地中海贫血

案例一

12周孕期

11-14周 1.血压和体重 1.妇检 2.白带常规+BV 1.产科彩超（小四维查胎儿NT 值）

2.产科医生问诊

2.心电图

3.孕期保健知识

3.多普勒听胎心

4.孕期咨询

4.孕早中期保健讲座

5.优生营养指导

轻度贫血

可无或有容易疲倦与头昏；中度贫血，活动或劳动后出现面色苍白、眼花、心慌和气促；重度贫血，即使在休息或卧床时也有明显的症状。其最常见的原因是缺铁性贫血，缺铁导致小细胞性贫血。

严重贫血

贫血的严重程度分类：

血红蛋白浓度 <30g/L 30～>59g/L 60～>90g/L >90g/L

贫血严重程度 极重度 重度 中度 轻度

分级 血红蛋白（g/L ） 临床表现

轻度 120～91(12～9.1g/dl) 症状轻微

中度 90～61(9～6.1g/dl) 体力劳动后感到心慌、气短

重度 60～31(6～3.1g/dl) 卧床休息时也感心慌、气短

极度 <30(3.0以下g/dl) 常合并贫血性心脏病

体格检查

指对人体形态结构和机能发展水平进行检测和计量。其内容包括：（1）运动史和疾病史；（2）形态指标测量；（3）生理机能测试；（4）身体成分测定；（5）特殊检查（化验、x 光、心电、脑电、肌电、超声心动、肌肉针刺活检等）。

超声波检查

利用超声产生的波在人体内传播时，通过示波屏显示体内各种器官和组织对超声的反射和减弱规律来诊断疾病的一种方法。超声波具有良好的方向性，当在人体内传播过程中，遇到密度不同的组织和器官，即有反射、折射和吸收等现象产生。根据示波屏上显示的回波的距离、弱强和多少，以及衰减是否明显，可以显示体内某些脏器的活动功能，并能确切地鉴别出组织器官是否含有液体或气体，或为实质性组织。 一位25岁的广西籍孕妇在其12周孕期时到医院妇产科进行首次产前检查，这是她的首次怀孕，她非常关注她怀的小孩患家族其他成员出现的一种遗传性血液病的风险。孕妇主诉轻度贫血史，但是没有向她哥哥那样严重，其哥哥患有严重的贫血，需要经常输血，10岁去世。该孕妇以往被诊断为贫血，但没有任何贫血的症状。体格检查符合12周妊娠，超声波检查确诊为12周宫内妊娠，血液检查显示为小细胞低色素贫血（血红蛋白（HB ）浓度为90g/L ）,血红蛋白电泳分析显示血红蛋白A2（HbA2）含量增高（4.0%），胎儿血红蛋白量也增高，符合轻型β-地中海的表现。为了检查胎儿是否患有地中海贫血，孕妇进行了绒毛膜穿刺检查，几个小时后得到诊断结果。

诊断：β-地中海贫血 CD41-42(-CTTT)缺失突变

小细胞低色素贫血

在缺铁性贫血的早期，多为正常细胞性贫血，表现为轻度贫血；随着进展，红细胞和血红蛋白进一步下降，出现明显的小细胞低色素性贫血，呈典型的缺铁性贫血。所以出现典型小细胞低色素贫血，可见于缺铁性贫血的晚期。

血红蛋白

血红蛋白由四条链组成，两条α链和两条β链，每一条链有一个包含一个铁原子的环状血红素。氧气结合在铁原子上，被血液运输。

有多种类型：血红蛋白A(HbA)，α2β2，占成人血红蛋白的98%；血红蛋白A2(HbA2)，α2δ2，占成人血红蛋白的2%；血红蛋白F(HbF)，α2γ2，仅存在于胎儿血中；血红蛋白H(HbH)，β4，四个相同β链组成的四聚体血红蛋白；血红蛋白C(HbC)，β链中Lys被Glu取代的血红蛋白；血红蛋白S(HbS)，镰刀状细胞红蛋白；血红蛋白O2(HbO2，HHbO2)，氧合血红蛋白；血红蛋白CO(HbCO)，一氧化碳结合血红蛋白。在没有氧存在的情况下，四个亚基之间相互作用的力很强。

