抗微生物药物和敏感性试验2013.05.02
临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展优秀课件
2). 培养与鉴定：通常将标本接种于血平板、麦康凯平板、 巧克力平板等三种培养基，疑为厌氧菌感染时还要接种 厌氧血平板。
3). 对于无菌部位的感染，从分泌物中分离的细菌，一般都 有临床意义，按分离鉴定的菌种报告细菌名称及药敏实 验结果。
临床微生物学检验与抗菌药物 敏感性试验进展优秀课件
第一节 概述
一、现代感染性疾病的特点
感染性疾病（infectious diseases）是指各种生物性病原 (病原微生物、寄生虫)寄生人体所引起的传染性感染疾病和 非传染性感染疾病。 （一）疾病谱发生变迁，发现了很多引起传染病的新病原
体，如嗜肺军团菌、汉坦病毒、埃博拉病毒、尼巴病毒、 朊病毒、SARS冠状病毒等。而且已经绝迹的旧传染病又 死灰复燃，如梅毒、结核病、霍乱等。 （二）多重耐药株的出现，导致抗感染治疗的困难 （三）器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展，减弱了机体的 免疫防御功能，造成医院感染及条件性致病菌感染的增 加
（二）病原学实验诊断 感染性疾病的病原体的实验诊断方法包括病原体的分离 培养、病原体特异性抗原抗体的检测、病原体核酸检测 等多种方法。
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第二节细菌感染的实验诊断
一、标本的采集与培养方法
（一）标本采集原则： 1.采集标本时应无菌操作，尽量避免污染。盛放标本的容 器和培养基应预先进行无菌处理并贴好标签。 2.应选择感染部位或病变明显的部位采集标本，避免周围 组织、器官或分泌物中的杂菌污染。 3.根据病原体在感染性疾病的不同时期的体内分布和排出 部位选择在最佳时间采集适宜标本。 4.对于怀疑细菌感染的标本，尽量在抗生素使用前采集。 5.标本采集后应及时送检。大多数细菌标本应冷藏送检， 但是某些细菌，如脑膜炎奈瑟菌对低温和干燥极其敏感 ，应注意保温，尽量床旁接种，并预温相应的培养基。
药敏试验判定标准-定义说明解析
药敏试验判定标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述药敏试验判定标准的概述部分旨在介绍本文要讨论的主题以及药敏试验判定标准在医药领域中的重要性。
药敏试验是一种常用的临床实验方法，用于评估微生物对不同药物的敏感性，以确定最佳治疗方案。
药物耐药性是一个全球性的医学难题，它对患者的治疗和健康带来了严重的威胁。
在选择适当的抗生素治疗某种感染病例时，药敏试验的结果对于临床医生至关重要。
药敏试验旨在确定特定微生物对某种药物的敏感性或耐药性，从而指导医生选择最佳的治疗药物。
药敏试验判定标准是根据一系列准则和指南制定的。
这些标准通常基于研究数据、临床实践和国际医学协会的共识。
药敏试验判定标准的制定旨在提供一种标准化的方法，以确保试验结果的准确性和可比性。
药敏试验判定标准的应用有助于指导临床医生在治疗过程中做出准确的决策。
通过根据耐药性结果选择最有效的药物，药敏试验判定标准可以减少治疗失败和微生物耐药性的发展。
此外，药敏试验判定标准还可以提供数据支持，用于药物研发和监测抗生素耐药性的流行趋势。
总之，药敏试验判定标准在临床医学中具有重要作用。
它们为临床医生提供了科学依据，以指导抗生素治疗的选择和使用。
在当前药物耐药性日益增加的背景下，药敏试验判定标准的应用前景非常广阔，将有助于提高抗生素的有效应用和管理。
文章结构：文章的结构是指在撰写过程中所遵循的组织框架，它能够提供一个清晰的脉络和逻辑关系，使读者更容易理解和跟随文章的内容。
本文将按照以下结构进行展开：第一部分：引言1.1 概述在这一部分，我们会对药敏试验判定标准进行简要介绍，并探讨它在药物研发和治疗中的重要性。
1.2 文章结构本部分将详细介绍整篇文章的框架和结构，为读者提供一个整体的概览。
1.3 目的在这一部分，我们会明确文章撰写的目的，阐明我们为什么要探讨药敏试验判定标准以及对这一主题的重要性。
第二部分：正文2.1 药敏试验的定义和背景这一部分会对药敏试验的定义和背景进行解释，以帮助读者了解该领域的基本概念和背景知识。
医院抗菌药物敏感性试验的技术要求(2019年版)
