中药指纹图谱研究综述
中药指纹图谱的原理与应用
气相色谱(GC)以气体为流动相，对于含挥发性 成分中药的鉴别具有一定优势。由于裂解气相 色谱具有操作简便、样品无须化学前处理、提 供信息量大等优点而格外引人注目。该方法将 样品故人裂解器内，在一定的条件下将样品加 热使其瞬间裂解，生成可挥发性的小分子物质， 立即被载气带人气相色谱系统的分析柱上，分 离后得到具有指纹性质的裂解气相色谱图。如 果将气相色谱与质谱、傅立叶变换红外光谱联 用，则不但可以知道不同中药中挥发性成分的 差别，而且可以对这些成分进行鉴定。
高速逆流色谱指纹图谱(HSCCC fingerprintspectrum， 即调整逆流色谱法) HSCCC利用动态液-液分配原理分 离样品，其分离度和重现性与HPLC类似，但样品前处 理简单。具体地说它是一种基于液-液多级逆流萃取建 立的色谱体系，以轻巧的聚四氟乙烯螺旋管作分离柱，
在行星式运动中连续地完成整个分配、传递、分离过
中药指纹图谱，即中药身份证，主要指中 药化学指纹图谱，实际上是一种保证中药质量 的措施，是指对某种中药材或中成药等运用现 代分离分析科学的手段，得到能够标示该中药 的色谱或光谱的图谱，最终用来对中药质量评 价的科学性方式。它有两个显著特点，一是通 过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪 或产地。二是通过指纹图谱主要特征峰的面积 或比例的制定，能有效控制产品的质量，确保 产品质量的相对一致。
对这种中药材的分子遗传标记的研究，找到具有该种高度特异性
的片段，便可以此为基础，制备出对该种高度特异性的寡核苷酸 探针，再经分子杂交进行指纹分析，即可达到鉴别目的。DNA指 纹图具有高度的个体特异性。DNA指纹图谱技术包括AP-PCR(arb itrary primer PCR，任意引物聚合酶链式反应)和RAPD(随机扩增 多态性DNA，randomly amplified polymorphic DNA)两种指纹图谱 技术。RFLP (限制性[内切酶]片段长度多态性，restriction fragment length polymorphism)是最常用的构建DNA指纹图的方法，但该法 费时费力，使应用受到限制。随机扩增多态DNA(RAPD)标记，可 以在特异DNA序列尚不清楚的情况下，检测DNA的多态性，这是
中药指纹图谱研究进展
中药指纹图谱研究进展付京 倪健※（北京中医药大学中药学院，北京，100102）【摘要】中药指纹图谱是近年来的研究热点，其在中药质量控制方面得到了广泛的应用，已成为国际上公认的控制中药质量的评价模式，是研制开发“安全、有效、稳定、可控”现代中药的必要手段。
我国对中药指纹图谱的研究尚处于初级阶段，主要为使用各种方法建立中药材及制剂的指纹图谱，使其能够评价和控制中药材及制剂的质量。
随着研究的深入，分析手段更加成熟，中药指纹图谱将在中药质量控制发挥更加重大作用。
本文对近年来中药指纹图谱的研究做如下综述。
【关键词】指纹图谱；质量控制；综述中药指纹图谱是一种新的中药质量控制模式，指将中药经适当处理，采用一定的手段，得到能标示该中药特性的图谱[1]。
中药指纹图谱的基本特征是系统性、特征性和稳定性，是一种综合的可量化的分析手段[2]。
中药指纹图谱的基本属性是整体性和模糊性[3]。
根据测定目标不同，分为中药化学指纹图谱和中药生物指纹图谱[4]。
中药质量评价过程中，将中药化学指纹图谱和中药生物指纹图谱相结合,将具有显著意义[5]。
1中药化学指纹图谱中药化学指纹图谱结合数理统计方法来评价中药材或制剂质量的优劣，通过各色谱峰的峰面积来确定样品中化学成分的相对量[6]。
色谱法是目前研究中药化学指纹图谱优先考虑的方法[7]。
公认的三种常规分析手段是薄层色谱、高效液相色谱和气相色谱[8]。
1.1 薄层色谱薄层色谱广泛被应用，因具有分析直观、速度快等特点。
王永生等[9]通过研究哈蟆油药材薄层图谱，科学评价及有效控制其质量。
