药品不仅在生产过程中会遭到微生物的污染
无菌技术在药物制备中的应用
无菌技术在药物制备中的应用随着现代化医疗的发展和技术的进步，药物制备在医疗领域中扮演着至关重要的角色。
然而，药物对人体产生的影响也是不可忽视的。
其中一个重要的问题就是药品的安全性。
如果药品制备过程中存在污染，就会造成严重的后果。
为了解决这一问题，无菌技术应运而生。
1. 无菌技术的概念无菌技术是指一种能够在制备药品过程中全面控制微生物数量和污染的技术。
它在医疗领域中使用，应用于药品制备和生物制品中，主要针对微生物供给的干扰。
无菌技术使用多种不同的方式保证无菌条件，从而确保在生产过程中不会产生微生物。
无菌技术有两种主要形式：无菌工艺和无菌隔离技术。
无菌工艺是指使用多种方式来预防微生物的污染，例如操作条件的控制和空气过滤。
无菌隔离技术是指使用正压隔离器，避免微生物进入工作区域。
2. 无菌技术的应用无菌技术在药品制备和生物制品的制造过程中广泛应用。
在药品制备的DO，从基础研究到药品包装，无菌技术都发挥着重要的作用：2.1 无菌填充和灭菌技术这是药品制备中最重要的无菌技术之一。
无菌填充是指在不污染药品的情况下，将药液或固体药品装入容器中。
在无菌条件下进行，无菌填充需要使用严格的生产工艺和设备，避免发生微生物污染。
灭菌技术是将容器和药品表面上的微生物全部清除，这可以使用高温或者紫外线灭菌、微生物毒性化学物质灭菌、过滤器材灭菌以及其他的灭菌手段来实现。
2.2 人工助理控制在药品制备过程中，经常需要对药品进行操作，无菌技术也在这些操作中起到了重要的作用。
例如，对于需要使用人工操作的药品，如注射液或制剂，需要使用严格的人工助理控制，确保操作的高度无菌化。
2.3 空气过滤、控制温湿度等无菌技术还包括空气过滤和温湿度控制等一系列措施。
空气过滤技术用于去除空气中的尘埃和微生物，控制温度和湿度也能帮助去除微生物干扰因素，从而有效提高无菌效率。
3. 无菌技术的重要性无菌技术的重要性在于，药品制备过程中的微生物污染会给病人带来威胁和健康风险。
微生物在药品中的应用
微生物在药品中的应用微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们在药品的研发、生产和应用中发挥着重要的作用。
本文将介绍微生物在药品中的应用，并探讨其优势和挑战。
一、微生物在药品研发中的应用1. 抗生素的发现与开发抗生素是一类能够抑制或杀死细菌的药物。
大部分抗生素都是由微生物产生的，如青霉素、链霉素等。
通过对微生物的筛选和改造，科学家们不断发现新的抗生素，并改进已有的抗生素，以应对细菌的耐药性问题。
2. 疫苗的研制疫苗是一种预防传染病的药物，通过激活人体免疫系统来产生抗体。
许多疫苗都是利用微生物的特性制备而成的，如麻疹疫苗、流感疫苗等。
微生物在疫苗研制中的应用，不仅可以提高疫苗的效果，还可以减少副作用。
3. 生物制剂的开发生物制剂是利用微生物或其产物制备的药物，如重组蛋白药物、基因治疗药物等。
微生物在生物制剂的开发中发挥着重要的作用，可以通过基因工程技术改造微生物，使其产生特定的蛋白质或基因产物，用于治疗各种疾病。
二、微生物在药品生产中的应用1. 药品的发酵生产许多药品的生产过程需要利用微生物进行发酵，如抗生素、酶制剂等。
微生物通过代谢产生的酶可以催化药品的合成，提高产量和纯度。
同时，微生物的发酵生产过程相对简单，成本较低，适用于大规模生产。
2. 微生物的代谢工程微生物的代谢工程是指通过基因工程技术改造微生物的代谢途径，使其产生特定的代谢产物。
这种方法可以用于生产高效的药品原料，如氨基酸、维生素等。
微生物的代谢工程不仅可以提高产量，还可以改善药品的质量和纯度。
三、微生物在药品应用中的优势和挑战微生物在药品应用中具有以下优势：1. 多样性和适应性：微生物种类繁多，可以应用于不同类型的药品研发和生产。
