禽流感病毒诊断技术研究进展
禽流感的流行特点和检测技术
中国动物保健2021.06禽流感（avian influenza ，AI ）的潜伏期一般较短，通常为4～5d 。
发病时精神沉郁，食欲、饮欲降低甚至废绝，被毛散乱，体温升高，趴卧不动，偶有流泪。
头部、面部水肿，脚鳞发紫出血，肉垂和鸡冠呈干枯紫色，甚至坏死。
呼吸困难，咳嗽，听诊呈啰音；下痢，粪便呈淡黄或白色。
出现神经症状，共济失调，不能站立或行走。
并且该病为人畜共患病，处理不好不但会危害养禽业的经济发展，还会危害人类身体健康。
1禽流感的流行病学特点1.1传染源主要由感染或携带禽流感病毒的鸡、鸭、鹅等家禽，野外野生鸟类，特别是迁徙性水禽相互传染所致。
1.2传播途径主要通过病禽的分泌物、排泄物、尸体，污染的饮水、饲料和其他物体，直接或间接接触引发感染，主要感染途径为呼吸道和消化道，以及直接接触病毒毒株感染。
人工接种可通过气溶胶经口鼻内、气管内、眼结膜、腹腔、肌肉、静脉和泄殖腔内等途径使易感禽类感染。
1.3易感动物禽流感病毒在世界范围内广泛分布。
许多家禽、野禽、人类、特别是鸭等迁徙水禽，发生病毒感染的概率比其他禽类高，而家养的鸡和火鸡所发生的流感最为严重。
1.4特点多为大流行，世界范围流行。
过去呈三年小流行，五年大流行。
该病主要在寒流较多，气温变化大的秋冬、冬春交替季节流行。
2禽流感的检测技术2.1血清学诊断技术中和试验中和试验的操作步骤复杂，容易造成材料的浪费，临床上不常用，但其为最原始的病毒检测技术，常用来做标准与其他检测方法作比较。
本试验常用鸡胚或组织培养细胞作为样本鉴定禽流感病毒。
中和试验是具有高度的灵敏性和特异性的血清学方法，抗体只和病毒上表面抗原相对应，特别是已吸附的宿主细胞上的病毒颗粒表面的抗原相对应。
所以，在某种特定血清型的中和实验中，抗体只和组内的其他病原发生有限的交叉反应。
琼脂扩散试验琼脂扩散试验检测禽流感时，以具有血凝素活性的鸡胚尿囊液作为样品，采用已知的阳性血清和未知抗原进行病毒抗原型的特异性鉴定。
禽流感病毒的分子生物学研究进展
为 Ａ类 烈 性 传 染 病 。 禽 流 感 病 毒 （ｖ ｎ 抗 病 毒 的感 染 和发 病 。它 是 Ａ 流 感 Ａｉ ａ 型
ｉｆ ｅｚ ｒｓ Ｉ） 型 的病 毒 粒 子为 球 形． 病毒 毒 力 的 主要 决 定 因 素 。 ｎ ｕｎａ ｉ ， Ｖ典 ｌ ｖ ｕＡ
直 径８ ～ ２ ｍ， 时呈 丝 状 体 等 多形 态 ， ０ １０ｎ 有 至
免疫 的主 要抗 原 ， Ａ 病 毒 吸 附及 穿 Ｈ 在 膜过 程 中起 关 键 作 用，刺 激 机 体 产 生 的 中和 抗 体，可 中和病 毒 的感 染 力 ， 抵
月３日．月 １ ３ ４日一３ ２ 日显 著 高 于 对 月 ３
照组（ ＜ ． ） Ｐ ００ 。其余时 问各组差异不 ５
显 著 （＞ ． ） Ｐ ００ 。 ５ 孕酮主动免疫后 （ ３ ， １ 的 表 ）第 组 蛋 重在 １ ０ 月２ 日一 １ ２ 日 ． 月９ 月 ９ ２ 日一 ２
第 ２ 的产 蛋 率 与 对 照组 相 比提 高 ８ 组 ％
（＞ ． ） Ｐ ０ ５ 。第 １ 在 ２ ９ ０ 组 月 日一２ ２ 日 月 １
禽流感病毒 的分子生物学 研究进展
张 平 边 旭 刘桂 林
的产 蛋率 比对 照组 低４ ％（ ＜ ． ）第 ０ Ｐ ００ ， ５ １ 在 其 余 时 间 的产 蛋 率 与 对 照 组 没 组 （ 山西 农 业大 学 动 物科 技 学 院 ， 太谷 山西 中 图分 类 号 ：８５３ ￥５． 文献 标 识 码 ： Ａ ０００ ） ３８ １
