不同温度下恩诺沙星及其代谢物在斑点叉尾鲖各组织中的残留及消除
盐酸氯苯胍在斑点叉尾鮰体内的药代动力学及残留消除规律
测, 可以制定药物的最高残留限量以及休药期等参 数, 确保水产品的质量安全。目前, 关于盐酸氯苯 胍在斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)体内的药代动 力学及残留消除规律的研究尚未见报道。
本试验以斑点叉尾鮰作为研究对象, 研究盐酸 氯苯胍在斑点叉尾鮰体内的药代动力学及残留消 除规律, 制定试验条件下药物的休药期, 保证用药 安全, 旨在为水产品的质量安全问题提供理论依据, 确保水产动物的食用安全性, 保障人们的生命健康。
出口的主要问题。药物使用不当或使用过量都会
引起水产品药物残留问题, 水产品中的药物残留会 危害水产品的质量安全, 人们长期食用这些带渔药 残留的水产品会严重危害身体健康, 同时也会对自 然环境造成污染, 污染水域环境, 影响水生动物的 正常生长。目前, 水产品中药物残留的检测技术主 要有高效液相色谱[4—6]、高效液相色谱-质谱联用 技术[7, 8]和免疫分析法[9, 10]。通过对药物残留的检
Basal Research Fund (2016 HY-ZD1202)] 作者简介: 余琳雪(1992－), 女, 湖北襄阳人; 硕士研究生; 主要从事水产动物药理学及药残控制技术研究。E-mail: yulx92@ 通信作者: 艾晓辉(1968－), 男, 湖北荆州人; 研究员, 博士, 博士生导师; 主要从事水产动物药理学及药残控制技术研究。E-mail:
第 43 卷 第 4 期 2019 年 7 月
doi: 10.7541/2019.103
水生生物学报
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
Vol. 43, No. 4 Jul., 2019
盐酸氯苯胍在斑点叉尾鮰体内的药代动力学及残留消除规律
余琳雪1, 2 刘永涛1, 3 丁 浩1, 2 苏志俊1, 2 艾晓辉1, 3
发酵饲料投喂方式对斑点叉尾生长、肠道菌群及代谢组学的影响
第45卷 第3期 渔 业 科 学 进 展Vol.45, No.3 2024年6月Jun., 2024* 江苏现代农业(大宗鱼类)产业技术体系种质创新与苗种繁育创新团队[JATS(2023)374]、国家自然科学基金(32002378)和国家特色淡水鱼产业技术体系(CARS-46)共同资助。
周丽颖，E-mail:*****************① 通信作者：钟立强，副研究员，E-mail:**********************；王明华，正高级工程师，E-mail:******************收稿日期: 2023-02-20, 收修改稿日期: 2023-03-17DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20230220001 /周丽颖, 钟立强, 张世勇, 陈校辉, 刘洪岩, 王明华. 发酵饲料投喂方式对斑点叉尾生长、肠道菌群及代谢组学的影响. 渔业科学进展, 2024, 45(3): 140–148ZHOU L Y, ZHONG L Q, ZHANG S Y, CHEN X H, LIU H Y, WANG M H. Effects of fermented feed feeding mode on intestinal flora and metabolomics of channel catfish (Ictalurus punctatus ). Progress in Fishery Sciences, 2024, 45(3): 140–148发酵饲料投喂方式对斑点叉尾生长、肠道菌群及代谢组学的影响*周丽颖1,2,3 钟立强1,3①张世勇1,3 陈校辉1,3 刘洪岩1,3 王明华1,3①(1. 江苏省淡水水产研究所 江苏 南京 210017；2. 扬州大学动物科学与技术学院 江苏 扬州 225009；3. 江苏省农业种质资源保护与利用平台 江苏 南京 210014)摘要 本研究对斑点叉尾(Ictalurus punctatus )的发酵饲料进行了合理饲喂，并确定了其对斑点叉尾生长、肠道菌群和代谢组学的影响。
恩诺沙星在大口黑鲈(Micropterus salmoides)体内代谢动力学研究
