淀粉样物质染色液(改良Stores刚果红法)
组成：
编号 名称 试剂(A): Stores 刚果红染色液 试剂(B): Leagene 苏木素染色液 试剂(C): 酸性分化液 试剂(D): Stores 返蓝液 使用说明 书
DG002 5 Storage
4×50mml RT
1份
操作步骤(仅供参考)：
染色结果：
淀粉样物质、弹力纤维、嗜伊红颗粒 红色
细胞核
蓝色
注: 在偏光显微镜下，淀粉样物质呈黄绿色的双折光。
北京雷根生物技术有限公司
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。 2、 酸性乙醇 分化液应密闭保存，一旦开启尽快用完。 3、 Stores 刚果红染色液染色时尽量采用浸染，如果滴染，应置于湿盒防止溶液挥发。 4、 酸性分化液应密闭保存，分化步骤 很重要 。
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淀粉样物质染色液(改良 Stores 刚果红法)
简介：
淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官导致 的疾病称为淀粉样变。淀粉 样物质主要是由蛋 白质构成，该蛋白 大部分排列成反向 的β-折 叠层结构。目前研究发 现传统的甲紫染色 法灵敏度低、特 异性差，经典的 而且有效的方法 是刚果红染色，1922 年 Bennhold 发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别，并应 用到组织切片,淀粉样物质染色液(改良 Stores 刚果红法)，主要由 Stores 刚果红染色液和苏 木素染色液组成，碱性刚果红染色无分化步骤，但保存时间较短。
1、常规固定，常采用 10%的中性福尔马林，常规脱水包埋。 2、切片厚度 4μm，常规脱蜡至水。 3、入 Stores 刚果红染色液浸染，弃余液。 5、无需分化，自来水冲洗。 6、入 Leagene 苏木素染色液浅染细胞核。 7、滴加酸性分化液分化，滴加 Stores 返蓝液返蓝。 8、自来水冲洗。 9、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏（Loeffler）美蓝染色液A液：美蓝（Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH）0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成.2、齐氏(Ziehl）石炭酸复红染色液A液：碱性复红（Basic fuchsin）0.3 克95%酒精10。
O 毫升B液：石炭酸(苯酚）5。
0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订）A液：结晶紫（Crystai violet）2。
5 克95%酒精25。
0 毫升B液：草酸铵（NH4）2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95％酒精，使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏（LugoI)碘液（革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2。
0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用）番红O（Safranin O) 2。
0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green）5。
0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素（Nigrosin）10。
0克蒸馏水100毫升福尔马林（40%甲醛）0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red）2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3） 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20。
0毫升乳酸(比重l.21) 10。
0毫升棉蓝0。
02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝，溶解即成。
两种刚果红染色方法的比较
有关（ Ｐ＝０ ． ０ ０外 ， 其余 病 例 均显示 坏 死 同 时 伴 有 核 分 裂 指 数 ≥５个／ １ ０ Ｈ Ｐ Ｆ 。Ｂ Ｒ Ａ Ｆ
