白血病融合基因
质量手册_白血病融合基因分型
计数200个细胞，阳性细胞比例占10%左右可报告结果呈阳性。
9
MYC断裂点探针
MYC原癌基因的易位分别会导致MYC在t（8；14），t(8；22）和t（2；8)与IgH，IgL和IgK融合，主要发生在B细胞ALL核非霍杰金白血病(NHL），特别是Burkitt淋巴瘤。t(8；14）易位存在于75-85%患者，t(2；8）易位存在于5%患者，剩下的10%患者为t(8；22）易位。MYC易位重排的患者预后差，但这些易位对强力化疗反应好，可增加患者生存率。
5）取出后去除上清液，再加入新鲜固定液10~15ml，吹打混匀，静止10分钟后离心
6）小心去除上清液，加入5~10 ml固定液吹打混匀后离心
7）去除上清液加固定液离心（重复6~7次直到细胞成分洗干净为止）
（2）玻片准备
1）滴制备好的细胞样本到载玻片上（用显微镜观察细胞分布情况）
2）在2×SSC（pH 7.0）液中浸泡2分钟
附表：各个相关探针检测的临床意义及诊断标准
序号
探针
临床意义
诊断标准
1
BCR/ABL双标融合探针
Ph染色体为9号染色体和22号染色体发生易位融合而成，在95%以上慢性粒细胞白血病（CML）患者，3-5%的儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）和25%成人ALL患者h会出现，BCR/ABL是t（9:22）（q34:q11）染色体易位产物，监测点该基因对慢性和细胞白血病及ALL的诊断，鉴别诊断及预后具有重要意义，在儿童ALL中检测到改融合暗示预后较差。
阴性细胞呈现两个黄色融合信号；阳性细胞呈现两红两绿四个荧光信号，或有一个黄色融合信号。
计数200个细胞，阳性细胞比例占10%左右可报告结果呈阳性。
PCR融合基因跟BCR关系
PCR融合基因跟BCR关系引言PCR（聚合酶链式反应）融合基因是一种常见的分子生物学技术，用于将两个或多个DNA片段连接在一起形成一个融合基因序列。
BCR（白血病融合基因）是一类与白血病相关的融合基因。
本文旨在探讨PCR融合基因与BCR之间的关系，以及其在白血病研究中的应用。
PCR融合基因与BCR之间的关系PCR融合基因是通过PCR技术将两个或多个DNA片段连接起来形成一个融合基因。
这种融合基因可以起源于不同的DNA分子，也可以是同一分子的两个不同区域。
BCR是一类与白血病相关的融合基因，其中最为常见的是Ph染色体的t(9;22)转座产生的BCR-ABL融合基因。
这个融合基因是慢性髓性白血病（CML）和一部分急性淋巴细胞白血病（ALL）的主要致病因子。
在Ph染色体的t(9;22)转座事件中，BCR基因位于染色体22上，ABL基因位于染色体9上。
转座事件导致BCR和ABL基因融合在一起，形成BCR-ABL融合基因。
BCR-ABL融合基因产生的转录产物具有激活ABL酪氨酸激酶活性的能力，进而促进细胞无限增殖和抑制凋亡。
这种异常的信号通路激活促进了白血病细胞的生长和存活，并最终导致白血病的发展。
PCR融合基因与BCR在白血病研究中的应用PCR融合基因的检测方法，特别是BCR-ABL融合基因的检测方法，在白血病的诊断和治疗中起到了重要的作用。
1. 白血病诊断通过对患者样本中的DNA进行PCR扩增，可以检测到BCR-ABL融合基因的存在与否。
这种检测方法通常用于白血病的早期诊断和鉴别诊断。
通过检测BCR-ABL融合基因的存在，可以确定是否存在Ph染色体的t(9;22)转座事件，从而确诊患者是否患有白血病。