2. 高效性和低成本：微生物的生长和繁殖速度较快，可以在短时间内大量产生药品原料，同时生产成本相对较低。
3. 可控性和可调节性：微生物的生长和代谢过程可以通过调节培养条件来控制和调节，以获得所需的药品产物。
注射剂生产过程中微生物的质量风险控制
注射剂生产过程中微生物的质量风险控制【摘要】注射剂是一种直接进入人体血液循环而发生作用的药品，为此要严格控制注射液微生物污染。
因此本文从注射剂选择适应的灭菌参数、f0值灭菌应用、灭菌效果验证方面进行探究注射剂生产过程中微生物的质量风险控制,以此保障灭菌过程均匀完善，提高注射液的安全性、稳定性、有效性。
在探究后总结，注射剂生产过程中微生物的质量风险控制主要还是保证生产过程中应用适当的灭菌工艺，并且严格执行gmp管理，以此保障良好的无菌生产体系，这就要求注射液在生产的各个环节应采取有效措施严格控制微生物污染，确保无菌安全，避免微生物风险，在生产过程中尽可能的完全灭菌，以此保证注射液产品的无菌安全。
【关键词】注射剂；生产过程；微生物；质量风险控制注射剂是一种直接进入人体血液循环而发生作用的药品，为此要严格控制注射液微生物污染，就显得尤为重要。
因此全部生产过程中的灭菌成为保障该注射液药品质量安全的关键工序，同时灭菌过程均匀完善程度直接关系到注射液的安全性、稳定性、有效性[1]。
1注射剂选择适应的灭菌参数要根据药物的理化性质、稳定性和生物学特性及临床用药的顺应性来保证制剂无菌水平。
一般湿热灭菌条件采用121℃×15min、121℃×30min、116℃×40min的程序，以此必须保证邪君后的微生物存活率≤10-6，即没100万个注射剂中存活微生物不得超过1个，以此保证灭菌后制剂的无菌保证水平。
注射剂生产过程中，为保证灭菌效果，应在密闭的制剂灭菌容器内，进行加压高温灭菌，若压力和灭菌时间不当，则不能有效杀死所有芽孢和细菌繁殖体。
对于含糖类注射剂和氨基酸类营养性注射液，高温灭菌条件会影响药物产生不稳定性，因此注射剂选择适应的灭菌参数时，要保障高温灭菌的安全性，也要保障注射剂的稳定性，以此能够即可有效去除微生物，确保药剂治疗的稳定性。
若灭菌方式方法不当，灭菌温度低、灭菌时间短，达不到灭菌目的；灭菌温度高、时间长，注射剂会产生杂质。
微生物在生物制药中有哪些应用
微生物在生物制药中有哪些应用在当今的生物制药领域，微生物扮演着至关重要的角色。
微生物的多样性和独特的生物学特性为药物研发和生产提供了丰富的资源和可能性。
首先，微生物可以作为生物活性物质的来源。
许多微生物能够产生具有药用价值的化合物，比如抗生素。
抗生素是一类用于治疗细菌感染的重要药物，它们大多是由微生物合成的。
例如，青霉素就是由青霉菌产生的一种抗生素。
在过去的几十年里，从微生物中发现的抗生素拯救了无数人的生命。
除了青霉素，还有许多其他种类的抗生素，如头孢菌素、四环素等，也都是来自微生物的代谢产物。
微生物还能产生一些具有抗肿瘤活性的物质。
比如，一些放线菌能够合成具有抗癌作用的药物。
这些药物通过干扰肿瘤细胞的生长和分裂，达到治疗癌症的效果。
此外，微生物产生的免疫调节剂也在生物制药中具有重要地位。
它们可以调节人体的免疫系统，增强机体对疾病的抵抗力。
其次，微生物在基因工程药物的生产中发挥着关键作用。
基因工程技术使得我们能够将特定的基因导入微生物细胞中，让微生物按照我们的需求大量生产所需的蛋白质药物。
例如，胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。
过去，胰岛素主要从动物的胰腺中提取，产量低且成本高。
通过基因工程技术，将人类胰岛素基因导入大肠杆菌或酵母菌中，这些微生物就能大量合成与人胰岛素结构和功能相同的蛋白质，从而满足了广大糖尿病患者的治疗需求。
再比如，生长激素也是通过基因工程微生物生产的重要药物。
它可以用于治疗儿童生长发育迟缓等疾病。
