林可霉素的发酵及生物效价测定
盐酸林可霉素产生菌扩大培养工艺选择
盐酸林可霉素产生菌扩大培养工艺选择张晓华;肖作为;陆广琴;焦志莎;黄绍国【摘要】试验在单因素试验基础上,选取摇瓶间温度、湿度、摇床转速、培养时间为自变量,PH值、还原糖含量、氨基氮含量为比较对象,通过正交试验分析法,研究各自变量交互作用及其对种子发酵的影响;以镜检结果下,菌丝生长状况和菌浓为选育标准,确定盐酸林可霉素扩大培养的最佳工艺条件为:温度30℃,湿度45％～48％,摇床转速220 r/min,培养时间48h.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2013(033)010【总页数】3页(P5-7)【关键词】盐酸林可霉素;摇瓶间温度;湿度;摇床转速;培养时间;菌浓【作者】张晓华;肖作为;陆广琴;焦志莎;黄绍国【作者单位】湖南永州市中心医院,湖南永州425006;湖南永州市中心医院,湖南永州425006;湖南永州市中心医院,湖南永州425006;湖南永州市中心医院,湖南永州425006;湖南永州市中心医院,湖南永州425006【正文语种】中文【中图分类】R978.19盐酸林可霉素又名洁霉素（L i n c o m y c i n Hydrochloride）为白色结晶性粉末；有微臭或特殊臭；味苦。
在水或甲醇中易溶，在乙醇中略溶[1]。
可治疗各种感染，属抑菌剂，是窄谱抗生素，作用机制与红霉素相似，主要抑制细菌细胞蛋白质的合成，对革兰阳性球菌有较好作用，特别对厌气菌、金葡菌及肺炎球菌高效[2]。
在人体内分布广，可进入骨髓和骨组织，临床上广泛用于呼吸系统、骨髓炎及软组织感染等病症的治疗，尤其适用于对青霉素过敏的病人[3]。
林可霉素的生物合成及代谢调节机制是极为复杂交错的生理生化现象[4]，工业化生产主要是通过林可霉素产生菌好氧发酵制取[5]。
本文则通过正交试验，分析盐酸林可霉素产生菌扩大培养的最佳工艺。
1.1 主要原料与试剂1.1.1 实验原料菌种LA02，由南阳化工厂中心实验室提供[6]；玉米浆，由华北制药康欣有限公司提供；自制豆饼粉，过80目筛。
林可霉素发酵中后期代谢的调控
林可霉素发酵中后期代谢的调控
张锐;徐虹;刘俭国;孙春玲;李爱玲
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2016(043)005
【摘要】在林可霉素的整个发酵过程中,在发酵的前期和中期效价增长一直比较稳定,但是从发酵中后期开始菌体开始自溶,效价增长放缓,对生产造成了很大的影响.找到一个有效的方法来减缓菌丝的衰老,对林可霉素的发酵具有重要的意义.从发酵的中后期开始少量多次的添加一定量的磷酸二氢钾能在一定程度上减缓菌丝的衰老,提高林可霉素发酵的产量.
