M蛋白检测-血清蛋白电泳及免疫固定电泳
免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用
免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用
陈慧丹;王友基
【期刊名称】《实验与检验医学》
【年(卷),期】2013(000)006
【摘要】目的：探讨免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用。
方法对48例M 蛋白血症患者进行琼脂糖凝胶免疫固定电泳(IFE)和免疫球蛋白定量检测。
结果在48例患者中有47例IFE检出M蛋白，M蛋白分型为IgGκ型14例,IgGλ型10例,IgAκ型3例,IgAλ型5例, IgMκ型3例,IgMλ型2例,单纯κ型1例，单纯λ型9例；免疫球蛋白定量仅有33例异常。
结论 IFE法灵敏度高，对MM的诊断和分型有重要意义。
【总页数】2页(P592-593)
【作者】陈慧丹;王友基
【作者单位】福建省立医院检验科，福建医科大学省立临床学院，福建福州350001;福建省立医院检验科，福建医科大学省立临床学院，福建福州 350001【正文语种】中文
【中图分类】R551.3;R733.3;R446.11+2
【相关文献】
1.免疫固定电泳技术在M蛋白免疫分型中的应用 [J], 刘金英;翟玉华;孙卫红
2.免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白中的应用 [J], 陈慧丹;陈发林;林凤娇
3.免疫固定电泳检查在M蛋白分型鉴定中的应用 [J], 崔凡
4.免疫固定电泳在血清M蛋白鉴定中的应用 [J], 甘勇;汪玄;高学慧;叶阿里1
5.免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白上的应用 [J], 周晖;王丁
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免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白中的应用
【 摘 要 】
目的 探 讨 免疫 固定 电 泳技 术在 鉴 定 多 发 性 骨 髓 瘤 单 克 隆 免 疫 球 蛋 白 （ 蛋 白） 中 的 应 用 。 方 法 Ｍ
采 用 琼 脂 糖 凝 胶 免 疫 固 定 电泳 技 术 （Ｆ ） 检 测 ４ ＩＥ Ｏ份 血 清 ，其 中 １ ９例 为 多 发 性 骨 髓 瘤 （ ＭＭ） 患 者 。 结 果 在 ｌ ９ 例 Ｍ Ｍ 患者 中 ，有 １ ７例 检 出 Ｍ 蛋 白，Ｍ 蛋 白分 型 为 ＩＧＫ型 ８例 ，ＩＧＸ型 ３例 ，ＩＡＫ型 ３例 ，ＩＡＸ型 １例 ，单 ｇ ｇ ｇ ｇ 纯 型 ２例 ；未 检 出 Ｍ 带 ２例 ；２ １例 其 他 疾 病 患 者 ，其 中有 １ ２例检 出 Ｍ 蛋 白，其 分 型 为 ＩＧ ｇ ｇ型 ２例 ，ＩＧ ｇ Ｘ型 ３ 例 ，ＩＡＫ型 １ ，ＩＡＸ型 １例 ，ＩＭＫ型 １例 ，ＩＭＸ型 １例 ，单 纯 型 ２例 ，双 克 隆 型 １例 ； 未 检 出 Ｍ 带 ９例 。 ｇ 例 ｇ ｇ ｇ 结 论 Ｉ Ｅ 法灵 敏 度 高 、 干扰 少 、 沉淀 带 易 识 别 、 快速 ， 试 验 完 成 后 的 胶 片 可 扫 描 定 量 及 长 期 保 存 。 Ｆ 【 键 词 】 免 疫 固定 电 泳 ； 多发 性 骨髓 ；Ｍ 蛋 白 关 【 图 分 类 号 １ Ｒ ３． ［ｔ献 标 识 码】 Ｂ 【 章 编 号 】 １ ０—６ ０ ２ ０ ） ５０ ８ —２ 中 ７３３ ３ 文 ０ ２２ ０ （０ ８０ －０ ６０