利用微生物进行基因工程药物的生产，具有成本低、产量高、易于控制质量等优点，极大地推动了生物制药产业的发展。
微生物还在疫苗的研发和生产中有着广泛的应用。
疫苗是预防传染病的有效手段，而微生物则是许多疫苗的基础。
传统的疫苗制备方法包括减毒活疫苗和灭活疫苗。
减毒活疫苗是通过对病原体进行人工减毒处理，使其保留免疫原性但失去致病性。
例如，麻疹、风疹等疫苗就是减毒活疫苗。
灭活疫苗则是通过物理或化学方法将病原体杀死，但保留其抗原性。
中药口服制剂微生物限度检查不合格的原因及解决办法
中药口服制剂微生物限度检查不合格的原因及解决办法这几年中药生产企业执行GMP 的力度愈来愈强，提升了产品质量。
但同时也出现了一些意想不到的问题，如一些企业发生了产品微生物限定检查不合格的质量事故。
2010版中国药典提高了制剂微生物限度检查标准，如增加培养基适用性检查，延长细菌培养时间。
GMP( 2010 年修订) 第四十八条要求，口服液体和固体制剂暴露工序区域，应当采取适当的微生物监控措施。
因此对中药制剂微生物限度超标进行有针对性的分析并提出解决问题的措施尤为重要，下面围绕中药生产的一系列环节分析微生物限度检查不合格的因素。
由于国家强制推行GMP，中药生产企业的厂房、设施等硬件设施越来越先进，软件管理水平也提升较快。
但一些设备如喷雾干燥、一步制粒大大缩短了物料干燥时间，除细菌、霉菌、控制菌的效果却不如烘房。
另外洁净区密闭加恒温恒湿的空气非常适合微生物的生长和繁殖。
人员是药品生产中主要的污染源，人体表面、衣服的污染物随着人的各种动作也会散发出来。
所以中药生产中药防止污染，首先要从人抓起。
进入生产区域的人员应与房间面积相匹配。
如人员数量较多，语言交流、咳嗽生产操作等活动会导致人体表面、衣服排出大量的污染物，这些污染物随着人体动作散发在空气中，增加了污染药品的可能性。
这些人员包括QA 检查员、设施检修人员、外单位检查参观人员等，一部分这类人员对微生物知识不甚了解，不规范的穿着、维修极易给生产区域带来新的污染源。
所以对非生产区域操作人员进行有关微生物、洁净区的培训很有必要。
制剂生产区域的人员应具有较高学历，应易接受内容繁多的微生物知识，并有较强的洁净生产意识。
对操作人员进行有效培训是很有必要，这些培训的着重点包括洗手、手消毒、洁净服的穿戴要求等。
规范化的操作能大大减少人直接或近距离与药品接触而带来的污染。
但是在实际操作中，操作人员操作存在诸多问题，如规范操作意识不强、洁净服不穿或穿戴不规范、用手直接接触最终灭菌物料、大声闲聊及野蛮操作。
浅谈中药原生药粉常用的几种灭菌方法
浅谈中药原生药粉常用的几种灭菌方法【摘要】中药原生药粉在中药制备中起着至关重要的作用，保证其质量和安全性需要进行灭菌处理。
本文主要介绍了几种常用的灭菌方法，包括高温灭菌法、紫外线灭菌法、化学灭菌法、蒸汽灭菌法和辐射灭菌法。
通过选择合适的灭菌方法，可以有效地杀灭原生药粉中的微生物，确保其质量和安全性。
在中药制备过程中，灭菌方法的选择是十分重要的，只有采取正确的灭菌措施，才能保证原生药粉的质量符合规定标准，让人们用药更加放心。
对于中药原生药粉的生产和使用，必须重视灭菌工作，选择适合的灭菌方法，以确保药材的质量和安全性。
【关键词】中药原生药粉、灭菌方法、高温灭菌、紫外线灭菌、化学灭菌、蒸汽灭菌、辐射灭菌、质量、安全性1. 引言1.1 中药原生药粉的重要性中药原生药粉是指由中药材破碎、粉碎后得到的粉末状药物原料。
在中药制药过程中，原生药粉是非常重要的一环，因为它直接影响着最终的药品质量。
中药原生药粉可以作为制剂的原料，也可以直接用于制成中药饮片等剂型。
其质量直接关系到中药制剂的药效、安全性以及稳定性。
中药原生药粉的重要性主要体现在以下几个方面：中药原生药粉是中药制剂的基础，它的质量直接决定了最终制剂的质量。
如果原生药粉质量不过关，将会影响制剂的功效，甚至导致药物的副作用。