【总页数】2页(P67-68)
【作者】张锐;徐虹;刘俭国;孙春玲;李爱玲
【作者单位】西北农林科技大学,陕西杨凌712100;天方药业有限公司,河南驻马店463000;西北农林科技大学,陕西杨凌712100;天方药业有限公司,河南驻马店463000;天方药业有限公司,河南驻马店463000;天方药业有限公司,河南驻马店463000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ
【相关文献】
1.旁路代谢酶抑制剂对林可霉素发酵的影响 [J], 乔现婷;叶蕊芳;毛全贵;张宏周;王丹
2.林可霉素发酵过程代谢特性与pH调控的研究 [J], 李啸;储炬;张嗣良;葛友群
3.肌苷发酵过程中后期的代谢流节点分析 [J], 徐咏全;马雷;关章军;刘淑云;陈宁
4.林可霉素生物合成过程中后期的调控研究 [J], 李啸;杭海峰;储炬;张嗣良;庄英萍;葛友群
5.林可霉素发酵过程中磷的调控 [J], 李小兵
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盐酸林可霉素
8、V型混合器：2000L600kg/0.5小时/台
9、粉碎机：120kg/1小时/10、纯化水系统：2T/小时
原材料、动力消耗和技术经济指标（略）
物料平衡（略）
附：
考核指标及计算：
预计体积=碱洗丁浓液体积（L）×碱洗丁浓液单位（u/ml）/300000(u/ml)
打开蒸出丁醇接收罐真空阀门，蒸发塔阀门，冷却系统阀门，检查罐底阀是否关闭，真空度达标，开启蒸汽阀门，控制蒸汽压力，蒸发温度，用9℃水或冰盐水对蒸出丁醇进行冷却。在浓缩液接近预计体积时，取样测单位，以控制浓缩液单位在28~35万u/ml之间。每小时记录一次浓缩温度和真空度。
比旋度
----
+135°～+150°
+135°～+150°
硫酸灰分
----
----
≤0.5%
重金属
----
----
≤5PPM
细菌内毒素
≤0.5EU/mg
≤0.5EU/mg
----
仅用于注射成品
残留丁醇＊
≤100PPM
≤100PPM
≤100PPM
残留丙酮＊
≤1000PPM
≤100PPM
≤100PPM
残留辛醇＊
工艺过程
一、发酵液纯化和过滤：
发酵液用草酸调PH至2.5-3.5，草酸用量以2.5±0.5kg/十亿发酵液的比例加入，然后用蒸汽直接加热至60-70℃，凝固蛋白质。经纯化后的发酵液用板框压滤机进行固液分离，再用自来水将滤饼中的林可霉素顶洗出来，顶水结束后用空气吹干板框，顶洗液与滤液合并。滤液应澄清，不得带絮状物和固体杂质。
盐酸林可霉素粗粉在中转桶内存放时间不超过48小时。
林可霉素高产菌的筛选
１ ２ 培 养基 ．
效 价 ， 以 看 出 能耐 受 较 高 浓度 甲硫 氨 酸 的 菌 株其 生 可 产 林可 霉 素 的能力 也 较强 （ ２ 。 表 ）
表 Ｉ 不 同 诱 变 因素 处 理 结 果
斜 面 、 板 和茄 子瓶 培养 基 均为 高 氏培 养基 。 子 平 种
维普资讯
中 国抗 生 索 杂 志 ２ ０ ０８年 ８月第 ３ ３卷第 ８期
・５ ５ ・ ０
文 章 编 号 ： ０ １ ８ ８ （ ０ ８ ０ — ５ ５ ０ １０ — ６ ９ ２ ０ ） ８０ ０— １
林 可 霉 素 高产 菌 的 筛 选
Ｓ ｒ ｅ ｎｇ ｆ ｒ ｔ ｅ ｈｉ ｈ ｌｎｃ ｍ ｙ ｉ ｐｒ ｄｕ ｉ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｎｉ ｏ ｈ ｇ ｉ ｏ ｃ ｎ— ｏ ｃ ｎｇ ｓ ｒ ｉ
（ ） 酸 二 乙酯 （ Ｅ ） 变 处 理 ２硫 Ｄ Ｓ诱
从 小平 皿 内 吸
表 ２ 耐 甲硫 氨 酸 菌 株 的筛 选 结 果 （ ｇ ｍ１ ￣／ ）
取 ｌ ， 入 ｌＯ ｍｌ 加 Ｏ ｍｌ摇 瓶 内 ， 后 在 摇 瓶 内 加 入 然
０ １ ｌＬ 的 Ｄ Ｓ， ３ ℃ ， ０ ｒｍｉ ． ｍｏ／ Ｅ 在 Ｏ ２ ０／ ｎ的摇 床 上 振 荡
中 国抗 生 素 杂 志 ２ ０ ０ ８年 ８月 第 ３ 卷 第 ８ ３ 期
［ ］李 光 辉 ， 婴 元 ， 楠 ， ．左 氧 氟 沙 星 序 贯 疗 法 治 疗 细 菌 ３ 张 陈 等 性 感 染 ２ ４例 的 临 床 评 价 ［］ 中 国 抗 感 染 化 疗 杂 志 ， １ Ｊ．
２ ０ ４ ２ ：５ ６ ． ０ ４， （ ） ６ ～ ９
年产100吨盐酸林可霉素工厂设计
年产100吨盐酸林可霉素工厂设计摘要本设计内容主要包括盐酸林可霉素的设计依据，工艺路线论证，工艺流程设计，全流程物料衡算，全流程热量衡算，设备设计计算与选型，车间布置设计，劳动保护，工程经济，安全生产和“三废处理”等关键词：盐酸林可霉素；车间布置；工艺设计；总平面布置AbstractThe design was composed of synthesizing lincomycin hydrochloride, industrial route arguementation, mass and energy balance, industrial calculation and choosing of machines, workshop layout, labour safe, and the treating of wasteKey Words: lincomycin hydrochloride; workshop design目录摘要 (2)Abstract (3)前言 (5)1.