植物组织培养绪论第一章第二章大纲
植物组织培养(tissue culture)技术
3.光照时间
光照长短对试管内 花的形成是个重要 影响因素，在胡萝 卜组织培养中随着 日照长度的增加， 而促进生长。
三、湿度
1.瓶内的湿度：
主要受到培养基含水量和 封口膜透性的影响。如培 养基过硬，则不利于外植 体接触和插入培养基，导 致生长迟缓；封口膜过于 透气，也会使瓶内湿度下 降。
三、湿度
六、渗透压
1.1-2个大气压促进生长。
2.２个大气压以上 就对生长有阻碍作 用，5－６个大气压 生长就完全停止， ６个大气压细胞就 不能生存。
总结： 思考题：
1.什么是组织培养？组织培养的原理是什么？
2.组织培养分哪几种类型？ 3.组织培养有哪些特点？ 4.组织培养在农业上的应用主要表现在哪些 方面？ 5.组织培养中，PH值的作用是什么？ 6.如何根据外植体的不同调整适宜的培养温 度？
（1）原生质体培养取得重大突破 （2）花药培养取得显著成绩
（3）微繁技术广泛应用 4.我国组培发展简介
70年代以来，在花药培养和原生质 体培养贡献大。
第三节
组织培养与农业上的关系
一、快速繁殖苗木 二、获得脱毒苗木 三、为农作物育种提供有利手段 四、实现工厂化育苗
一、快速繁殖苗木
快繁方法： ◆茎尖、茎段、鳞茎盘培养产生腋芽； ◆根、叶等培养产生不定芽； ◆愈伤组织诱导产生不定芽等。
四、实现工厂化育苗
1.含义：是指以植物组织培养为基础， 将外植体接种在人工配制的培养基上， 通过控制环境条件，使细胞脱分化、再 分化成新的组织、器官，进而培育出与 母株一样的批量幼苗的方法。如非洲紫 罗兰组织培养工厂化育苗的生产。 2.特点：繁殖快，整齐、一致，无病虫害， 周期短，周年生产，性状稳定。
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二、光照
植物组织培养讲稿
第一章绪论目的要求：1．掌握组织培养的概念和培养的类型2．掌握组织培养的特点3．一般掌握组织培养发展历史4．初步掌握组织培养在农业实践上的应用第一节组织培养的意义高等植物的组织培养(tissue culture)技术是指分离一个或数个体细胞或植物体的一部分在无菌条件下培养的技术。
•通常我们所说的广义的组织培养，是指通过无菌操作分离植物体的一部分(即外植体explant)，接种到培养基上，在人工控制的条件进行培养，使其生成完整的植株。
• 组织培养按培养对象可分为植株培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养等。
１．植株培养(plant culture) 是对完整植株材料的培养，如幼苗及较大植株的培养。
2．器官培养(organ culture) 即离体器官的培养，根据作物和需要的不同,可以分离茎尖、茎段、根尖、叶片、叶原基、子叶、花瓣、雄蕊、雌蕊、胚珠、胚、子房、果实等外植体的培养。
3. 组织或愈伤组织培养(tissue or callus culture) •为狭义的组织培养，是对植物体的各部分组织进行培养，如茎尖分生组织、形成层、•木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织等等；或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株。
4. 细胞培养 (cell culture ) 是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养。
•5. 原生质体培养(proplast culture ) 是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。
组织培养是本世纪发展起来的一门技术，•由于科学技术的进步，尤其是外源激素的应用，•使组织培养不仅从理论上为相关学科提出了可靠的实验证据，•而且一跃成为一种大规模、批量工厂化生产种苗的新方法，并在生产上越来越得到广泛的应用。
•植物组织培养之所以发展如此快，应用的范围如此广泛，是由于其具备以下几个特点：１．培养条件可以人为控制组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件下进行生长，•摆脱了大自然中四季、昼夜的变化、以及灾害性气候的不利影响，•且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
植物组织培养知识点归纳教学提纲
植物组织培养知识点归纳教学提纲第⼀章1、植物组织培养：是指在离体条件下，利⽤⼈⼯培养基对植物的器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏培养，使其长成完整植株2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的⽆菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织：指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
4、应⽤⼀、农业上的应⽤1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.⽆病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应⽤(breeding)（1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显；（2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）；（3）保存种质（4）创造变异⼆、在遗传学、分⼦⽣物学、细胞⽣物学、组织学、胚胎学、基因⼯程、⽣物⼯程等⽅⾯的应⽤。