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福 建 医药 杂 志 ２ ０ ０ ８年 １ ０月第 ３ Ｏ卷 第 ５期
Ｆ ｊ ｎＭｅ ， ｔｂ ｒ ０ ８ Ｖｏ ０ Ｎｏ ５ ｕｉ ｄＪＯｃｏ ｅ ０ ， ｌ ， ． ａ ２ ３
６ 郑 洪 ，梁 雪 冰 ． ＵＦ １０尿 沉 渣 分 析 仪 与 干 化 学 法 检 测 红 细 胞 的 －０
免疫固定电泳与交又免疫电泳
免疫固定电泳与交又免疫电泳免疫固定电泳(immuno fixationel ectrophoresis，IFE)是Alper和Johnson于1969年推荐的一项具有实用价值的电泳加沉淀反应技术，可用于各种蛋白质的鉴定。
该方法原理是先将待检样品在凝胶板上作区带电泳，将蛋白质分离成不同区带，然后在其上覆盖抗血清!当抗血清与某区带中的单克隆免疫球蛋白结合，便形成抗原抗体复合物而沉淀。
最后通过漂洗和染色，并与蛋白质参考泳道对照分析，可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。
免疫固定电泳图左图为IgGκ型；右图为IgGλ型免疫固定电泳最常用于M蛋白的鉴定。
方法是：①先将患者血清或血浆在醋酸纤维膜或琼脂上作区带电泳(6孔)，根据血清蛋白质的电荷不同将其分开；②将IgG、IgA、IgM、κ轻链和λ轻链的抗血清加于分离的蛋白质泳道上，参考泳道加抗正常人全血清用于区带对照；③作用30min后，洗去游离蛋白质，待干燥后用氨基黑染色；④结果判新，M蛋白被固定，形成窄而致密的沉淀带。
本法可用于鉴定迁移率近似的蛋白和M蛋白，免疫球蛋白轻链，尿液、脑脊液等微量蛋白，游离轻链，补体裂解产物等。
免疫固定电泳最大的优势是分辨率强，敏感度高，操作周期短，仅需数小时，结果易于分析，目前已作为常规检测。
交叉免疫电泳(crossed immuunoelectrophoresis，CIEP)是将区带电泳和火箭免疫电泳相结合的免疫电泳分析技术。
CIEP是一种有效的抗原蛋白定量技术，可一次同时对多种抗原定量。
分辨率较高，有利于各种蛋白组分的比较，对于蛋白质遗传多态性、微小异质性、蛋白质裂解产物和不正常片段等进行定性分析。
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血清免疫固定电泳临床意义
血清免疫固定电泳临床意义
血清免疫固定电泳是一种能够区分蛋白类型的技术手段，主要是通过分离血清蛋白的各种成分，从而达到辨别其类型的目的。
血清免疫固定电泳技术是将血清、血浆等在凝胶或薄膜处，使血液中的抗原与相应抗体发生沉淀反应，形成免疫复合物，对其进行染色并观测结果的技术，主要可用于分析抗体成分、分析蛋白成分两方面。
1、分析抗体成分：血清免疫固定电泳可用于抗原或抗体成分、纯度的分析，常用于免疫反应后不同抗体组分的动态变化研究，了解红斑狼疮、类风湿关节炎等免疫疾病的进展；
2、分析蛋白成分：还可用于正常或异常体液蛋白的分析、检测和鉴定，可辅助诊断无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症等，还可用于多发性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等患者的血清蛋白成分的分析，帮助鉴别疾病，了解疾病发展，对于多发性骨髓瘤患者血清M蛋白的检测和鉴定、多发性骨髓瘤疾病诊断有重要意义。
6.2血清蛋白质电泳
结合珠蛋白 α2-巨球蛋白
铜蓝蛋白 转铁蛋白 低密度脂蛋白
C3
C4 β2-微球蛋白 纤维蛋白原
IgG
IgA
IgM C-反应蛋白
成人参考值（g/ L） 35~52 0.9~2.0 0.5~1.2 3×10－5 1.7~3.25 0.3~2.0 1.3~3.0 0.2~0.6 2.0~3.6 0.6~1.55 0.9~1.8 0.1~0.4
多发性骨髓瘤
