蛋白质水平对牛肉肌苷酸含量的影响

西南农业学报　Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｅｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　２０１１年２４卷１期　

Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．１　

文章编号：１００１—４８２９（２０１１）０１—０２９４一Ｏ３　

蛋白质水平对牛肉肌苷酸含量的影响　

徐　英　，李石友　，李琦华　，段　刚　，杨国荣。，梁应海　（１．云南农业职业技术学院，云南昆明６５０２１２；２．云南农业大学，云南昆明６５０２０１；３．云南省草地动物科学研究院，云南昆明　６５０２１２；４．云南天牧肉牛开发有限公司，云南昆明６５０２００）　

摘要：探讨不同蛋白质水平对牛内肌苷酸含量的影响，设计５个营养水平的精料补充料配方，分别饲喂５个试验组肉牛。并与不　添加精料补充料的对照组进行比较。结果表明，精料补充料粗蛋白质水平的提高对牛肉肌苷酸含量没有明显影响。　关键词：内牛；蛋白质水平；肌苷酸　中图分类号：Ｓ８２３．８　文献标识码：Ａ　

Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｌｅｖｅｌｓ　ｏｎ　Ｂｅｅｆ　Ｉｎｏｓｉｎｅ　Ａｃｉｄ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ＸＵ　Ｙｉｎｇ　，ＬＩ　Ｓｈｉ－ｙｏｕ　，ｕ　Ｑｉ・ｈｕａ２，ＤＵＡＮ　Ｇａｎｇ：，ＹＡＮＧ　Ｇｕｏ—ｒｏｎｇ３，ＬＩＡＮＧ　Ｙｉｎｇ—ｈａｌ　（１．Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｅｕｈｕｒａｌ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ＣｏＨｅｇｅ，Ｙｕｎｎａｎ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５０２１２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｙｕｎｎａｎ　Ａ　ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｕｎｎａｎ　Ｋｕｎ－　ｍｉｎｇ　６５０２１２，Ｃｈｉｎａ；３．Ｙｕｎｎａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆＧｒａｓｓｌａｎｄ　ａｎｄ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｙｕｎｎａｎ　Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２１２，Ｃｈｉｎａ；４．Ｙｕｎｎａｎ　Ｔｉａｎｍｕ　Ｂｅｅｆｃａｔ—　ｔｉｅ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　Ｃｏ．Ｙｕｎｎａｎ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５０２００，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｆｅｅｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｖｅｌ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｎ　ｂｅｅｆ　ｉｎｏｓｉｎｅ　ａｃｉｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ。５　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ　ｄｉｅｔａｒｙ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（ｎｏ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ　ａｓ　ｃｏｎｔｒｏ１）ｗｅｒｅ　ｆｅｄ　５　ｇｒｏｕｐｓ’ｃａｔｔｌｅ　ａｎｄ　ｉｔ　ｗａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｆｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｎｅｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏ　ｍｕｃｈ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｆｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｂｅｅｆ　ｉｎｏｓｉｎｅ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｂｅｅｆ　ｃａｔｔｌｅ；Ｐｒｏｔｅｉｎ　ｌｅｖｅｌｓ；Ｉｎｏｓｉｎｅ　ａｃｉｄ　

多年以来，人们对肉类及其制品的鲜味进行了　广泛研究，在与鲜味有关的化合物中，贡献最大的有　２类物质，即氨基酸和肌苷酸（ｉｎｏｓｉｎｉｃ　ａｃｉｄ，ＩＭＰ），　其中肌苷酸是构成肌肉鲜味的主要成分之　

