刺激隐核虫对大黄鱼致病力及中草药抑制其世代繁殖的研究
防腐剂——福尔马林
防腐剂——福尔马林"福尔马林″〈formalin；福美林〉通用名：福尔马林学名：甲醛英文名： Formaldehyde， methanol俄语名：Формалин汉语拼音： Jia Quan主要成份：甲醛结构式：结构式分子式：CH2O分子量：30.03编辑本段性状有刺激性气味的无色液体。
甲醛是一种易溶于水的高刺激性有毒气体，具有易燃性及腐蚀性，在空气里一般能测出微量。
在甲醛制造方面通常利用氧化甲醇的化工方法制得。
甲醇氧化之后可得甲醛，而甲醛继续氧化之后可得甲酸。
三者皆为毒性物质，在剂量相同的情形下，以对人体的毒性而言，毒性比为甲醇：甲醛：甲酸 = 1：30：6，即甲酸的毒性为甲醇之六倍，而甲醛的毒性为甲醇之三十倍。
而福尔马林不可接触强氧化剂、强碱、酚类、尿素等物质，易引起化学反应造成危险。
药理作用：35～40%的甲醛水溶液叫做福尔马林，阻止细胞核蛋白的合成，抑制细胞分裂及抑制细胞核和细胞浆的合成，导致微生物的死亡。
用途：能有效地杀死细菌繁殖体，也能杀死芽胞（如炭疽芽胞），以及抵抗力强的结核杆菌、病毒。
多用于畜禽棚舍、仓库、卵化室、皮毛、衣物、器具等的熏蒸消毒和标本、尸体防腐；也用于胃肠道制酵。
用途福尔马林的使用涵盖之层面其实相当广泛，其中因甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此在医药上可做为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。
在浓度与剂量足够时，此特性对大部分微生物都具破坏能力，所以也常做为一种消毒剂。
而福尔马林在工业上的使用，性质也相当多，例如运用于制作黏着剂、染剂、涂料等，所衍生出来的产品在我们的生活中其实相当容易接触到〈亦是气喘之可能过敏源〉。
畜牧业也常利用福尔马林搭配"高锰酸钾″〈Potassium permanganate〉来进行寮舍或鸡蛋孵化前的甲醛熏烟消毒。
至于用在鱼病治疗上，至少有八十年以上的历史，对体外寄生虫与真菌、细菌甚至病毒的感染，都有不错的作用力。
警惕鱼类诺卡氏菌病
警惕鱼类诺卡氏菌病 The document was finally revised on 2021警惕鱼类诺卡氏菌病(下)文/ 中国水产科学研究院南海水产研究所徐力文诺卡氏菌（奴卡氏菌）为放线菌类微生物，革兰氏阳性，弱抗酸性，在一般培养基上生长缓慢，3-7天可形成淡黄色沙粒状菌落，形态与一般鱼类病原菌差别显着，菌体为长杆或短杆或分支状。
引起鱼类病害的为星状诺卡氏菌（Nocardia asteroides）和鰤诺卡氏菌（），前者还可感染人类，而国内从患病鱼分离到的多为鰤鱼诺卡氏菌。
鱼类诺卡氏菌病又称结节病，可在内脏各器官形成肉眼可见直径的大量白色结节（肉芽肿），以脾脏和肾脏最为显着，相当比例的鱼还可在体表皮下脂肪和肌肉形成脓疮，呈现大小不一的鼓起软包，划破有白色或淡红色脓液流出，有的鱼还在鳃上形成白色棉絮状结节。
诺卡氏菌病主要危害6个月-2龄鱼，可导致慢性死亡，或降低成鱼商品价值，一个养殖季节死亡率约10-30%，淡水鱼和海水鱼都可以被感染，就我们检测到的有卵形鲳鰺、青斑、鮸鱼、红鱼、美国红鱼、海鲈、尖吻鲈、泥鯭、加州鲈、生鱼等，国内报道的还有大黄鱼，目前实验室保存的约有20株分离自不同海区和鱼类的诺卡氏菌株，鉴定均为鰤鱼诺卡氏菌。
危害严重的有目前养殖广泛的卵形鲳鰺及淡水养殖的加州鲈和生鱼，全年都可发病，在南方以秋季水温22-28℃时流行为甚。
诺卡氏菌本是水体条件致病菌，无处不在，但在鱼类遭受寄生虫侵染后更易患病，如海水小瓜虫（刺激隐核虫）和单殖吸虫，可通过体表和鳃的伤口入侵，我们研究显示其还可以通过肠道感染，投喂含菌饲料，金鲳可在15天左右发病死亡。
近年来该病日趋严重，应与养殖环境水质恶化和虫害猖獗有关。
通过临床症状可以基本诊断该病，也可以用常见培养基分离，但该菌生长缓慢，分离过程中应注意防止污染，最好用选择性培养基如改良罗氏琼脂。
简便的诊断可用体表脓疱中脓液或内脏结节涂片，吉姆萨染色即可镜检到大量分支长杆状菌体。
福尔马林
福尔马林福尔马林″〈formalin；福美林〉是"甲醛″〈formaldehyde〉(HCHO))的水溶液，外观无色透明，具有腐蚀性，且因内含的甲醛挥发性很强，开瓶后一下子就会散发出强烈的刺鼻味道。
甲醛含量为35%至40%(一般是37%)的水溶液，也加入10%~15%的甲醇防止聚合。
具有防腐、消毒和漂白的功能。
不同领域有不同作用。
"福尔马林″〈formalin；福美林〉通用名：福尔马林学名：甲醛英文名：Formaldehyde，methanal汉语拼音：Jia Quan主要成份：甲醛结构式：结构式分子式：CH2O分子量：30.03性状有刺激性气味的无色液体。