恩诺沙星在大口黑鲈(Micropterus salmoides)体内代谢动力学研究何欣;王扬;贝亦江【摘要】给大口黑鲈(Micropterus salmoides)连续5 d口服30 mg·kg-1剂量(以体质量计)的恩诺沙星,利用液相色谱技术测定不同时间点大口黑鲈各组织中恩诺沙星的含量,建立药时曲线,探讨恩诺沙星在大口黑鲈体内的代谢动力学.结果表明:在(25±2)℃水温下,大口黑鲈血液、肌肉、肝脏中恩诺沙星的达峰时间均为4 h,吸收半衰期分别为0.998、2.176、1.892 h,消除半衰期分别为8.494、23.84、37.53 h,血液中的药时曲线下总面积为132.23μg·mL-1·h,肌肉和肝脏中的药时曲线下总面积分别为273.50、247.12μg·g-1·h.25℃下,恩诺沙星在大口黑鲈体内的建议休药期为15 d.【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2018(030)009【总页数】7页(P1482-1488)【关键词】恩诺沙星;大口黑鲈;代谢动力学【作者】何欣;王扬;贝亦江【作者单位】杭州市农业科学研究院实验中心,浙江杭州 310024;浙江省水产技术推广总站,浙江杭州310012;浙江省水产技术推广总站,浙江杭州310012【正文语种】中文【中图分类】S948大口黑鲈(Micropterus salmoides)，俗称加州鲈鱼，隶属鲈形目(Perciformes)鲈亚目(Porcoidei)太阳鱼科(Cehtrachidae)黑鲈属(Micropterus)。
自20世纪80年代初由北美引进后，因其肌肉营养价值丰富全面、味道鲜美可口、生长快、易起捕，现已推广到全国各地，成为我国新的重要的水产养殖品种之一。
然而，由于大口黑鲈引进时主要由野生种驯化而成，经多年近亲繁育和集约化养殖，种质退化和抗病能力降低等问题日渐突出。
氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡蛋中的残留消除规律
浙江大学学报（农业与生命科学版）47（1）：127~134，2021Journal of Zhejiang University (Agric.&Life Sci.)http ：///agr E -mail ：zdxbnsb @氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡蛋中的残留消除规律张静，周倩，高玉时*，唐修君，陆俊贤，马丽娜，陈大伟，唐梦君（江苏省家禽科学研究所，江苏扬州225125）摘要本试验旨在研究氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡蛋中的残留消除规律。
预防组和治疗组蛋鸡分别按体质量以15和30mg/kg 剂量预拌料方式给予氟苯尼考粉药物，连续5d ，分别收集给药期和停药后第1、2、3、5、7、10、12、15、18天的各组鸡蛋，测定全蛋、蛋黄和蛋清中氟苯尼考和氟苯尼考胺的残留量。
结果表明：全蛋、蛋清和蛋黄中氟苯尼考和氟苯尼考胺的检出限均为2μg/kg ，定量限均为5μg/kg 。
鸡蛋样品在氟苯尼考添加水平为1.0～5.0μg/kg 时平均回收率为78.9%～105.0%，日内精密度为2.22%～4.22%，日间精密度为4.22%～6.54%。
停药后，氟苯尼考在预防组和治疗组蛋清中的残留量峰值（520.70、797.12μg/kg ）高于蛋黄（285.96、442.40μg/kg ），氟苯尼考胺在蛋黄中的残留量峰值（218.40、646.14μg/kg ）高于蛋清（87.36、36.89μg/kg ），氟苯尼考和氟苯尼考胺在蛋清中的消除速率均快于蛋黄。
氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量及其总残留量与给药剂量呈正相关，蛋黄中以氟苯尼考和氟苯尼考胺残留为主，蛋清中主要是氟苯尼考残留。
不同剂量组蛋黄中氟苯尼考残留时间为18d 。
关键词氟苯尼考；氟苯尼考胺；鸡蛋；残留消除；高效液相色谱-串联质谱法中图分类号S 859.796文献标志码AResidue depletion laws of florfenicol and its metabolite florfenicol amine in eggs.Journal ofZhejiang University (Agric.