一种白细胞介素10的突变体及其制备方法和应用
血液产品使用手册

⾎液产品使⽤⼿册⾎液成分的制备第⼀节成分输⾎概述成分输⾎是⽤物理的或化学的⽅法把全⾎分离制备成各种较浓和较纯的制品以供临床输⽤。
⾎液成分包括⾎细胞成分和⾎浆成分等。
⾎细胞成分有红细胞、⽩细胞、⾎⼩板;⾎浆成分有⽩蛋⽩、免疫球蛋⽩以及其他凝⾎因⼦。
本章主要叙述⽤物理⽅法根据⾎细胞在⾎液中⽐重不同制备的各种⾎液成分,包括红细胞、⽩细胞、⾎⼩板、⾎浆和冷沉淀等类制品。
随着科学的发展和技术的进步,⾎液成分制备⽅法⽬前可分为两种,⼀种为⼿⼯制备;另⼀种是⽤⾎细胞分离机从单⼀献⾎者采集⾼度浓缩的某种成分,⽽将其他成分回输给献⾎者。
成分输⾎之所以能迅速发展,在于较全⾎输注有很多的优越性。
第⼀,治疗效果显著。
成分输⾎的原则是确定患者缺什么成分补充什么成分,将全⾎中的某种成分分离、纯化得到⾼浓度、便于保存和运输的⾎液制品,把多个献⾎者的同⼀种⾎液成分混合成为有效的治疗剂量,给缺乏这种⾎液成分的患者输注,可以得到很好的治疗效果。
红细胞制剂的种类及制备红细胞是⾎液的主要成分之⼀,具有重要的运输氧⽓和⼆氧化碳的⽣理功能。
临床上需要输⾎的患者⼤约80%以上需补充红细胞。
红细胞制品的种类很多,国内外常⽤的制品包括悬浮红细胞、浓缩红细胞、悬浮少⽩细胞红细胞、浓缩少⽩细胞红细胞、洗涤红细胞、年轻红细胞、冷冻解冻去⽢油红细胞等。
分离各种不同的⾎液成分依据全⾎中红细胞、⾎⼩板和⾎浆的⽐重不同(分别为1.08~1.09、1.03~1.04和1.027),利⽤重⼒离⼼法分离⾎液成分,多采⽤⼤容量冷冻离⼼机。
把全⾎采集于塑料袋中,于离⼼筒内⽤柔软的塑料⽚平衡离⼼筒,对称位放于离⼼机内,根据所需分离成分选择不同的离⼼⼒。
通过相对离⼼⼒(g)和离⼼机半径(cm)(从离⼼机中轴点到离⼼筒内底部的距离)换算出每分钟离⼼转数。
离⼼机的每分钟转数,离⼼时间直接影响各种成分的分离效果,必须定期给予校正。
⼀、悬浮红细胞悬浮红细胞是⽬前国内外临床应⽤最⼴泛的⼀种红细胞制品,⽤离⼼的⽅法分离出全⾎中⼤部分(90%)⾎浆后,加⼊各种晶体盐红细胞保存液。
SOE-PCR在定点突变中的应用_百替生物

SOE-PCR在定点突变中的应用福建师范大学闽南科技学院生物工程专业122582005037魏慧娘指导教师:张彦定【摘要】重叠延伸剪接技术(Gene splicing by overlap extension,SOE)是一种通过DNA链的交错延伸而实现基因的拼接的分子生物学实验方法,可简单的将两个不同来源的DNA片段连在一起,广泛应用于产生突变基因、杂合基因、构建突变体库、融合基因,基因敲除等。
本文综述了SOE-PCR在基因的基因定点突变中的应用情况、该方法的利弊并展望了其应用前景。
【关键词】SOE-PCR;定点突变SOE-PCR技术是1989年由Horton等[1]提出的,即利用掺有预期改变的人工合成引物,通过多次扩增反应来完成,得到重组基因或嵌合基因;如果片段来源相同就可以得到基因长片段DNA,片段来源不同就可以形成融合基因[2]。
该技术的关键是使用了具有末端互补的引物对,特殊设计的PCR5’端寡聚核苷酸引物含有使重构基因所需的遗传物质改变的碱基渗入,如置换、插入、或缺失,就可通过重叠链延伸技术迅速地将突变基因引入内部造成基因突变,可获得依靠内切酶消化的方法难以得到的产物[3]。
与常用的定点突变的方法如寡聚核苷酸引文介导的定点突变、PCR介导的定点突变及盒式突变相比,重叠延伸技术作为PCR介导的定点突变技术之一可以再DNA区段的任何位点进行突变[4]。
本文主要对SOE-PCR在定点突变中的应用进行综述。
1、SOE-PCR的原理SOE-PCR的主要原理是采用特殊设计的寡聚核苷酸引物,在特定位置引入突变。
首先,设计一对含有突变位点的引物,如图1中的c、b这两条引物含有互补末端,两个重叠片段可以再随后的延伸反应中融合在一起,在设计如图1中的a、d两条外侧引物通过PCR将人融合产物扩增。
原则上,引物可沿着靶基因移动到任何地方引入突变。