１２２ 神 经 氨 酸 酶 ｆ ｕ ａ ｎ ｉ ｓ 。 －－ ｎ ｒｍ ｉ ｄ ｅ ｅ ａ 今Ａ型流 感 病 毒 的 血凝 素 已发 现 有 １ 种 ， ６ 神 Ｎ ） Ａ由病 毒 核 糖 核 酸 （ Ｎ ） Ａ： Ｎ ｖ Ａ 片段 ６ Ｒ
禽流感的实验室诊断技术
得时问。
最常用 的方法 是免 疫双扩散Ｏ ＤＤ １ 。另外 ，还有免疫单辐 射扩 散试验（ Ｓ Ｒ Ｄ） 和对 流免疫 电泳（ Ｃ Ｉ Ｅ ） 。其中Ｓ Ｒ Ｄ可对抗 体进行定性或 定量检测 。而ＣＩ Ｅ 相 对而言则较为敏感 ，操
作简单 ，所 需时间最短 ，ｌ ｈ 即可 出结果 。李 海燕 等（ ２ ０ ０ ０ ）
用Ｏ． ５ ｇ ／ ｍｌ 的ＮＰ － ４ ０ 处 理病毒 蛋 白作 为Ａ ＧＩ Ｄ试验用抗 原， 能检 出禽流 感各 型阳性 血清 ，而 与Ｎ Ｄ、ＭＤ、Ｉ Ｂ 等ｌ ５ 种
其 他鸡 的疫病 阳性血 清均 无交叉 反应 。邓 困华等人 用禽
方法高２ － － ４ 倍 。试 验简便快速 、特 异性好 ，是亚 型鉴 定的 常用 方 法 。 由于用 己知 亚 型 的 抗ｍ 清 不 能 检 出新 的亚
型 ，所以用该法鉴定不如琼脂扩 散凝胶试验简便快捷。 ２ ． ２ 琼脂凝胶免 疫扩散 试验（ ＡＧ Ｉ Ｄ） 免疫扩散法就 是使 抗 原与抗 体在琼 脂糖凝 胶 中 自由扩散而 相遇 ，从而 形成 抗 原 抗 体复 合 物 ， 由 于此 复 合 物 分 子量 增 大 并产 生 聚
下 作 用 下 ，加 入 鸡 红 细 胞 ， 该 法 检 测 的抗 体 效 价 比 常 规
禽流感 是一种 急性传 染病 ，每 次爆发 不但 给养禽业 造成 巨大经济损失 ，而且严重威胁 人类的健康 。由Ａ型流 感病 毒引起 的禽流感 ，其 临床症状 因感 染禽 的种类 、年 龄 、病发感染 情况及 新感 染毒株 的毒 力不 同而表现 不一 致 ，其病 理变化 因感 染病 毒株 毒力 的高低 、病程长 短及 种类 不 同表现 也不尽 相 同，而 且无一 为特征 性症状 和剖
禽流感检测技术研究进展
第 ２卷 １
第１ 期
重 庆 工 学 院 学 报
Ｊｕ ｌ ｆＣ ｏ ｇｒ ￣Ｉｓｉ ｔ ｆＴ ｏ ｍａ ｏ ｈ ｔｎ ｎｔｕｅｏ ｆ ｎ ｉ ｔ
２ｃ 年 １ ０ｒ ７ 月
Ｊｎ．０ ｒ ａ ２ Ｃ ７
Ｖ０ ． １ Ｎ １ １ ２ ｏ．
ｉ ｆ ｉ ｎ ，Ａ Ｖ ａ ｈ ｗ ｉ ｉｅｅ ｃ ｔ ａ ｇ ｎ ｃｔ ｔ ｎ ｏ ｔ ｅ ｓ Ｉ ｈ ｓ ｓ ｏ ｎ ａ ｂｇ ｄ ｆ ｒｎ ｅ ｉ ｅ ｐ ｔｏ ｅ ｉｉ ．Ｅ ｒ ｅｅ ｔ ｎ ａ ｄ ｒｐ ｄ ｄ ａ ｎ ｓｓ ｏ ｎ ａ ｇ ｎｈ ｈ ｙ ａ ｌ ｄ ｔ ｉ ａ ｉ ｉｇ ｏ ｉ ｙ ｃｏ ｎ ｈ ｖ ｅ ｏ ｆ ｃｅ ｔ ａ￣ ｆｒ ｒ ｖ ｎ ｎ ｄ ｃ ｎ ｒｌ ｎ Ｉ ｈ ｅｈ ｄ ｆ ｅｅ ｔ ｇ Ａ ｃｕ ｅ ｍ ｉｌ ａ ｅ ｂ ｃ ｍｅｅ ｉｎ ｌ ｏ ｅ ｅ ｔ ｇ ａ ｏ ｔ ｌ ｇ Ａ ．Ｔ ｅ ｍ ｔｏ ｓｏ ｔ ｉ Ｉｉ ｌｄ ａｎ ｙ ｉ ｍｅ ｐ ｉ ｎ ｏ ｉ ｄ ｃ ｎ ｎ ｓ ｒ ｍ－ ｓ ｎ ｄ ｍｏ ｕａ ｉ ｏ ｉ ｍ ｔｏ ｓ ｄ ｐ ｎ ｉ ｇ Ｏｌ Ｃ ｅｕ ｔ ｔ ａ ｌ ｌｒ ｏ ｇｃ ｅ ｈ ｄ ｅ ｅ ｄｎ ｉ Ｐ Ｒ，ｏ ｈｃ ｕ ｌｉ ｃ ｅ ｔ ｇ ｔｃ ｎ ｑ ｅ ｅｉ ｎ ｇ ｃ ｅ ｂ ｌ ｆｗ ｉ ｎ ｃ ｃ ａ ｉ ｔ ｉ ｅ ｈ ｉ ｕ ｓ ｈ ｅ ｄ ｓ ｎ
