中性内肽酶在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者咽部组织中的表达和意义

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龇一每一拳生帆．地点必．

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（保密的论文在解密后应遵循此规定）签名：一鸯一叁肇剥币虢牲磷…』期：醐＾曩住木斯』、学硕士研究生毕韭论文中文摘妥中文摘要目的通过研究中性内肽酶（ＮＥＰ）在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（ＯｓＡＨＳ）患者咽部组织中的表达情况，探讨ＮＥＰ与ＯｓＡＨＳ的关系，以进一步阐明ＮＥＰ蛋白产物在０ＳＡＨＳ中的作用。方法采用免疫组织化学（ＥｎｖｉｓｉｏｎＳｙｓｔｅｍ）

染色技术定位检测ＮＥＰ蛋白产物在ＯＳＡＨＳ组（３２例）和对照组（１４例）咽部组织中的表达。结果ＮＥＰ蛋白阳性表达定位于细胞核和细胞浆，ＮＥＰ蛋白产物在ＯｓＡＨＳ组咽部组织粘膜鳞状上皮全层均有阳性表达，而在对照组只有基底层阳性表达。ＯＳＡＨｓ组中ＮＥＰ蛋白阳性细胞率为２７．０５％±３．１４％，对照组中为９７．１０％±５．０８％，二者差异有显著性意义（ｐ＜Ｏ．０５）。结论ＯＳＡＨＳ患者咽部组织ＮＥＰ含量明显降低，其与ＯＳＡＨＳ关系密切，在ＯＳＡＨｓ变化规律及其在ＯＳＡＨＳ发病机制中的作用有一定意义。

Ｉ关键词】阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征：啁；中性内肽酶；免疫组织化学往拳斯夫学硕士研究生毕监论文英文摘要Ａｂｓｔｒａｃｔｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙＮｅｕｔｍＩｅｎｄｏｐｅｔｉｄａｓｅｔｏｃｘｐｒｅｓｓｉｎｐｈａｒｙｎｘｏｆｏｂｓｔｒｕｃｔｉＶｅｓｌｅｅ・ｐａｐｎｏｅａｈｙｐｏｐｕｅａｓｙｎｄｒｏｍｅ，ａｎｄｅＸｐｌｏｒｅ也ｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＮＥＰａｎｄ

０ｓＡＨＳ，ｆｏｒ

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ｅｐｉ也ｅｌｉｕｍ，ｗｅｒｅ９７．１０％±５．０８％ｉｎｃｏｎｔｒｏｌＦｏｕｐｓ，ｔｈｅｆｏｒｍｅｒｗｅｒｅｌｏｗｅｒｍａｎｍｅｌａｔｔｅｒ【ｐ＜Ｏ．０５）。Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＮＥＰｐｒｏｔｅｉｎｉｎｐｈａｒｙｎｘｓｑｕａｍｏｕｓｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍｏｆＯＳＡＨＳｗａｓｆａｒＩｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓ。ＡｎｄＮＥＰｐｒＯｔｅｉｎｈａｓａｎａｍｎｉｔｙｗｉｔｈＯＳＡＨＳ，ｈａｓａ

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前言１９７３年美国ＧｒｕｉｌｃｍｉＩｌａｕｌｔ首次提出阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｓｌｅｅｐａｐｎｏｅａ

ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＯｓＡｓ）的概念。现更名为阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征