甲醛是一种高刺激性有毒气体，具易燃性及腐蚀性，在一般空气里均能测出微量，相当易溶于水，制造上通常利用化工方法氧化甲醇而得。
甲醇氧化之后可得甲醛，而甲醛继续氧化之后可得甲酸。
三者皆为毒性物质，在剂量相同的情形下，以对人体的毒性而言，毒性比为甲醇：甲醛：甲酸= 1：30：6，即甲酸的毒性为甲醇之六倍，而甲醛的毒性为甲醇之三十倍。
而福尔马林不可接触强氧化剂、强碱、酚类、尿素等物质，易引起化学反应造成危险。
药理作用：35～40%的甲醛水溶液叫做福尔马林，阻止细胞核蛋白的合成，抑制细胞分裂及抑制细胞核和细胞浆的合成，导致微生物的死亡。
用途：能有效地杀死细菌繁殖体，也能杀死芽胞（如炭疽芽胞），以及抵抗力强的结核杆菌、病毒。
用于畜禽棚舍、仓库、卵化室、皮毛、衣物、器具等的熏蒸消毒和标本、尸体防腐；也用于胃肠道制酵。
用途福尔马林的使用涵盖之层面其实相当广泛，其中因甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此在医药上可做为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。
在浓度与剂量足够时，此特性对大部分微生物都具破坏能力，所以也常做为一种消毒剂。
而福尔马林在工业上的使用，性质也相当多，例如运用于制作黏着剂、染剂、涂料等，所衍生出来的产品在我们的生活中其实相当容易接触到〈亦是气喘之可能过敏源〉。
海水网箱养殖中海水小瓜虫病的防治
、
病 原体
海 水鱼 类 小 瓜 虫病 又 叫 海 水鱼 白点 病 （ｈ ｔ ｐ ｔ Ｗ ｉ ｅ ｓｏ
不断在 同着物上摩擦身体 ，体表分泌大量粘液 ，因表皮 细胞增生产生 白色的小囊包；体表继发性细菌感染 ，发 炎溃疡 ；鳍条缺损 、开叉 ；眼 白浊变瞎；鳃上皮增生、 部分鳃组织贫血或坏死 ；病鱼体色发黑、消瘦、游动异 常 。最终，病鱼因鳃组织损坏 、呼吸 困难 ，宅息而死 。
设计和制作网箱渔排时其分布要合理规划和布局密度适宜网箱要能够相互疏散这样在发病时可以将发病的和将要发病的网箱拖到水体流动较好清洁的海区暂养对原养殖区也可实行轮养模式使生态环境得以改善和修复
维普资讯
海 水 网 箱 荠 殖 ［ 海 水 小 瓜 虫 病 的 防 治 １ 】
町存以下治疗措施中，选择适合当地具体养殖情况 的方法进行。
分裂成幼虫，营 自由游泳 于水中的纤毛幼虫钻入鱼体组 织形成滋养体。如果幼虫在２ ｄ 时内不能感染宿主，即 ４， 自行死亡 。 二、流行情况 海水小瓜虫病传染速度快，死 亡牢高，１ 天内可 ～２
造成 养 殖鱼类 令 部 死亡 。 箱养 殖 尤 以不 流动 或水 流 Leabharlann 潼 ５ ３ 维普资讯
面目叵 董 旦 旦塑 夔
团 ，而阻碍鱼类鳃 的呼吸 。 ２用硫酸铜挂在水里 ，硫酸铜用大的矿泉水瓶或可 ． 乐瓶来装 ，瓶上打孔 ，在晚上挂在 网箱里 ，一个网箱挂
１ 网箱提起 、套袋 ，用２ ０ ． ０ 毫升／ 的福尔马林浸 米３ 泡 １￣２分钟 ，连续２ ，杀灭寄生在鱼体上 的刺激 隐 ０ ０ 天 核虫的成虫和幼虫 ，并起到体表杀菌和消毒作用。存浸
浴过程 中要注意观察鱼 的活动状况 ，且密度 宜过大， 否则会冈药物刺激分泌的大量粘液及脱落的胞囊聚集成
低盐养殖大黄鱼部分器官的组织学特征
低盐养殖大黄鱼部分器官的组织学特征金希哲;陈庆凯;叶坤;龚诗琦;王志勇;谢仰杰【摘要】对低盐养殖大黄鱼(低盐组)与正常海水养殖大黄鱼(对照组)的肥满度、肝体指数和鳃、肾、肝、性腺的组织学特征进行了比较.结果表明:生物学参数方面,低盐组大黄鱼的体长(17.31±1.76) cm、体重(56.31±13.85)g、肥满度(1.08±0.14)和肝体指数(0.50±0.11)均显著低于对照组(体长(23.85±1.13) cm,体重(267.91±42.74)g,肥满度(1.96±0.10)及肝体指数(1.16±0.12));组织学特征方面,低盐组与对照组相比,低盐组的鳃丝明显较宽,鳃小片上皮细胞增生、肥大,部分鳃小片上皮明显隆起、上皮细胞脱落、坏死,黏液细胞体积变大且数目大量增多,泌氯细胞数量大量增加且胞体变大;低盐组肾小体体积膨大,各级肾小管管径变大,肝细胞肿大、变形,出现大量空泡,部分肝细胞细胞核偏离细胞中心.低盐组大黄鱼性腺中,切片所得多为第Ⅱ、第Ⅲ时相卵母细胞,第Ⅳ时相卵母细胞几不可见,第Ⅲ时相卵母细胞不够饱满,脂肪滴小而密,且卵黄集中在细胞膜内缘,相对于对照组明显偏少.