⽤于基因⼯程技术创造植物新种质。
⽤于植物⽣长发育理论研究，包括⽣理学、病理学、胚胎学和细胞与分⼦⽣物学等。
三、利⽤组织培养材料作为植物⽣物反应器第⼆章1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成⼀个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能⼒。
2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育⽅式改变的过程。
3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下⽣长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能⼒，形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚⾄植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施⼀、污染及防治：1、真菌污染后，如果已形成孢⼦，则必须经⾼压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染，只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使⽤。
2、⽤抗⽣素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常⽣长。
植物组织培养复习笔记【最新】
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。
3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效.管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
(完整版)植物组织培养技术绪论1
1934年：Gautherete培养山毛杨、黑杨形成层组织产生了Callus
1937年：White发现3种B族维生素和IAA对植物生长有用
将初代培养得到 的培养体移植于 新鲜培养基中这 种反复多次移植 的培养，称为继 代培养
• 3.生根培养：将芽苗转接到生根培养基上培 养成为完整植株的过程。
4.驯化移栽：组培苗经人工炼苗后移栽到驯 化苗床上使之适应 露地或保护地条件的过 程。
植物组织培养过程
离体的植物 脱分化 器官、组织、
细胞
植物组织培养特点
• ③管理方便 利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为 提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等 条件，既利于高度集约化和高密度工厂化生产， 也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化 育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽培等相比 省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一 系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田 间种植所需要的土地。
1946年：罗士韦在菟丝子茎尖培养地观察到花 的形成，为试管受精奠定了基础
1948年：Skoog和崔真培养烟草茎段时，发现腺 嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的抑 制作用，腺嘌呤/生长素高，生芽；低， 生根；相等，不分化。
1952-1953年：美国科学家Steward F.C. 用胡萝 卜根的细胞悬浮培养，发现单个细胞能象受精卵 发育成胚一样的途径，发育成完整植抹。证实了 植物细胞全能性学说。
2、植物组织培养的类型
➢按材料的类别分
1、愈伤组织培养 最为常见的组织培养
植物组织培养学概论修改中PPT课件
（4）N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等 禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成 分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。 在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物 的花药培养和其他组织培养。 (5)KM—8P培养基 它是1974年为原生质体 培养而设计的。其特点是有机成分较复杂， 它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原 生质融合的培养。
(2)B5培养基 是1968年由Galmborg等为培养大 豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的 铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。 从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜， 如双子叶植物特别是木本植物。 (3)White培养基 是1943年由White为培养番茄 根尖而设计的。1963年又作了改良，称作 White改良培养基，提高了MsSO4的浓度和增 加了硼素。其特点是无机机盐数量较低，适于 生根培养。
