医院感染念珠菌临床分布及耐药情况

医院感染念珠菌临床分布及耐药情况 【摘要】目的：探讨医院感染念珠菌临床分布情况及耐药性。方法：271例院内感染念珠菌患者均给予试验室念珠菌鉴定及药敏试验，记录念珠菌样本分布、菌种分布、科室分布、药敏试验结果，给予统计学分析后得出结论。结果：271株念珠菌中，白色念珠菌所占比例高达69.00%，其中43.17%来自痰液标本，48.71%来自ICU科室（P<0.05）；白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌等主要念珠菌种类均对两性霉素B未表现出耐药性，提示临床医生可尽量选用两性霉素B对念珠菌感染患者实施治疗。结论：临床医生应准确掌握念珠菌感染特征，对疑似医院感染念珠菌患者积极给予实验室检验确诊病情，根据药敏试验结果合理选择抗菌药物予以救治，保障患者生活质量及生命安全。 【关键词】：医院感染；念珠菌；分布情况；耐药性 念珠菌（candida）属于条件致病菌 [1]，也是临床常见的真菌病原菌，由于目前抗生素滥用情况较为严重，医院感染念珠菌发生率有所提高，应引起广大医务工作者高度重视 [2]。本文将于2013年1月1日至2013年12月31日期间，选取前来我院就诊并发生医院感染念珠菌的271例患者给予临床研究，探讨医院感染念珠菌临床分布情况及耐药性，为提高患者疗效及预后提供可靠依据，现总结如下。 1 资料与方法 1．1 一般资料 271例医院感染念珠菌患者中男性52例、女性48例，年龄19至89岁，平均年龄（47.88±2.91）岁。 1．2 方法 1. 2. 1 研究方法 对271例院内感染念珠菌患者临床资料进行回顾性分析，所有患者均给予试验室念珠菌鉴定及药敏试验，指定具有专业知识及丰富经验的临床检验人员严格按照无菌操作相关规程完成其试验室念珠菌鉴定及药敏试验工作。分析内容为查阅相关病历资料、询问当事医护人员、询问患者及家属等。记录271例院内感染念珠菌患者分布情况（样本分布、菌种分布、科室分布）、药敏试验结果，给予统计学分析后得出结论。 1. 2. 2 试验室检验 1. 2. 2. 1 菌株鉴定 根据相关要求正确留取样本，包括痰液、血液、腹水、脑脊液、咽拭子、胸水、尿液等，将所得检验样本于沙保弱培养基中接种并放置于320C条件下持续培养7-10d，之后划线分离并选取酵母样菌落转接种于科玛嘉（CHROM agar）念珠菌显色培养基中，经350C条件下恒温培养1-3d。根据念珠菌显色培养基所呈现的不同颜色判断念珠菌种类：热带念珠菌为铁蓝色、克柔念珠菌为紫红色（边缘存在欠清晰微毛）、白色念珠菌为翠绿色、光滑念珠菌为紫红色（边缘无微毛）、其他念珠菌为白色。待显色培养完成后利用法国生物梅里埃公司（BioMerieux, Lyon, France）提供的ATB-ID 32C 酵母鉴定试剂条实施复检，若复检结果不符则利用北京索莱宝科技有限公司（solarbio）提供的酵母基因组DNA提取试剂盒、真菌通用引物NL1、NL4将待检念珠菌DNA提取后，将26 Sr DNA D1、D2区扩展并测量序列，提交美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information ，NCBI)建立的DNA序列数据库（GenBank数据库）实施比对及鉴定，由上海英俊生物技术有限公司提供引物、DNA Marker（分子量不同的DNA片段）、Pfu DNA 聚合酶（Pfu DNA polymerase）。PCR反应体系25ul，条件设定：预变性940C反应2min、变性940C反应1min、退火350C持续1min、延伸720C持续2min，持续循环45次后延伸10min（720C）。所得念珠菌经-700C条件下保存备用。 1. 2. 2. 2 药敏试验 药敏试验选择两性霉素B（amphotericin, Am B）、伊曲康唑（itraconazole, ITC）、5-氟胞嘧啶（5-flucytosine, 5-FC）、氟康唑（fluconazole, FCZ）等四种临床常用抗真菌药物，药敏试剂条由法国生物梅里埃公司提供，型号为ATB FUNGUS。