医院抗菌药物敏感性试验的技术要求（2019年版）目录1 范围 (2)2 术语和定义 (2)3 常规药敏试验的药物选择和报告 (4)4 药敏试验方法 (7)5 各种属细菌药敏试验 (12)6 质量控制（Quality control, QC） (17)7 商品化药敏试验检测系统的性能验证 (19)附录 A （资料性附录）临床各种属细菌的药敏试验方法和试验条件 (23)附录 B （资料性附录）不常见苛养菌和非苛养菌药敏试验折点 (27)1 范围本标准规定了临床抗菌药物敏感性试验的技术要求，包括常规药敏试验的药物选择和报告、药敏试验方法、各种属细菌药敏试验、常见菌特殊耐药表型检测、药敏试验的质量控制、商品化药敏试验检测系统的性能验证。
本标准适用于开展临床微生物学检验的各级临床实验室。
2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
2.1抗微生物药物敏感性试验Antimicrobial susceptibility testing指检测微生物（本行业标准特指细菌）对抗微生物药物（本行业标准特指抗菌药物）的体外敏感性，以指导临床合理选用药物的微生物学试验，简称药敏试验。
2.2最低抑菌浓度Minimal inhibitory concentration；MIC指在琼脂或肉汤稀释法药物敏感性检测试验中能抑制肉眼可见的微生物生长的最低抗菌药物浓度。
2.3折点Breakpoint能预测临床治疗效果，用以判断敏感、中介、剂量依赖型敏感、耐药、非敏感的最低抑菌浓度（MIC）或者抑菌圈直径（mm）的数值。
2.3.1敏感Susceptible；S当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于敏感范围时，使用推荐剂量进行治疗，该药在感染部位通常达到的浓度可抑制被测菌的生长，临床治疗可能有效。
2.3.2中介Intermediate；I当菌株的MIC值或抑菌圈直径处于中介时，该数值接近药物在血液和组织中达到的浓度，从而治疗反应率低于敏感菌群。
抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
耐药机制 None mecA
相对流行率 OX报告
一般
S
一般
R
RS
mecA（低水平表达） 少见
R*
SR
PBP改变或β-内酰胺 罕见
R*
酶的高表达（模糊的
MRSA）
葡萄球菌属:诱导性β-内酰胺酶试验
青霉素 – MIC≤0.12mg/L – 抑菌圈直径≥29mm 诱导性β-内酰胺酶试验
对于严重感染，随后分离出的菌株，实验室应进行 青霉素的MIC检测和β-内酰胺酶诱导试验
霉素诱导耐药试验阳性 ,推测此菌株对克林霉 素耐药,但在少数患者 治疗中克林霉素可能仍 有效”。
修订的建议… Re：万古霉素MIC,什么时候葡萄球菌应该被
送到一个参考实验室做进一步检测？
§金黄色葡萄球菌 ---MIC 4μg/ml—Maybe ---MIC≥8μg/ml—Yes §凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS） --- MIC≥32μg/ml—Yes
2007版 ! M100-S17 Table 2G 青霉素
敏感 ≤2 ≤0.06 ≤0.06
中介 4
耐药 8
- 0.12
0.12-1 2
≤0.06 0.12-1 2
对于三个青霉素的判断标准我们都应该解 释和报告吗？
青霉素判断标准 脑膜炎
解释/报告？ • 是的，脑脊液标本
非脑膜炎 口服青霉素V
• 是的，其他的标本，因为我们通常不 能确定该感染是否涉及脑膜
40%
20%
0%
总体
MIC ≤1
MIC=2
*到达目标：万古霉素血浆谷浓度达到15-20µg/mL；†治疗反应：患者发热、白细胞增多症状部分或完全缓解
一项单中心、前瞻性研究，对95例罹患医院MRSA感染的住院或住护理院的老年患者静脉滴注万古霉素，对临床疗效、
医院抗菌药物敏感性试验的技术要求(2022年版)
(2022年版)1范围 (2)2 术语和定义 (2)3 常规药敏试验的药物选择和报告 (4)4 药敏试验方法 (7)5 各种属细菌药敏试验 (12)6 质量控制(Quality control, QC) (17)7 商品化药敏试验检测系统的性能验证 (19)附录 A (资料性附录) 临床各种属细菌的药敏试验方法和试验条件 (23)附录 B (资料性附录) 不常见苛养菌和非苛养菌药敏试验折点 (27)1 范围本标准规定了临床抗菌药物敏感性试验的技术要求，包括常规药敏试验的药物选择和报告、药敏试验方法、各种属细菌药敏试验、常见菌特殊耐药表型检测、药敏试验的质量控制、商品化药敏试验检测系统的性能验证。
本标准合用于开展临床微生物学检验的各级临床实验室。