中药原生药粉的纯度和微生物含量直接关系到药物的安全性。
如果原生药粉未经适当处理，可能会导致微生物的污染，从而影响药物的品质和安全性。
保证中药原生药粉的质量至关重要。
为了确保原生药粉的质量和安全性，在生产过程中需要采取一系列的灭菌方法来消除可能存在的微生物及其他有害物质，从而确保原生药粉的质量和安全性。
1.2 灭菌方法的必要性灭菌方法是中药原生药粉加工过程中不可或缺的环节，其必要性主要体现在以下几个方面：1. 保证原生药粉的质量和安全性。
中药原生药粉往往受到空气、水分、温度等环境因素的影响，容易受到细菌、霉菌等微生物的侵害，从而影响其药效和安全性。
微生物学在制药中的应用
微生物学在制药中的应用随着科技的不断发展，微生物学成为了制药领域中的一个重要分支。
微生物是生命活动的基本单位，存在于生态环境中的各种生物中，具有重要的生态、经济和社会价值。
自古以来，微生物就被人们广泛地应用于生产生活中，包括食品、化妆品、环保等方面。
而在制药中，微生物学的应用更是重要且不可或缺的，无论是从开发新药、提高药效、生产药物、减少药物副作用等方面来看，微生物学都发挥了重要的作用。
1. 微生物开发新药微生物是制药过程中不可或缺的一部分，其中最具有代表性的就是抗生素。
抗生素是抑制细菌生长和扩散的一类化合物，可用于治疗细菌引起的感染性疾病，包括肺炎、泌尿系感染、结核病等。
然而，细菌对抗生素的抵抗力增强，抗生素的疗效逐渐降低。
因此，开发新型抗生素成为制药研究的一个重要方向。
一些常见的抗生素，如青霉素、链霉素等，都是由微生物合成而来的。
在微生物的发酵过程中，通过调节培养基的成分、培养条件等，刺激微生物产生出一些新的化合物。
这些新化合物往往具有杀菌或抑菌作用，可以用于开发新型的抗生素。
此外，微生物还可用于制备疫苗、药物酶等。
可以说，在开发新药方面，微生物的应用为我们的健康提供了重要的保障。
2. 微生物制备药物微生物的应用不仅仅局限于药物的发现，还可以在药物的生产过程中发挥作用。
许多药物是在微生物的发酵生产过程中合成的。
常见的如水杨酸钠、链霉素、利福平、头孢菌素等。
这些药物在生产过程中不仅可以方便、廉价地合成，而且质量也可以得到保证。
与采集天然药源相比，利用微生物发酵合成更能满足人们日益增长的药物需求量。
微生物的发酵技术已经成熟，工业生产已经广泛应用于生产中。
微生物的发酵过程可以通过调节培养基、培养条件等手段来合成药物，其生产效率和质量远优于传统的人工合成方法。
这一技术的发展，使得药物的生产的成本得到了大幅降低，以及提高了纯度和质量，使得我们消费者受益匪浅。
3. 微生物降低药物副作用随着生产方式的不断改进和技术的不断发展，微生物学还为降低药物副作用提供了一些途径。
生产过程防止污染、交叉污染、混淆和差错的管理规程
生产过程防止污染、交叉污染、混淆和差错的管理规程目的：建立防止污染、交叉污染、混淆和差错管理规程，规定了在药品生产活动过程中防止污染、交叉污染、混淆和差错管理内容和要求适用范围：适用于药品生产活动过程中防止污染、交叉污染、混淆和差错的管理职责：生产技术部、质保部、车间对实施本规程负责内容:1．定义1。
1污染：在生产、取样、包装或重新包装、贮存或运输等操作过程中，原辅料、中间产品、待包装产品、成品受到具有化学或微生物特性的杂质或异物的不利影响。
1.2 交叉污染：不同原料、辅料及产品之间发生的相互污染。
1。
3混淆：在生产或包装的过程中,误将一种或一批物料当成了另一种或另一批物料进行使用、操作.1。
4 差错:在生产过程中,因为计量器具未调试到位、或计量方式不正确、或计数不准确而造成的错误2. 产生污染、交叉污染、混淆和差错的原因2.1 人员：操作人员患有传染病、皮肤病等,或未接受卫生方面的培训，未按要求穿戴工作服,行为不规范、人员带来外部污染，生产人员未按工艺规程和SOP要求操作，工作责任心不强，工作量过大，操作中随意性大等。
2。