ｄ ｐ ｎ ｉｇＰ Ｒ ｂ ｌｎ ｓｔ ｅ ｅｅ ｔ ｎ ｍ ｔｏ ｓ Ｔ ｅｄ ｔ ｔ ｎｍ ｔｏｓａｅｒｖｅ ｅ ｄｔｅｄ ｖ ｌ ｈ ｅ ｄｎ Ｃ ｅ ｇ ｎ ｗ ｄ ｔ ｉ ｈ ｄ ． ｅ ｏ ｏ ｃ ｏ ｅ ｈ ｅ ｉ ｈ ｄ ｒ ｉ ｗ ｄ ａ ｅｅｏ ｇ ｃ ｅ ｏ ｅ ｅ ｎ ｈ ｐ ｐｏｐ ｃｓｏ Ｖ ｄ ｔ ｔ ｇｔ ｈ ｏｏ ｙａｅｄｓｕ ｓｄ ｉ ｅｐ ｐ ｒ ｒｓ ｅ ｔ ｆ ＡＩ ｅｅ ｉ ｎ ｌ ｒ ｉ ｓｅ ｔ ａ ． ｃ ｎ ｅ ｃ ｇ ｃ ｎ ｈ ｅ Ｋｅ ｒ ｓ ｖａ ｆ ｅ ｚ ；ｄ ｔｃｉ ｙｗｏ ｄ ：ａ ｉ ｉｌ ｎａ ｅｅ ｔｎ；ｄａｎ ｉ；ＡＩ ｎ ｎｕ ｏ ｉ ｇｏ ｓ ｓ Ｖ
禽流感病毒与人禽流感的研究进展
胞 中都 具有 功能 ， 以与 相应 的病 毒相 结合 。 因此 ， 可 鼠动 物模 型 可用 于研 究 仅 与 ａ２３Ａ结 合 的毒 株 ， 一，Ｓ 而分化 的人呼 吸道 上皮细 胞 培养 可用 于评估 一 些毒 株是否 容 易感 染人 的一种 工具 。 最近 ，ｈｕ等 ＿还 比较 了新 生儿 与 成 人 巨噬细 Ｚｏ ５ Ｊ
等 。最近 在北 伊拉 克家 猪 中发现 有 与 中国青 海湖 流
行相 似 的 Ｈ Ｎ 毒 株 ＿ 。至 于 血 清 抗 Ｈ Ｎ ５１ ２ Ｊ ５ １阳性 仅 能代 表该 种 动物 曾感染 过 Ｈ Ｎ１不 一定 是该 病毒 的 ５ ， 宿 主或传 播 的媒 介 。 由于 Ａ Ｖ尚未发生 入一 Ｉ 人之 间传 播 ， 严重 急 性 与 呼 吸综 合征 （ Ａ Ｓ 不 同 ， 切 接触 者 人 中很少 有 感 ＳＲ ） 密
禽 流 感 病 毒 与人 禽 流 感 的研 究 进 展
闻玉梅
禽 流感 病毒 （ Ⅳ ） 甲型 流感 病 毒 同属 正 黏 病 Ａ 与 毒 科 （ ｒ ｏ ｕｏｉｄ ｅ 。迄今 根据 血凝 素 Ｈ， 有 １ Ｏｔ ｎ ｘｖ ／ ） ｈ ｒａ 共 ６
宿 主 中流 感病 毒 受体 的研 究
个 亚 型 ， 经氨 酸酶 Ｎ共 有 ９ 亚 型 ， 组 成 １４种 神 个 可 ４
岁 。全球 至今 已 由实 验 室 确 诊 的 人 禽 流 感 患 者 共
染 者 。因此有 学 者认 为受 禽流 感感 染具 有 被禽病 毒
感 染遗 传 的特性 （ｅｅ ｃｐｅｉ ｏｉｏ ） ｇｎｔ ｒ ｓ ｓｉ 。据 分析 ， ｉ ｄ ｐ ｔｎ 在
家庭 中被 Ａ 感 染 者 中常 有 血 缘 关 联性 。如 父 子 、 Ｗ
禽流感病毒H5N1的重组酶介导检测方法学研究
CHINA PORT SCIENCE AND TECHNOLOGY禽流感病毒H5N4的重组酶介导检测方法学研究陈淑丹I廖静I王玲I罗鹏I郭利川2郑伟广吴忠华I应清界2摘要采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法，根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针，将H5N1RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板.