【期刊名称】《集美大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(020)002【总页数】8页(P90-97)【关键词】大黄鱼;低盐养殖;鳃;肾;肝;性腺;组织学【作者】金希哲;陈庆凯;叶坤;龚诗琦;王志勇;谢仰杰【作者单位】集美大学水产学院,福建厦门361021;农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021;集美大学水产学院,福建厦门361021;农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021;宁德市水产技术推广站,福建宁德352100;集美大学水产学院,福建厦门361021;农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021;集美大学水产学院,福建厦门361021;农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021;集美大学水产学院,福建厦门361021;农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021;集美大学水产学院,福建厦门361021;农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021【正文语种】中文【中图分类】S965.322大黄鱼(Larimichthys crocea)属鲈形目、石首鱼科、黄鱼属，是我国重要的海水养殖鱼类，在20世纪70年代前为我国近海四大渔捞对象之首，有我国“海水国鱼”之称，其营养丰富、肉质鲜美.随着大黄鱼人工育苗技术的突破，大黄鱼养殖业得到迅速发展，成为我国海水养殖鱼类中养殖规模最大的种类之一.近十几年来，由刺激隐核虫引起的“白点病”频发，使渔民经济损失惨重.由于刺激隐核虫在低盐环境中不易存活，在盐度为6的海水下，15 min即可完全杀死刺激隐核虫幼虫[1]，随着盐度继续降低，灭杀效果越好.大黄鱼有较强的耐低盐能力，用较低盐度水体进行大黄鱼养殖，有可能避免因刺激隐核虫病而引起的重大损失.此外，我国沿海拥有大量的低盐养殖水域，如能在低盐水域养殖大黄鱼，不但能拓展大黄鱼养殖空间，还能减轻近海网箱养殖的压力.李兵等[2]采用低盐咸水驯化养殖的方式研究了大黄鱼的摄食生长与存活，探讨了大黄鱼淡化养殖的可能性，为我国的大黄鱼低盐度水域的推广养殖起到了积极作用.国内外学者已在盐度变化对海水鱼类的影响方面作了研究，内容涉及多个学科领域[3-12]，于娜等[11]利用组织学切片的手段研究了盐度对鲻鱼消化生理和渗透调节生理的影响，发现随着盐度的升高，其鳃和肾器官发生不同程度的组织生理变化；盐度变化对于大黄鱼的影响，国内也已有一些研究报道[13-16]，李兵等[13]报道了大黄鱼早期各发育阶段对盐度的适应范围，为大黄鱼的低盐养殖及白点病的淡水浴治疗提供了依据，沈盎绿和陈亚瞿[16]通过低盐度驯化大黄鱼的研究表明，在盐度小于10的试验组中，体长为9 cm左右的大黄鱼刚开始反应比较激烈，而后趋于平静，盐度对大黄鱼的48 h半致死盐度为2.5.但对于长时间养殖在低盐度海水中大黄鱼的重要生物学参数指标及有关组织、器官影响的研究，尚未见报道.笔者在开展大黄鱼低盐养殖试验时发现，低盐养殖大黄鱼生长速度明显较缓，养殖初期出现一定程度的死亡.为了解决低盐养殖大黄鱼生长缓慢的问题，为低盐养殖大黄鱼养殖技术的改进提供理论依据，本研究拟对低盐养殖大黄鱼和正常海水养殖大黄鱼的部分生物学参数进行测定和比较，并对两组大黄鱼的若干重要器官组织学特征进行比较研究，探讨低盐度影响大黄鱼生长发育缓慢的原因.实验用的正常海水养殖的大黄鱼(对照组)取自福建省宁德市三都澳海域网箱，海域盐度在24~26范围内，对照组大黄鱼体重211.40～346.60 g，体长22.7～25.9 cm；低盐度养殖大黄鱼(低盐组)取自福建省宁德市横屿岛水产有限公司室内养殖场，体重33.1～149.8 g，体长15.7～21.5 cm.两组鱼均为2011年9月繁育的同一批种苗，低盐组从体长10 cm左右开始驯化，驯化初期盐度从25开始，每次盐度降5，每个盐度适应2 d，最终在盐度为6的水中进行养殖.对照组及低盐组每天投喂两次，低盐组温度保持在22~26 ℃之间，于2013年11月随机取样各30尾，进行生物学测量后用SPSS软件对两组数据的差异性进行分析.取鳃、肾、肝、性腺组织，用Bouin氏液进行固定，次日换成70%的乙醇进行保存，对组织样品进行石蜡包埋和切片，切片厚度为5 μm，HE染色.肝体指数及其肥满度的计算公式为：肝体指数(HSI)/%=肝重/体重×100，肥满度(CF)/%=体重/体长3×100.低盐养殖的大黄鱼体长和体重显著低于正常海水养殖的大黄鱼，肥满度和肝体指数也显著低于正常海水养殖的大黄鱼(见表1).2.2.1 低盐养殖大黄鱼鳃的组织学特征正常海水养殖大黄鱼的鳃丝细长，排列宽松，细胞大小正常，胞间无明显间隙.鳃丝均向两侧伸出半圆形扁平囊状鳃小片，鳃小片平行排列与鳃丝纵轴垂直，鳃小片上皮细胞结构完整，无损伤.黏液细胞稀少，胞体小，分布于鳃丝上皮中.泌氯细胞散布于鳃小叶基部，胞体较小，呈近椭圆状且数量较少(见图版1-1).