&Life Sci.),2021,47(1):127-134ZHANG Jing,ZHOU Qian,GAO Yushi *,TANG Xiujun,LU Junxian,MA Lina,CHEN Dawei,TANG Mengjun (Jiangsu Institute of Poultry Sciences,Yangzhou 225125,Jiangsu,China )Abstract A study on florfenicol (FF)and florfenicol amine (FFA)residue depletion raws was conducted ineggs.After the chickens were administered successively florfenicol (FF)powder of 15mg/kg (prevention group)and 30mg/kg (treatment group)of body mass in the form of premix for 5d,the eggs of each group were collected at administration period and 1,2,3,5,7,10,12,15,18d at withdrawal period.Then FF and FFA residues of egg,egg yolk and egg white were detected using high performance liquid chromatography -tandem mass spectrometry (HPLC -MS/MS).The results showed that the limits of detection (LOD)of FF and FFA in egg,egg yolk and egg white were 2μg/kg,and the limits of quantitation (LOQ)were 5μg/kg.The average recoveries were in the range of 78.9%-105.0%when the egg samples were added with FF in the range of 1.0-5.0μg/kg,and the intraday precision and the interday precision was 2.22%-4.22%and 4.22%-6.54%,respectively.The peak values of FF residues (520.70,797.12μg/kg)of egg white in prevention group and treatment group,respectively,DOI ：10.3785/j.issn.1008-9209.2020.03.241基金项目：江苏省现代农业重点及面上项目（BE2018363）；江苏省属公益类科研院所自主科研经费（BM2018026）；国家自然科学基金青年科学基金（31700005）；江苏省扬州市重点研发计划（社会发展）项目（YZ2020060）；江苏省现代农业产业技术体系建设专项资金（JATS 〔2020〕359）。
恩诺沙星在三疣梭子蟹主要组织中的代谢动力学
三疣梭子 蟹 （ｏｔ ｕ ｉ ｂｒ ｌ ｕ ）是浙 江 省优 ｐｒ ｎｓｔｔ ｅ ｕ ｔ ｕ ｒｕ ｃ ａ ｓ
养殖 的不 断发展 ， 三疣梭 子蟹养 殖病 害频 繁发生 且 日
势水 产养殖 品种 ， 养殖 产 量 约 占全 国 的 １３ 其 ／ 。随着
趋严重 。 目前对三疣梭子蟹病 害的防治仍采用 药物控
Ｐ ａ ｅｋ ｅ ｅ ｒ￣ａ ３ ９ ） ｈ ｅｕｔ ｄｍ ｎｔ ｔｄｔａ ｅｒｆｘｃｎｉ ｈｅ ｉ ｕｓｆ ｍ 尸 ｒ ｕｅ ｕ ｔｓｗ ｓｗ ｌ ｄ． ｈｒ ｏｉ ｔ ｓ ｏ ｍ（ Ｐ ７ ．Ｔ ｅｒｓｌ ｅ ｏ ｓａｅ ｔ ｎｏ ｏａｉ ｎｔｒｅｔｓｅ ｒ ｍａ ｎ ｉ Ｐ ｓ ｒ ｈ ｌ ｓ ｏ ．ｔｔｂｒ ｌ ｕ ａ ｅ ｅ ｉ ｃａ ｌ
星后 体 内的 药代动力 学规律 。结果表 明 口灌给药后 ， 疣梭 子蟹肝胰腺 、 肉和血淋 巴组织 中的恩诺沙星达峰速度 三 肌 快， 肝胰腺和血淋 巴在 给药 ２ ｈ都有 双峰 现象 出现 。恩诺 沙星在肝胰 腺 、 肉、 ４ 肌 血淋 巴中的 ｃ 分 别为 １．３ ｇ … １２ ５ ／