产品概述 (6)1.1产品名称，化学结构，理化性质 (6)1.2规格，临床用途，药理毒理和药代动力学 (6)1.3工艺改革，技术依据 (7)1.3.1林可霉素板框过滤洗涤方法的讨论 (7)1.3.2林可霉素提取过程讨论 (8)2．流程设计及流程叙述 (10)2.1工艺流程框图 (11)2.2流程简述 (12)3.物料衡算 (13)3.1酸化、过滤段物料衡算： (13)3.2碱化段物料衡算： (15)3.3丁提段物料衡算： (18)3.4丁浓工段物料衡算： (20)3.5水洗、浓缩段物料衡算： (22)3.6脱色、结晶工段物料衡算： (25)4.热量衡算 (28)4.1酸化、过滤： (30)5.主要设备的选型与计算 (34)6.非标准设备的选型与计算 (37)7.车间布置设计 (40)8.岗位操作要点及工时 (41)9.工艺质量控制检查及中间体，成品质量标准 (41)10.劳动组织 (42)11.劳动保护与安全生产 (42)12.“三废”处理及其综合利用 (45)13.工程经济 (46)所存在的问题及改进（设计小结）参考文献附录1 设备一览表附录2 工艺流程图附录3 车间平立面布置图附录4 工厂总平面布置图前言此为年产100吨盐酸林可霉素的初步设计说明书，是在经过毕业实习，即在湖北制药厂盐酸林可霉素生产车间实习之后和对盐酸林可霉素现有的生产工艺进行查阅的基础上进行的初步设计。
林可霉素人工抗原的合成与鉴定
林可霉素人工抗原的合成与鉴定张小辉;职爱民;侯玉泽;宋春美;王耀;龚芳;赵启法;张改平【摘要】拟合成并鉴定林可霉素( Lincomycin,LIN)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源LIN多克隆抗血清.采用高碘酸钠法将林可霉素与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清蛋白(OVA)分别偶联,合成免疫原LIN-BSA和包被原LIN-OVA,并采用紫外分光光度法(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定.结果表明,半抗原LIN和载体蛋白偶联成功.动物免疫试验(免疫BALB/c纯系小鼠)结果显示,3只小鼠效价均达1∶3 000,且2号小鼠多抗血清抗LIN的半数抑制质量浓度IC50为3.85 μg/L,与莫能菌素的交叉反应率为6.19％,与其他药物无交叉反应.表明成功获得高效价、特异性好、亲和力高的鼠源抗LIN多抗血清.%The goal of this study was to synthesize artificial antigen of lincomycin and to obtain its mice polyclonal antiserum. Artificial antigen LIN-BSA and LIN-OVA were synthesized using sodium perio-date by linking carrier proteins BSA and OVA to LIN. The antigen LIN-BSA and LIN-OVA was identified by ultraviolet scanning and SDS-PAGE. The results showed that the hapten LIN was successfully linked to carrier proteins. The animal immunization results showed that three BALB/c mice indirect ELISA titer against LIN were 1 : 3 000 and the IC50 of No. 2 mice was 3. 85 μg/L and the high-titer; the rate of cross reaction of LIN mAb with Monensin was 6. 19%, and there was no cross-reactivity to other compounds; sensitivity LIN polyclonal antiserum has been generated. The artificial antigen of LIN and its mice polyclonal antiserum laid a foundation base for product the monoclonal antibodies and rapid test reagent against LIN.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2012(021)008【总页数】6页(P1-6)【关键词】林可霉素;人工抗原;合成;多抗血情【作者】张小辉;职爱民;侯玉泽;宋春美;王耀;龚芳;赵启法;张改平【作者单位】河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002【正文语种】中文【中图分类】S859.84林可霉素（lincomycin，LIN）又称洁霉素，是由林肯链霉菌发酵产生的林可酰胺类抗生素［1－2］。
