灵芝多糖的研究及其提取工艺
灵芝多糖制备及药理研究进展_石凤敏
作者简介 收稿日期
石 凤 敏 （ 1983 － ） ，女，河 北 承 德 人，博 士，从 事 药 学 研 究， E-mail： shifengmin318@ 163． com。* 通讯作者，副研究员，从 事植物资源开发研究，E-mial： dzmbj@ sohu． com。 2012-01-11
行比较，发现微波法提取多糖具有操作简便、能耗低、省时且 提取率高等优点，并指出该方法可以广泛用于灵芝多糖的工 业化生产［14］。周明等采用热水浸提和超声波 － 微波协同 2 种方法萃取灵芝子实体中的多糖，并对提取时间和料液比等 因素对灵芝多糖提取率的影响进行了研究，发现与常规热水 提取工艺相比，超声波 － 微波协同萃取法可减少 3 /4 的提取 时 间，提取率更高，同时还可有效降低用水量 ，节约水 资
Research Progress of Polysaccharide from Ganoderma lucidum SHI Feng-min et al （ Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences，Peking Union Medical College， Beijing 100193） Abstract The paper introduced the main research achievements on the preparation and pharmacological effect of Ganoderma lucidum polysaccharides （ GLP） ，and then forecasted its development prospect． It was pointed out that polysaccharide was one of the main active components in Ganoderma lucidum with the medical functions of immune regulation，anti-tumor，anti-aging，antioxidant，anti-lipid，etc． ，it was the medical resources with broad development prospect． Key words Ganoderma lucidum； Polysaccharide； Preparation； Pharmacological effect
灵芝菌丝体多糖(工艺)
灵芝菌丝体多糖（工艺）
灵芝发酵菌块——机器粉碎（粗粉）——水提取——浓缩——酒精沉淀——喷雾干燥——过筛分装
菌丝体原料与子实体原料相比较区别在于
1、菌丝口感不苦，子实体与原料卒取口感为苦味，口服液非常适用
2、椴木赤多糖含量略高，菌丝体相对子丝体来说，纤为含量低取出多糖含量略高
3、菌丝体原料取物不含三萜成分（三萜含量比较低）
4、菌丝体原料重金属含量很低，子实体原料重金属含量较高
灵芝子实体多糖（工艺）
灵芝子实体（0kg）——干燥——粗粉（40目）——纯化水提取物——离心过滤——浓缩——纯水——喷雾干燥——过筛80目——包装1kg灵芝多糖——检测理化指标——入库。
西藏野生灵芝粗多糖提取工艺研究
西藏野生灵芝粗多糖提取工艺研究杨晓梅;鲍隆友;耿向永;蔡灵男【摘要】采用正交试验,对影响灵芝多糖提取的4个主要因素(料水比、提取温度、提取时间、醇析浓度)进行了最佳工艺条件研究.结果表明,提取灵芝子实体粗多糖采用水提醇沉法,最优工艺条件为:料水比1:50,提取温度90℃,提取2次,每次提取2 h,90%乙醇醇析,3 000 r/min离心30 min取沉淀,sevage法除游离蛋白,离心取上层液即为灵芝粗多糖溶液.苯酚-硫酸法测定灵芝子实体粗多糖含量约为0.734%,这一含量在全国灵芝子实体多糖含量中处于中等水平,还有待于进一步的研究和开发利用.【期刊名称】《长江蔬菜》【年(卷),期】2010(000)022【总页数】5页(P41-45)【关键词】西藏;野生;灵芝;粗多糖;提取【作者】杨晓梅;鲍隆友;耿向永;蔡灵男【作者单位】西藏农牧学院动物科学技术学院,西藏林芝,860000;西藏农牧学院动物科学技术学院,西藏林芝,860000;西藏农牧学院高原生态研究所;西藏农牧学院动物科学技术学院,西藏林芝,860000【正文语种】中文灵芝是我国中医药宝库中的灿烂瑰宝，几千年来备受中华民族的珍爱和崇拜。
其中灵芝多糖又以其特有的医学功效成为灵芝的主要活性成分，其含量已成为衡量灵芝质量的重要指标之一[1]。
多糖由多种醛糖和酮糖通过糖苷缩合而成，是一种天然多聚体，其分子量从几百到数十万，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高度醇而溶于热水。