（Ｎ Ｅ Ｒ）ａ ｓ ｇ ｏｅｏ ／ ｇ ｙ ｅｅｓ—ｈｓ ｉ ｅ ｏｍ ｎｅｌ ｕｄｃ ｒｍ ｔ ｒｐ ｙ Ｒ — Ｐ Ｃ ．Ｔ ｅｌ ｅ ｏ ｒ ｏａｉ ｉ ｔ ｉ ｌ ｄ ｓ ｆ ０ｍｇｋ ｖｒｅｐａｅ ｇ ｐｒ ｒ ａ ｃ ｑ ｉ ｈｏ ａ ｇａｈ （ ＰＨ Ｌ ） ｈ ｖｌ ｆ ｎｏ ｘｃ ｎ ｅ １ ｂｒ ｈｈ ｆ ｉ ｏ ｅ ｅ ｆ ｌ ｎｎ ｔｒｅｔ ｓｅ ｒａｈｄｔｅ ｘ ｍ ｃｎ ｅｔ ｔ ｎ Ｃ ）ｑ ｉ ｌ，ｔｅｄｕ ｌ ｐａ ｅｅｏｓｒｅ ｅｈ ｐｔ ａｃｅ ｎ ｅ ｏ ｍｐ ｈｅ ｓｕ ｓ ｅｃｅ ｉ ｏ ｃｎｒ ｉ （ ｉ ｈ ｍａ ｍｕ ａｏ ｕ ｋｙ ｈ ｏｂｅ ｅｋｗ ｒ ｂｅ ｄｉ ｔ ｅａ ｐｎ ｒａａｄｈ ｍ ｌ ｈ ｃ ｖ ｎｈ ｏ ｙ （ ４ｈ ．Ｔ ｅ ｘ ｌ ｏｃｎ ａｏ ｆ ｎｏ ｏａｉ ｅａ ｐｎｒａ ｍ ｓｌ ａｄｈｍｏ ｍ ｈｗ ｓ１． ３ ／ 。 ．５ ｇａｄ０ ８ ８ ２ ） ｈ ｉ ｎｅｔ ｔ ｎｏ ｅｒｆ ｘｃ ｉ ｈｐ ｔ ａｃｅ ， ｕｃｅ ｎ ｅ ｌ ｐ ａ ２ ５ｓｇ ０ ８０ ｓ ｎ ．５ ｍａ ｍａ ｃ ｒｉ ｉ ｎｎ ｏ ｙ １ ／
恩诺沙星在水产中的应用与研究
恩诺沙星在水产中的应用与研究刘开永;汪开毓【摘要】恩诺沙星是动物专用的高效抗菌药.本文对恩诺沙星的结构特征、作用机理、国内外所做的相关研究和应用以及使用注意事项进行了综述,为进行恩诺沙星在水产养殖中应用的理论研究和正确使用提供参考.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2004(038)010【总页数】3页(P32-34)【关键词】恩诺沙星;水产;应用与研究【作者】刘开永;汪开毓【作者单位】山西省农科院饲料科技开发中心,山西太原,030006;四川农业大学鱼病研究中心,四川雅安,625014【正文语种】中文【中图分类】S859.791.1 结构及性状恩诺沙星由德国拜耳公司于1987年首创并投放市场，化学名称为1-环丙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氢-7-（4-乙基-1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸，分子式为C19H22FN3O3，分子量为359.4，化学结构见图1。
本品为微黄色或类白色结晶性粉末，无臭，味微苦，易溶于碱性溶液中，在水、甲醇中微溶，在乙醇中不溶；遇光渐变为橙红色。
1.2 作用机理由于恩诺沙星是在喹诺酮结构的6位上引入了氟原子，从而增强了药物与细菌靶位的亲和力，且扩大了抗菌谱；1位上的环丙基能促进药物的组织渗透性。
恩诺沙星在动物体内代谢为环丙沙星来发挥抗菌活性。
与其他喹诺酮类药的抗菌机理相同，恩诺沙星以细菌的脱氧核糖核酸（DNA）酶为靶。
细菌的双股DNA扭曲成为袢状或螺旋状（称为超螺旋），使DNA形成超螺旋的酶称为DNA 回旋酶。
药物通过与细菌DNA回旋酶亚基A结合，抑制该酶的切割与连接功能，对染色体造成不可逆损害，阻止细菌细胞分裂而发挥抗菌作用［2］。
同时，它对细菌细胞壁有高度的渗透力、并破坏细菌的胞膜。
因此，恩诺沙星是通过双重抗菌作用来达到溶菌、杀菌目的。
大量实验证实，恩诺沙星对细菌、支原体等引起的疾病疗效一般要优于环丙沙星、诺氟沙星及抗生素类药。
2.1 抗菌性研究范红结等［3］进行雷氏普罗威登菌的药敏试验表明，该菌对环丙沙星低度敏感，而对恩诺沙星高度敏感。
诺氟沙星在奥尼罗非鱼体内的药代动力学及残留研究
诺氟沙星在奥尼罗非鱼体内的药代动力学及残留研究廖碧钗【摘要】In order to study the metabolism and elimination of norfloxacin (NFX) in hybrid tilapias (Oreochromis aureus ×O. Niloticus), single oral administration at dose of 20 mg · kg-1 had been investigated in healthy tilapia at (25±2)℃. The result demonstrated: Plasma concentration-time datas of NFX were best fitted using a two-compartmental open model. Absorption, distribution and elimination half-life were 1.30, 1.97 and 26.36 hours, respectively. The maximal plasma concentrati on was 0. 546 μg · mL-1 , peaking at 2. 715 hour. Area under the plasma drug concentration-time curve was 14. 