Ｖ ６ ０ ０ Ｅ突变的患者与 Ｂ Ｒ Ａ Ｆ Ｖ ６ ０ ０ Ｅ非突变患者相 比 ， 有显 著 较长的总体生存 时 间 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ２ ０ ） 。Ｐ Ｘ Ａ Ａ Ｆ患者 相对 于 无 问变特征的患者而言 ， 无论 年龄其 总体生存 时间均明显较 短 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ０ ０ ３ ） ， 但无复发 生存 时间仅成人 Ｐ Ｘ Ａ — Ａ Ｆ明显较 短 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ４ ７ ） 。３年 内复发或者 死亡 的患 者大多 是首 次诊 断
・
１ ３ １ ０・
临 床 与 实验 病 理 学杂 志
Ｊ Ｃ ｌ ｉ ｎ Ｅ ｘ ｐ Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ ２ ０ １ ５ Ｎ ｏ ｖ ； ３ １ （ １ １ ）
质的背景着色 ， 但效果 不是 很理想。
３ 讨论
本 组 在 Ｈｉ ｇ ｈ ｍａ ｎ甲醇 刚果 红 染 色 中发 现 ， 肾 穿 刺 组 织 染 色 时 间增 加 到 ２ ５ ｍ ｉ ｎ而不 需 要 分 化 。这 可 能 与 组 织 中 淀 粉
物质呈鲜红色 ， 可与黏膜上皮层 的复层扁平 的蓝色细胞 核 区 分 Ｊ 。沉积在肾小球 系膜 区和毛细血管 基膜 的淀粉样 物被
甲醇 刚 果 红 染 成 红 色 ， 而周 围无 沉 积 的 毛 细 血管 、 近 曲小 管 、
生 出版 社 ， ２ ０ １ ０ ： １ ４ ７— ５ ２ ．
远 曲小管等不被着色 。甲状 腺组织 中呈 片状 淀粉样 物质 在清晰 、 分明的色彩下可准确的判 断出存 在的部 位 。 Ｆ ｒ ｅ ｕ ｄ ｅ ｎ ｔ ｈ ａ ｌ 氏刚果红 ： 淀粉 样物 质呈 鲜红 色 ， 细胞 核呈 蓝色 。喉部 、 肾穿刺组织 、 甲状 腺 组织 中易着 色 ， 色彩浓 郁 ， 切 片呈红色 ， 背景着色较 强。另喉部 的黏膜 上皮 也易着 色 。 实验过程 中作者 曾试 图适 当延长苏木精 的时 间， 中和部分 间
特殊染色
结缔组织染色法Mallory三色染色法：胶原和网状纤维蓝色，软骨、淀粉样变物质淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞橘红色。
2.Masson三色染色法：胶原纤维绿色，肌纤维红色，红细胞橘红色。
鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。
3.三联染色法：胶原纤维红色，网状纤维黑色，弹性纤维绿色，肌肉和红细胞淡黄色。
二.胶原纤维染色1.Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法：胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，胞核蓝褐色。
与胶原纤维染色相比的缺点是：易褪色和对比度差。
2.天狼星红（Sirius Red）苦味酸染色法：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。
在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。
三.网状纤维染色：包括：Gomori和James。
Gomori银氨染色法：网状纤维黑色，胶原纤维红色。
鉴别诊断中的应用：1）癌和肉瘤的鉴别。
2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。
3）血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。
4）黏液纤维瘤和黏液肉瘤。
四.弹性纤维染色：效果最好的固定液是：甲醛生理盐水。
Gomori醛复红染色法：弹力纤维深紫色，黏液紫色（肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色），背景不同程度的黄色。
1）配制后需在室温静置1-2日。
2）是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。
3）醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。
3)可使胃主细胞着色。
5）应放置在冰箱内保存。