低盐度组大黄鱼的鳃丝的主干部明显较宽；鳃丝上的鳃小片宽且短，彼此间隔变大，均匀分布在鳃丝两侧，鳃小片上皮变厚，鳃小片上皮细胞发生增生、肥大，部分鳃小片上皮明显隆起，上皮细胞脱落、坏死.黏液细胞主要分布在鳃小片之间的鳃丝上皮中，鳃丝上皮中的黏液细胞数量与对照组相比体积变大，且数目大量增多，充斥于鳃丝基部之间(见图版1-2).2.2.2 低盐养殖大黄鱼肾脏的组织学特征海水对照组大黄鱼的肾脏器官中，肾小球发达，大多数均较饱满，形状规则，肾小管的颈端部分较细，形状规则，上皮细胞呈立方形，胞界清楚，核中位，球形，染色较深，肾小体和各级肾小管外围出现不同的空白隔离区.第一近曲小管(PI)发达，管径较大，管腔大多呈扁卵形，顶部内腔游离面具有发达的刷状缘，上皮细胞呈柱状，细胞界线模糊，核较大，略呈椭圆形，染色较浅，中位，胞体较充实.第二近曲小管(PⅡ)管径逐渐缩小，呈圆形，刷状缘不及第一近曲小管发达，上皮细胞锥柱形，胞间分界亦不清晰，核近圆形，染色深，居中位.远曲小管大多呈近圆形，无刷状缘，管壁上皮为单层立方上皮.肾间质内有许多纵横交错的微血管(见图版2-1).低盐组肾脏器官的基本结构与海水对照组一致，只是在肾小体及上述各级肾小管的结构上出现了不同程度的肿胀现象.肾小体体积膨大，成不规则形状.各级肾小管管径变大，第一部分近曲小管(PI)与第二部分近曲小管(PⅡ)变化较大，表现为细胞体积增大，管径变大(见图版2-2).2.2.3 低盐养殖大黄鱼肝脏的组织学特征海水对照组肝细胞胞质均匀，偶有细胞质空泡，细胞核成规则圆形，位于细胞核中央，肝细胞索相互交错，结构清晰(见图版3-1).与对照组相比，低盐组大黄鱼的肝细胞发生肿大、变形，出现大量空泡.部分肝细胞还出现细胞形状不规则、细胞核偏离细胞中心(见图版3-2).2.2.4 低盐养殖大黄鱼性腺发育及组织学特征海水对照组大黄鱼性腺中，切片所得多为第Ⅱ时相卵母细胞，第Ⅲ、第Ⅳ时相卵母细胞相对较少，第Ⅱ时相卵母细胞体积相对较小，多呈多边形，核型卵圆形，核质透亮，核仁明显，染色较深；第Ⅲ时相卵母细胞体积增大，体型饱满近圆球形，核外周边出现脂肪滴，后向细胞质扩增为数层，同时在细胞膜内缘出现卵黄粒，多而密，且逐渐向细胞质内发展；第Ⅳ时相卵母细胞体积进一步增大，细胞质中充满卵黄，并与脂肪滴混杂(见图版4-1).低盐组大黄鱼性腺中，切片所得多为第Ⅱ、第Ⅲ时相卵母细胞，第Ⅳ时相卵母细胞几不可见，卵母细胞结构与海水对照组的基本相似.其中，第Ⅲ时相卵母细胞呈多边形，不够饱满，脂肪滴小而密，且卵黄集中在细胞膜内缘，相对于海水对照组明显偏少(见图版4-2).鱼类的鳃与其生活的水环境直接接触，覆盖于鳃丝的表皮细胞对鳃生理功能的正常发挥至关重要.当环境盐度变化时，广盐性鱼类鳃的上皮细胞发生适应性改变[15].本实验中，生活在低盐环境中的大黄鱼，由于鱼体内环境对周围水环境来说是高渗的,水将不断地由鳃和体表进入鱼体内，同时消化道也会吸收一部分水分.为了维持体内的高渗透压，低盐组大黄鱼的肾脏排出过多的水分并大量吸收各种离子,排出大量稀薄的尿液，同时鳃主动吸收Na+和Cl-，因此低盐组的大黄鱼鳃丝和鳃小片变宽，有利于与水体充分接触，从而摄取水中的无机离子以适应低渗环境[16]，同时Na+和Cl-通过鳃的氯细胞和辅助细胞进行吸收，结果是氯细胞的数量增多，并且鳃小片发生肥大、增厚.同时，低盐养殖大黄鱼粘液细胞大量增加，分泌的粘液可能导致出现部分鱼苗由于缺氧而死亡.在本实验的低盐条件下养殖大黄鱼鳃的部分鳃小片上皮明显隆起，上皮细胞脱落、坏死，说明该盐度对于大黄鱼生长来说是偏低的.在条件允许时，应适当提高养殖水的盐度，降低低盐对鱼体的损伤程度.鱼类的肾脏是鱼体渗透压调节的一个重要器官，由肾小体和肾小管组成.本研究结果表明，大黄鱼的肾脏在低盐的水环境中其组织结构发生了明显的变化，对照组的肾小球饱满、充盈，各级肾小管结构完整，无损伤；低盐度组因外界水体渗透压低，进入鱼体的大量水分需要通过肾脏排出，且糖分、无机离子等重吸收加强，故肾脏各结构充实，肾小体体积膨大，各级肾小管体积膨胀，管径变大.于娜等[11]在盐度对鲻鱼消化生理及渗透调节生理的影响中发现，淡水组和低盐度组鲻鱼的肾组织结构差异不大，肾小球发达，大多数均较饱满，第一近曲小管(PI)十分发达，管径较大，管腔不规则，这与本实验的研究结果有类似的地方.正常盐度海水养殖大黄鱼肝组织出现少量空泡,其原因可能是肝细胞内物质合成速度与向循环系统释放的速度失衡导致细胞空泡化[17],也可能是肝糖原在肝细胞中的积累造成组织学方法观察到的空泡[18]；而低盐组大黄鱼肝组织出现了更明显的变化，这可能是因为大黄鱼为了适应低渗环境，将体内的能量更多用于调节渗透压，通过激素的调节，使糖代谢向着糖酵解的方向进行，导致肝脏中肝糖原大量贮藏，以供体内渗透压调节所耗的能量，而肝糖原的大量贮藏导致肝细胞中出现大量的空泡以及细胞的增大膨胀.