VG染色法
【染色步骤】
（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至 水。 （2）70%乙醇稍洗后，浸入Victoria Blue’B染色液中 15ml。 （3）95%乙醇中分化数秒钟。 （4）用蒸馏水洗2次 （5）用Ponceau染色液滴染5min。 （6）直接用无水乙醇分化与脱水。 （7）二甲苯透明，中性树胶封固。
因此,在Van Gieson氏法中,苦 味酸染红细胞和肌纤维,酸性品红 染胶原纤维。
【试剂配置】
（1）Ponceau染色液 0.5%ponceau(丽 春红S)水溶液10-15ml，苦味酸饱和水溶 液85-90ml。 （2）Victoria Blue’B染色液 Victoria Blue’B（维多利亚蓝B）0.5g，70%乙醇 100ml。
2.在慢性炎症,机化和瘢痕形成中,可随病理过 程的发展而出现胶原纤维。在早期,H-E染色 切片中的这些纤维往往和纤维蛋白很难鉴别, 通过胶原纤维染色则可证实。如慢性肾小球 肾炎的肾小球纤维化后,V.G.染色呈红色。大 叶性肺炎或血栓发生机化后,原有的纤维蛋白 灶内出现胶原纤维,V.G.染色呈红色。风湿性 肉芽肿已静止时,阿啸夫氏(Aschoff's)。巨细 胞消失,病灶内的纤维被胶原纤维取代,V.G.染 色也呈红色。胃、十二指肠溃疡愈复时,在渍 疡底部出现胶原纤维构成的疤痕,慢性阑尾炎 时阑尾壁出现的纤维化,肝硬化时胶原纤维的 增生,这些用V.G。染色也都染成红色。
3.血管壁的胶原纤维染色对病理诊断也很重 要。良性高血压,小动脉的玻璃样变,V.G.染色 阳性。恶性高血压病时,小动脉管壁为纤维素 样坏死,V.G.染色阴性而纤维素染色阳性
4．V.G.染色对是高血压性血管疾患还是淀 粉性样变血管损害的鉴别也很重要。H-E染 色的玻璃样变和淀粉样变有时很难区别，用 V.G.染色和淀粉样物质染色则可作出区别。 如高血压性肾固缩其小动脉壁V染色呈红色。 而淀粉样物质沉积的小动脉壁V.G.染色呈黄 色。
注意事项：
（1）胶原纤维切片的厚度需6um，使之 对比清晰。 （2） Victoria Blue’B染色液应盛染色缸内， 进行浸染色。 （3）Ponceau染色后，不能与水接触， 直接用无水乙醇冲洗脱水。
在Van Gieson氏染色,苦味酸与酸性品红浓的 比例若不恰当,如苦味酸的浓度太高,小分子量 染料苦味酸占优势,则结构致密的胞浆,肌纤维 和结构疏松的胶原纤维都会被苦味酸所着染。 这点是来体现。 一般来说小分子量者易于穿透结构致密， 渗透性低的组织，而大分子染料只能进入 结构疏松，渗透性高的组织。 常用胶原纤维染色而几种阴离子染料的分 子量由小到大分别是：
苦味酸（黄色），分子量229.11 橙黄G（橙黄色）分子量452 丽春红（红色）分子量480.42 酸性品红（红色）分子量585.53 苯胺蓝（蓝色）分子量737.72 亮绿（绿色）分子量792.72 甲基蓝（蓝色）分子量799
肌肉组织呈 黄色
胶原纤维 呈红色
应用
胶原纤维和肌纤维的鉴别染色是病理 组织制片的一个重要方法,它的染色对 病理诊断很有帮助。
1.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤、平滑肌 瘤、横纹肌瘤、神经纤维瘤甚至它们的肉 瘤等都产生一定的纤维,这些纤维在H-E染 色中都染成红色而难以区别。通过用上述 方法染色,一般可区分出该肿瘤组织是胶原 纤维源性,还是肌源性,或者是神经纤维源 性。对于后者,有时还需加染磷 钨酸苏木 素来协助诊断。
VG染色法
主讲：李磊 姜明星
染色效果如下图
原理
VG染色法是利用两种阴离子染料混合或 先或后作用而完成鉴别染色的。 胶原纤维呈红色（被丽春红所染）肌纤维 呈黄色（被苦味酸所染），这与阴离子染 料分子的大小和组织的渗透性有关。组织 的渗透性，取决于组织的结构密度，如细 致观察，会发现组织和细胞成分都是多孔 的构造。
不同的组织和细胞成分，它们的空隙大小是 不同的，空隙的大小，决定了组织的渗透性， 如空隙小，组织结构致密，渗透性低；空隙 宽，组织结构疏松，渗透性高。 如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料 先后或混合染色，则可发现红细胞被最小分 子的阴离子染料着染。由此说明红细胞对阴 离子染料的渗透性最小。肌纤维与胞质次之， 而胶原纤维具有最大的渗透性。 根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不 同的阴离子染料进行染色，便可把不同组织 成分显示出来。
