乙醇对雄性大鼠生殖毒性的研究
几种微量元素对动物生殖毒性的研究进展
胞， 通过影响精母 细胞 而导致 成熟 精子数量下 降而非直接作
用于精 子细胞。江琴等 研究指出 ， 可能通过 抑制增殖 细 氟
胞核抗 原（ Ｃ Ａ） Ｐ Ｎ 的表达 ， 而减少 生殖细 胞 的数量 ，对雄 从
性 生殖 系统 造 成 损 害 。李 积 胜 通 过 饮 用 含 ２０ ｍ ／ 氟 化 ０ ｇＬ
显的剂量 一 效应关系 。说 明氟具有一定的生殖遗传毒性。
２ 砷
砷所表现 出的生殖毒性是 多方面 的， 对生殖 细胞有直接 的损害作用 ； 砷可通过直接损伤生殖 器官及影 响生殖 内分泌
功能而产生生殖毒 性作 用 ； 外 ， 此 砷还可 使动 物的繁殖 能力
降低 ， 并对子代产生诸多不 良影响。 ２ １ 砷对精子质 量 的影 响 张育 等 通过 每天 对大 鼠腹 ． 腔注射不 同剂量 的 Ａ ， 二周后对大 鼠进行睾丸精子计数 ， ｓ０ ， 并计算每 日精 子生成 量 ， 结果 表明 ， 高剂量 的 Ａ 引起 ｓＯ 可
微量元素是营养元 素 中的重要 部分 ， 动物机 体生 长 、 是 发育 、 维持正常生理机能必不可少 的元 素。动物 营养 学研究 表 明， 补充动物机体 所需 的微量 元素 ， 能够 促进 动物机 体 的 新陈代谢 、 增强免疫功能 、 高生产性 能 ， 是某些微 量元素 提 但 在动物体内达到一定 量时 ， 对动 物性腺 、 殖 内分 泌 系统产 生
丸器官指数均 明显 降低 ， 可严 重损伤 鸡睾 丸 曲细 精管 、 生精 细 胞及 间质 细 胞 。崔 留欣 等 ３ 究 表 明 ， 剂 量 的 氟 可 诱 导 ７研 高 大鼠睾丸生精细胞凋亡 ， 且存 在一定 的时 间 一剂 量 一效应 关
系 ； 外 还 发 现 ， 量 的 氟 进 入 睾 丸 后 ， 要 作 用 于 精 母 细 另 过 主
09生殖毒性作用081215
二、评价方法
生殖毒性试验是以阐明外来化合物对整个生殖过程是否 产生影响为目的而进行的试验。 采用病理生理、细胞遗传、组织形态、生物化学、内分 泌学等学科的基本原理，从不同角度观察外来化合物对正常 生殖功能的影响，它们彼此联系，互为补充。
（一）三段生殖试验（three segment reproduction test） 一阶段试验 检测对生殖能力、早期胚胎发育的影响。 在动物交配前给药 大鼠 雄性给药60天 （精子发生周期） 雌性给药14天 （卵子成熟周期）
（二）对性功能、排卵、受精及着床的影响 氯化汞给予刚出生雌性大鼠，发现汞沉积在卵巢的巨噬 细胞、粒细胞，导致动情周期紊乱，间情期延长。 镉、汞、镍 影响下丘脑－垂体功能，进而排卵受阻。
（三） 结 局 不育、流产、畸形。 原因：配子形成受阻；抑制受精；抑制孕卵发育、着床；胚 胎发育不良；生殖细胞突变。
血睾屏障（blood testis barrier，BTB）
组成：以支持细胞的紧密连接为主要结构，此外还包括 曲精小管基膜和其外面的结缔组织及毛细血管壁等。 作用：限制血液内大分子物质进入曲精小管的管腔，使 进行减数分裂的生精细胞处于适宜的微环境，避免与血源性 有害物质接触，有利于其分化发育。
作用机理
1960－1962 反应停(thalidomide)灾难事件 1961年，怀疑短肢畸形与妊娠母亲服用反应停 有关。经调查发现，每位生有短肢畸形的母亲，均 在妊娠第3～8周时服用了反应停（一次 50mg 亦可 引起胎儿畸形）。
生殖毒理学（reproductive toxicology） 生殖毒理学 指研究外来化合物损害生殖过程的机制、规律 及其毒作用对后代影响的学科。 生殖毒性（reproductive toxicity） 生殖毒性 指外来化合物对生殖系统产生损害的能力。它 包括：生育力与一般生殖行为、致畸形、孕后期与 哺乳期。广义的生殖毒性涉及对亲代（父母双方） 和对子代（胚胎、胎儿和新生儿）的损害。
一般生殖毒性试验方法原则
剂量与效应关系较为复杂
剂量效应关系复杂的表现及原因：在一定范围内，
畸胎率与剂量成正比，当高到一定水平引起胚胎死亡而
掩盖了致畸作用，畸胎率反而会下降。
致畸作用的剂量效应曲线较为陡峭，斜率很大。 致畸带：从无作用剂量到胚胎死亡剂量的范围
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致畸作用的毒理学特点
种属差异以及个体差异在致畸作用中较为明显 在不同动物并不一定都具有致畸作用，引起畸
响，但是，是否产生畸形依赖于在致病过程中的每个步骤
在损伤和修复之间的平衡。
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Wilson发育毒理学基本原理