鱼类性腺发育成熟是个复杂的过程，是外在生态条件刺激和内在调控系统各个环节相互协调和配合的结果.盐度对海产鱼类性腺的发育和成熟显得特别重要,尤其是降海洄游产卵的鱼类，其性腺一定要到入海后才能最后发育成熟.河北省水产研究所研究盐度对梭鱼性腺发育影响的结果表明，超过限度的盐度会导致梭鱼性腺在后期出现发育延滞[19].本研究中，低盐养殖大黄鱼第Ⅳ时相卵母细胞几不可见，以及第Ⅲ时相卵母细胞呈不规则多边形，脂肪滴小而密，卵黄集中在细胞膜内缘，相对于海水对照组卵黄明显偏少，说明低盐养殖大黄鱼的性腺发育不如对照组，受到一定程度的抑制.低盐养殖大黄鱼卵母细胞未能发育到第Ⅳ时相，这应该是低盐抑制性腺发育的结果，对于提高大黄鱼的商品价值是有利的.水体中不同的盐度水平对鱼类的生长和存活有显著影响[20-25].鱼类处于盐度适宜的水体中时，鱼的存活率高，特定生长率和肥满度等指标也能达到最大值[26-27].低盐组大黄鱼经过两年的低盐养殖，肥满度和肝体指数均显著低于对照组的水平.其原因可能是由于水体盐度低于鱼体的等渗点，鱼体调节渗透压需要消耗能量，使生长能减少，导致鱼类的生长性能下降[28].此外，盐度变化也可能导致水体的pH 值升高或降低，使鱼类肠道中消化酶的活性降低，影响食物转化效率，导致鱼类生长速率降低或停滞，甚至出现负增长[29-30].陈佳等在温度和盐度对大黄鱼生长性能的联合效应研究中发现，当温度在24.1~24.7 ℃时，大黄鱼生长的最佳盐度在13.6~14.1范围内[31].MAGNUSSEN等研究发现，温度对鱼类的最适盐度有调节作用，温度改变时，鱼体对盐度的需求也随之变化，鱼类的等渗点随温度的变化而变化[32].这对本实验有借鉴意义，可以考虑维持水体温度在24~25 ℃范围内，使大黄鱼有最大的盐度适应范围.本文对低盐养殖大黄鱼的几种器官组织学的研究表明，低盐养殖导致相关器官出现明显的组织学变化.显然，鱼类通过这些组织结构的变化来适应低盐的环境.低盐环境的适应主要在于获取足够的无机盐以稳定鱼体的渗透压，而从水体中吸收无机离子需要消耗能量，从而影响生长.因此，可以尝试在饲料中增加无机盐含量，以提高鱼体无机盐的摄入量.此外，由于渗透调节而能量消耗增大，考虑可以适当增加饲料中糖分的含量来满足低盐养殖大黄鱼的能量消耗的需求，并由此降低饲料成本.【相关文献】[1]周旻曦.大黄鱼刺激隐核虫病病原生物学特性的研究[D].宁波:宁波大学海洋学院,2012:1-56．[2]李兵,王帅，张伟，等.室内低盐度饲养大黄鱼的初步研究[J].上海海洋大学学报,2012,21(4):524-529.[3]YIN F,PENG S,SUN P,et al.Effects of low salinity on antioxidant enzymes activities in kidney and muscle of juvenile silver pomfret Pampus argenteus[J].Acta Ecologica Sinica,2011,31(1):55-60.[4]IMSLAND A K,GSTAVSSON A,GUNNARSSON S,et al.Effects of reduced salinities on growth,feed conversion efficiency and blood physiology of juvenile Atlantichalibut(Hippoglossus hippoglossus 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刺激隐核虫与多子小瓜虫免疫学特性比较研究综述
鱼体的保护性存在一定 联系 。近几年刺 激隐 』 核虫 的免疫 学研 究也 取得 了大量研究 成果 。早在
１８ ９ ８年 Ｃａｋ和 Ｄ ｅｅ ｏ 就 证 明将 多 子 小 瓜 ｌ ｒ ｉ ｍ ｎ等 ｋ 虫幼 虫注射 免疫 斑点叉 尾鲴 腹腔后得 到 的血清可 以在 体外 凝 集 多 子 小瓜 虫 幼 虫 。Ｂ ｒｅｓ宿 主 ｕｇｓ 用刺 激隐核 虫免疫 鱼类 ，也 可 以使 鱼类产生 获得 性 的免疫 。２ ０ ０ ７年 Ｈ ｔ ａ ａ等用 刺 激 隐 核虫 ａ ｎｋ ａ 幼虫 免疫试 验兔 和河豚 后 ，兔 免疫血 清 和鱼免疫
１ ３． ｏ ６ ｃ ｍ
７ ８
福
建
水
产
总第 １６ ２ 期
对幼虫 有抑 动作 用 的特 异性抗体 ，并使被 免疫 鱼 获得 明显 的免疫 保护 。 以上美 国 、日本和我 国的学者们 都在刺激 隐 核虫或 多子小瓜虫虫 体上发 现 了虫体 的凝集现 象 和与其相关 的抑动抗 原 。这 两种寄生虫 免疫鱼体
不 同地 区或 者宿主来 源 的多子 小瓜虫或刺 激 隐核 虫存 在 种 内 的差 异 性 ，即在 形 态 学 、发育 学 、分子 生物学 、免疫学 上不 同来 源的虫株存 在
一
定 的差 异 ，学者 们采 用不 同学科 的方法 对不 同