491 μg · h · mL-1. As an edible tissue, muscle was selected as target tissue in this experiment. The maximum residue limit (MRL) is 10μg · kg-1 in muscle, the withdrawal time should not be less than 55 days under this experiment condition.%在水温(25±2)℃条件下,以20 mg·kg-1鱼体重的剂量给奥尼罗非鱼单次口灌诺氟沙星,高效液相色谱法测定血浆和肌肉组织中的药物浓度,研究诺氟沙星在奥尼罗非鱼体内的代谢及消除规律.结果显示:血药时间数据符合一级吸收二室开放模型,半衰期(T1/2Ka、T1/2α、T1/2β)分别为1.30、1.97、26.36 h,最大血药浓度为0.546 μg·mL-1,达峰时间为2.715 h,药时曲线下面积(AUC)为14.491 μg·h·mL-1.选取肌肉组织作为残留检测的靶组织,以10μg·kg-1为最高残留限量,在本试验条件下,建议休药期不低于55 d.【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2011(026)006【总页数】5页(P930-934)【关键词】诺氟沙星;奥尼罗非鱼;药代动力学;残留【作者】廖碧钗【作者单位】福建省淡水水产研究所,福建福州 350002;福建省水产技术推广总站,福建福州 350003【正文语种】中文【中图分类】S859.84诺氟沙星（norfloxacin，NFX）是20世纪70年代日本最先合成的第三代喹诺酮类药物，具有抗菌谱广、抗菌力强、体内分布广、安全性高、价格低廉、对革兰氏阳性菌和阴性菌在低浓度时即表现杀菌作用的优势[1-2]，被广泛应用于动物和人类多种感染性疾病的治疗[3-6]，在水产养殖中主要应用于鱼类细菌性疾病的防治[7-10]。
水产品体内血、肝、肾、肌肉中恩诺沙星及其代谢产物的测定研究
水产品体内血、肝、肾、肌肉中恩诺沙星及其代谢产物的测定研究作者：张乐刘超来源：《安徽农学通报》2013年第02期摘要：研究了恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在水产品各组织（血、肝、肾、肌肉）的提取、净化方法，建立了一套水产品血、肝、肾、肌肉中恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星准确、简便的测定方法。
并应用该套测定方法初步研究了中华鳖中恩诺沙星的代谢规律。
关键词：恩诺沙星；环丙沙星；测定；代谢规律中图分类号 S9 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）01-02-116-02恩诺沙星（enrofloxacin，ENR）为第3代喹诺酮类药物，属广谱抗菌药，抗菌力强，与其它抗菌药无交叉耐药性等特点，可用于治疗多种细菌感染性疾病，目前广泛应用于水产动物病害防治[1]。
近年来国内陆续有部分水产品（中华绒螯蟹、青蟹、罗氏沼虾、鲤鱼[2-7]）中恩诺沙星的药代动力学方面的报道，但还需要进一步研究。
而研究恩诺沙星药代动力学一个很重要的基础是测定方法。
水产品中恩诺沙星代谢主要通过血液、肝、肾等，最后主要滞留在肌肉、肝脏和肾脏中，目前恩诺沙星测定方法的报道主要集中在水产品的肌肉部分，而对血、肝、肾等组织的恩诺沙星测定方法缺少相关验证及比较。
本文旨在探索建立一套水产品血、肝、肾、肌肉中恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星准确、简便的测定方法。
并应用该套测定方法初步研究了中华鳖中恩诺沙星的代谢规律。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂 Waters e2695高效液相色谱仪（2475荧光检测器，美国Waters公司）；分散机（IKA T18）；氮吹仪（Organomation N-EVAP- 24）；旋涡混合器（VORTEX Wizard）；Milli-Q纯水系统（美国Millipor公司）。
1.2 色谱条件色谱柱：Aglient TC-C18，5μm，4.6mm×250mm；流动相：0.05mol/L磷酸/三乙胺溶液（pH=2.4）∶乙腈=85∶15；柱温：35℃；检测波长：λex 280nm ，λem 450nm；流速：0.8mL/min。
恩诺沙星对眼斑双锯鱼生理生化的影响
1.1 试验材料 以眼斑双锯鱼为试验对象，鱼苗由南海水产研