阴茎海绵体平滑肌细胞的鉴定分析进展
阴茎海绵体平滑肌细胞的鉴定分析进展作者：陈世涛吕伯东黄晓军论文关键词：阴茎海绵体平滑肌细胞鉴定论文摘要：阐述体外培养阴茎海绵体平滑肌细胞(corpuscavernosumsmoothmusclecell，CMSC)的鉴定方法。
比较不同方法对于体外培养的阴茎海绵体平滑肌细胞(CMSC)的鉴定分析及其特异性，优化研究勃起功能障碍所需要的CMSC培养模型。
勃起功能障碍是一种多因素引起的男科难治性疾病[1]，严重影响患者的整体健康和生活质量[2]。
阴茎海绵体平滑肌细胞(CSMC)是组成阴茎海绵体的主要功能成分，约占整个阴茎组织成分40％～50％，是调节阴茎勃起及维持勃起的重要因素，是阴茎神经调控的主要效应器部位[3-4]，因此关于阴茎海绵体平滑肌细胞的研究显得尤为重要，而CSMC的培养和鉴定是研究的基础，因此CSMC纯化鉴定在细胞水平上研究ED的机制颇为关注，就体外培养的CMSC鉴定分析做一综述。
1988年,Krall等[5]首先运用体外培养的人CMSC研究了勃起相关的生化反应。
此后，体外培养扩增CMSC成为ED 基础研究的重要手段[6]，但尚缺乏对体外培养的CMSC的特异性鉴定方法。
Granchi等[7]很早就发现成人海绵体平滑肌细胞的培养过程中很难避免成纤维细胞污染。
目前被奉为经典的Pilatz等[8]文献报道中海绵体平滑肌细胞的培养纯度也仅达到25%左右。
现在鉴定CMSC 的方法一般有光镜、透射电镜观察、相差显微镜观察、免疫组化印记法、免疫细胞化学法等[9]。
1CMSC的形态鉴定在常规染色中，第2代传代培养的CMSC常规苏木精、伊红染色，显微镜下观察。
苏木精伊红染色显微镜显示培养细胞胞质被染成红色，且清晰、均匀，胞核染成蓝色。
另外还有一些特殊的染色方法，参照杜卓民[10]方法，标本获取、固定同常规染色法，显微镜下观察。
Masson三色染色法显示培养细胞胞质被染成红色。
VG染色显示培养细胞胞质被染成黄色，传代培养的细胞Masson三色染色法及VG染色细胞纯度在98％以上[9]。
Van Gieson 染色液(VG染色液,含苏木素)使用说明
Van Gieson染色液（VG染色液，含苏木素）使用说明
货号：G1333
规格：3*50ml/3*100ml/3*500ml
保存：室温密闭保存，有效期一年
产品说明：
Van Gieson染色液（VG染色液，含苏木素）用于区分胶原纤维和肌纤维，鉴别组织器官的损失、硬化，鉴别肿瘤组织等实验。
染色后胶原纤维呈鲜红色，肌纤维、神经胶质细胞胞质和红细胞呈黄色，细胞核呈蓝色或棕蓝色。
使用方法：
Weigert苏木素使用前取A液和B液等份混合，4个小时内用完，最长不得超过一天。
1、切片常规脱蜡。
2、用Weigert苏木素染色大约10-20min左右（可根据预实验结果适当优化调整）。
3、水洗返蓝5-10min。
4、使用VG染色液染色0.5-2min。
5、弃染液，直接用95%酒精液急速分化约数秒钟。
6、无水乙醇脱水，二甲苯透明，封固，观察拍照。
注意事项：
1，染色结束后及时拍照，否则颜色会逐渐暗淡，不利于拍照保存。
2，VG染色液的染色时间不宜过长，一般1min左右，可根据实验结果适当调整，出现鲜红色为最佳。
染色时间过长可能影响观察，同时会使细胞核着色变浅。
Van Gieson染色液的配制及染色体会
Van Gieson染色液的配制及染色体会
郑集义
【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》
【年(卷),期】2005(021)004
【摘要】Van Gieson染色简称VG染色，是一种成熟的结缔组织染色方法，用于区别胶原纤维和肌纤维。
其操作简单，结果可靠，是实验室常规特染方法之一。
VG染色液配制的关键主要是酸性品红和苦味酸饱和液的比例。
一些文献资料记载差异比较大，我们拟通过实验找出其最佳配制比例。
【总页数】2页(P496-497)
【作者】郑集义
【作者单位】北京解放军海军总医院,北京,100037
【正文语种】中文
【中图分类】R446.8
【相关文献】
1.改良HE染色-酸化伊红染色液配制法 [J], 杨永平;孟娟;李莉;王兰慧
2.不同浓度Van Gieson染色液对细胞染色的研究 [J], 陈川宁;陶忠桦;李洪
3.不同浓度配制VG染色液染色效果的比较 [J], 林秀芳
4.PTAH染色液配制的改进及应用体会 [J], 王晓东