根据多糖的这种化学特性，灵芝多糖的一般提取过程是：技术处理→分离纯化→含量测定。
本试验以西藏野生灵芝（Ganoderma lucidum）为材料，探究在西藏高海拔条件下灵芝粗多糖的提取工艺，以期为西藏野生灵芝的开发利用奠定基础。
1．1 试验材料新鲜灵芝采自西藏林芝地区林芝县、米林县。
试验试剂有葡萄糖（成都化学试剂厂生产）、浓硫酸（四川省德阳市化学试剂厂生产）、苯酚（成都化学试剂厂生产）。
中药提取技术提取灵芝提取物
中药提取技术提取灵芝提取物自二十世纪八十年代以来，有关中药提取技术提取灵芝提取物研究取得了很大的进展，通过中药化学、药理学、免疫学、分子生物学、现代基础医学和临床医学等多学科紧密结合，从不同层次，多种指标上，逐渐揭示了灵芝的奥妙，证明灵芝不仅是一味滋补强身壮体的药物，而且对心脑血管疾病、高脂血症、神经衰弱、胃肠疾病、呼吸道疾病、肝炎、免疫性疾病和肿瘤等疾病有着确实的治疗作用。
灵芝多糖的提取方法： 1．多采用热水提取、分部沉淀的方式分离灵芝的多糖组分；进一步经各种层析如 DEAE 纤维素柱色谱、Sephadex G75 柱色谱，凝胶过滤如 Sepharose CL—4B 凝胶过滤，利用中药提取技术提取灵芝提取物等处理可获纯化的多糖。
2．生物技术：灵芝液体深层培养，从其菌丝体中分离提取。
到目前为止，已从灵芝中分离出近二百种化合物，最有效的方法当属中药提取技术提取灵芝提取物，其化学分类为多糖、核苷、呋喃、三萜、甾醇、生物碱、蛋白质、氨基酸和微量元素等十大类。
天一萃取利用萃取设备通过实验室及临床研究都已分别揭示了这些化合物就是灵芝的药理活性成分。
下面就对这些活性成分的药理作用与相关疾病的关系做一概述： 1．灵芝多糖．灵芝多糖（Ganoderma lucidum Polysaccharide）目前已分离到的有 200 多种，多糖链由三股单糖链构成，是一种螺旋状立体构形物，其立体构形和 DNA、RNA 相似。
分子量从数百到数十万，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高浓度酒精，在热水中溶解，大多存在于灵芝细胞内壁。
灵芝多糖大多为异多糖，即除含有葡萄糖外，大多还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等其他单糖。
灵芝多糖在国外亦在进行广泛、深入研究。
灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一，因此，也特别受到医药科技工作者的重视，研究报道也最多。
现知灵芝多糖有广泛的药理活性，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿瘤、抗辐射，提高肝脏、骨髓、血液合成 DNA、RNA、蛋白质能力，延长寿命等。
鹿角灵芝有效成分提取工艺研究
鹿角灵芝有效成分提取工艺研究鹿角灵芝是一种珍贵的中药材，具有很高的药用价值。
其中的有效成分主要是生物碱、多糖、多肽以及其他一些活性物质。
有效成分提取工艺是鹿角灵芝的重要研究内容之一，通过优化提取工艺，可以提高有效成分的提取率和纯度，从而增加药用价值。
鹿角灵芝提取工艺的研究包括提取溶剂的选择、提取温度、提取时间、提取方法以及后处理等方面。
首先需要选择合适的溶剂，一般常用的溶剂有水、乙醇、甲醇等。
不同的溶剂具有不同的极性，对有效成分有不同的溶解度，因此需要根据需要提取的有效成分来选择合适的溶剂。
提取温度也是影响提取效果的重要因素之一。
一般来说，较高的温度可以加速提取过程，但过高的温度可能会破坏有效成分。
因此需要在温度选择上进行适当的控制。
还需要进行适当的提取时间控制，以充分提取有效成分。
提取方法可以选择传统的水煎法、浸泡法，也可以采用超声波提取、微波提取等新型技术。
超声波提取和微波提取可以提高提取效率，缩短提取时间。
超声波提取利用超声波机械作用和热效应实现提取过程；微波提取则是利用微波的电磁波与溶剂分子之间的相互作用来加热提取。
提取完毕后需要进行后处理，通常包括过滤、浓缩和干燥等步骤。
过滤可以去除提取液中的杂质；浓缩可以减少提取液的体积，提高有效成分的浓度；干燥可以将提取液中的水分去除，得到干燥的提取物。
鹿角灵芝有效成分提取工艺的研究是提高药用价值的重要途径。
通过合理选择溶剂、控制温度和时间、选择适当的提取方法以及进行后处理，可以有效地提高有效成分的提取率和纯度。
可以进一步研究鹿角灵芝提取液的药用价值和应用前景，为其进一步的开发和利用提供参考依据。
灵芝多糖提取工艺及含量测定