出现深染的M蛋白 窄区带，多见于γ、 β区，偶见于α区
Alb α1 α2 β1 β2 γ
2. 血清蛋白电泳典型异常图谱
肝硬化
Alb下降，γ明显 升高，β和γ区带 融合呈β-γ桥
Alb α1 α2 β γ
2. 血清蛋白电泳典型异常图谱
肾病综合征
Alb明显低下（尿 中选择性漏出）， α2-球蛋白显著升 高，β-球蛋白升高
0.001~0.002 2.0~4.0 7.0~16 0.7~4.0 0.4~2.3 ＜0.005
分子量（kD） 66.2 52 40 69 200
85~400 720 132 79.6 300 185 206 11.8 340
144~150 ~160 970 ~115
等电点 4.7~4.9
4.8 2.7~3.5
4.1 5.4 4.4 5.7
5.5 6~7.3
6.2
三、SPE有哪些临床应用
血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱
1. 血清蛋白电泳异常图谱分型
图谱类型 低蛋白血症型 肾病型 肝硬化型 弥漫性肝损害型 慢性炎症型 急性时相反应型 M蛋白血症型 高α2(β)-球蛋白血症型 妊娠型 蛋白质缺陷型
二、正常SPE图谱有何特征
多发性骨髓瘤免疫球蛋白M蛋白测定的结果分析
多发性骨髓瘤免疫球蛋白M蛋白测定的结果分析蔡惠兴;苏荣;黄慧萍;钟敏仙;陈胜男;谢湘媚;卓雪芽【期刊名称】《现代医药卫生》【年(卷),期】2014(30)10【摘要】目的：对63例多发性骨髓瘤（MM）患者的血清免疫固定电泳及血清免疫球蛋白M蛋白的测定结果进行回顾性分析，探讨M蛋白检测在MM诊断中的应用。
方法对63例[年龄大于或等于50岁居多（55例），50岁以下较少（8例），男性略多于女性（41∶22）]确诊为MM的患者进行免疫固定电泳、血清蛋白电泳和免疫球蛋白定量测定，并对结果进行分析比较。
结果 IgG类患者所占比例最高（68.3%，43/63），游离轻链型MM最低（9.5%，6/63）；无论是κ型还是λ型M蛋白，κ/λ值均显著异常。
各种免疫学指标检测M蛋白阳性率，血清κ/λ最高（84.1%，53/63），血清免疫球蛋白定量最低（39.7%，25/63）。
结论血清免疫球蛋白M蛋白分类及分型可为临床MM的诊断和治疗提供重要依据。
%Objective To retrospectively analyze the detection results of serum immunofixation electrophoresis (IFE) and serum immunoglobulin M of 63 patients with multiple myeloma (MM),and investigate the application of M protein in the diag-nosis of MM. Methods A total of 63 patients diagnosed with MM ,including 50 cases with the age of 55 years or older and 8 cas-es with the age less than 50 years and the proportion of male to female was 41∶22,were selected to conduct IFE,serum protein electrophoresis and quantitative determination of immunoglobulin. The results were analyzed and compared. Results The pa-tients with IgG had the highest proportionaccounting for 68.3%(43/63),and