（一）对致畸的易感性取决于孕体的基因型及其与有害环境 因子相互作用的方式。 （二）对致畸的易感性随着对有害因素暴露的发育时期的不 同而变化。 （三）致畸物以特异的方式（作用机制）作用于发育的细胞 和组织，启动一系列的异常发育事件（细胞病理机制）。 （四）有害影响能否接近发育中的组织取决于有害影响本身 的性质。 （五）异常发育的四种表型是：死亡、畸形、生长迟缓和功 能缺陷。 （六）随着剂量的增加，异常发育表型的频率和程度也随之 增加，从无毒作用到全部致死。
生殖道的损害：影响运送卵子/受精/受精卵发育
对下丘脑-垂体系统的损害：闭经，受孕力降低。
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二、生殖毒性的评价
是检查外源化学物对动物生育繁殖机能有无 损害作用的试验。 评定的主要依据是交配后母体受孕情况（受 孕率）、妊娠过程情况（正常妊娠率）、子 代动物分娩出生情况（出生存活率）、授乳 哺育（哺育成活率）以及断奶后发育情况等。
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对雄性生殖系统的毒作用
直接损伤睾丸中的细胞群 继发性的影响精子发生 对精子发生的有害作用
改变下丘脑-垂体功能
DEHP对雄性生殖系统毒性的研究进展
Research Progress on Male Reproductive Toxicity Induced by Di(2-ethylhexyl)phthalate
DONG Rui-na, DAI Hong*
（Inner Mongolia Medical University, Hohhot）
ABSTRACT: Phthalate (2-ethylhexyl) ester [di (2-ethylhexyl) phthalate, DEHP]is an important component of two phthalate esters
(PAEs), and is one of the global organic pollutants.DEHP into the body can produce liver, kidney, lung, heart, reproductive and other multi system toxic effect, especially lead to the formation of the male reproductive system toxicity and development, such as decrease of reproductive organ damage and degeneration, germ cell vitality and proportion, even leads to apoptotic and caused a series of pathological changes, which greatly the harm to human health and development.In order to promote human health and control the pollution of DEHP,this paper is to review the role and mechanism of DEHP on male reproductive and developmental toxicity. KEY WORDS: Di(2-ethylhexyl)phthalate; Male; Reproductive toxicity; Mechanism of action
乙醇胺化学品安全技术说明书
化学品安全技术说明书公司地址：上海化学工业区奉贤分区银工路28号E栋楼客服热线：400-133-2688 1 化学品及企业标识1.1 产品标识符化学品俗名或商品名：乙醇胺CAS No.：141-43-5别名：2-氨基乙醇;2-羟基乙胺;2-胺基乙醇;1.2 鉴别的其他方法无数据资料1.3 有关的确定了的物质或混合物的用途和建议不适合的用途仅供科研用途，不作为药物、家庭备用药或其它用途。
2 危险性概述2.1 GHS分类物理性危害：FlammableLiquids:Flam.Liq.3健康危害急性毒性（经口）：AcuteTox.4急性毒性（经皮）：AcuteTox.4严重损伤/刺激眼睛：EyeDam.1皮肤腐蚀/刺激：SkinCorr.1B环境危害急性水生毒性：AquaticAcute12.2 GHS 标记要素，包括预防性的陈述危害类型GHS05:腐蚀性物质; GHS07:感叹号;信号词 【危险】危险申明H227 可燃液体。
H302 如果吞食有害健康。
H312 皮肤接触有害健康。
H314 引起严重的皮肤灼伤,以及眼睛损伤。
H332 吸入有害健康。
H402 对水生生物有害。
警告申明P280 戴防护手套/防护服/护眼/防护面具。
P305+P351+P338 如进入眼睛：用水小心清洗几分钟。
如果可以做到，摘掉隐形眼镜，继续冲洗。
P310 立即呼叫解毒中心/医生。
P210 远离热源/火花/明火/热表面。