来 源的小瓜 虫进行分 型 。俞伏 松等对福建 省鳗鲡 养殖 场 中小瓜 虫病 的调 查 中发 现 ：不 同地 区感染 欧洲鳗 的虫株在 包囊 的大 小和孵 化时间上存 在差
一
血清 能够在 体外凝 集或 凝聚刺 激隐核 虫幼虫 ，且 血 清抗 体水 平与凝 集 能力相关 ，并从 虫体 中纯化
得 到抑 动抗 原 ，证 明刺 激隐核 虫 的抑 动抗原 也与 鱼 类 的获 得 性 免疫 相 关 。２ ０ ０ ８年 罗 晓春 等 发 现 感染 的 石 斑 鱼 血 清 能 够 凝 集 小 瓜 虫 幼 虫 － ， ６ Ｊ 柏 建 山等 也检 测到刺 激 隐核虫幼 虫虫体存 在 抑动 抗 原蛋 白 。但 学 明 等 用 刺 激 隐核 虫 幼 虫 对 卵 形 鲳修 （ ｒｃｉ ｔｓｏａｕ ） 免 疫 后 ，鱼 体 产 生 Ｔａｈｎ ｕ ｖ ｔ ｏ ｓ
海南岛石斑鱼刺激隐核虫病发病规律调查
海南岛石斑鱼刺激隐核虫病发病规律调查王永波;王秀英;刘金叶;刘天密【摘要】采用定点采样检测和重点区域重点检测的方法,调查了2014-2015年间海南岛主要石斑鱼养殖区刺激隐核虫病的发病情况和流行规律.结果显示,石斑鱼刺激隐核虫病总体发病率稍微降低,其中,点带石斑鱼、斜带石斑鱼、豹纹鳃棘鲈最容易寄生暴发刺激隐核虫病;从石斑鱼养殖区发病地理位置分析,刺激隐核虫病主要集中在文昌到万宁等东部沿海地区;从流行季节分析,当水温低于25℃时文昌至万宁沿海每年的春夏、秋冬之交均会大量发病,在琼海欧村、万宁港北均出现大量暴发而导致整塘死亡的个案.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2016(043)005【总页数】5页(P152-156)【关键词】海南岛;刺激隐核虫病;石斑鱼;流行性【作者】王永波;王秀英;刘金叶;刘天密【作者单位】海南省海洋与渔业科学院,海南海口570203;海南省水产品质量安全检测中心,海南海口570200;海南省海洋与渔业科学院,海南海口570203;海南省水产品质量安全检测中心,海南海口570200【正文语种】中文【中图分类】S941.5;S965.334王永波，王秀英，刘金叶，等.海南岛石斑鱼刺激隐核虫病发病规律调查［J］.广东农业科学，2016，43（5）：152-156.目前，海南岛已发展成为我国最大的石斑鱼养殖和育苗生产基地，建有完善的石斑鱼亲鱼培育、人工育苗、标粗、养成、加工销售产业链。
据海南省海洋渔业厅和海南省南海鱼类苗种协会数据统计，2015年全省石斑鱼苗种年产量达2亿尾以上，其中石斑鱼苗种约70%销往广东、广西、福建和越南，苗种产量位居全国首位，养殖商品鱼产量达3万t以上，养殖的石斑鱼主要有珍珠龙胆石斑鱼（Epinephelus fuscoguttatus♀×Epinephelus lanceolatus♂）、点带石斑鱼（Epinephelus malabaricus）、斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）、棕点石斑鱼（Epinephelus fuscoguttatus）、鞍带石斑鱼（Epinephelus lanceolatus）、驼背鲈（Cromileptesaltivelis）和豹纹鳃棘鲈（Plectropomus leopardus）等7大品种，养殖方式主要有近岸网箱（渔排）养殖、池塘养殖和工厂化养殖［1］。
2009年福建省水产养殖病害测报分析
毒性疾病减少 １ 种、细菌性疾病减少 １ ２种、寄
生虫性疾 病减少 ７种 、其 它病 害减少 ９种 ；藻类
和真菌性 疾病 种数 与 ２ ０ ０ ８年 相 同 ；不 明病 因 比
５． ％。２０ 年高温天气持续时 间长、 ２３ ０９ 降雨少 、 海水水温 比往年同期上升， 因此 ， 刺激隐核虫病发 病 时间提前 ， 持续 的时 间长 ， 主要 危害 对象 是 ８～
ｌｏ 的苗种 。从 ５月 中旬 监 测 发 现刺 激 隐 核虫 Ｏｍ 病开始 到 ６月 中下旬 暴 发 ， 至 ７月 份病 情才 得 直 到缓 解 ， 病 率 和 死 亡 率 最 高 分 别 为 １０ 和 发 ０％ ７ ％ 。福 鼎沙埕 港 、 德三 都 湾 和福 州 市罗 源 湾 ０ 宁
鱼 、对虾 和鲍 （ 海上 挂养 ） ，年 平 均死 亡 率 有 明
从 测报 区 各 养 殖 种类 病 害 种 数 来 看 ：草 鱼
２ ４种 、鳗 鱼 １ ９种 、对 虾 类 １ １种 、 团头 鲂 和 罗 非 鱼均是 ７种 ，其 它淡水 鱼 、青蟹 、大黄鱼 和 鲍 鱼均 为 ６种 ，海 水 网 箱 养 殖 鱼 类 ５种 、紫 菜 ４ 种 、蛙类 １种 。与 ２ ０ ０ ８年相 比，除 团 头 鲂 病 害 种 数与 ２ ０ ０ ８年 相 同外 ，病 害 种 数 减少 的有 鳗 鱼 （一 ６种 ） 、大黄 鱼 （一５种 ） 、海 水 网箱 养 殖 鱼 类 （一 ５种 ）和 罗非 鱼 （一 ５种 ） ；病害 种数 增