扩增检测病毒核酸序列本研究构建了带有H5N1核酸序列的质粒，以此为模板检测不同浓度的质粒.分析该方法的灵敏度，对已知样本进行检测来验证方法的特异性.设计的H5N1特异性引物和探针，能在3『C恒温下，10-30min可有效扩增岀相应病毒的核酸.与其他流感病毒无交叉反应；对质粒的检测灵敏度可达10拷贝建立的RT-RAA检测禽流感病毒H5N1方法灵敏度和特异性均较髙.且该方法操作简单，适用于禽流感病毒H5N1的快速检测关键词禽流感病毒H5N1；逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)；分子检测Rapid Detection of H5N1Avian Influenza Virus Based onRAA Fluoresce n ee AssayCHEN Shu-Dan1LIAO Jing1WANG Ling1LUO Peng1GUO Li-Chuan*12ZHENG Wei1,WU Zhong-Hua1YING Qing-Jie2Abstract A quick assay of detecting H5N1avian influenza virus was established through reverse transcription recombinase-aided amplification assay(RT-RAA).H5N1avian influenza virus RNA was transcribed into the cDNA by a reverse-transcription reaction,which served as template for RAA amplification.We design universal primer and probe according to the conserved nucleic acid sequence of H5N1virus.Then constructed plasmid and clinical samples were used to evaluate the specificity and sensitivity of the method.The results showed that nucleic acids of H5N1could be well amplified with specific primer and probe,while nucleic acids of other viruses had negative amplification results.The whole reaction was completed within30minutes under constant temperature of 39°C.The study indicates that the RT-RAA method is very sensitive and able to detect10copies.The established RT-RAA assay had high sensitivity and specificity,ready-to-hand for rapid detection of H5N1avian influenza virus.Keywords H5N1avian influenza virus；reverse transcription recombinase-aided amplification(RT-RAA)；molecular detectio n基金项目:海关总署科研项目(2019HK139)通讯作者：郑伟(1979-),男，汉族，杭州人，博士，主任医师.