五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法：维多利亚蓝+丽春红S：弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。
六.横纹肌组织染色：Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色；胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。
1）要在室温下成熟。
2）可使用高锰酸钾促使PATH成熟。
3）乙醇分化时要保存一定的红色。
4）染色后用无水乙醇快速脱水，冷风稍干燥后封固。
七.糖类染色：过碘酸的作用是氧化。
过碘酸-Schiff（PAS）染色法：糖原及其他PAS反应阳性物质红色，细胞核蓝色。
淀粉样物质染色液(Bennhold刚果红法)
染色结果：
淀粉样物质
红色
细胞核
蓝色
注: 在偏光显微镜下，淀粉样物质呈黄绿色的双折光。
北京雷根生物技术有限公司
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。 2、 酸性乙醇 分化液应密闭保存，一旦开启尽快用完。 3、 刚果红染色液染色时尽量采用浸染，如果滴染，应置于湿盒防止溶液挥发。。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
50ml RT
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、常规固定，常采用 10%的中性福尔马林，常规脱水包埋。 2、切片厚度 4μm，常规脱蜡至水。 3、入 Bennhold 苏木素浸染。 4、酸性乙醇分化，立即入水终止分化，水洗 2 次后镜下控制至恰当程度。 5、自来水冲洗。 6、入 Scott 蓝化液返蓝。自来水冲洗。 8、入刚果红染色液浸染。 9、Bennhold 分化液迅速分化。 11、自来水冲洗 1～2min。 12、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。
组成：
编号 名称 试剂(A): Bennhold 苏木素染色液 试剂(B): 酸性乙醇分化液 试剂(C): Scott 蓝化液 试剂(D): 刚果红染色液 试剂(E): Bennhold 分化液 使用说明 书
DG002 1 5×50ml
Storage
50ml RT 避光
50ml RT
50ml RT
50ml RT 避光
北京雷根生物技术有限公司
淀粉样物质染色液(Bennhold 刚果红法)
简介：
淀粉样物质是一种无固 定形状的细胞外 嗜酸性物质， 可存在于不同的 组织、器官，导 致的疾病称为淀粉样变 。目前研究发现传 统的甲紫染色法 灵敏度低、特异 性差，经典的而 且有效的方法是刚果红染色，1922 年 Bennhold 发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质 的鉴别，并应用到组织切片。淀粉样物质染色液(Bennhold 刚果红法)主要由刚果红染色液、 苏木素染色液等组成。该染色法性能稳定，是非常经典的淀粉样物质染色的方法。
刚果红染色法
3、刚果红染色法分离纤维素分解菌
这一步所需要的仪器有：无菌培养皿、涂布器、1mL移液管，装有9mL无菌水的20mL大试管，温箱等。
培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。
在500mL三角瓶中装入200mL培养基，在121℃下高压蒸汽灭菌20min。
倒平板操作：将灭菌后的固体培养基熔化，按无菌操作的要求，在无菌的培养皿中倒入15～20mL培养基，凝固后待用。
制备菌悬液：按照本专题课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数至106。
涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液涂布均匀，在30℃倒置培养，至菌落长出。
每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对照。
刚果红染色法：
常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。
方法一在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mI。
的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物质的量浓度为l mol／I。