薄层图谱显示不同品种有很高的相似性。
李彩君等[10]以高良姜素为对照品, 建立了高良姜药材的薄层色谱定性鉴别。
结果表明，本方法可以有效地鉴别高良姜, 并评价其质量。
李彬等[11]对解酒肝康颗粒中的主要药材进行薄层色谱鉴别。
结果表明，本方法分离度好, 专属性强。
1.2 高效液相色谱高效液相色谱是中药指纹图谱中应用最广泛最成熟的一类。
黄连指纹图谱研究概况
黄连指纹图谱研究概况黄连HPLC指纹图谱研究进展姓名：方功学号：211134****班级：中药专硕3班摘要：中药质量标准现代化的模式将是中药化学指纹图谱配合有效成分含量测定和必要的检查项目,较全面地整体控制中药质量，中药指纹图谱研究是中药质量标准现代化研究的关键技术。
本文就黄连HPLC 指纹图谱研究的情况进行归纳综述。
关键词：黄连中药指纹图谱中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。
日本汉方药主要生产企业在20世纪80年代就已经在企业内部采用HPLC指纹图谱控制质量。
我国自2000年8月国家药品监督管理局颁发《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求( 暂行) 》以来, 中药指纹图谱的研究已经成为中药研究的热点。
高效液相色谱法( HPLC) 也在中药成份分离、分析中获得了广泛的应用, 特别是三维高效液相色谱近年来发展迅速, 使得HPLC在中药质量控制中占有重要地位, 被认为是目前检测中药指纹图谱的首选方法。
1.中药HPLC指纹图谱定义中药HPLC指纹图谱系指中药材或中成药经适当处理后, 采取HPLC分析手段, 得到能够标示该中药材或中成药特性的共有峰的图谱。
指纹图谱一般包含两层含义:（1）必须反映出该药材(或成药)有别于其他任何物质;（2）对于中药材,指纹图谱还能反应出产地和采收期不同而造成的差异; 对于中成药, 则能反映出同一产品不同批次间的质量差异, 差异越小说明药材(或成药) 的稳定性越好。
2.黄连HPLC指纹图谱的构建2.1黄连HPLC法分离模式黄连HPLC法分离模式有反相色谱法( RPC) , 正相色谱法( NPC) , 梯度洗脱法, 离子交换色谱法, 分子排阻色谱法( SEC) , 手性HPLC法等。
RPC比较简单方便, 柱性能较好, 是应用最广泛的HPLC法。
在HPLC方法建立时, 应首先试用RPC, 若初步试验证明样品不适合使用RPC分离, 则改为NPC。
中药现代化技术-中药指纹图谱技术
紫外光谱指纹图谱 紫外光谱是由分子中价电子 的跃迁而产生的一种光谱，它依靠图谱上吸收峰 的位置和吸收光谱的吸收强度来分析鉴别样品， 具有实用性强、可靠灵敏、无污染、重现性好等 特点。
彭文进等研究了紫外指纹图谱技术在长生露口 服液鉴别及质量控制中的应用，建立了长生露口 服液的质量控制紫外光谱指纹图谱。
刘向华等分别从药材蛇胆的胆衣和胆汁、原动 物棕黑锦蛇的肌肉和胆汁中提取DNA，经PCR扩 增得到400bp的12srRNA基因片段，并对该基因 片段进行测序研究，结果表明同一动物的胆衣和 胆汁、肌肉和胆汁的碱基序列完全一致，所以可 依次用于鉴别中药材蛇胆和胆汁。
展望
中药指纹图谱技术在中药质量控制领域以及药 效学研究方面有着不可或缺的作用，中药指纹图 谱技术是中药现代化发展必不可少的手段。
核磁共振指纹图谱 核磁共振指纹图谱主要用于 纯化合物的结构鉴定，可以反映出有机分子中氢 或碳的类型。中药材及其制剂的核磁共振谱是多 种化合物核磁共振的叠加。
江洪波采用1 H － NMＲ 建立了不同产地麦冬 甲醇提取物的指纹图谱，并对不同品种、产地的 样品进行分析，结果表明不同麦冬品种、不同产
地 1 H － NMＲ指纹图谱有较大的差异，可以 此区分，故1 H － NMＲ指纹图谱不但可以鉴 定不同麦冬品种，还可以区分不同产地的麦冬 。
图谱
中
核磁共振波谱法 气相色谱法
药
电化学法
毛细管电泳法
指