5.改进瑞氏染色液配制方法的体会 [J], 郁华;崔秀华
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组织化学技术
组织化学技术切片染色方法可以显示不同细胞和组织形态，以及细胞和组织中某些化学成分含量的变化。
一、染色的目的任何冰冻切片、石蜡切片等如果不经过染色，在显微镜下只能看到细胞及其它组织成分的轮廓，即使由于组织内部各种物质的折射指数不同，从光线的明暗上能观察到一些组织结构，但也是极其简单有限的，远不能满足观察和借以诊断的目的。
染色的目的，是将染料配制成溶液，将组织切片浸入染色剂内，经过一定的时间，使组织或细胞及其他异常的成分染上不同深浅的颜色，产生不同的折射率，便于在光学显微镜下进行观察。
因此，染色在组织形态学，特别是病理形态诊断、科研和教学工作中，都具有非常重要的意义和实用价值。
二、染色的原理染色就是染色剂和组织细胞相结合的过程。
有关两者结合的原理，有不同的学说，一般认为其过程是化学反应和物理现象。
（一）染色的化学反应在组织细胞内，一般有酸性和碱性区别，酸性物质部分能与溶液中的阳离子结合，碱性物质部分能与溶液中的阴离子结合。
在细胞核中，特别是核内染色质，一般有酸性物质组成（其中主要有核酸），故与碱性染料的亲和力很强，易于染色，以氧化苏木素代表的碱性染料中有染色作用的是阳离子。
在细胞浆中则由碱性物质组成，所以胞浆与酸性染料有较强的亲和力，以伊红染料为代表的酸性染料中有染色作用的是阴离子。
(二) 染色的物理作用1. 毛细作用及渗透作用组织有许多小孔，染料因渗透作用进入组织，它与组织没有牢固的结合，所以是单纯的物理作用，不能称为直接染色作用。
因所谓染色必需是染料留贮于组织内与组织有较稳固的结合。
2. 吸收或溶液作用组织吸收染料，作牢固的结合，组织的着色与溶液颜色相同，但不是和干燥染料的颜色相同。
如复红溶液为红色，所染组织也为红色，而干燥的复红带绿色。
3. 吸附作用吸附作用是固体物理的特性，它能从周围溶液中吸住一些细小的物质微粒，这些微粒可能是溶于溶液中的化合物，也可能是只在溶液中单独存在的离子，如染液中分散的色素粒子进入被染物质的间隙内，由于分子的引力作用，色素粒子被吸附而染色。
2012年检验专业《病理检验技术》试卷及答案
2012年检验专业《病理检验技术》试卷及答案姓名分数：一、单选题(每题1分，共30分)（ E ）1．以下哪种溶液用于HE染色中苏木素染色后的分化？A.温水B.自来水浸洗C.稀碳酸氢钠D.稀氨水E.盐酸酒精（A）2．包埋蜡槽的工作温度应是：A. 60~63℃B.65℃C. 56℃D.56~58℃E.58℃（A）3．Gomori网纤染色法时需用到下列哪种试剂?A.硝酸银B.磷钼酸C.亮绿D.碳酸钠E.苦味酸（D）4．以下哪种不是粘液染色法?A.奥新蓝-雪夫液反应法B.奥辛蓝染色法C.奥辛蓝地衣红染色法D.苏丹Ⅲ染色法E. AB-PAS法（E）5．作为固定剂常用的是10%的福尔马林，其实际甲醛浓度为A.10%B.20%C.40%D.1%E.4%（D）6．冷冻切片时组织切片最佳温度是切片机和切片刀的温度维持在:A.0℃B. 4℃C. –10℃D. –19~-20℃E. –30℃（ D ）7．石蜡切片使用二甲苯脱蜡后首先要用什么浓度的酒精处理以脱去二甲苯?A.70%B.95%C.90%D.100%E.40%（B）8．常规石蜡切片的切片厚度是：A. 4mmB.4~6μmC. 1mmD. 4cmE. 8μm（C）9．VG染色法中不使用以下哪个试剂？A.酸性品红B.苦味酸C.伊红D.苏木素E.乙醇（B）10．脂肪染色的标准封固剂是什么？A.中性树胶B.甘油明胶封固剂C.液体石蜡D.松节油E.二甲苯（A）11．以下哪种是病理科最常用的透明剂？A.二甲苯B.酒精C.氯仿`D.香柏油E.松油醇（E）12. 切片时，摊片的水温宜为：A.30℃B. 42~45℃C. 60℃D.50 ℃E. 20℃（B）13．以下哪种是幽门螺杆菌的染色法A.PAS染色法B. Warthin-starry染色法C.过碘酸雪夫反应法D. Gridley染色法E.奥辛蓝染色法（A）14．以下哪种不是细胞质染料?A.美蓝B.橙黄-GC.伊红D.苦味酸E.光绿SF（light green SF）（B）15．以下哪种不是细胞核染料?A.核固红B.俾士麦棕C.苏木素D.中性红E.甲苯胺蓝（ E ）16．以下哪种细胞不属于上皮细胞？A.间皮细胞B.尿路上皮细胞C.鳞状上皮细胞D.内皮细胞E.血细胞（C）17．变移上皮分布在以下哪个器官或系统?A．体表 B.