2 术语和定义下列术语和定义合用于本文件。
2.1抗微生物药物敏感性试验 Antimicrobial susceptibility testing指检测微生物(本行业标准特指细菌)对抗微生物药物(本行业标准特指抗菌药物)的体外敏感性，以指导临床合理选用药物的微生物学试验，简称药敏试验。
2.2最低抑菌浓度 Minimal inhibitory concentration；MIC指在琼脂或者肉汤稀释法药物敏感性检测试验中能抑制肉眼可见的微生物生长的最低抗菌药物浓度。
2.3折点 Breakpoint能预测临床治疗效果，用以判断敏感、中介、剂量依赖型敏感、耐药、非敏感的最低抑菌浓度(MIC)或者抑菌圈直径(mm)的数值。
2.3.1敏感 Susceptible；S当抗菌药物对分离株的MIC值或者抑菌圈直径处于敏感范围时，使用推荐剂量进行治疗，该药在感染部位通常达到的浓度可抑制被测菌的生长，临床治疗可能有效。
2.3.2中介 Intermediate； I当菌株的MIC值或者抑菌圈直径处于中介时，该数值接近药物在血液和组织中达到的浓度，从而治疗反应率低于敏感菌群。
该分类意味着采用高于常规剂量治疗时或者在药物生理浓集的部位，临床治疗可能有效。
第十三章临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展
第十三章临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展概述临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验是临床医学中重要的基础性诊断检查方法之一，其目的是通过对临床样本进行微生物学检验和药敏试验，得出对患者感染病原体的确诊和对其是否对抗生素敏感的判断，为临床合理使用抗生素提供依据。
当前，在微生物学检验和药敏试验方面有了很大的进步和创新，这些新技术的应用促进了微生物学检验和药敏试验的精准度和效率，也使得临床医生的诊治工作更加科学、准确和快速。
本文将针对当前的新技术和新方法，对临床微生物学检验和抗菌药物敏感性试验的进展进行探讨。
微生物学检验新技术1. 基因检测技术基因检测技术采用PCR技术，能够对微生物进行快速而准确的检测，并能够对微生物的易感性、耐药性和毒力等进行分析。
现在有许多基因检测商业化开发，例如改进型的Molecular Inversion Probe（MIP）技术，不仅能够对传统微生物的检测进行加强，还可以快速检测一些病原体对抗生素的抗性情况。
2. 质谱检测技术质谱检测技术已经成为了检测和确认微生物种类的重要工具。
它通过离子化和分子裂解的方式，将分子特性转换为质量信号，从而确定微生物的分子结构和种类。
该技术对病原体的检测效率很高，主要适应于一些非常难以培养或培养周期比较长的微生物。
3. 全基因组测序技术目前全基因组测序技术日渐成为病原学研究领域中的新的分析工具。
该技术可以快速、准确地检测微生物的基因组序列，包括基因型、单核苷酸多态性和基因表达谱。
通过对这些数据进行分析，可以更加准确地判断病原体的分子特性和药敏性。
抗菌药物敏感性试验进展1. 自动化技术近年来，自动化技术在抗菌药物敏感性试验中得到了广泛应用。
自动化技术可以提高试验的准确性和效率，使得抗菌药物敏感性试验的结果更加可靠和精确，为临床合理用药提供更为科学、快速、高效的依据。
2. 病原体翻译系统技术病原体翻译系统技术被认为是一种高通量药敏试验技术，可以对大量的病原体进行药敏试验。
细菌药物敏感性试验及标准化2006
自动化仪器法： 利用自动化仪器 进行细菌药物敏 感性试验可快速、 准确地检测大量 细菌样本的药物 敏感性。
表型筛选法：通 过筛选具有特定 表型的细菌研究 其对药物的敏感 性以发现新的药 物作用机制或耐 药机制。
E-test法
原理：利用细菌代谢过程中消耗培 养基中的营养物质产生酸度变化通 过指示剂变色反应来判定结果
E试验法：结合了纸片扩散法和稀释法 的原理通过特殊设计的试条对细菌进行 药物敏感性试验结果准确可靠。
稀释法
稀释法：通过不 同浓度的药物对 细菌进行处理观 察细菌的生长情 况确定细菌对药 物的敏感性。
扩散法：将含有 药物的纸片或液 体置于细菌培养 皿上观察细菌对 药物的反应判断 细菌对药物的敏 感性。
试验结果解读：根据 抑菌圈大小、最低抑 菌浓度等指标判断细 菌对药物的敏感性
试验标准化必要性
试验目的：确定细菌对各种抗菌药物的敏感性为临床合理用药提供依据 试验方法：纸片扩散法、稀释法、自动化仪器法等 结果解释：根据抑菌圈大小、细菌生长情况等判断细菌对抗菌药物的敏感性 试验标准化必要性：确保试验结果的准确性和可靠性促进临床合理用药和抗菌药物的合理使用