因此含有引入突变基因片段可通过单体反应得到加长。
这种通过重叠延伸两个DNA片段融合为一得能力可进一步用于两个或是来两个以上异源基因DNA片段的剪接。
白介2研究进展(2)

白细胞介素- 2 的研究进展白细胞介素-2 (interleukin-2 ,IL-2 )是T 淋巴细胞所产生的一类重要的淋巴因子,具有广泛的生物学活性,不仅可以促进T 、B 淋巴细胞、NK 细胞、单核细胞的分裂增殖,还可以促进其它细胞因子如干扰素等的分泌,增强抗原提呈作用,是调节机体免疫的重要细胞因子,在抗肿瘤、抗毒素及感染性疾病的治疗中也具有重要用自白细胞介素-2 发现以来,许多学者对其展开研究,对白细胞介素-2 的结构、分泌、调节、种属特异性、生物学活性、受体等方面有了较深的认识,本文就白细胞介素-2 的研究进展作一综述IL-2 的发现及命名●当时分别称之为“ 淋巴细胞丝裂原因子” ( lymphocyte mitogenicfactor )、“ 致母细胞性因子” ( blastogenic factor )、“ T 细胞激活因子” ( T cell activating factor )。
1976 年, Morgan等发现,将 T 细胞上世纪60 年代,一些学者发现多种来源于植物的外源凝集素(lectin )可在体外刺激淋巴细胞转化及增殖。
这些外源凝集素如植物血凝素(Phytohemagglutinin ,PHA ),刀豆蛋白A (Concanavalin A ,Con A )对淋巴细胞起着有丝分裂原的作用。
在丝裂原刺激的淋巴细胞培养上清中具有可溶性丝裂原因子1◆丝裂原( PHA )刺激的人外周血淋巴细胞培养上清加入体外培养的人白血病细胞或骨髓细胞之后,该上清可导致上述细胞的体外增殖,作者当时将种上清称为“ 条件培养基” (condition medium ,CM )。
表型分析及功能测定均证实,CM 诱导生长的细胞为正常T 细胞群体。
Gills 和Smith3等利用ConA 刺激的大鼠及小鼠CM 先后在体外建立了小鼠细胞毒性T 细胞(Cytotoxic TLymphocyte ,CTL )和辅助性T 细胞(helpT cell ,Th )克隆。
北京市2023-2024学年高二上学期期末考试生物试卷(含解析)

北京市2023-2024学年高二上学期期末考试生物试卷学校:___________姓名:___________班级:___________一、单选题1.某人大脑受到损伤,能读书看报,也能听懂别人说话,但却不会讲话,这表明他的大脑受伤的区域是()A.大脑皮层内侧面某一特定区域B.大脑皮层运动区C.大脑皮层感觉区D.大脑皮层言语区A.A B.B C.C D.D3.下列过程发生在人体内环境中的是()A.胰岛细胞合成胰岛素B.葡萄糖氧化分解产生丙酮酸C.氨基酸分子脱水缩合D.神经递质与受体结合4.外泌体是细胞释放的膜性小泡。
鼠的肥大细胞分泌的外泌体可以被人的肥大细胞捕获,并且其携带的mRNA可以进入细胞质中被翻译成蛋白质。
除mRNA外,外泌体所转移的mi-RNA(一类长度约为20-24个核苷酸的小RNA,其在细胞内具有多种重要的调节作用)进入靶细胞后可以靶向调节细胞中mRNA的水平。
以下说法不正确的是()A.外泌体的产生依赖于细胞膜的流动性B.mRNA可借助外泌体实现跨细胞翻译C.mi-RNA是一类催化mRNA水解的酶D.肥大细胞释放组织胺可引起过敏反应5.春节将至,疫情防控形势严峻,我市对疫情防控工作提出了新的要求,如坚持“人物同防、人物同查、人物同检”,严防境外疫情输入;从严从实加强重点场所、重点行业疫情防控:突出对重点人群做好核酸检测“应检尽检”工作;加大疫苗接种力度;做好个人防护。
