枯草芽孢杆菌母药标准
枯草芽孢杆菌(水产养殖用)

枯草芽孢杆菌【菌种成分】枯草芽孢杆菌,有效活菌数≥100亿/克【产品概述】枯草芽孢杆菌是经国家农业部微生物检测中心批准使用的一种天然菌种。
枯草芽孢杆菌能分泌合成多种有机酸、酶、生理活性物质等。
具有繁殖快速、生命力强、安全无毒等特点;无荚膜,周生鞭毛,能运动,是好氧菌。
革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大;菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。
枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。
可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。
【产品功效】产品功效(1)枯草芽孢杆菌在饲料添加中的应用功效:维持肠道生态平衡,增强抗应激能力;本菌可产生有机酸、多种酶、B族维生素,促进消化吸收,提高饲料转化率;调节免疫力:刺激免疫器官生长发育,增强抗病力,提高成活率;优化养殖环境,消除臭味。
产品功效(2)枯草芽孢杆菌在农业中的应用功效:提高作物抗病、抗寒,抗旱、防热、防病防虫能力,有一定的固氮、解磷、解钾作用,改良土壤结构及微生态环境,提高化肥利用率,促进根系生长,平衡土壤pH值,克服连作障碍。
产品功效(3)枯草芽孢杆菌在水产养殖中应用功效:能大量消耗水体中的有机质,将其分解为小分子有机酸、氨基酸及氨,改善水质,为单胞藻提供营养;抑制有害藻类,增加水体活力;降解亚硝酸盐、氨氮及硫化氢等有毒物质,净化养殖环境。
【用法用量】1、在饲料添加中的用量:禽类 100-150g/t、畜类150-200g/t、水产100-200g/t。
2、在农业中的用量:直接使用:1-2kg/亩;配制有机肥按GB20287-2006要求配制(0.5亿/g);发酵有机肥:300-400g/吨,建议与巨大芽孢杆菌等其它微生物产品一起使用。
3、在水产养殖中的用量:按100~200g/亩•米兑水均匀泼洒,10~15天使用一次。
水质严重恶化可加倍使用,隔5~7天再用一次。
枯草芽孢杆菌喷雾剂使用

枯草芽孢杆菌喷雾剂使用枯草芽孢杆菌喷雾剂使用说明书[药品名称]通用名:枯草芽孢杆菌喷雾剂英文名:Bacillus subtilis Preparation for Spraying汉语拼音:Kucaoyabaoganjun Penwuji主要组成成分:枯草芽孢杆菌活菌[性状]本品为浅棕色混悬液体。
[药理作用]通过对创面植入优势菌,可迅速形成菌膜,并具有生物拮抗作用,对烧伤创面起到生物屏障和抑菌作用,达到防治由金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、假单胞杆菌等外袭感染的目的。
[适应症]适用于防治中、小面积?度烧伤烫伤创面感染。
[用法用量]伤后即可使用,先清洗创面,用纱布或棉球擦干创面渗出物和分泌物后,均匀喷涂本制品;每次治疗时,按1%体表面积的创面计,每次5ml/1%体表面积的创面,每揿1下,剂量为0.3ml左右,连续揿压17下,总剂量为5ml,可使制剂完全均匀覆盖该1%体表面积创面,每天1,3次,连用3天(视创面情况而定),成膜后就不再喷涂药物。
[不良反应]未见不良反应。
[禁忌]有过敏史者禁用。
[注意事项]1.应用本制品一般不用包扎及不用其他外用药。
2.每次治疗前须将制品混匀。
3.根据不同面积创面,选用适宜规格,一次性使用。
4.为防止本品可能造成的环境污染,用后最好喷0.05%氯酸钠进行空气和局部地面消毒。
[孕妇及哺乳期妇女用药]尚不清楚。
[药物相互作用]尚不清楚。
[规格]10ml/瓶、30ml/瓶;含活菌数应不低于5×107CFU/ml。
[贮藏]2,8?避光保存。
[有效期]1年6个月假单胞菌制剂使用说明书[药品名称]通用名:假单胞菌制剂英文名:Pseudomonas Preparation汉语拼音:Jiadanbaojun Zhiji主要组成成分:灭活假单胞菌[性状]本品为乳白色混悬液。
[药理作用]在动物试验中证实假单胞菌对免疫系统有促进作用,使巨噬细胞功能增强,并产生特异性抗体,对动物转移瘤有明显的抑制作用,还可诱导机体产生干扰素及肿瘤坏死因子等。
母猪和仔猪日粮中添加枯草芽孢杆菌对仔猪生产性能的影响

开 始补 料 ,4日龄 断奶 ,0 3 2 1 ~ 1日龄 喂教 槽 料 ,2 6 3~0 日龄 喂乳仔 猪料 。
1 测定指 标 . 2
1 . 断奶前哺 乳仔猪 的检测指 标 .1 2 产活 仔数 , 生 重 、 初 断奶 仔 猪数 、 断奶 重 、 乳期 哺 仔猪腹 泻率 。这些指标 也代表母 猪生产 性 能指 标 。
收 稿 日期 : 0 0 0 — 3 2 1 — 8 0
1 数据统 计 . 3 数 据 统 计 采 用 S S 1. P S 20软 件 , 采 用 单 因 素
A O A分析 , u cnS N V D n a 法多重 比较 。部 分指标 采用 T
检验 。
2 结 果 与 讨 论
21 枯 草 芽 孢 杆 菌 对 断奶 前 仔 猪 生 产 性 能 的影 响 .