１、２ ０ １ 月份）刺激隐核虫病 （ — 月份） 贝尼 、 ５ ７ 、
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刺激隐核虫对大黄鱼致病力及中草药抑制其世代繁殖的研究焦恺强;王印庚;荣小军;陈佳;张正;廖梅杰;李彬;孙陆宇;苏跃中【摘要】由刺激隐核虫寄生感染而引起的\"白点病\"成为大黄鱼养殖生产中危害最为严重的病害之一.为研究刺激隐核虫对大黄鱼的致病力及复方中草药HD-2对刺激隐核虫世代繁殖的抑制和阻断其感染的效果,本研究在测定了患病大黄鱼产生刺激隐核虫包囊数量、大小、孵化率和幼虫产率的基础上,测定了幼虫体外存活时间和感染力.同时,研究了HD-2中草药液对刺激隐核虫幼虫、滋养体和包囊的杀除效果以及口服复方中草药HD-2对患病大黄鱼的治疗效果.结果显示,自然患病大黄鱼体型规格与产生包囊总数呈正相关,包囊直径为(340.8±64.9)μm,平均孵化率为76.4％,每个包囊可产生280±42.5个幼虫;幼虫体外最长存活时间超过24 h,幼虫孵化20 h后便丧失感染力.幼虫感染大黄鱼7 d的LD90为9712个幼虫/尾,LD50为4366个幼虫/尾.HD-2中草药液可有效杀灭刺激隐核虫幼虫,分别口服含复方中草药5、10和15 g/kg饲料30 d的实验组大黄鱼在LD50攻毒剂量下其相对感染强度较对照组分别下降32.0％、44.5％和51.8％,包囊体积较对照组分别减少35.4％、36.1％和37.3％,孵化率分别下降16.3％、23.3％和27.9％;在LD90攻毒剂量下3个实验组大黄鱼的存活率分别达到40.0％、55.0％和58.3％,显著高于对照组(8.3％),且鳃丝、胸鳍上滋养体数量较对照组显著下降.口服复方中草药HD-2对自然患病大黄鱼的治疗效果表明,采集口服15 d的3组大黄鱼的包囊数量分别较对照组下降73.1％、87.7％和93.8％,鱼体死亡率分别为58.3％、36.7％和21.7％,较对照组83.3％的死亡率明显降低,且用药组大黄鱼的生理状态明显优于对照组.由此可见,口服复方中草药HD-2能有效阻断刺激隐核虫的二次感染,抑制包囊的形成和发育,降低包囊孵化率和幼虫孵化数量,从而有效抑制了虫体的世代繁殖.【期刊名称】《水产学报》【年(卷),期】2019(043)005【总页数】12页(P1326-1337)【关键词】大黄鱼;刺激隐核虫;复方中草药HD-2;阻断感染;世代繁殖;致病力【作者】焦恺强;王印庚;荣小军;陈佳;张正;廖梅杰;李彬;孙陆宇;苏跃中【作者单位】上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛266071;福建福鼎海鸥水产食品有限公司,大黄鱼育种国家重点实验室,福建宁德352103;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,山东青岛 266071;福建大北农水产科技有限公司,福建漳州363502;福建省海洋环境与渔业资源监测中心,福建福州 350003【正文语种】中文【中图分类】S943大黄鱼(Larimichthys crocea)俗称黄瓜鱼、黄花鱼，隶属于鲈形目(Perciformes)、石首鱼科(Sciaenidae)、黄鱼属(Larimichthys )，广泛分布于我国黄海南部至南海雷州半岛以东海域，是我国特有的地方性鱼种，其肉质细腻，味道鲜美，具有极高的营养价值[1] 。
自1985年大黄鱼人工繁殖育苗技术突破以后，至2010年该品种成为全国第二大海水鱼养殖品种[2] ，2016年以17万t的总产量跃居海水养殖鱼类产量第一位[3] 。
随着大黄鱼养殖产业的快速发展，各种病害也随之频繁发生，给产业造成了巨大的经济损失，其中由刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)寄生感染而引起的“白点病”成为大黄鱼养殖生产中危害最为严重的病害之一[4-5] 。
该病的传染速度极快，且具有非常高的发病率和死亡率，控制不及时，1～2 d内即可造成85%养殖鱼类死亡[6] 。
刺激隐核虫俗称“海水小瓜虫”，是一种纤毛虫类寄生虫，主要以细胞、组织碎屑及组织液等为食，其整个生活史主要经历4个阶段，分别为滋养体(trophont)、包囊前体(protomont)、包囊(tomont)和幼虫(theront)[7] 。
鳃和皮肤是刺激隐核虫主要寄生的部位，也是鱼体受到直接损害的组织器官[8] 。