2. 白血病治疗BCR-ABL融合基因是白血病的致病因子，因此针对BCR-ABL基因的治疗是白血病治疗的重要策略之一。
靶向BCR-ABL基因的药物，例如伊马替尼等酪氨酸激酶抑制剂，可以抑制BCR-ABL基因产生的异常的信号通路，从而抑制白血病细胞的增殖和生存。
白血病患者融合基因检测
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液科 住 院或 门诊 随访 的 ５ Ｏ例 白血 病 患 者 ， 中 Ｃ 者 ３ 其 ＭＩ 患 Ｏ 例， ｌ例， １ 男 ６ 女 ４例 ， 位 年 龄 ５ 中 ４岁 （ ７ ８ ） ； 诊 时 病 ３～ ０岁 就 程 Ｏ ７年 ， 均 病 程 ２年 ； ～ 平 治疗 方 案包 括 羟基 脲 、 扰 素 ａ或 干 甲磺 酸 一 伊 马 替 尼 （ 列 卫 ） 格 。ＡＰ Ｌ患 者 １ ， ８例 ， ７ ５例 男 女
例， 中位 年 龄 ４ ７岁 （ ４ ６ ） ； 为 初 发 患 者 ， 诊 时 病 程 ＜ ２～ ４岁 均 就
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合基 因 的 准确 性 高 ， 辅 助 临 床 诊 断 和 白血 病 患 者 药 物 疗 效 判 定 方 面都 有较 大 的应 用价 值 。 在
aml融合基因型
aml融合基因型全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：aml融合基因型是指在急性髓系白血病（AML）中，染色体突变导致的基因融合现象。
这种基因型在AML的发病机制和治疗中具有重要的意义。
AML是一种由幼稚的骨髓干细胞异常增殖而发展成的恶性肿瘤。
在AML中，常见的染色体突变包括t(8;21)、t(15;17)和inv(16)等。
这些染色体突变导致特定基因之间的融合，形成新的融合基因型。
这些融合基因型能够影响AML的发展、预后和治疗效果。
一个常见的AML融合基因型是t(8;21)(q22;q22)，通过这种染色体易位，ETO（8q22）和RUNX1（21q22）基因融合为RUNX1-RUNX1T1。
这种融合基因型出现在AML的15%至20%的患者中，通常与较好的预后相关。
另一个常见的AML融合基因型是t(15;17)(q22;q21)，导致PML（15q21）和RARα（17q21）基因融合为PML-RARα。
这种融合基因型在AML-M3亚型中常见，患者通常有着较好的预后。
除了t(8;21)和t(15;17)外，inv(16)(p13;q22)导致CBFB（16q22）和MYH11（16p13）基因融合为CBFB-MYH11，在AML患者中也较为常见。
这些融合基因型通常与较好的预后相关，治疗响应率高。
除了上述常见的AML融合基因型，还有一些其他少见但重要的融合基因型，如MLL融合、DEK-NUP214融合等，这些融合基因型在AML的发展过程中发挥着重要作用。
研究表明，AML融合基因型对于AML的治疗策略和预后评估有着重要的临床意义。
根据AML患者的融合基因型，临床医生可以选择更精准的治疗方案，提高治疗效果和患者的生存率。
对AML融合基因型的研究也为深入理解AML的发病机制提供了重要线索。
AML融合基因型在AML的发病机制、预后评估和治疗中具有重要的作用。
随着对AML融合基因型的认识不断深入，相信将能够为AML 的个体化治疗和预后评估带来更为准确和有效的方法。
白血病预后相关融合基因的检测及其意义
判断和追踪AML的疗效,是反映预后不良的指标，可以较好地反映患者的微小残留病的动态变化.