林可霉素
大剂量本品快速静注时可引起血压下降、心电图变化，有潮红及发热感，偶也可致心跳呼吸停止。1例用 200mg发生恶心、呕吐、低血压、呼吸困难及心电图改变约20分钟。因此较大剂量静脉给药时宜稀释后静滴，每 2g量至少以250ml液体稀释，每小时输液速度不宜超过100mL。静脉用药时可引致血栓性静脉炎。
不良反应
常见的不良反应有：1、腹或胃绞痛、疼痛、严重气胀；2、严重腹泻（水样或血样）；3、发热；4、恶心、 呕吐；5、异常口渴；6、异常疲乏或软弱；7、显著体重减轻（伪膜性肠炎）。
大剂量林可霉素静注时可引起血压下降、心电图变化等，偶可引起心跳、呼吸停止。静脉给药可引起血栓性 静脉炎。可引起胃肠道反应：恶心，呕吐，食欲不振，腹胀，腹泻.。可引起二重感染，伪膜性结肠炎及光敏反应。 可致皮疹，哮喘，耳鸣，眩晕，过敏性休克。亦有血象改变的报道。偶尔出现手脚麻木。
化合物简介
1
基本信息
2
物化性质
3
安全信息
4
生产方法
5
用途
基本信息
化学名称：6,8-二脱氧-6-(1-甲基-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基)-1-硫代-D-赤式-α-D-半乳辛吡喃糖苷 化学式：C18H34N2O6S 分子量：406.54 CAS号：154-21-2 EINECS号：205-824-6
用法用量
1、口服成人每日1.5～2g（按林可霉素计，以下同），分3～4次服；小儿每日 按体重30～60mg/kg，分3～4次服；婴儿小于4周者不宜服用。 2、肌内注射成人一般为每8-12小时0.6g；小儿每日按体重15-30mg/kg，分次注射。 3、静脉滴注成人一次0.6g，溶于100～200ml输液内，滴注1～2小时，每8～12小时一次。小儿每日按体重 10～20mg/kg，分2～3次给药。 4、其他： （1）为防止急性风湿热的发生，用本类药物治疗溶血性链球菌感染时的疗程，至少为10日。 （2）处理林可霉素或克林霉素所致的伪膜性肠炎，轻症单独停药可望有效，中等至重症患者需补充水、电 解质和蛋白质。如经上述处理无效，则应给万古霉素口服，每6小时125～500mg，疗程5～10日。复发时可给第二 疗程万古霉素。甲硝唑口服或杆菌肽口服也有效；甲硝唑250～500mg，一日3次，杆菌肽2.5万单位，一日4次。 （3）不同菌株对林可霉素的敏感性可有相当差异，故药敏试验有重要意义。
林可霉素发酵液的预处理工艺优化研究
当代化工研究Modem Chemical Research126工艺与设备2020・15林可霉素发酵液的预处理工艺优化研究*张杭洲刘万礼管金富王晓宁（宁夏泰益欣生物科技有限公司宁夏750000）摘耍：林可霉素（Lincomycin,LCM）又称EP克林霉素杂质A,是通过林可链霉菌发酵培养而产生的一种次级代谢产物；由于发酵液的滤速和澄清度问题，对其生产周期以及产品质量有重要影响，因此，林可霉素发酵液的预处理工艺优化（酸化、絮凝剂、助滤剂）备受关注.本研究结果表明：在酸性条件下（PH=2.92）,可以明显提高林可霉素发酵液的滤速，随着絮凝剂与助滤剂（0%。
、1%。
、3%。
和5%o）的增加，发酵液的滤速均呈降低的趋势；3%。
絮凝剂与助滤剂的加量所对应的滤液澄清度最佳（由Y3号提升至Y5号）.根据林可霉素发酵液的滤速和滤液澄清度的研究结果表明，其预处理的最佳工艺优化条件为：在酸性条件下（PH=2.92）,絮凝剂与助滤剂均选择3%。
的加量，这将对林可霉素的预处理工艺具有潜在的实用价值.关键词：林可霉素发酵液；预处理；PH=2.92;3%。
絮凝剂；3%。
助滤剂中图分类号：TQ文献标识码：AOptimization of Pretreatment Process for Lincomycin Fermentation BrothZhang Hangzhou,Liu Wanli,Guan Jinfii,Wang Xiaoning(Ningxia Taiyixin Biotechnology Co.,Ltd.,Ningxia,750000)Abstract:Lincomycin(LCM),also known as EP clindamycin impurity A,is a secondary metabolite produced by Streptomyces lincomycin fermentation.Due to the problems of f iltration rate and clarity offermentation broth,which have an important impact on its production cycle and product quality.Therefore,the optimization of p retreatment p rocess(acidification,f locculant,filter aid)of l incomycin f ermentation broth has attracted much attention.The results of this