血红蛋白电泳

正常范围

血红蛋白A 95％

血红蛋白A2 1.6％～3.5％

血红蛋白F 0.2％～2.0％

检查介绍各种血红蛋白的等电点不同的特点，在一定pH缓冲液中所带的正、负电荷不同，经电泳后各血红蛋白的移动方向不同。

临床意义该试验是为了确诊是否有异常血红蛋白存在，以及各种血红蛋白的比例。

(1)HbA2增高是轻型β—海洋性贫血最重要的诊断依据；

(2)HbS病、β链异常的不稳定Hb病及某些巨幼细胞性贫血患者HbA2也可增高；

(3)缺铁性贫血时，HbA2常降低，可与轻型β—海洋性贫血鉴别；

(4)正常人Hb电泳后，一般只见两条区带(HbA和HbA2)，若出现新的区带，则可能为异常Hb，应进一步检查。

轻型b-地中海表现

轻型地贫是β0或β+地贫的杂合子状态，β链的合成仅轻度减少，故其病理生理改变极轻微。中间型β地贫是一些β+地贫的双重杂合子和某些地贫的变异型的纯合子，或两种不同变异型珠蛋白生成障碍性贫血的双重杂合子状态，其病理生理改变介于重型和轻型之间

绒毛穿刺检查（绒毛膜取样术）

它是用一根很细的针穿刺到胎盘的组织中去，取适量的绒毛组织出来，可进行一些细胞或遗传方面的检查。

绒毛膜取样术-适用人群

适用于高危险群通常进行绒毛膜取样者是经第一孕期筛检后为高危险群者，意即后颈部透明带太厚或超音波即发现胎儿结构异常者，或高龄产妇担心胎儿可能异常、前次怀孕有过染色体异常者，亦或是夫妻两人有一人有染色体异常者。萧庆华医师表示，若是绒毛膜

取样术早于怀孕10周前实施，会有些许胎儿肢体异常现象，为了避免此风险，会在11周后才实施绒毛膜取样术。但若绒毛膜取样结果为正常，也不百分百代表会生出健康的胎儿，因人类肢体先天的缺陷占了约2～3%，这部分则不在绒毛膜取样术的检验之内。

绒毛取样术通常在妊娠10～12周进行，用于诊断胎儿的某些疾病。除了某些特殊的情况需要进行羊水检查（如羊水甲胎蛋白测定）外，绒毛取样几乎可以代替羊膜囊穿刺。取样前应做超声扫描，确定胎儿是否存活、胎龄和胎盘位置。绒毛取样的主要优点是比羊膜囊穿刺更早得到诊断结果。如果有异常，能采取更简单、安全的方法终止妊娠。如果没有异常，也能及早消除父母的忧虑。早期诊断某些胎儿疾病，便于在出生前及早治疗。如给孕妇用皮质类固醇药物，预防先天性肾上腺皮质增生症的女胎男性化。肾上腺皮质增生症是一种遗传疾病，肾上腺皮质过度增生，产生大量的雄激素。如果Rh阴性孕妇，已经被Rh阳性胎血致敏，不宜采用绒毛取样，因为可能使过敏加重，若必须产前诊断，可用羊膜囊穿刺代替。