2 设备：表面不光洁、平整，材质不稳定，不易清洁，设备选型不合理，维修、保养不及时，没有定期验证或没有保持验证状态。
生产中使用的设备、容器无状态标志，清场不彻底等造成混淆。
2。
3 物料：购进的原辅料本身质量不好，或在运输、贮存、检验取样、配料过程中造成污染。
原辅料微生物指标超限。
原辅料、包装材料、半成品、中间体等无明显标志,放置混乱，散装或放在易破损的包装中，印刷性包装材料管理不善等。
2.4 文件：文件管理制度不健全，或执行不力,无复核、监控，发现问题未及时查找原因等，特别是配料、包装等重要部门管理不严格。
2.5 环境：厂房设计不合理，生产环境如空气中粒子过多,车间地面、墙壁、天花板等不平整、易脱落、长霉、消毒不严格等造成污染。
2.6 清洁:清洁效果不能保证微生物除去水平及残留限度,清洁剂残留、消毒剂效果不能保证；生产结束后不及时清洁清场等造成污染。
食品生产过程中的微生物污染如何控制
食品生产过程中的微生物污染如何控制在食品生产领域，微生物污染一直是一个备受关注的重要问题。
微生物污染不仅会影响食品的质量和安全，还可能对消费者的健康造成严重威胁。
因此，有效地控制食品生产过程中的微生物污染至关重要。
微生物污染的来源多种多样。
首先，原材料可能携带各种微生物，如细菌、霉菌和病毒等。
在采购原材料时，如果没有严格筛选和检测，就容易引入污染。
其次，生产环境中的空气、水、设备表面以及操作人员等都可能成为微生物的传播媒介。
此外，不合理的加工工艺和储存条件也会为微生物的生长和繁殖创造有利条件。
那么，如何在食品生产过程中有效地控制微生物污染呢？首先，要从源头抓起，严格把控原材料的质量。
在采购原材料时，应选择信誉良好的供应商，并要求其提供相关的质量检测报告。
对于易受微生物污染的原材料，如肉类、蛋类、乳制品等，要加强检测力度，确保其符合卫生标准。
在储存原材料时，要根据不同的特性，创造适宜的储存环境，如控制温度、湿度等，以防止微生物的滋生。
生产环境的卫生控制是关键的一环。
保持生产车间的清洁和卫生是至关重要的。
定期对车间进行彻底的清洁和消毒，包括地面、墙壁、设备表面等。
对于空气，应采用合适的过滤和净化系统，减少空气中微生物的含量。
同时，要确保生产用水的质量，定期检测水质，防止水中的微生物对食品造成污染。
设备的清洁和消毒不容忽视。
食品生产设备在使用后，会残留食品残渣和微生物。
因此，每次使用后都要进行及时、彻底的清洁和消毒。
对于一些难以清洁的部位，要特别注意，制定专门的清洁方案。
定期对设备进行维护和检查，确保其正常运行，避免因设备故障而导致微生物污染。
合理的加工工艺对于控制微生物污染也起着重要作用。
在加工过程中，要控制好温度、时间等参数。
例如，在加热处理食品时，要确保温度足够高、时间足够长，以杀灭其中的微生物。
对于一些需要低温处理的食品，要严格控制温度，防止微生物在低温下生长。
操作人员的卫生意识和操作规范同样重要。
工业生产过程中的微生物污染控制
工业生产过程中的微生物污染控制工业生产是现代社会的重要支柱之一，在各行业的生产过程中，难免会面临着微生物污染的问题。
微生物对于人类的影响，可能是正面的，也可能是负面的。
在工业生产中，微生物常常扮演着破坏者的角色，它们会通过多种途径进入生产环境和产品中，影响到生产的质量和效率，甚至会威胁到人类的健康。
为了对抗微生物污染，工业企业需要进行严密的微生物污染控制。
一、微生物污染的来源和危害微生物污染的来源主要分为生产环境和原材料两大类。
在生产环境中，微生物可以通过气、水、土壤、粉尘、工作人员等多种途径进入生产区域。
在原材料中，一些动植物性原材料往往是微生物的良好培养基，这些原材料如果未经过有效的杀菌处理就会成为污染源，引发生产中的微生物污染。
微生物的污染对工业生产具有严重的危害。
首先，微生物会对生产设备和生产环境造成腐蚀、氧化、变质等影响，降低设备的寿命和运行效率。