植物组织培体（in vivo)植物体上提取 下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官 等。
广义的组织培养依外植体不同，可分为：器官培养 （organ culture）、茎尖分生组织培养(shoot tip culture,shoot apex culture,apical meristem culture)、 愈伤组织培养(calluse cultrue)、细胞培养(cell culture)、原生质体培养(protoplast culture)
接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花 板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉 动门，以减少开关门时的空气扰动。 接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装 1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小 型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外 界空气对流。 接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。进入无菌操作 室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。 缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。
《植物组织培养》课件PPT第1章植物组织培养基本知识
——组织培养学科的奠基人
组织培养的奠基人
3. 细胞全能性的证实阶段（1940-1959） 1943年：White植物组织培养手册《A Handbook of Plant Tissue Culture》，标志组织培养 成为一门新兴学科 1946年：罗士韦在菟丝子茎尖培养中观察到花 的形成，为试管受精奠定了基础 1948年：Skoog和崔真培养烟草茎段时，发现腺 嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的抑 制作用，腺嘌呤/生长素高，生芽；低， 生根；相等，不分化。
②生长周期短，繁殖率高
由于人为控制培养条件，因此生长较快，一般20—30d为一个周期。植物 材料按几何级数繁殖生产，总体来说成本低廉，且能及时提供规格一致 的优质种苗或脱病毒种苗。
③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制
植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿 度、营养、激素等条件，既利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利 于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、 田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一系列繁杂 劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。
一、植物组织培养一般概念
定义：离体（in vitro)条件下利用人工培 养条件在无菌情况下，对植物组织（器官、组 织、细胞、原生质体等）进行培养，并使之生长、 发育再生出完整植株的过程。
外植体（explant)：由活体（in vivo)植物体
上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组 织、器官等。
二、植物组织培养的类型
组织培养 绪论
非融合培养
融合培养
第一节
植物组织培养的意义
三、植物组织培养的原理 ★植物细胞全能性（Cellular totipotency）：
任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形 成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成 完整植株的能力。 （Haberlandt, 1902）
细胞全能性（胡萝卜）
根据培养基的类型分为:
（1）固体培养（Solid culture）: 琼脂、卡拉胶等 固化。 （2）半液半固体培养(Semisolid Culture)：固液双 层。 （3）液体培养(Liquid Culture)：震荡、旋转或静置 培养。
液体培养的优点： A 不使用凝固剂，节约生产成本 B 营养吸收充分； C 操作过程简化。
对组织培养技术的诞生起到了极大的推动作用。
第二节
植物组织培养发展简史
植物组织培养发展简史可划分为三个阶段：
一、探索阶段 二、奠基阶段 三、迅速发展阶段
第二节
植物组织培养发展简史
一、探索阶段（上世纪初至上世纪30年代中） 1902年德国著名的植物生理学家和植物学家 哈伯兰特（Haberlandt） 在Schleiden和Schwann的 细胞学说的推动下，提出了高等植物细胞全能性 理论 。它是植物组织培养的理论依据，对植物组 织培养的发展起了先导作用。
第二节 植物组织培养发展简史
与此同时，高特里特（Gautheret） (1934)在研究山毛 柳和黑杨等形成层的组织培养实验中，提出了B族维生素和 生长素对组织培养的重要意义，并于1939年连续培养胡萝 卜根形成层获得首次成功。