的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl 溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。
方法二配制质量浓度为10 mg／mI。
的CR溶液，灭菌后，按照每200 mI。
培养基加入1 mI。
的比例加入CR溶液，混匀后倒平板。
等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。
病理学技术(主管技师)考试：2022病理学技术专业知识和专业实践能力真题模拟及答案(1)
病理学技术(主管技师)考试：2022病理学技术专业知识和专业实践能力真题模拟及答案(1)共643道题1、可同时进行光镜和电子显微镜检测的包埋法是（）（单选题）A. 火棉胶包埋法B. 树脂包埋法C. 塑料包埋法D. 碳蜡包埋法E. 明胶包埋法试题答案：C2、关于显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法的描述，正确的是（）（单选题）A. 胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹性纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色B. 胶原纤维呈黑色，网状纤维呈绿色，弹性纤维呈黄色，肌肉和红细胞呈淡红色C. 胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹性纤维呈黄色，肌肉和红细胞呈淡绿色D. 胶原纤维呈黑色，网状纤维呈红色，弹性纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色E. 胶原纤维呈红色，网状纤维呈绿色，弹性纤维呈黑色，肌肉和红细胞呈淡黄色试题答案：A3、免疫组织化学染色APAAP法的原理是（）（单选题）A. 将亲和素-生物素-过氧化物酶复合物中的亲和素替换为链亲和素，特异性更高B. 利用线状的葡聚糖分子与大量的AP或HRP酶结合，再将葡聚糖-酶复合物连接到第二抗体上，形成酶-葡聚糖-第二抗体复合物，灵敏度高C. 用AP取代PAP法的过氧化物酶而成，显色对比好D. 将游离酶和抗酶抗体制成稳定的酶-抗酶抗体复合物E. 通过复合物中亲和素的桥梁作用，将亲和素-生物素-过氧化物酶复合物与生物素化的抗体结合在一起，达到检测抗原的目的试题答案：C4、在进行脂肪染色和神经组织髓鞘染色中常用（）（单选题）A. 冷冻切片法B. 火棉胶切片法C. 震动切片D. 超薄切片E. 石蜡切片法试题答案：A5、关于使用刚果红进行淀粉样物质染色时，需注意的问题不包括（）（单选题）A. 苏木精染色的细胞核不能深B. 淀粉样物质可以结合偏光的方法得到良好的效果C. 观察时应结合HE切片D. 在偏光显微镜下呈特征性的红色双折光性E. 由于无水乙醇有脱色作用，脱水后即用冷风干燥，再透明封固试题答案：D6、对于组织固定后的脱水，下面的描述不正确的是（）（单选题）A. 脱水是借某些溶媒置换组织内水分的过程B. 脱水剂必须能与水以任意比例混合C. 根据固定剂的要求选择脱水剂D. 根据被固定组织的要求选择脱水剂E. 乙醇是最常用的脱水剂试题答案：D7、门诊患者查询病理学检查资料的期限是（）（单选题）A. 送检后5年B. 送检后10年C. 送检后15年D. 送检后20年E. 送检后25年试题答案：C8、下列关于Wachstein-Meisel镁激活酶法检测ATP的叙述，错误的是（）（单选题）A. 缓冲液pH7.2B. 甲醛固定C. 甘油明胶封片D. 酶活性呈棕黑色E. 可见于肝脏的毛细胆管试题答案：B9、抗酸杆菌染色最基本的染料是（）（单选题）A. 酸性复红B. 碱性复红C. 中性红D. 结晶紫E. 亚甲蓝试题答案：B10、肾活检石蜡包埋切片常用的固定液有（）（单选题）A. 缓冲甲醛B. 80%乙醇D. 多聚甲醛E. 无水乙醇试题答案：A11、灰度与图像纹理属于（）（单选题）A. 几何学参数B. 体视学参数C. 特化参数D. 三维参数E. 光度学参数试题答案：E12、应用尚无文献报道的抗血清或自己制备的抗血清进行免疫酶组织细胞化学染色时，必须设置的对照是（）（单选题）A. 交叉实验B. 替代实验C. 吸收实验D. 置换实验E. 阳性对照试题答案：C13、纤维蛋白（）（单选题）A. James染色B. 维多利亚蓝染色C. 丽春红S染色D. PTAH染色试题答案：D14、下面的固定液中含有过碘酸钠的是（）（单选题）A. Zenker液B. PFG液C. PLP液和PLPD液D. 