微生 态制 剂具 有调整 动物 肠道 菌群 , 进 营养 物 促
饲养 管理 、 苗接种 及 预防性 ( 疫 全群 ) 健用 药按 保
质 的消化 能 力 , 于种 用动 物 , 表现 出对 种鸡 方 面 猪 场常规 程序进 行 ,试验期 间不使 用个 别药 物治疗 。 对 已 提高生产 性能 和种蛋 的孵化 率等效 果 。 奶牛 日粮 中添 母 猪 怀孕 9 始 , 喂 哺 乳母 猪 料 , 猪 1 0d开 饲 仔 0日龄 加后 , 具有提 高产奶量 和乳脂 率 的效 果 。 也 微生 态制剂 用于母 猪上 的研 究报 道甚少 。 在生 产 上 用于母 猪 能够缓 解便秘 。有 人认 为 , 这个 效 果对提 高母 猪 泌乳 力是有 帮助 的 。因此 , 试验研 究在 母猪 本 怀孕 9 0d后 、 槽料 和保 育料 添加 枯 草芽孢 杆 菌 , 教 研 究 枯草芽 孢杆菌 对仔猪生 产性 能 的影 响 。
枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢菌片使用说明书

北京索莱宝科技有限公司
枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢菌片使用说明书
货号:LA8980
规格:5×105~5×106cfu/片,50片/包
菌株编号:ATCC9372
保存条件:2~8℃冰箱保存
有效期:1年
产品用途:用于环氧乙烷灭菌效果检测
使用方法:
1、使用时将装有菌片的小纸袋放在被灭菌的物品中心部位(每锅放置菌片数按卫生部规定或其它相关
标准规定)。
2、灭菌后,无菌操作取出小纸袋中的菌片,投放到营养肉汤中。
同时将两片未经灭菌的菌片分别投入
两管营养肉汤中作对照。
3、37℃培养7天,观察结果,对照管呈混浊:若灭菌后营养肉汤澄清透明,则为阴性,表示灭菌彻底;
若灭菌后营养肉汤浑浊,则为阳性,表示灭菌不彻底。
4、当出现阳性结果时,为确定是否为灭菌后接种操作过程中操作不当污染所致,可使用无菌操作取
0.2ml营养肉汤涂布接种至营养琼脂平板上,置37℃培养48小时,涂片镜检或作进一步试验。
5、枯草芽孢杆菌为G+杆菌,极易形成芽孢,芽孢位置位于菌体中央,不膨大。
芽孢染色为孔雀绿着色。
在营养琼脂上菌落呈棕色并随时间延长菌落逐渐着上黑色。
配套试剂:
1、营养肉汤。
按使用说明配制,分装试管,5ml/支,灭菌后4℃保存备用。
2、营养琼脂
3、芽孢染色液
注意事项:
本品用于实验室微生物检验
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枯草芽孢杆菌培养基配方

枯草芽孢杆菌培养基配方枯草芽孢杆菌培养基的组分是由葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、碳酸钙等5种原料构成,采用L16(45)正交表,将5种原料作为枯草芽孢杆菌培养有影响的因素,通过试验数理统计的直观和理论分析,对其配方进行优化。
试验结果表明,当培养基的配方为无水葡萄糖3.50 g/L、蛋白胨0.83 g/L、酵母膏0.50 g/L、磷酸二氢钾0.35 g/L和碳酸钙0.25 g/L,温度(34±2)℃时,培养16 h即可达到生长峰值。
由于枯草芽孢杆菌光学密度(optical density,OD)与活菌数量的关系:y=0.5182x2+1.4462x+1.9714(r=0.996343),接种的枯草芽孢杆菌由1.9714×108cfu/mL提高到3.3124×108cfu/mL。
优化的枯草芽孢杆菌培养基条件能有效促进枯草芽孢杆菌生长。
培养基:1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g 牛肉膏+20g琼脂,或牛肉膏蛋白胨配方(1000ml)加10g的葡萄糖。
ph为7即可,温度30度到37度皆可——条件不是很苛刻,比较容易培养。
枯草芽孢杆菌常用培养基配方:1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂枯草芽孢杆菌原生质体的制备1. 培养枯草芽孢杆菌取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中,36℃振荡培养14 h,各取1 mL 菌液转接入装有20mL 液体完全培养基的250 mL 锥形瓶中,36℃振荡培养 3 h,使细胞生长进入对数前期,各加入25 u/mL 青霉素,使其终浓度为0.3 u/mL,继续振荡培养2 h。
2. 收集细胞各取菌液10 mL,4000 r/min 离心10 min,弃上清液,将菌体悬浮于磷酸缓冲液中,离心。