究所热带水产研究开发中心陵水基地人工孵化而 来，试验于该基地原地进行。试验前，苗种暂养于 水族箱，充气泵充氧，保证溶氧量≥6.5 mg /L，循 环水连续供应换水，盐度 32±2，水温（28±1）℃， pH 8.0～8.2，亚硝酸盐含量小于 0.03 mg/L，氨氮 含量小于 0.01 mg/L。每天投喂两次人工颗粒饲 料，试验前 24 h 停止喂食。 1.2 试验设计
1A～图 1G。试验结果表明，恩诺沙星对眼斑双锯 鱼幼鱼 GSH、AKP、LZM、GST 活性影响显著（P＜ 0.05），恩诺沙星对眼斑双锯鱼幼鱼 SOD、CAT、 POD 活性影响不显著（P＞0.05）。不同处理组间， GSH 活性随处理浓度升高呈先降低后升高现象； AKP 活性随处理浓度升高先升高后降低，但中、 高浓度组不显著（P＞0.05）；LZM、GST 活性随处 理浓度升高呈上升趋势，但 LZM 活性在 5 mg/L 分 别与 0、10 mg/L 差异不显著（P＞0.05），GST 活 性在 0、5 mg/L 差异不显著（P＞0.05）。
称取恩诺沙星晶体，溶解于砂滤海水体积为 20 L 的储物箱中，配置浓度分别为 0、5 和 10 mg/L 的海水溶液，并根据 Fang[13]之前报道的 HPLC 方 法确定水体中恩诺沙星的浓度。其中 0 mg/L 处理 组为对照组，说明书所示安全治疗浓度 5 mg/L 为 中浓度处理组，10 mg/L 为高浓度处理组，共计 3 组，每组 3 个平行。将 90 尾健康眼斑双锯鱼幼鱼 个体（1.59±0.33）g 随机放入以上 9 个试验容器 中，每个容器 10 尾个体。试验容器连续充氧，各 水质参数与暂养时相同。以说明书指定最长治疗 时间 24 h 为试验时间，期间停止喂食。试验结束 时，从每个试验容器中随机取 3 尾试验个体，取
环丙沙星在鱼体内残留的研究
环丙沙星在鱼体内残留的研究葛虹深圳市水产品质量监督检验中心518031张杨齐采霞葛雷陈霞湖北省水产科学研究所430071环丙沙星是合成的第三代含氟的喹诺酮类抗菌素药物,具有广谱抗菌活性作用强、体内分布广、杀菌效果好、对所有细菌的抗菌性均较诺氟沙星强2-4倍。
因此近年来环丙沙星已广泛的被应用于动物产品养殖,尤其是水产品养殖中对于致病性细菌病的治疗。
使用环丙沙星后，其药物的残留问题十分严重。
环丙沙星对生物体的危害是通过药物在鱼体的残留，又经过食物链进入人体。
摄入环丙沙星残留较高的鱼类会造成人体内脏损伤,消化系统的出血,肝肾功能异常炎症及衰竭,血液系统白血球减少症,神经系统的疾病和过敏症也有发生。
环丙沙星在鱼体中残留研究较少，使用后残留水平变化的报道不多。
本文就环丙沙星在鱼体给药及停药不同时间的残留水平做了初步研究，结果表明，环丙沙星在鱼体内的代谢速度较慢，富集后残留在鱼体有一个较长的过程。
本实验安排了采用不同给药期及不同休药期环丙沙星药饵连续投喂斑点叉尾鮰,检测其鱼体环丙沙星残留量，并分析其代谢速度。
同时做了一组空白和一组自行研制的“肠炎灵”中药饵投喂对照，进行养殖后鱼肉样本的检测，鱼体中环丙沙星残留为未检出。
1.材料与方法1.1 试验材料采用养殖场成批购进斑点叉尾鮰 (规格60-100g/尾左右),在室内驯养10天，投饵驯养，剔除伤残后分组,每组12尾。
1.2 养殖药饵试验药饵试验组以投喂药饵7天、14天、21天、25天、32天以及停药7天、14天、21天、25天等分阶段采集鱼肉样。
中药制剂组及空白对照组,随试验同时进行投喂,按时采集鱼肉。
采用江西汇仁药业公司生产的盐酸环丙沙星片剂（0．25g/片）,添加到鱼饲料中.添加量为1%,混匀,制成颗粒饵料.每天投喂2次。
药饵量为鱼体重的3%。
中药组为投喂自行研制的“肠炎灵”中药,为3%的药饵投喂。
(中药饵为湖北省水产科学研究所承担的省科技厅重大项目的研究成果) 空白组仅喂普通饵料。
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doi: 10.7541/2017.97不同温度下恩诺沙星及其代谢物在斑点叉尾鲖各组织中的残留及消除规律比较
杨秋红1 艾晓辉1 刘永涛1 胥 宁1 赵 凤2(1. 中国水产科学研究院长江水产研究所, 农业部淡水鱼类种质监督检验测试中心, 武汉 430223;2. 贵州省水产研究所, 贵阳 550025)