灵芝多糖提取工艺及含量测定刘鸿雁;刘丽娜;贾忠【摘要】目的:建立芝芪康艾颗粒中的灵芝多糖含量测定方法,优选灵芝多糖的最佳提取工艺.方法:采用正交试验法优选灵芝多糖的最佳提取工艺,以蒽酮-硫酸法测定灵芝多糖的含量.结果:葡萄糖对照品浓度在0.005～0.03mg/ml范围内,回归方程式为Y=41.686X+0.42367(r=0.999),灵芝多糖平均回收率为98.32％,RSD=0.44％;灵芝多糖的最佳提取工艺为12、9、9倍水提取三次,每次40min.结论:灵芝多糖含量测定方法简单、可靠,最佳提取工艺合理可行.【期刊名称】《甘肃医药》【年(卷),期】2017(036)012【总页数】3页(P1000-1002)【关键词】芝芪康艾颗粒;灵芝多糖;含量测定;正交试验;提取工艺【作者】刘鸿雁;刘丽娜;贾忠【作者单位】兰州市肺科医院,甘肃兰州730046;兰州市肺科医院,甘肃兰州730046;兰州市肺科医院,甘肃兰州730046;甘肃农业大学,甘肃兰州730070【正文语种】中文【中图分类】R28芝芪康艾颗粒为兰州市肺科医院感染科的协定方，由黄芪、党参、灵芝、鱼腥草、柴胡、甘草等中药组成，用于治疗心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食等症状［1］。
多糖是灵芝的主要有效成分，现代研究证实，灵芝多糖可促进单核巨噬细胞与自然杀伤细胞的功能；促进树突状细胞成熟、分化及抗原提呈功能；活化淋巴细胞、增强T细胞的功能和细胞因子生成［2］。
本研究用正交试验法优选灵芝多糖工艺，采用蒽酮－硫酸法［3］对灵芝多糖进行了含量测定，为建立其质量标准提供科学依据。
1 仪器与试剂FA2004B电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；KH-500DE数控超声波清洗器（功率250W，频率50kHz，昆山禾创超声仪器有限公司）；HH-6数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）；UV-2450紫外分光光度计（岛津）。
蒽酮（购自上海中秦化学试剂有限公司），硫酸纯化水，D-无水葡萄糖对照品（110833-201205）购自中国食品药品鉴定研究院；灵芝提取物（兰州市肺科医院制剂室生产，批号分别为20160325、20160411、20160425）。
灵芝多糖提取工艺研究进展
第20期宁娜，等:灵芝多糖提取工艺研究进展-63•灵芝多糖提取工艺研究进展宁娜02,3，韩建军7,杨广安7,郁建生013（0铜仁职业技术学院药学院，贵州铜仁554300； 2.民族中兽药分离纯化技术国家地方联合工程研究中心，贵州铜仁554300；3.铜仁职业技术学院中兽药国家民委重点开放实验室，贵州铜仁554300）摘要:灵芝含有多糖、萜类、核苷酸等成分，其中多糖类成分含量较高，具有广泛的药理活性。
灵芝多糖具有降血糖、抗癌、抗氧化等多种活性。
本文对灵芝多糖的提取技术进行了综述,为灵芝的进一步开发利提供依据。
关键词：灵芝;多糖;提取工艺；进展中图分类号:TQ452.7文献标识码:A文章编号：138-921X（2929）29-0066-97ReseercO Praoresu on Extraction Technologyof Polysucchaades fram Ganoderma luciOumNing NcO0,Han Jianjun,h ang Guangan,0u Jiansheng10((.Department oZ Pharmacy,Tongren Vocahonai and Technical College,Tongren554300,China；.Nahonct and Locct Engineering Research Centro for Separa/on and Purification Ethnic Chinese VeteOnara HerUs,Tongren554300,China；3.Key Open LaPomWm oZ TrabiUonai Chinese VeteOnara MeVicinc,Tongren Voca/onai and Technical College,Tongren554300,China)Abstraci:Ganoberma lucidum is rich in a variety of chemical ingrehients,inclubing polysaccharides,(eruencs,nucleo/dcs,etc.Among these ingrehients,the content oZ polysaccharides is higher,which has widely pharmacoloyicai activity-This paper revieweh poCsaccharidcs from Ganoberma lucidum which provideh the basis for beUer development and utilization oZ Ganoberma lucidum.Key words:Ganoberma lucidum；poCsaccharidcs:extraction Wchnoloay,proyress灵芝为多孔菌科植物赤芝Ganoberma lucidum（Leyss.ex Fr.1Karst或紫芝Ganoberma pnenso Zhao,Xu et Zhang的干燥子实体。