如此洗涤两次,将菌体悬浮10 mL SMM 中,每mL 约含108~109 活菌为宜。
枯草芽孢杆菌活菌数含量的测定操作规程

文件名称枯草芽孢杆菌活菌数的测定操作规程文件编号编制人编制日期年月日颁发部门审核人审核日期年月日印制份数批准人批准日期年月日生效日期年月日分发部门质量管理部、生产部目的:建立枯草芽孢杆菌活菌数含量的测定标准操作规程范围:本方法适用于的枯草芽孢杆菌活芽孢的测定责任人:内容:1.仪器与工具:电子天平、生物显微镜、摇床、18×180mm试管、500ml三角瓶、10ml刻度吸管、1ml刻度吸管2.试剂与试液:牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、无菌蒸馏水、等。
3.检测培养基配方:牛肉膏3g、蛋白胨10g、琼脂16g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml,调至PH7.2,121℃灭菌30min。
4.检测步骤:4.1 菌液制备:采样量不少于500g,从所采的样品中精确称取10.00g试样,加入已灭菌的带玻璃珠(玻璃珠在80个左右)的500ml锥形瓶中,加入90ml已灭菌的无菌水,在摇床上200r/min摇动60min,即成母液的菌悬液。
4.2 用1ml无菌吸管吸取1ml上述母液的菌悬液,加入9ml无菌水混匀成1:1×102稀释的菌悬液,这样依此稀释,直至得到1:106;1:107;1:108;1:109等浓度(每个稀释度必须更换无菌吸管)。
4.3向每个灭菌培养平皿中倒入约12ml培养基,混合均匀,待凝固后备用。
4.4用1ml无菌吸管分别吸取不同稀释浓度菌悬液0.2ml,加至已凝固好的培养基中,用涂布棒涂匀,在无菌操作台中静置30min后,倒置于37℃的恒温培养箱内培养18h—24h。
每个样品取3个连续适宜稀释度,每个稀释度重复3次,同时加入无菌水的空白对照,每个稀释度取5个到10个菌落的菌体,涂片染色,显微镜观察识别后计数菌落。
5.菌落计数:5.1 以平板上出现20个——200个菌落数的稀释度平板为记数标准,并确定为稀释倍数。
5.2 当只有一个稀释度,其平均菌落数在20个——200个之间时,则以该平均菌落数乘以其稀释倍数。
农业部办公厅关于印发《第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议纪要》的通知

农业部办公厅关于印发《第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议纪要》的通知文章属性•【制定机关】农业部(已撤销)•【公布日期】2009.08.17•【文号】农办农[2009]90号•【施行日期】2009.08.17•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】农业管理综合规定正文农业部办公厅关于印发《第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议纪要》的通知(农办农〔2009〕90号)各省、自治区、直辖市农业(农林、农牧)厅(局、委),新疆生产建设兵团农业局,各评委会委员:第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议于2009年6月19-20日在内蒙古自治区召开。
现将《第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议纪要》印发给你们,请参照执行。
附件:第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议纪要二○○九年八月十七日附件:第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议纪要(二ΟΟ九年六月二十日于内蒙古自治区)第八届全国农药登记评审委员会第五次全体会议于2009年6月19-20日在内蒙古自治区召开。
会议应到委员36人,实到委员28人,符合《全国农药登记评审委员会章程》规定,评审结果有效。
会议期间,委员们对申请正式登记的新农药品种进行认真评审,讨论了加强特丁硫磷管理和减免部分特殊农药原药(母药)的登记及残留试验等问题,形成了一致意见。
现将有关会议情况纪要如下:一、评审了申请正式登记的新农药产品提交本次会议审议的农药品种有60个,其中杀菌剂20个、杀虫剂17个、除草剂9个、杀鼠剂3个、植物生长调节剂6个、昆虫引诱剂2个、植物诱抗剂1个、卫生杀虫剂1个、杀线虫剂1个,共涉及114个产品。