摘要: 分别在18℃和28℃水温下, 以20 mg/(kg·d)鱼体质量对斑点叉尾鲙给药恩诺沙星, 连续灌胃7d。给药后在不同的时间点取样, 用高效液相色谱荧光检测器检测, 研究恩诺沙星及其主要代谢产物环丙沙星在斑点叉尾鲙体内(血液、肌肉、皮肤、肝脏和肾脏)的残留消除规律。结果表明, 恩诺沙星在不同组织、不同水温消除速率不同: 水温为18℃, 皮肤、肝脏、肾脏和肌肉中的消除曲线方程分别为C=1022.1e–0.034t、C=2601.3e–0.046t、C=2903.6e–0.072t和C=1186.5e–0.036t, 消除半衰期分别为31.79d、45.29d、16.15d和35.54d; 水温为28℃, 皮肤、肝脏、肾脏和肌肉中的消除曲线方程分别为C=8805.5e–0.04t、C=3154e–0.08t、C=4145.1e–0.1t和C=1302.1e–0.068t, 消除半衰期分别为18.33d、6.26d、12.44d和10.34d。恩诺沙星在斑点叉尾鲙体内可代谢为环丙沙星, 恩诺沙星在斑点叉尾鲙体内的代谢速度较慢, 代谢物环丙沙星在斑点叉尾鲙体内的消除速度比恩诺沙星快; 在18℃水温下,斑点叉尾鲙肉中的恩诺沙星和环丙沙星完全消除需要150d以上; 在28℃水温下, 斑点叉尾鲙肉中的恩诺沙星和环丙沙星完全消除需要120d。在实验条件下, 建议水温为18℃和28℃时, 休药期分别为3240℃·日和4200℃·日。
关键词: 斑点叉尾鲙; 恩诺沙星; 环丙沙星; 消除; 残留中图分类号: S948 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2017)04-0781-06
恩诺沙星(Enrofloxacin, EF)又名乙基环丙氟哌酸、乙基环丙沙星, 俗称海达, 属第3代喹诺酮类药物, 是化学合成的第三代喹诺酮类广谱抗菌药物,是一族新型杀菌性抗菌药[1—3]。具有口服及肌注后吸收迅速、完全、消除半衰期较长、体内分布广泛、表观分布容积大等药动学特征, 因其具有抗菌谱广、抗菌力强、作用迅速、体内分布广泛, 与其他抗菌药之间无交叉耐药性及敏感微生物的最小抑菌浓度MIC较低等特点, 而广泛用于动物和人类多种感染性疾病的治疗, 对水产动物多种细菌感染性疾病也具有很好的疗效。但由于养殖人员缺乏相应的理论指导, 使用过程中导致药物滥用, 而且恩诺沙星代谢缓慢, 易残留于动物体的肌肉、肝脏和肾脏等组织中, 其毒副作用逐渐显现, 加上人们对食品安全意识的不断加强, 其药物及代谢产物环丙沙星(Ciprofloxacin, CF)残留问题已引起了国内外的普遍重视[4—8]。鉴于此, 国内外已报道了恩诺沙星在养殖鱼类如虹鳟、大西洋鲑、鳗鲡、鲈、眼斑石首鱼和鲤等体内的残留情况, 有关恩诺沙星在斑点叉尾鲙(Ietalurus punetaus)体内的残留及消除规律研究尚未见报道。笔者主要研究了在不同水温下, 多次口服恩诺沙星后, 其在斑点叉尾鲙各组织中的残留和消除特点, 据此确定合理的用药方案, 确立休药期,为药物残留标准的限量提供基础性数据, 为渔药残留监控和食品安全提供科学依据。1 材料与方法1.1 材料实验动物 健康斑点叉尾鲙, 平均质量为
第 41 卷 第 4 期水 生 生 物 学 报Vol. 41, No. 4
2017 年 7 月ACTA HYDROBIOLOGICA SINICAJul., 2017
收稿日期: 2016-07-13; 修订日期: 2016-11-05基金项目: 公益性行业(农业)科研专项(201503108-CC-1)资助 [Supported by the Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest(201503108-CC-1)]作者简介: 杨秋红(1986—), 女, 回族, 河南禹州人, 硕士; 研究方向为水产动物药理及药残控制技术。E-mail: qmini1986@163.com通信作者: 艾晓辉, E-mail: aixh@yfi.ac.cn(60.13±15.23) g, 由湖北省仙桃市水产局提供, 试验在实验室网箱中进行。室温由空调控制在16℃, 室内水温在(18±2)℃左右, 通过加热棒调节水温, 可控制水温在(28±2)℃, 实验在这2种温度下进行。实验前, 斑点叉尾鲙在室内网箱(1 m×2 m×1.5 m)内暂养一周, 每个网箱放置50尾, 共3个网箱。试验期间,每天上午8点和下午6点投喂饲料, 并记录水温。试剂 乙腈、正己烷、质谱水(色谱纯, 美国CNW公司), 四丁基溴化铵(分析纯, 国药集团化学试剂有限公司), 无水硫酸钠(分析纯, 国药集团),恩诺沙星标准品(纯度>99.0%, Dr. EhrenstorferGmbH), 环丙沙星标准品(纯度>95.0%, Dr. Ehren-storfer GmbH), 水产用盐酸恩诺沙星粉(纯度99.8%,产品批号120418-8, 购自浙江国邦药业有限公司)。