雪菊总黄酮降血脂作用及其机制研究

第一章绪论 (1)

1.1雪菊药理研究概况 (1)

1.1.1降糖、降压、降血脂的作用 (1)

1.1.2抗衰老作用 (2)

1.1.3抗癌作用 (2)

1.2植物中黄酮类成分对高脂血症作用的研究进展 (3)

1.2.1高脂血症的概况 (3)

1.2.2黄酮类成分降低血脂的作用途径 (4)

1.2.3黄酮类化合物降低细胞内甘油三酯水平的分子作用机制 (7)

1.3小结 (10)

1.4立题背景和主要研究内容 (11)

第二章雪菊化学成分研究 (12)

2.1材料与仪器 (12)

2.2实验内容 (12)

2.2.1雪菊化学成分分离鉴定 (12)

2.2.2HPLC法测定雪菊药材中四种黄酮成分含量 (13)

2.2.3LC-MS/MS法定性分析雪菊总黄酮成分 (15)

2.3结果与讨论 (15)

2.3.1雪菊化学成分分离与鉴定 (15)

2.3.2HPLC法测定雪菊药材中四种黄酮含量 (16)

2.3.3LC-MS/MS法定性分析雪菊总黄酮成分 (21)

2.4本章小结 (22)

第三章雪菊总黄酮对细胞脂质代谢的作用及其机制研究 (24)

3.1材料与方法 (24)

3.1.1药物 (24)

3.1.2细胞与主要试剂 (24)

3.1.3主要仪器 (25)

3.2实验方法 (25)

3.2.1细胞培养 (25)

3.2.2MTT比色法检测药物对HepG2细胞增殖的影响 (25)

3.2.3不同剂量的油酸对HepG2细胞脂肪变性的影响 (26)

3.2.4药物对油酸诱导的脂肪变性HepG2细胞脂质含量的影响 (26)

3.2.5Western blot法检测HepG2细胞中蛋白的表达变化 (26)

3.2.6数据处理 (28)

3.3实验结果 (28)

3.3.1雪菊总黄酮、马里苷和黄诺玛苷对HepG2细胞增殖的影响 (28)

3.3.2不同剂量油酸对诱导HepG2细胞脂肪变性的影响 (29)

3.3.3雪菊总黄酮对油酸诱导的脂肪变性HepG2细胞内脂质含量的影响及其机

制探讨 (30)

3.3.4马里苷和黄诺玛苷对油酸诱导的脂肪变性HepG2细胞内脂质含量的作用

及其机制探讨 (34)

3.4小结 (39)

第四章全文总结 (41)

4.1雪菊总黄酮的成分分析与含量测定 (41)

4.2雪菊总黄酮体外降血脂的作用及其机制 (41)

参考文献 (43)

攻读学位期间发表的学术论文 (49)

附图 (50)

致谢 (55)

雪菊总黄酮降血脂作用及其机制研究第一章绪论

第一章绪论

雪菊为菊科金鸡菊属植物两色金鸡菊(Coreopsis tinctoria)的头状花序，是新疆地区习用维药，为多年生草本植物。始载于《新华本草纲要》，味甘、性平，归肝、大肠经。金鸡菊属植物化学成分的研究始于20世纪50年代。迄今为止，已从该属26种植物中分离得到79个化合物，其中以黄酮类、苯丙素类、多糖类、倍半萜类及聚炔类化合物为主，此外，还含有常见的甾醇类化合物[1]。雪菊在新疆地区作为花茶饮用具有降压、降糖及降脂的功效。近年研究表明，雪菊中的黄酮类物质是其主要活性成分之一，并具有明确的抗氧化作用。其中，马里苷和黄诺马苷为75%乙醇溶液提取部位中雪菊总黄酮的主要成分化合物，在以DPPH和ABTS系统为基础的抗氧化实验研究中得到马里苷和黄诺马苷活性均较好，且马里苷的活性明显大于芦丁[2]。

本章对近年来雪菊药理学研究和中药中黄酮类成分降血脂研究进展进行了综述。

1.1雪菊药理研究概况

传统研究，雪菊有清热解毒、舒血化瘀、和胃健脾的功效，可用于预防治疗燥热烦渴、心慌、高血压、痢疾等症，并有一定的降血压、降血脂、降血糖的效果。随着生活水平的提高，人类“三高”症状也越来越普遍，近年来人们渴望找到有效且无副作用的治疗药物，因此外界对金鸡菊的研究更加广泛深入希望能从中得到治疗高血脂、高血压、糖尿病等疾病的又一有效中草药[3,4]。

1.1.1降糖、降压、降血脂的作用

根据文献报道，菊类提取物一般对α-葡萄糖苷酶有良好的抑制活性。近来有研究人员采用α-葡萄糖苷酶体外活性抑制模型测定昆仑雪菊提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性，结果显示其对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用，说明雪菊有潜力能够被开发成降糖药[5]。此外，Teresa Diasa等[6]设计考察小鼠的糖耐量实验，通过测定小鼠的血糖水平来评价雪菊提取物中黄酮类物质对胰腺功能的影响。结果表明，服用含黄酮类药物的小鼠组糖耐量增加，这说明服用含有黄酮类物质的药物可以提高小鼠的糖耐量，并且可能与其调节胰岛素的分泌有关。葡萄牙学者发现雪菊黄酮部位可降低血