学免疫学与病原生物学》 课程实验教学大纲 [适用对象]中医学（骨伤）、针灸推拿学专业 [实验学时] 9 学时 一、实验教学任务和目的 《微生物与免疫学实验》是与《微生物与免疫学》理论课程密切结合的一门重要的、非单独设课的医学专业基础实验课程。课程学习的目的是让学生掌握本课程基本技能操作，为学习基础医学有关课程和临床医学课程、为学生将来从事医药相关工作和科研工作奠定基础。 二、实验教学基本要求 （1）训练学生掌握微生物学与免疫学最基本的操作技能。 （2）加深理解课堂讲授的微生物学与免疫学理论。 （3）培养学生观察、思考、分析问题、解决问题和提出问题的能力。 （4）培养学生实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神。 (5)培养学生树立勤俭节约、爱护公物的良好作风。 三、实验教学内容 实验一细菌的人工培养法 1、实验目的和要求 （1）掌握各种培养基接种技术。 （2）熟悉细菌在培养基中的生长现象；认识菌落、菌苔。 （3）了解常用的液体、固体和半固体培养基的成分、制备方法和用途。 2、实验内容 （1）分离培养法(平板划线法) （2）斜面培养基接种方法 （3）液体培养基接种法 （4）半固体培养基的接种法 （5）观察细菌在培养基上的生长情况：细菌各种培养物的示教；描述细菌
在各种培养基上的生长现象；观察大肠杆菌与痢疾杆菌在半固体培养基上的现象。 3、实验仪器 普通琼脂平板，普通琼脂斜面，半固体培养基，肉汤培养基，接种环，接种针，酒精灯，大肠杆菌24小时斜面培养物等。 4、实验学时 1学时 实验二细菌的分布及消毒与灭菌 1、实验目的和要求 掌握高压蒸气灭菌器的使用方法及注意事项；证实热力和紫外线的杀菌效果；证实常用消毒剂的消毒效果；证明细菌在自然界和正常人体的存在，为在医学实践中树立严格的“无菌观念”提供依据。 2、实验内容 （1）高压蒸气灭菌法 （2）干热灭菌器（干烤箱） （3）紫外线的杀菌实验 （4）热力对芽胞及繁殖体的作用 （5）药物敏感性试验 （6）化学消毒剂的杀菌的作用———手指皮肤消毒前后的细菌学检查 （7）空气中的细菌检查 （8）污水和净水中的细菌数检查 （9）皮肤表面的细菌检查 3、实验仪器 普通琼脂平板、1％高层琼脂，血琼脂平板，无菌试管，无菌吸管，无菌平皿，灭菌棉签，咽拭子，酒精灯等。 4、实验学时 2学时 实验三细菌形态与结构的检查法 1、实验目的和要求 (1)学会显微镜油镜的使用和保护方法。 (2)认识细菌的基本形态和特殊结构(荚膜、鞭毛、芽胞)。 (3)掌握革兰氏染色方法 (4)了解细菌的动力 2、实验内容 (1)显微镜油镜的使用 (2)观察细菌的形态结构 (3)动力试验 (4)革兰染色 3、实验仪器
微生物与免疫学第2
《微生物与免疫学》（ 一、名词解释(本大题共8小题，每小题3分，共24分) 1、抗原转换 2、潜伏感染 3、乙肝小三阳 4、适应性免疫应答 5、半抗原 6、交叉反应 7、异嗜性抗原 8、抗体 二、单选题(本大题共20小题，每小题1分，共20分)。 1、不属于疱疹病毒的是（） Ａ、单纯疱疹病毒Ｂ、流感病毒Ｃ、水痘-带状疱疹病毒 Ｄ、ＥＢ病毒Ｅ、巨细胞病毒 2、病毒感染宿主细胞的范围主要取决于：（） A、病毒表面的蛋白 B、病毒的衣壳 C、细胞表面的受体 D、病毒包膜 E、病毒表面的血凝素 3、关于垂直感染，下列叙述哪项不正确？（） A、感染方式是亲代直接传给子代 B、感染途径是产道或胎盘 C、可致死胎，早产或先天畸形 D、是病毒才具有的感染方式 E、以风疹病毒等常见 4、病毒感染后无法获得持久免疫力的最重要原因是：（） A、无病毒血症 B、抗原易变异 C、表浅感染 D、短暂感染 E、免疫耐受 5、干扰素的特性是：（） A、无种属特异性 B、由宿主基因编码 C、能直接发挥抗病毒作用 D、抗病毒作用比特异性抗体强 E、需IgG和补体辅助抗病毒 6、与流感病毒吸附有关的成分是：（） A、核蛋白 B、血凝素 C、神经氨酸酶 D、M蛋白 E、脂质双层 7、关于流感病毒NA的特性，下列哪项是不正确？（） A、由4条糖基化多肽组成 B、具酶活性 C、具抗原性 D、其作用有利于病毒的释放和扩散 E、能凝集多种红细胞 8、关于乙型肝炎的叙述，下列哪项是错误的？（）