纹
图
谱
中药生物指纹 图谱
基因组学指纹图谱 蛋白质组学指纹图谱
DNA 指纹图谱
测定方法及运用
红外光谱指纹图谱 主要是利用红外光谱仪分析 、测定中药材及其制剂而得到的光谱图。通过比 较光谱中各吸收峰的位置及强度来鉴定中药材及 其制剂的真伪。
中药指纹图谱研究技术要点
中药指纹图谱研究技术要点中药指纹图谱是指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段和仪器检测得到的，能够标示该中药及其制剂中的各种组分群体特性的共有峰的图谱。
通过指纹图谱整体特征峰的相对保留时间及含量或比例的制定和比对，可有效地控制中药材及中药产品质量，保证产品质量的相对稳定。
目前，指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。
实施中药指纹图谱难免会有一个提高、完善的过程。
从技术上说，中药指纹图谱的建立是完全可行的，但在实际应用中，还要解决诸多问题。
中药指纹图谱研究的技术要点主要有以下几个方面。
■中药材来源及样品处理对制作指纹图谱的动、植物药材必须做到固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。
对矿物药应固定产地和炮制、加工方法，这是制定合格指纹图谱的先决条件。
对供试样品的取样应注意样品的代表性与均匀性，以保持实验室取样与实际生产应用药材一致。
除此之外，还必须做到组方和用量固定，生产工艺稳定。
■检测方法作为一张合格的指纹图谱必须具有特征明显、专属性强、重现性好的特点，而且要求做到操作和应用方便。
目前最常采用的制备中药指纹图谱的检测方法有光谱法和色谱法。
光谱方法如紫外光谱和红外光谱在实际应用中能提供识别的信息较少，往往当同类化合物其取代基团发生变化时，对应的光谱却难以体现出来，建议尽量不要采用。
色谱法最大特点在于可进行复杂组分的成分分离，特别是新的高效、通用检测器的发展和引入，使得采用色谱法检测可得到足够多的图谱识别信息，是目前制备指纹图谱的主流方法。
尤其是薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)技术已成为3种公认常用的指纹图谱分析手段。
其中特别又以HPLC分离效率高、分析速度快、样品适应性广、检测器种类多、灵敏度高、稳定性、重复性好而备受推崇，成为制备指纹图谱的首选方法。
参照物的选择：以色谱法制备得到的特征指纹图谱识别信息，主要是色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值。
中药指纹图谱研究进展
药学进展中药指纹图谱研究进展王睿 徐伟 方翼 (解放军总医院临床药理药学研究室 北京100853)关键词 中药指纹图谱 中药发展趋势中图分类号:R282.5 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2004)10-0764-04中药是我国人民在数千年治疗疾病过程中积累起来的宝贵财富。
中药生产和质量的规范化和现代化是祖国传统医药走向世界的重要前提,目前中药正处于迈向现代化的瓶颈阶段,中药指纹图谱的出现为解决这个问题提供了现代技术手段。
该图谱近年来进展很快,现将国内近年来有关文献对中药指纹图谱的研究进展及其与中药现代化的关系作一综述。
1 中药指纹图谱的概念中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药中所共有的,具有特征性的某类或几类成分的色谱或光谱的图谱。
其特点是:1.1 通过指纹图谱的特征性,能有效鉴别样品的真伪每种药材都有其特有的指纹图谱,例如薄层色谱指纹图谱、高效液相指纹图谱、气相液相指纹图谱、高效毛细管电泳5.3.1 加速试验 用市售包装样品在(30 2) / RH(60 5)%条件下放置,在0,1,2,3,6个月时测定以上稳定性考察项目。