E2A/PBX1融合基因定性检测
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
原始B细胞性急性淋巴细胞性白血病多检测到此项基因融合，可辅助该疾病的诊断
E2A/PBX1融合基因定量检测
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头）
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
急性早幼粒细胞白血病（M3）中可以检测到这种异常，判断和追踪M3的疗效,可以较好地反映患者的微小残留病的动态变化
AML1/ETO融合基因定性检测
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
AML-M2多检测到此项基因融合，可辅助该疾病的诊断
AML1/ETO融合基因定量检测
骨髓3ml，EDTA抗凝
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
急性淋巴细胞白血病（ALL）中可以检测到这种异常，判断和追踪ALL的疗效,可以较好地反映患者的微小残留病的动态变化
PML/RARα融合基因定性检测（M3）
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
急性早幼粒细胞白血病（M3）的辅助诊断
PML/RARα融合基因定量检测（M3）
TEL/AML1融合基因定量检测
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
判断和追踪原始B细胞性急性淋巴细胞性白血病、特别是儿童ALL疗效，反映预后良好的指标
t(11;14)bcl-1/JH融合基因定性检测
骨髓3ml，EDTA抗凝
（紫头管）
检测bcl-1/JH基因重排[t(11;14)(q13;q32)]可帮助鉴别诊断套细胞淋巴瘤，评估治疗效果，监测微小残留病监测，预测早期复发
白血病预后相关融合基因检测及意义
白血病融合基因检测的意义
白血病融合基因检测的意义 白血病（leukemia）属于造血系统的恶性肿瘤，是一组高度异质性的恶性血液病，其特点为白血病细胞呈现异常增生伴分化成熟障碍。临床出现不同程度的贫血、出血、发热及肝脾、淋巴结肿大，可危及生命。 白血病融合基因（fusion gene），是白血病的分子生物学特异性标志。近年来，由于分子生物学技术的发展，对白血病细胞分子遗传学改变的了解也不断深入。迄今报道白血病涉及至少数十种融合基因。已经认识到大部分的白血病中存在着染色体结构畸变，包括缺失、重复、倒位、易位等，导致原癌基因及抑癌基因结构变异，原癌基因激活或抑癌基因失活，产生新的融合基因，编码融合蛋白。有些基因是调控细胞增殖、分化和凋亡的转录因子，当基因发生变异，直接影响了下游信号传递途径，导致细胞增殖能力增强、凋亡障碍，分化障碍等，产生白血病表型。 一些典型的白血病融合基因是某种白血病的特异性分子诊断标志，如BCR-ABL融合基因，可出现在95%以上的慢性粒细胞白血病（CML）。患者预后效果的好坏，与融合基因的类型有一定关系，如急性早幼粒细胞白血病（APL）特有的PML-RARa融合基因，对APL患者用全反式维甲酸（ATRA）诱导缓解治疗，其预后非常好，复发率低。而有些基因，如MLL相关融合基因，预后差，死亡率高。 1.融合基因检测对白血病诊断的意义 通过临床实践发现单纯细胞形态学分型，检测者的主观成分较大，相互间的符合率及正确率有一定限制，随着细胞和分子生物学技术的迅速发展及对白血病发病机制研究的不断深入，认识到白血病发病过程中的基因和表型变化对各类白血病的诊断与治疗具有重要意义，因此提出了白血病MICM分型。