4%多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠液E. Müller液试题答案：C15、光度学参数包含（）（单选题）A. 偏心度B. 光密度C. 粒子面数密度D. 边凹度E. 面积密度试题答案：B16、免疫组织化学PAP法的原理是（）（单选题）A. 将亲和素-生物素-过氧化物酶复合物中的亲和素替换为链亲和素，特异性更高B. 利用线状的葡聚糖分子与大量的AP或HRP酶结合，再将葡聚糖-酶复合物连接到第二抗体上，形成酶-葡聚糖-第二抗体复合物，灵敏度高C. 用AP取代PAP法的过氧化物酶而成，显色对比好D. 将游离酶和抗酶抗体制成稳定的酶-抗酶抗体复合物E. 通过复合物中亲和素的桥梁作用，将亲和素-生物素-过氧化物酶复合物与生物素化的抗体结合在一起，达到检测抗原的目的试题答案：D17、病理大体标本制作中对实质性器官的取材，下面的方法正确的是（）（单选题）A. 肝脏，用长刀沿肝脏短轴切成均匀的若干片，厚约5cmB. 肝脏，用长刀沿肝脏短轴切成均匀的若干片，厚1～2cmC. 肝脏，用长刀沿肝脏长轴均匀切成若干片，厚1～2cmD. 肝脏，用长刀沿肝脏长轴均匀切成若干片，厚约5cmE. 肾脏，用刀自肾门向肾外侧切开试题答案：C18、组织脱水剂中，用下面哪种脱水后可不经透明直接浸蜡（）（单选题）A. 叔丁醇B. 还氧己环C. 异丙醇D. 丙酮E. 乙醇试题答案：A19、下列不是神经纤维的染色方法的是（）（单选题）A. Holmes染色法B. Bielschowsky染色法C. VonBraunmubl染色法D. Kultsclutzky染色法E. Eager染色法试题答案：D20、实验中需给小鼠口服某药物，现查到人用量为一次静脉（成人体重60kg）300mg，将该药配成5%溶液，试计算一只25g体重小鼠需多少毫升（）（单选题）A. 0.5mlB. 0.4mlC. 0.6mlD. 0.45mlE. 0.65ml试题答案：A21、尸体剖检时的尸检记录可以不包括（）（单选题）A. 对有关尸体及其死亡征象的确认B. 体表检测所见C. 体腔检测所见D. 脏器检测所见E. 医院和死者家属对死亡的陈述试题答案：E22、免疫组织化学染色间接法的特点是（）（单选题）A. 将标记物标记在第一抗体上B. 将标记物标记在第二抗体上C. 同时标记第一抗体和第二抗体D. 特异性高，敏感性强E. 需要高浓度的第一抗体试题答案：B23、下列染色法不能用于显示纤维蛋白的是（）（单选题）A. HE染色B. MSB染色法C. 甲紫染色法D. PAS染色E. Masson三色染色试题答案：E24、过碘酸-无色品红(PAS)法中，过碘酸的作用是（）（单选题）A. 水解B. 漂白C. 氧化D. 还原E. 媒染试题答案：C25、氯仿作为组织处理过程中的透明剂，特点是（）（单选题）A. 透明能力强于二甲苯B. 透明能力不及二甲苯C. 氯仿不易挥发D. 主要用于小块组织透明E. 氯仿极易使组织变硬变脆试题答案：B26、天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察结果不正确的是（）（单选题）A. Ⅰ型胶原纤维：排列紧密，显示强的双折光性，呈黄色或红色B. Ⅱ型胶原纤维：显示弱的双折光，呈多种色彩的疏松网状分布C. Ⅲ型胶原纤维：显示弱的双折光，呈绿色的细纤维D. Ⅳ型胶原纤维：显示弱的双折光的基膜呈淡黄色E. Ⅴ型胶原纤维：排列疏松，显示强的双折光性，呈绿色试题答案：E27、甲醛溶液保存病理大体标本时，不能保留标本的原有颜色可能的原因是（）（单选题）A. 甲醛使组织收缩B. 甲醛使组织硬化C. 甲醛破坏血红蛋白D. 甲醛破坏白细胞E. 甲醛破坏血小板试题答案：C28、特别适用于固定脂肪组织和组织化学染色（）（单选题）A. 乙醚-乙醇液B. 乙醇-甲醛液C. 中性缓冲甲醛液D. 甲醛-钙液E. 丙酮试题答案：D29、能同时显示髓鞘和尼氏小体的染色方法是（）（单选题）A. Weigert-Pal染色法B. Marchi染色法C. Kullshitsky染色法D. Luxolfastblue染色法E. Weil染色法试题答案：D30、显微摄影时彩色画面的背景带有红或蓝的颜色，下列纠正措施不正确的是（）（单选题）A. 应用色温平衡滤色镜以平衡色温B. 提高照明灯泡的电压C. 降低照明灯泡的电压D. 换用新灯泡E. 灯光型彩色片加用LBD-2N色温平衡滤色镜试题答案：E31、关于真菌的描述错误的是（）（单选题）A. 真菌又称霉菌B. 真菌的基本结构成分是黏多糖和蛋白质C. 放线菌和白色念珠菌不是真菌D. 由于抗生素的广泛应用导致几年来真菌感染的发病率增高E. 免疫缺陷患者真菌感染的概率增加试题答案：C32、可用于胚胎组织、神经组织和脂肪组织固定（）（单选题）A. B-5固定液B. Bouin固定液C. Rossman液D. Müller液E. Orth液试题答案：E33、常用的组织固定方法错误的是（）（单选题）A. 