A、致病机制主要是HBV对肝细胞的直接损害 B、感染途径主要是非胃肠道途径和垂直传播 C、临床表现多数是无症状携带者 D、转为慢性迁延性肝炎的多见 E、有些可发展成为肝硬化或肝癌 9、乙型肝炎病毒的抗原系统，血清中不易检测到的是：（） A、HBsAg B、HBcAg C、HBeAg D、前S1抗原 E、前S2抗原 10、CMV常通过产道引起：（） A、唇疱疹 B、带状疱疹 C、围产期感染 D、病毒性脑炎 E、鼻咽癌 11、免疫防御功能低下的机体易发生：（） A.肿瘤 B.超敏反应 C.移植排斥反应 D.反复感染 E.免疫增生病 12、人类的外周免疫器官是：（） A.淋巴结、脾脏、胸腺 B.胸腺、淋巴结、粘膜组织 C.扁桃体、淋巴结和骨髓 D. 骨髓和粘膜相关淋巴组织 E.脾脏、淋巴结、皮肤粘膜相关淋巴组织 13、切除胸腺的新生鼠的淋巴结中缺乏何种细胞？（） A.巨噬细胞 B. B淋巴细胞 C.T淋巴细胞 D.干细胞 E.粒细胞 14、决定抗原特异性的结构基础是：（） A.抗原决定基 B.抗原的大小 C.抗原的电荷性质 D.载体的性质 E.抗原的物理性状 15、引起兄弟之间移植排斥反应的抗原属于：（） A. 异种抗原 B. 同种异型抗原 C. 自身抗原 D. 异嗜性抗原 E. 感染的微生物抗原 16、动物来源的破伤风抗毒素对人体而言是：（） A. 半抗原 B.抗体 C.抗原 D. 超抗原 E. 既是抗原又是抗体 17、与抗原结合后激活补体能力最强的Ig是：（） A. IgA B. IgM C. IgG D. IgD E. IgE 18、脐带血中哪类Ig增高提示胎儿有宫内感染？（） A. IgA B. IgM C. IgG D. IgD E. IgE 19、下列哪一类Ig参与粘膜局部抗感染：（） A. sIgA B. IgM C. IgG D. IgD E. IgE 20、3-6个月婴儿易患呼吸道感染是因为粘膜表面哪种Ig不足：（） A. sIgA B. IgM C. IgG D. IgD E. IgE 三、填空题(本大题共30个空，每空1分，共30分) 1、干扰素的生物学活性主要为，和作用。 2、乙肝病毒感染者中的“大三阳”指，和阳性。
《医学免疫学与微生物学》实验报告
［实验名称］:沉淀反应 ［实验目的］:通过单向琼脂扩散测定待测血清Ig 含量 ［实验材 料］: 打孔器 (1) 将溶解后的离子琼脂冷却到4 5 °C ，加入适 当浓度的抗原混 合均匀，吸取3—4毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片 而又 不流失。 (2) 琼脂凝固后制成凝胶板，然后隔适当距离打孔。 (3) 在孔内滴加待测可溶性抗体。 (4) 将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置 于3 7 °0恒温箱中2 4小时，观察沉淀环。 单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球 蛋白或补体成分的含量。 在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂 中抗原相遇，在比例适宜处生成白色沉淀环。 沉淀环直径与抗体浓度成正比。根据测试样品沉淀环直径的大 小，可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。 实验二 ［实验名称］:间接凝集抑制试验（妊娠试验） ［实验目的］:测定待检尿液中是否含HCG （绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠 ［实验材料］:孕妇尿液、非孕妇尿液、HCG 致敏乳胶抗原、抗HCG 血清、载 实验一 1%离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、载玻片、毛细吸管 ［试验步骤］: ［实验结果］: (沉淀环直径) 测量沉淀环直径: 毫米 ［实验分析］