质量控制：定 期进行内部和 外部质量控制 确保试验结果 的准确性和可
靠性
07
细菌药物敏感性试 验发展趋势
新型试验方法研究与应用
自动化与智能化：提高试验效率和 准确性
耐药性检测：监测细菌耐药性发展 趋势
添加标题
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新型抗生素筛选：发现新的抗菌药 物
联合用药方案：优化抗菌治疗效果
03
细菌药物敏感性试 验方法
纸片扩散法
纸片扩散法：将含有一定浓度的抗菌药 物的纸片贴在接种了测试菌的琼脂平板 上观察细菌的生长情况从而判断其对抗 菌药物的敏感性。
微生物药敏结果临床解读与应用
微生物药敏结果临床解读与应用微生物药敏试验（Antimicrobial Susceptibility Testing, AST）是一种用来检测微生物（如细菌）对特定抗生素的敏感性的实验。
这种测试的结果对于指导临床治疗尤为重要，特别是在处理细菌感染时。
以下是微生物药敏结果的临床解读和应用：一、临床解读：1.敏感（Sensitive, S）：●如果细菌对某种抗生素敏感，这意味着这种抗生素在临床上可以有效抑制或杀死这种细菌。
●在选择治疗方案时，敏感的抗生素通常是首选。
2.中间敏感（Intermediate, I）：●中间敏感意味着抗生素对细菌有一定的抑制作用，但效果不如敏感类别中的抗生素。
●在某些情况下，如果药物浓度增加或药物累积，中间敏感的抗生素也可能有效。
3.耐药（Resistant, R）：●耐药表示细菌对某种抗生素具有抵抗力，常规剂量的抗生素无法有效控制或杀死这种细菌。
●应避免使用对该细菌耐药的抗生素。
二、应用：1.制定治疗计划：●药敏测试结果是制定抗生素治疗方案的重要依据，有助于选择最有效的抗生素。
●这有助于提高治疗效果，同时减少抗药性的发展。
2.调整治疗方案：●如果患者对初步治疗没有反应，药敏结果可以用来调整治疗方案。
●在长期或复杂的感染治疗中，根据药敏结果定期调整抗生素选择是常见的做法。
3.监测抗药性发展：●药敏测试可以帮助监测特定地区或医院内细菌抗药性的趋势。
●这对于公共卫生管理和抗生素使用指南的制定具有重要意义。
4.避免抗生素滥用：●通过准确的药敏测试，可以避免不必要或无效的抗生素使用，从而降低抗药性风险。
5.个体化治疗：●药敏测试结果有助于实现针对特定患者和感染的个体化治疗。
三、注意事项：1.临床医生需要结合患者的具体情况（如感染部位、患者的免疫状态、过敏历史等）来解读药敏测试结果。
2.在某些情况下，可能需要结合其他微生物学和临床数据来做出最终的治疗决策。
3.定期更新和审视药敏测试技术和标准，以确保结果的准确性和可靠性。
菌药物敏感性试验和细菌耐药性的检查
1.概述
1.3.2 药敏试验用药的分组： 临床实验室标准化研究所（Clinical Laboratory
Standards I，CLSI）将抗菌药物分成A、B、C、U四组
1.概述
1.3.2 药敏试验用药的分组 • A组：常规药敏试验的首选药物，应常规报告
1.概述
1.3.2 药敏试验用药的分组
• B组：包含针对医院感染的药物，亦可作为首选药物，选择 性报告临床。 （csf、多种细菌、多部位感染、A组药物过 敏或耐药，流行病学目的向感控部门报告）
细菌耐药性的检测31细菌的耐药机制311细菌产生灭活抗生素的各种酶内酰胺酶氨基糖苷修饰酶312细菌改变药物作用的靶位青霉素结合蛋白pbp肽聚糖交联靶位改变dna拓扑异构酶313细胞膜通透性改变及对药物主动外排314细菌生物膜的形成3
内容与要求
• 抗菌药物敏感性试验适应症(了解) • 药敏试验常用抗菌药物选择与分组(了解) •TH药A敏N试K 验YO结U果表示及其临床意义 (掌握) • 细菌耐药机制及常见耐药菌检测(了解)
4.1.2 MRSA的检测 • 厚度为4mm的M-H琼脂平板 • 30μ g/d的头孢西丁纸片 • 0．5麦氏浊度的待测菌液 • 35℃培养24小时 • 结果判定：
抑菌环直径≤21mm即为MRSA 抑菌环直径≥22mm即为MSSA
4.重要耐药菌的检测
4.2 万古霉素耐药和低敏感性的葡萄球菌
• 1997年日本发现1株VISA
1.2.1 药敏试验目的： 1）为临床选用抗菌药物提供信息 2）对常见病原菌耐药状况监测，经验用药 3）评价新药的抗菌药效 4）分析医院感染流行株药敏谱，为单株流行提供依据。
1.概述
1.2 抗菌药物敏感性试验目的与适应症