肌苷酸产业及工艺

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磷酸法合成肌苷酸工艺的优化

的POCL 3不仅会增加成本，而且会使目标产物转化为其他杂质。

综合成本和转化率两个因素考虑，POCL 3量为300Kg是最佳选择。

不同肌苷粒度对转化率的影响。

反应投料量肌苷300Kg，加入1800L磷酸三乙酯，POCL 3为300Kg，反应温度设定5℃～7℃，加入相同量的肌苷进行不同粒度粉碎后反应并统计产物转化率。

试验中每种粒度的肌苷重复三次试验，反应5小时取样检测转化率，数据如下：试验1：肌苷粒度：60目，I M P 纯度91.9%，IR纯度5.0%，纯度和96.9%；试验2：肌苷粒度：150目，I M P 纯度94.6%，IR纯度2.5%，纯度和97.1%；试验3：肌苷粒度：250目，I M P 纯度96.0%，IR纯度1.0%，纯度和97.0%；试验4：肌苷粒度：350目，I M P 纯度96.0%，IR纯度1.0%，纯度和97.0%；以上述数据肌苷粒度为横坐标，转化率为纵坐标，得到更为直观的两者关系如下图1所示。

由图1可看出，在一定范围内，肌苷粒度与产物转化率成正相关。

当肌苷粒度≥100ml 时，反应转化率在96％以上，但在100ml～120ml此区间内，肌苷粒度的增加并没有使转化率显著增大。

因此，综合考虑粒度成本与转化率等因素，肌苷粒度选择在250目是最佳选择。

综上所述，以肌苷为原料磷酸法合成肌苷酸的最佳工艺条件为：原料投量重量比为POCL 3：IR＝1:1，反应温度在5℃～7℃之间，肌苷粒度在250目左右，5hr反应结束，在此条件下反应的产物转化率达到96％以上，较以前合成法高出4-5%，为合成肌苷酸大幅度降低生产成本提高质量纯度提供了重要途径。

严盟广东肇庆星湖生物科技股份有限公司磷酸法合成肌苷酸工艺的优化苷酸（英文名：inosinicacid或inosinemonophosp，简称IMP），也称次黄嘌呤核苷酸。

目前国内外生产肌苷酸主要有发酵法和肌苷磷酸法，发酵法优点是原料来源广，但存在生产周期较长，防污染难度大，纯度低分离复杂等缺点。

食品中肌苷酸的测定原理

食品中肌苷酸的测定原理
肌苷酸的测定原理主要是通过颜色反应法来实现的。

下面是具体的步骤：
1. 食品样品的制备：将待测食品样品加入生理盐水或其他适当的提取液中，用搅拌器搅拌均匀，得到均匀的食品提取液。

2. 反应原理：肌苷酸与亚硝酸钠在酸性条件下发生反应生成亚硝基肌苷酸，然后亚硝基肌苷酸与硫酸铁铵反应生成深红色络合物。

3. 测定操作：在一定体积的食品提取液中加入适量的亚硝酸钠溶液和硫酸铁铵溶液，使反应发生。

经过一定的反应时间后，用分光光度计测定溶液的吸光度。

4. 比色测定：根据反应产生的深红色络合物的吸收光谱，选取合适的波长进行测定。

一般选择较大吸光度的波长作为测定波长。

5. 校正测定结果：通过对照试剂或标准品进行测定，得到标准曲线，然后用标准曲线将吸光度转化为肌苷酸的浓度。

总结：肌苷酸的测定原理是利用其与亚硝酸钠反应生成亚硝基肌苷酸，再与硫酸铁铵反应形成深红色络合物，通过测定络合物的吸光度，并用标准曲线进行校正，来间接测定样品中肌苷酸的含量。