委员们经过认真评审,同意联苯肼酯等25个品种及其产品的正式登记;壬菌铜等 16个品种及其产品在补充有关资料,并经相关专家组审核符合要求后,同意正式登记;暂不同意磷化钙等19个品种及其产品的正式登记(具体评审意见见附件)。
WB800枯草芽孢杆菌使用说明

WB800枯草芽孢杆菌
编号 名称 北京华越洋生物NRR00591 WB800枯草芽孢杆菌 基本信息: 名称:WB800枯草芽孢杆菌 规格:300ul甘油菌 储存温度:-‐80℃ 简介: 类别 枯草杆菌表达菌 培养基 YPD 培养方式 28℃,有氧 保存方式 30%甘油,-‐80℃
操作说明: 1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。 2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
冷冻管开封: 用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌株复溶: 无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml 左右复溶液,加入到冷冻管中。轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。 菌株复壮: 用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。做好标识,在适宜温度下培养。细菌在30-‐35℃培养箱中培养24-‐48h,真菌在23-‐28℃培养箱中培养24-‐72h(必要时,可适当延长培养时间)。
菌株传代: 将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项: 1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放置会导致菌种衰退; 2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行; 3、一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能正常生长; 4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬请正确选择,不清楚时来电询问; 5、某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态;培养过程中亦要保持厌氧状态; 6、某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-‐10%CO2 促进生长; 7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。 8、部分菌种有致病性、扩散性,请专业人员在专业环境下有保护性操作。
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G25Q 江苏苏滨生物农化有限公司企业标准Q/320922 BN 032-2014 1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药2014-08–18发布 2014-08–30实施江苏苏滨生物农化有限公司发布前言本标准按照 GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》和GH/T2467.8—2003《农药母药产品标准编写规范》进行编制而成。
本标准附录A为规范性附录。
本标准附录B为资料性附录。
本标准由江苏苏滨生物农化有限公司提出并起草。
本标准主要起草人:赵福兵、许军、沈文权。
Ⅰ引言1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药是我公司自行研制开发的微生物发酵产品。
1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药经过加工可以主要用于防治水稻纹枯病、稻曲病。
经测定1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药对大白鼠的经口毒性LD50雌、雄性均>4640mg/kg,经皮毒性为LD50雌、雄性均>2150mg/kg。
Ⅱ1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药本品有效成分的其他名称、结构式和基本物化参数如下:a)枯草芽孢杆菌中文通用名称:枯草芽孢杆菌—+菌株编号。