子宫C．输尿管 C.细支气管E．鼻腔（E）18．以下哪项不属于常用脱落细胞学染色技术的范畴?A．巴氏染色 B.HE染色C．瑞特—吉姆萨复合染色法 D.EA36染液E．VG染色（C）19．以下哪种细胞不是上皮细胞？A. 粘液柱状上皮B.间皮细胞C. 巨噬细胞D.柱状上皮D. 不全角化细胞（ A ）20．以下哪种成份属于结缔组织纤维？A.弹力纤维B横纹肌纤维C.平滑肌D.骨骼肌纤维E.心肌纤维（B）21．大体标本的原色保存中保存胆色素标本用以下哪种方法或试剂较好？A.Pulvertaft法B.柯氏（Klotz）法C.凯氏改良法D.Kaiserling法E.10%中性缓冲福尔马林液（C）22．巴氏染色不使用以下哪种试剂？A.苏木素B. 光绿SF（light green SF）C. 美兰D.伊红E.橙黄G6（ E ）22．以下哪种试剂不用于苏木素液的配制？A.酒精B.硫酸铝钾C.碘酸钠D.氧化汞E.福尔马林（ D ）23．Zenker固定液的配制不使用以下哪种试剂？A.升汞B.重铬酸钾C.冰醋酸D.磷酸氢二钠E. 蒸馏水（D）24．以下哪种试剂可用于脂肪染色？A. 二甲苯B.碱性品红C. Schiff液D.苏丹ⅢE.苦味酸（E）25．以下哪种不是浸蜡剂？A.火棉胶B.明胶C.碳蜡D.石蜡E.二甲苯（E）26．以下哪个内容不属于病理资料？A.切片B.登记薄C.大体标本D.会诊结果E.病理专业书籍（D）27．以下哪个内容不属于临床细胞学？A.痰涂片检查B.尿液找瘤细胞C.宫颈涂片检查D.气管镜活检E.细胞块检查（A）28．以下哪个是苏木素染色时使用的蓝化液？A.自来水B.95%酒精C.10%福尔马林D.0.5%盐酸E.1%冰醋酸（D）29．以下哪种试剂不用于组织固定？A.4%甲醛B.酒精C.AAF液D.生理盐水E.醋酸（A）30．以下哪种细胞是结核病具诊断价值的形态学特征之一？A.朗格汉斯巨细胞B.红细胞C.中性粒细胞D.淋巴细胞E平滑肌细胞二、填空题(每空1分，共25分)：1. 组织固定的注意事项有固定的组织必须新鲜、固定液用量应为标本体积的4~10倍、防止固定组织变形和固定时间要适当等四方面内容。
特殊染色联合免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用
特殊染色联合免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的应用摘要:目的:本临床研究主要是讨论特殊染色联合免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的功效。
方法：选择2020年1月至2020年6月在我院肿瘤科接受治疗的76例肿瘤病人做为此次临床研究的观察目标。
依据不一样的诊治方式，将76例病人随机分成实验组和对照组。
对照组病人选用免疫组化技术完成诊断，实验组病人选用特殊染色联合免疫组化技术完成诊断。
比较为2组肿瘤的阳性诊断率。
结果：特殊染色联合免疫组化技术诊断：呈阳性35例，呈阴性3例，检出率为92.1%。
实验组92.1%的呈阳性诊断率显著高过对照组的65.5%。
两组结论差别明显，具备明显统计学意义(p＜0.01)。
结论：结果显示，特殊染色与免疫组化技术对肿瘤的病理诊断有良好的实际效果，可做为肿瘤疾病诊断的根据，对疾病诊断有较准确的指导作用。
关键词:特殊染色;肿瘤病理诊断;联合免疫组化技术伴随着我们生活水平的不断提升，尤其是近些年，人们的人均寿命不断地增加，但是社会负担也在持续提升，这促使肿瘤的患病率也呈上涨的发展趋势。
由于肿瘤患者早期症状不明显，多数患者确诊时疾病已经进入中晚期，因而，造成肿瘤的最佳医治时间点延长，使很多肿瘤病人只能通过长期化疗、放疗等方式控制病情[1]。
很多研究表明，病理诊断是临床医学专业肿瘤诊断中最经常使用的诊断方式，因为创伤性诊断方式，病人的诊断配合度较低。
而常规的磁共振、CT 等诊断方法中又存在误诊率高的不足。
因此，对更准确、更简单的诊断方法进行研究是临床研究的重点。
与这二种方式不一样，特殊染色联合免疫组化技术是诊断率高的诊断技术，在世界各地取得了广泛应用。
世界各地的很多研究表明，特殊染色联合免疫组化技术对肿瘤有很高的诊断意义。
因而，本分析关键搜集我院肿瘤科2020年1月至2020年6月的76例肿瘤患者做为此次临床研究的研究目标，重点讨论特殊染色联合免疫组化技术在肿瘤病理学诊断中的实际效果。
科学研究如下所示。
革兰氏染色法
