2017-2018学年高中生物 第一章 微生物培养技术 第二节 培养基对微生物的选择作用学业达标测评 中图版1 精品
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教育精品学习资源教育精品学习资源第1章微生物培养技术由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的成分来分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理状态分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。
2017-2018学年高中生物第章微生物技术-培养基的配制和灭菌同步备课教学案
第1课时培养基的配制和灭菌[学习导航] 1.阅读教材P4、P7内容，掌握培养基的作用、营养成分、种类及制备。
2.阅读教材P5、P9内容，区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。
[重难点击] 1.掌握制备培养基的原理。
2.区分消毒和灭菌。
一、培养基在实验室条件下进行科学研究或在工业生产上大规模制造微生物产品都需要用到培养基。
1.概念：是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定和保存各种微生物。
2.成分(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源、微量元素和无机盐等，有时候还需要加入特殊的营养物质。
(2)判断下面培养基的各种成分能提供的营养物质类别3.分类：不同种类微生物的生长繁殖对营养的要求不同，通过选择不同的培养基，人为控制培养基的pH、碳源、氮源、渗透压等条件，使选择的培养基利于某类或某种微生物的生长，而不利于其他微生物的生存，可以达到分离、培养不同微生物的目的。
(1)根据物理状态分为液体培养基和固体培养基，主要区别是后者加入了凝固剂琼脂。
(2)用途①液体培养基：用于各种生理、代谢研究和获得大量菌体；用于发酵工业生产。
②固体培养基：应用于微生物的分离、纯化、培养、保存和鉴定等。
另外，一些由天然固体基质制成的培养基也属于固体培养基。
1.培养基的成分与作用(1)试根据微生物的同化作用类型将微生物进行分类。
答案分为自养型微生物和异养型微生物。
(2)试从碳源和氮源的角度分析不同类型的微生物所需的培养基成分的特点。
2.牛肉膏蛋白胨培养基(1)牛肉膏蛋白胨培养基中提供碳源和氮源的物质各是什么？ 答案 牛肉膏和蛋白胨都可以为微生物提供碳源和氮源。
(2)牛肉膏蛋白胨培养基中主要提供碳源和主要提供氮源的物质各是什么？ 答案 主要提供碳源的是牛肉膏，主要提供氮源的是蛋白胨。
1.下列关于培养基的说法正确的是( ) A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B.培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C.除水以外的无机物只能提供无机盐 D.无机氮源不可能提供能量 答案 A解析 根据培养基的物理性质，可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基，在液体培养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体培养基；除水以外的无机物如NH 4HCO 3，既可以是碳源，也可以是氮源，不仅仅提供无机盐；无机氮源有时也能提供能量，如NH 3可以为硝化细菌提供能量。
新教材高中生物第1章第2节第1课时微生物的培养技术及应用pptx课件新人教版选择性必修3
三、微生物的纯培养
1.相关概念。
(1)培养物:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下
形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。
(2)纯培养物:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯
培养物。
(3)纯培养:获得纯培养物的过程称为纯培养。
2.主要步骤:包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等
步骤。
3.酵母菌的纯培养。
(1)实验原理。
①菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以
繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
②采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散
在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微
生物繁殖形成的纯培养物。
(2)实验步骤。
微判断3
1.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。
(1)一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。
(2)此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及
O2的需求。例如,在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维
生素;在培养霉菌时,一般需要将培养基调至酸性;在培养细菌
时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生物
时,需要提供无氧的条件。
微思考1为什么培养基需要氮源?