灵芝多糖提取工艺研究
Advances in Microbiology 微生物前沿, 2018, 7(1), 26-37Published Online March 2018 in Hans. /journal/ambhttps:///10.12677/amb.2018.71004Extraction Process of Ganoderma lucidumPolysaccharidesYuantao Yin, Qingzhi Yao*College of Life Science, Inner Mongolia Agriculture University, Huhhot Inner MongoliaReceived: Mar. 5th, 2018; accepted: Mar. 16th, 2018; published: Mar. 23rd, 2018AbstractIn this paper, the optimum extraction process of two kinds of Ganoderma lucidum polysaccharide was studied, and the content of two kinds of Ganoderma lucidum polysaccharide was compared. The hot water extraction method is used to study the conditions of extracting polysaccharides from Ganoderma lucidum. With taking the polysaccharide yield as the evaluation index, the single factor test and L18(35) orthogonal test are used to examine the effect of the extraction ratio, pH value, extraction tem-perature, ethanol concentration and extraction time on the yield of Ganoderma lucidum polysaccha-rides. The optimum processing conditions for Ganoderma lucidum polysaccharides extraction with hot water are determined as that of extraction ratio 1:40, pH 7.5, extraction temperature 90˚C, extraction time 1.5 h, and ethanol concentration 90%. The content of Ganoderma lucidum polysaccharide was determined by Sevage method with the removal of free protein and 3,5-Dinitrosalicylic acid (DNS).KeywordsGanoderma, Polysaccharide, Extraction, Hot Water Extraction灵芝多糖提取工艺研究殷远滔，姚庆智*内蒙古农业大学生命科学学院，内蒙古呼和浩特收稿日期：2018年3月5日；录用日期：2018年3月16日；发布日期：2018年3月23日摘要本文主要研究了两种灵芝多糖的最佳提取工艺，比较两种灵芝多糖含量的不同。
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灵芝多糖提取工艺
1、灵芝多糖简介
灵芝多糖是一种从灵芝孢子粉或灵芝中提取的物质。不溶于高浓度的酒精 ,
微溶于低浓度的酒精及冷水 , 在热水中能全部溶解。目前已分离到的有200多
种，其中大部分为β–葡聚糖，少数为α–葡聚糖，多糖链由三股单糖链构成，
是一种螺旋状立体构形物，其立体构形和DNA、RNA相似，螺旋层之间主要以氢
键固定，分子量从数百到数十万，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高浓度
酒精，在热水中溶解，大多存在于灵芝细胞内壁。
灵芝多糖都存在于灵芝的细胞壁内壁。灵芝多糖中除含有葡萄糖外 , 大多
还含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、鼠李糖等单糖 , 但含量较