拉丁学名:Bacillus subtilis。
分类地位:细菌(Bacteria);厚壁菌门(Firmicutes);芽孢杆菌纲(Bacilli);芽孢杆菌目(Bacillales);芽孢杆菌科(Bacillaceae);牙孢杆菌属(Bacillus)。
形态学特征:菌体呈杆状,单个、成对或短链排列,大小为0.7µm~0.8µm×2.0µm~3.0µm,无荚膜,周生鞭毛,能运动;芽孢0.6µm~0.9µm×1.0µm~1.5µm,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大;革兰氏染色阳性;菌落圆或不规则形,表面粗糙不透明,可以起皱,呈奶油色或污白色。
有效成分主要存在形式:芽孢。
主要生物活性:抑菌(防病)。
培养保存条件:最适生长温度为30℃—37℃;适合培养基为营养琼脂(NA)或营养肉汤(NB)培养基;适宜贮存温度为0℃—4℃。
1 范围本部分规定了细菌微生物农药枯草芽孢杆菌母药的要求、试验方法、检验与验收以及标志、标签、包装、贮运。
本部分适用于以芽孢为主要活性成分的粉状枯草芽孢杆菌母药。
2 规范性引用文件下列文件中对于本文件的应用是必不可少。
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 1601-1993农药pH值的测定方法GB/T 1604-1995商品农药验收规则GB/T 1605-2001商品农药采样方法GB 3796-2006农药包装通则GB/T 8170-2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T16150-1995 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1 枯草芽孢杆菌母药Bacillus subtilis technical concentrates(TK)由枯草芽杆菌纯菌种经发酵而获得的高含量芽孢菌粉,通常情况下还会包含伴随发酵过程的少量生物组分和化学杂质。
3.2 菌落形成单位 colony forming units(cfu)是将枯草芽孢杆菌母药用水稀释后得到的菌泫通过涂布的方法,让其单个芽孢分散在琼脂平板上,待培养后每活芽孢形成一个菌落,即一个菌落形成单位(cfu),通过肉眼观察菌落的数量来推算单位微生物农药样品中的活芽孢含量。
3.3 杂菌数 number of microbial contaminants枯草芽孢杆菌母药样品中,除枯草芽孢杆菌菌落以外的其他微生物菌落数之和。
3.4 杂菌率 rate of microbial contaminants枯草芽孢杆菌母药样品中除枯草芽孢杆菌外,其他菌(真菌和细菌等)量占总菌量的百分率。
3.5 贮存稳定性 storage stability枯草芽孢杆菌母药在室温和(或)低于室温下贮存一定时间后,产品的活菌数占其标明值的相对百分率。
4 要求4.1 外观:通常为灰白色或棕褐色粉状物,由于发酵基质的不同颜色偶有差异,但应为均匀疏松粉末,不可有团块。
4. 2枯草芽孢杆菌母药质量控制项目指标应符合表1要求。
5 试验方法除另有说明,本方法所用试剂均为化学纯及以上,所用溶液均为水溶液。
5.1 抽样按照GB/T 1605规定进行样品的采集,用随机数表法确定抽样的包装件,最终抽样量不少于100g。
采样时必须特别注意样品的代表性和避免污染,采样容器和采样工具应经过消毒灭菌,样品采集后应立即进行检验,若不能立即检验,需贮存在4℃冰箱中。
5.2 菌种鉴别根据代表菌株的形态学和生理生化特征进行菌种鉴别,并可辅助脂肪酸分析、Biolog、16SrRNA 序列分析等手段。
当对鉴别结果有争议或需要进行法律仲裁检验时,应到具有菌种鉴定资质的单位,将待检菌种与模式菌种进行比对,出具菌种鉴定报告,作为仲裁依据。
鉴别方法见附录A。
5.3 含孢量测定5.3.1 方法提示采用平板菌落计数法。
将母药润湿、稀释后,均匀涂布在培养基平板上,待各芽孢菌体形成菌落后,统计菌落总数,以单位样品(g)中的菌落形成单位数(cfu)表示活芽孢含量(cfu/g)。
5.3.2 试剂和溶液试剂:Tween-20或Triton X-100;溶液:0.05%Tween-20或0.05%Triton X-100。
5.3.3 主要仪器、设备天平:精度为0.01g移液器:20µL~200µL,200µL~1000µL;高压蒸汽灭菌器;超净工作台;恒温振荡器;恒温培养箱。
5.3.4 实验步骤5.3.4.1 样品的准备在无菌操作条件下,将样品搅拌均匀,准确称取3.0g样品,溶入27.0mL的含0.05% Tween-20或0.05%Triton X-100的无菌水中浸泡30minb后,振荡30min,得到稀释10倍的样品溶液,标记为0号。