其次，微生物污染还会影响产品的品质和口感，进而降低产品的市场竞争力。
最重要的是，一些病原微生物的污染可能会导致生产工人和消费者受到感染，危及他们的生命健康。
二、微生物污染控制的原则和方法为了防止微生物污染造成的危害，工业企业需要遵循微生物污染控制的原则和方法进行防治。
微生物污染控制的主要原则包括避免、屏障和消灭三个方面。
1. 避免避免微生物污染的产生是微生物污染控制的首要原则。
工业企业应该加强对生产现场的环境检测，对可能引入微生物的环节进行严密管理。
生产人员应严格按照生产操作规程进行操作，避免在操作过程中引入微生物。
此外，原材料和辅料需要经过严格的微生物检测和处理，做到消灭原材料中的微生物源。
2. 屏障屏障是指在生产环节中设置防护屏障，避免微生物传播扩散。
比如在生产车间设置空气净化器，防止空气中的微生物进入生产车间。
还可以在生产流程中设置不同的关键控制点，监控和管理微生物污染的来源。
3. 消灭消灭是指在生产流程中使用合适的方法，对已经存在的微生物进行立即消灭。
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药品不仅在生产过程中会遭到微生物的污染，在检验过程中也会被污染，因此必须采取一定的措施使生产和实验室设施的微生物污染处于受控状态或者完全被消除（如采用隔离技术）。在实际的操作中，可以采用物理和化学的方法来控制微生物的生长，其中化学方法是用化学消毒剂将环境中的微生物杀灭或降低其在环境中的污染程度。
我国GMP规定中强调，设备清洗是必要的验证内容之一。制药企业必须制定清洁和灭菌的标准操作规程(SOP)，并定期进行验证，以确证清洁与灭菌的有效性。每个使用者都应当对消毒剂在各种不同的使用条件下的消毒效果进行评价，因为消毒剂的杀菌结果会受到被消毒表面的类型、与被消毒物的接触时间以及相关设施中的微生物种群的影响，同时，制药企业还应当用从自身环境中分离出来的微生物来测定消毒剂对这些微生物的杀灭效果。
1 验证前的准备 1.1 考虑因素 验证工作要考虑的因素主要有：（1）基于消毒剂本身的消毒能力进行设计及评价；（2）基于生产和实验室环境真实生物负载进行设计及评价；（3）验证内容应包括消毒条件、方法、所用介质、消毒剂浓度、消毒时间、消毒剂的交替使用等；（4）选择合适的试验方案；（5）审计生产／供应商；（6）所有的规程、方法和结果均要形成文件，以提供一个完整的验证项目的永久性书面记录。
1.2 生物负载的测定 对可能污染洁净室的生物负载要进行调查研究，以确定室内存在的微生物数量和种类。测定生物负载的方法一般包括平面取样法、棉签技术和浸演法。
1）平皿取样法。又称Rodac Plate法，仅适用于平整的表面。盘内灭菌琼脂直接与设备或设施表面接触，然后加盖，在预定时间和规定温度下（例如30～35℃或20～25℃）进行培养，用肉眼对微生物计数并识别。如有必要，还需鉴别菌种。普通使用的培养基是标准方法琼脂或标准方法琼脂加卵磷脂和吐温80。此法明显缺点是会将培养基残留在取样点表面。
2）棉签技术和浸渍法。棉签取样能用于Rodac Plate取样法无法取样的场合，例如角落、缝隙等处。棉签可由棉花和涤纶构成，如果是由海藻酸钙做成的最好不过（该材料能溶于稀释液中释放微生物）。棉签用灭菌稀释液预润湿，擦试取样后放入装有预灭菌稀释液的试管中搅动，以释放出微生物，稀释液则注入培养盘培养，然后计数并鉴别。取样的多少必须有规定（例如100cm2），另外必须采用一个恰当的稀释液（例如美国药典中的磷酸缓冲液pH=7.2）。必须注意的是，任何被选定的稀释液必须用一种对照菌种进行抑菌试验。