绒毛膜取样术-基本资料

绒毛膜取样术名词解释：绒毛膜取样术就是用一根很细的针穿刺到胎盘的组织中去，取适量的绒毛组织出来，可进行一些细胞或遗传方面的检查。检查时机：怀孕10～12周

检查目的：可进行细胞遗传诊断，基因分析及先天生化代谢疾病分析

（1）染色体分析：有直接法和培养法。

（2）基因分析：可诊断单基因遗传疾病，如海洋性贫血症等。

（3）生化分析：有直接法和培养法；以羊水来检查代谢疾病。

检查方法：抽取胎盘位置的绒毛，取20～40毫克的绒毛量。共有4种方法：

(1)经子宫颈法；(2) 经腹部法；(3) 经阴道法；(4) 经膀胱法。

最早也最常使用的是经子宫颈法。

检查风险：导致胎儿流产率约2%。曾发现进行绒毛取样后胎儿四肢缺陷的病例，但至今未证实；是争议性较大的一项检查。不过，妊娠早期即可进行取样，最快可于数小时内得知结果，万一发现胎儿有异常，妊娠早期的子宫扩刮术比妊娠中期的引产术要安全、经济。

检查报告：数小时后即可得知

检查结果：可得知胎儿有无异常。

异常：下一步如果发现胎儿有严重异常，建议中止妊娠。

问题1：

地中海贫血（简称地贫）常见于地中海地区，指海的贫血，它不是一种简单的病症，而是一种遗传性溶血性贫血；此病遍布世界各地，以地中海地区、中非洲、亚洲、南太平洋地区发病较多。在我国以广东、广西、贵州、四川为多。地中海贫血基因携带者或轻型地中海贫血患者平常是没有明显症状的，若夫妻为同型地中海型贫血的带因者，每次怀孕，其子女有1/4的机会为正常，1/2的机会为带因者，另1/4的机会为重型地中海型贫血患者。

由于珠蛋白基因缺陷或点突变，使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成，导致血红蛋白组成成分发生改变，最重要的是患者一生都会受到贫血的影响。（材料）

问题2：

人体内的血红蛋白由四个亚基构成，分别为两个α亚基和两个β亚基，每个亚基结构中间有一个疏水局部，可结合一个血红素并携带一分子氧，因此一分子Hb共结合4分子氧。Hb亚基之间通过8对盐键，使四个亚基紧密结合而形成亲水的球状蛋白。血红蛋白由珠蛋白和血红素缔结而成。

合成特点分为血红素合成特点和珠蛋白合成特点。血红素合成特点；（1）合成的主要部位是骨髓和肝脏，但成熟红细胞不能合成；（2）合成的原料简单：琥珀酰CoA、甘氨酸、Fe2+等小分子物质；（3）合成过程的起始与最终过程在线粒体，中间过程在胞液。血红素合成后与珠蛋白结合成血红蛋白。珠蛋白合成的特点：（1）血红素合成后与珠蛋白结合成血红蛋白。（2）珠蛋白的合成同一般蛋白质的合成，其合成受血红素调控。（课本）

问题3：

人类b-珠蛋白基因基因结构：包括已确定的八个珠蛋白功能基因和三个珠蛋白假基因，还有一个近年发现的基因，它们在两条染色体上排列成簇。人类β珠蛋白基因簇位于11号染色体短臂1lp155，长约60kb，包含5个按其排列顺序依次表达的功能基因，分别为5′-ε-Gγ-Aγ-δ-β-3′。（《出自中国实验血液学杂志》）

问题4：

β- 珠蛋白基因有1700个碱基对，全长1605bp，其中有3个外显子，2个内含子，能够编码146个氨基酸。每个外显子DNA序列中的起始位置和终始位置是在A和T。存在于包含与被包含的关系，外显子可以编码蛋白质。对于真核生物，转录的RNA要经过剪切，去掉内含子，才能成为成熟的mRNA（即编码蛋白质序列）；对于原核生物，转录的RNA不需要剪切，转录的RNA就是编码蛋白质的序列。（《内科》）

问题5：

从70682到70818、从71040到71889。2个内含子序列的开始2个碱基和末尾两个碱基分别为G和G、G和G。（从材料）

问题6：

从起始密码子AUG开始。编码甲硫氨基酸。因为包含了起始密码子。（从材料）

问题7：

从mRNA5'-端的起始密码子AUG到3'-端终止密码子之间的核苷酸序列称为开放阅读框（open reading frame or ORF）。通常ORF包含500个以上的密码子。开始于AUG起始密码子，直到终止密码子（UAA、UAG、UGA）结束。开放阅读框[open reading frame，ORF] 是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。（课本）

问题8：

加尾信号与断裂位点之间的距离为19.