蒸汽固定法B. 注射灌注固定法C. 浸入固定法D. 紫外固定法E. 微波固定法试题答案：D34、计算机病理档案管理系统应具有的功能包括（）（单选题）A. 信息输入B. 分类统计C. 按需检索D. 资料备份及输出E. 以上都是试题答案：E35、单纯固定液属于剧毒品，是电镜研究的必需固定剂的是（）（单选题）A. 锇酸B. 三氯醋酸C. 苦味酸D. 醋酸E. 升汞试题答案：A36、肿物穿刺取材室的基本设施不包括（）（单选题）A. 室内紫外线消毒设备B. 穿刺用器械和器械柜C. 石蜡切片机D. 用于实施穿刺术的检查床、椅E. 穿刺、急救用药物和药品柜试题答案：C37、显示淀粉样蛋白最常用的方法是（）（单选题）B. 硫酸钠爱尔森蓝法C. 刚果红法D. 氧化苏木红法E. 诱导荧光法试题答案：C38、丽春红S(Ponceau染色液)染色胶原纤维显示（）（单选题）A. 绿色B. 红色C. 黄色D. 蓝色E. 黑色试题答案：B39、疑似印戒细胞癌组织可选用下列哪种染色方法明确其黏液性质（）（单选题）A. 马休黄猩红蓝染色法B. Schiff阿尔辛蓝地衣红染色法C. 过碘酸希夫染色法D. Jurgens甲基紫染色法E. 刚果红染色法试题答案：B40、恶性黑色素瘤的诊断（）（单选题）A. Lillie亚铁染色法B. Schiff阿尔辛蓝地衣红染色法C. 磷钨酸苏木精（PTAH）染色法E. Gomori银染色法试题答案：A41、校正照片所偏的颜色为红色时，需要加用的彩色补偿滤色镜为（）（单选题）A. 蓝B. 绿C. 青D. 品红E. 黄试题答案：C42、Ziehl-Neelsen抗酸菌染色将抗酸菌染为（）（单选题）A. 红色B. 灰蓝色C. 蓝绿色D. 黄色E. 紫色试题答案：A43、病理大体标本制作中对实质性器官的取材，下面的方法正确的是（）（单选题）A. 肝脏，用长刀沿肝脏短轴切成均匀的若干片，厚约5cmB. 肝脏，用长刀沿肝脏短轴切成均匀的若干片，厚1～2cmC. 肝脏，用长刀沿肝脏长轴均匀切成若干片，厚1～2cmD. 肝脏，用长刀沿肝脏长轴均匀切成若干片，厚约5cmE. 肾脏，用刀自肾门向肾外侧切开试题答案：C44、通常动物进行灌注固定时，先用下面哪种混合固定液进行灌注，取材后再浸泡在固定液中（）（单选题）A. 4%多聚甲醛-0.1mol／L磷酸缓冲液（pH7.3）B. PFG液C. 中性甲醛液D. 4%多聚甲醛-磷酸二钠／氢氧化钠液E. 乙醚-乙醇液试题答案：A45、关于冷冻干燥包埋法错误的描述是（）（单选题）A. 可保存组织内可溶性物质，防止蛋白质变性B. 可保存组织内酶的活性，减少抗原的丢失C. 可用于免疫荧光标记D. 可用于放射自显影E. 适合电镜标本制备试题答案：E46、下列关于荧光显微镜标本制作的描述，错误的是（）（单选题）A. 载玻片厚度应在1.5～2.0mm之间B. 盖玻片厚度在0.17mm左右C. 组织切片不能太厚D. 封裱剂常用甘油E. 暗视野荧光显微镜观察标本时必须使用镜油试题答案：A47、用于三磷酸腺苷酶的染色法是（）（单选题）A. Gomori钙钴法B. Gossrau偶氮吲哚酚法C. Leder-Stutt改良萘酚AS-TR磷酸酯法D. Wachstein-Meisel镁激活酶法E. Snell-Garrett胆碱铜法试题答案：D48、与PAP法有关的复合物是（）（单选题）A. 抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物B. 过氧化物酶-抗过氧化物酶C. 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶D. 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶复合物E. 抗体-亲和素-生物素过氧化物酶复合物试题答案：B49、关于使用MSB染色法进行纤维蛋白染色的叙述错误的是（）（单选题）A. 纤维蛋白呈红色B. 陈旧纤维蛋白呈黄色C. 无水乙醇快速脱水后，稍干燥，再透明和封固D. 可以使用Masson三色法进行对照染色E. 亮结晶猩红6R染料可用酸性复红代替试题答案：B50、免疫组织化学染色间接法的特点是（）（单选题）A. 将标记物标记在第一抗体上B. 将标记物标记在第二抗体上C. 同时标记第一抗体和第二抗体D. 特异性高，敏感性强E. 需要高浓度的第一抗体试题答案：B51、将荧光抗体和未标记的抗体球蛋白等量混合后，对已知阳性抗原的切片进行处理，结果为阴性，此试验为（）（单选题）A. 阳性对照B. 染色抑制试验C. 凝集试验D. 自身对照E. 类属抗原染色试验试题答案：B52、患者，女，52岁，出现刺激性干咳就诊，胸部X线片及CT示：两肺多发结节，最大直径15mm，考虑多发转移瘤。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表B 1.2 Mssson三色法图表C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