1.3 选择消毒方法 选择化学消毒剂必须对其某些性质予以鉴定，包括消毒效果的预期水平、作用于微生物的类型、对操作人员的毒性程度和沾染在被消毒设备上的残存量。所选化学消毒剂应能杀死细菌、细菌抱子、酵母和霉菌，而不是仅仅制止它们的繁殖。其杀菌范围应能涵盖对工作现场进行的生物负载测定时发现的微生物种群，且至少应有两种杀菌剂（或5～6种）轮流使用，以避免产生耐药性。 1.4 制定验证方案 验证方案一般应包括前言、责任、步骤、合格标准等内容。“前言”应阐明验证的目的、验证的内容和原因。“责任”应详尽把整个验证的每一个部分落实到具体的部门和个人。“步骤”应说明取样方法（包括取样数量和取样点）以及样品传递到实验室的方法，测试方法应尽可能具体并附有相关SOP和文件表格。“合格标准”必须有限定范围，包括当结果超越限度时如何进行调查和纠正的方法。
由于没有特定的测试方法要求，不同的企业可采用不同的试验方案，理想的做法是将试验方案分为实验室考察和现场考察两部份。
药品不仅在生产过程中会遭到微生物的污染，在检验过程中也会被污染，因此必须采取一定的措施使生产和实验室设施的微生物污染处于受控状态或者完全被消除（如采用隔离技术）。在实际的操作中，可以采用物理和化学的方法来控制微生物的生长，其中化学方法是用化学消毒剂将环境中的微生物杀灭或降低其在环境中的污染程度。
我国GMP规定中强调，设备清洗是必要的验证内容之一。制药企业必须制定清洁和灭菌的标准操作规程(SOP)，并定期进行验证，以确证清洁与灭菌的有效性。每个使用者都应当对消毒剂在各种不同的使用条件下的消毒效果进行评价，因为消毒剂的杀菌结果会受到被消毒表面的类型、与被消毒物的接触时间以及相关设施中的微生物种群的影响，同时，制药企业还应当用从自身环境中分离出来的微生物来测定消毒剂对这些微生物的杀灭效果。
1 验证前的准备 1.1 考虑因素 验证工作要考虑的因素主要有：（1）基于消毒剂本身的消毒能力进行设计及评价；（2）基于生产和实验室环境真实生物负载进行设计及评价；（3）验证内容应包括消毒条件、方法、所用介质、消毒剂浓度、消毒时间、消毒剂的交替使用等；（4）选择合适的试验方案；（5）审计生产／供应商；（6）所有的规程、方法和结果均要形成文件，以提供一个完整的验证项目的永久性书面记录。
1.2 生物负载的测定 对可能污染洁净室的生物负载要进行调查研究，以确定室内存在的微生物数量和种类。测定生物负载的方法一般包括平面取样法、棉签技术和浸演法。
1）平皿取样法。又称Rodac Plate法，仅适用于平整的表面。盘内灭菌琼脂直接与设备或设施表面接触，然后加盖，在预定时间和规定温度下（例如30～35℃或20～25℃）进行培养，用肉眼对微生物计数并识别。如有必要，还需鉴别菌种。普通使用的培养基是标准方法琼脂或标准方法琼脂加卵磷脂和吐温80。此法明显缺点是会将培养基残留在取样点表面。 2）棉签技术和浸渍法。棉签取样能用于Rodac Plate取样法无法取样的场合，例如角落、缝隙等处。棉签可由棉花和涤纶构成，如果是由海藻酸钙做成的最好不过（该材料能溶于稀释液中释放微生物）。棉签用灭菌稀释液预润湿，擦试取样后放入装有预灭菌稀释液的试管中搅动，以释放出微生物，稀释液则注入培养盘培养，然后计数并鉴别。取样的多少必须有规定（例如100cm2），另外必须采用一个恰当的稀释液（例如美国药典中的磷酸缓冲液pH=7.2）。必须注意的是，任何被选定的稀释液必须用一种对照菌种进行抑菌试验。
1.3 选择消毒方法 选择化学消毒剂必须对其某些性质予以鉴定，包括消毒效果的预期水平、作用于微生物的类型、对操作人员的毒性程度和沾染在被消毒设备上的残存量。所选化学消毒剂应能杀死细菌、细菌抱子、酵母和霉菌，而不是仅仅制止它们的繁殖。其杀菌范围应能涵盖对工作现场进行的生物负载测定时发现的微生物种群，且至少应有两种杀菌剂（或5～6种）轮流使用，以避免产生耐药性。
1.4 制定验证方案 验证方案一般应包括前言、责任、步骤、合格标准等内容。“前言”应阐明验证的目的、验证的内容和原因。“责任”应详尽把整个验证的每一个部分落实到具体的部门和个人。“步骤”应说明取样方法（包括取样数量和取样点）以及样品传递到实验室的方法，测试方法应尽可能具体并附有相关SOP和文件表格。“合格标准”必须有限定范围，包括当结果超越限度时如何进行调查和纠正的方法。