（Ｏｂｓ虹．ｕｃｔｉｖｅｓｌｅｅｐａｐｎｏｅａｈｙｐｏｐｕｅａ

ｓｙｎｄｒｏｍｅ，０ｓＡＨＳ），是一种以睡眠时反复发作

的咽部气道塌陷为特征的疾病，其特征表现为反复发作的低氧血症和高碳酸血症【１。２’孙，能导致肺动脉和体循环高压，心律失常和可能的寿命缩短［４】，是一种发病率高，危险性大的疾病【５们。关于阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病机制目前仍不十分明确。中性内肽酶（Ｎｕｔｒａｌｅｎｄｏｐｅｔｉｄａｓｅ，ＮＥＰ）是广泛存在于呼吸道、肠道和其它器官上皮细胞的膜结合酶，可分解和灭活促炎性肽（如缓激肽、Ｐ物质等）ｆ９１１钔，其功能下降可导致呼吸道对各种环境刺激过度反应【“。１２。１３１，引起哮喘、慢性支气管炎和管壁纤维化等炎症，致使呼吸道管径缩小【ｌ””】。目前国内还未见研究证实ＯＳＡＨＳ患者咽部组织中是否有中性内肽酶蛋白产物的表达情况。本项研究通过免疫组织化学染色方法，研究中性内肽酶蛋白产物在ＯＳＡＨＳ患者啁部组织上皮细胞中的表达，探讨ＮＥＰ表达与ＯＳＡＨＳ组织炎症水肿的关系，以进一步研究ＮＥＰ在ＯＳＡＨＳ形成过程中的作用，为ＯＳＡＨＳ发病机制的研究提供一定的实验资料，有助于了解ＯＳＡＨＳ的发病机制，为探索ＯＳＡＨＳ的临床治疗提供新的思路和依掘。竺查堑丛：竺堑塑兰丝塑竺望苎垄型鲨文献综述

ＯＳＡＨＳ是指睡眠期间上气道塌陷阻塞引起的呼吸暂停和低通气不足，具体指成人于７小时的夜间睡眠时间内，至少有３０次呼吸暂停，每次呼吸暂停至少１０秒以上；睡眠过程中呼吸气流强度较基础水平降低５０％以上，并伴有血氧饱和度（Ａｒｔｅｒｉａｌｏｘｙｇｏｎｓ砷ｌｒａｔｉｏｎ，Ｓａ０２）下降≥４％；或呼吸暂停低通气指数（Ａｐｎｅａｈｙｐｅｐｎｅａ

ｉｎｄｅｘ’ＡＨＩ）（即平均每小时睡眠中呼吸暂停和低通气的次数）＞５【１６］。在过去几十年

中虽然对其在基础研究、Ｉ临床诊断方法、手术适应证的选择、并发症的预防及疗效评估等方面都取得了可喜的成绩，但对于ＯＳＡＨｓ的认识仍只是在临床方面及表面形态学方面，而其中重要的一点就是上气道解剖因素与ＯＳＡＨＳ的发生有着密切的关系。随着研究技术和实验手段及相关学科的发展进步，尤其是近几年的免疫组织化学染色和ＲＴ．ＰｃＲ等技术的广泛应用，在ＯｓＡＨｓ的研究上有了进一步的深入。我们将从分子水平上、ＤＮＡ水平上探讨ＯＳＡＨＳ的发生、发展、特性及临床危害，为阐明０ＳＡＨＳ的发病机制提供更多的实验资料。最近新兴了一门交叉学科…医学分子生物学，它是从分子水平上研究人体在Ｊ下

常和疾病状态下的生命活动及其规律，并开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究。在ＯｓＡＨｓ分子水平的研究过程中，人们发现多种细胞因子拥有广泛的生物学特性，在ＯＳＡＨＳ的发生发展中起到了重要的作用。ＮＥＰ是与细胞膜结合的金属蛋白酶，广泛存在于呼吸道、肠道和其他器官的上皮细胞中，此类细胞因子受到多种外界刺激后立即引起正常细胞的生长、发育及分化。关于ＮＥＰ在ＯｓＡＨＳ咽部组织中的表达研究，对探讨ＯＳＡＨＳ的发病学及临床治疗具有重要意义。本文以二十世纪九十年代以来国内、国外对ＯＳＡＨＳ研究的最新进展为参考，以及ＮＥＰ在多种组织中的研究新发现为借鉴，从上气道解剖因素与ＯｓＡＨＳ发生的关系、ＯＳＡＨＳ中分子生物学的研究进展及ＮＥＰ研究进展等方面给予综述。一、上气道解剖因素与０ＳＡＨＳ发生的关系