近两年白血病分子特征的研究取得了明显进展，尤其是对染色体易位形成融合基因，有一些已作为诊断不同类型白血病的分子生物学特异性标志和确定诊断的唯一依据，如急性早幼粒细胞白血病APL：PML/RARA，t(15;17)(q21;q22)；急性髓细胞白血病AML-M4Eo：CBFB/MYH11,inv(16)(p13;q22)；慢性粒细胞白血病CML或部分急性淋巴细胞白血病ALL：BCR/ABL，t (9;22)(q34;q11)；AML-M2：AML1/ETO，t(8;21)(q22;q22)；ALL-L3：MYC/IgH，t(8;14) (q24;q32)；AML-M4/M5：11q23MLL异常等。白血病融合基因可以通过逆转录PCR（RT-PCR）技术加以检出，有助于评价白血病的急性程度、克隆特性及分型，使白血病的诊断分型更加科学化和规范化。2007年卫生部颁布的《医疗机构临床检验项目目录》，其中有要求利用RT-PCR或real-time PCR技术的白血病融合基因检查，主要涉及6种融合基因的检查，包括BCR/ABL、PML/RARA、AML1/MPSI/EVI1、DEK/CAN、AML1/MTG8、E2A/PBX1。RT-PCR可比传统的细胞学方法及临床症状出现早5～8个月，可检出1×106个有核细胞中的一个白血病细胞，在白血病的早期诊断方面有着其它方法无可比拟的特异性和敏感性。 2.融合基因检测对白血病治疗和预后判断的意义 细胞遗传学分型与疾病的预后关系密切，对于指导临床个性化治疗方案的选择和判断预后具有十分重要的意义。急性白血病有PML/RARA，CBFB/MYH11，AML1/ETO融合基因预后较好，化疗完全，缓解率高，可长期缓解或治愈，不主张早期做造血干细胞移植；而对于有MLL异常、MYC/IgH融合基因的AML，BCR/ABL融合基因的ALL对化疗反应差，复发率高，建议其有条件积极行造血干细胞移植。有了融合基因的检测，初治时可指导科学合理选择长期治疗方案，避免不必要的治疗不足或过度治疗。 3.融合基因检测对白血病微小残留病变监测的意义 随着白血病化疗方案的改善和造血干细胞移植的进展，白血病的完全缓解(CR)率明显提高，然而仍有许多CR患者在数年内复发，其主要原因是血液学CR后体内仍残留106～109白血病细胞，称为微小残留病(MRD)。有学者认为MRD是血液学CR乃至持续完全缓解(CCR)期间白血病复发的根源，如何早期准确地诊断MRD是防治白血病复发的前提，MRD的监测也是指导临床治疗、评价治疗效果和预测复发的实验室指标。目前已用于检测MRD的技术主要有流式细胞计数法和PCR技术，敏感性都可达到10-3-10-5(103-5细胞中有1个肿瘤细胞)以上，应用最广的是PCR技术。目前用于PCR检测的靶基因主要是白血病特异性染色体易位产生的融合基因，白血病患者体内融合基因转录本的拷贝数随病情进展逐渐升高；随病情好转逐渐下降，并且早于细胞遗传学的染色体核型分析。定期检测白血病微小残留病很有必要。临床上通过检测微小残留病融合基因表达水平，可更早预测白血病的复发；指导白血病的临床治疗，根据融合基因表达水平的多少，决定是否继续化疗；有利于评价药物治疗效果，是否耐药，并依此指导临床更换治疗方案；评价造血干细胞移植的净化效果。。
慢粒融合基因转阴标准
慢粒融合基因转阴标准
慢粒融合基因转阴标准是指在慢性粒细胞白血病治疗中，通过检测慢粒融合基因是否转阴来评估治疗效果的标准。
慢性粒细胞白血病是一种由慢粒细胞克隆性增生引起的骨髓增生性疾病，患者常常出现贫血、出血、感染等症状。
而慢粒融合基因转阴标准的制定，对于评估治疗效果、指导临床治疗具有重要意义。
慢粒融合基因转阴标准的制定需要考虑多个因素，包括基因检测方法、标准化操作流程、临床病例数据分析等。
目前，常用的慢粒融合基因检测方法包括荧光原位杂交（FISH）技术、聚合酶链式反应（PCR）技术等。
这些方法可以检测慢粒融合基因的存在与否，从而评估治疗效果。
在制定慢粒融合基因转阴标准时，需要考虑不同检测方法的特点，确定标准化操作流程，以保证检测结果的准确性和可靠性。
同时，还需要结合临床病例数据进行分析，找出慢粒融合基因转阴与患者预后的关系，为临床治疗提供科学依据。
慢粒融合基因转阴标准的制定对于临床治疗具有重要的指导意义。
首先，可以帮助医生评估治疗效果，及时调整治疗方案，提高治疗成功率。