革兰氏染色法步骤及原理革兰氏染色法G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：基本原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884 年由丹麦医师Gr 二创立的。
革兰氏染色法（Gram stain ）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G＋表示：染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G 一表示。
细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肤聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫一碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肤聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫一碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。
革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic dye ）初染液；媒染剂（mordant ) ；脱色剂( decolorising agent ）和复染液（counter stain ）。
碱性染料初染液的作用象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫（crystal violet ）。
媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落，碘（iodine ) 是常用的媒染剂。
脱色剂是将被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95 ％的酒精（ethanol ）。
微波改良Masson三色法在观察博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中应用
微波改良Masson三色法在观察博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中应用林云恩;龙惠东;许惠娟;何新明;杨通【摘要】@@ 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是一种原因不明的弥漫性肺疾病.主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化,最终导致肺脏结构和功能严重破坏,其发病机制尚未明确.研究发现,经气管内灌注博莱霉素(bleomycin, BLM)可以造成大鼠肺纤维化,此病理过程与人类TPF的病理过程极其相似,因此,对BLM致大鼠肺纤维化不同阶段的肺组织病理改变进行研究,探讨肺纤维化在IPF不同阶段的病变程度,为临床制定有效的治疗策略提供理论和实验依据.本文用显示大鼠肺纤维化的效果来比较微波改良Masson三色法和VG染色法.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2011(027)009【总页数】3页(P1014-1016)【关键词】微波改良Masson三色法;VG染色法;肺间质纤维化;博来霉素【作者】林云恩;龙惠东;许惠娟;何新明;杨通【作者单位】广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120;广州医学院附属肿瘤医院ICU,广州,510095;汕头大学医学院附属第二人民医院呼吸内科,汕头,515041;广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120;广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120【正文语种】中文【中图分类】R446特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是一种原因不明的弥漫性肺疾病。
主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化，最终导致肺脏结构和功能严重破坏，其发病机制尚未明确。