问题9：

转录起始点再甲硫核苷酸。CAAT框（CAAT box）：其一致顺序为GGCTCAATCT，是真核生物基因常有的调节区，位于转录起始点上游约-80bp处，可能也是RNA聚合酶的一个结合处，控制着转录起始的频率。CAAT盒是最早被人们描述的常见启动子元件之一，常位于接近-80的位置，但是它可以在离起始点较远的距离仍能起作用，且在两种取向均可发挥作用。CAAT盒的突变敏感性提示了它在决定转录效率上有很强的作用，但是突变对启动子的特异性没有影响。

TATA框（TATA box / Hogness box）是构成真核生物启动子的元件之一。其一致顺序为TA TAATAAT。它约在多数真核生物基因转录起始点上游约-30-50bp（-25~-32bp）处，基本上由A-T碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为RNA聚合酶的结合处之一，RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。诱变缺失后，引起转录位点改变，故其功能为保证转录的正确定位。在mRNA前体转录的起始过程中，需先由转录因子TF2和TATA框结合，形成稳定的复合物，然后由其他转录因子和RNA聚合酶按一定时空顺序与DNA结合形成转录起始复合物开始转录。（课本）

问题10：

分子基础：β珠蛋白基因簇在11号染色体短臂上，包含5个功能基因和1个假基因，功能基因结构中有3个编码序列（称为外显子）被2个插入序列（称为内含子）所分开，经过切除内含子拼接外显子，在5’端加上“帽”结构，3’端加上多聚腺苷酸、转录的mRNA 便形成为成熟的mRNA。

β珠蛋白生成障碍性贫血是由于位于11号染色体短臂的两个β珠蛋白基因或者与其相关的DNA序列发生点突变，在转录、RNA的加工及翻译过程中出现各种障碍，导致β珠蛋白合成不足或缺如。

5种突变为：CD71-72、CD41-42、CD17→0、IVS-Ⅱ-654C→T和-28A→G

影响：基因（Gene）是指携带有遗传信息的DNA序列，是控制性状的基本遗传单位。基因通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。基因有两个特点，一是能忠实地复制自己，以保持生物的基本特征；二是基因能够“突变”，突变大绝大多数会导致疾病，另外的一小部分是非致病突变。非致病突变给自然选择带来了原始材料，使生物可以在自然选择中被选择出最适合自然的个体.所谓遗传病，就是从父母亲那里接受到已发生突变的遗传物质(基因)而引起相应的疾病或缺陷。这种遗传因素(致病基因)，按一定的方式传给子代，子代就可能发生遗传病。《临床血液学》

问题11：

检测β-地中海贫血：1.寡苷酸探针杂交技术。2.反向点杂交。3.等位基因聚合酶链反应。4.限制性内切酶分析检测方法。

这些检测方法的生化基础分别是：碱基互补配对原则；限制性内切酶具有方向性；反向点杂交(reverse dot blot，RDB)技术检测点突变遵循ASO法的基本原理，即通过位于寡核苷酸探针中部的基因(或序列)特异性碱基与靶序列DNA 的碱基配对并在严格条件下洗膜来达到检测基因中少数碱基变化(少至单个碱基的目的。PCR诊断一地中海贫血：针对这些已知突变，设计一系列PCR引物。这些引物3’端的核苷酸与突变基因的突变碱基特异互补匹配，当基因序列中存在与引物3’互补的突变碱基时，可扩增出1条特异产物(否则，不会出现PCR扩增产物)，以此达到诊断目的；大概40种β-地中海贫血突变型能消消除一个限制性内切酶位点，这使得利用ＰＣＲ－限制性内切酶分析方法来鉴定β-地中海贫血。（来自《贫血》）

