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(一)单纯固定液

甲醛:

1.浓度:40%,气体

2.渗透力强,固定均匀,组织收缩小,

3.不能使白蛋白和核蛋白沉淀

4.保存脂类,必须用冷冻切片。是糖的保护剂

5.可固定高尔基体,线粒体

重铬酸钾

1.浓度:1%-3%水溶液,有毒,橘红色结晶

2.穿透速度快,几乎不收缩,经乙醇脱水后明显收缩,

3.未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀,但可使蛋白质变为脂溶剂。

酸化后可使蛋白质沉淀,此时染色体可被保存,但线粒体破坏。

4.固定高尔基体和线粒体有良好效果。

5.酸性染料着色好,碱性染料着色差

6.固定的组织需经流水冲洗12-24h,或用亚硫酸盐洗涤。

苦味酸

1.黄色结晶体,是一种强酸,易燃易爆,配成饱和溶液储藏

2.穿透慢,组织收缩明显,无明显硬化。

3.能沉淀一切蛋白质

4.对脂肪和类脂无固定作用。

5. 可软化皮肤和火棉胶,不宜用火棉胶包埋

6. 固定时间不宜超过24h,

7. 固定的组织应尽快放入70%乙醇,滴加饱和碳酸锂或浓氨水,有助于除去苦味酸固定产生的黄色。

升汞

1. 浓度为5%-7%的水溶液,针状结晶

2.穿透力低,只宜固定薄片组织,单独应用组织收缩明显

3, 对蛋白质有固定作用,

4. 对类脂和糖类无固定作用

5. 临用时加冰醋酸

醋酸

1. 刺激性气味的无色液体,低于15℃为冰醋酸

5%的醋酸PH为2-8,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶。

2. 穿透力强

3 不能沉淀白蛋白,球蛋白,但能沉淀核蛋白

4 不能固定脂肪和内酯,不能保存糖

5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸,可较好的保存染色体

6, 缺点是组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白

铬酸

1.为三氧化铬的水溶液,浓度%-1%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合

2 穿透力弱,一般组织需固定12-24h,固定的组织有收缩,

3 能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好。

4 对脂肪无固定作用

5 固定线粒体和高尔基复合体

6. 宜避光保存,以防蛋白质溶解。

7. 必须彻底流水冲洗(≥24h)。

锇酸(四氧化锇)

1.淡黄色结晶,剧毒,浓度1%-2%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合

2. 渗透力极弱,易使组织变硬,延长固定时间,组织的脆性增加,对染色不利。

3. 固定均匀,不沉淀蛋白质。

4.为脂类固定剂

5. 适用于线粒体和内质网的固定

6. 为电镜研究的必须固定剂。

7. 固定目的不同,配方和浓度根据需要改变

8. 固定后对碱性染料亲和力强,细胞核的染色效果好

9. 应在临用前前几天配制以保证充分溶解。

丙酮

1.易挥发,易燃的无色液体,可与水,醇,氯仿,醚混合

2. 渗透力强,对核的固定差

3. 可使蛋白质沉淀

4. 作用基本与乙醇相同,但对糖原无固定作用

5.广泛用于酶组织化学中各种酶的固定

乙醇

1. 无色液体,,还原剂,可与水无限相溶,有固定兼脱水作用

用于固定的浓度为80%-95%

2.渗透力弱,固定速度较慢,易使组织变脆,无水乙醇固定时,穿透速度快,渗透力差,使组织收缩

3.,能沉淀白蛋白,球蛋白,核蛋白

4. 用于糖原的固定

5. 50%以上乙醇可溶解脂肪和类脂体,并可溶解血红蛋白,对其他色素也有破坏。

三氯醋酸

1. 为无色易潮解的结晶体,水溶液为强酸性,易溶于醇和醚,应密封保存

2. 也是一种良好的脱钙剂

(二)混合固定液

B-5固定液(醋酸钠-升汞-甲醛)

1.多用于固定淋巴组织,

2. 染色前应进行脱汞处理

3. 配方:无水醋酸钠,升汞6g,甲醛10ml,蒸馏水90ml.

Bouin液

1.有一定毒性,应避免吸入或与皮肤接触

2. 固定液偏酸,对抗原有一定损害,使组织收缩,不适宜标本的长期保存

3. 固定效果好,组织细胞结构完整。细胞核着色鲜明,细胞质着色较差。

4. 对脂肪固定效果好,尤适用于含脂肪的淋巴结,乳腺组织和脂肪瘤标本

5.适用于结缔组织染色,尤其是三色染色更为理想。

6. 配方:饱和苦味酸水溶液:甲醛水溶液:冰醋酸=15:5::1

Carnoy液

1.有防止乙醇的硬化和收缩作用,增加渗透力,外膜致密的组织可用其固定

2. 固定速度快,3mm厚组织块1h内即可固定,大块组织不超过4h。

3,固定细胞质和细胞核,对于染色体固定佳,显示DNA,RNA效果好。

4.常用于糖原和尼氏体的固定

5.不能保存脂类,不适用脂肪染色。

6. 配方:冰醋酸10ml,氯仿30ml,无水乙醇60ml

Muller液

1. 作用缓慢,固定均匀,组织收缩小

2. 多用于媒染和硬化神经组织

3. 固定过程中,需常更换新鲜的液体

4.配方:重铬酸钾,硫酸钠,蒸馏水100ml

Orth液

1. 渗透力强,组织收缩小

2. 应临时配置,在暗处固定,固定24h左右,固定液变为黑色时不可用,固定后流

水冲洗12-24h。

3. 固定胚胎组织,神经组织。脂肪组织

4. 配方:重铬酸钾,硫酸钠,蒸馏水100ml,37%-40%的甲醛10ml(用时加入)

PFG液

1. 适用于多种肽类抗原的固定,多用于免疫电镜研究

2. 对细胞抗原性和结构保存好

3. 配方:对苯醌20g,多聚甲醛15g,25%戊二醛40ml,L二甲砷酸钠缓冲液

1000ml。

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