the free light chain MM was the lowest accounting for 9.5%(6/63). Whateverκ-type M protein orλ-type M protein,the ratio ofκ/λwas significantly abnormal. The positive rate of M protein was highest by serumκ/λaccounting for 84.1%(53/63),while lowest by serum immunoglobulin quantitative minimum ac-counting for39.7%(25/63). Conclusion Classifications and types of M protein provide valuable basis for the diagnosis and treatment of MM clinically.【总页数】3页(P1441-1442,1445)【作者】蔡惠兴;苏荣;黄慧萍;钟敏仙;陈胜男;谢湘媚;卓雪芽【作者单位】佛山市中医院检验科，广东佛山528000;佛山市中医院检验科，广东佛山528000;佛山市中医院检验科，广东佛山528000;佛山市中医院检验科，广东佛山528000;佛山市中医院检验科，广东佛山528000;佛山市中医院检验科，广东佛山528000;佛山市中医院检验科，广东佛山528000【正文语种】中文【相关文献】1.兰州地区多发性骨髓瘤患者M蛋白免疫固定电泳结果分析 [J], 周爱花;韩平治;常若云2.速率散射比浊法测定血清免疫球蛋白和轻链在M蛋白病中的诊断意义 [J], 谢华斌;李云莲3.速率散射比浊法测定血清免疫球蛋白和轻链在诊断M蛋白病中的应用 [J], 陈永亮;谢华斌;李云莲4.多发性骨髓瘤免疫球蛋白及生化相关指标检测结果分析 [J], 杨霞芳;许晓红;朱心智;谭春艳5.速率散射法测定M蛋白病免疫球蛋白及轻链结果分析 [J], 肖淑辉;李公祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
探讨免疫固定电泳（IFE）和免疫球蛋白对多发性骨髓瘤（MM）的诊断意义
探讨免疫固定电泳（IFE）和免疫球蛋白对多发性骨髓瘤（MM）的诊断意义发布时间：2021-01-18T08:30:42.260Z 来源：《医药前沿》2020年28期作者：沈奕[导读] IFE、免疫球蛋白定量检查帮助检查人员分辨患者体内的病变情况，保障临床诊断正确率，增加MM诊断支持数据，现报告如下。
（常州市第一人民医院江苏常州 213100）【摘要】目的：探讨免疫固定电泳(IFE)和免疫球蛋白对多发性骨髓瘤(MM)的诊断意义。
方法：选用2018年2月—2019年3月在我院体检中心的健康成年人60例为参照组，在我院确诊的60例多发性骨髓瘤患者为观察组，两组均进行免疫固定电泳、免疫球蛋白定量检查，对测定结果开展比较。
结果：检测后，参照组比观察组的测定结果好，但观察组的检测结果正确率明显变高（主要数据比值包括：IgG型t=37.318，P=0.000，IgA型t=53.916，P=0.000，轻链型t=44.649，P=0.000；检测结果χ2=8.571，P=0.003），有统计学意义（P＜0.05）。
结论：在临床诊断中使用IFE和免疫球蛋白为患者进行检测能提高多发性骨髓瘤检测准确性，在临床诊断中的具有较实用的意义，可以用于多发性骨髓瘤的初筛，提高临床的诊断效果。
【关键词】骨髓瘤；IFE；免疫；细胞；血清；蛋白【中图分类号】R733.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2020）28-0125-02多发性骨髓瘤对血液系统造成干扰和损伤，降低骨髓造血功能，使患者反复发热、感染，影响脏器运转。