主要从事口岸病原体检测工作，E-mail：*************** 1•杭州国际旅行卫生保健中心(杭州海关口岸门诊部)杭州3100122.江苏奇天基因生物科技有限公司无锡2141351.Hangzhou Intemationai Travel Healthcare Center(Hangzhou Customs Port Outpatient Departments),Hangzhou3100122.Jiangsu Qitian Gene Bio-Sci&Tech Co.Ltd,Wuxi2141354中国口岸科学技术禽流感病毒可通过空气传播，引起急性呼吸道感染高致病性禽流感H5N1曾在亚洲、欧洲和非洲引起大量家禽的流感暴发野生鸟类包括海鸟、海鸥和家鸭被认为是病毒的天然宿主。
禽流感实验室检测技术方案
禽流感实验室检测技术方案禽流感，这个让无数人闻之色变的词汇，已经成为我们生活中无法回避的一部分。
如何快速、准确地检测出禽流感病毒，成为了当务之急。
今天，就让我来为大家详细介绍一下禽流感实验室检测技术方案。
我们需要明确检测的目标。
禽流感病毒有多种亚型，我们要检测的是哪些亚型，需要根据实际情况来确定。
一般来说，H5和H7亚型的禽流感病毒对我国养殖业和公共卫生安全威胁较大，因此，我们将重点检测这两种亚型。
我们要选择合适的检测方法。
目前，实验室检测禽流感病毒的主要方法有病毒分离、血清学检测和分子生物学检测。
病毒分离是传统的检测方法，准确性较高，但操作复杂，耗时较长。
血清学检测通过检测抗体来判断病毒感染情况，速度快，但准确性相对较低。
分子生物学检测，尤其是实时荧光定量PCR技术，具有高灵敏度、高特异性、快速简便等优点，成为近年来禽流感病毒检测的主流方法。
下面，我将详细介绍实时荧光定量PCR技术在禽流感实验室检测中的应用。
一、实验材料1.样本：采集疑似感染禽流感的家禽咽喉拭子、泄殖腔拭子等。
2.试剂：实时荧光定量PCR试剂盒、病毒提取试剂盒等。
3.仪器：实时荧光定量PCR仪、离心机、恒温箱等。
二、实验步骤1.样本处理：将采集的拭子样本放入病毒提取试剂盒中，按照说明书操作，提取病毒RNA。
2.模板制备：将提取的病毒RNA与实时荧光定量PCR试剂盒中的缓冲液、酶混合，进行模板制备。
4.结果分析：观察实时荧光定量PCR仪上的扩增曲线和溶解曲线，判断样本是否为阳性。
三、注意事项1.实验过程中要严格遵循无菌操作原则，防止样本污染。
2.实验室人员要具备一定的分子生物学实验技能，确保实验顺利进行。
3.实验结果要及时记录，并与临床诊断相结合，为疫情防控提供有力支持。
通过实时荧光定量PCR技术，我们可以快速、准确地检测出禽流感病毒，为我国养殖业和公共卫生安全保驾护航。
当然，实验室检测只是禽流感防控工作的一部分，我们还需要加强疫情监测、疫苗接种、生物安全等措施，共同抵御禽流感病毒的侵袭。
禽流感病毒血凝素基因研究进展