（1）寡核苷酸芯片的主要原理与cDNA芯片类似，主要通过碱基互补配对原则进行杂

交，来检测对应片段是否存在、存在量的多少。它与cDNA芯片的本质差别在于寡聚核苷酸芯片固定的探针为特定的DNA寡聚核苷酸片段（探针），而后者为cDNA。（2）原理：将一系列针对中国人18种β-地中海贫血(β-地贫)基因突变的ASO探銈固定在尼龙膜条上。用此膜条与用5′端生物素化引物扩增获得的β-珠蛋白基因片段杂交。再用酶标抗生物素蛋白及底物系统检出。用本法检测已知的18种中国人β-地贫突变样品,可准确识别这些突变的杂合子.纯合子和双重杂合子或正常DNA。（3）原理：根据SNP位点设计特异引物，其中一条链（特异链）的3'末端与SNP位点的碱基互补（或相同）。另一条链（普通连）按常规方法进行设计。因此AS-PCR技术是一种基于SNP的PCR技术。因为特异引物在一种基因型有扩增物，在另一种基因型中没有扩增物，用凝胶电泳就能够容易地分辨出扩增物的有无，从而确定基因型的SNP。（4）每种酶有其特定的核苷酸序列识别特异性，酶的活性需Mg 2来激活。不同的酶也有许多差别：有些酶除需Mg2 外，还需ATP等其他辅助因子的激活；切割位点和识别序列间的距离不同；有的内切酶同时具有甲基化作用。根据这些差别，可将限制性内切酶分为I、II和III种类型。II型限制性内切酶只需要二价镁离子的激活，酶在其识别序列内切割双链DNA，产生的各种DNA片段具有相同的末端结构，而且大多数的II型酶可提供粘性未端，有利于片段再连接，大部分II型酶所识别的序列具有反向对称的结构。

问题12：

β地中海贫血的诊断主要依赖实验室，检查方法主要有：①血常规检查②高效液相色谱技术(HPLC) ③基因诊断④探针斑点杂交技术（ASO）⑤反向点杂交方法（ＲＤＢ）⑥等位基因特异性扩增技术ＰＣＲ⑦DNA芯片技术⑧DNA序列测定法⑨荧光聚合酶链反应（出自《贫血》）

1）PCR-限制酶切法：用PCR方法扩增患者基因组中含突变位点的珠蛋白基因片段,再选适当的内切酶消化PCR产物,电泳后根据电泳图谱上片段数量和大小做出判断。

2）聚合酶链反应结合寡核苷酸探针杂交（PCR-ASO）：将β-珠蛋白基因的PCR扩增产物经碱变性后，固定于尼龙膜或硝酸纤维素膜上，与特异寡核苷酸探针（ASO）进行杂交。但该法一次检测只针对一种突变，所以费时费力，限制了该方法的应用。

3）基因芯片检测技术（PCR+反向点杂交）；将β-地贫突变区域的DNA片段进行PCR 扩增，然后将扩增产物与固定在片或尼龙膜上一系列探针进行杂交，激发荧光或显色后扫描杂交结果，可确定患者β-珠蛋白基因是否发生突变以及突变的具体类型。是目前公认的准确、可靠、快捷的β-地中海贫血基因诊断和产前诊断方法。

名词解释

贫血(Anemia)：是指一定体积的血液内血红蛋白浓度的降低火红细胞计数的减少，可伴有血氧运输障碍。（到目前为止，贫血最常见的原因是缺铁，缺铁导致小细胞性贫血。其他常见的小细胞性贫血的原因是地中海贫血（地贫）。某些种族如地中海或东亚血统的人群的发病率较高）