核酸类药物

的。
AMP GMP
脱氨
还原
酶
酶
SAMP 合成酶
IMP
IMP脱氢酶
GMP合成酶
XMP
AICAR
枯草杆菌的腺嘌呤缺陷型，当培养基中提供限量腺嘌呤时就累积肌苷。
而枯草杆菌的腺嘌呤、黄嘌呤缺陷型，当培养基中提供限量鸟嘌呤时就累积腺苷。
SAICAR PRPP
PRPP转酰胺酶
PRPPБайду номын сангаас
枯草杆菌的嘌呤核苷酸合成途径
（一）酶解法
4．菌体自溶法生产核苷酸磷酸二酯酶在合适的条件下降解细胞内的RNA可
产生5′-核苷酸。在国内用谷氨酸产生菌体自溶法生产 5′ -核苷酸。工艺流程如下：
（一）酶解法
5．碱水解法生产2' 、3' -混合核苷酸。
用酶法降解RNA得到的是5’-核苷酸，可用于生产呈味核苷酸。
2’、3’ -混合核苷酸在医药上有它的特殊用途。对血小板减少，白血球减少症和癌症化疗后升白血球均有较好疗效。
肌苷酸（ I M P ）
0 ℃
核苷的制备
核苷是多种核苷类药物的原料，这些药物通常是生物自身能够合成的组成遗传物质的结构类似物，目前已用于临床的此类药物有几十种
另外，核苷的发酵法生产水平大大高于同类结构核苷酸的发酵水平，因此肌苷酸钠，鸟苷酸钠可分别由肌苷和鸟苷经化学磷酸化方法合成， ATP由腺苷酯法合成。
（二）DNA的提取与制备
2．具有生物活性DNA的制备可从动物内脏（肝、脾、胸腺）中提取制备，操作条件0～3℃。
动物内脏加4倍量生理盐水经组织捣碎机捣碎1分钟，匀浆于2500rpm离心30 分钟，沉淀用同样体积的生理盐水洗涤3次，每次洗涤后离心，将沉淀悬浮于20 倍量的冷生理盐水中，再捣碎3分钟，加入2倍量5％十二烷基磺酸钠，并搅拌2～ 3小时，在0 ℃2500rpm离心，在上层液中加入等体积的冷乙醇，离心即可得纤维状DNA，再用冷乙醇和丙酮洗涤，减压低温干燥得粗品DNA。

肌苷酸生产培养时间

肌苷酸生产培养时间肌苷酸（Creatine）是一种重要的氨基酸衍生物，以其在能量贮备、减少乳酸积累、增加肌肉力量等方面的作用备受关注。

那么，针对制备肌苷酸这个过程，我们该如何合理掌握培养时间呢？下面就是肌苷酸生产培养时间相关的内容。

一、肌苷酸生产的作用及意义通过肌酸、甘氨酸和精氨酸的反应，合成肌苷酸，可以大大增强力量训练的效果。

此外，肌苷酸还能够帮助肌肉快速恢复，减少肌肉酸痛程度等。

因此，不少健身爱好者、运动员等都会选择肌苷酸作为补充剂，以提高运动表现和康复效果。

二、肌苷酸的生产方法及其主要特点目前，肌苷酸的生产方式主要有化学合成和微生物发酵法两种方法。

其中，由于化学合成的成本较高，得到的肌苷酸也带有一定的杂质，因此在工业上更倾向于采用微生物发酵法。

此外，微生物发酵法还能够大规模制备高纯度的肌苷酸，并且具有生物学可持续性、资源利用率高等优点。

三、影响肌苷酸生产的因素在肌苷酸的发酵过程中，影响其生产的因素主要有菌株选择、培养基成分、培养条件、投料策略等几个方面。

四、肌苷酸生产中的培养时间控制方法在微生物发酵方法中，针对肌苷酸的生产过程，一般采用批发酵、半连续发酵或连续发酵等方法。

其中，批发酵的优点是操作简单、投资少、随时可控等。

不过，批发酵的劣势在于酿造期间产量不如其他两种方法稳定，且需要占用大量的生产设备，不适合大规模工业生产。

对于肌苷酸生产中的培养时间控制，常常需要考虑到培养时间对产酸量的影响。

因此，在实际生产中，一般会通过调节发酵时间、进料时间等方法来控制肌苷酸生产的效率和产量。

总的来说，针对肌苷酸的生产过程，通过正确把握菌株选择、培养基成分、培养条件、投料策略等方面的因素，合理掌握发酵期，最终才能够得到高质量的肌苷酸产物。

工业生产肌苷酸流程

工业生产肌苷酸流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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在进行工业生产肌苷酸之前，首先要做好充分的准备工作。