仪器 高效液相色谱(Waters515泵, 717自动进样器, 2475多通道荧光检测器, 配Empower色谱工作站, 美国Waters公司), METTLE-TOLEDO精密电子天平(AE-240, 梅特勒-托利多公司), 自动高速冷冻离心机(20PR-520, 日本HITACH公司), 旋转蒸发仪(Hei-VAP, 德国Heidolph公司), 氮吹仪(KD200,杭州奥盛仪器有限公司), 涡旋混合器(HQ-60, 北方同正)。1.2 实验设计¢¢¢¢¢¢¢¢¢¢¢¢称取盐酸恩诺沙星原粉400 mg, 用5%冰醋酸溶解后, 加饲料10 g, 定容至100 mL, 此时EF含量为4 mg/mL, 使用20 mg/(kg·d)的剂量连续灌胃7d, 每天固定在上午9点喂药。随后定时投喂无药的饲料,每天两次, 并记录水温。在第7天投药结束后, 立即采样, 此样品算作第0天样品, 其后从最后一次灌胃算, 1、3、5、7、9、11、13、15、20、30、45、65d后采样, 算作第1、第3、第5、第7、第9、第11、第13、第15、第20、第30、第45、第65天的样品。每次各取斑点叉尾鲙5尾作为平行样, 现场取斑点叉尾鲙血浆、肌肉、皮肤、肝脏和肾脏,用均浆机或剪刀制成均匀样品, 及时送至实验室处理和检测。实验时间2013年7月—2013年10月。1.3 方法样品处理 准确称取剪碎或研磨后的肌肉样品5.00 g(肝脏、肾脏、皮肤各1.00 g, 血浆1.00 mL), 依次加入5 g无水硫酸钠(肝脏、肾脏、皮肤、血浆各1 g)和10 mL酸化乙腈(肝脏、肾脏、皮肤、血浆各5 mL), 用涡旋仪混匀后, 超声10—15min后, 6000 r/min离心5min, 去上层清液。往残渣中继续加10 mL酸化乙腈(肝脏、肾脏、皮肤、血浆各5 mL), 重复操作, 合并上层清液, 于55℃氮吹仪上氮吹至干。用2.0 mL流动相充分溶解, 涡旋并离心后, 并经0.22 μm微孔过滤膜过滤后,供高效液相色谱仪测定。标准溶液配制和标准曲线的制备 准确称取0.020 g恩诺沙星和环丙沙星, 用乙腈稀释, 并定容至100 mL, 配制成200 mg/L的标准储备液。配制时使用棕色容量瓶, 低温避光储存, 有效期为6个月。将恩诺沙星和环丙沙星标准储备液用流动相依次稀释, 配制恩诺沙星和环丙沙星的浓度为5、10、20、50和100 ng/mL的低浓度标准曲线; 配制恩诺沙星和环丙沙星的浓度为100、200、500、1000和2000 ng/mL的高浓度标准曲线。采用高效液相色谱荧光检测器分析检测。以恩诺沙星、环丙沙星浓度为横坐标X, 以其峰面积为纵坐标Y, 绘制标准曲线, 并计算回归方程及相关系数。回收率和检测限 取不含恩诺沙星和环丙沙星药物的斑点叉尾鲙组织(以下简称空白样品)加入一定量的恩诺沙星、环丙沙星标准溶液, 放置至少30min, 每个样品同时做7个平行。再按照样品预处理方法进行处理后进样, 分别计算组织中恩诺沙星和环丙沙星的含量。空白样品中添加的质量浓度分别为: 1、4、20和100 μg/kg。以引起3倍基线噪音的药量的质量浓度作为最低检测限。色谱条件 色谱柱: 反相色谱柱C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm); 流动相鲶乙腈鲶四丁基溴化铵=10鲶90(v/v); 流速1.0 mL/min; 激发波长280 nm, 发射波长450 nm; 柱温: 30℃; 进样量: 10 μL。数据处理 标准曲线, 消除方程及休药期计算, 采用Microsoft Excel 2010进行处理和绘制, 消除规律柱状图采样Origin7.5进行计算和绘制。消除方程采用C=C0e–kt, C表示药物浓度, C0为残留消除对数曲线的截距(μg/kg或ng/mL), k表示消除速率常数。
2 结果2.1 标准曲线与相关系数、方法检测限及回收率在5—100 ng/mL和100—2000 ng/mL内恩诺沙星线性关系良好, 其线性方程分别为: Y=18101X–754315、Y=20404X–2×106; 相关系数r2均大于0.9980。在本试验条件下, 组织中恩诺沙星最低检测限为1.0 μg/L, 环丙沙星最低检测限为2.0 μg/L。各组织中低、中、高3个质量浓度加标水平的恩诺沙星和环丙沙星平均回收率在70.35%—90.63%, 分析方法满足要求。2.2 水温为18℃时, 恩诺沙星及其代谢物在斑点叉尾鲖体内的残留消除情况从表 1可以很明显地看出, 在水温为18℃时, 斑点叉尾鲙5种组织中EF的初始残留浓度大于CF的
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