经离心后,乳滴会加速上浮或下沉。
将亚微乳放在3750r/min、半径为10 cm的离心机中离心5h,相当于放置1a因密度不同产生的分层、絮凝或合并的结果。
如将鸦胆子油静注亚微乳(豆磷脂作乳化剂)在约2000r/m in条件下离心20min以内,发现乳滴都增大,在0.5%~ 1.0%乳化剂范围内,乳化剂用量愈少的乳滴增大愈多。
且其平均体积(面积径(Dvs)的增大与时间的关系接近成线性,离心20m in后Dvs增大25%。
5.3.2 常温留样考察 将市售包装在[常温(25 2) /RH(60 10)%]条件下进行,应按一定时间间隔(0,3,6,9,12,18,24,36个月),测定以上稳定性考察项目。
以确定有效期或使用期限。
注射剂还应进行无菌及无热原等的检查。
苍术 白术中有效成分研究及中药材元素指纹图谱的建立
主要成分及作用
1、苍术、白术中的ห้องสมุดไป่ตู้要成分
苍术、白术中的主要有效成分为挥发油、苷类、黄酮类等化合物。挥发油类成 分具有抗炎、抗菌、抗病毒等作用，而苷类和黄酮类成分则具有抗氧化、抗肿 瘤、抗炎等作用。此外，苍术、白术中还含有多种氨基酸、无机元素和维生素 等营养成分，对人体具有一定的保健作用。
2、主要成分的提取方法与含量 测定
3、黄酮类
白术中含有多种黄酮类化合物，如木犀草素、芦丁、杨梅酮等。这些化合物具 有抗氧自由基、抗炎症等作用，并对肿瘤细胞有一定的抑制作用。
4、其他成分
白术还含有多种其他成分，如苯丙素类化合物、色原酮类化合物等。这些化合 物在抗氧化、抗炎等方面具有一定的作用。
二、白术的药理作用
1、调节胃肠道功能
白术具有明显的调节胃肠道功能的作用，能够促进胃肠蠕动、增加胃酸分泌， 缓解胃溃疡、胃炎等症状。其主要有效成分是挥发油和苷类化合物。
2、抗炎作用
白术具有显著的抗炎作用，能够抑制炎症细胞的活化和炎症因子的释放，减轻 炎症反应。其主要有效成分是挥发油、苷类化合物和黄酮类化合物。
3、抗氧化作用
白术具有抗氧化作用，能够清除体内的氧自由基，降低氧化应激水平，保护细 胞免受氧化损伤。其主要有效成分是黄酮类化合物和其他抗氧化成分。
研究展望
未来对苍术、白术有效成分及中药材元素指纹图谱的研究将更加深入和全面。 首先，需要进一步明确苍术、白术中有效成分的药理作用机制及其与其他成分 的相互作用关系，为新药研发和临床应用提供理论依据。其次，应加强对于苍 术、白术活性成分的修饰和结构优化，
以提高其药效和降低不良反应。此外，随着色谱技术、质谱技术等分析技术的 发展，应进一步完善中药材元素指纹图谱的建立方法和应用范围，提高中药材 鉴定的准确性和效率。
中药指纹图谱
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1.5 国外植物药指纹图谱应用 美国FDA：允许草药保健品申报资料能够提供色
谱指纹图； WHO：1996年草药评价指导标准中要求，假如草
药活性成份不明，能够提供色谱指纹图谱以证实产品质 量一致。
X射线衍射法、核磁共振法（NMR）等。
中药指纹图谱
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（1） X射线衍射法及核磁共振法 这两种方法能给出药效物质基础结构信息，部
分信息也可能与特定化学成份直接关联。但该两种方 法所使用仪器在国内还未普及，不适应该方法应用与 推广。在中药指纹图谱研究过程中不提议采取X射线 衍射法及核磁共振法。
中药指纹图谱
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重现性：
“重现性“是指所建立指纹图谱，在要求方法与条 件下，不一样操作者和不一样试验室应能作出相同指纹 图谱，其误差应在允许范例内，这么才能够确保指纹图 谱使用含有通用性和实用性，也是作为标准方法所必备 特征之一。
实现指纹图谱重现性，除在样品制备方法、分析过 程、结果处理待步骤规范操作外，还应建立对应评价机 制，对指纹图谱进行客观评价，并公布标准指纹图谱。