5′-肌苷酸在榨菜中的应用

ｎｔｎ．８ａｅａｄ０
ｔｓｅａｏｓ．ａｔｎｄｃｔＫｅｙｗｏｒＩＰ；ｄ：ＭＧＭＰ；ｔｂｌｔｐｒｓｒｅｅｔｂｅ；ｍａｉｓａｉｉｙ；ｅｅｖｄｖｇｅａｌｕｍ
ｍｏｏｓｄｉｍｕｔｍａｅｗａｐｔｍｉｅｎｔｅｐｅｅｖｄｖｅｔｂｅｎｔｒｆｕｍｉｎｏｕｇｌａｔｓｏｉｚｄｉｈｒｓｒｅｇｅａｌｓｉｅｍｓｏｍａ
ａｏｎｏｉｍｌａａｅａｅｍｏｅｗｉｅｙｕｓｄｉｈｏｃｓｏｅｅｖｄｖｇｔｂｌｈｗｅｅｈｅｎｄｍｏｓｄｕｇｕｔｍｔｒｒｄｌｅｎｔｅｐｒｄｕｔｆｐｒｓｒｅｅｅａｅ，ｏｖｒｔ
萝卜等产品中添加呈味核苷酸提升产品的风味和档干
ｕｍｉｔｓｅｏｈｅｅｐｏｄｔｕｌｃｅｓｓｉｈｈｌｉｅＴｈｅａｌｓｓｏｆｔｅｕｍａｕｂｓａｅｍａａｔｆｔｓｒｕｃｓｗｏｄｄｅｒａｅｎｔｅｓｅｆｌｆ．ｎａｙｉｈｍｉｓｔｎｃ
随着人们生活水平的提高，费者对食品风味的消要求越来越高；与此同时，品科技的进步为各种新型食食品添加的生产和应用提供了可能。运用新型的食品添加剂对我国传统食品进行改造和提升已经是食品行业的共识，比如发酵蔬菜企业开始在泡菜、榨菜、菜、雪

5’-肌苷酸二钠的生产工艺[发明专利]

专利名称：5’－肌苷酸二钠的生产工艺
专利类型：发明专利
发明人：张逸伟,刘剑,潘小锋,伍文锋,瞿东方,顾振东,梁健富,宁异真
申请号：CN200810028996.1
申请日：20080624
公开号：CN101293907A
公开日：
20081029
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种5’－肌苷酸二钠生产工艺，特别是以Ba沉淀工艺得到5’－肌苷酸二钠的生产工艺，它是取5’－肌苷酸二钠水相，加入5’－肌苷酸二钠当量数的一定当量倍数BaCl溶液(饱和或接近饱和)，一边搅拌，一边加入膜碱中和至PH7.3－7.6，或加碱中和至PH7.3－7.6，然后加入5’－肌苷酸二钠当量数的一定当量倍数BaCl溶液(饱和或接近饱和)搅拌沉淀，降温至10℃以下，用布氏漏斗滤纸真空抽滤，得母液和IMPBa盐，计算母液损失率，将IMPBa盐加至相当于5’－肌苷酸二钠水相中5’－肌苷酸二钠当量数的一定当量倍数的NaSO溶液(饱和或接近饱和)，60－70℃搅拌析出IMP，60－70℃开始用布氏漏斗滤纸真空抽滤，得BaSO沉淀和滤液，计算滤液中5’－肌苷酸二钠收率和测纯度，与现有技术相比，具有提高5’－肌苷酸二钠析晶的收率和纯度、降低生产成本等优点。

申请人：广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
地址：526040 广东省肇庆市端州区工农北路67号
国籍：CN
代理机构：广州新诺专利商标事务所有限公司
代理人：华辉
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食品肌苷酸含量的检测方法研究