一¨　’　。在肌肉僵直达到极限ｐＨ值过程中，部分　

三磷酸腺苷（ＡＴＰ）在ＡＴＰ酶的作用下，分解成二磷　酸腺苷（ＡＤＰ）　。ＡＤＰ在肌酸激酶的作用下，分解　成腺苷酸（ＡＭＰ）。ＡＭＰ在脱氨酶作用下，脱氨形成　肌苷酸（ＩＭＰ），ＩＭＰ又可在磷酸脂酶的作用下形成　肌苷（ＨｘＲ），并进一步在核苷水解酶的作用下，分　解成次黄嘌呤和核糖。肉中次黄嘌呤核苷酸和其它　分解产物的积累可使肉鲜味变浓　。此外，大量的　研究表明，肌苷酸和糖蛋白在水中或脂肪中加热能　产生明显的肉鲜味＿４】，肉品质受遗传的影响　】。　在以粗料为主要日粮的基础上，根据云南肉牛　养殖户存在的饲粮单一、营养不全、育肥效果差、肉　收稿日期：２０１０—０６—０４　作者简介：（１９７０一），女，副教授，从事家畜家禽研究，＋为通讯　作者。　质不好的共同问题，结合云南饲料资源实际，研究不　同蛋白质营养水平对育肥牛牛肉肌苷酸含量的影　响，为肉牛产业化开发提供参考　引。　１材料与方法　１．１试验地点和时间　试验地点在云南省昆明市寻甸县城郊云南海潮　集团天牧肉牛开发有限公司羊街肉牛养殖场。试验　期为２００７年５～７月共７０　ｄ。　１．２试验方法和步骤　１．２．１试验牛的选择和分组选择品种相同、体重　相近、性别一致（公母比例适宜）的１８月龄西门塔　尔牛与云南黄牛杂交后代的肉牛４８头，按体重相　近、公母搭配原则分为６组，每组８头。　１．２．２试验用精料补充料云南农业大学动物科　学技术学院负责设计并加工肉牛预混料，设计试验　用精料补充料配方（５个），云南天牧肉牛开发有限　公司负责按肉牛精料补充料配方要求，委托饲料生　产企业生产精料补充料（表１）。由表１可知，各试　１期　徐英等：蛋白质水平对牛肉肌苷酸含量的影响　２９５　注：预混料组成为矿物质微量兀素添加剂、维生素添加剂、瘤胃调控剂及载体等。　验组营养物质含量除蛋白质水平不同（试验Ａ组为　水将料拌湿。粗料自由采食，自由饮水。每日清理　

２３％、试验Ｂ组为２Ｏ％、试验Ｃ组为ｌ７％、试验Ｄ　粪尿２次，并注意保暖、通风和光照，严格控制各种　组为ｌ４％、试验Ｅ组为１　１％）之外，其它养分均相　环境因素，做到各组试验牛饲养管理条件一致。　同或相近　，另外，供给各对照组和试验组的青　１．３肌苷酸测定　粗饲料（采用当地的蔬菜、青草、玉米青贮、作物秸　１．３．１　试剂与配制３．５％ＨＣＩＯ　溶液：量取５０　秆等）也完全相同。　ｍＬ高氯酸加水至１　Ｌ。０．５　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液：称取　１．２．３试验设计　采用分组饲养试验，各试验组、　２０　ｇ氢氧化钠，先溶于少量水中，冷却后加水至１　Ｌ。　对照组都是８头牛（表２），同时进入预试期和正试　５　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液：称取２００　ｇ氢氧化钠，先溶于少　期。试验牛选定后先预试（预备试验）１０　ｄ，并在此　量水中，冷却后加水至１　Ｌ。流动相配制：量取３．５　期间驱除体内外寄生虫１次，观察试验牛采食试验　Ｌ磷酸溶液，加人２００　ｍＬ水和２　ｍＬ三乙胺，摇匀，　饲料情况。进行称重后，即正式进入试验期，正式试　补加水至ｌ　Ｌ，再用三乙胺调ｐＨ６．５后，取９５０　ｍＬ　验期为６０　ｄ。　加５０　ｍＬ甲醇，混匀，经０．４５　ｍ滤膜过滤，置超声　１．２．４饲养管理　严格按照牛的饲养管理规程进　波水浴中脱气３０　ｍｉｎ。　行科学饲养。同一组的８头牛在同＿圈舍内拴系饲　肌苷标准储备液：准确称取肌苷标准品（Ｓｉｇｍａ　养，饲喂对应日粮，单头饲喂，每头每天饲喂精料补　公司，含量＞９８％）ｌＯ．４　ｍｇ，用流动相溶解并定容　充料２　ｋｇ，分早、晚２次饲喂。饲喂精料补充料时用　至１０　ｍＬ，摇匀，其浓度为１．０１９　ｇ／Ｌ。　表２试验设计　Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｄｅｓｉｇｎ　２９６　西南农业学报　肌苷酸标准储备液：准确称取肌苷酸标准品　（Ｓｉｇｍａ公司，含量＞９９％）１Ｏ．７　ｍｇ，用流动相溶解　并定容至１０　ｍＬ，摇匀，其浓度为１．０５９　ｇ／Ｌ。　标准系列工作液：准确移取上述肌苷酸和肌苷　标准储备液，用流动相分别逐级稀释至含肌苷酸为　１．０６、３．１８、６．３６　Ｌ和含肌苷为０．３４、１．０２、２．０４　ｇ／Ｌ的混合标准系列工作液，现配现用。　以上所用试剂均为分析纯，水为自制二次蒸馏　水。　１．３．２测定仪器惠普ＨＰ１１００高效液相色谱仪，　包括Ｕ６Ｋ进样阀，４８６型紫外检测器，Ｎ－２０００双通　道色谱工作站，高速离心机，ｐＨｓ－２型酸度计，容量　瓶（５０　ｍＬ），烧杯（２５　ｍＬ），离心管（５、１５　ｍＬ），胶夹　滴管。　１．３．３　色谱条件Ｃ１８ＯＤＳ分离柱，检测器为紫外　检测器，２５４　ｎｍ、ＡＴｒｏ．３２，灵敏度０．０４ＡＵＦＳ．夕　标　流速１．０　ｍｌＭｍｉｎ。　１．３．４测定步骤每组随机抽取１头试验牛屠宰，　分别取背最长肌、股二头肌各１００　ｇ分装，低温冷冻　备用。各样品经绞碎混匀后，分别准确称取１．０　ｇ，　置１０　ｍＬ玻璃匀浆器中，用１５　ｍＬ　３．５％高氯酸溶　液分３次匀浆，匀浆液转入离心管中，并用少量３．５　％高氯酸洗涤匀浆器，洗液并人离心管中，以３５００　ｒ／ｍｉｎ离心１０　ｍｉｎ，吸取上清液，沉淀物用３．５　ｍＬ　３．５％高氯酸溶液再洗涤、离心，合并２次上清液作　为提取液。先用５　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液再用０．５　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液调提取液至ｐＨ６．５，用水定容至５０　ｍＬ，　摇匀。移取１　ｍＬ，用水稀释至１０　ｍＬ，过０．４５　ｍ　滤膜。分离柱经流动相平衡１　ｈ后，取标准系列工　作液及样品提取液各ｌ５　ｌ上色谱柱分析测定。　