study show that the f iltration rate of lincomycin fermentation broth can be significantly increased under acidic conditions(PH=2.92).With the increase of f locculant andfilter aid(0%o,l%o,3%o and5%o),the f iltration rate of f ermentation broth tends to decrease. The f iltrate clarity corresponding to the addition of3%o f locculant and f ilter aid is the best(from Y3to Y5).The research results of f iltration rate and f iltrate clarity of l incomycin f ermentation broth show that the optimal p retreatment p rocess optimization conditions are:under acidic conditions (PH=2.92),flocculant and f ilter aid are both added in an amount of3%o,which yvill have potential practical value j or the pretreatment p rocess of lincomycin.Key words i lincomycin f ermentation broth；pretreatment}PH=2.92；3%o f locculant^3%o f ilter aid林可霉素（Lincomycin,LCM）又称EP克林霉素杂质A,是通过林可链霉菌发酵培养而产生的一种次级代谢产物对革兰氏阳性菌、厌氧菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均具备一定的抗菌效果，并且与现存的广谱抗生素也不存在交叉耐药性，因此，林可霉素及其半合成制备的克林霉素（图1）,在医药卫生领域中被广泛应用呦。
不同补料工艺对林可霉素发酵的影响
不同补料工艺对林可霉素发酵的影响
钟益清;肖永梅;王筱兰
【期刊名称】《南昌大学学报（工科版）》
【年(卷),期】2013(035)002
【摘要】研究补料工艺对林可霉素发酵生产的作用,考察在不同时间1次和2次补加小料对菌体形态和发酵效价的影响.结果显示:发酵过程中补糖和补硫酸铵可提高林可霉素发酵的效价,在此基础上分批增补小料对林可霉素发酵效价的增加效果更好,其中2次补小料的最优时间分别在发酵48 h和96 h.进行2次补小料的林可霉素发酵效价达到7.421 g/L,比不补小料和补1次小料林的林可霉素发酵效价分别提高192.7％和135.4％.
【总页数】4页(P130-133)
【作者】钟益清;肖永梅;王筱兰
【作者单位】江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022;江西国药有限责任公司,江西南昌330052;江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022
【正文语种】中文
【中图分类】TQ465.2
【相关文献】
1.不同补料方式对酿酒酵母高密度发酵的影响 [J], 荣博涵;甄玉国;赵小丽;刘乙辰;冀红芹
2.林可霉素发酵补料工艺研究 [J], 王昂;刘颖利
3.不同添加物对L-色氨酸补料分批发酵的影响 [J], 杨海军;王健;陈宁;刘淑云;张克旭
4.不同pH调节剂对补料批式发酵产1,3-丙二醇的影响 [J], 唐浩;郭美锦;庄英萍
5.不同补料发酵方式对发夫酵母产虾青素的影响 [J], 汪洪涛;徐学明;金征宇
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
发酵工程基础实验
华东理工大学2011—2012学年第_Ⅱ_学期《发酵工程基础实验》实验论文班级学号姓名成绩________ 开课学院生工学院任课教师李友元论文题目：洁霉菌紫外诱变与发酵洁霉菌紫外诱变与发酵朱理﹡，周文茹，陈鹏飞华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海200237摘要优良的菌种是发酵工业的基础，工业生产的菌种一般都需要运用遗传学原理和技术进行改造，从而使得现存的优良性状强化，去除不良性状，提高菌种的生产能力。
本实验从洁霉菌的单孢子悬浮液出发，采用紫外诱变选育菌株，经过种子扩陪、发酵培养后，最终用杯碟法对产物进行分析,并与原菌种进行比较。
实验测得紫外诱变的平均死亡率为%，诱变后效价值为。
并与其他实验组进行比较得，诱变剂量不同即紫外照射时间不同，会直接导致菌体的死亡率不同，且诱变剂量越大即紫外照射时间越长，则菌体死亡率越高。