中药指纹图谱
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1.3 中药指纹图谱与中药安全、有效、稳定和可控关系
药品研究主要内容包含药品安全性、有效性、稳定性 和可控性，四者缺一不可。
已生产并临床使用注射剂等中成药，因为经过了药效 学测试、临床评价，安全性与有效性没有，不过，现有质量 控制方法不全方面性及生产过程中不稳定性造成各批次产品 之间质量出现差异，在临床应用过程中往往出现非正常医疗 事故。
（2） 紫外可见分光光度法和红外光谱法 这两种方法能够给出药效物质基础结构信息，
但所给出信息是全部化学物质结构结构信息加和，不 具备指纹特征，但可作为中药指纹图谱研究辅助方法 。
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#综 述#中药指纹图谱研究综述李强,李超1(东营市药品检验所,山东东营257091;11山东中医药大学,山东济南250355)
摘要:本文通过对文献的研究、整理,总结了中药指纹图谱的近年来研究进展,为中药指纹图谱的进一步深入研究提供了线索和依据。关键词:中药 指纹图谱 研究中图分类号:R28411 文献标识码:A 文章编号:1672-7738(2010)03-0158-04
ResearchonfingerprintoftraditionalChinesemedicineLIQiang,LIChao1(DongyingInstituteforDrugControl,Dongying257091;11ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine,Jicnan250355)
ABSTRACT:ThispapersummedupthefingerprintoftraditionalChinesemedicineresearchbyorganizetheliteratureinrecentyears,inordertoprovidesevidenceanddataforthefingerprintoftraditionalChinesemedicinefurtherstudy1KEYWORDS:TraditionalChinesemedicine;fingerprint;research
中药含有的活性成分是中药药效的物质基础,任何一种活性成分均不能体现出中医临床用药的整体疗效。若以个别活性成分的含量作为中药的质量控制指标,而忽略中药的其他成分的作用,则难以确保中药及其制剂的质量。中药指纹图谱是一种多指标的质量控制模式,虽然它不能代替含量测定,但它比测定任何单一成分所提供的信息却丰富得多,可以比较全面的反映所含化学成分的种类和数量,能够更加有效地体现出中药成分的整体性和综合作用,从而更好地评价中药及其制剂的质量。1 中药指纹图谱的来源与概念/指纹鉴定0开始于19世纪末20世纪初的犯罪学和法医学。人们研究发现。人的指纹有拱形、环形和螺形3种基本模式,并且每个人的指纹都是绝对不同的,这种指纹的/绝对唯一性0使得案件的侦破效率大大提高。中药指纹图谱就是借用了法医学/指纹鉴定0的概念,是指中药经过适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标示该中药特性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。中药指纹图谱作为一种综合的、宏观的、可量化的鉴别手段,能全面的反映中药所含成分的相对关系,是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式。整体性和模糊性是它的基本属性。指纹图谱应该反映药材的完整面貌即整体性,但是由于植物药中化学成分天然潜在的不稳定性,所以指纹图谱又具有模糊性[1]。