凝结水珠,平板倒置后,既可避免培养基表面的水分过度挥发,
又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
⑤在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底
之间的部位,这个平板就不能用来培养微生物了,这是因为空
气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
⑥整个操作过程要在酒精灯火焰附近进行,以避免杂菌污染。
提示:培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质
2017-2018学年高中生物 第一章 无菌操作技术实践 第2课时 分离特定的微生物并测定其数量同步
第2课时分离特定的微生物并测定其数量[学习导航] 1.认识各种微生物形成的菌落特征。
2.学会利用涂布平板法分离、培养微生物，并能测定其数量。
3.掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。
[重难点击] 简述分离、培养微生物的方法及数量测定。
一、微生物分离和培养的基本理论1.纯培养物培养在实验室中利用选择培养基可以筛选和分离某种微生物，然后在高度稀释的条件下，在固体培养基上培养该微生物形成单个菌落，即由一个微生物(如某种细菌)形成的单个菌落。
单个菌落即为纯培养物，可用于科学研究。
2.分离特定的微生物(1)平板分离法①概念：能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成单个菌落。
②分离、培养微生物最常用的培养基是琼脂固体培养基。
③类型：平板分离法有多种，如涂布平板法、混合平板法等。
a.涂布平板法分离细菌：将待分离的样品进行10倍系列稀释，取一定稀释度的样品0.1 mL 倒入预先制备好的培养基平板中，用无菌玻璃涂布器将样品涂布均匀，恒温培养一段时间，以获得单个菌落的方法。
b.混合平板法分离细菌：将待分离的样品进行10倍系列稀释，取一定稀释度的样品0.1 mL与熔化冷却至50_℃左右的培养基混合均匀，将混合液倒入无菌培养皿中制成平板，培养一段时间，以获得单个菌落的方法。
(2)选择培养分离①概念：科学家针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之特别适合这种微生物的生长，而抑制其他微生物的生长。
这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。
②依据原理：不同的微生物有不同的营养需求或对某种化学物质有不同的敏感性。
③举例a.要分离耐高温菌，可在高温条件下进行培养。
b.要分离对某种抗生素具有抗性的菌种，可在加有该抗生素(如链霉素或青霉素)的平板上进行分离。
c.在培养基中加入质量分数为10%的酚，可以抑制细菌和霉菌的生长。
d.运用将纤维素作为唯一碳源和能源的培养基，可以有效地分离能分解纤维素的细菌。
2017-2018学年高中生物苏教版选修1课件：第一章 第二节 分离特定的微生物并测定其数量
2．植物组织培养的过程
(1)脱分化：由已经分化 的植物细胞或组织产生愈伤组织 的 过程。
(2)再分化：在一定条件下继续培养脱分化的 愈伤组织 ，可 以重新诱导 根 、 芽 等器官的分化。
1．在生物体内，细胞并不表现出全能性，而是分化为不同 的组织、器官的原因是什么？
提示：细胞全能性表达的基本条件之一是离体状态。例如： 植株上的分生组织细胞在体内只能进行分裂分化，形成不同的组 织，但不能表现出全能性，这是生物体内基因程序性表达的结 果。
(1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的________和 ________过程。
(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。培 养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值________(填“高”或 “低”)时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭 菌方法是_______________________________________________。
无定形
高度液泡 化
疏松
再分化成新 个体
相同点
都通过有丝分裂进行细胞增殖
(2)植物组织培养过程中脱分化与再分化的比较：
过程
特点
条件
外植体成为愈伤组 排列疏松、高度液泡 离体、营养
脱分化
织
化的薄壁细胞团
物质、植物
由愈伤组织成为幼 有根、芽或有生根发 激素、其他
再分化
苗或胚状体结构 芽的能力
适宜条件
植物组织培养技术的操作流程(以天竺葵的 组织培养为例)
[思路点拨]
[精讲精析] 植物组织培养所用的培养基的主要成分有无机 盐(大量元素和微量元素)、有机物，常常还需要添加植物激素。 根据实验结果可知，本实验所用培养基中加入的6-BA属于细胞分 裂素类生长调节剂。根据表中所列数据及实验结果可知，本实验 自变量是IAA浓度，其取值范围是0～0.5 mg·L－1，因变量是再生 丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)。当 生长素用量与细胞分裂素用量比值高时，有利于根的分化，所以 为了诱导菊花试管苗生根，培养基中一般不加入6-BA。
2017-18学年高中生物第一章第一节微生物的培养和应用第2课时学案苏教版
第二课时无菌操作和接种技术及微生物的分离、培养与数量测定一、无菌操作和接种技术1．接种通常把在______条件下将微生物接入________的操作过程叫做接种。
由于接种方法的不同，采用的接种工具也有区别，如用________进行固体培养基划线接种；用________穿刺接种；用__________涂抹平板等。