关键词洁霉菌, 紫外诱变，死亡率，糖氮测定，效价，中图分类号TQ92 文献标识码 A 文章编号The Ultraviolet Mutagenesis and Fermentation of of S. LincolnensisZHU Li﹡，ZHOU Wen-Ru，CHEN Peng-FeiState Key Laboratory of Bioreactor Engineering, ECUST, Shanghai 200237, ChinaAbstract The good strain is the basis of the fermentation industry, industrial production strains generally requires the use of genetic principles and techniques to improve the characteristic, in order to make the existing good traits to strengthen, remove the undesirable traits, and increase the production capacity of the strain. In the research, S..lincolnensis was mutated by UV. After scale-up and fermentation,we determined the potency by cylinder-plate method, then compared with the initial strain. Finally，We matured the death rate is about %，the podency of mutated strain＇s efficiency was compared with other group, different UV radiation times cause different mortality, the greater UV radiation time, the higher mortality.Key words S. lincolnensis , UV mutation , mortality , potency洁霉菌(S. lincolnensis,)，又名林可链霉菌，它可产生林可霉素(1incomycin)，一种林可胺类碱性抗生素，对多数的革兰氏阳性菌有较强抗菌活性，是临床用主要抗生素之一[1]。
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微生物发酵即是指利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转
化为人类所需要的产物的过程,微生物发酵生产水平主要取决于菌种本身的遗传特性和培养条件
林可霉素（Lincomycin）是一类具有重要临床意义的高效抗生素，是美国普强公
司的Manson等人于1962年首先从美国内布拉斯加州林肯市附近土壤中分离得到的一种由林可链霉菌所产生的抗生素，主要对革兰氏阳性菌有效，特别是对金黄色葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等有良好抑菌作用，对革兰氏阴性菌亦有一定的抑制作用。
林可霉素的作用机制是通过与核糖体50S亚基23S rRNA的中心环相结合而抑制蛋白质生物合成过程中的转移定位，因此通过影响蛋白质的合成抑制细菌生长。
抗生素抗菌物质的含量称效价。
抗生素效价测定有化学法或生物法。
生物法就是将抗生素溶液，在含有敏感试验菌的琼脂培养基上进行扩散渗透，经过一定时间后，抗
生素扩散到适当的范围，产生透明的抑菌圈。
抑菌圈的直径与抗生素总量、抗生素的扩散系数、扩散时间、培养基的厚度和
最低抑菌浓度等因素有关。
抗生素总量的对数和抑菌圈直径的平方呈直线关系。
因此，抗生素效价可以由抑菌圈的大小来衡量.
将已知效价的林可霉素标准液先制成标准曲线，比较已知效价标准液与未知效价的被检品溶液的抑菌圈的大小，算出样品中林可霉素的效价。
菌种：林可链霉菌（林可霉素产生菌）
藤黄八叠球菌（林可霉素指示菌）
培养基：种子培养基TSBY（30ml）、发酵培养基YMG （30ml）、指示菌培养皿YMG 器皿：三角瓶、容量瓶、恒温摇床、离心机、恒温培养箱、灭菌锅等
主要试剂：5 mol/L NaOH等
1. 发酵前工作：
培养基、试剂的配制；包培养皿、枪头等。
灭菌工作。
2. 发酵培养
(1) 将菌种接至固体培养基，30℃培养7天放冰箱0℃-8℃保存备用
(2) 从固体培养基上挖1cm×1cm正方块，接入装有已灭菌发酵培养的摇瓶内，放入摇床（30℃，220r/min）摇瓶2天观察菌丝形态，测菌丝浓度和培养液pH
(3) 接摇瓶菌丝体3ml于已灭菌的带有30ml发酵培养基的250ml摇瓶中，发酵5-6天，在发酵过程中定时测菌丝浓度，观察菌丝形态
3. 生物效价的测定
(1) 藤黄八叠球菌液的制备
取每周接种一次，用普通琼脂斜面保存的藤黄八叠球菌，在实验前一日，将细菌接种
于盛有种子培养基的试管斜面上，于28℃培养24小时后，用无菌水5ml将菌洗下
(2) 标准曲线的绘制
取2 ml EP管5只编号，并向各瓶分别加入不同量的100 μg/ml的标准品溶液，用水
稀释至刻度，使成每ml含林可霉素2、12、22、32、42 μg 5种浓度的标准品稀释液。