禽 流感 病 毒 （ Ａｖ ｉ ａ ｎ Ｉ ｎ ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｚ ａ Ｖｉ ｒ ｕ ｓ ， ＡＩ Ｖ） 是 正 粘 病毒 科 （ Ｏｒ ｔ ｈ ｏ ｍｙ ｘ ｏ ｖ ｉ ｒ ｉ ｄ ａ ｅ ） Ａ 型流 感 病 毒 属 （ Ｉ ｎ — ｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｚ ａ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ Ａ ｇ ｅ ｎ ｕ ｓ ） 的负链 Ｒ ＮＡ 病 毒 ， 该 病 毒 除 能 够感 染禽 类 以外 ， 还 会 感 染人 、 猪和马 ， 宿 主 范 围
禽 流 感 病 毒 血 凝 素 基 因研 究 进 展
蒋 梅
摘 要 ： 血 凝 素 在 禽 流 感 病 毒 感 染 细 胞 过 程 中起 到 了 关键 作 用 ， 对 血 凝 素 基 因 的 相 关 研 究 一 直 是 禽 流 感 研 究 的 重 点 和 热 点 。文 章 从 禽 流 感 病 毒 简 介 ， 血 凝 素 基 因的 结 构 特 点 ， 血 凝 素 基 因 编 码 的 蛋 白质 结 构 与 功 能 ， 血 凝 素 裂 解 位 点 的 研 究 情 况 等 方 面 进 行 了综述 。 可 以 为 禽 流 感 的预 防和 治疗 提 供 参 考 。
广 泛 。根据 ＡＩ Ｖ致 病 力 分 为非 致 病 性 禽 流 感 病 毒
（ ＮＰ ＡＩ Ｖ） ， 低致 病性 禽流 感 病毒 （ Ｌ Ｐ ＡＩ Ｖ） 和高 致 病 性 禽 流感病 毒 （ ＨＰ ＡＩ Ｖ） ３种 １ ］ 。病 毒 粒 子 一 般 呈 球形 ， 初代 分离 毒 常 见 有 丝 状 或其 它形 状 ， 有囊 膜 ， 该 完整 病毒 包 含 内 、 中、 外 ３层 结 构 ， 其 中外 层 为 双 层脂质囊膜， 其 表 面 主要 有 血 凝 素 （ ｈ ｅ ｍａ ｇ ｇ ｌ ｕ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ ， ＨＡ） 和神经氨酸酶 （ ｎ ｅ ｕ ｒ ａ ｍｉ ｍｄ ａ ｓ ｅ ， ＮＡ） 两 种 糖 蛋 白纤 突 。 目前 已经 发现 ＨＡ 共 有 １ ６种 亚 型 、 ＮＡ 共 有 １ ０种亚 型口 ］ 。根 据 ＨＡ 和 ＮＡ 抗 原 性 的不 同分 为 多种 血 清亚 型 。 目前 发 现 的高致 病性 禽 流感病 毒
新型H7N9禽流感病毒的研究进展
［ ２ ０ ］蔡颖 ， 周 广彪 ， 赵 书民， 等． 中 国人 群 亲 权 鉴 定 常 用 Ｓ ＴＲ 基 因座 平 均 突 变 率 的估 计 ［ Ｊ ］ ． 中 国 司法 鉴 定 ， ２ ０ １ ０ （ ５ ） ： ５ ６ ５ ９ ． ［ ２ １ ］李 成 涛 ， 郭宏 ， 赵珍敏 ， 等． 亲权鉴定中常用 Ｓ ＴＲ 基 因 座 的基 因组
学 和 遗传 学 分 析 ［ Ｊ ］ ． 中 国法 医学 杂 志 ， ２ ０ ０ ８ ， ２ ４ （ ３ ） ： ２ １ ４ ２ １ ８ ．
［ ２ ２ ］曾 艳 红 ， 孙宏 钰 ， 童 大跃 ， 等． Ｐ ｏ ｗｅ ｒ Ｐ ｌ ｅ ｘ ＴＭ１ ６体 系 在 中 国 人 群 中 罕见等位基因及 其类 型［ Ｊ ］ ． 中 国法 医学杂 志 ， ２ ０ ０ ５ ， Ｉ ９ （ ２ ） ： ７ ８
频率［ Ｊ ］ ． 刑事技术 ， ２ ０ １ １ （ ３ ） ： ５ ２ ５ ３ ．
（ 收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ ４ — ０ ８ ）