浅谈淀粉样变性肾病的染色方法体会
浅谈淀粉样变性肾病的染色方法体会摘要目的探讨淀粉样变性肾病的染色方法及体会。
方法对15例淀粉样变性肾病患者的活检标本进行常规染色、刚果红、高锰酸钾氧化刚果红染色后以偏振光显微镜观察，同时予以免疫荧光、免疫组化染色，使用透视电镜观察，分析淀粉样变性肾病的染色方法及效果。
结果15例标本可见淀粉样蛋白沉积区HE呈均质、淡染的嗜伊红状，PASM染色呈毛刷样结构，刚果红染色呈砖红色、偏振光下呈青绿色。
免疫组化染色中AA染色均为阴性，κ染色显示14例为阴性，λ染色显示14例为阳性。
电镜下观察有纤维状结构且排列紊乱。
结论对淀粉样变性肾病需采用多种染色方法结合效果较好，使用碱性刚果红染色较为便利使用，使用免疫组化染色后透视电镜观察有助于发现早期不典型病变。
关键词淀粉样变性肾病；病理技术；染色方法肾脏是淀粉样变性常见的受累器官，约占肾活检的1.25%，多发生于年龄在50岁以上的老年人群中。
淀粉样变性肾病是指淀粉纤维大量沉积于肾脏引起的病变，随着我国人口老龄化的进程不断加快，其发病率也呈逐年上升的趋势[1]。
而关于淀粉样变性肾病的诊断率一直较低，确诊率低，更需要探寻更佳的病理技术进行诊断。
本文主要探讨淀粉样变性肾病的染色方法及体会，旨在提高病理技术，报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料选取本院2012年3月～2014年12月收治的淀粉样变性肾病患者的活检标本共15例作为本次实验的实验标本。
1. 2 方法1. 2. 1 对15例标本进行常规染色及特殊染色。
①标本的常规处理。
首先使用10%福尔马林进行固定，并给予梯度酒精脱水，每个步骤进行30 min，使用二甲苯透明10 min×2，给予60℃浸蜡后进行石蜡包埋。
切片厚度为5 μm，并置于45℃水浴展开，干燥时间为20 min。
脱蜡至水。
②染色配置分别为：HE、储备液、碱性工作液、碱性刚果红工作液、酸性高锰酸钾溶液、5%草酸溶液。
③碱性刚果红染色方法：使用mayer氏苏木素液进行内染色10 min后蒸馏水洗，给予盐酸乙醇分化再用蒸馏水洗，随后放入到碱性工作液内进行染色20 min，再放入碱性刚果红工作液内20 min，进行无水乙醇三次脱水，二甲苯透明后固封。
几种常用特殊染色操作过程中的要点
一、网状纤维染色 ——氢氧化银氨法（Gomori法）
5
（一）网状纤维的形态结构
较细的纤维组织、短、分支多，交织成网状
（与胶原纤维共同为细胞丰富的器官起到支撑作用）
HE呈淡红色，银氨液浸染、甲醛还原后呈黑色
（嗜银性/嗜银纤维：黑色）
主要由Ⅲ型胶原蛋白构成，表面被覆糖蛋白
（PAS染色：淡紫红色）
6
＋蒸馏水，洗涤沉淀（50-100ml蒸馏水） <反复/3次，沉淀不浑浊>
留下沉淀及少许上清液（4ml）
<保留沉淀物质>
逐滴＋氢氧化铵（一次1-2滴加入）
<边加摇晃>
至沉淀逐渐完全溶解
<无色溶液>
逐滴＋10%硝酸银，至刚出现浑浊 加氢氧化铵一至数滴，使沉淀消失
＋蒸馏水至40ml，2-8°C冰箱
<浑浊状态>
2
四、淀粉样物 刚果红法（甲醇刚果红、碱性刚果红）、甲基紫法 五、色素 含铁血黄素（Perls）、黑色素（Masson-Fontana）铜（罗 丹明、红氨酸） 六、糖类物质 糖原（PAS）、黏液物质（AB-PAS、AB） 七、脂内物质 中性脂肪（苏丹Ⅲ、Ⅳ、油红O）
3
八、神经组织 尼氏体（硫瑾、甲苯胺蓝）、神经髓鞘（变色酸2R、砂罗 铬花青） 九、肝脏穿刺 Masson、网状纤维、含铁血黄素、PAS、铜等。 十、肾脏穿刺组织 Masson、六胺银、PAS、刚果红等
1.氧化（KMnO4）：使网状纤维内羟基转变为醛基。<选择性> 2.漂白（H2C2O4）：棕色变为无色。 3.媒染（铁明矾）：增加网状纤维对银氨液的选择性。 4.浸银（氢氧化银氨）：银氨液中Ag（NH3）2+被组织吸附后与醛基结合。 5.还原（甲醛）：与网状纤维结合的银氨配位化合物还原成黑色的金属 银。
病理学技术—特殊染色最最全总结
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)绿色：细胞核黄色：其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。