多发性骨髓瘤若在肌体中扩散会影响肌体免疫力，对患者身心进行消耗，血压、心率等波动明显，全身功能紊乱，行动、认知变差等。
免疫固定电泳、免疫球蛋白定量检测对M蛋白等鉴别能力强，临床能通过免疫球蛋白G等指标判断患者病情，加快临床诊断速度。
IFE、免疫球蛋白定量检查帮助检查人员分辨患者体内的病变情况，保障临床诊断正确率，增加MM诊断支持数据，现报告如下。
免疫固定电泳分型技术在M蛋白相关疾病诊断中的应用
免疫固定电泳分型技术在M蛋白相关疾病诊断中的应用
杨辛;林洁;吴颖稚;张庆五
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2015(000)021
【摘要】目的：探讨免疫固定分型技术在M蛋白相关疾病诊断中的应用价值。
方法采用免疫球蛋白定量、血清及尿蛋白电泳、血清及尿本周蛋白免疫固定电泳及其他试验，对2例患者标本进行检测和确认。
结果结合实验室检测及患者临床体征，1例患者确诊为血清单克隆Ig A‐κ轻链型多发性骨髓，1例患者确诊为血清Ig M‐λ型巨球蛋白血症。
结论随着电泳技术发展，免疫固定电泳分型技术在M蛋白鉴
定中具有较高的特异性和敏感性，应加强其临床应用。
【总页数】3页(P3128-3130)
【作者】杨辛;林洁;吴颖稚;张庆五
【作者单位】上海市杨浦区控江医院检验科，上海200093;上海市杨浦区控江医
院检验科，上海200093;上海市杨浦区控江医院检验科，上海200093;上海市杨
浦区控江医院检验科，上海200093
【正文语种】中文
【相关文献】
1.免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用 [J], 陈慧丹;王友基
2.免疫固定电泳快速检测法在浆细胞疾病诊断与分型中的应用 [J], 卢振华
3.免疫固定电泳技术在M蛋白免疫分型中的应用 [J], 刘金英;翟玉华;孙卫红
4.免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白中的应用 [J], 陈慧丹;陈发林;林
凤娇
5.免疫固定电泳检查在M蛋白分型鉴定中的应用 [J], 崔凡
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
107例多发性骨髓瘤M蛋白检测与免疫学分型分析
１ １ ２ 试剂 与仪器 ： 清蛋 白电泳 、 ．． 血 免疫 固定 电泳
和 尿液 本周 氏蛋 白电泳 均采 用法 国 Ｓ ｂａ公 司 Ｓ — ｅｉ ｅ
ｂａＨｙ ｒｓｓ半 自动 电泳 仪 检 测 ， 用 试 剂 、 ｉ ｄ ａｙ 所 抗体 均为原 装配套 试 剂 。
１ ２ 方 法 ．
１３ ３
ＩＭ 及 抗 ．和抗 血清 ， ｇ ｃ 使其 分 别 直接 覆盖 于六 条 ２ ２ 免 疫 固定 电泳 结果 ． 蛋 白区带上 。 ０ ２ ￣ 育 ５ｍｉ 。 Ｃ孵 ｎ 干燥 ： 厚 滤纸 吸去 ２ ２ １ 正常 人血 清免 疫 固定 电泳后 Ｂ或 ７区 沉 淀 用 ．． 多余 的抗血 清 ， 分别 于 ４ ℃干燥 ３ｍｉ ，６ Ｏ ｎ ５ ℃干燥 ６ 带 多为 浅染 ， 弥 散分 布 （ 图 １ 。如果 在 同一 水 呈 见 ）
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂ ｅ ｔｖ Ｔｏｓｕ ｙｔ ｅａ ｐ ｉａｉｎ ｏ ｍｍｕ ｏ ｉａｉｎ ｅｅ ｔ０ ｈ ｒ ｓｓ（ＦＥ）ｉ ｙ ｉｇ Ｍ ｒｔ ｉｓ Ｍｅｈ ｄ ｓｒ ｃ ： ｊ ｃｉｅ ｔ ｄ ｈ ｐ ｌ ｔｏ ｆｉ ｃ ｎ ｆ ｔ １ｃｒ ｐ ｏ ｅ ｉ Ｉ ｘ ｏ ｎ ｔ ｐｎ ｐ ｏｅｎ ． ｔｏ ｓ
ｔｉ ｅｎ
多 发性 骨髓 瘤 （ ｌｐｅｍｙ ｌｍａ ＭＭ） 恶 ｍｕｔ ｌ ｉ ｅｏ ， 是