2 中药指纹图谱的构建方法中药指纹图谱的测定方法种类较多,主要采用色谱法分离特征成分,采用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)、质谱(MS)等光谱、波谱方法鉴定化合物的结构,现阶段用于构建中药指纹图谱的色谱法主要有:薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、高效毛细管电泳(HPCE)、高速逆流色谱(HSCCC),其中又以HPLC法分离效率高、分析速度快、样品适应性广、检测器种类多、灵敏度高、稳定性强、重复性好而倍受推崇,成为中药指纹图谱的首选方法。211薄层色谱(TLC)指纹图谱 薄层色谱具有快速可靠、操作简单、适用范围广等优点,它是利用中药各成分性质上的差异在薄层上分离后相对位移值的不同进行鉴别的一种方法。无论在中药材的品种鉴别、提取、含量测定、成分研究中还是在产品的稳定性测试方面,薄层色谱都能提供直观形象的可见光或荧光图像,并能进一步配合色谱扫描或数码处理得到不同层次轮廓图谱和相应的积分数据。但由于TLC是一种开放的色谱系统,外界因素影响较多,因此,重现性与精密度差,不能完全满足指纹图谱研究的要求,所以,现在应用薄层色谱法研究指纹图谱较少。崔淑芬等[2]对甘草药材的薄层扫描指纹图谱进行了研究,发现甘草样品得到的薄层色谱指纹图谱通过聚类分析后与正品甘草药材有较好的相似度;其三维图谱可对不同产地的甘草药材质量进行直观比较。该研究说明TLCS-FP可用于甘草的真伪鉴别和质量评价。谢培山等[3]为考察商品白芍总苷质量的稳定性和一致性,建立了薄层色谱指纹图谱,结果发现10批样品的薄层色谱指纹图谱所形成的全谱图像显示批间产品有很高的相
#158#齐鲁药事QiluPharmaceuticalAffairs2010Vol129,No13似性。212气相色谱(GC)指纹图谱 气相色谱是一种柱色谱技术,它是封闭性色谱,受外界影响较少,主要用于中药中挥发油成分、极性较小的成分或衍生化后可挥发的成分的指纹图谱特征研究,它具有高效、高选择性、高灵敏度、用量少和分析速度快等优点,具体应用时多与质谱技术联用。一般使用质量型检测器氢火焰离子化检测器(FID)。黄天来等[4]研究了生姜所含挥发油成分的气相色谱指纹图谱。结果显示生姜挥发油成分气相色谱指纹图由5组峰群组成,各组峰群清晰可辨,分离度较好。该方法准确,简单,为生姜的鉴别和质量监测提供了依据。凌大奎等[5]用规范化的色谱分离条件建立了砂仁、当归、苍术、柴胡、藁本和香附的挥发油成分的气相色谱保留指数谱,并利用GC-MS和GC傅利叶变换红外光谱对各主要成分做出了定性鉴别。钱浩泉等[6]用GC-MS联用的方法建立了道地药材高良姜及近缘植物挥发油成分的气相色谱指纹图谱,各自的特有的色谱构成相应品种指纹特征的唯一性。213高效液相色谱(HPLC)指纹图谱 高效液相色谱法是在20世纪60年末,以经典液相色谱法为基础,利用气相色谱的理论与实验方法而发展成的分离分析方法。它具有分离效能高,分析速度快,定量精密度高,稳定性好,色谱柱可反复使用等优点,不受样品挥发性和热稳定性的限制,大多数成分均可在高效液相色谱上进行分析检测,因此成为指纹图谱中应用最广最成熟的一类。由于中药成分的复杂性,选用高效液相色谱法构建中药指纹图谱时,一般多采用梯度洗脱的方法,这样能够将中药中的大多数成分分开,因而能更准确地反映中药的鉴别信息。2000年国家食品药品监督管理局制定了5中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)6[7],对已批准的中药注射剂和申报的新中药注射剂实行药材和制剂的指纹图谱标准的要求,多数的中药注射剂都采用了HPLC法来测定指纹图谱,2005年版药典一部开始收录高效液相色谱法进行含量测定,相关品种达479项。高效液相色谱法已成为指纹图谱研究首选的方法。