地中海贫血（thalassemia）：是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致。组成珠蛋白的肽链有4种，即α；β、γ、δ、链，分别由其相应的基因编码，这些基因的缺失或点突变可造成各种肽链的合成障碍，致使血红蛋白的组分改变。如果α有缺陷，称为α型地中海贫血；如果β有缺陷，称为β型地中海贫血，其中β链的生成完全抑制β0地贫，β链的生成部分受抑制则为β+ 地贫。（β+ 地贫有以下几种亚类型：HbF 或HbA2 增高型；正常HbA2 型，静止型或良性型，这三类都属于显性遗传，第四类β+ 地贫β基因无关）

断裂基因（Split gene）：真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再链接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。

密码子（codon）：在mRNA的开放阅读框架区，以每3个相邻的核苷酸为一组，代表一种氨基酸或肽链合成的其他信息，这种三联体形式的核苷酸序列称为密码子。共有64个密码子，密码子的阅读方向是5' 3'。

反密码子（anticodon）：RNA链经过折叠，看上去像三叶草的叶形，其一端是携带氨基酸的部位，另一端有3个碱基。每个tRNA(transfer RNA)的这3个碱基可以与mRNA上的密码子互补配对，因而叫反密码子。

密码子的简并性（degeneracy）：遗传密码表中显示，每个密码子仅编码一种氨基酸，但除甲硫氨酸和色氨酸只对1个密码子外，其他氨基酸都有2、3、4或6个密码子为之密码。为同一种氨基酸编码的各密码子称为简并性密码子，也称同义密码子，（如苯丙氨酸UUU、UUC两个同义密码子）

（遗传密码的简并性：一种氨基酸可具有两个或两个以上的密码子为其编码）密码子的连续性（commaless）：mRNA序列上的各个密码子及密码子的各碱基是连续排列的，密码子及密码子的各碱基之间没有间隔，即有无标点性。翻译时从起始密码子AUG开始向3’-端连续读码，每次读码时每个碱基只读一次，不重叠阅读。

密码子的摇摆性（wobble）：tRNA序列中的反密码子能与mRNA序列中相应的密码子配对结合。反密码子与密码子配对时，遵循反向互补的原则。从5’-端向3’-端计数时，密码子的第1位碱基与反密码子的第3位碱基之间、两者中间的碱基之间以及密码子的第3位碱基与反密码子的第1位碱基之间互补配对。但反密码子与密码子之间的配对并不严格遵守常见的碱基配对规律，称为摆动配对。

阅读框架（Reading frame）：是指RNA或DNA中，一组连续且不重复的3核苷酸密码子。每一条mRNA共有3种可能的阅读框架，而双股的DNA则每股各3种，共6种阅读框架。同一序列具有多种阅读框架的现象使重叠基因（overlapping genes）可能存在，已知常见于某些细菌[1]与病毒。至于人类细胞中则较少见。若是一个核糖体进行转译时改变了阅读框架，将导致转译转移（Translational frameshift）的发生。而如果一段DNA序列被插入了一个新的核苷酸，那么会造成框架转移突变（frameshift mutation）。

启动子：RNA聚合酶结合的、在转录起始上游的DNA序列。RNA与之结合后（如不受到阻遏）即可启动转录。

外显子(expressed region)：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。

内含子（introns）：真核生物中隔断基因的线性表达，而在剪接过程中除去的核酸序列。

剪接接口:去除初级转录产物上的内含子,把外显子连接为成熟的RNA,称为剪切。大多数内含子都以GU为5′端的起始，而其末端则为AG-OH-3′。5′GU……AG-OH-3′称为剪切切口

无义突变：是编码某一氨基酸的三联体密码经碱基替换后，变成不编码任何氨基酸的终止密码UAA、UAG或UGA。虽然无义突变并不引起氨基酸编码的错误，但由于终止密码出现在一条mRNA的中间部位，就使翻译时多肽链的终止就此终止，形成一条不完整的多肽链