然后参照表2(以稀释7次为例)进行梯度稀释。
5.3.4.2 涂板计数将上述各梯度稀释液分别吸取100μL于NA平板上,并用L形玻棒均匀涂布在整个平板表面,每1稀释度做3次重复,然后置于37℃培养24-48h后,选择适宜的稀释度,取菌落数在30~300个之间的平板进行计数。
5.3.5 菌落总数的计算方法5.3.5.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,则计算该稀释度3个重复平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应的稀释倍数,作为每g试验中的菌落数。
如第7号稀释度3个平板的菌落数分别为98、100、102,则该试样的菌落数:N= [(98+100+102)÷3]×108×10=1.0×1011cfu/g5.3.5.2如有两个连续稀释度的平板菌落数均在适宜计数范围之类,则按式(1)计算:N=∑C / [(1×n1+0.1×n2) ×0.1×d] (1)式中:N—单位样品(g) 中的菌落数(cfu/g)∑C—平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和n1—第1个适宜稀释度的调查平板数n2—第2个适宜稀释度的调查平板数d —第1稀释度的稀释因子示例:如果第1稀释度(10-7)的菌落数(cfu )为110、105、100,第2稀释度(10-8)的菌落数(cfu )为15、16、17,则根据式(1)计算。
N=(110+105+100+15+16+17)/[(1×3+0.1×3)×0.1×10-8]=1.1×1011cfu/g5.4 杂菌率的测定按5.3方法进行测定,NA 培养基检测样品中的细菌杂菌;选择PDA 培养基检测样品中的真菌杂菌。
然后统计总的可见杂菌菌落数量,杂菌率按式(2)计算。
式中:X ——杂菌率,单位为百分率(%); N 1——细菌杂菌菌落数的总和,单位为cfu ; N 2——真菌杂菌菌落数的总和,单位为cfu ;N 3——有效成分枯草芽孢杆菌菌落数总和,单位为cfu 。
5.5 pH 值的测定按GB/T 1601-1993的规定进行。
5.6 细度的测定按GB/T 16150-1995中2.2的规定进行。
5.7 干燥减量的测定 5.7.1仪器、设备扁形称量瓶:直径40mm ;电热干燥箱:控温范围(50℃~200℃),误差±2℃; 干燥器。
5.7.2 试验步骤称取试样10g (精确至1mg ),置于预先恒重的称量瓶中,将此瓶放入105℃±2℃的电热恒温干燥箱内干燥,1h 后取出,在干燥器中冷却至室温,称重。
5.7.3 测定结果干燥减量按式(3)计算。
W =m-m 1 ×100 (3)m式中:W ——干燥减量,单位为百分率(%); m ——试样的质量,单位为克(g); m 1——干燥后试样的质量,单位为克(g)。
X =N 1+N 2 ×100 (2)N 1+N 2+N 35.8 贮存稳定性5.8.1 方法提要将试样密闭放置于 5℃贮存24个月或20℃—25℃贮存12个月后,对含孢量进行测定,计算其占标明值的百分率,要求不低于80%。
5.8.2 仪器、设备冰箱;恒温箱:控温范围(0℃~50℃),控温误差±2℃;玻璃瓶:带有密封盖或瓶塞,能充分保证其密封性。
5.8.3 试验步骤将20g试样放入玻璃瓶中,使其铺成平滑均匀层,密封后置于5℃冰箱中放置24个月或20℃~25℃恒温箱中放置12个月后按5.3方法测定样品中的含孢量,并计算其占标明值的百分率。
6 产品检验与验收应符合GB/T 1604-1995的规定。
极限值的处理应按GB/T8170-2008中4.3.3的要求进行。
7 标志、标签、包装、贮运7.1 1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药的标志、标签和包装,应符合GB3796-2006中的有关规定,并应有农药生产批准证书号、标准号、农药登记证号、商标和使用范围。
7.2 包装:1000亿cfu/g枯草芽孢杆菌母药内衬塑料袋硬纸桶(或牛皮纸袋、编织袋),每桶(袋)不超过25kg。
也可根据用户要求或订货协议,采用其它形式的包装,但要符合GB 3796-2006的规定。
7.3 贮运:贮运时严防日晒及35℃以上高温,置于阴凉干燥处。
运输时,注意轻放,防止破损。
不得与有毒有害物质混装、混运。
7.4 安全:在使用说明书或包装标签上应注明毒性、防护措施等。
7.5 保质期:在正常贮运条件下,质量保证期从生产日期算起,二年内产品含孢量不低于标明值的80%。