研究发现，经气管内灌注博莱霉素(bleomycin，BLM)可以造成大鼠肺纤维化，此病理过程与人类TPF的病理过程极其相似，因此，对BLM致大鼠肺纤维化不同阶段的肺组织病理改变进行研究，探讨肺纤维化在IPF不同阶段的病变程度，为临床制定有效的治疗策略提供理论和实验依据。
VG染色液
Van Gieson氏苦味酸～酸性复（品）红染色法（简称VG法，显示胶原纤维）操作步骤：（如没特别说明，都在室温下进行）1. 将切片脱蜡至水；2. 用Weigert铁苏木素液染色5～10min；3. 自来水冲洗数分钟；4. 根据染色的深浅可用1%盐酸酒精分化；5. 流水冲洗片刻；6. 用Van Gieson溶液染色1～2min；7. 倾去染液，直接用95%酒精快速分化约数秒钟；8. 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：胶原纤维呈红色，肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色，细胞核呈黑蓝色或棕色。
注意事项：① Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合，几个小时内用完，最长不得超过一天，否则易氧化沉淀而逐渐失其染色能力。
②苏木素配后经二十多天才能成熟，必须提前配制。
③此苏木素染液能抵抗弱酸性染液，对已着染的细胞核在酸性染液的作用，不易被脱去颜色，如果不特别深染，则无须分化。
④ Van Gieson染色液分别在临用时混合，取B液9份，加入A液1份，即可使用，若放置时间过长，则酸性品红不易着色。
试剂配制：1.Weigert氏铁苏木素液A液苏木素 1g无水酒精（或 95％酒精） 100mlB液29％三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水（30%三氯化铁溶液则为100ml） 95ml盐酸 1ml临用时，取A、B液等量混合即可应用。
混合时应将B液加人A液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
2. Van Gieson溶液：A液：酸性品红 1g蒸馏水 100mlB液：苦味酸饱和水溶液（约1.22%）A、B两液分瓶盛放。
临用前取A液1份，B液9份混合后使用用途：用于胶原纤维染色。
染色液
【摘要】目的不同浓度VG 氏染色液对细胞培养后的染色效果的研究，寻求理想的配置浓度。
方法大鼠肝星状细胞（HSC-T6）培养，细胞爬片，经乙醛刺激细胞活化后，通过HE、VG 氏染色，观察胶原纤维和肌源性成分的染色效果。
结果VG染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液），临用前分别按A∶B=2∶1、1∶1、1∶2三种配方中肌性纤维和胶原纤维都染成不同程度的品红色。
A∶B=1∶9配方中肌性纤维染成黄色，胶原纤维染成红色。
A∶B=5∶95、1∶99配方中两者都染成黄色。
结论A∶B=1∶9此种染色两种成分明显，效果最佳,其余比例染色效果呈单一色，无鉴别作用。
【关键词】VG染色；细胞培养；肝星状细胞；胶原纤维VG氏(Van Giesan)染色方法在病理诊断中是最常应用的一种特殊染色，鉴定胶原纤维和肌源性成分起着重要的作用［1］。
但是对细胞染色的研究报道很少，本文对不同浓度VG 氏染色液对细胞培养后的染色效果进行探讨，寻求理想的配置浓度。
1 材料与方法1.1 材料细胞来源于泸州医学院中心实验室的大鼠肝星状细胞（HSC-T6），正常细胞培养再经乙醛刺激24h，95％的酒精固定。
VG染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液）；HE染液均由该实验中心提供。
1.2 方法1.2.1 细胞培养大鼠肝星状细胞（HSC-T6）经10%胎牛血清DMEM培养基正常传代培养稳定后，细胞爬片，长至融合度70%时，0.4%胎牛血清DMEM培养基同步化处理12h，200uM乙醛刺激24h, 95％的酒精固定。
1.2.2 染色HE染色5～10min，稀盐酸酒精进行分色，淡氨水使胞核蓝化3～5min，用VG染液染5～10min。
弃去染液，直接用95% 酒精快速分化，用滤纸吸干。
二甲苯透明，中性树胶封固。
VG 染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液），临用前分别按A∶B=2∶1、1∶1、1∶2、1∶9、5∶95、1∶99的比例混合使用。