2．无菌操作__________是微生物接种技术的关键。
通常在酒精灯________进行接种操作，其原因是：酒精灯火焰附近的________使微生物不能存活。
预习交流1．根据接种工具的区别，分析有哪些接种技术。
2．接种过程中在接种环从菌种管中抽出时，应该注意什么问题？3．无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？二、微生物的分离、培养与数量测定1．分离微生物的依据分离微生物时，根据微生物对________、______、______等要求的不同，通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入__________使____________不能生长，从而达到选择分离微生物的目的。
2．菌落单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度，可以形成肉眼可见的、有____________的______________，称为菌落。
当______培养基表面众多菌落连成一片时，便成为______。
当多种微生物混杂在一起时，根据它们在平板上形成的菌落的________可初步将所需的微生物与其他微生物区分开，并在此基础上获得所需微生物的________。
3．分离微生物的常用方法______分离法能将单个微生物______和固定在______培养基表面或里面，每个孤立的活微生物经过______、______均可形成便于移植的菌落。
最常用的分离、培养微生物的固体培养基是________________平板。
平板分离法有多种，如__________和____________就是常用的两种________的方法。
2017-2018学年高中生物1教学案：二课题1微生物的实验室培养含答案
课题1微生物的实验室培养1．培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。
2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子.3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
4．固体培养基的配制过程为:计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。
5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法.6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。
一、培养基1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2。
种类：(按物理性质分)液体培养基错误!固体培养基3。
营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1。
获取纯净培养物的方法获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,具体操作如下:(1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌.（3）为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行.（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2．消毒和灭菌（1)概念:［填表]（2)常用方法：[连线］三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板.2.纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
(2）接种方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养，12 h和24 h后,分别观察、记录。
[配套K12]2017-2018学年高中生物 第1章 微生物培养技术 微生物培养技术(1)素材 中图
配套K12内容资料配套K12内容资料第1章微生物培养技术由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的成分来分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理状态分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。
《培养基对微生物的选择作用》 讲义
《培养基对微生物的选择作用》讲义在微生物学的领域中，培养基是我们研究和利用微生物的重要工具之一。
它就像是为微生物精心准备的“餐桌”，不仅提供了微生物生长所需的营养物质，还对微生物起着关键的选择作用。
这种选择作用在微生物的分离、鉴定、培养和应用等方面都具有极其重要的意义。
一、培养基的基本概念和组成要理解培养基对微生物的选择作用，首先我们得清楚什么是培养基。
简单来说，培养基就是人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。
培养基通常由以下几部分组成：1、水：这是微生物生长不可或缺的溶剂，也是许多生化反应的介质。
2、碳源：为微生物提供能量和构建细胞的物质，如葡萄糖、蔗糖等。
3、氮源：用于合成微生物细胞中的蛋白质、核酸等含氮物质，常见的有铵盐、硝酸盐等。
4、无机盐：包括钾、钠、钙、镁、铁、磷等元素，它们对于维持微生物的正常生理功能至关重要。
5、生长因子：一些微生物自身不能合成但生长必需的有机物质，如维生素、氨基酸等。
不同类型的微生物对营养物质的需求各不相同，因此我们需要根据研究或应用的目的来配制合适的培养基。