将待检菌株传代活化（350C）后，经药敏试剂条相关说明完成药敏试验。 1. 3 统计学方法 将所得数据利用SPSS17.0(Statistical Product and Service Solution 17.0)软件包完成统计学分析，其中以t检验计量资料（由x±s表示），X2检验计数资料[由X（%）表示]，当结果为P<0.05时则表示差异具有统计学意义。 2 结果 271份标本中共检出念珠菌菌株271株，其样本分布情况、致病菌种类分布情况、科室分布情况、耐药性检验结果如下： 2. 1 念珠菌分布情况 2. 1. 1 菌种分布 271株念珠菌中白色念珠菌所占比例高达69.00%，其次为热带念珠菌（14.76%），与其他念珠菌种类所占比例对比结果具有统计学意义（P<0.05），具体情况见表1。 表1 271株念珠菌菌种分布情况分析 菌种 株数（株） 所占比例（%） 白色念珠菌 187 69.00* 光滑念珠菌 14 5.17 近平滑念珠菌 5 1.85 热带念珠菌 40 14.76 克柔念珠菌 9 3.32 季也蒙念珠菌 2 0.74 葡萄牙念珠菌 3 1.11 其他念珠菌 11 4.06 总计 271 100.00 注：*表示与其他念珠菌种类所占比例对比结果具有统计学意义（P<0.05）。 2. 1. 2 样本分布 271株念珠菌中来自痰液所占比例高达43.17%，与其他样本样本所占比例对比结果具有统计学意义（P<0.05），具体情况见表2。 表2 271株念珠菌样本样本分布情况分析[例（%）] 菌种 痰液 尿液 血液 粪便 胸腹水 脓液 其他 白色念珠菌（n=187） 82 20 8 16 9 33 19

光滑念珠菌（n=14） 6 4 1 1 1 1 0 近平滑念珠菌（n=5） 2 1 0 0 1 1 0 热带念珠菌（n=40） 16 9 1 2 4 8 0 克柔念珠菌（n=9） 4 1 1 1 1 1 0 季也蒙念珠菌（n=2） 1 0 0 0 0 1 0 葡萄牙念珠菌（n=3） 1 1 0 0 0 1 0 其他念珠菌（n=11） 5 1 1 1 1 2 0 总计（n=271） 117（43.17）37（13.65） 12（4.43） 21（7.75） 17（6.27） 48（17.71） 19（7.01） ★ 注：★表示与其他样本所占比例对比结果具有统计学意义（P<0.05）。 2. 1. 3 科室分布 271株念珠菌中48.71%来自ICU科室，与其他科室所占比例对比结果具有统计学意义（P<0.05），具体情况见表3。 表3 271株念珠菌科室分布情况分析 科室 数量（株） 所占比例（%） ICU 132 48.71▲ 感染科 31 11.44 呼吸内科 25 9.23 普外科 21 7.75 老年科 13 4.80 肿瘤科 11 4.06 其他外科 10 3.69 心内科 10 3.69 神经内科 6 2.21 血液内科 5 1.85 肾内科 3 1.11 其他科 4 1.48 总计 271 100.00 注：▲表示与其他科室所占比例对比结果具有统计学意义（P<0.05）。 2. 2 耐药性 白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌等主要念珠菌种类均对两性霉素B未表现出耐药性，提示临床医生可尽量选用两性霉素B对念珠菌感染患者实施治疗，具体情况见表4。 表4 主要念珠菌耐药性分析 菌种 氟康唑 5-氟胞嘧啶 伊曲康唑 两性霉素B 白色念珠菌（n=187） 11（5.88） 4（2.14） 2（1.07） 0（0.00） 光滑念珠菌（n=14） 7（50.00） 4（28.57） 3（21.43） 0（0.00） 热带念珠菌（n=40） 2（5.00） 0（0.00） 3（7.50） 0（0.00） 3 讨论 研究表明 [3]，部分健康人群可能携带少量念珠菌但并未表现出相应临床症状，提示人体遭受念珠菌入侵后，入侵部位、机体免疫力、菌株数量、菌株毒力等因素均将直接影响被入侵者发病情况。