玻片等 ［试验步骤］: （1）取一片载玻片，标记出左右。 （2）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。 （3）在两侧尿液中分别加一滴抗HCG血清，摇动混匀2 —3分钟。 （4）在两侧液滴中分别再加一滴HCG致敏乳胶抗原，摇动混匀2 — 3分钟。 （5）观察判定结果。 ［实验结果］:（凝集和非凝集的描述） 左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。间接凝集抑制阳性。 右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。间接凝集抑制阴性。 ［实验分析］:（结合实验原理） 孕妇尿液中的HCG含量显著增高。尿液中的HCG与加入的抗HCG结合, 抗HCG被消耗，使得加入的HCG乳胶抗原不能再与抗HCG结合，不出现乳胶抗原间接凝集反应（凝集被抑制），所以液滴呈现均匀乳状液，为乳胶间接凝集抑制阳性反应。 非孕妇尿液中HCG含量极少，不足以抑制抗HCG与HCG乳胶抗原发生间接凝集反应，所以出现乳胶颗粒的凝集，为乳胶间接凝集抑制阴性反应。
微生物与免疫学期末试卷
微生物与免疫学期末试卷（临药专业）? 出题人：王雅帆 一、单选（每题一分，共20分） 1.A群链球菌的粘附物质是（D） A.外膜蛋白 B.肽聚糖 C.壁磷壁酸 D.脂磷壁酸 2.有关荚膜的叙述正确的是（A） A.与细菌致病力有关 B.与细菌的生长能力有关 C.与细菌的变异有关 D.与细菌的分裂有关 3.内毒素的毒性部分是（B） A.特异多糖 B.脂质A C.脂多糖 D.核心多糖 4.结核和布鲁斯菌为胞内寄生菌，机体为了抵抗它们的感染主要依靠哪类效应T细胞（A） A.CD4+Th1 B. CD4+Th2 C. CD4+Th3 D. CD8+CTL 5.属于再次免疫应答的特点是（B） A.潜伏期长 B.平台期长 C.抗体倍增时间长 D.血清中以IgM为主 6.下列是胞内寄生菌的是（A） A.麻风杆菌 B.破伤风杆菌 C.肺炎链球菌 D.霍乱弧菌 7.肺炎链球菌培养一段时间，其液体培养基的特点为（C） A.先清后浊 B.先浊后清 C.由清至浊再清 D.由浊至清再浊 8.淋病奈瑟菌与脑膜炎奈瑟菌的鉴别通过（B）来实现 A.淋病奈瑟菌分解麦芽糖脑膜炎奈瑟菌不分解 B.脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖淋病奈瑟菌不分解 C.淋病奈瑟菌分解菊糖脑膜炎奈瑟菌不分解 D.脑膜炎奈瑟菌分解菊糖淋病奈瑟菌不分解 9.下列属于B细胞表面的且与ITIM有关的是（D） A.BCR-Igα/β B.FcγRⅠ C.CTLA-4 D. FcγRⅡ 10.Ⅰ型超敏反应的抗体是（），它的合成依赖（C） A.IgG IL-4 B.IgG IL-2 C.IgE IL-4 D. IgE IL-2 11.由EHEC引起的血性结肠炎的主要血清型为（C） A.O151H7 B.O157H17 C.O157H7 D.O151H17 12.霍乱弧菌（B） A.耐酸不耐碱 B.耐碱不耐酸 C.酸碱都不耐 D.既耐酸也耐碱 13、嗜盐性的细菌是（A） A、副溶血性弧菌 B、甲型溶血性链球菌 C、乙型溶血性链球菌 D、霍乱弧菌 14、细菌壁含有大量脂质的是（C） A、沙门菌属 B、弧菌属 C、分枝杆菌属 D、志贺菌属 15、下列关于SSPE不正确的是（D） A、全称为亚急性硬化性全脑炎 B、患者在1~2年内昏迷死亡 C、患者大脑功能发生渐进性衰退 D、是麻疹早期中枢神经系统并发症 16、在胞质和胞核内均可见嗜酸性包涵体的是（D） A、伤寒杆菌 B、麻风杆菌 C、流感病毒 D、麻疹病毒 17、BCR活化的第一信号为（A） A、经Igα/Igβ链传入的活化信号 B、经CD3分子传入的活化信号 C、经CD28分子传入的活化信号 D、经CD19传入的活化信号 18、TD-Ag引起的体液免疫中，Th细胞与B细胞相互作用的分子为（A） A、CD40L和CD40 B、CD4和CD28 C、CD28和CD4 D、CD4和B7