目前，养殖者多使用化学药物浸泡的方法来防治由刺激隐核虫引起的“白点病”，福尔马林、盐酸奎宁、硫酸铜、亚甲基蓝、乙酸、双氧水、孔雀石绿、次氯酸钠、盐霉素、磺胺类抗生素等都已被证实对刺激隐核虫具有一定杀伤效果[9-13] ，但在临床应用上存在很多问题：①长期过量使用化学药物会引发水体污染和水产品质量安全问题；②上述药物大部分属于外用药品，施用成本较高，且不能口服使用，因此，不能有效解决寄生虫在鳃丝内部感染的问题；③孔雀石绿等高效药物已被列为水产禁药[14] 。
因此，寻找一种无污染、安全有效、成本低、方便使用的杀虫药物势在必行。
中草药具有不易产生耐药性、天然环保、无残留等优点，不仅对病原微生物或者寄生虫有直接的抑制和杀灭作用，还能调节养殖鱼类的抗应激能力和免疫机能以提高其抗病力，用中草药来防治鱼病已成为今后水产养殖疾病防控的发展重点之一[5，15] 。
本研究通过对刺激隐核虫包囊的收集培养，结合其生活史对其致病力进行研究，并利用实验室前期筛选的复方中草药HD-2对抑制刺激隐核虫世代繁殖和阻断感染的效果进行研究，以期为预防和治疗刺激隐核虫病提供科学依据和有效方法。
1 材料与方法实验所用的健康大黄鱼购自福建宁德富发水产有限公司，患刺激隐核虫病的大黄鱼采自该公司海水网箱；实验用颗粒饲料购自福建大北农饲料有限公司，中草药为本实验室前期筛选出的复方中草药HD-2[16] ，主要成分为槟榔(Areca catechu)、川楝子( Meliae toosendan)、绵马贯众(Rhizoma dryopteridis crassirhizomatis)、大青叶(I-satidis)、穿心莲(Herba andrographis)等。
实验用海水均经过沙滤，水温为27～28 °C，盐度为29～33，pH为7.9～8.1，溶解氧≥5.0 mg/L，亚硝酸盐＜0.2 mg/L。
1.1 刺激隐核虫致病力研究包囊收集分别取(250.0±25.0) g、(100.0±16.0) g、(40.0±7.0) g 3个规格的自然感染刺激隐核虫的大黄鱼各60尾，置于9个深1 m、容积为1 m3的玻璃钢水槽中饲养，每个规格的大黄鱼分装到3个水槽内，每个水槽20尾；2 d后可见包囊落于水槽底部，轻轻刷起包囊并利用虹吸法将其收集到烧杯中，冲洗干净后计数。
之后，每2 d收集1次，共收集5次。
包囊大小、孵化率及产率测定随机选取72个2 h内脱落的包囊，在显微镜下测量其直径(或长直径)后分别转入3个24孔培养板中，27 °C恒温培养并观察记录包囊发育情况。
待包囊孵化后滴加少量甲醛溶液将幼虫全部杀死，在显微镜下进行计数并计算包囊产率，即单个包囊产生幼虫的数量。
实验周期为7 d，每天更换海水，7 d后未孵化且分裂不正常的包囊记为死亡。
刺激隐核虫幼虫体外存活时间测定收集30 min内孵化出的新鲜幼虫，用灭菌海水将幼虫浓度调整为50个/mL。
在24孔培养板中每孔加入1 mL虫液后27 °C 恒温培养，每隔4 h吸取2个培养孔中的虫液，观察并统计死亡幼虫的数量后滴入5 μL甲醛溶液对总虫数计数并计算相应时间点的幼虫存活率。
虫体死亡判断标准为30 s内虫体不运动、纤毛不打动。
幼虫感染率测定收集30 min内孵化出的新鲜幼虫，分别在收集后的0、4、8、12、16、20和24 h时检测其存活率并计算存活虫体密度，存活率计算方法同“刺激隐核虫幼虫体外存活时间测定”。
用每个时间节点的虫液进行感染大黄鱼实验，实验用大黄鱼鱼苗规格为(50.0±7.0) g，感染剂量为1 000个虫体/尾，感染实验在直径为20 cm的水桶中进行，感染时水体为3 L，感染2 h后加入灭菌海水至10 L，每个感染节点设3个生物学重复。
在虫体感染60 h时收集鱼体产生的包囊，计数并计算幼虫的感染率。
刺激隐核虫对大黄鱼的致死、半致死浓度测定收集30 min内同期孵化的刺激隐核虫幼虫，分别以每尾鱼1 000、3 000、5 600、8 000、10 500、12 000个幼虫剂量感染规格为(82.0±8.5) g的大黄鱼，每组感染20尾，感染时水体中鱼的密度为每5 L海水中1尾鱼，2 h后加水至800 L。
统计7 d内大黄鱼死亡数量，根据寇氏法[17] 计算半致死浓度LD50：lg LD50=XK-d (ΣPi-0.5)，其中XK为最大对数剂量，d为相邻两组对数剂量之差数，Pi为死亡率，i为组号。
90%致死浓度LD90通过SPSS 17.0软件回归分析各致死概率的幼虫量。
1.2 中草药抑制刺激隐核虫世代繁殖效果中草药对刺激隐核虫幼虫药浴杀灭实验收集刺激隐核虫包囊，在27 °C条件下连续充气培养。
待包囊孵化后，收集30 min内同期孵化的高活力幼虫。
将收集到的虫液加灭菌海水稀释至200个幼虫/mL，同时用灭菌海水调节中草药终浓度分别为50、80、100、200和400 mg/L备用。
在24孔培养板上每孔加0.5 mL虫液，药物处理组添加0.5 mL HD-2中草药药液，对照组加0.5 mL灭菌海水，每个浓度设置3个平行组，置于27 °C恒温培养箱培养，每隔1 h，将培养板于倒置显微镜下观察，统计沉底死亡的幼虫数量，从而计算幼虫的存活率。