其次，可以为患者提供更加个性化的治疗方案，减少不必要的治疗，降低治疗风险。
最后，可以为临床研究提供可靠的数据支持，推动慢性粒细胞白血病治疗的进步。
总之，慢粒融合基因转阴标准的制定是一项复杂而重要的工作，需要全面考虑多个因素。
通过科学的方法和严谨的态度，制定出合理的标准，将对慢性粒细胞白血病的治疗和研究产生深远的影响。
希望未来能够有更多的科研人员投入到这一领域，共同努力，为慢性粒细胞白血病患者带来更好的治疗效果。
儿童白血病的遗传基因突变与治疗策略
儿童白血病的遗传基因突变与治疗策略Introduction白血病是一种常见的儿童恶性肿瘤，其中儿童白血病的遗传基因突变扮演着重要角色。
这些突变影响了细胞分化、增殖和生存能力，导致异常细胞在骨髓中大量积累。
本文将探讨儿童白血病中的常见遗传基因突变以及针对这些突变的治疗策略。
I. 常见的遗传基因突变A. BCR-ABL1融合基因BCR-ABL1融合基因是儿童慢性骨髓性白血病（CML）和一部分急性淋巴细胞性白血病（ALL）的主要致病因子。
它产生了一个具有持久活性的酪氨酸激酶，促进细胞增殖并抑制凋亡。
B. TEL-AML1融合基因在急性淋巴细胞性白血病中，TEL-AML1融合基因是最常见的突变之一。
它导致细胞定位异常，阻碍正常细胞分化并增加白血病前体细胞的生存能力。
C. MLL基因重排MLL（Mixed-lineage leukemia）基因重排突变在儿童急性髓系白血病（AML）中很常见。
这种突变引发了一个与正常MLL表达水平不同的蛋白质，导致细胞增殖和分化途径的紊乱。
II. 针对遗传基因突变的治疗策略A. 靶向BCR-ABL1的治疗方法针对BCR-ABL1融合基因，干扰其信号传导通路是目前的主要治疗策略。
Imatinib和Nilotinib等小分子酪氨酸激酶抑制剂已被证实在CML患儿中具有显著疗效。
B. TEL-AML1融合基因靶向治疗由于TEL-AML1融合基因的特异性，科学家已经开发出一些针对该突变的靶向药物。
这些药物作用于阻断该融合基因的表达，从而矫正细胞分化和凋亡途径。
C. MLL基因突变的治疗策略针对MLL基因重排，联合化疗和干细胞移植通常是常规治疗方法。
然而，由于MLL变异的异质性，挑战仍然存在。
新型药物如DOT1L抑制剂等正在被研究以提供更加有效的治疗策略。
III. 新兴的治疗策略A. 免疫细胞疗法近年来，免疫细胞疗法作为一种新兴的白血病治疗策略引起了广泛关注。
这种治疗方法利用患者自身修饰过的T细胞或自然杀伤细胞（NK细胞）来攻击白血病细胞。
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bcr/abl融合基因慢性粒细胞白血病Chronic Myelogenous Leukemia,CML是一种发生于造血干细胞的血液系统恶性克隆增生性疾病;在受累的细胞系中可找到Ph标记染色体或和bcr/abl基因重排;基因结构人abl基因位于9号染色体长臂,有1b、1a和2-11共12个外显子;转录始自1b或1a,形成的两种mRNA长度分别为7kb和6kb,合成的两种蛋白质分子量均约为145,前者定位于细胞膜,而后者主要在细胞核内;abl主要结构有N端的肉瘤同源2srchomology,SH2、SH1;SH2结合磷酸化的酪氨酸残基,SH1具有酪氨酸激酶活性;近C端富含酸性氨基酸残基,可结合DNA;abl蛋白参与细胞周期调节;在G0期,abl-Rb蛋白复合物与DNA结合;在G1→S转变过程中,Rb被磷酸化,abl与之分离,并激活,使RNA聚合酶磷酸化,促进转录,细胞进入S期;bcr基因位于22号染色体长臂,有23个外显子;蛋白产物分子量均为160;bcr 蛋白第1-63个氨基酸是二聚体化结构,参与bcr蛋白多聚体的形成;bcr蛋白参与细胞周期调节,但详细过程还不十分明确;bcr基因断裂点集中在三个区域：主要major bcr,M-bcr、次要minor