有研究显示 [4]，当人体免疫力较低、大量使用广谱抗生素等情况时可引起机体菌群失调，将为念珠菌入侵及致病创造有利条件。 院内感染是指患者在住院治疗期间获得的感染性疾病，包括住院期间感染或住院期间获得而出院后感染，常见院内感染包括肺部感染、尿道感染等 [5]。研究表明 [6]，患者入院治疗期间一旦发生院内感染，将显著延长其住院治疗时间，甚至加重原发疾病程度，不利于其尽快恢复健康，甚至造成死亡等严重后果。提示对发生院内感染患者给予及时确诊及正确治疗是保障其疗效及预后的关键因素 [7]。 本文研究可知，医院感染念珠菌主要为白色念珠菌，其中呼吸道感染所占比例最高，提示医护工作者应密切注意患者各项生命体征变化情况从而及时判断是否发生院内念珠菌感染。本文中ICU科室患者发生念珠菌感染几率最高，分析可能与该科室患者大多病情较重、机体抵抗力较低、需气管插管或气管切开处理等因素相关 [8]。 有研究显示 [9]，对病原菌感染患者给予正确的药敏试验可为临床医生合理选择治疗方案提供有力依据，可助患者及时控制病情获得满意疗效。本文研究后提示，白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌等主要念珠菌类型均对两性霉素B不耐药，提示患者一旦确诊为念珠菌感染后可积极给予两性霉素B临床治疗，从而快速控制病情降低病死率 [10-11]。 综上所述，临床医生应准确掌握念珠菌感染特征，对疑似医院感染念珠菌患者积极给予实验室检验确诊病情，根据药敏试验结果合理选择抗菌药物予以救治，保障患者生活质量及生命安全，值得今后实际工作中推广应用。 参考文献 [1]沈银忠, 卢洪洲, 张永信. 非白念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性分析[J]. 中国抗生素杂志, 2013, 35(1): 72-76. [2]梁顺容, 容富强, 黄进梅.1443株念珠菌院内感染的分布及药敏情况分析检验[J].医学与临床,2013, 10(11):161-163. [3]苏逸丹, 汪师贞, 翁心华, 等. 白念珠菌ERG11基因突变与氟康唑耐药性的关系[J]. 中国抗生素杂志, 2010, 25(6): 467-470. [4]栗方, 曹彬, 杜小玲, 等. 医院内深部真菌感染的临床分布特点及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志, 2010, 18(12): 134-136. [5]周小明,严子禾,胡锡池. 147株住院患者呼吸道念珠菌感染的鉴定及耐药性分析[J].中国抗生素杂志,2014,31(1):65-66. [6]江惟苏, 陈荣, 谭升顺, 等. 特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑体外联合抗白念珠菌的作用[J]. 中国抗生素杂志, 2012, 30(9): 568-571. [7]杨莉莉, 范严严,邓英,等.146株念珠菌的分布及药敏结果分析[J].中华医院感染学杂志2014,14(6):703-704. [8]代敏.医院内念珠菌感染493例临床分析[J].四川医学, 2005,26(9): 984-985. [9]李政,高玲,王玉春,等.498株念珠菌菌种分布及耐药性分析[J].华夏医学, 2013, 26(4): 666-669. [10]李丁, 张文芳, 郑珊, 等. 肿瘤患者真菌感染的菌株分布及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志, 2011, 19(17): 112 -113. [11]任淑华，卢青，陈秀清．2694例医院感染调查分析[J]．中华医学会感染学杂志，2013，12(8):583-584.