下列有关说法错误的是()A.与抗体检测相比,核酸检测更利于排查早期感染者B.对接种过新冠疫苗的人,抗体检测的结果更加准确C.实施隔离措施的目的是控制传染源和切断传播途径D.戴口罩、勤洗手可阻断病毒突破第一道防线进入人体6.球场上,运动员奔跑、抢断、配合,下列相关生理活动叙述错误的是()A.运动员频繁奔跑,产热增加,体温会暂时升高B.长时间奔跑需要消耗肝糖原和肌糖原,用于供能C.比赛过程中运动员大量出汗,抗利尿激素水平升高D.运动员在比赛中心跳加快,只有副交感神经发挥作用7.如图表示对去甲状腺大鼠给予大剂量甲状腺激素后其机体耗氧量的变化,下列分析错误的是()A.甲状腺激素可加快细胞呼吸以维持大鼠的体温B.脑细胞的甲状腺激素受体数量可能少于胃黏膜细胞的C.甲状腺激素分泌过多可导致机体耐低氧能力下降D.对去甲状腺大鼠给予等量的清水作为对照组8.如图表示种群数量增长的“J”形曲线和“S”形曲线,下列有关叙述正确的是()A.自然状态下种群数量达到K值后将一直保持不变B.曲线X的数学模型为N t=N0λ,其中λ是大于1的定值C.渔业生产中一般在曲线Y所示B点开始捕捞以保证持续高产D.同一地区中不同种群因所处环境相同,K值也基本相近9.如图表示某河流生态系统的能量金字塔及相关食物网(甲、乙、丙为3种鱼,甲不摄食藻类,箭头指示能量流动方向)。
核酸适配体在临床诊断领域中的研究进展

核酸适配体在临床诊断领域中的研究进展核酸适配体是一类能够高灵敏、高特异性地与靶标相结合的寡核普酸序列,包括小分子化合物、细胞膜表面受体、蛋白质、金属离子等,具有超强的结合能力、低免疫原性、高稳定性等特点,同时能与各种药物及载体结合,构建多元复合靶向给药系统,目前已用于肿瘤的靶向治疗。
本文综述核酸适配体在临床诊断领域中的最新研究进展,为肿瘤疾病的靶向治疗提供新的干预方向,同时也为核酸适配体更为广阔的应用提供参考。
[Abstract] Aptamers is a class oligonucleotide sequence combinated with target of high sensitivity and high specificity,including small molecules,cell surface receptors,proteins,metal ions,etc.It has superior binding capacity,low immunogenicity,high stability and other characteristics,and can be combined with a variety of drugs and carriers to construct multiple composite targeted drug delivery system.At present,it has been used in cancer targeted therapy.This paper has reviewed the research progress of aptamers in clinical diagnostic field for the latest,to provide a new direction for the treatment of neoplastic diseases targeted interventions,while also to provide a reference for broader application prospects of aptamers.[Key words] Aptamers;Clinical diagnosis;Research progress核酸适配体是一类经过人工进化而筛选出的单链寡核苷酸片段,能特异、高亲和力地识别靶分子。
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(原创实用版4篇)
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序言
下面是本店铺为大家精心编写的4篇《一种白细胞介素10的突变体及其制备方法和应用》,供大家借鉴与参考。
下载后,可根据实际需要进行调整和使用,希望能够帮助到大家,谢射!