bcr,m-bcr和μμ-bcr区域;abl基因断裂位于第1或第2内含子;因断裂点不一,bcr/abl融合基因及其mRNA和蛋白产物呈多样性;CML的bcr基因断裂点常位于M-bcr,主要是b2a2和b3a2,蛋白分子量为210kb;bcr基因在ALL中大约2/3为m-BCR位点;Ph1染色体和bcr/abl融合基因是CML的分子基础,并可作为区分典型CML和非典型CML的诊断指标;由于t9；22q34；而产生的费城染色体Ph在血液肿瘤中具有重要的诊断和预后意义,出现于90%以上的CML、30%的成人ALL、2%-10%的儿童ALL、以及少数的AML和MM患者;位于9q34的ABL基因与位于22q11的BCR基因相互易位,形成bcr/abl融合基因;此基因产生一种新的mRNA,编码的蛋白为P210;P210具有增强酪氨酸激酶的活性,改变了细胞多种蛋白质酪氨酸磷酸化水平和细胞微丝机动蛋白的功能,从而扰乱了细胞内正常的信号传导途径,使细胞失去了对周围环境的反应性,并抑制了凋亡的发生;具有BCR/ABL融合基因的患者预后差;基因检测Southern Blot即DNA印迹,可以对bcr-abl融合基因DNA重排进行分子生物学检测;将经限制性内切酶酶切及琼脂糖电泳分离的DNA片段转移到固相杂交膜上,胚系DNA会产生特征性片段,但发生过基因重排的细胞DNA因酶切位点有所改变会产生有别于胚系的DNA酶切片段;大多数bcr基因的断裂点集中于的主要断裂点集簇区M-bcr;从白血病患者白细胞中抽提的基因组DNA,经一组限制性内切酶消化及琼脂糖凝胶电泳分离后转移到尼龙膜上,用取自M-bcr3’和5’端的bcr探针与之杂交;放射自显影洗片后即可显示所要检测的条带,对于CML患者,除可见到一条与胚系bcr基因组DNA相对应的条带外,其他的条带说明存在重排的bcr等位基因;RT-PCR采用异硫氢酸胍酚、氯仿一步法提取细胞总RNA,方法见参考文献,用RT-PCR 技术扩增bcr-abl基因接合区mRNA是检测CML敏感而特异的方法,设计两对引物,先进行逆转录反应合成cDNA,再进行PCR扩增,取扩增后产物10μl,用2%的琼脂糖凝胶进行电泳,在紫外灯下观察结果;实时定量PCR利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中纵坐标为起始拷贝数的对数,横坐标代表Ct值,然后根据待测样本的Ct值从标准曲线上计算出该样本的起始拷贝数;另外bcr/abl融合基因编码的蛋白P210可以用Western印迹或酶联免疫反应加以检测;PML/RARα融合基因急性早幼粒细胞白血病APL是急性髓细胞白血病AML的一种特殊类型M3,占所有AML病例的10%-15%;APL具有独特的临床表型及细胞形态学、细胞遗传学和分子生物学特征;目前发现约95%的APL患者伴有异常染色体核型t15;17q22;q21,该易位使15号染色体上的PML基因与17号染色体上的RARα基因发生相互易位形成PML/RARα融合基因,是APL的一个特异分子标志;PML/RARα融合蛋白通过显性负抑制作用抑制早幼粒细胞分化成熟,从而阻断细胞分化导致持续增殖;全反式维甲酸ATRA和三氧化二砷能靶向降解PML/RARα融合蛋白,恢复野生型PML和RARα基因功能,解除其对基因转录的抑制,诱导细胞发生分化和凋亡,使APL得到有效治疗;ATRA与化疗联合使用可使APL的完全缓解率达90%-95%,并可使70%以上的患者得到长期生存;PML/RARα融合基因检测可作为APL早期诊断、治疗方案选择及微小残留病灶监测的一项检测手段;用荧光原位杂交方法或荧光定量RT-PCR方法来检测PML/RARα融合基因,的情况,可对融合基因进一步具体分型;广州安必平上海之江上海源奇TEL-AML1融合基因当染色体12和21号发生易位形成TEL-AML1时,TEL的断裂点位于内含子5,AML1断裂点80%-90%位于内含子1外显子1和外显子2间,余则发生于内含子2;TEL和AML1断裂后,DNA修复时将TEL基因HLH区和几乎整个AML1基因拼接在一起形成TEL-AML1融合基因,所表达TEL-AML1融合蛋白突出作用是抑制转录活性;白血病相关融合基因检测