ＯＳＡＨＳ在中年人的发病率为２％～４％”“。其发生受多种因索影响，上气道解剖性狭窄和软组织塌陷性增强为其重要原因”。…。

上气道由鼻腔和咽腔组成，口罔腔又可分为鼻咽、腭啁、舌咽、喉咽等四部分ｍ－”，。鼻口阔部：相顶穹隆部至硬腭向后水平延长线；腭啊部：硬腭向后水平延长线至悬雍垂尖部；舌咽部：悬雍垂失至会厌上缘；喉咽部：会厌上缘至食管入口。其中腭咽部是佳本强大学硕＋研究生毕监论文文献综述最常见的阻塞部位（１００％）…。但其中仅有部分患者单纯该处阻塞，多同时伴有舌咽和／或喉咽部阻塞（７０％～８０％）“…，部分伴有鼻腔机械性阻塞，上气道多部位受累是ＯＳＡＨＳ咽腔阻塞的特点，同一咽腔部位也有致局部阻塞的不同解剖异常，以口Ｉｊｊ腔的部位分述如下。１．鼻腔及鼻咽部鼻腔的机械性阻塞因素主要为鼻中隔偏曲，下鼻甲肥大及某些占位性病变等。鼻咽部气道阻塞主要由咽壁软组织厚度增加及鼻咽部淋巴组织、粘液物质增多引起的”…。不同学者所观测到的数据有很大差异，但鼻咽部往往不是上气道阻塞的起始部位。２．腭咽部软腭后区是上气道解剖最狭窄的部位，并在多数情况下为ＯＳＡＨｓ的始发部位和主要阻塞部位“。…。此部位阻塞主要由于软腭及悬雍垂后坠、咽侧壁组织向内塌陷造成“８’…。研究显示ＯＳＡＨＳ患者软腭后区横截面积明显低于正常人““““２：，该区最小横径明显减少，但最小前后径无明显变化”“２…。软腭及悬雍垂的长度、厚度、面积均大于正常““”１，占咽腔很大面积。有学者发现ＯｓＡＨｓ患者软腭呈一种特殊形态‘”：，即悬雍垂远端与软腭纵轴延长线成角大于３０。。睡眠状态下９０％患者在腭啁阻塞初始出现特殊形态的软腭，清醒状态下仅９％患者发现软腭的特殊形态，这部分患者年龄偏大，较肥胖，软腭明显较长。软腭这种形态变化是明部软组织塌陷的表现之一，可导致腭咽部气道面积突然减少，通气严重受阻。腭明部最小横径减少主要由口｜ｊｊ侧壁的解剖学因素与舌咽、喉Ⅱ困部相同，故详细叙述于舌Ⅱ罔及喉咽部。３．舌咽及喉咽部舌咽及喉咽部阻塞的解剖因素主要有：双侧肥大的腭扁桃体下极、舌扁桃体增生及舌根后坠“。“，口嗣壁组织增厚向气道中央塌陷堆积”“２“、吸气相舌根及增生的舌扁桃体后坠将会厌向后挤压使其变形”１等。其中咽壁组织增厚、舌体后坠为阻塞最常见原因”。２’。支配其运动的肌肉附着于舌骨，舌骨的位置直接影响舌的位置和形态”“。有学者发现ＯＳＡＨＳ患者舌骨位置较正常人偏低，颏舌肌附着于较低位置的舌骨，使得舌体明显后坠，甚至与塌陷的咽后壁相贴而引起舌啁部阻塞。对ＯｓＡＨｓ患者吸气相、呼气相咽腔情况对比观察发现…３：吸气相舌啁部气道软组织塌陷性增强，横截面积较正常人减少，甚至出现咽腔完全闭塞。呼气相舌咽部气道横截面积反而较『Ｆ常人增大，扩大的舌咽部使增长的软腭、悬雍垂直接暴露于吸气相的负压作用下极易塌陷，而且软腭、悬雍垂后坠的咽部空间扩大，伴随吸气相舌咽软组织塌陷，腭啊部及舌瞩部均易发生闭塞。