２结果与分析　试验结果显示（表３），Ａ、Ｂ、Ｅ组背最长肌的肌　苷酸含量，比对照低，Ｃ组与对照含量相近；Ａ、Ｂ、　Ｃ、Ｅ组股二头肌的肌甘酸含量比对照低。说明在营　养水平较低、育肥速度较慢时，有利于鲜味物质肌苷　酸的沉积。　

２３卷　表３牛肉中肌苷酸的含量　Ｉ　ｌｅ　３　ｌｎｏｓｉｎｅ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｍｅａｔ　

注：检验依据：高效液相色谱法测定畜禽肌肉中肌苷酸含量　［Ｊ］．１９８８，２４（３）：２９５．　

３讨论　

精料补充料粗蛋白质水平的提高对牛肉肌苷酸　含量没有明显影响。在营养水平较低、育肥速度较　慢时，有利于鲜味物质肌苷酸的沉积。　参考文献：　［１］陈宁，尹君亮，李国庆，等．不同营养调控剂对牛肉中肌苷和肌　苷酸含量的影响［Ｊ］．家畜生态学报，２００９，３０（１）．６５—６７．　［２］李石友，徐英，李琦华，等．品种与日粮营养水平对鸡肉肌苷酸　含量的影响［Ｊ］．中国畜牧兽医，２００７（１１）：１３３—１３５．　［３］喻兵兵，毛华明，文际坤．优质肉牛屠宰试验及肉品质研究［Ｊ］．　云南农业大学学报，２００４（２）：２１５—２１９．　［４］范江平，叶绍辉，葛长荣，等．杂交太额牛肉质特性研究初报［Ｊ］．　云南农业大学学报，２００５（４）：６００—６０２．　［５］田应华，钱林东，凌军，等．云南中甸牦牛的遗传多样性研究　［Ｊ］．西南农业学报，２００９，２２（３）：７９４—７９７．　［６］曹冶，王淮，赵素君，等．利用ＲＡＰＤ引物对四川乳肉兼用　牛及其父母本的遗传距离鉴定［Ｊ］．西南农业学报，２００９，２２（５）：　１４４９—１４５２．　［７］刘仙喜．海南优质肉牛产业化推广模式新探【Ｊ］．广东农业科学，　

２００９（１１）：２１２—２１４．　［８］李芳，万忠，骆浩文，等．２００９年广东肉牛产业发展现状分析　［Ｊ］．广东农业科学，２０１０（７）：２４７—２４９．　［９］李慧芳，王强，厉宝林，等．０～２８日龄高邮鸭日粮能量和蛋白　质适宜需要值［Ｊ］．四川农业大学学报，２００９，２７（３）：３６０—３６４．　［１０］徐海军，印遇龙，黄瑞林，等．蛋白质和脂肪在肥育猪体内的分　配沉积规律研究进展［Ｊ］．广东农业科学，２００７（１０）：７２—７６．　［１１］陈国宏，侯水生．中国部分地方鸡肌肉肌苷酸含量研究［Ｊ］．畜　牧兽医学报，２０００，３１（３）：２１１—２１５．　（责任编辑王家银）