试剂盒TEL-AML1品名：白血病相关融合基因检测试剂TEL-AML1RT-PCR法厂商：上海源奇生物医药科技有限公司TEL-AML1杂合体的检测不仅可以快速鉴定预后相关的分子marker,常被学者作为检测MRD的标记,可以据此判断疾病的进展、治疗效果以及预后转归等;TEL-AML1融合基因阳性ALL的特点:1、病年龄;t12;21的儿童ALL多发生在1-10岁,1-5岁者占%;2、免疫表型特征;所有的t12;21病人都表达B祖细胞免疫表型,以CD19、CD10阳性最为多见,偶见前-前B表型,未见成熟B细胞及T细胞表型;3、与预后的关系;TEL-AML1表达阳性组属高危ALL的占13%,而阴性组属高危ALL 的占68%,说明TEL-AML1往往与低危ALL相关,预后较好；TEL-AML1阳性组地塞米松诱导实验阳性率为88%,而阴性组仅为38%,阳性组地塞米松诱导实验效果明显优于阴性组;TEL-AML1融合基因t12;21p12;q22易位产生的TEL-AML1融合基因主要见于25%B-系急性淋巴白血病的儿童和3%成人中;TEL基因习惯上又称ETV6ETS-variant gene 6,基因位于12p13上,全长300 kb, 编码452个氨基酸,其所编码蛋白由螺旋-环-螺旋helix-loop-helix,HLH和ETS结构域组成;AML1又称CBFα2,是核心结合因子CBFcore bindingfactor的亚基,基因定位于21q22上,全长超过260 kb,含有12个外显子,表达480氨基酸的核磷酸蛋白,TEL和AML1的融合使AML1编码的CBRa失去与DNA结合能力或不能正常转录而发挥激活靶基因的作用,即AML1从转录激活因子转变成转录抑制因子;检测原理：本试剂盒由白血病TEL-AML1融合基因特异性引物、荧光探针、逆转录酶以及Taq酶等成分组成,采用一步法在同一反应管中相继完成逆转录和PCR过程,从而检测人骨髓标本中的白血病TEL-AML1融合基因RNA；同时使用尿苷酶UNG防污染体系, 经加热可选择性地降解PCR产物中的U-DNA,以防止先前PCR扩增产物的污染；采用内参基因,控制整个试剂盒检测过程及标本的有效性;实验操作步骤说明：产品特性说明：1.本试剂盒能从抗凝骨髓提取的RNA中检测TEL-AML1的相关融合基因,最低检出量达到100拷贝/反应;2.试剂盒对各精密度质控品,在相应的反应液中重复做10次,均能检出,且其实验数据CV值均小于10%;CBFβ/MYH11融合基因M4Eo是M4型白血病中的一种特殊类型,约占急性粒细胞白血病的10%;患者骨髓中粒系和单核系原始细胞同时恶性增生,嗜酸粒细胞占5%～30%;含有CBFβ-MYH11融合基因的M4Eo患者预后较好;Inv16 /t16；16p13；q22为急性髓系白血病AML-M4Eo的非随机染色体异常,16q22断裂区受累基因CBFβ编码CBF的β亚单位,inv16/t16；16导致形成CBFβ/MYH11融合基因;inv16/t16；16p13；q22的结果是16号染色体长臂的CBFβ基因与短臂的平滑肌肌球蛋白重链1MYH11基因发生重排,形成CBFβ-MYH11和MYH11-CBFβ两种融合基因,其中CBFβ-MYH11融合基因易促使白血病发病;C BFβ链不直接结合DNA,而是通过与CBFα形成异二聚体来增加α链与DNA结合的亲和力,稳定该异二聚体的稳定性;目前已识别了一些CBF结合位点,它们存在于TCR、GM-CSF、GM-CSF受体、髓过氧化物酶及中性粒细胞弹性蛋白基因的调控区,因此可能是由这些基因的表达失控而致白血病;CBFβ基因断裂点恒定地位于3′端编码区的17个氨基酸处nt495,而MYH11基因的断裂点存在5种不同方式,因此根据MYH11断裂点的不同,CBFβ-MYH11转录本有5种不同的剪接方式, 迄今共发现10余种CB Fβ/MYH11融合基因转录本,但最常见的为A型即MYH11基因的断裂点在于nt1921,占80%,其余均少见;AML1 /ETO融合基因t8；21q22；q22是初治急性粒细胞白血病AML患者中常见的细胞遗传学异常,大约20%～40%的AML-M2患者有t8；21q22；q22,并且在M2b亚型中发生率高达90%以上;位于染色体21q22的AML1基因与8q22的ETO基因融合,产生AML1/ETO融合基因;AML1/ETO融合基因是转录激活基因,导致细胞不断增殖;临床上t8；21白血病好发于青年和儿童5%～10%,主要与M2型密切相关,并且年龄越小发生率越高;t8；21代表预后较好的急性白血病类型,成人患者对治疗反应佳,完全缓解率高,中位生存时间长,但易复发；儿童患者的治疗和预后不如成人患者理想;AML1/ETO融合基因可作为M2b诊断分型的标志,以及微小残留病灶监测的一项检测手段;AML：acute myelocytic leukemia急性髓细胞白血病,一类白血病的总称,临床中急性骨髓系白血病可分为M0-M7共8种;M1 急性髓细胞白血病未成熟型M2 急性髓细胞白血病部分成熟型：染色体和分子生物学检验t8；21q22；q22易位是M2b的一种常见非随机染色体重排,其检出率高达90%;AML1基因重排可作为本病基因诊断的标志;M3急性早幼粒细胞白血病：染色体及分子生物学检验约70%～90%的APL具有特异性的染色体易位t15；17,是APL特有的遗传学标志,t15；17染色体易位使17号染色体上的维甲酸受体αPARα基因发生断裂;与15号染色体上的早幼粒细胞白血病PML基因发生融合,形成PML-RARα融合基因;M4 急性粒单核细胞白血病M5 急性单核细胞白血病M6 急性红白细胞白血病M7 急性巨核细胞白血病：染色体检验染色体有inv3或del3、+8、+21异常;M0急性微分化型粒细胞白血病E2A/PBX1融合基因白血病相关融合基因检测试剂盒E2A-PBX1RT-PCR法厂商：上海源奇生物医药科技有限公司E2A-PBX1基因t1;19易位见于25 %的婴儿ALL 和成人ALL 儿童患者为主,免疫亚型主要为前B-ALL,易位产生E2A一PBX融合基因;根据断裂点的不同,E2A-PBX1存在两种亚型;有该融合基因表型的患者易发生中枢神经系统白血病,预后差;因此E2A-PBX1融合基因是个高危的分子生物学标志,与早期的治疗失败有密切关系;对该融合基因进行定量检测可以辅助临床的预后判断以及对疾病进行实时检测,以随时调整化疗方案;检测原理：本试剂盒由白血病E2A-PBX1融合基因特异性引物、荧光探针、逆转录酶以及Taq酶等成分组成,采用一步法在同一反应管中相继完成逆转录和PCR过程,从而检测人骨髓标本中的白血病E2A-PBX1融合基因RNA；同时使用尿苷酶UNG防污染体系, 经加热可选择性地降解PCR产物中的U-DNA,以防止先前PCR扩增产物的污染；采用内参基因,控制整个试剂盒检测过程及标本的有效性;产品特性说明：1.本试剂盒能检测包括含E2A-PBX1所有2种剪接体;2.本试剂盒能从抗凝骨髓提取的RNA中检测E2A-PBX1的相关融合基因,最低检出量达到100拷贝/反应;3.试剂盒对各精密度质控品,在相应的反应液中重复做10次,均能检出,且其实验数据CV值均小于10%;白血病30种融合基因检测试剂盒本试剂盒适用于白血病中常见30种融合基因的检测;包括MLL-AF9,MLL-AF4,MLL-ENL,MLL-AF10,MLL-SEPT6,MLL-ELL,MLL-AF17,MLL-AF1q,M LL-AF1p,MLL-AF6,PML-RARα,NPM-RARα,PLZF-RARα,AML1-ETO,AML1-MDS1/EVI1 ,AML1-MTG16,AML1-EAP,TEL-AML1,TEL-PDGFRB,TEL-ABL,E2A-PBX1,E2A-HLF,BCR-ABL,CBFβ-MYH11,SIL-TAL1,FIP1L1-PDGFRA,DEK-CAN,SET-CAN,TLS-ERG,NPM-MLF本试剂盒熔解分析可使用带有FAM、HEX、ROX及Cy5检测通道的实时PCR扩增仪,如Bio-Rad CFX96、ABI 7500、Roche LC480等;提取——逆转录——PCR扩增;。