［ １ ９ ］Ｚ ｈ ａ ｎ ｇ Ｓ ， Ｚ ｈ ａ ｎ ｇ ｚ， Ｚ ｈ ａ ｏ Ｓ ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｇｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍｓ ｉ ｎ １ ２ ａ ｕ
Ｐ ｏ ｌ ａ ｎ ｄ ［ Ｊ ］ ． Ｌ ｅ ｇ Ｍｅ ｄ（ Ｔｏ ｋ ｙ ｏ ） ， ２ ０ １ ０ ， １ ２ （ ５ ） ： ２ ４ ６ — ２ ４ ８ ． ｒ １ ４ ］Ｓ ｔ ｅ ｐ ａ ｎ ｏ ｖ ＶＡ， Ｍｅ ｌ ｎ ｉ ｋ ｏ ｖ ＡＶ， Ｌ ａ ｓ ｈ Ｚ ａ ｖ ａ ｄ ａ ＡＹ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｖ ａ ｒ ｉ —
［ １ ８ ］Ｌ ｕ Ｄ， Ｌ ｉ ｕ Ｑ， Ｗｕ Ｗ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｍｕ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ２ ４ ｓ ｈ ｏ ｒ ｔ ｔ ａ ｎ ｄ ｅ ｍ ｒ ｅ ｐ ｅ ａ ｔ ｓ ｉ ｎ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｈａ ｎ ｐ ｏ ｐ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ［ Ｊ ］ ． Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｌ ｅ ｇ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ， ２ ０ １ ２ ， １ ２ ６
禽流感的研究进展
来 严 重 的 后 果 。注 意 选 择 适 宜 的 给 药
立 用 药记录 ，农业 部颁 布 了禁 止使 用 的 兽 药及 其化 合 物清 单 。有休 药 期规 定 的兽 药 用 于食 用动 物 时 ，饲养 者应 向购买 者 或者 屠 宰者 提供 准 确 的 、真 实 的用 药 记录 。禁 止 销售 含有 违禁 药
种 呼 吸 系 统 到 严 重 全 身 性 败 血 症 等 多
以 为它 是 一种 自限性 疾病 ，是 一种 真 性 鸡 瘟 。１５ ９ ５年 Ｓ ｈ ｆｒ 实 该 病 原 ｃ ａｅ 证 属 于 Ａ型 流感病 毒 ，１８ 年在 美 国马 ９１ 里兰 州 召开 的 首 届禽 流感 会议 上把 该
禽 流感 病毒 广 泛分 布 于 许 多家 禽
在 宾 夕法 尼亚 州 、弗 吉尼 亚 州、新 泽
西 州 暴 发 的 ＨＰ ， 资 ５ ０万 美 元 ， ＡＩ 耗 ０ 间 接 经 济 损 失 达 ３４ ．９亿 美 元 。 我 国
二 、病 原学
（ ）分 类和命名 禽流感的病原 一 为禽流感 病毒 ， 类属于正黏 病毒 科 。 分 根据 病原核蛋 白 （ ＮＰ） 和膜 蛋白 （ ＭＰ） 抗 原 及其 基 因特性 的 不 同将流 感病 毒 分 为 Ａ、Ｂ、Ｃ三型。Ａ型流 感病 毒可 引起 人和 动物 发 生流 感 ，常以 流行 形 式 出现 ，引起 世界 性 流 感大 流行 ，在 动物 中广 泛 存在 ，也 可能 引起 大批 动 物死 亡 ，Ｂ型和 Ｃ型流 感病 毒 主要 引 起人 发生流感 。 Ａ 型流 感病 毒根 据 表面 抗 原血 凝