食品肌苷酸含量的检测方法研究肌苷酸是一种存在于动物组织中的物质，尤其在肌肉组织中含量较高。

它是能源物质的一种来源，可以通过代谢产生腺苷三磷酸（ATP），为人体提供活动所需的能量。

因此，肌苷酸在食品中的含量成为了人们关注的焦点之一。

食品肌苷酸含量的检测方法研究旨在准确测定食品中肌苷酸的含量，以帮助人们了解食品的营养价值。

过去，常用的检测方法主要是基于色谱技术，如高效液相色谱（HPLC），通过将食品样品提取后，使用色谱柱进行分离，再利用紫外或荧光检测器来定量分析肌苷酸的含量。

然而，随着科学技术的发展和深入研究，新的检测方法逐渐涌现。

一种新兴的方法是利用质谱技术进行检测。

质谱技术能够提供更加准确和灵敏的分析结果。

例如，气相色谱质谱联用可以通过将食品样品挥发成气体后，使用质谱仪进行分析，不仅可以检测肌苷酸的含量，还可以确定其结构。

同时，液相色谱质谱联用也是一种常用的肌苷酸含量检测方法，可以在不需要样品预处理的情况下，直接对食品样品进行分析。

这些质谱技术的出现使得肌苷酸含量的检测更加便捷和高效。

除了色谱和质谱技术，生物传感技术也被应用于肌苷酸含量的检测。

生物传感技术利用生物体的特异性识别和信号转导机制，将目标物质与生物分子结合，并转化为可测量的信号。

例如，利用抗体对肌苷酸进行识别，通过一系列的反应将识别到的肌苷酸转化为电化学信号进行检测。

这种方法具有灵敏度高、选择性好的优点，对于肌苷酸含量的快速检测具有重要意义。

除了传统的检测方法外，近年来，新型的纳米材料也逐渐应用于肌苷酸含量的检测。

纳米材料具有较大的比表面积和特殊的物理、化学性质，能够提高检测的敏感性和选择性。

例如，利用石墨烯等纳米材料制备传感器，可以通过肌苷酸与纳米材料发生特定的相互作用，改变纳米材料的电导率、发光性质或电化学反应，从而实现肌苷酸含量的检测。

这种纳米材料在肌苷酸检测中的应用，为人们探索更加灵敏、快速的检测方法打开了新的研究方向。

综上所述，食品肌苷酸含量的检测方法研究在近年来得到了长足的发展。

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（3）肌苷的提取
先过阳离子交换柱，再过活性炭柱吸附），结晶。
3.肌苷的磷酸化
（1）酶法：
酶：核苷磷酸化酶磷酸的供体：对硝基苯磷酸难点：除5‘－磷酸化产物外，还有3’- 、 2‘-位异构体，收率85％。
（2）化学法：用不同的磷酸化试剂（磷酰氯、
磷酸、五氧化二磷等）。
4.肌苷酸的提取
离子交换法
除菌体
（过滤、离心）加乙醇沉淀精制（结晶）
除对硝基酚
柱层析活性炭吸附肌苷酸
粗制品
活性较弱。
2.培养条件
（1）培养基：
碳源：淀粉水解糖或糖蜜
氮源：要充分（因肌苷含氮量高，20.9％）无机盐：可溶性磷盐有抑制作用（胞外磷酸化）生长因子：加适量含腺嘌呤的物质，如酵母膏。
腺嘌呤的最适浓度：不影响菌体生长使肌苷大量积累
（2）发酵条件
通气搅拌：供氧充足，促进肌苷生成，并可减少CO2 对肌苷生成的抑制。
因此，选择可以产生核苷酸的产氨短杆菌
（Brevibacterium ammoniagene）为出发菌株，
诱变为腺嘌呤缺陷型突变株，再诱变为鸟嘌呤
缺陷型突变株。
2.培养条件
（1）因所用菌株为腺嘌呤缺陷型，所以添加适量腺嘌
呤（加0.5%酵母膏或酵母水解液）。
（2）Mn2+亚适量工业原料和工业用水含较多的Mn2+，难于控制Mn2+ 亚适量,有两条途径： a.筛选对Mn2+不敏感的突变株 b.加抗生素或表面活性剂以解除过量Mn2+的影响。（3）添加较高浓度的磷盐。
（二）二步法（肌苷酸生产主要方法）
发酵法原因： •IMP对细胞膜的透性很差。 •微生物中普遍存在使IMP脱磷酸化的酶类。肌苷磷酸化肌苷酸
1.肌苷生产菌的选育
常用：枯草杆菌（Bacillus subtilis ）的腺嘌呤缺陷型。
原因：
该菌磷酸酯酶活性强，有利于将IMP脱磷酸化形成肌苷，分泌至胞外，而产氨短杆菌的磷酸酯酶
二、成本、应用分析
（一）调味是食品增鲜剂，其二钠盐与谷氨酸钠（味精）混合使用，其呈味作用比单用味精高数倍，有“ 强力味精”之称。（二）医疗适用于各种原因引起的白细胞减少症、血小板减少症、各种心脏疾患、急性及慢性肝炎、肝硬化等，此外尚可治疗中心视网膜炎、视神经萎缩等。
三、国内主要生产企业
肌苷酸产业及生产工艺
李查杭生物工程101班
一、国内外生产水平
截至今日，日本的肌苷酸生产达到最高的水平，最高达可达到到20— 27g/L，而在我国的生产水平达到 16g/L。
二、成本、应用分析
成本分析
肌苷酸过去一直靠进口，其价格高达每千克200元。从70年代开始，我国成功地利用细菌（如谷氨酸棒状杆菌265和产氨短杆菌926）发酵法生产肌苷酸和乌苷酸，成本仅为每千克2～3元。而现在肌苷酸二钠的价格在每千克260元。
山东双凤股份有限公司江阴市蔚尔生物科技有限公司南通秋之友生物科技有限公司南京同凯兆业生物技术有限责任公司广东江门甘蔗化工股份有限责任公司武汉生科生物股份有限公司等

四、肌苷酸的生产（一）一步法
1.肌苷酸生产菌选育（1）解除微生物自身的反馈调节 a.解除AMP、GMP对PRPP（ 5-磷酸核糖-1-焦磷酸）转酰胺酶的反馈抑制。 b.切断5‘-IMP继续代谢生成GMP和AMP的途径。