病理技术专业知识
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
(一)单纯固定液
甲醛:
1.浓度:40%,气体
2.渗透力强,固定均匀,组织收缩小,
3.不能使白蛋白和核蛋白沉淀
4.保存脂类,必须用冷冻切片。是糖的保护剂
5.可固定高尔基体,线粒体
重铬酸钾
1.浓度:1%-3%水溶液,有毒,橘红色结晶
2.穿透速度快,几乎不收缩,经乙醇脱水后明显收缩,
3.未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀,但可使蛋白质变为脂溶剂。
酸化后可使蛋白质沉淀,此时染色体可被保存,但线粒体破坏。
4.固定高尔基体和线粒体有良好效果。
5.酸性染料着色好,碱性染料着色差
6.固定的组织需经流水冲洗12-24h,或用亚硫酸盐洗涤。
苦味酸
1.黄色结晶体,是一种强酸,易燃易爆,配成饱和溶液储藏
2.穿透慢,组织收缩明显,无明显硬化。
3.能沉淀一切蛋白质
4.对脂肪和类脂无固定作用。
5. 可软化皮肤和火棉胶,不宜用火棉胶包埋
6. 固定时间不宜超过24h,
7. 固定的组织应尽快放入70%乙醇,滴加饱和碳酸锂或浓氨水,有助于除去苦味酸固定产生的黄色。
升汞
1. 浓度为5%-7%的水溶液,针状结晶
2.穿透力低,只宜固定薄片组织,单独应用组织收缩明显
3, 对蛋白质有固定作用,
4. 对类脂和糖类无固定作用
5. 临用时加冰醋酸
醋酸
1. 刺激性气味的无色液体,低于15℃为冰醋酸
5%的醋酸PH为2-8,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶。
2. 穿透力强
3 不能沉淀白蛋白,球蛋白,但能沉淀核蛋白
4 不能固定脂肪和内酯,不能保存糖
5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸,可较好的保存染色体
6, 缺点是组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白
铬酸
1.为三氧化铬的水溶液,浓度%-1%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合
2 穿透力弱,一般组织需固定12-24h,固定的组织有收缩,
3 能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好。
4 对脂肪无固定作用
5 固定线粒体和高尔基复合体
6. 宜避光保存,以防蛋白质溶解。
7. 必须彻底流水冲洗(≥24h)。
锇酸(四氧化锇)
1.淡黄色结晶,剧毒,浓度1%-2%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合
2. 渗透力极弱,易使组织变硬,延长固定时间,组织的脆性增加,对染色不利。
3. 固定均匀,不沉淀蛋白质。
4.为脂类固定剂
5. 适用于线粒体和内质网的固定
6. 为电镜研究的必须固定剂。
7. 固定目的不同,配方和浓度根据需要改变
8. 固定后对碱性染料亲和力强,细胞核的染色效果好
9. 应在临用前前几天配制以保证充分溶解。
丙酮
1.易挥发,易燃的无色液体,可与水,醇,氯仿,醚混合
2. 渗透力强,对核的固定差
3. 可使蛋白质沉淀
4. 作用基本与乙醇相同,但对糖原无固定作用
5.广泛用于酶组织化学中各种酶的固定
乙醇
1. 无色液体,,还原剂,可与水无限相溶,有固定兼脱水作用
用于固定的浓度为80%-95%
2.渗透力弱,固定速度较慢,易使组织变脆,无水乙醇固定时,穿透速度快,渗透力差,使组织收缩
3.,能沉淀白蛋白,球蛋白,核蛋白
4. 用于糖原的固定
5. 50%以上乙醇可溶解脂肪和类脂体,并可溶解血红蛋白,对其他色素也有破坏。
三氯醋酸
1. 为无色易潮解的结晶体,水溶液为强酸性,易溶于醇和醚,应密封保存
2. 也是一种良好的脱钙剂
(二)混合固定液
B-5固定液(醋酸钠-升汞-甲醛)
1.多用于固定淋巴组织,
2. 染色前应进行脱汞处理
3. 配方:无水醋酸钠,升汞6g,甲醛10ml,蒸馏水90ml.
Bouin液
1.有一定毒性,应避免吸入或与皮肤接触
2. 固定液偏酸,对抗原有一定损害,使组织收缩,不适宜标本的长期保存
3. 固定效果好,组织细胞结构完整。细胞核着色鲜明,细胞质着色较差。
4. 对脂肪固定效果好,尤适用于含脂肪的淋巴结,乳腺组织和脂肪瘤标本
5.适用于结缔组织染色,尤其是三色染色更为理想。
6. 配方:饱和苦味酸水溶液:甲醛水溶液:冰醋酸=15:5::1
Carnoy液
1.有防止乙醇的硬化和收缩作用,增加渗透力,外膜致密的组织可用其固定
2. 固定速度快,3mm厚组织块1h内即可固定,大块组织不超过4h。
3,固定细胞质和细胞核,对于染色体固定佳,显示DNA,RNA效果好。
4.常用于糖原和尼氏体的固定
5.不能保存脂类,不适用脂肪染色。
6. 配方:冰醋酸10ml,氯仿30ml,无水乙醇60ml
Muller液
1. 作用缓慢,固定均匀,组织收缩小
2. 多用于媒染和硬化神经组织
3. 固定过程中,需常更换新鲜的液体
4.配方:重铬酸钾,硫酸钠,蒸馏水100ml
Orth液
1. 渗透力强,组织收缩小
2. 应临时配置,在暗处固定,固定24h左右,固定液变为黑色时不可用,固定后流
水冲洗12-24h。
3. 固定胚胎组织,神经组织。脂肪组织
4. 配方:重铬酸钾,硫酸钠,蒸馏水100ml,37%-40%的甲醛10ml(用时加入)
PFG液
1. 适用于多种肽类抗原的固定,多用于免疫电镜研究
2. 对细胞抗原性和结构保存好
3. 配方:对苯醌20g,多聚甲醛15g,25%戊二醛40ml,L二甲砷酸钠缓冲液
1000ml。