由于没有特定的测试方法要求，不同的企业可采用不同的试验方案，理想的做法是将试验方案分为实验室考察和现场考察两部份。
2 验证试验 2.1 现场考察试验 现场考察试验用以评估消毒剂对相应设施的实际消毒能力，是通过监测清洁／消毒前、后的环境微生物学质量进行的，经历一段时间后才能积累用以评估消毒程度的数据（建立至少3次试验）。为了获得更好的评价结果，可以在最差条件下（如预防性维修之后）检测环境的污染情况。一般说来，要求在清洁消毒后，环境中的微生物数量应控制在警戒限度以内。虽然现场考察对评估消毒程度非常有用，但是，还要进行实验室测试，以保证消毒剂效力确认试验的完整性。
2.2 实验室考察试验 实验室对消毒剂的杀菌效力测定方法，通常参照美国政府农业化学师学会制定的消毒剂效力测定方法的建议，使用铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌作为挑战菌。有时限于实验室实际试验条件，也可对标准方法作适当的修改和调整。具体试验方法有： 1）载体试验法 制备足够数量的接种菌液的载体，准备60支各装有消毒液10mL 的试管，从第一支试管开始计时，每隔30s放入一支载体到消毒液中，10 min后取出载体并置于含10mL Letheen液体培养基的试管中，在（37±1)9v下培养48～55h,观察，培基混浊则表明有微生物生长。载体试验用的载体，是经过火刨光处理过的硼硅酸盐玻璃圆柱管［长度（10±1）nun，内径（6±1）mm，外径（8±1）mm］。制备菌悬液，将浓度调至108一109 CFU/mL。先将载体灭菌，后放人菌悬液中浸泡巧min，用无菌镊子将载体逐一移出，直立于铺在培养皿内的无菌滤纸上。盖上皿盖，并置(37±1)℃下培养40 min.干燥后，每一载体含菌量应当在0.4×106～2.0×106CFU之间。接种时微生物的活性取决于挑战菌的特性。
试验结果的合格标准是60支试管中阳性管数不得超过2支。将观察到有微生物生长的试管再转种培基并做革兰氏染色检查，以进一步核实微生物生长状况。载体试验只能评判结果是否合格，而无法反映挑战菌的具体下降数量这一重要信息。这时可以对原实验方法做适当修改，通常另外再准备3支载体，在消毒剂中处理后立即放入中和剂中作系列稀释，用平皿计数法或薄膜过滤法测定微生物的残存数量。
2)表面试验法 该方法是使用薄膜片代替被消毒设施表面，来模拟实际的清洁／消毒方法和设施表面而进行的消毒剂效力测试法，可避免在生产及实验室洁净区进行此类试验可能增加的污染风险。
方法：配制浓度为107～108CFU/mL的试验菌悬液。在试验薄片上接种菌液0.1mL，以使液体能在试验薄片表面充分铺散开来。接种后的薄片置超净台内吹干，但应注意，有可能因干燥而导致试验菌丧失活性，从而对消毒剂的杀菌效力造成虚高。将消毒剂与接种表面接触至预定时间，用接触碟、或棉签、或润洗等方法来测定薄片表面的残留菌数，同时需作阴性和阳性对照试验，以证明接种菌和无菌操作技术的可靠性、所用材料和培养基的无菌性，以及培养基对细菌生长的灵敏度等都是可靠的。残留菌数的测定方法要反映出薄片表面的实际污染状况。一般说来，用接触碟取得的样品于 30～35℃下培养3～5d，用棉签拭子取得的样品先置于含有中和消毒剂的中和液（含大豆卵磷脂的肉汤）中，涡旋振荡片刻，然后用平皿技术法或薄膜过滤法计数。将薄膜取样法取得的样品取出滤膜，于琼脂平皿内培养后计数，计数用培养基和培养条件均与上述接触碟取样法相同。
结果评价：多数情况下，应至少下降3～5个对数单位才能证明消毒剂的杀菌效力（杀芽抱剂的效力应能使细菌芽孢下降3～4个对数单位）。用户必须做验证试验，以确认表面测试中用以恢复细菌生长力的方法的可靠性（细菌恢复生长的数量最少应为初始量的 50%～70%）。