少。单糖间糖苷键连接有1,3、 1,4 和 1, 6 数种。大多为β型结构 , 少数
为α - 型结构。α -型多糖没有药理活性 ( 药效 ) 。多数多糖链有分枝 , 部
分多糖链含有小分子肤链。多糖链分枝密度高或含有肤链的其药理活性也高。灵
芝多糖在水溶液中多糖链一般由三股糖链组成 , 在 o. 1 摩 / 升氢氧化纳溶
液中时多糖链的三股糖链离解为单股单糖链。
多糖的药理活性与单糖间糖苷键的结合形式有关。单糖间以β- 1 , 3 、 1,
6 或β-1,4 、 1, 6-糖苷键连接是有效的即具有药理活性 , 而纯 β_-1 ,4-
糖背键连接的则没有药理活性。此外 , 多糖的药理活性还与其立体构形有关 ,
若螺旋形立体结构被破坏 , 其活性则大大下降。淀粉、纤维素、糊精也是多糖 ,
但其构形与灵芝多糖 ( 或其他真菌多糖 ) 不同。淀粉、纤维素等多糖没有螺旋
形立体结构 , 单糖间的连接全是β- 1,4-连接。纤维素是 β-型多糖 , 淀粉、
糊精是α -型多糖。由于其构形不同 , 所以淀粉、糊精、纤维素都没有药理活
性。
灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一 ,已分离到的灵芝多糖有 200 多种 ,
其中有数十种的结构已被搞清 , 分子量已被测定。
现知灵芝多糖有广泛的药理活性，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，
消除自由基，抑制肿瘤、抗辐射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白
质能力，延长寿命，灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及
抑制移植肿瘤生理活性的特性。多糖分子量大于1×104时显示强抑制肿瘤活性，
活性强弱还与多糖链分叉的程度及支链上羟基的数量有关。灵芝的多种药理活性
大多和灵芝多糖有关。
2、灵芝多糖提取工艺
2．1、灵芝菌丝体多糖的提取及含量检测
2.2.1、灵芝菌丝体多糖的提取
取适量的灵芝湿菌体，用乙醇等有机溶剂进行处理，以除去湿菌体中的脂类
物质，同时使糖苷酶失去活性，防止多糖的降解。
用热水提取多糖。取上面经预处理的灵芝湿菌体，放人1：20的热水（95℃）
中浸提，一次3小时，连续浸提3次，合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体
积，再用3倍体积的95%乙醇混合，静置10－12小时，再离心，最后加入75%
的乙醇反复洗涤，以沉淀多糖。此沉淀物为粗多糖，其中混杂有蛋白质、色素、
低聚糖等小分子杂质，一般要经过纯化。
多糖的纯化，去蛋白质和deae纤维素柱层析。去蛋白质一般采用sevag法：
加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分
离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止，且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中
的蛋白质。多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法：取脱蛋白后的多糖，
分别以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂，0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱，然
后用0.2%恿铜硫酸液比色测定吸收度，收集有多糖的洗脱液，再浓缩脱盐即得
所需的多糖。
2.2.2、多糖纯度的鉴定
可用电泳法进行鉴定，如果存在单一带，说明为纯多糖。
2.3.3、多糖与多糖中蛋白质含量的测定
取一定量菌丝体粗多糖，加水煮沸溶解，用sevag方法脱去蛋白考马斯亮兰
法测其粗多糖中蛋白质和多糖的含量。一般菌丝体中粗多糖含17.01%、多糖含
5.43%、蛋白质含量2.16%。
2.2、灵芝子实体多糖的提取及含量检测
2.2.1、灵芝子实体多糖的提取
取适量的灵芝子实体，捣碎成粉末，用80目筛过筛，然后用热水提取法进
行提取。具体操作同菌丝体多糖的提取。提取出的粗多糖含有色素、蛋白质等小
分子杂质，也须除去。
子实体粗多糖去除蛋白质也采用se阴法。去除色素，目前尚未发现很理想
的方法。一般用乙醇进行反复冲洗，但效果不很理想。
2.2.2、多糖纯度的鉴定
同菌丝体多糖纯度的鉴定。
2.2.3、子实体粗多糖、多糖及蛋白质含量的测定。
具体方法同菌丝体多糖及蛋白质含量的测定。测得子实体中粗多糖7.5%、
多糖1.5%，蛋白质0.6%，其含量均低于菌丝体中的含量。可见菌丝体阶段就形
成了灵芝多糖的有效成分，为灵芝液体深层发酵生产菌丝体提供了科学依据。