(4篇)
《一种白细胞介素10的突变体及其制备方法和应用》篇1
一种白细胞介素 10(IL-10)的突变体及其制备方法和应用如下:
1. 突变体构建:通过基因工程技术将 IL-10 基因进行突变,使得突变后的IL-10 蛋白能够更加稳定,且保持生物活性。
具体来说,可以在 IL-10 基因的特定位点进行点突变,将原来的核苷酸替换成其他核苷酸,从而得到 IL-10 突变体。
2. 制备方法:可以通过发酵或细胞培养等方法来制备 IL-10 突变体。
具体来说,可以将构建好的 IL-10 突变体基因克隆到表达载体中,转化到宿主细胞中,并通过发酵或细胞培养等方法来表达和纯化 IL-10 突变体蛋白。
3. 应用:IL-10 突变体可以用于治疗炎症性疾病、自身免疫性疾病等多种疾病。
具体来说,IL-10 突变体可以抑制炎症反应和免疫反应,从而减轻疾病的症状和损伤。
此外,IL-10 突变体还可以用于促进细胞分化和增殖,从而在组织修复和再生中发挥作用。
《一种白细胞介素10的突变体及其制备方法和应用》篇2
白细胞介素 10 (IL-10) 是一种细胞因子,具有抑制炎症反应和促进细胞分化增殖的作用。
突变体通常是指在基因序列中发生了改变的版本,可能导致蛋白质的结构和功能发生变化。
制备突变体的方法通常包括基因工程和蛋白质重组技术。
一种可能的白细胞介素 10 突变体是 IL-10R1,它是 IL-10 受体的一种亚型。
IL-10R1 突变体可以通过基因工程技术制备,例如使用基因合成技术或基因编辑技术。
这些技术可以将指定的突变引入 IL-10R1 基因序列中,然后通过重组表达宿主细胞来制备突变体蛋白质。
IL-10R1 突变体可以在医学研究和药物开发中应用。
例如,研究人员可以研究 IL-10R1 突变体对炎症反应的影响,以了解它们在疾病治疗中的潜在作用。
《一种白细胞介素10的突变体及其制备方法和应用》篇3
一种白细胞介素 10(IL-10)的突变体及其制备方法和应用如下:
1. 突变体构建:通过基因工程技术将 IL-10 基因进行突变,使得突变后的IL-10 能够更好地抑制炎症反应,同时保持其原有的促进细胞分化增殖的作用。
具体来说,可以在 IL-10 基因的启动子区域引入点突变,将原本的 ATG 启动子序列中的 -1081、-819、-591 三个位置的碱基突变为 CGT、CAT、CGA,从而增强其转录活性。
2. 制备方法:将突变后的 IL-10 基因克隆到表达载体中,通过转染或转化等方式将其导入细胞或组织中,使其表达出突变后的 IL-10 蛋白。
具体来说,可以将表达载体构建为真核表达载体或原核表达载体,使用转染剂或转化酶将其导入细胞或组织中,使其表达出突变后的 IL-10 蛋白。
3. 应用:突变后的 IL-10 可以用于治疗炎症性疾病,如风湿性关节炎、炎症性肠病等。
还可以用于促进细胞分化增殖,如促进造血干细胞分化为各种血细胞系列等。
此外,突变后的 IL-10 还可以用于免疫调节,如抑制过度激活的免疫系统,减轻自身免疫性疾病的症状等。
《一种白细胞介素10的突变体及其制备方法和应用》篇4
一种白细胞介素 10(IL-10)的突变体及其制备方法和应用如下:
1. 突变体构建:通过基因工程技术将 IL-10 基因的特定位点进行突变,构建得到 IL-10 突变体。
2. 制备方法:将 IL-10 突变体基因克隆到表达载体中,转化细胞表达,然后通过亲和层析等方法进行纯化,得到 IL-10 突变体蛋白。
3. 应用:将 IL-10 突变体蛋白用于治疗炎症性疾病,如炎症性肠病、自身免疫性疾病等。
IL-10 突变体蛋白能够抑制炎症细胞因子的产生,从而减轻炎症反应。
此外,IL-10 突变体还可以用于促进细胞分化增殖,如在干细胞治疗中促进干细胞向特定细胞类型的分化。
在实际应用中,可以根据需要对 IL-10 突变体进行进一步优化,如通过改变突变位点或调整表达水平等方法,以达到更好的治疗效果。