禁止吸烟。
P261 避免吸入粉尘/烟/气体/烟雾/蒸汽/喷雾。
P264 在处理后要彻底清洗双手或 … 。
P270 使用本产品时不要吃东西，喝水或吸烟。
P271 只能在室外或通风良好的环境下使用。
P273 避免释放到环境中。
P301+P312 如误吞咽：若感觉不适，呼叫解毒中心/医生。
P301+P330+P331 如误吞咽：漱口。
不得诱导呕吐。
P303+P361+P353 如沾染皮肤或头发?：立即去除/脱掉所有污染的衣服。
化学毒物的生殖毒性
完整的生殖发育过程细分为如下阶段。
A阶段 交配前到受孕：检查成年雄性和雌性生殖功能， 配子的发育与成熟，交配行为，受精。
B阶段 受孕到着床：检查成年雌性生殖功能，胚胎着 床前发育、着床。
C阶段 着床到硬腭闭合：检查成年雌性生殖功能，胎 体发育，主要器官形成。
D阶段 硬腭闭合到妊娠结束：检查成年雌性生殖功能、 胎体的发育与生长，器官的发育与生长。
人是第3～8周（又称胚期）。这期的特点是细胞移动 和组合，形成器官原基，四肢和颜面形成等。这时期 特别容易诱发器官结构的缺陷，即结构畸形，故又称 敏感期；也可能引起胚胎死亡。
啮齿类胚胎死亡后被吸收，称为吸收胎 （resorption），在人则以流产告终，人的胚 胎约50％死亡。
畸形的发生取决于化学毒物的性质、剂量 以及给予的时间。在胚胎期中不同日给予致畸 物会诱发不同器官畸形，因为不同器官的敏感 期有差别，过早或过迟反而不引起畸形。
(二)精子穿透试验：
(三)睾丸中标志酶活性的测定：
一类为透明质酸酶、山梨醇脱氢酶(SDH)、乳 酸脱氢酶同工酶x(LDH-x)、5-核苷酸酶、α磷酸甘油脱氢酶等，在精母细胞和精细胞中 首先出现，其含量和活性随精子的形成、成 熟而达到高峰。
另一类为6-磷酸葡萄糖脱氢酶、苹果酸脱氢酶、 三磷酸甘油醛脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、γ谷氨酰转肽酶、尿苷二磷酸酶、鸟氨酸脱羧 酶等，在睾丸足细胞、间质细胞或精原细胞 内含量最高，其含量和活性在性成熟前达到 高峰，并随精母细胞、精细胞和精子的形成、 成熟而降低。
4、发育毒性(development toxicity)：化学毒物 在着床前胚泡、器官形成，胎儿和新生儿各发 育阶段干扰正常发育过程，称为发育毒性。
不同的化学毒物作用于不同发育阶段。过早或过迟接
生殖毒性与发育毒性
从着床至哺乳期终止[大、小 鼠：妊娠 15 天-分娩后 21 （28 天）]
处 死 孕中期（13-15 天）（部分动物出生 分娩前一天
亲代：F1 代断乳时
时间 或断乳）
子代：断乳时
观 察 项 目
亲代动物：一般情况，交配行为， 孕鼠：一般情况， 孕鼠一般情况，受孕情况
雄鼠精子检查，生殖器官病理改变 受孕情况
发育生物体死亡 结构异常 生长、发育迟缓 功能缺陷
• 对胎盘的毒作用
经胎盘致癌作用(transplacental carcinogenesis)
致畸作用 （Terotogenicity)
外源化学物作用于妊娠母体， 干扰胚胎及胎儿的正常发育过程， 使胎儿出现形态结构及功能异常．
已知的人类致畸物
电离辐射 放射治疗 放射性碘 原子武器
学物，对生育力及早期胚胎发育的 接触化学物，对动 触化学物，对母鼠妊娠，仔鼠
影响
物 妊 娠 ， 胎 体 死 生长发育、形态结构及神经行
亡、生长及结构异 为功能的影响
常的影响
动物 首选大鼠，也可用小鼠
大鼠、小鼠、家兔 大鼠、小鼠、家兔
染 毒 期
雄鼠：交配前 28-80 天（精子发生 胎鼠器官形成期 期） 雌鼠：交配前 14 天（卵子发生期） 到着床（多数器官形成期）
一代生殖毒性试验
两代生殖毒性试验
7
器官形成 10-56 6-15 6-15 4-14 6-18
平均妊娠期 270 21-22 19-20 16 32
胎儿发育过程中对发育缺陷的敏感期
大鼠胚胎各器官的特殊敏感期
剂量增加与毒作用表现的关系
三段生殖毒性试验
一般生殖毒性试验
致畸敏感期
围生期毒性试验
玛咖
早期的秘鲁科学研究者Chacón G 等人对玛咖的营养成分和功效作用进行过初步的研究，初步验证了玛咖在提高哺乳动物生育力、抗疲劳、抗抑郁等方面具有一定作用，并从其中发现了被命名为“macaina”的4 种活性生物碱和芥子油苷（glucosinolates），但玛咖得到国际植物学家和医药研究者的普遍重视是从20世纪80 年代开始，特别是90 年代中期意大利人Dini A 等发表了对玛咖干根的组成成份分析之后，随着现代分析和药效药理技术日益成熟，玛咖的植物化学分析、功效、毒理以及临床研究在20 世纪90 年代末有了较大发展。
玛咖中发现了新植物化学成分玛咖酰胺(macamides)和玛咖烯（macaenes）以及一些结构独特的生物碱，芥子油苷及其异硫氰酸苄酯也被系统的分析，从而玛咖在提高生育力、促进性欲等方面的功效研究以及临床研究也不断的深入。