二、培养基的类型及其特点根据不同的分类标准，培养基可以分为多种类型。
1、按物理状态分固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂（如琼脂），使其成为固体状态。
常用于微生物的分离、纯化和鉴定。
液体培养基：营养物质均匀分布在溶液中，微生物能充分接触营养，常用于大规模培养和发酵。
半固体培养基：凝固剂含量较低，呈半固体状态，常用于观察微生物的运动和穿刺培养。
2、按用途分基础培养基：含有一般微生物生长所需的基本营养物质，如牛肉膏蛋白胨培养基。
加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质，以满足特定微生物的生长需求，常用于分离和培养营养要求苛刻的微生物。
选择培养基：通过加入某种化学物质，抑制不需要的微生物生长，而有利于所需微生物的生长。
鉴别培养基：在培养基中加入特定的化学试剂，使培养后产生明显的特征性变化，从而鉴别不同类型的微生物。
2017-2018学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养课件 新人教版选修1
2．下列操作属于灭菌方法的是( ) A．接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面 B．在接种过程中，将试管口和瓶口等易被污染的部位通过火焰灼烧 C．牛奶在 80 ℃下煮 15 min 以杀死其中的微生物 D．通过紫外线或者喷洒石炭酸溶液处理实验室 解析：用酒精棉球擦拭双手和工作台面，属于化学药剂消毒，A 项不符合题意；接种 过程中，将试管口等易被污染的部位通过火焰灼烧，属于灭菌，B 项符合题意；牛奶在 80 ℃下煮 15 min 以杀死其中的微生物，属于巴氏消毒法，C 项不符合题意；用紫外线 处理实验室属于紫外线消毒，喷洒石炭酸溶液处理实验室属于化学药剂消毒，D 项不 符合题意。 答案：B
四、菌种的保存[连线] 答案：①—a—Ⅱ ②—b—Ⅰ
[思考辨析] (1)液体培养基含有水，而固体培养基不含水。(×) (2)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。(√) (3)日常生活中所用的 84 消毒液，其消毒方法属于巴氏消毒法。(×) (4)平板划线法和稀释涂布平板法都是为了得到由单个细胞繁殖而来的菌落。(√) (5)用酒精消毒时，酒精的浓度越高杀菌效果越好。(×) (6)操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，不需要灼烧 接种环。(×)
要点一 培养基
1．培养基的种类 划分标准 培养基种类 液体培养基 半固体培养基 物理性质 固体培养基
特点 不加凝固剂
加凝固剂，如琼脂
主要用途 工业生产 观察微生物的运动、保藏菌种等 微生物的分离、鉴定，活菌计数、
保藏等
化学成分
天然培养基 合成培养基
含化学成分不明确 的天然物质
培养基成分明确(用 化学成分已知的化 学物质配制而成)
解析：题表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。该培 养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可判断培养的微生物 是自养型微生物。该培养基中加入了过量食盐，就可以培养耐盐的金黄色葡萄球菌， 但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基还需要加入有机碳源。该培养基若加 入糖类物质，培养基中就有了碳源，但除去成分②，却使培养基中没有了氮源，这时 就只能用于培养固氮微生物了。微生物生长需要一定的 pH，所以培养基装瓶前需要调 节 pH。表中各成分含量要根据微生物的生长需要来确定。对于菌种鉴定，往往用的是 固体培养基，而表中没有凝固剂，故需要加入常见的凝固剂——琼脂。 答案：(1)自养型微生物 (2)含碳有机物 金黄色葡萄球菌 (3)固氮微生物 (4)3 (5) 调节 pH (6)依微生物的生长需要确定 (7)琼脂(或凝固剂)
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1
学业达标测评(二)
一、选择题
1．鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成，这些物质
是( )
A．指示剂或化学药品 B．青霉素或琼脂
C．高浓度食盐 D．维生素或指示剂
【解析】 鉴别培养基是根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药
品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。
【答案】 A
2．天然培养基与合成培养基是按照什么分类的( )
A．物理状态 B．化学成分
C．用途 D．配制方法
【解析】 培养基的分类有多种方法，按照化学成分可分为天然培养基和合成培养基。
【答案】 B
3．制备培养基的步骤是( )
①溶解 ②称量 ③计算 ④倒平板 ⑤灭菌 ⑥调pH ⑦分装
A．①②③④⑤⑥⑦ B．③②①⑥⑦④⑤
C．③②①⑥⑦⑤④ D．③②①⑤④⑥⑦
【解析】 制备培养基的步骤是：计算、称量、溶解、调pH、分装、灭菌、倒平板。
【答案】 C
4．关于制备牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的说法，叙述错误的是( )
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D．等平板冷却凝固约5 min～10 min后将平板倒过来放置
【解析】 制备牛肉膏蛋白胨琼脂培养基时，正确的操作顺序是：计算、称量、溶化、
灭菌、倒平板。
【答案】 A