一
区 病定名 为 “ 高致病性 禽流感 ”（ ｉｈ ｙ Ｈ ｇ ｌ 个 省 （ ） 的部 分 地 区暴 发 禽 流 感 。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
禽流感病毒诊断技术研究进展
一、引言
禽流感是一种高致病性病毒性疾病，目前已在世界范围内造成大量的家禽死亡和经济损失。
禽流感病毒的快速检测和准确诊断对于疫情的防控和阻断至关重要。
该文将介绍目前禽流感病毒诊断技术的研究进展。
二、免疫学诊断技术
1. 细胞培养法
细胞培养法是禽流感病毒的最早诊断方法之一，通过将感染样品接种细胞培养物中，观察是否有细胞损伤和病毒分离情况。
但由于该方法需要特定实验室条件，并且需要较长时间，因此已渐被其他更先进的诊断技术所取代。
2. 补体结合反应（CFT）
CFT是一种免疫学诊断方法，它通过观察血清中禽流感特异性抗体和禽流感病毒抗原之间的补体结合情况来诊断病毒。
但是，由于该方法对试剂质量和操作技巧要求较高，且存在假阴性和假阳性等问题，因此不常用于临床检测。
3. 酶联免疫吸附试验（ELISA）
ELISA是一种快速、准确和经济的诊断方法。
该方法利用特异
性抗体与抗原之间的特异性结合，通过酶标记活性物质，使结合
物可定量检测。
目前，ELISA已被广泛应用于疫情监测和疫苗效
果评估等方面。
4. 荧光素酶联免疫吸附试验（F-ELISA）
F-ELISA是一种对传统ELISA方法的改进，它利用荧光素作为
标记物，从而提高了灵敏度和特异性。
F-ELISA操作简单、快速、可靠，已被广泛用于临床检测和疫情监测。
三、分子诊断技术
1. 聚合酶链反应（PCR）
PCR是一种高度敏感和特异的分子诊断技术，它能够从样品中
扩增病毒DNA或RNA片段，从而进行病毒诊断。
PCR具有快速、准确、可靠的优点，因此已成为禽流感病毒诊断的首选方法之一。
2. 实时荧光定量PCR（RT-qPCR）
RT-qPCR将常规PCR与荧光标记技术相结合，能够快速、准
确地扩增、检测禽流感病毒。
该方法可用于样品的快速筛选和诊断。
此外，RT-qPCR还可用于研究禽流感病毒的毒株差异和基因
变异。
3. 巢式PCR
巢式PCR是将PCR的灵敏度和特异性提高到更高水平的方法。
它通过多次扩增同一片段，将PCR的敏感度提高到单个病毒分子
级别。
在禽流感病毒的早期检测和病毒数量极少或稀有的情况下，该方法显示出较高的应用潜力。
四、新兴诊断技术
1. 全基因组测序
全基因组测序是一种新兴的病毒检测技术，它可同时检测多种
禽流感病毒亚型。
全基因组测序的应用不仅有利于加强对病毒流
行病学分析，还对疫苗设计和病毒毒株的遗传进化研究具有重要
意义。
2. 大规模平行DNA测序技术（NGS）
NGS可进行高通量的DNA测序，并且快速排除假阴性和假阳
性的可能。
NGS可用于检测不同样本类型（如禽体、环境样本和
粪便样本）中的禽流感病毒，并可用于病毒基因组扩增、组装和
变异分析研究。
五、结论
禽流感的快速检测和准确诊断对于有效预防和控制疫情至关重要。
目前，免疫学诊断技术和分子诊断技术是目前禽流感病毒诊
断的主要方法。
然而，随着新技术的不断涌现，尤其是全基因组
测序和NGS技术的应用，禽流感病毒控制和预防的诊断水平和效果将有所提高。