现代科研揭示的玛咖功效价值得到国际医药公司和营养保健品公司的广泛关注，越来越多的玛咖产品如MacaPure、Vimaca、IMPERIAL GOLD MACA、SuMACA等从美国、秘鲁、日本等国纷纷推出，产品功能以增强精力、改善性功能和缓解女性更年期综合症为主，玛咖完成了由传统食品到“性欲刺激剂”的转变。
而且玛咖产品的形式也由早期的玛咖干粉、玛咖酒、玛咖饮料等向玛咖胶囊、玛咖片剂、玛咖浓缩口服液、玛咖复方保健品等第二代玛咖产品发展，玛咖迅速成为国际医药保健品市场中的一颗新星，受到广大消费者尤其是中老年人群、体育运动员、健美爱好者、女性更年期综合征患者的广泛喜爱。
1.增强生育力：玛咖增强生育力作用是其最早期的传统功效之一，自上世纪90 年代以来，玛咖在提高哺乳动物和鱼类生育力方面的作用已有许多报道，如在几内亚的猪饲料中加入6 %～10 %的玛咖，可以发现产崽率提高36 %～45 %，猪崽出生重量提高40%～73 %；2000 年Canales M 等人开展了玛咖对小白鼠及其后代的营养评价研究，该研究对瑞士小白鼠进行了两代观察，验证了玛咖传统宣称的营养特性，推测了玛咖提高生育力与玛咖的营养特性密切相关。
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・１６４・ 第２６卷第３期 河 北 医 科 大 学 学 报 Ｖｏ１．２６ Ｎｏ．３ ２００５年５月 ＪＯＵＲＮＡＩ ＯＦ ＨＥＢＥＩ ＭＥＤＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ Ｍａｙ ２００５
・论 著・
乙醇对雄性大鼠生殖毒性的研究
赵松 ，解丽君。，胡文媛。 （１．河北医科大学基础医学院病理学教研室，河北石家庄０５００１ ７；２．河北省疾病预防控制中心药物研究室， 河北石家庄０５００２１；３．河北医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室，河北石家庄０５００１ ７）
【摘要】 目的观察长期摄入乙醇对雄性大鼠生殖内分泌功能的损伤及机制。方法４ｏ只健康雄性成年ＳＤ 大鼠随机分为４组，对照组和分别灌胃给予乙醇２．７、４．５、７．５ ｇ／（ｋｇ・ｄ），连续１３周，测定各组大鼠血清睾酮 （ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，Ｔ）、黄体生成素（１ｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ，Ｉ Ｈ）、卵泡刺激素（ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ，ＦＳＨ）含量，光 镜、电镜观察睾丸组织的形态学改变，同时测定睾丸线粒体中丙二醛（ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）的产生量。结果各乙 醇组动物血清Ｔ和Ｉ Ｈ水平较对照组明显降低（Ｐ＜ｏ．０１），仅高剂量组ＦＳＨ较对照组明显降低（Ｐ ｄ０．０５）；光镜 下乙醇组动物睾丸生精细胞出现细胞变性，核固缩，曲细精管腔中脱落细胞增多；超微结构显示乙醇组睾丸生精上 皮结构破坏，支持细胞和各级生精细胞均有退化变性，且损伤程度与乙醇剂量明显相关，乙醇４．５、７．５ ｇ／ｋｇ组动 物睾丸线粒体中ＭＤＡ含量明显高于对照组（Ｐ ｄ０．０５）。结论乙醇是一种睾丸毒物，既可以直接作用于睾丸，弓【 起生精细胞损伤和睾丸类固醇合成抑制，还使下丘脑一垂体轴生殖内分泌功能受损，脂质过氧化可能是乙醇性睾丸 损伤的一种机制。 【主题词】乙醇；睾丸；泌尿生殖系统／损伤；大鼠 【中图分类号１ Ｒ５９５．６ 【文献标识码】 Ａ 【文章编号１ １００７—３２０５（２００５）０３—０１６４一Ｏ４
ＥＦＦＥＣＴＳ ｏＦ ＣＨＲｏＮｌＣ ＥＴＨＡＮｏＬ ＣｏＮＳＵＭＰＴＩｏＮ ｏＮ ＭＡＬＥ ＲＥＰＲｏＤＵＣＴＩＶＥ ＳＹＳＴＥＭ ｏＦ ＲＡＴＳ ＺＨＡＯ Ｓｏｎｇ ，ＸＩＥ Ｌｉ－ｉｕｎ。，ＨＵ Ｗｅｎ－ｙｕａｎ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００１ ７，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｈｅｂｅｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００２１，Ｃｈｉｎａ；３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌａｂｏｕｒ Ｈｙｇｉｅｎｅ， ｔｈｅ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ．Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００１ ７，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：０ｂｊｅｅｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｌｅ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｃｌａｒｉｆｙ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｏｒｔｙ ｈｅａｌｔｈｙ Ｓｐｒａｇｕｅ—Ｄａｗｌｅｙ ａｄｕｌｔ ｍａｌｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ． Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ［０，２．７，４．５，７．５ ｇ／（ｋｇ・ｄ）］ｗｅｒｅ ａｄｍｉｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｒａｔｓ ｆｏｒ １ ３ ｗｅｅｋｓ ｂｙ ａ ｇａｓｔｒｉｃ ｔｕｂｅ．Ｓｅｒｕｍ ｓｅｘｕａｌ ｈｏｒｍｏｎｅｓ：ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ（Ｔ），ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＬＨ）ａｎｄ ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＦＳＨ）ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｔｅｓｔｉｃｌｅ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｌｉｇｈｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．Ｔｈｅ ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｖｄｅ（ＭＤＡ）ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ｗａｓ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｓｅｒｕｍ Ｔ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｅａｃｈ ｅｔｈａｎｏｌ—ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）．Ｓｅｒｕｍ ＬＨ ａｎｄ ＦＳＨ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ—ｔｒｅａｔｅｄ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｌｉｇｈｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｓｔｅｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｇｅｒｍ ｃｅｌｌｓ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｌｏｕｇｈｅｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎ ｔｕｂｕｌａｒ ｌｕｍｅｎ ｏｆ ａｌｃｏｈｏｌ—ｔｒｅａｔｅｄ ｒａｔｓ．
［收稿日期］２００５～０１－２４ 修回日期］２００５—０３—０９ ［作者简介］赵松（１９７２一），男，山东泰安人，河北医科大学基础 医学院博士研究生，从事肾病和肿瘤的病理学研究。
维普资讯 http://www.cqvip.com 河北医科大学学报 第２６卷第３期 ・ １６５ ・ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ—ｔｒｅａｔｅｄ ｒａｔｓ ｗａｓ ｄｉｓｏｒｇａｎｉｚｅｄ ａｎｄ ｔｈａｔ ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ａｌｌ ｓｏｒｔｓ ｏｆ ｇｅｒｍ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｉｎ ｕｒｙ ｗａｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｏｓｅ ｏｆ ｅｔｈａｎｏ１．ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ｉｎ ｅｔｈａｎｏｌ ４．５，７．５ ｇ／（ｋｇ・ｄ）ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｐ＜０．０１）． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｅｔｈａｎｏｌ ｉＳ ａ ｋｎｏｗｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｔｏｘｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｈｒｏｎｉｃ ｕｓｅ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｇｅｒｍ ｃｅｌｌ ｉｎｉｕｒｙ ａｎｄ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｓｔｅｒｏｉｄｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｑＳ ｗｅｌｌ ａｓ ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ—ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ａｘｉｓ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ ｒｅｌｅａｓｅ．Ｉ ｉｐｉｄ ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｍａｙ ｂｅ ａ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｔｈａｔ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ．ａｔ ｌｅａｓｔ ｉｎ ｐａｒｔ，ｔｏ ｔｈｅ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｉｎｊ ｕｒｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｅｔｈａｎｏ１ ａｂｕｓｅ． ＭｅＳＨ：ｅｔｈａｎｏｌ；ｔｅｓｔｉｓ；ｕｒｏｇｅｎｉｔａｌ ｓｙｓｔｅｍ／ｉｎｊ；ｒａｔｓ
乙醇是一种常用的化学试剂，也是食用酒的主 要成分。随着生活方式的改变，酗酒已成为重要的 社会问题。有关研究表明，乙醇是一种确认的致畸 物，母亲孕期大量饮酒可致“胎儿乙醇综合征” ：男 性酗酒除可影响身体健康外，可引起后代发育和行 为异常 一。为提高人类生命质量和优生优育，研究 乙醇的生殖遗传毒性具深远意义。本研究通过经口 灌胃给予雄性大鼠乙醇，观察乙醇对睾丸组织形态 学及生殖内分泌激素的影响，并初步探讨了乙醇引 起睾丸损伤的作用机制。 １材料和方法 １．１ 实验动物及分组：选体质量１８０～２２０ ｇ健康 成熟雄性ＳＤ大鼠４０只（河北省实验动物中心提 供），随机分为４组：对照组、乙醇２．７、４．５、７．５ ｇ／（ｋｇ・ｄ）组，每组１０只。各乙醇处理组均用无水 乙醇加入不同量蒸馏水灌胃，灌胃量为１５ ｍＩ ／ｋｇ， 对照组给予等量蒸馏水，１次／ｄ，连续１３周。于末 次染毒２４ ｈ后用乙醚麻醉动物，眼眶静脉丛采血后 处死，取双侧睾丸，称重，一侧待做睾丸线粒体丙二 醛（ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量测定，另一侧用于组 织形态学观察。 １．２观察指标及方法 １．２．１睾丸光镜病理切片制作：取一侧睾丸部分组 织Ｂｏｕｉｎ液固定，常规石蜡包埋切片，ＨＥ染色，光 镜下观察睾丸组织病理学变化。 １．２．２睾丸超薄切片制作及观察：取一侧睾丸部分 组织，双蒸水冲洗，在冰面上分别切割成２ ｍｍ× ２ ｍｍ×４ ｍｍ小块，４ 戊二醛固定，环氧树脂包 埋，超薄切片，醋酸双氧铀和枸橼酸铅双重染色法染 色，于日本产Ｈ一７５００型透射电镜下观察睾丸组织 超微结构。 １．２．３血清睾酮、黄体生成素、卵泡刺激素测定：采 用放射免疫法。由北京核仪器厂产Ｆ一６４６Ａ型微机 单头放射免疫仪进行测定。试剂盒由中国原子能科 学院同位素研究所提供。 １．２．４ 睾丸线粒体ＭＤＡ含量测定：取一侧睾丸． 摘除被膜后，加入６倍体积的含０．２５ ｍｍｏｌ／Ｌ蔗 糖、１ ｍｍｏｌ／Ｉ 氯化镁、１０ ｍｍｏｌ／Ｉ Ｔｒｉｓ—ＨＣ１缓冲液 （ＰＨ一７．４），在冰浴下制成匀浆，使用日本产ＲＰ２０ 型高速冷冻离心机在４℃条件下６００ ｒ／ｍｉｎ离心取 上清夜，再以９ ７００ ｒ／ｍｉｎ离心３０ ｍｉｎ，得沉淀于 ０．１５ ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣ１—０．１５ ｒｅｔｏｏｌ／Ｉ ＫＨ ２ＰＯｌ缓冲液 （ｐＨ一７．４）冲洗，再以同样速度离心３０ ｍｉｎ，最后得 睾丸线粒体。ＭＤＡ测定用南京建成生物研究所试 剂盒，严格按操作说明书进行；考马斯亮兰法测定蛋 白含量。 １．３统计学处理：应用ＳＰＳＳ １０．０统计软件，进行 Ｄｕｎｎｅｔｔ检验，Ｐ ｄ０．０５为有统计学意义。