吸光度法测定花青素含量备课讲稿

吸光度法测定花青素

含量

吸光度法测定花青素含量

一、试验器材

1 材料与试剂

花青素标样；体积分数95%的乙醇；盐酸、甲醇、正丁醇、硫酸铁铵，均为分析纯。

2 仪器与设备

超声波细胞粉碎机、微波炉、低速大容量多管离心机、UV—1200 型紫外可见分光度计、pHS—3C型酸度计、RE—52型旋转蒸发仪、电子恒温水浴锅。

二.

1、标准曲线的绘制

准确配制质量浓度为0.50 mg/mL的花青素标准溶液，分别吸取0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL置于6支10mL具塞比色管中，各加入甲醇溶液至1.0mL，然后加入6.0mL正丁醇—盐酸溶液（体积比为95∶5）和0.2mL质量分数为2％的硫酸铁铵溶液（临用时配制），摇匀后，置沸水浴中加热40 min，然后迅速冷却，在波长400~600 nm处进行扫描，确定其最大吸收波长530nm，于最大吸收波长处测定花青素标准溶液吸光度，得到标准曲线方程。将待测溶液在最大吸收波长下的吸光度值(平行6次）。再通过标准曲线得出其浓度。