微生物与免疫学名词解释
《医学免疫学》与《医学微生物学》名词解释 1.抗原：能刺激机体的免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答产物发生特异性结合的物质。 2.表位（抗原决定簇）：抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。 3.异嗜性抗原：存在于人、动物、微生物等不同种属之间的共同抗原。 4.抗体：免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆B细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 5.免疫球蛋白：血清中一类主要的蛋白，由α1、α2、β和γ球蛋白组成。 6.抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）：抗体Fab段结合病毒感染的细胞或肿瘤细胞表面的抗原表位，其Fc段与杀伤细胞表面的FcR结合，介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞。 7.补体：正常人或动物体液中存在的一组与免疫有关，并具有免疫活性的免疫球蛋白。 细胞因子：由免疫细胞及组织细胞分泌的具有生物学活性的小分子蛋白。 8.主要组织相容性复合体（MHC）：某一染色体上的一群紧密连接的，决定移植组织是否 相容，与免疫应答有关的基因群。 9.人类白细胞抗原（HLA）：人的MHC。 10.B细胞受体（BCR）：表达于B细胞表面的免疫球蛋白。 11.T细胞受体（TCR）：表达于T细胞表面的免疫球蛋白。 12.抗原提呈细胞（APC）：能够摄取、加工、处理抗原，并以抗原肽—MHC分子复合物的形式将抗原肽信息提呈给T细胞的一类细胞。 13.免疫耐受：免疫活性细胞接触某种抗原性物质时所表现的一种特异性无应答状态。 14.超敏反应：机体受到某些抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常的适应 性免疫应答。 L型细菌：细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素直接破坏或合成被抑制后的细菌，在高渗环境下仍可存活，这种细胞壁受损后，仍能够生长和分裂的细菌称为细胞壁缺陷型或L 型细菌。 质粒：染色体外的遗传物质，存在于细胞质中。为闭合环状的双链DNA，控制细菌某些特定的遗传特性。 荚膜:某些细菌如肺炎球菌、炭疽杆菌等在细胞外面有一层较厚的粘液性物质，称为荚膜。鞭毛:有些杆菌、弧菌及螺形菌的菌体上具附有细长、弯曲的丝状物，称为鞭毛。它是细菌的运动器官。 芽胞:某些菌在一定的环境条件下，细胞质脱水、浓缩，在菌体内形成折光性强、不易着色的圆形或卵圆形的小体，称为芽胞。 菌落：单个细菌经一定时间培养后形成的一个肉眼可见的细菌集团。 消毒：杀灭物体上的病原微生物，但不一定能杀死芽胞的方法。 灭菌：杀灭物体上所有微生物，包括病原微生物、非病原微生物和芽胞的方法。 毒性噬菌体：能在敏感菌内复制繁殖并使之裂解的噬菌体。 温和噬菌体：感染敏感菌后能将自身的核酸整合到宿主主菌DNA并使之复制而复制传代的噬菌体。 转化：受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段并整合到受体菌的基因组中，使受体菌获得新的性状。 转导：以温和噬菌体为载体，把供体菌的遗传物质转移给受体菌，使其获得新的性状。 溶原性转换：温和噬菌体的DNA作为一种外源性基因与细菌染色体通过溶原性整合而重组，使细菌的遗传结构发生改变而导致细菌性状的改变。