张玉杰等[8]采用反相高效液相色谱法对不同产地沙苑子进行了指纹图谱研究,结果发现不同来源的正品沙苑子指纹图谱十分相似,而与2种伪品则显示出完全不同的指纹图谱特征。邹忠梅等[9]利用HPLC-DAD方法,采用梯度洗脱,测定了10批芍药总苷样品,建立了芍药总苷的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制芍药的质量提供了可靠方法。瞿为民等[10]采用高效液相色谱法对人参、西洋参及三七药材指纹图谱进行了鉴别,结果表明,3种参的皂苷类成分均得到很好的分离,该方法可有效的鉴别人参、西洋参和三七参。游松等[11]采用高效液相色谱法对银杏叶注射剂进行了指纹图谱研究,结果发现所有参数均符合国家食品药品监督管理局关于有关中药注射剂的技术要求。周玉新等[12]以HPLC梯度洗脱法对三七原药材、三七总皂苷提取物及三七总皂苷注射液进行了指纹图谱的研究,证明了HPLC法可操作性强、重复性好。颜玉贞等[13]采用高效液相色谱法进行梯度洗脱,紫外检测,测定了西青果与不同种诃子的指纹图谱。214高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱 高效毛细管电泳法是以高压直流电场为驱动力,毛细管为分离通道,依据样品中各组分淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种新型电泳技术。本法具有分离模式多,分离效率高,速度快,使用范围广,进样体积小,易清洁,可直接分析水溶液等特点。主要用于中药中带电荷的化合物(如蛋白质、氨基酸、黄酮、生物碱)、有机酸、单糖及一些中性分子的分离分析,得到的指纹图谱能反映出更多的特性,使中药成分的分析范围更广泛,但毛细管电泳的检测灵敏度与精密度不如高效液相色谱法,在指纹图谱研究中应用较少。叶斌等[14]利用高效毛细管电泳技术建立了人工蛹虫草药材的指纹图谱,该法准确简便可靠,可作为控制人工蛹虫草中药材内在质量的有效手段。程伟等[15]采用毛细管区带电泳法建立了不同产地连钱草药材的高效毛细管电泳指纹图谱,并进行了比较,结果HPCE指纹图谱法具有较好的稳定性、精密度和重现性,可作为连钱草药材的质量控制方法。尉小慧等[16]采用HPCE法比较麻杏石甘汤2种方法提取物在体内吸收和代谢过程中的差异,结果证明采用HPCE图谱研究中药复方药动学有一定的科学性和可行性。215高速逆流色谱(HSCCC)指纹图谱 HSCCC法是目前中药分析分离中应用的一种新型液-液分配技术。该技术利用相对移动的互不混溶的两相溶剂,在处于动态平衡的两相中将具有不同分配比的样品分离。国内外已报道将高速逆流色谱技术应用于天然产物的分离和分析,该技术可适用于任何极性范围的样品,预处理要求低,一般粗提物即可满足要求,而且回收率高,能实现梯度操作,亦能重复进样,在中药质量分析控制研究中,尤其在指纹图谱研究中有较好的应用前景。沈平孃[17]利用HSCCC技术对多种中药进行了指纹谱分析都得到了较好效果,可用于中药的质量分析和控制。随着中药指纹图谱的研究越来越多,应用的技术手段也在不断更新,除了以上几种方法外,还有X-射线衍射指纹图谱,核磁共振指纹图谱,质谱指纹图谱,红外指纹图谱,DNA指纹图谱等多种技术手段,但研究中药指纹图谱时应结合实际情况选择适宜的方法,使其应用于中药质量控制时,更加简便准确。3 中药指纹图谱的解析方法中药的化学成分极为复杂,即使对于同一种属的药材,也会因种植区域,采收时间,环境条件等多种因素的影响造成药材化学组成的差异,这便形成了它们各自的化学指纹,如果用人工对其进行分析,容易由于人的主观因素,做出不同判断,造成结果误差。另外指纹图谱中各色谱峰的保留值容易受到各种因素的影响,包括操作因素和实验条件的差异。为此需要对大量的仪器分析数据进行处理,从中提取化学特征信息,进而实现化学模式识别[18,19]。311模糊聚类分析 聚类分析是近十年来发展起来的一种
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