同年，White由烟草种间杂种的瘤组织， 诺比考特 （Nobecourt）由胡萝卜均建立了与上述类似的连续生长的 组织培养物。
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一、植物组织培养的广义含义(tissue culture)在无菌条件下，将离体植物的器官、组织、细胞或原生质体在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件使其长成完整植株的过程或生产具有经济价值的其他产品的技术。
也称离体培养（Invitro culture）。
二、此定义内涵：1、无菌条件（asepsis)：外植体、培养基、培养容器、接种工具、操作环境、培养环境等。
2、外植体（explant）：健康植株的特定部位或组织，如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等，选择用于组织培养的起始材料，称之为外植体。
包括营养器官、生殖器官、组织、细胞等。
3、培养基（culture medium)：是植物组织培养的重要基质，它提供植物生长所需的营养物质。
人工配制，成分确定。
4、组培的理论基础：植物细胞的全能性（totipotent）。
5、激素：调控培养物的状态和发育方向，实现不同的实验目的。
6、封闭培养：通过封口材料实现气体交换。
7、培养条件（ culture condiction）:人为控制。
*植物组织培养的狭义含义指对植物体所有组织如分生组织、胚乳组织、薄壁组织、花药组织、愈伤组织的培养。
本课程所涉及的组织培养若无特殊说明均指广义含义。
三、植物组织培养的四要素（1）无菌（2）培养材料：①器官：根、茎、叶、花、果实②组织：花药组织、胚乳、皮层等③细胞：体细胞（2n）、生殖细胞（n）④原生质体（3）培养基（4）培养条件：温度、光照、湿度等四、与组培有关的术语及理论1、植物细胞全能性（totipotent)：植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
原理：植物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，植物体的每一个活细胞都应该具有全能性。
潜在全能性的原因：基因表达的选择性。
科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。
人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。
实现全能性的条件1. 离体条件2. 给予适当的条件，如激素等。
全能性的相对性和绝对性差异：（1）植物细胞强于动物细胞。
（2）受精卵的全能性最高。
（3）受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。
全能性表现强弱:按细胞类型：营养生长中心>形成层>薄壁细胞>厚壁细胞>特化细胞按细胞所处的组织：顶端分生组织>居间分生组织>侧生分生组织（形成层和木栓层）>薄壁组织>厚角组织>输导组织>厚壁组织2、外植体（explant)：从健康植株的特定部位或组织，如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等，选择用于组织培养的起始材料，称之为外植体。
供离体培养用的植物器官统称外植体。
3、愈伤组织（callus)：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
4、分化(differentiation)：具有分裂能力的分生细胞停止分裂，形成具有各种特殊构造和机能的细胞组织和器官的发育过程。
5、脱分化（去分化） (dedifferentiation):已经分化的细胞在一定因素的作用下，改变原来的发展方向，重新恢复分裂能力的过程。
6、再分化（re differentiation)：愈伤组织在合适的条件下，重新分化形成具有各种特殊功能或结构的器官和组织的过程。
脱分化１、概念脱分化的机理目前尚未得到合理的清楚的阐明２、影响因素Ａ、损伤Ｂ、生长调节剂Ｃ、光照Ｄ、细胞位置Ｅ、植物生理状态Ｆ、植物种类差异再分化１、概念目前还无法使所有植物的所有活细胞再分化成完整植株２、原因Ａ、植物种类再分化的能力不同Ｂ、再分化的条件未完全掌握植物的再生性（细胞全能性的实现的过程）植物组织培养7、胚状体（embryoid）：非合子细胞形成的胚状结构，如兰花的原球茎。
8、胚胎发生：培养物通过与正常的受精卵发育相似方式形成胚状体的过程。
（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期）9、无性系(clone)：即无性繁殖系，克隆。
由同一个外植体培养而得到的一群在遗传上基本保持一致的细胞组织或植株。
植物的形态建成一、愈伤组织诱导与器官分化（一）诱导、形成条件１、离体２、激素愈伤组织的形成和形态发生1、形成过程①启动期（诱导期）：细胞准备进行分裂的时期。
长短因不同植物而不同，如与植物种类、外植体的生理状态、外部条件有关。
②分裂期：外植体细胞经过诱导后脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。
细胞数量大量增加，分裂速度大于生长速度；此时期特点：细胞分裂快，结构疏松，缺少有组织的结构，颜色浅或呈透明状。
细胞体积较小，数量多，恢复到分生组织的状态，进行脱分化，要及时转瓶，否则发生分化，若转入新鲜培养基，可无限地进行分裂，保持不分化状态。