错义突变：是编码某种氨基酸的密码子经碱基替换以后,变成编码另一种氨基酸的密码子,从而使多肽链的氨基酸种类和序列发生改变。错义突变的结果通常能使多肽链丧失原有功能，许多蛋白质的异常就是由错义突变引起的。由于bp的替换，使一种aa的密码子变为另一种aa的密码子，在合成多肽时，译成了不同的aa，从而引起基因突变。这种突变被称为错义突变。

编码链：双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T），又称有义链（sense strand）。分子中的核苷酸序列是同DNA双链中一条脱氧核苷酸链的序列相互补，转录RNA分子的这条DNA链称为DNA的模板链，另一条链称为该基因的编码链。转录初级产物RNA的核苷酸序列同编码链的序列相同(除了以U替换T)，意指DNA通过RNA编码该基因的蛋白质产物。含有众多基因的双链DNA分子中，各个基因的模板链未必都在同一条链上，就双链DNA分子中的一条链来说，既是某些基因的模板链，又是另一些基因的编码链。

非编码链：DNA双链中能够转录的一条链成为非编码（或反编码链），方向（3’-5’）。另一条链为编码链（5’-3’）

有意义链：即华森链，华森——克里格型DNA 中，在体内被转录的那股DNA 链。DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作反意义链或Watson链或负（—）链。相对的另一股单链是编码链(coding strand)，也称为有意义链或Crick链无意义链：DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链，也称为反意义链。相对的另一股单链是编码链，也称为有意义链。

起始密码止：AUG即编码多肽链中的甲硫氨酸，又作为多肽链合成的起始信号。作为起始信号的AUG作为起始密码止。在某些原核生物中,GUG和UUG也可充当起始密码子。

终止密码止：3个密码子UAA、UAG、UGA不编码任何氨基酸，只作为肽链合成终止的信号，称为终止密码子

解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度相对于A260值作图，所的曲线称为解链曲线

熔解温度：即熔点,用Tm表示, 在解链过程中，紫外吸光度的变化A260达到最大变化值的一半时所对应的温度称为熔解温度

杂交：两条单链DNA或RNA的碱基配对。通过不同的基因型的个体之间的交配而取得某些双亲基因重新组合的个体的方法。一般情况下，把通过生殖细胞相互融合而达到这一目的过程称为杂交；而把由体细胞相互融合达到这一结果的过程称为体细胞杂交。

红细胞生成：指从多能干细胞通过一系列的连锁（变化）变成含有血红蛋白的成熟红细胞的过程。

转座子：在单细胞的基因组中一些DNA片段能移动到不同的位置。在移动的过程中，这些DNA片段可能会突变，并导致基因组DNA数量的增加（偶然减少）。这些可移动的DNA片段有时被称为“跳跃的基因”。

限制性内切酶：生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶(简称限制酶)。

聚合酶链反应：已广泛采用聚合酶链反应获取目的DNA。PCR是一种在体外利用酶促反应获得特异序列的基因组DNA或cDNA的专门技术。要获得目的基因，除PCR技术的通用条件外，还必须知道目的基因5′3′端的各一段核苷酸序列及其他相关条件，已设计出合适的引物ployA信号：加尾过程由poly( A)转移酶催化完成，但poly(A)添加部位并不直接位于转录终止位点, 而是转录产物3c 末端一个特异性酶切除

后的序列。该酶识别断裂位点常位于加尾位点上游10—30nt, 有AAUAAA 信号序列及切点下游20—40nt，有富含GU的序列(单细胞真核生物除外), 称为poly(A)信号[ poly(A) denylation signa, l PAS]。

理解性：

1.DNA的复制与突变遗传的关系

2.RNA的转录与加工的关系

3.密码子与氨基酸的关系

4.中国人群中常见的B-地中海贫血突变，这些突变对转录和翻译的影响

5.常用的检测基因突变方法的原理

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4)