国 际骨 髓瘤 工作 组 ２ ０ 年 ＭＭ 的诊 断标 准［ 。 ０３ ２ 静 ］ 脉 采取 全 血 ， 分离 后 血 清标 本 置 一２ ℃冰箱 待 用 。 Ｏ 尿 液 留取 新鲜晨 尿送 检 ， 分装后 一２ ℃冰 箱保 存待 Ｏ
ｍｉ 。染 色 和 脱 色 ： 烘 干 的胶 片置 于 染色 缸 内选 ｎ 将 平 位置 上 ， 白电泳条 带 ， Ａ， 重链 和 ． 入 链 蛋 Ｇ， Ｍ ｃ 轻 ，
电泳技术及临床应用
操作步骤-挂缓冲条和电泳胶片
操作步骤-点样
操作步骤-选择电泳类型
操作步骤-烘干染色
操作步骤-扫描
电泳结果
2.血清蛋白电泳看的是什么？
含量的变化 : 条带中蛋白含量增或减
基于蛋白含量的变化, 有助于我们对以下疾病的筛 查 :炎症 、营养不良、肺气肿等
性质的变化 :异常条带的出现
对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病:骨髓 瘤、巨球蛋白血症、细菌和病毒感染等
铜蓝蛋白（CER）是一种含铜的α2糖蛋白，分子量12～16万，等电 点4.4，半寿期4.5天，CER也属于一种急性时相反应蛋白。在感染、 创伤和肿瘤时血浆CER增加，在营养不良、严重肝病及肾病综合症时 CER往往下降。妊娠期、口服避孕药时其含量有明显增加。该蛋白最 特殊作用在于协助Wilson病的诊断，既患者血浆CER含量明显下降， 而拌有血浆可透析的铜含量增加。
小儿类脂样肾病时，γ-球蛋白可降低，有时可降低至零； 成人肾病综合症时，γ-球蛋白通常增加，特别是狼疮性肾病。
异常血清蛋白电泳-弥漫性肝损伤型
主要特征： Alb明显降低, α1-球蛋白在轻度时可略增加，但肝细胞破 坏严重时，则α1、α2和β球蛋白通常均降低，在胆汁郁积性肝炎时， α2和β球蛋白可增高，γ-球蛋白轻度或中度增高。
异常血清蛋白电泳-肝硬化型
主要特征： Alb均有不同程度的降低，α1、α2和β球蛋白正 常或降低，γ-G明显增高且宽度增加，可见β-γ桥。
异常血清蛋白电泳-原发性肝癌
主要特征： 在Alb与α1球蛋白之间 出现一小的 区带，称为 甲胎蛋白带。
本项目试验 精确地的限 制这个AFP 区带很难分 清，需要用 高分辨染色
1969 年 Alper 和 Johnson 相继报道了 IFE 在铜蓝蛋 白、 IgG 基因的多态性检 测和 C3 激活后分子转变 中的应用，随后他们又发 表了 IFE 在补体组份基因 多态性和抗胰蛋白酶表现 型鉴别中的研究。
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M蛋白检测-血清蛋白电泳及免疫固定电泳
血清蛋白电泳可以根据血清中所有蛋白质的电荷性质和分子量的不同进行分离的技术，目前临床上的主要应用是筛查Ｍ蛋白（单克隆免疫球蛋白），正常血清的图谱如下：
M蛋白是浆细胞异常增殖产生的一种单克隆的异常的免疫球蛋白，由于其电荷性质和分子量都是完全一样，因此在血清蛋白电泳图谱的位置是同一个，导致在正常图谱中有一个异常的蛋白峰，如下图：
这种异常的M蛋白多出现在图谱的γ区，也可出现在α2区和β1 和β2，有时可出现在区与区之间的连接处！
一旦出现M蛋白，提示受试者血清中有异常的单克隆免疫球蛋白，即浆细胞出现了异常的增殖（可以是良性的，更多的是恶性），进一步需要免疫固定电泳进行M蛋白的类型鉴定（免疫球蛋白的类型），如下图：
血清蛋白电泳的检测方法有琼脂糖电泳和毛细管电泳，这两个方法学的差异是毛细管电泳的敏感性略高于琼脂糖电泳，且完全实现了自动化检测，避免了手工操作和蛋白染脱色的程序；
免疫固定电泳的检查方法亦包括琼脂糖电泳和毛细管电泳，两者的敏感性相似，琼脂糖电泳的历史比较悠久，多是指南推荐的检测方法，但毛细管电泳的免疫固定电泳对于高免疫球蛋白血症背景下的M 蛋白的类型检测更有优势。