5．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( )
A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C．适宜条件下培养
2
D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落
【解析】 稀释涂布平板法接种后培养，培养基表面有的可以形成单个菌落，有的则不
能。
【答案】 D
6．下列斜面培养基正确的画线示意图，正确的是( )
【解析】 正确的接种方法是将带菌的接种环伸入待接种的试管中，在培养基面上由底
部向上轻划“S”型曲线，将菌种接种到培养基上。
【答案】 A
7．漆酶属于木质素降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分
离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述不正确的是( )
A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法
【解析】 生活污水中含木质素的物质相对较少，产漆酶菌株也较少，不宜作为分离产
漆酶菌株的样品，A选项错误；产漆酶菌株可降解木质素，在筛选培养基中加入木质素可筛
选产漆酶的菌株，筛选时可通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，B选项正确；在涂布平板上生
长的菌落可能还有其他杂菌，可再通过平板划线法进一步纯化，C选项正确。
【答案】 A
8．在细菌的连续培养过程中，要以一定速度不断添加新的培养基，同时以同样速度放
出“老”的培养基。右图表示培养基的稀释率(培养基的更新速率)与培养容器中营养物质浓
度、细菌代时(细菌数目增加一倍所需的时间)、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是
( )
3
A．在稀释率很低的情况下，稀释率的增加会导致细菌密度增加
B．稀释率从A点到B点的变化过程中，细菌生长速率不断提高
C．稀释率超过B点后，营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大，细菌密度降低
D．为持续高效地获得发酵产品，应将稀释率控制在B点附近
【解析】 当稀释率大于B点时，营养物质的浓度还会进一步增加，代时也还会进一步
缩小，但是由于培养液更新的速度太快，细菌很快就会随“老”的培养基被放出，而在这个
培养环境中存留的时间非常的短暂，最后导致细菌的密度较低。C叙述错误。ABD叙述正确。
【答案】 C
二、非选择题
9．在细菌的纯培养中，可在无菌条件下，用已灭菌的接种环(或接种针)，把纯种细菌(培
养在试管中)接种在含有营养物质的固体培养基上(一般可用培养皿放置)，该种细菌在适宜
条件下会迅速繁殖，形成菌落。请根据提供的材料设计一个简单实验探究抗生素A和抗生素
B的杀菌效果。
(1)在下图中画出设计方案示意图并注明名称(三个培养皿均含相同培养基，无菌条件操
作)。
(2)预测实验结果并分析：
①经过一段时间后，Ⅱ号培养皿和Ⅲ号培养皿均没有菌落，抗生素A和抗生素B杀菌效
果相同；
②____________________________________________________________；
③____________________________________________________________；
④若Ⅱ、Ⅲ号培养皿内均有大量菌落，说明抗生素A和抗生素B均无杀菌功效。
【答案】 (1)
(2)②若Ⅱ号培养皿内无菌落，而Ⅲ号培养皿内菌落与Ⅰ号相同，说明抗生素A有杀菌
功效，而抗生素B无杀菌功效
③若Ⅲ号培养皿内无菌落，而Ⅱ号培养皿内菌落与Ⅰ号相同，说明抗生素B有杀菌功效，
而抗生素A无杀菌功效
10．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中
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因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释
的理由是_____________________________。
(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有________和________。分离纯
化时应挑选出________的菌落作为候选菌。
(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏
水”“甘油”或“碳酸钙”)。
【解析】 (1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，这样
既可避免杂菌污染，又可将乳酸菌分散成单个细胞，以便在培养基表面形成单个菌落。(2)
乳酸的积累影响乳酸菌的增殖，加入碳酸钙可以中和乳酸菌代谢(无氧呼吸)过程中产生的乳
酸，另外，乳酸和碳酸钙反应，进而导致碳酸钙分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鉴别和分
离。(3)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，装入1
mL甘油后灭菌。将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20 ℃的
冷冻箱中保存。
【答案】 (1)无菌水 泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落 (2)
鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸(或酸) 具有透明圈 (3)甘油