③分化期：停止分裂的细胞发生生理代谢变化而形成不同形态和功能的细胞过程。
此时期特点：细胞分裂部位由愈伤组织表面转向内部，出现瘤状结构和维管组织和各种类型的细胞，表现出一定的形态特征，颜色鲜艳有光泽。
为暂不再进一步分化的生长中心。
2、愈伤组织的生长在愈伤组织生长缓慢或停止生长时，要及时进行继代，选择颜色鲜艳，生长旺盛者切割，大小要适宜，太小难以恢复分裂和生长，太大则分裂速度慢。
愈伤组织生长符合“S”形3、愈伤组织的分化在分化培养基上，会出现2种途径（器官发生、体细胞胚胎发生）形成完整植株，取决于： ①植物种类。
②外植体类型。
③生理状态；④生长条件。
诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培养形成芽、根再生成植株的方式。
技术关键：外植体诱导产生的愈伤组织要早期挑选，使其来源尽量一致。
特点：繁殖速度快；培养经愈伤组织阶段再生成植株，遗传性不稳定，易产生变异。
其他形式略胚状体发生型(embryogenesis type)：②、体细胞胚胎（胚状体）发生对此概念的理解a、体细胞胚是组织培养中形成的，只限于组培范围，不同于无融合生殖产生的胚；b、起源于非合子细胞，不同于来自受精卵的合子胚；c、体细胞胚形成过程中经历的胚胎发育过程，不同于组织培养器官分化过程。
最初是在1958年首次在胡萝卜根离体培养通过体细胞胚而形成再生植株取得成功的，目前有200多种植物可观察到胚状体发生。
来源有二：①植物体多种器官、组织、游离的体细胞发育形成二倍体；②小孢子等单倍体产生的花粉胚，发育形成单倍体，经染色体加倍后形成二倍体。
胚状体发生途径1、直接发生从器官、组织、细胞等直接分化出胚，不经过愈伤组织阶段，是植物的特性，如山茶子叶， 2、间接发生外植体先愈伤化，然后由愈伤组织分化体细胞胚，如槐树子叶，发生过程略。
课本18页体细胞胚胎的特点三、根芽激素理论激素是影响器官建成的主要因素。
受外源激素和内源激素的共同影响。
一般地，生长素/分裂素=高，促进生根；生长素/分裂素=低，促进茎芽分化；生长素/分裂素=适中，无结构的生长方式。
离体器官诱导包括以下器官：1、根（包括变态根）：低盐、生长素2、茎（包括变态茎）3、花（试管花卉）影响植物离体形态发生的因素1、植物种类及基因2、外植体的生理状态2.1 年龄 2.2 器官或组织类型 2.3 培养时间及细胞倍性3、培养基3.1 无机营养3.2 激素4、培养条件基因表达于位置效应及器官分化信息传递 (自学）理解以下2个概念：基因表达：储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。
不同的植物基因表达的程度不一样。
位置效应因基因所处的位置不同而表现不同的遗传效应的现象。
取不同部位作为外植体，会得到不同的效果器官分化信息传递植物细胞信息传递系统：1、生物大分子信息系统；2、细胞反应偶联信息系统（环境刺激）五、植物组织培养的类型（一）1、植株培养：对完整植株材料的无菌培养，如幼苗及较大植株的培养。
2、胚胎培养：从果实或子房中分离出未成熟或成熟的胚的无菌培养。
4、组织培养：对植物体所有组织如分生组织、胚乳组织、薄壁组织、花药组织、愈伤组织的培养。
以上类型的划分界限并非绝对植物组织培养的类型（二）初代培养和继代培养植物组织培养的类型（三）液体培养(liquid culture) ：在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养，由于液体中氧气含量较少，常用振动培养的方法以确保氧气的供给。
往复式摇床或旋转式摇床进行培养，速度一般为50-200r／min，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。
缺点：不能较好地固定培养物，优点：营养成分得到充分利用，产生的有害物质能及时清除双相培养：固体、液体混合培养，协调了固体、液体培养的优缺点六、植物组织培养的技术特点（优越性）1、实验材料来源单一，无性系遗传特性一致；2、成本低，效率高；3、环境条件可控，误差小；4、生长快，周期短，可重复性强；5、可连续运行、周年实验或生产，利于自动化控制。
§1-2 植物组织培养的发展和应用一、发展简史(略)1、探索阶段：19世纪中期至20世纪30年代（1838-1930年）★1838年初步提出全能性概念，★1853年离体茎段、根段获得愈伤组织，但未获得完整植株，★ 1901年正式提出全能性概念，White对此概念做解释，★ 1902年Haberdandt首先进行植物组织培养，未获成功；★ 1922年Knudson 兰花无菌播种；2、奠基阶段：20世纪30年代至50年代末（1930-1965年）★1934年White 蕃茄根尖培养，可以继代培养，并发现VB；★ 1941年植物添加物的使用；★1948年Skoog and Tsui烟草培养产生不定根或不定芽，取取决于auxin 及adenin的比例，并发现6-BA。
★ 1954年Muir等人成功的由单细胞培养产生再生植株。
★ 1958年胡萝卜获得胚状体；★ 1962年Murashige and Skoog MS培养基配方；★ 1965年细胞培养获得完整植株，证实了全能性。
3、蓬勃发展阶段：20世纪60年代至今（1965年-至今）★1966年、67年烟草、胡萝卜小孢子培养获得单倍体植株；★ 1971 Takebe等人原生质体培养产生再生植株，证实了细胞分化全能性。
二、植物组织培养的应用1、育种1.1 单倍体育种1.2 培育远缘杂种1.3 筛选并培育突变体1.4 转基因为什么番茄—马铃薯不能表现出理想结果？？主要原因是：生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。